本發(fā)明屬于藥物化學的合成技術領域，具體涉及一種具有生物活性的哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物的制備方法

背景技術：

含氮雜環(huán)化合物因其具有良好的生物活性而在醫(yī)藥和農藥等人類健康和農業(yè)生產中發(fā)揮著重要的作用。近年來，這類物質在醫(yī)藥和農藥發(fā)展中的作用日益明顯，大多數雜環(huán)類的新農藥對溫血動物毒性很小，對鳥類、魚類的毒性也很低，這為新型農藥醫(yī)藥的研發(fā)提供了極其廣闊的應用前景。哌啶衍生物是重要的農藥和醫(yī)藥中間體，比如在農藥行業(yè)中可以合成一種名為哌草丹的稻田除草劑，它是一種選擇性的非激素型硫代氨基甲酸類除草劑，具有很大的發(fā)展空間；在醫(yī)藥行業(yè)可以用于合成鹽酸乙酰羅沙替丁(是一種消化系統(tǒng)藥物)，雙密達莫心(是一種血管疾病藥物)等。因此，探索具有哌啶基團的新型化合物對于合成新的農藥及醫(yī)藥等先導化合物具有重要的現實意義。本課題組設計并合成了一系列新型哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物，并對其進行了相關活性測試。

技術實現要素：

本發(fā)明解決的技術問題是提供了一種合成方法簡單，分子結構新穎的具有抗真菌活性的哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物的制備方法。

本發(fā)明為解決上述技術問題采用如下技術方案，一種新型的哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物制備方法，其特征在于具體步驟為：

a、n-boc-4-哌啶酮與碳酸二甲酯在叔丁醇鉀的作用下反應得到n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮

b、n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮在乙酸銨作用下，酮羰基氧化還原成氨基，得到化合物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶

c、n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶與氯甲酰乙酸乙酯在tea作用下發(fā)生取代反應得到化合物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶

d、n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶在叔丁醇鉀的作用下發(fā)生分子內成環(huán)得到化合物然后在酸性條件下該化合物進行分子內氫轉移和羰基還原得到化合物

e、在強酸條件下，加熱脫去酯基和boc基團，得到化合物

f、在三氯氧磷作用下，羥基被氯取代得到化合物

g、在濃鹽酸作用下使氯代碳氮雙鍵變?yōu)轷０锋I得到化合物

h、在堿性條件下，進行boc氨基保護得到化合物

i、在碳酸銫作用下與碘甲烷反應得到化合物

j、在磷酸鉀作用下與鄰氟苯硼酸反應生成

k、脫去boc基團得到化合物

l、與羧酸化合物在堿性條件進行?；兔摷谆磻玫?imgfile="bda0001312424290000032.gif"wi="323"he="301"img-content="drawing"img-format="gif"orientation="portrait"inline="no"/>

進一步限定，步驟a的具體過程為：在反應瓶中，把1eq的n-boc-4-哌啶酮加入到10v體積的甲苯中，再加入2eq的碳酸二甲酯和2eq的叔丁醇鉀，加熱至70℃反應1h，冷卻至室溫，加水淬滅，用1mol/l的hcl調節(jié)反應液ph為7，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥后，旋干得到黃色油狀物n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮

進一步限定，步驟b的具體過程為：將1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮加入到10倍體積的甲醇中，再加入3eq的乙酸銨，反應過夜，旋干甲醇，加入3倍體積的水，二氯甲烷萃取反應液后用無水硫酸鈉干燥，旋干后得到紅的油狀液體n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶

進一步限定，步驟c的具體過程為：將1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶加入到8倍體積的dcm中，再加入1.05eq的tea，冷卻至10℃，滴加1.05eq的4-氯甲酰乙酸乙酯，室溫反應過夜，再加入8倍體積的dcm稀釋反應液，水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，旋干既得紅色油狀產物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶

進一步限定，步驟d的具體過程為：把1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶加入到10倍體積的thf中，再分批加入2.0eq的t-buok，反應溫度控制在小于25℃，反應1h后加入冰水淬滅，用2mol/l的hcl調節(jié)反應液ph為3，過濾，真空干燥得到類白色固體產品

進一步限定，步驟e的具體過程為：在10eq6mol/l的hcl溶液中，分批加入1.0eq的加熱至100℃，反應過夜，旋干反應溶劑，再用乙醚洗滌，真空干燥得到類白色固體

進一步限定，步驟f的具體過程為：向5eqpocl3中分批加入1.0eq的加熱至100℃，反應過夜，旋干pocl3得到紅色油狀產物

進一步限定，步驟g的具體過程為：把加入到4倍體積的1,4-二氧六環(huán)中，再加入4倍體積的濃鹽酸，加熱至100℃，回流反應2天，旋干溶劑后加入10倍體積的乙酸乙酯，水洗三次，干燥旋干后得到棕色固體

進一步限定，步驟h的具體過程為：把1eq的加入到10倍體積的1,4-二氧六環(huán)和10倍體積的水中，再分批加入3.0eq的碳酸鈉和1.5eq的(boc)2o，室溫反應10h后，過濾，再用乙酸乙酯洗滌濾餅后用乙酸乙酯萃取反應液，再用氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋反應液得到

進一步限定，步驟i的具體過程為：把1.0eq的加入到10倍體積的dmf中，再加入1.5eq的cs2co3，1.3eq的碘化鉀，室溫反應過夜，加入冰水淬滅反應液，乙酸乙酯萃取反應液，氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋干，再用乙醚打漿，過濾，真空干燥得到白色固體

進一步限定，步驟j的具體過程為：將1.0eq的加入到20倍體積的thf中，再加入3eq的1mol/l的磷酸鉀和1.2eq的鄰氟苯硼酸，加熱至100℃，反應過夜，乙酸乙酯萃取，干燥，旋干后柱層析分離得到

進一步限定，步驟k的具體過程為：1.0eq的加入到10倍體積的甲醇和10體積的12mol/l的hcl/1,4-二氧六環(huán)中，室溫反應過夜，旋干，乙醚洗滌，得到

進一步限定，步驟l的具體過程為：在反應瓶中，把加入到dmf中，再加入三乙胺和羧酸化合物，加熱到70℃，反應一段時間，同時進行酰化和脫甲基得到化合物

本發(fā)明所述的具有生物活性的哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物合成路線為：

本發(fā)明通過對哌啶酮分子進行了改造，合成了一系列哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物并進行了抗真菌活性測試，發(fā)現該類化合物對白假絲酵母菌具有較好的抑制活性。

具體實施方式

以下通過實施例對本發(fā)明的上述內容做進一步詳細說明，但不應該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例，凡基于本發(fā)明上述內容實現的技術均屬于本發(fā)明的范圍。

實施例1

在反應瓶中，把n-boc-4-哌啶酮20g(0.1mol)加入到甲苯200ml中，再加入碳酸二甲酯18g(0.2mol)和叔丁醇鉀22g(0.2mol)，加熱至70℃反應1h，冷卻至室溫，加水100ml淬滅，用1mol/l的hcl調節(jié)反應液ph為7，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥后，旋干得到黃色油狀物n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮24g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:3.81(s,1h),3.71(d,j＝8.4hz,1h),3.68(d,j＝8.4hz,1h),3.45(s,3h),3.07-3.05(m,2h),2.76-2.73(m,2h),1.37(s,9h).ms-esi(m/z):258.3[m+h⁺]。

實施例2

在反應瓶中，將n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮25g(0.1mol)加入到甲醇300ml中，再加入乙酸銨22g(0.3mol)，反應過夜，tlc監(jiān)控原料反應完全，旋干甲醇，加入水900ml，用二氯甲烷300ml萃取反應液三次，合并有機相后用無水硫酸鈉干燥，旋干后得到紅的油狀液體n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶22g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:8.56(s,2h),3.93(s,2h),3.77(s,3h),3.57-3.55(m,2h),2.16-2.13(m,2h),1.37(s,9h).ms-esi(m/z):257.3[m+h⁺]。

實施例3

在反應瓶中，將n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶26g(0.1mol)加入到二氯甲烷200ml中，再加入tea11g(0.11mol)，冷卻至10℃，緩慢滴加4-氯甲酰乙酸乙酯16g(0.105mol)，室溫反應過夜，tlc監(jiān)控原料反應完全，再加入二氯甲烷200ml稀釋反應液，水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，旋干既得紅色油狀產物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶23g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:4.71(s,2h),3.93(s,2h),3.79(s,3h),3.57-3.55(m,2h),3.53(s,2h),2.16-2.13(m,2h),1.37(s,9h),1.29(s,3h).ms-esi(m/z):371.4[m+h⁺]。

實施例4

在反應瓶中，把n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶37g(0.1mol)加入到thf400ml中，再分批加入t-buok23g(0.2mol)，反應溫度控制在小于25℃，反應1h后加入冰水300ml淬滅，用2mol/l的hcl調節(jié)反應液ph為3，過濾，真空干燥得到類白色固體產品32g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.51(s,1h),5.35(s,1h),4.71(s,2h),4.33(d,j＝4.0hz,2h),3.66-3.62(m,2h),3.25(d,j＝12.0hz,2h),1.41-1.39(m,9h),1.33-1.32(m,3h)。

實施例5

在反應瓶中，加入在6mol/l的hcl溶液200ml，再分批加入34g(0.1mol)，加熱至100℃，反應過夜，旋干反應溶劑，再用乙醚洗滌，真空干燥得到類白色固體15g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.47(s,1h),5.95(s,1h),5.41(s,1h),3.86-3.85(m,2h),3.71(d,j＝12.0hz,2h),3.11-3.09(m,2h),1.90(s,1h)。

實施例6

在密閉的反應瓶中，向三氯氧磷50g(0.5mol)中分批加入16g(0.1mol)，緩慢加熱至100℃，反應過夜，真空旋干三氯氧磷得到紅色油狀產物16g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.61(s,1h),3.81(s,2h),3.37(d,j＝12.0hz,2h),3.13-3.12(m,2h),1.87(s,1h)。

實施例7

在帶有溫度計和攪拌的反應瓶中，把20g加入到1,4-二氧六環(huán)100ml中，再緩慢加入濃鹽酸100ml，加熱至100℃，回流反應2天，旋干溶劑后加入10倍體積的乙酸乙酯，水洗三次，干燥旋干后得到棕色固體17g；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.17(s,1h),6.62(s,1h),3.35(s,2h),2.96(d,j＝12.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h).ms-esi(m/z):185.6[m+h⁺]。

實施例8

在反應瓶中，把18g(0.1mol)加入到1,4-二氧六環(huán)200ml和水200ml中，再分批加入碳酸鈉30g(0.3mol)和(boc)2o33g(0.15mol)，室溫反應10h后，tlc監(jiān)控原料反應完全，過濾反應液，再用乙酸乙酯100ml洗滌濾餅后用乙酸乙酯200ml萃取反應液三次，再用氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋反應液得到20g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.61(s,1h),3.93(s,2h),3.54(s,3h),3.57(d,j＝12.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h),1.39(s,9h)。

實施例9

在反應液中，把28g(0.1mol)加入到dmf300ml中，再加入碳酸銫50g(0.15mol)，碘化鉀20g(0.13mol)，室溫反應過夜，tlc監(jiān)控原料反應完全，加入冰水100ml淬滅反應液，乙酸乙酯200ml萃取反應液三次，飽和氯化鈉溶液200ml洗滌反應液，干燥，旋干，再用乙醚打漿，過濾，真空干燥得到白色固體26g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.61(s,1h),3.94(s,2h),3.54(s,3h),3.55(d,j＝8.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h),1.38(s,9h).ms-esi(m/z):299.8[m+h⁺]。

實施例10

在反應液中，將30g(0.1mol)加入到無水thf500ml中，再加入1mol/l的磷酸鉀70ml(0.3mol)和2-氟苯硼酸17g(0.12mol)，加熱至100℃，反應過夜，再用乙酸乙酯300ml萃取反應液兩次，合并有機相干燥，旋干有機相后經柱層析分離得到39g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.47-7.41(m,4h),5.71(s,1h),3.96(s,2h),3.57(s,3h),3.51(d,j＝12.0hz,2h),2.11-2.10(m,2h),1.39(s,9h)。

實施例11

在反應瓶中，將36g(0.1mol)加入到甲醇400ml和12mol/l的hcl/1,4-二氧六環(huán)400ml中，室溫反應過夜，tlc監(jiān)控原料反應完全，旋干，乙醚洗滌濃縮物，得到22g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.63-7.59(m,2h),7.19-7.17(m,2h),5.71(s,1h),3.93(s,2h),3.55(d,j＝12.0hz,2h),3.54(s,3h),2.95-2.93(m,2h),2.07-2.05(m,2h)。

實施例12

在反應瓶中，把26g(0.1mol)加入到dmf中，再加入三乙胺20g(0.2mol)和苯甲酸12g(0.1mol)，加熱到70℃，反應3h后經tlc監(jiān)控原料反應完全，把反應液倒入水中，用氯仿200ml萃取反應液三次，合并有機相后旋干得到化合物31g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.11(s,1h),8.01-7.89(m,3h),7.70-7.66(m,2h),7.12-7.09(m,2h),7.02(d,j＝4.0hz,1h),5.71(s,1h),3.93(s,2h),3.55(d,j＝12.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h)。

實施例13

生物活性測定

根據國標gb15979-2002，測定了藥物質量濃度為0.1ml/l時，目標化合物對白假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌標準菌株的抑菌活性。以質量濃度為0.1mg/l的化合物對白假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌的活性測試過程為例，測試步驟如下：(1)取實驗樣品0.05mg，加入3mldmso和2ml蒸餾水，配成質量分數為10mg/l的樣品溶液；(2)菌液的配置：用棉簽蘸取適量的白假絲酵母菌或光滑假絲酵母菌，溶入到裝有緩沖液的標準試管中混勻，與比濁管對比，濁度與比濁管相當即為所需濃度；(3)取實驗樣品管和含有相同體積相同溶劑的對照液各1管，高壓滅菌；(4)分別用移液槍移去步驟(2)中的菌懸液100μl，分別加入盛有實驗樣品液和對照樣液的試管中，混勻，作用20min；(5)分別取0.5ml樣品溶液，加入含4.5ml緩沖溶液的試管內，用混勻器混勻，取3個稀釋度；(6)分別取0.5ml稀釋后的樣品溶液，置于兩個材料、規(guī)格相同的無菌培養(yǎng)皿中，在其中加入約15ml溫度為40～50℃的無菌沙氏培養(yǎng)基，輕輕轉動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿中厚度均勻，待培養(yǎng)基凝固后翻轉平板，置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h；(7)培養(yǎng)完畢，取出培養(yǎng)皿數菌落個數，計算抑菌率。經過實驗發(fā)現該類化合物苯環(huán)取代基上，間位為吸電子取代基時對光滑假絲酵母菌的抑制作用普遍優(yōu)于對白假絲酵母菌的抑制作用，當間位為給電子取代基時對白假絲酵母菌的抑制作用普遍優(yōu)于對光滑假絲酵母菌的抑制作用。

以上實施例描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征及優(yōu)點，本行業(yè)的技術人員應該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明原理的范圍下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進均落入本發(fā)明保護的范圍內。