隱亭及其速釋制劑。
[0098] 特別感興趣的是可以與本發(fā)明的化合物組合使用的二肽基肽酶-IV(DPP-4)抑制 劑。此類抑制劑包括，但不限于，西格列汀（在美國(guó)專利號(hào)6, 699, 871中公開(kāi)）、MK-3102、 SYR-472、替格列汀、KRP104、TS021、AMG222、SK0403、LC15-0444、維格列汀、沙格列汀、阿格 列汀、美格列汀、利格列汀、及其藥學(xué)上可接受的鹽，和這些化合物與鹽酸二甲雙胍、吡格列 酮、羅格列酮、辛伐他汀、阿托伐他汀或磺酰脲類的固定劑量組合。
[0099] 可以與本文所述式的化合物組合使用的其它GPR-40激動(dòng)劑包括但不限于： (1) 5-[4-[[(11?)-4-[6-(3-羥基-3-甲基丁氧基）-2-甲基吡啶-3-基]-2,3-二 氫-1H-茚-1-基]氧基]苯基]異噻唑-3-醇1-氧化物 (2) 5-(4-((3-(2,6_二甲基-4-(3-(甲基磺?；┍趸┍交┍交┘籽趸┍?基）異噻唑-3-醇1-氧化物； (3) 5-(4-((3-(2-甲基-6-(3-羥基丙氧基）吡啶-3-基）-2-甲基苯基）甲氧基）苯 基）異噻唑-3-醇1-氧化物；和 (4) 5-[4-[[3-[4-(3_氨基丙氧基）-2,6_二甲基苯基]苯基]甲氧基]苯基]異噻 唑-3-醇1-氧化物，和 其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0100] 可以與本文所述式的化合物組合使用的其它二肽基肽酶-IV(DPP-4)抑制劑包括 但不限于： (1) (2兄 35；5奶-5-(1-甲基-4,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡 唑-5 (1功-基）-2-(2, 4, 5-三氟苯基）四氫-2f吡喃-3-胺； (2) (2兄 35；5奶-5-(1-甲基-4,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡 唑-5 (1功-基）-2-(2, 4, 5-三氟苯基）四氫-2f吡喃-3-胺； (3) (2《35； 5功-2- (2, 5-二氟苯基）四氫）-5- (4, 6-二氫吡咯并[3, 4-c]吡 唑-5 (1功-基）四氫-2f吡喃-3-胺； (4) (3功_4_[(3功-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基）丁酰基]-六氫-3-甲基-2A1，4-二氮雜草-2-酮； (5) 4-[ (3功_3_氨基_4_ (2, 5-二氣苯基）丁酰基]六氫-1-甲基-2/M, 4-二氮雜 草-2-酮鹽酸鹽；和 (6) (3功 _4_[ (3功 _3_ 氨基 _4_ (2, 4, 5-二氣苯基）丁酰基]-六氫 _3_ (2, 2, 2-二氣乙 基）-2A1，4-二氮雜草-2-酮；和 其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0101] 可以與式I的化合物組合的抗肥胖化合物包括托吡酯、唑尼沙胺、納曲酮、苯丁 胺、丁胺苯丙酮、丁胺苯丙酮和納曲酮的組合、丁胺苯丙酮和唑尼沙胺的組合、托吡酯和苯 丁胺的組合、氟苯丙胺、右芬氟拉明、西布曲明、脂肪酶抑制劑，諸如奧利司他和西替司他、 黑皮質(zhì)素受體激動(dòng)劑，特別是黑皮質(zhì)素-4受體激動(dòng)劑、CCK-1激動(dòng)劑、黑色素聚集激素 (MCH)受體拮抗劑、神經(jīng)肽YiSY5拮抗劑（諸如MK-0557)、CB1受體反向激動(dòng)劑和拮抗劑 (諸如利莫那班和他拉納班）、0 3腎上腺素能受體激動(dòng)劑、胃饑餓素拮抗劑、鈴蟾肽受體激 動(dòng)劑（諸如鈴蟾肽受體亞型-3激動(dòng)劑）和5-羥色胺-2c(5-HT2c)激動(dòng)劑，諸如氯卡色 林。關(guān)于可與本發(fā)明的化合物組合的抗肥胖化合物的綜述，參見(jiàn)S.Chaki等人，"Recent advancesinfeedingsuppressingagents:potentialtherapeuticstrategyforthe treatmentofobesity,"ExpertOpin.Ther.Patents, 11: 1677-1692 (2001);D. Spanswick和K.Lee,"Emergingantiobesitydrugs,'，ExpertOpin.EmergingDrugs， 8: 217-237 (2003);J.A.Fernandez-Lopez，等人，"PharmacologicalApproaches fortheTreatmentofObesity,y,Drugs, 62: 915-944 (2002);和K.M.Gadde，等人， ''Combinationpharmaceuticaltherapiesforobesity, 〃Exp.Opin.Pharmacother.. 10: 921-925 (2009)。
[0102] 可以與式I的化合物組合使用的胰高血糖素受體拮抗劑包括但不限于： (1) ，[4-((15)-1-{3-(3, 5-二氯苯基）-5-[6-(三氟甲氧基）-2_ 萘基]-If吡 唑-l-基}乙基）苯甲酰基]-0-丙氨酸； (2) A[4- ((1功-1- {3- (3, 5-二氯苯基）-5- [6-(三氟甲氧基）-2-萘基]-If吡 唑-l-基}乙基）苯甲?；鵠-0-丙氨酸； (3) A(4-{l-[3-(2,5-二氯苯基）-5-(6_甲氧基-2-萘基吡唑-1-基]乙基} 苯甲?；彼幔?(4) A(4-{(15)-1-[3-(3, 5-二氯苯基）-5-(6-甲氧基-2-萘基）-If吡唑-1-基] 乙基}苯甲?；彼?； (5) ^(4-{(13)-1-[0?)-(4-氯苯基）（7-氟-5-甲基-111-吲哚-3-基）甲基]丁基} 苯甲?；彼?；和 (6) N-(4-{(lS)-l-[(4-氯苯基）（6-氯-8-甲基喹啉-4-基）甲基]丁基}苯甲酰 基）_0 _丙氨酸；和 其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0103] 在本發(fā)明的另一個(gè)方面，公開(kāi)了包含一種或多種以下藥劑的藥物組合物： (a)結(jié)構(gòu)式I的化合物； (b) -種或多種選自下述的化合物： (I) 二肽基肽酶-IV(DPP-4)抑制劑； ⑵胰島素敏化劑，包括⑴PPAR丫激動(dòng)劑，諸如格列酮類（例如AMG13UMBX2044、mitoglitazone、洛貝格列酮、IDR-105、匹格列酮、羅格列酮和巴格列酮）和其它PPAR配體， 包括（1)PPARa/Y雙重激動(dòng)劑，諸如ZYHUYYH2、西格列他、GFT505、莫格列他、阿格列扎、 索格列扎和那格列扎，（2)PPARa激動(dòng)劑，諸如非諾貝酸衍生物（例如吉非貝齊、氯貝特、 環(huán)丙貝特、非諾貝特和苯扎貝特），⑶選擇性PPARy調(diào)節(jié)劑（SPPARyM's)，和⑷PPARy 部分激動(dòng)劑；（ii)雙胍類，諸如二甲雙胍及其藥學(xué)上可接受的鹽，尤其是鹽酸二甲雙胍， 以及其緩釋制劑，諸如Glumetza?、Fortamet?和GlucophageXR? ; (iii)蛋白酪氨酸磷酸 酶-IB(PTP-1B)抑制劑，諸如ISI-113715 和ITP814 ; ⑶磺酰脲類和非磺酰脲類胰島素促分泌素（例如甲糖寧、格列本脲、格列吡嗪、格列 美脲、米格列奈，和氯茴苯酸類，諸如那格列奈和瑞格列奈）； (4) a-葡萄糖苷酶抑制劑（例如阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇）； (5) 胰高血糖素受體拮抗劑； (6) 降LDL膽固醇劑，諸如（i)HMG-CoA還原酶抑制劑（例如洛伐他汀、辛伐他汀、 普伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、匹伐他汀和羅舒伐他?。?，（ii)膽汁酸多 價(jià)螯合劑（例如考來(lái)替蘭、考來(lái)烯胺、colestimide、鹽酸考來(lái)維侖、考來(lái)替泊和交聯(lián)葡聚糖 的二烷基氨基烷基衍生物），（iii)膽固醇吸收抑制劑（例如依澤替米貝），和（iv)酰基 CoA:膽固醇?；D(zhuǎn)移酶抑制劑（例如阿伐麥布）； (7) HDL-升高藥物，諸如煙酸或其鹽和其緩釋形式；MK-524A(其為緩釋煙酸和DP-1拮 抗劑MK-524的組合）；和煙酸受體激動(dòng)劑； (8) 抗肥胖化合物； (9) 意欲用于炎性病況的藥劑，諸如阿司匹林、非留體抗炎藥（NSAIDs)、糖皮質(zhì)激素和 選擇性環(huán)氧合酶-2 (C0X-2)抑制劑； (10) 抗高血壓藥，諸如ACE抑制劑（例如依那普利、賴諾普利、雷米普利、卡托普利、喹 那普利和坦度普利），A-II受體阻斷劑（例如洛沙坦、坎地沙坦、厄貝沙坦、奧美沙坦酯、纈 沙坦、替米沙坦和依普沙坦），腎素抑制劑（例如阿利吉侖），0阻斷劑（例如鈣通道阻斷 劑）； (II) 葡萄糖激酶活化劑（GKAs)(例如AZD6370); (12) 1型110-羥基類固醇脫氫酶的抑制劑（例如，諸如美國(guó)專利號(hào)6, 730, 690;TO 03/104207;和TO04/058741 中公開(kāi)的那些）； (13) 膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白（CETP)的抑制劑（例如托徹普和MK-0859); (14) 果糖1，6-二磷酸酶的抑制劑（例如，諸如美國(guó)專利號(hào)6, 054, 587 ;6, 110, 903 ; 6, 284, 748 ;6, 399, 782 ;和 6, 489, 476 中公開(kāi)的那些）； (15) 乙酰CoA羧化酶-1或2 (ACC1或ACC2)的抑制劑； (16) AMP-活化的蛋白激酶（AMPK)活化劑； (17) G蛋白偶聯(lián)受體的激動(dòng)劑：⑴GPR-109、（ii)GPR-119 (例如，MBX2982和 PSN821)，和（iii)GPR-40 (例如，TAK875、5-[4-[[(lR)-4-[6-(3-羥基-3-甲基丁氧 基）-2-甲基吡啶-3-基]-2,3-二氫-1H-茚-1-基]氧基]苯基]異噻唑-3-醇1-氧化 物、5-(4-((3-(2,6_二甲基-4-(3-(甲基磺?；┍趸┍交┍交┘籽趸┍交?異噻唑-3-醇1-氧化物、5-(4-((3-(2-甲基-6-(3-羥基丙氧基）吡啶-3-基）-2-甲基苯 基）甲氧基）苯基）異噻唑-3-醇1-氧化物、和5-[4-[[3-[4-(3-氨基丙氧基）-2, 6-二 甲基苯基]苯基]甲氧基]苯基]異噻唑-3-醇1-氧化物）； (18) SSTR3拮抗劑（例如，諸如W0 2009/011836中公開(kāi)的那些）； (19) 神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體激動(dòng)劑（例如，諸如W02009/042053中公開(kāi)的那些，包括但不 限于神經(jīng)調(diào)節(jié)肽S(WS)); (20) 硬脂酰輔酶AS-9去飽和酶（SCD)抑制劑； (21) GPR-105拮抗劑（例如，諸如WO2009/000087中公開(kāi)的那些）； (22) 葡萄糖攝取抑制劑，諸如鈉-葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（SGLT)抑制劑及其各種 異型體，諸如SGLT-1 ;SGLT-2 (例如，ASP1941、TS071、BI10773、tofogliflozin、 LX4211、坎格列凈、達(dá)格列凈和瑞格列凈；和SGLT-3); (23) 酰基輔酶A:二?；视王；D(zhuǎn)移酶1和2 (DGAT-1和DGAT-2)的抑制劑； (24) 脂肪酸合成酶的抑制劑； (25) 酰基輔酶A:單?；视王；D(zhuǎn)移酶1和2 (MGAT-1和MGAT-2)的抑制劑； (26) TGR5 受體（也稱為GPBAR1、BG37、GPCR19、GPR131 和M-BAR)的激動(dòng)劑； (28) 甲磺酸溴隱亭及其速釋制劑；和 (29) IL-lb抗體（例如，X0MA052和卡那奴單抗）；和 (c)藥學(xué)上可接受的載體。
[0104]當(dāng)本發(fā)明的化合物與一種或多種其它藥物同時(shí)使用時(shí)，優(yōu)選除了本發(fā)明的化合物 以外還含有此類其它藥物的藥物組合物。相應(yīng)地，本發(fā)明的藥物組合物包括除了本發(fā)明的 化合物以外還含有一種或多種其它活性成分的那些。
[0105] 本發(fā)明的化合物與第二種活性成分的重量比可以變化并取決于各成分的有效劑 量。通常，使用各自的有效劑量。因此，例如，當(dāng)本發(fā)明的化合物與另一種藥劑組合時(shí)，本發(fā) 明的化合物與其它藥劑的重量比的通常范圍為約1〇〇〇:1至約1:1〇〇〇,優(yōu)選約200:1至約 1:200。本發(fā)明的化合物與其它活性成分的組合通常也在上述范圍內(nèi)，但在每種情況下，應(yīng) 當(dāng)使用各活性成分的有效劑量。
[0106] 在此類組合中，本發(fā)明的化合物與其它活性藥劑可以分開(kāi)或組合施用。此外，一種 要素的施用可在其它藥劑(一種或多種）施用之前、同時(shí)或之后進(jìn)行。
[0107] 測(cè)定 式（I)包括的化合物用于藥物的有用性顯示于下述測(cè)試中。
[0108] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案的化合物用于藥物的有用性通過(guò)以下體外測(cè)試所述的方 法進(jìn)行評(píng)價(jià)： FLIPR測(cè)定 所有化合物在FLIPR測(cè)定下測(cè)試，除非另外指出。
[0109] 測(cè)試1:基_的克降 在GenBank登錄號(hào)NM181745(人）和NM181748(小鼠）中已知的GPCR和GPR120的 0RF的堿基序列的相對(duì)側(cè)上的結(jié)構(gòu)域中合成引物，并且基因通過(guò)RT-PCR克隆。所用引物的 堿基序列如下描述。將限制性酶BamHI和EcoRI識(shí)別位點(diǎn)分別引入用于亞克隆。 hGPR120_F01:AGGATCCGCCGCCATGTCCCCTGAATGCGCGCGGGCAG(SEQIDNO: 1)hGPR120_R01:CGAATTCTTAGCCAGAAATAATCGACAAGTCATTTC(SEQIDNO: 2) mGPR120_F01:AGGATCCGCCGCCATGTCCCCTGAGTGTGCACAGACGAC(SEQIDNO: 3) mGPR120_R01:CGAATTCTTAGCTGGAAATAACAGACAAGTCATTTC(SEQIDNO: 4)〇
[0110] 作為用于PCR的樣品，人小腸Marathon-即用cDNA(CLONTECH，目前公司名： TaKaRa)和通過(guò)小鼠BAT衍生的RNA的逆轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA分別用于人和小鼠GPR120受體 基因。
[0111] 使用KODPlus(T0Y0B0)用于PCR，實(shí)施30個(gè)循環(huán)的94°C持續(xù)2分鐘、94°C持續(xù) 15秒、55°C持續(xù)30秒和68°C持續(xù)1分鐘以實(shí)現(xiàn)反應(yīng)，隨后添加0. 5單位ExTaq(TaKaRa)， 并在72°C孵育10分鐘以實(shí)施對(duì)末端的A-添加反應(yīng)。對(duì)于小鼠PCR，35個(gè)循環(huán)在2%的最終 DMS0濃度的條件下實(shí)施。
[0112] 擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物的克隆使用pCR2. 1-T0P0TA克隆試劑盒（Invitrogen)實(shí)施。為了 驗(yàn)證堿基序列，使用BigDye終止循環(huán)測(cè)序即用反應(yīng)試劑盒（TerminatorCycleSequencing ReadyReactionKit)Ver. 3.0 和 377DNA測(cè)序儀（AppliedBiosystems)實(shí)施電泳以測(cè)定 堿基序列。人GPR120基因比作為GenBank登錄號(hào)匪181745登記的序列短16個(gè)氨基酸。
[0113] 將克隆進(jìn)pCR2. 1-T0P0載體中的GPR120受體基因（向其中引入限制性酶 BamHI和EcoRI識(shí)別位點(diǎn)）通過(guò)酶從載體切離，并亞克隆至真核表達(dá)載體EF1/V5-His B (Invitrogen)的BamHI和EcoRI識(shí)別位點(diǎn)中。
[0114]測(cè)試2:表汰細(xì)朐的產(chǎn)牛 使用Lipofectamine2000 (Invitrogen)，將GPR120 受體的cDNA轉(zhuǎn)染至CH0/NFAT-BLA細(xì)胞中，并且分離耐藥細(xì)胞以獲得GPR120穩(wěn)定表達(dá)株。將表達(dá)GPR120的CH0細(xì)胞在含有 10%胎牛血清、100個(gè)單位/ml青霉素、0.1mg/ml硫酸鏈霉素、250μg/mlZeocin、500yg/ mL遺傳霉素和15mMHEPES的DMEM/F12培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
[0115]測(cè)試3:細(xì)朐內(nèi)鈣濃度的測(cè)量 在測(cè)量日的前一天，將表達(dá)人GPR120的CH0細(xì)胞以每孔10000個(gè)細(xì)胞鋪板在384-孔 黑色板（#3702，Corning)中，并在C02培養(yǎng)箱中孵育過(guò)夜。在測(cè)量當(dāng)天，在C02培養(yǎng)箱中， 在0.08%PluronicF-127存在的情況下，將4yMFluo-4AM(熒光鈣指示劑試劑）孵育 90分鐘，以引入人GPR120表達(dá)CH0細(xì)胞中。向細(xì)胞中添加用含有20mMHEPES和2. 5mM 丙磺舒的HBSS溶液稀釋的測(cè)試化合物。細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的變化通過(guò)熒光成像讀板儀（FLIPR; MolecularDevices)測(cè)量以檢查激動(dòng)劑作用，并且計(jì)算EC5。值。以下化合物（美國(guó)專利號(hào) 8, 367, 708)用于測(cè)定100 %活化：
[0116] 實(shí)施例化合物的EC5。值提供在以下實(shí)施例和下表中。
[0117]IP1 測(cè)定 通過(guò)調(diào)整C.Bergsdorf,等人，Assay Drug Dev. Technol., 2008, 6 (1), 39-53 中 描述的GPR120測(cè)定獲得IP1測(cè)定結(jié)果。
[0118] 通用方案 本發(fā)明的化合物可以使用本文所述的合成方案以及對(duì)于本領(lǐng)域熟練的化學(xué)家將顯而 易見(jiàn)的若干種替代方法中的任一種來(lái)制備。
[0119] 以下縮寫可用于合成方案或?qū)嵤├?aq.是水性的/含水的；B0C是叔丁基氧基幾基；Boc20是二(叔丁基氧基）幾基；C是攝 氏度；Calc'd是計(jì)算值；Cbz是羧基芐基；DCM是二氯甲烷；DEA是N，N-二異丙基乙胺；DMF 是二甲基甲酰胺；DMAP是二甲基氨基吡啶；DMEDA是N，N'_二甲基乙烷-1，2-二胺；DMS0是 二甲基亞諷；EtOAc是乙酸乙酯；EtOH是乙醇；ent是對(duì)映異構(gòu)體；g是克；h是小時(shí)；HPLC是 高效液相色譜法；i-PrOH是異丙醇；K0H是氫氧化鉀；L是升；LC是液相色譜法；LCMS是液 相色譜法-質(zhì)譜法；M是摩爾的；min是分鐘；mg是毫克；mL是毫升；mmol是毫摩爾；MTBE是 甲基叔丁基醚；MVK是甲基乙烯基酮；NMP是N-甲基-2-吡咯烷酮；Pd2 (dba) 3是三（二亞芐 基丙酮）二鈀（〇) 是室溫；SPhos是二環(huán)己基膦基-2'，6' -二甲氧基聯(lián)苯；TEA是三乙 胺；TFA是三氟乙酸；THF是四氫呋喃；UV是紫外線；且i-BuOK是叔丁醇鉀。
[0120] 以下反應(yīng)方案舉例說(shuō)明了式I的本發(fā)明的化合物的合成中采用的方法。所有取代 基如上所定義，除非另外指出。本發(fā)明的新型化合物的合成可以通過(guò)本文所述的合成方案 中的一種或多種來(lái)完成。
[0121] 方案 1
化合物可以使用對(duì)于普通技術(shù)人員從本文教導(dǎo)將變得顯而易見(jiàn)的各種方法來(lái)制備，一 種此類途徑示于方案1中。在零至30°C的溫度下，在溶劑（諸如MTBE)中，在堿（諸如叔丁 醇鉀）存在的情況下，將甲?；哙?用MVK處理。將反應(yīng)再攪拌30分鐘，然后用水性后 處理（work-up)分離中間體2。
[0122] 在0°C至50°C的溫度下使2與通過(guò)堿（諸如NaH)脫質(zhì)子的膦酸酯碳負(fù)離子 (phosphonatecarbanions)在溶劑（諸如THF)中反應(yīng)以生成中間體3。在用例如氫和鈀 催化劑還原和在酸性條件（諸如4NHC1)下Boc脫保護(hù)后，容易制備螺環(huán)中間體5。在膦 配位體（諸如Sphos)、鈀催化劑前體（諸如Pd2(dba)3)和堿（諸如碳酸銫）存在的情況下， 使5與取代的芳基溴化物在溶劑（諸如二氧雜環(huán)己烷）中進(jìn)行碳-氮交叉偶聯(lián)（在加熱的 情況下），隨后使用極性溶劑（諸如THF、MeOH、水或類似溶劑的混合物）中的堿（諸如氫氧 化鋰）使酯6皂化，得到所需化合物7。
[0123]C-N交叉偶聯(lián)伴侶芳基溴化物是市售的，或由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易制備，例如通過(guò) 在堿（諸如碳酸鉀）存在的情況下用例如烷基溴化物使相應(yīng)的溴苯酚〇-烷基化。
[0124]方案 2
如方案2中所示，在升高溫度下，在鈀催化劑、配位體（諸如Sphos)和堿（諸如碳酸 銫）存在的情況下，使氧雜螺哌啶（oxaspiropipedine)Int1與芳基鹵化物（諸如芳基溴 化物）在溶劑（諸如二氧雜環(huán)己烷）中反應(yīng)，以得到N-芳基化的氧雜螺哌啶Int-2。在皂 化后，將酯Int-2轉(zhuǎn)化為羧酸產(chǎn)物Int-3。
[0125] 可替代地，化合物Int-3可以通過(guò)以下制備：在去除化合物Int-4的Boc保護(hù)基團(tuán) 后，使氰基甲基取代的氧雜螺哌啶Int-5與芳基鹵化物（諸如芳基溴化物）在類似的C-N交 叉偶聯(lián)條件下反應(yīng)，以提供化合物Int-6,然后將其水解以形成羧酸。對(duì)于一些情況，如果需 要，中間體Int-6可以進(jìn)一步修飾，例如，通過(guò)與疊氮化鈉在升高溫度（例如微波照射）下 反應(yīng)，以提供四唑最終化合物Int-7。
[0126] 所述氧雜螺哌啶Int-1可以商業(yè)獲得，是文獻(xiàn)中已知的（TetrahedronLett.， 2011，52，6457)，并且可以通過(guò)多種方法由本領(lǐng)域技術(shù)人員制備。用于形成Int-la的一 個(gè)此類實(shí)例顯示在方案2中，其涉及將甲酯Int-8還原為亞甲基醇Int-9。通過(guò)用MsCl和 堿（諸如三乙胺）和DMAP處理使醇甲磺酰化以得到Int-10,隨后用氰化鉀進(jìn)行氰基置換， 可以提供Int-4a。用堿（諸如氫氧化鉀）水解可以容易地將Int-4a轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的羧酸 Int-11，然后，當(dāng)在醇（諸如乙醇）存在的情況下接觸（三甲基甲硅烷基）重氮基甲烷或硫 酸時(shí)，可以將羧酸Int-11方便地轉(zhuǎn)化為酯Int-la。
[0127] 如本領(lǐng)域技術(shù)人員將知道的那樣，在所有方案中，式I的產(chǎn)物和所有合成中間體 可以通過(guò)以下手段從不需要的副產(chǎn)物、試劑和溶劑純化：重結(jié)晶、研磨、制備型薄層色譜法、 如W.C.Still等人，J.Org.Chem. 1978，43，2923所述的硅膠上的快速色譜法或反 相HPLC。通過(guò)HPLC純化的化合物可以分離為相應(yīng)的鹽。
[0128] 此外，在一些情況下，式I的最終化合物和合成中間體可以由順式和反式異構(gòu)體、 對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的混合物構(gòu)成。如本領(lǐng)域技術(shù)人員將知道的那樣，此類順式和 反式異構(gòu)體，對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體可以通過(guò)各種方法分離，所述方法包括結(jié)晶，使用 純手性固定相的色譜法，以及正相和反相色譜法（在順/反異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體的情況 下）。
[0129] 化學(xué)反應(yīng)通過(guò)LCMS監(jiān)測(cè)，并且反應(yīng)產(chǎn)物的純度和身份通過(guò)LCMS(電噴霧電離）和 NMR測(cè)定。將1HNMR譜內(nèi)部參考至殘留質(zhì)子溶劑信號(hào)。對(duì)于1HNMR的數(shù)據(jù)用以下報(bào)道：化 學(xué)位移（Sppm)、多重性（s=單峰，d=雙峰，t=三重峰，q=四重峰，m=多重峰，brs =寬單峰，brm=寬多重峰）、偶合常數(shù)（Hz)和積分（integration)。除非另有指出，否則 所列的所有LCMS離子都是[M+H]。所有溫度都是攝氏度，除非另外指出。
[0130] 在實(shí)施例中，具有手性碳的一些中間體和最終化合物被制備為外消旋體。術(shù)語(yǔ)"外 消旋（rac)"是指外消旋混合物。
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