專利名稱：嘌呤類化合物雙氨基酸酯的制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及藥物化學及抗病毒感染治療學領域，具體涉及嘌呤類化合物及其在制備抗病毒藥物中的用途。
背景技術：
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一種嚴重危害人類健康的疾病。據(jù)統(tǒng)計，世界上大約有3.5億慢性HBV攜帶者，每年大約有100萬人死于HBV引起的疾病。在我國約有1.2億人是乙肝病毒攜帶者，乙肝患者2800萬，乙肝患者中三分之一的人會演變成慢性肝炎、肝硬化或原發(fā)性肝癌(HCC)。慢性乙型肝炎治療的主要藥物包括干擾素、核苷類抗病毒藥物和免疫調(diào)節(jié)劑。核苷類抗病毒藥物是病毒DNA多聚酶或逆轉錄酶的抑制劑，它們能終止病毒DNA鏈的合成，從而抑制病毒復制。在核苷類抗HBV藥物中，非環(huán)核苷膦酸酯類化合物具有重要作用，其可作為核苷5′-單磷酸酯的類似物，能繞過核苷類似物活化過程中速率限制性的初次磷酸化反應，因此對于不能編碼病毒胸腺嘧啶激酶(TK)的DNA病毒同樣具有抑制作用，具有更廣譜的抗病毒活性(Erik De Clercq Nature Rev.2002，1，13)。另外，由于該類化合物的結構不同于L-核苷類藥物，因而與臨床應用的L-核苷類抗HBV藥物如拉米夫定之間不產(chǎn)生交叉耐藥性。(Doo E Gastroenterology 2001，1201000；Das，K J Virol 2001，754771)。由于這些特點，使得非環(huán)核苷膦酸酯代表了一類極有發(fā)展前景的抗病毒藥物。
阿德福韋雙特戊酰氧甲酯(bis(POM)PMEA，簡稱ADV)是9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤阿德福韋(PMEA，Adefovir)的雙特戊酰氧甲基酯前藥，于2003年9月經(jīng)FDA批準上市，是繼拉米夫定后上市的第二個核苷類小分子抗HBV藥物。ADV在體外和體內(nèi)對乙肝病毒(HBV)、鴨乙肝病毒(DHBV)、以及對拉米夫定耐受的變異乙肝病毒(YMDD)均有很強的抗病毒活性(Yuen MF.Expert Opin Pharmacother.2004，5(11)2361-7)。臨床研究表明該藥物能明顯改善患者肝臟組織學性質，降低血清HBV-DNA及轉氨酶水平，增加e抗原(HBeAg)轉化率，并且無論HBeAg的狀態(tài)、基因型、人種差異或是否存在對拉米夫定耐藥的變異病毒均不影響ADV發(fā)揮抗HBV活性(Anneke KRaney.Expert Opin.Investig Drugs 2003，12(8)1281-1295)。但ADV應用中也存在如下主要缺陷(1)化學性質不穩(wěn)定，其對于血清酶介導的水解反應高度敏感，不能有效增加作用部位藥物濃度(Pieter Annaert，Pharmaceutical Research.1997，14(4)492-496)；(2)轉運一分子的核酸需要釋放兩當量的具有潛在毒性的甲醛和特戊酸(Jae-Taeg Hwang.Drugs of the Future 2004，29(2)；163-177)。新一代阿德福韋前藥設計目的旨在增加藥物的代謝穩(wěn)定性，延長作用時間，增加藥物生物利用度，同時降低藥物毒性。
人類肽轉運體(Human peptide transporters)是人體內(nèi)介導二、三肽吸收的一種整合胞漿膜蛋白，其屬于質子依耐性寡肽轉運體家族。目前兩種具有轉運活性的人類肽轉運體(PepT1，PepT2)被克隆和功能學確證，其中PepT1被稱為腸道肽轉運體，其主要存在于小腸上皮細胞梳狀膜上，介導逆濃度梯度的底物-質子共轉運過程，天然的L-氨基酸是其適宜的轉運底物(Isabel Rubio-Aliaga TRENDS inPharmacological Sciences，2002，23(9)434-440)。由于這種機制的闡明，近來氨基酸酯修飾方法被用于抗病毒核苷衍生物提高生物利用度和增強藥效的設計上，如阿昔洛韋(Acyclovir)和更昔洛韋(Ganciclovir)的纈氨酸酯前藥L-Valaciclovir、L-Valganciclovir分別將原藥的生物利用度從6％、20％提高到63％、61％(Birger Brodin.Pharmacology &Toxicology.2002，90285-29；Raymund R Razonable，Expert Rev.Anti-infect.Ther.2004，2(1)27-42)。MEDIVIR AB公司研制的噴昔洛韋雙L-纈氨酸與異亮氨酸酯衍生物均能明顯提高原藥的生物利用度并使藥物具有強效的抗水痘病毒、腮腺病毒及EB-病毒作用(PerEngelhardt，US 0020188125)；Smithline Beecham公司研制的9-(3-羥丙基-1-氧)鳥嘌呤的L-纈氨酸酯衍生物BRL 44385能在提高原藥生物利用度的同時，使藥物對DNA病毒(腮腺單純病毒1/2、水痘病毒、巨細胞病毒、乙肝病毒等)具有強效抑制作用(Hamden，Michael，WO9509855)。以上研究結果顯示了氨基酸酯修飾方法在改善核苷類抗病毒藥物藥動學方面的優(yōu)勢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是提供具有抗病毒活性特別是抗乙型肝炎(HBV)和艾滋病(HIV)病毒活性的新型嘌呤類化合物及其藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一個目的是提供上述具有抗病毒活性特別是抗乙型肝炎和HIV病毒活性的新型嘌呤類化合物及其藥學上可接受的鹽的制備方法。
本發(fā)明的再一個目的是提供該類化合物及其鹽做為活性物質在制備治療病毒感染性疾病特別是HBV和HIV病毒引起的感染性疾病的藥物中的應用。
本發(fā)明提供式(I)所示的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其藥理上可接受無機或有機鹽 式(I)中，R1為氨基；R2為氨基保護的或游離的L-型氨基酸；n為0或1；X為O或S。
本發(fā)明還提供具有上述式(I)結構的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其鹽的兩種制備方法。
方法一按以下流程I進行流程I
例示a.2-溴乙醇，N，N-二甲氨基吡啶，二環(huán)己基碳二亞胺，0～25℃，6～24小時；b.異丁基氯甲酸酯，N-甲基嗎啉，硫化氫，-20～-10℃，1～4小時；c.1，2-二溴乙烷，氫化鈉，-20～0℃，1～5小時；氯甲基氯磺酸酯，四正丁基硫酸氫銨，0～25℃，6～12小時；d.N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒(DCMC)，1，8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]十一烷-7-烯(DBU)為堿，25～90℃，4-48小時；e.氯化氫飽和/1，4-二氧六環(huán)或乙酰氯/甲醇，-10～25℃，0.5-6小時。
方法一包括以下步驟(1)N-叔丁氧羰基(BOC)L-氨基酸酯的制備
N-叔丁氧羰基L-氨基酸與2-溴乙醇在非質子溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)以及N，N-二甲胺基吡啶(DMAP)存在下，于0～25℃反應6～24小時，得到N-叔丁氧羰基L-氨基酸溴乙基酯；或N-叔丁氧羰基L-氨基酸在異丁基氯甲酸酯，N-甲基嗎啉，硫化氫氣體在低溫-20～-10℃反應1～4小時，得到N-叔丁氧羰基L-氨基硫代羧酸，然后再與1、2-二溴乙烷在非質子性溶劑中，在強堿存在下，在低溫-20～0℃反應1～5小時，得到N-叔丁氧羰基L-氨基硫代羧酸-2-溴乙基酯；溴氯甲烷與氯磺酸反應得到氯甲基氯磺酸酯，氯甲基氯磺酸酯與N-叔丁氧羰基L-氨基酸在惰性溶劑-水兩相體系中，在相轉移催化劑，四正丁基硫酸氫銨存在下，在0～25℃反應6～12小時，得到N-叔丁氧羰基L-氨基酸的氯甲基酯。
(2)各種N-叔丁氧羰基L-氨基酸或L-氨基硫代羧酸酯與9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤在極性非質子溶劑中，以N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒(DCMC)或1，8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]十一烷-7-烯(DBU)為堿，在25～90℃反應4-48小時，得到產(chǎn)物。
(3)在上面步驟2中制備得到的產(chǎn)物在極性或非極性溶劑中，在氯化氫飽和的1，4-二氧六環(huán)或乙酰氯/甲醇存在下，于-10～25℃，反應0.5～6小時得到產(chǎn)物化合物。
(4)根據(jù)需要，制備成相應的藥學上可接受的鹽。例如，將嘌呤類化合物三鹽酸鹽用碳酸氫鈉、碳酸鈉等游離后與三倍當量的無機酸如硫酸、磷酸及有機酸如檸檬酸、馬來酸等形成硫酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽及馬來酸鹽等按現(xiàn)有技術中已知的方法制備成藥學上可接受的鹽。
方法二按以下流程II進行流程II a.草酰氯，N，N′-二乙基甲酰胺(DEF)，0～50℃，0.5～4.5小時；b.N，N-二甲氨基吡啶(DMAP)，二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，0～25℃，6～24小時；c.吡啶，三乙胺，0～25℃，1～10小時；d.飽和的氯化氫/1，4-二氧六環(huán)或乙酰氯/甲醇，-10～25℃，0.5～6小時。
方法二包括以下步驟
(1)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤在惰性溶劑中，在鹵化劑草酰氯及催化劑，N，N′-二乙基甲酰胺存在下，于0～50℃，反應0.5～4.5小時，得到9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤的二氯代膦酸酯。
(2)N-叔丁氧羰基L-氨基酸與乙二醇在非質子溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺以及N，N-二甲胺基吡啶存在下，于0～25℃反應6～24小時，得到N-叔丁氧羰基L-氨基酸-羥乙基酯。
(3)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤的二氯代膦酸酯與N-叔丁氧羰基L-氨基酸-羥乙基酯在惰性溶劑中，在吡啶與三乙胺存在下，在0～25℃反應1～10小時，得到產(chǎn)物化合物。
(4)上面步驟(3)中得到的產(chǎn)物化合物在極性或非極性溶劑中，在氯化氫飽和的1、4-二氧六環(huán)或乙酰氯/甲醇存在下，于-10～25℃，反應0.5～6小時得到產(chǎn)物化合物。
(5)根據(jù)需要，制備成相應的藥學上可接受的鹽。例如，將嘌呤類化合物三鹽酸鹽用碳酸氫鈉、碳酸鈉等游離后與三倍當量的無機酸如硫酸、磷酸及有機酸如檸檬酸、馬來酸等形成硫酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽及馬來酸鹽等按現(xiàn)有技術中已知的方法制備成藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明進一步提供式(I)所示阿德福韋雙膦酸酯類化合物及其鹽在制備治療病毒感染性疾病特別是乙型肝炎病毒引起的感染性疾病的藥物上的應用。
本發(fā)明的化合物的藥理上可接受的鹽具體地可列舉與鹽酸、氫溴酸、氫氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸的鹽，與甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸等有機酸和天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸的酸加成鹽，或與堿形成的鹽，如鈉、鉀、鈣、鋁等無機堿的鹽，銨鹽，甲胺鹽，乙胺鹽，乙醇胺鹽等，或與賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸等堿性氨基酸形成的鹽。
本發(fā)明的式(I)所示化合物的代表性例子如下(1)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(2)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-乙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(3)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(4)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基丙?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(5)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(1-叔丁氧羰基-2-吡咯啶基甲?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(6)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(7)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(8)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(9)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；
(10)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(11)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(12)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基乙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(13)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(14)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-苯基丙?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(15)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-吡咯啶甲?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(16)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-4-甲基戊酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(17)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(18)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(19)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-4-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(20)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(21)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；
(22)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基)丙酰氧基]乙基]膦?；籽趸鶀乙基}腺嘌呤；(23)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(1-叔丁氧羰基-2-吡咯啶基甲酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(24)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基丙酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(25)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(26)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(27)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-苯基丙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(28)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-吡咯啶基甲酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(29)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基丙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(30)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-4-甲基戊酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽。
以上化合物的結構見表-1 表-1化合物編號與結構


本發(fā)明所要求保護的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其藥理上可接受的鹽具有治療病毒感染性疾病特別是HBV和HIV病毒引起的感染性疾病的功能。
本發(fā)明所要求保護的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其藥理上可接受的鹽具有與現(xiàn)有技術中核苷類小分子抗HBV藥物的阿德福韋相似或更強的治療病毒感染性疾病的活性，所以這些化合物可用于制備新型治療病毒感染性疾病，特別是HBV和HIV病毒引起的感染性疾病的藥物。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發(fā)明作進一步闡述，但這些實施例絕不是對本發(fā)明的任何限制。所有實施例中，熔點用MEL-TEMP熔點儀測定，溫度計未校正；1H-NMR用Varian Mercury 400核磁共振儀記錄，化學位移以δ(ppm)表示；分離用硅膠未說明均為200-300目。
本發(fā)明的化合物可以通過兩種方法制備。
按照方法一制備本發(fā)明的化合物
1、以1，3-二氧雜環(huán)戊烷為起始原料，按已知方法(Nucleoside &Nucleotide 1996，15，1771)經(jīng)若干步反應合成中間體9-[2-(膦?；籽趸?乙基]嘌呤衍生物。
2、N-叔丁氧羰基(BOC)L-氨基酸與2-溴乙醇在甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃等非極性溶劑中，在N，N-二甲氨基吡啶，二環(huán)己基碳二亞胺存在下于0～25℃反應6～24小時，最佳條件為以二氯甲烷為溶劑于10～25℃反應12～24小時，得到N-叔丁氧羰基(BOC)L-氨基酸-溴乙基酯。
3、N-叔丁氧羰基L-氨基酸與異丁基氯甲酸酯(IBCF)及硫化氫氣體在甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃低溫-30～10℃反應1～10小時，得到N-叔丁氧羰基L-氨基硫代羧酸。最佳條件為四氫呋喃為溶劑，在-20～10反應2～4小時。所得產(chǎn)物與1，2-二溴乙烷在甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃等非質子性溶劑中，在氫化鈉、叔丁醇鈉、叔丁醇鋰、乙醇鈉等存在下，在-40～10℃反應0.5～10小時。最佳反應條件為以四氫呋喃為溶劑，在氫化鈉存在下于-20～0℃反應2～5小時。得到N-叔丁氧羰基L-氨基硫代羧酸-2-溴乙基酯。
4、N-叔丁氧羰基(BOC)L-氨基酸與溴氯甲烷和氯磺酸反應得到氯甲基氯磺酸酯，在惰性溶劑-水兩相體系(二氯甲烷-水、氯仿-水、二硫化碳-水、四氯化碳-水等)中，在相轉移催化劑，四正丁基硫酸氫銨、四正丁基溴化銨存在下，在-20～25℃反應0.5～24小時，得到N-叔丁氧羰基L-氨基酸的氯甲基酯。最佳反應條件為以二氯甲烷-水為反應體系，以四正丁基硫酸氫銨為相轉移催化劑，于0～15℃反應6～12小時。
5、N-叔丁氧羰基L-氨基酸-溴乙基酯、N-叔丁氧羰基L-氨基硫代羧酸-2-溴乙基酯、N-叔丁氧羰基L-氨基酸的氯甲基酯與9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤在N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、吡啶等極性非質子溶劑中，在N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒或1，8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]十一烷-7-烯存在下，在25～90℃反應4～48小時，得到化合物1～10；最佳反應條件為以N、N-二甲基甲酰胺為溶劑，在N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒與1，8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]十一烷-7-烯(DBU)存在下，在40～80℃反應，6～24小時。
6、化合物1～10在乙酸乙酯、乙酸異丙酯、1，4-二氧六環(huán)等中極性溶劑中，在氯化氫飽和的1，4-二氧六環(huán)或乙酰氯/甲醇存在下，于-20～25℃反應0.5-12小時得到化合物11～20。最佳反應條件為以1，4-二氧六環(huán)為反應溶劑，在氯化氫飽和的1，4-二氧六環(huán)存在下于0～10℃反應3～6小時。
7、根據(jù)需要，制備成相應的鹽。將嘌呤類化合物三鹽酸鹽用碳酸氫鈉、碳酸鈉等游離后與三倍當量的無機酸如硫酸、磷酸及有機酸如檸檬酸、馬來酸等形成硫酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽及馬來酸鹽等按常規(guī)方法制備成藥學上可接受的鹽。
按照方法二制備本發(fā)明的化合物1、9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤為原料，按以知方法(MarkD.Erion.et al J.Am.Chem.Soc.2004，126，5154-5163)制備二氯代9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤。
2、N-叔丁氧羰基L-氨基酸與乙二醇在甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃等非極性溶劑中，在N，N-二甲氨基吡啶，二環(huán)己基碳二亞胺存在下于0～25℃反應6～24小時，最佳條件為以二氯甲烷為溶劑于10～25℃反應12～24小時，得到N-叔丁氧羰基L-氨基酸-羥乙基酯。
3、9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤的二氯代瞵酸酯與N-叔丁氧羰基L-氨基酸-羥乙基酯在甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃等非極性溶劑中，在吡啶與三乙胺存在下，在0～25℃反應1～10小時，最佳反應條件為以二氯甲烷為溶劑，在0～10℃，反應2～6小時得到化合物21～25。
4、化合物21～25在1、4-二氧六環(huán)、乙酸乙酯、乙酸異丙酯、二氯甲烷等非極性溶劑中，在氯化氫飽和1、4-二氧六環(huán)的或乙酰氯/甲醇存在下，于-10～100℃，反應0.5～6小時，最佳反應條件為以1、4-二氧六環(huán)為溶劑在氯化氫飽和1、4-二氧六環(huán)條件下，在0～10℃反應2～4小時得到化合物26～30。
5、據(jù)需要，制備成相應的鹽。將嘌呤類化合物三鹽酸鹽用碳酸氫鈉、碳酸鈉等游離后與三倍當量的無機酸如硫酸、磷酸及有機酸如檸檬酸、馬來酸等形成硫酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽及馬來酸鹽等按常規(guī)方法制備成藥學上可接受的鹽。
實施例1(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物1)的制備1.1(1S)-叔丁基-1-[(2-溴乙氧基)羰基]-2-甲基丁基氨基甲酸酯(a)的制備
將N-叔丁氧羰基-L-異亮氨酸(5.00g，0.02mol)，2-溴乙醇(2.98g，0.024mol)溶解于200ml干燥二氯甲烷中，以冰-水浴降溫至10℃，分次加入N，N-二甲胺基吡啶(2.92g，0.023mol)。加畢，體系保溫攪拌15分鐘。而后緩慢滴加二環(huán)己基碳二亞胺(4.53g，0.022mol)的30ml二氯甲烷溶液。加畢，將反應溫度自然升至室溫反應12小時。將體系中不溶物濾過，蒸除溶劑。向所得殘余物中加入100ml乙酸乙酯，在低溫(-10℃)靜止6小時使體系中固體充分沉降。濾過，濾液以100×2ml水洗，200ml飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除溶劑，得粗品8.65g。以石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1為洗脫劑，硅膠柱層析分得無色油狀物叔丁基1-[(2-溴乙氧基)羰基]-2-甲基丁基氨基甲酸酯(a)4.86g，收率68.39％。
1HNMR(CDCl3)4.99(d，J＝8.15Hz，1H)，4.48-4.37(m，2H)，4.28(m，1H)，3.52-3.47(m，2H)，1.87(m，1H)，1.42(s，9H)，1.22-1.17(m，2H)，0.94-0.87(m，6H)；EI-MS(m/e)323，M+1.2(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤(化合物1)的制備 室溫條件下，將叔丁基1-[(2-溴乙氧基)羰基]-2-甲基丁基氨基甲酸酯(a)(0.63g，1.8mmol)，9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(0.10g，0.36mnol)及N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒(0.21g，0.72mmol)懸浮于10ml干燥N，N-二甲基甲酰胺中，室溫反應24小時，然后在80℃反應4小時。將反應溶劑減壓蒸干，殘余物中加入20ml乙酸乙酯，-5～0℃沉降6小時，濾除不溶物，濾液分別以1％檸檬酸，水及飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，殘留物柱層析分離(洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)得白色泡膜狀固體化合物43mg。產(chǎn)率15.17％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.32(s，1H)，7.96(s，1H)，5.87(brs，2H)，5.21-5.40(m，2H)，4.39(t，J＝5.32Hz，2H)，4.10-4.37(m，10H)，3.93(m，2H)，3.81(d，J＝8.41Hz，2H)，1.84(m，2H)，1.42(s，18H)，1.05-1.26(m，4H)，0.85-0.91(m，12H).EI-MS(m/e)787，M+實施例2(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-乙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物2)的制備2.1叔丁基-1-[(2-溴乙氧基)羰基]甲基氨基甲酸酯(a)的制備 將N-叔丁氧羰基-甘氨酸(3.70g，0.021mol)，2-溴乙醇(3.47g，0.028mol)溶解于200ml干燥二氯甲烷中，以冰-水浴降溫至10℃，分次加入N，N-二甲胺基吡啶(3.10g，0.025mol)。加畢，體系保溫攪拌15分鐘。而后緩慢滴加二環(huán)己基碳二亞胺(4.53g，0.022mol)的30ml二氯甲烷溶液。后續(xù)過程類似于化合物1.1的合成.得無色油狀物(a)3.21g，收率54.39％。
2.2(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-乙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物2)的制備
室溫條件下，將(a)(0.99g，3.55mmol)，9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(0.16g，0.59mnol)及N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒(0.33g，1.13mmol)懸浮于10ml干燥N，N-二甲基甲酰胺中，室溫反應24小時，后在80℃反應4小時。將反應溶劑減壓蒸干，殘余物中加入20ml乙酸乙酯，-5～0℃沉降6小時，濾除不溶物，濾液分別以1％檸檬酸，水及飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，殘留物柱層析分離(洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)得淡黃琥珀狀化合物52.4mg。產(chǎn)率13.15％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.26(s，1H)，8.11(s，1H)，5.44(brs，2H)，4.38-4.45(m，2H)，4.23-4.31(m，8H)，3.93-4.01(m，6H)，3.84(d，J＝8.52Hz，2H)，1.43(s，18H).EI-MS(m/e)675，M+.
實施例3(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物3)的制備3.1(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基單硫代丁酸(a)的制備 將N-叔丁氧羰基-L-纈氨酸(2.50g，0.0115mol)溶解于25ml干燥四氫呋喃中，以冰-鹽浴降溫至-15℃，加入N-甲基嗎啉(11.54g，0.0575mol)及異丁基氯甲酸酯(1.74g，0.0126mol)，體系保溫攪拌30分鐘。在反應體系內(nèi)溫保持在-15℃以下，通入自制硫化氫氣體，通氣時間持續(xù)1.5-2小時，至體系中硫化氫氣體吸收至飽和后，再保溫反應2小時使反應進行完全。加入40ml無水乙醚，以0.1M鹽酸調(diào)節(jié)體系pH至3，分取有機層，以2×20ml水，2×20ml飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸干溶劑，得淡黃色油狀物(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基單硫代丁酸(a)2.22g，收率82.85％.
1HNMR(CDCl3)5.06(m，1H)，4.24(m，1H)，2.27(m，1H)，1.43(s，9H)，0.93-0.89(m，6H).
3.2(1S)-叔丁基-1-[(2-溴乙基硫)羰基]-2-甲基丙基氨基甲酸酯(b)的制備 將氫化鈉(0.17g，4.29mmol)加入10ml四氫呋喃中，攪拌并以冰-鹽浴降溫至-15℃，緩慢滴加入(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基單硫代丁酸(a)(1.00g，4.29mmol)的2ml四氫呋喃溶液，滴畢，保溫反應1.5小時，室溫反應2小時，緩慢滴加入1，2-二溴乙烷(1.60g，8.58mol)的5ml四氫呋喃溶液，滴畢，體系室溫反應12小時。將體系過濾，濾液用2×20ml水，2×20ml飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，殘留物柱層析分離(洗脫劑石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)，得淡黃色油狀物(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基單硫代丁酸-2-溴乙基酯(b)0.59g，收率40.52％。
1HNMR(CDCl3)4.95(d，J＝8.95Hz，1H)，4.26(m，1H)，3.42(t，J＝7.34Hz，2H)，3.29(t J＝6.6Hz，2H)2.31-2.25(m，1H)，1.46(s，18H)，0.99(d，J＝6.78Hz，3H)，0.86(d，J＝6.96Hz，3H).
3.3(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物3)的制備 將(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基單硫代丁酸-2-溴乙基酯(b)(0.44g，1.3mmol)和9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(0.08g，0.26mmol)及N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒(0.15g，0.26mmol)懸浮于10ml干燥N，N-二甲基甲酰胺中，室溫反應24小時，后在80℃反應5小時。將反應溶劑減壓蒸干，殘余物中加入20ml乙酸乙酯，-5～0℃沉降，濾除不溶物，濾液分別以10×2ml 1％檸檬酸，水及飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，殘留物柱層析分離(洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)得無色琥珀狀化合物58mg。產(chǎn)率13.09％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.27(s，1H)，8.05(s，1H)，6.18(brs，2H)，5.21-5.39(m，2H)，3.97-4.41(m，8H)，3.91(t，J＝4.89Hz，2H)，3.79(d，J＝8.41Hz，2H)，3.04-3.21(m，4H)，2.24(m，2H)，1.42(S，18H)，0.96(d，J＝6.84Hz，6H)，0.83(d，J＝6.65Hz，6H).ESI-MS(m/e)792.2，(M+H)+.
實施例4(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基丙?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物4)的制備
N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸為起始原料，以類似于實施例3的方法制備，得類白色琥珀狀化合物(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基丙?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤61mg。產(chǎn)率12.67％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.31(s，1H)，8.01(s，1H)，7.11-7.26(m，10H)，6.12(brs，2H)，5.44-5.37(m，2H)，4.09-4.45(m，8H)，3.81-3.90(m，4H)，3.14-3.31(m，4H)，2.88-3.13(m，4H)，1.42(S，18H)。
實施例5(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(1-叔丁氧羰基-2-吡咯啶基甲?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物5)的制備N-叔丁氧羰基-L-脯氨酸為起始原料，以類似于實施例3的方法制備，得淺棕黃色油狀化合物(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(1-叔丁氧羰基-2-吡咯啶基甲?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤55mg，產(chǎn)率18.61％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.35(s，1H)，8.07(s，1H)，5.84(brs，2H)，4.47(m，2H)，4.36-4.24(m，6H)，3.83-3.96(m，4H)，3.38-3.57(m，4H)，3.14-3.26(m，4H)，1.42(S，18H)，2.13-2.24(m，4H)，1.91-2.02(m，4H)，1.43(d，J＝16.67Hz，18H)。
實施例6(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物6)的制備N-叔丁氧羰基-L-脯氨酸為起始原料，以類似于實施例3的方法制備，得白色泡沫狀化合物(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤67mg，產(chǎn)率31.38％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.31(s，1H)，7.97(s，1H)，5.97(brs，2H)，5.24-5.41(m，2H)，4.51-4.28(m，8H)，3.91-4.02(m，4H)，3.23-3.41(m，4H)，1.72-1.80(m，4H)，1.07(brs，12H)。
實施例7(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物7)的制備N-叔丁氧羰基-L-異亮氨酸為起始原料，以類似于實施例3的方法制備，得類白色泡沫狀化合物(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤，81mg，產(chǎn)率35.23％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.36(s，1H)，8.04(s，1H)，5.87(brs，2H)，5.18-5.34(m，2H)，4.32-4.42(m，4H)，4.08-4.11(m，4H)，3.92(m，2H)，3.81(d，J＝8.66Hz 2H)，3.02-3.18(m，4H)，1.92-1.99(m，2H)，1.42(s，18H)，1.11-1.17(m，4H)，0.79-0.98(m，12H)。
實施例8(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物8)的制備8.1氯甲基氯磺酸酯(a) 將氯磺酸(100ml，1.5mol)，溴氯甲烷(50ml，0.75mol)共置于反應瓶內(nèi)，緩慢將反應體系加熱至回流，反應3小時。反應畢，將體系冷卻至室溫，后將其緩慢傾入500g碎冰中，待冰融化后用二氯甲烷(400×2ml，)萃取，有機層分出，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液在常壓下蒸除溶劑，殘余物減壓蒸餾，收集45-50℃/9-10mmHg餾分。得產(chǎn)物30.25g，產(chǎn)率24.4％。
1HNMR(CDCl3)5.96(s，2H)8.2(1S)-叔丁基-1-[(氯甲氧基)羰基]-2-甲基丙基氨基甲酸酯(b)的制備 將N-叔丁氧羰基-L-纈氨酸(3.00g，0.0138mol)，碳酸氫鈉(4.59g，0.0546mol)及四-正丁基硫酸氫銨(0.47g，0.00138mol)至于50ml水與50ml二氯甲烷的體系中，冰鹽浴冷卻至0℃，劇烈攪拌下緩慢滴加入氯甲基氯磺酸酯(a)(2.78g，0.0167mol)的14ml二氯甲烷溶液，滴畢，體系自然升至室溫并反應12小時。有機層分出，以2×10ml飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，殘留物柱層析分離(洗脫劑石油醚∶乙酸乙酯＝15∶1)得無色油狀物2.96g。產(chǎn)率80.77％。
1HNMR(CDCl3)5.83(d，J＝5.86Hz，1H)，5.58(d，J＝5.37Hz，1H)，4.97(dJ＝8.3Hz，1H)，4.23-4.21(m，1H)，2.15(m，1H)，1.41(s，9H)，0.96(d，J＝6.83Hz，3H)，0.89(d，J＝6.84Hz，3H)。
8.3(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物8)的制備將9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤(0.10g，0.36mmol)，叔丁基1-[(氯甲氧基)羰基]-2-甲基丙基氨基甲酸酯(b)(0.48g，1.8mmol)，N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒(0.21g，0.72mmol)懸浮于10ml干燥的N-甲基-2-吡咯烷酮中，室溫反應24小時后，80℃反應5小時。將體系傾入5ml1％檸檬酸與5ml乙酸乙酯中，萃取，分出有機相，水相續(xù)用2×5ml乙酸乙酯萃取，酯層合并，續(xù)用2×5ml 1％檸檬酸，水及飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，殘留物柱層析分離(洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)得無色琥珀狀物55mg。產(chǎn)率20.8％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.28(s，1H)，7.97(s，1H)，6.18(brs，2H)，5.66-5.72(m，4H)，5.21-5.36(m，2H)，4.41(m，2H)，4.27-4.31(m，2H)，3.91(m，2H)，3.85(d，J＝5.09Hz，2H)，2.13-2.18(m，2H)，1.42(s，18H)，0.96(d，J＝6.32Hz，6H)，0.84(d，J＝6.78Hz，6H)。
實施例9(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物9)的制備N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸為起始原料，以類似于實施例8的方法制備，得類白色泡沫狀化合物(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤26mg，產(chǎn)率9.56％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.34(s，1H)，8.06(s，1H)，6.21(brs，2H)，5.76-5.91(m，4H)，5.18-5.29(m，2H)，4.52-4.36(m，4H)，3.94(m，2H)，3.91(d，J＝5.97Hz，2H)，1.71-1.93(m，6H)，1.42(s，18H)，0.91(t，J＝5.5Hz，12H)。
實施例10(2S，2′S )-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤(化合物10)的制備N-叔丁氧羰基-L-異亮氨酸為起始原料，以類似于實施例8的方法制備，得白色泡沫狀化合物(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤85mg，產(chǎn)率15.56％。
1HNMR(CDCl3)δ＝8.28(s，1H)，7.96(s，1H)，6.09(brs，2H)，5.59-5.72(m，4H)，5.08-5.21(m，2H)，4.38(m，2H)，4.23-4.31(m，2H)，3.89(m，2H)，3.82(d，J＝7.33Hz，2H)，1.84(m，2H)，1.41(s，18H)，1.07-1.16(m，4H)，0.81-0.95(m，12H)。
實施例11(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物11)的制備 將實施例1中制備的化合物(0.21g，0.267mmol)溶解于1ml干燥1，4-二氧六環(huán)中，氮氣保護下用冰鹽浴將體系冷卻至0℃，攪拌下緩慢滴加15％氯化氫的1、4-二氧六環(huán)溶液(1ml，4mmol)，保溫反應1小時，后室溫反應3小時至產(chǎn)物轉化充分。靜置30分鐘，將體系中上清液吸棄，固體物用5×2ml乙酸乙酯洗滌、沉降5次，將溶劑吸棄，殘余物充分干燥后得白色泡沫狀固體0.176g，產(chǎn)率95.24％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.43(s，1H)，8.39(s，1H)，4.55(t，J＝5.08Hz，2H)，4.38-4.53(m，4H)4.21-4.36(m，4H)，4.06-4.11(m，2H)，3.98-4.02(m，4H)，1.98-2.01(m，2H)，1.34-1.57(m，4H)，0.96-1.03(m，12H).ESI-MS588.2(M+H)+。
實施例12(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基乙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物12)的制備以實施例2中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得白色粉末狀物22mg，產(chǎn)率87.76％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.54(brs，4H)，8.49(s，1H)，8.42(s，1H)，4.44(m，2H)，4.31(m，4H)4.16(m，4H)，3.97(d，J＝7.82Hz，2H)，3.92(m，2H)，3.85(s，4H).EI-MS(m/e)475M+。
實施例13(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物13)的制備 將乙酰氯(0.077ml，1.06mmol)、甲醇(0.058ml，1.36mmol)置于1.6ml干燥乙酸乙酯中，體系用冰鹽浴冷卻至-5～0℃，反應30分鐘，緩慢滴加入實施例3中制備的化合物(30mg，0.0379mmol)的1.6ml干燥乙酸乙酯溶液，滴畢，保溫反應2小時，后自然升至室溫反應6小時至產(chǎn)物轉化充分。靜置30分鐘，將體系中上清液吸棄，固體物用5×2ml乙酸乙酯洗滌、沉降5次，將溶劑吸棄，殘余物充分干燥后得白色半固體13mg，產(chǎn)率58.03％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.43(s，1H)，8.39(s，1H)，，4.58(t，J＝4.69Hz，2H)，4.14-4.22(m，6H)，3.98-4.02(m，4H)，3.31(t，J＝6.26Hz，4H)，2.26-2.41(m，2H)，1.12(d，J＝6.85，6H)，1.04(d，J＝7.04Hz，6H).ESI-MS592.1(M+H)+。
實施例14(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-苯基丙酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物14)的制備以實施例4中制備的化合物為原料，以類似于實施例13的方法制備，得白色粉末狀物14mg，產(chǎn)率84.46％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.38(s，1H)，8.35(s，1H)，7.28-7.38(m，10H)，4.56(m，4H)，4.05-4.18(m，4H)，3.96(t，J＝4.59Hz)，3.91(d，J＝8.25Hz，2H)，3.24(m，4H)，3.13-3.19(m，4H)。
實施例15(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-吡咯啶甲?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物15)的制備以實施例5中制備的化合物為原料，以類似于實施例13的方法制備，得類白色泡沫狀固體10mg，產(chǎn)率41.55％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.44(s，1H)，8.40(s，1H)，4.68(m，2H)，4.56(m，2H)，4.17-4.19(m，4H)，3.97-4.01(m，4H)，3.39(t，J＝6.96Hz，4H)，3.33(m，4H)，2.50-2.56(m，2H)，2.07-2.16(m，6H).ESI-MS588.1(M+H)+。
實施例16(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-4-甲基戊酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物16)的制備以實施例6中制備的化合物為原料，以類似于實施例13的方法制備，得無色凝膠狀半固體7mg，產(chǎn)率46.34％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.42(s，1H)，8.37(s，1H)，4.55(m，2H)，4.18-4.26(m，6H)，4.01(m，4H)，3.31(m，4H)，1.72-1.81(m，4H)，1.02(m，12H).ESI-MS620.2(M+H)+。
實施例17(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物17)的制備以實施例7中制備的化合物為原料，以類似于實施例13的方法制備，得白色蓬松固體14mg，產(chǎn)率50.26％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.41(s，1H)，8.36(s，1H)，4.56(t，J＝5.12Hz，2H)，4.18-4.25(m，6H)，3.91-4.01(m，4H)，3.24(m，4H)，2.07(m，2H)，1.24-1.61(m，4H)，0.97-1.08(m，12H)ESI-MS620.2(M+H)+。
實施例18(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物18)的制備以實施例8中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得白色泡沫狀固體18mg，產(chǎn)率，57.45％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.42(s，1H)，8.37(s，1H)，5.65-5.91(m，4H)，4.57(t，J＝4.89Hz，2H)，4.11(m，2H)，4.08(d，J＝8.22Hz，2H)，4.02(t，J＝4.89Hz，2H)，2.14-2.21(m，2H)，1.02-1.16(m，12H).ESI-MS532.1(M+H)+。
實施例19(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-4-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物19)的制備以實施例9中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得白色泡沫狀固體14mg，產(chǎn)率90.74％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.42(s，1H)，8.38(s，1H)，5.85-5.73(m，4H)，4.56(t，J＝5.13Hz，2H)，4.18(m，2H)，4.09(d，J＝8.43Hz，2H)，4.02(t，J＝4.76Hz，2H)，1.71-1.86(m，6H)，1.01(m，12H)。
實施例20(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物20)的制備以實施例10中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得類白色泡沫狀固體15mg，產(chǎn)率78.26％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.41(s，1H)，8.36(s，1H)，5.73-5.89(m，4H)，4.56(t，J＝5.13Hz，2H)，4.18(m，2H)，4.08(d，J＝8.07Hz，2H)，4.01(t，J＝5.14Hz，2H)，+12H)。
實施例21(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物21)的制備21.1(1S)-叔丁基-1-[(2-羥乙氧基)羰基]-2-甲基丙基氨基甲酸酯(a)的制備 將N-叔丁氧羰基L-纈氨酸(0.22g，1mmol)，乙二醇(0.06g，1mmol)，置于15ml干燥二氯甲烷中，以冰-水浴降溫至10℃，分次加入N，N-二甲胺基吡啶(0.122g，1mmol)，體系保溫攪拌15分鐘，緩慢滴加入二環(huán)己基碳二亞胺(0.22g，1.1mmol)的10ml二氯甲烷溶液，加畢，將反應溫度自然升至室溫反應24小時。將體系中不溶物濾過，蒸除溶劑，殘余物溶解于10ml乙酸乙酯中，低溫(-10℃)靜置，過濾，濾液分別以2×5ml 1M硫酸氫鉀、水及5％碳酸鈉溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，溶劑減壓蒸除，殘余物以石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1為洗脫劑，硅膠柱層析分得無色油狀物叔丁基1-[(2-羥乙氧基)羰基]-2-甲基丙基氨基甲酸酯(a)0.167g，收率76.95％。
1HNMR(CDCl3)5.15(d，J＝8.43Hz，1H)，4.20-4.27(m，3H)，3.77(t，J＝4.59Hz，2H)，3.24(brs，1H)1.81(m，1H)，1.41(s，9H)，1.21-1.13(m，2H)，0.85-0.91(m，6H)。
21.2二氯代9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(b)的制備將草酰氯(0.54ml，6.28mmol)緩慢滴加入含9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(0.50g，1.8mmol)，N，N-二乙基甲酰胺(0.20ml，1.9mmol)的14ml二氯甲烷中，體系回流3小時，取反應液用甲醇淬滅，至TLC檢測雙氯代物轉化完全。將體系冷至室溫，減壓濃縮，將殘余的黃色泡沫狀物二氯代9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(b)0.37g，粗收率66.95％。將所得物溶解于2ml干燥二氯甲烷中，冰鹽浴冷卻至0℃，緩慢加入0.3ml吡啶，低溫(0℃以下保存?zhèn)溆?。
21.3(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤(化合物21)的制備將叔丁基1-[(2-羥乙氧基)羰基]-2-甲基丙基氨基甲酸酯(a)(0.94g，3.6mmol)，三乙胺(1.50ml，10.78mmol)溶解于6ml干燥二氯甲烷中，體系用冰鹽浴冷卻至0℃，緩慢滴加入二氯代9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(b)的二氯甲烷溶液，滴畢，保溫反應1小時，后緩慢升至室溫反應4小時。溶液分別用3×1ml水、2×1ml1％檸檬酸及飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，濾液濃縮，殘余物以二氯甲烷∶甲醇＝15∶1為洗脫劑，硅膠柱層析分得淡黃色半固體0.22g，收率15.53％。
1HNMR(CDCl3)8.36(s，1H)，8.09(s，1H)，6.21(brs，2H)，5.25-5.41(m，2H)，4.45(t，J＝6.25Hz，2H)，4.11-4.36(m，10H)，3.97(t，J＝5.51Hz，2H)，3.82(d，J＝9.35Hz，2H)，2.02-2.18(m，2H)，1.42(s，18H)，0.96(d，J＝6.41Hz，6H)，0.82(d，J＝6.59Hz，6H).EI-MS(m/e)759，M+。
實施例22(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基)丙酰氧基]乙基]膦?；籽趸鶀乙基}腺嘌呤(化合物22)的制備N-叔丁氧羰基L-苯丙氨酸為起始原料，以類似于實施例21的方法制備，得淺黃色泡沫狀固體43mg，收率13.97％。
1HNMR(CDCl3)8.31(s，1H)，8.01(s，1H)，7.14-7.26(m，10H)，6.01(brs，2H)，5.37-5.44(m，2H)，4.75(m，2H)，4.21-4.27(m，10H)，3.91(m，2H)，3.81(d，J＝8.80Hz，2H)，2.98-3.13(m，4H)，1.38(s，18H).ESI-MS856.2(M+H)+。
實施例23(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(1-叔丁氧羰基-2-吡咯啶基甲酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤(化合物23)的制備N-叔丁氧羰基L-脯氨酸為起始原料，以類似于實施例21的方法制備，得淺黃色琥珀狀物31mg，收率11.41％。
1HNMR(CDCl3)8.34(s，1H)，7.96(s，1H)，5.76-5.84(m，2H)，4.41(t，J＝4.76Hz，2H)，4.21-4.33(m，10H)，3.95(m，2H)，3.79-3.86(m，2H)，3.35-3.53(m，4H)，2.14-2.24(m，4H)，1.91-2.02(m，4H)，1.43(d，J＝17.38Hz，18H).EI-MS(m/e)755，M+。
實施例24(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基丙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤(化合物24)的制備
N-叔丁氧羰基L-丙氨酸為起始原料，以類似于實施例21的方法制備，得類白色半固體44mg，收率22.4％。
1HNMR(CDCl3)8.33(s，1H)，7.98(s，1H)，5.92(brs，2H)，5.40-5.48(m，2H)，4.23-4.42(m，12H)，3.83-3.93(m，4H)，1.37-1.43(m，24H)。
實施例25(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤(化合物25)的制備N-叔丁氧羰基L-亮氨酸為起始原料，以類似于實施例21的方法制備，得淺黃色泡沫狀固體24mg，收率8.47％。
1HNMR(CDCl3)8.36(s，1H)，8.04(s，1H)，6.24(brs，2H)，5.25-5.40(m，2H)，4.24-4.42(m，12H)，3.94(m，2H)，3.85(d，J＝8.47Hz，2H)，1.44-1.59(m，6H)，1.42(s，18H)，0.91(t，J＝6.59Hz，12H).EI-MS(m/e)787，M+。
實施例26(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物26)的制備以實施例21中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得類白色半固體13mg，收率61.36％。
1HNMR(CD3OD)8.41(s，1H)，8.36(s，1H)，4.54(t，J＝4.76Hz，2H)，4.40-4.47(m，4H)，4.31(m，4H)，3.98-4.02(m，6H)，2.30-2.33(m，2H)，1.04-1.16(m，12H).EI-MS(m/e)559，M+。
實施例27(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-苯基丙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物27)的制備以實施例22中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得類白色半固體0.106g，收率91.51％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.37(s，1H)，8.35(s，1H)，7.25-7.36(m，10H)，4.51(t，J＝5.09Hz，2H)，4.27-4.31(m，6H)，4.22-4.26(m，4H)，3.98-4.01(m，4H)，3.16-3.28(m，4H)，ESI-MS656.3(M+H)+實施例28(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-吡咯啶基甲酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物28)的制備以實施例23中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得類白色半固體0.106g，收率91.51％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.43(s，1H)，8.39(s，1H)，4.49-4.55(m，4H)，4.52(m，2H)，4.11(m，4H)，3.99-4.01(m，4H)，3.37-3.43(m，4H)，2.41-2.45(m，2H)，2.06-2.19(m，6H)。ESI-MS556.2(M+H)+。
實施例29(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基丙酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物29)的制備以實施例24中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得類白色半固體26mg，收率77.65％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.42(s，1H)，8.38(s，1H)，4.55(t，J＝5.08Hz，2H)，4.43(t，J＝4.41Hz，2H)，4.29-4.32(m，4H)，4.18(q，J＝7.14Hz，2H)，4.01(m，4H)，1.56(d，J＝7.28Hz，6H)。EI-MS(m/e)503，M+。
實施例30(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-4-甲基戊酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽(化合物30)的制備以實施例25中制備的化合物為原料，以類似于實施例11的方法制備，得淺黃色半固體46mg，收率81.45％。
1HNMR(CD3OD)δ＝8.44(s，1H)，8.41(s，1H)，4.57(m，2H)，4.31(m，4H)，4.11(m，4H)，4.08-4.11(m，4H)，4.02(d，J＝7.42Hz，2H)，1.71-1.85(m，6H)，0.98(t，J＝5.76Hz，12H)，EI-MS(m/e)587，M+。
實施例31體外抗病毒活性測定1、試驗方法(1)細胞毒性試驗采用四氮唑還原法(3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyltetrazolium bromide assay MTT)檢測藥物對HepG 2215生長的抑制作用。取HepG 2215細胞一瓶，用胰酶消化后制備成單細胞懸液，計數(shù)后調(diào)整細胞濃度至2×104cell/ml，加入96孔培養(yǎng)板中。置于細胞培養(yǎng)箱中，37℃、5％CO2培養(yǎng)過夜。吸去上清后加入含有不同濃度藥物的DMEM培養(yǎng)基(5％胎牛血清)。作用9天之后，各孔中加入10μl的MTT并繼續(xù)培養(yǎng)4小時。仔細吸去上清，每孔加入150μl DMSO，輕輕振蕩后，用酶標儀檢測570nm處的OD值。
(2)對乙型肝炎病毒-DNA(HBV-DNA)的抑制試驗a)細胞藥物處理取HepG 2215細胞一瓶，用胰酶消化后制備成單細胞懸液，調(diào)節(jié)細胞濃度至2×104cell/ml，加入24孔細胞培養(yǎng)板中(1ml/well)。37℃、5％CO2培養(yǎng)過夜。取出24孔細胞培養(yǎng)板，吸出上清后依次加入5個5倍稀釋濃度藥物，以及陽性對照藥物。繼續(xù)培養(yǎng)，每3天更換含有藥物的培養(yǎng)基，并于第9天收集各孔上清液至離心管中-20℃凍存?zhèn)溆谩?br> b)熒光定量PCR反應血清標本(100ul)置于裂解液(1mmol/L Tris-Hcl，pH8.0，10mmol/LNacl，0.1mmol/L EDTA，0.5％SDS，0.8mg/ml蛋白酶K)37℃孵化5h，然后用酚氯仿和氯仿分別抽提兩次，再用乙醇沉淀。溶解在50μl水中以備作PCR擴增。
2ul病毒DNA放入48μl的反應混合物中，包括5mmol/L Mgcl2、每種dNTP0.2mmol/L、2.5U的Gold Taq多聚酶，0.2U的UNG酶及引物各0.4mmol/L，探針0.15mmol/L。37℃5min后，95℃變性3min30s，94℃20s、60℃40s(熒光信號檢測)循環(huán)41次，最后4℃保存。檢測所用Taqman探針序列5’FAM-CCAGCAGCGCCTCCTCCTGC-3’TAMARA；引物序列Forward primer5’-CCC TCAGGCTCAGGGCATA-3’，Reverse primer5’-CTTCCTGACTGCCGATTGGT-3’。
2.試驗細胞系HepG 2215細胞，引自復旦大學分子病毒實驗室。該細胞株是用2個頭尾相連的HBV DNA全基因的重組質粒轉染受體細胞HepG2而成，可在體外穩(wěn)定的分泌HBsAg，HBeAg和完整的Dane顆粒，還能產(chǎn)生大量的復制中間體(RI)。細胞培養(yǎng)于含10％胎牛血清的DMEM中。
3.陽性對照組為阿德福韋雙特戊酸酯(Adefovir Dipivoxil)。
4、各化合物對HepG2.2.15細胞中HBV-DNA抑制EC50，細胞毒性CC50，及作用選擇指數(shù)SI值見表-2。
表-2測試化合物對HepG2.2.15細胞中HBV-DNA的抑制效果


a.EC50半數(shù)有效濃度b.CC50半數(shù)細胞毒性濃度c.SI作用選擇性指數(shù)(CC50/EC50)由表-2可知本發(fā)明所要求保護的化合物在抗HBV活性及作用選擇指數(shù)與陽性對照阿德福韋雙特戊酸酯相似或更優(yōu)，這說明它們具有更好的療效指數(shù)。
權利要求
1.一類由下面式(I)所示的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其藥理上可接受的鹽 其中，R1為氨基；R2為氨基保護的或游離的L-型氨基酸；n為0或1；X為O或S。
2.根據(jù)權利要求1的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其藥理上可接受的鹽，其特征在于，所述的嘌呤類化合物雙氨基酸酯選自以下的化合物(1)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(2)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-乙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(3)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(4)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基丙?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(5)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(1-叔丁氧羰基-2-吡咯啶基甲?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(6)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(7)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊?；?乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(8)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基)亞甲基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(9)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(10)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤；(11)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(12)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基乙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(13)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁酰基硫)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(14)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-苯基丙酰基硫)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(15)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-吡咯啶甲?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(16)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-4-甲基戊?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(17)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊?；?乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(18)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(19)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基4-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(20)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基戊酰氧基)亞甲基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(21)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(22)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基)丙酰氧基]乙基]膦?；籽趸鶀乙基}腺嘌呤；(23)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(1-叔丁氧羰基-2-吡咯啶基甲酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(24)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基丙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(25)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤；(26)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-甲基丁酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(27)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-3-苯基丙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(28)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-吡咯啶基甲酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(29)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基丙酰氧基)乙基]膦?；籽趸鵠乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽；(30)(2S，2′S)-9-{2-[O，O′-雙[(2-氨基-4-甲基戊酰氧基)乙基]膦酰基甲氧基]乙基}腺嘌呤.三鹽酸鹽。
3.根據(jù)權利要求1的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其藥理上可接受的鹽，其特征在于，所述藥理上可接受的鹽為該嘌呤類化合物雙氨基酸酯與鹽酸、氫溴酸、氫氟酸、硫酸、硝酸或磷酸形成的無機酸鹽；與甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苦味酸、甲磺酸或乙磺酸形成的有機酸鹽；和天冬氨酸或谷氨酸的酸性氨基酸形成的酸加成鹽；或與鈉、鉀、鈣或鋁的無機堿形成的鹽；銨鹽、甲胺鹽、乙胺鹽、乙醇胺鹽；或與賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸的堿性氨基酸形成的鹽。
4.一種制備權利要求1的嘌呤類化合物雙氨基酸酯的方法，包括以下步驟(1)N-叔丁氧羰基L-氨基酸與2-溴乙醇在非質子溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺以及N，N-二甲胺基吡啶存在下反應，得到N-叔丁氧羰基L-氨基酸溴乙基酯；或N-叔丁氧羰基L-氨基酸與異丁基氯甲酸酯、N-甲基嗎啉及硫化氫氣體反應，得到N-叔丁氧羰基L-氨基硫代羧酸，然后再與1，2-二溴乙烷在非質子性溶劑中，在強堿存在下反應，得到N-叔丁氧羰基L-氨基硫代羧酸-2-溴乙基酯；氯甲基氯磺酸酯與N-叔丁氧羰基L-氨基酸在兩相體系中，在相轉移催化劑四正丁基硫酸氫銨存在下反應，得到N-叔丁氧羰基L-氨基酸的氯甲基酯；(2)各種N-叔丁氧羰基L-氨基酸或L-氨基硫代羧酸酯分別與9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤在極性非質子溶劑中，以N，N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒或1，8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]十一烷-7-烯為堿反應，得到產(chǎn)物；(3)上面步驟(2)中所得產(chǎn)物在極性或非極性溶劑中，在氯化氫飽和的1，4-二氧六環(huán)或乙酰氯/甲醇存在下反應得到產(chǎn)物；(4)根據(jù)需要，按照常規(guī)方法將步驟(3)中得到的產(chǎn)物制備成相應的藥學上可接受的鹽。
5.一種制備權利要求1的化合物的方法，包括以下步驟(1)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤在惰性溶劑中，在鹵化劑草酰氯及催化劑N，N′-二乙基甲酰胺存在下反應，得到9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤的二氯代膦酸酯；(2)N-叔丁氧羰基L-氨基酸與乙二醇在非質子溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺以及N，N-二甲胺基吡啶存在下反應，得到N-叔丁氧羰基L-氨基酸-羥乙基酯；(3)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤的二氯代膦酸酯與N-叔丁氧羰基L-氨基酸-羥乙基酯在惰性溶劑中，在吡啶與三乙胺存在下反應，得到產(chǎn)物；(4)步驟(3)中得到的產(chǎn)物在極性或非極性溶劑中，在氯化氫飽和的1，4-二氧六環(huán)或乙酰氯/甲醇存在下反應得到相應的化合物；(5)根據(jù)需要，按照常規(guī)方法將上面步驟中得到的產(chǎn)物制備成相應的藥學上可接受的鹽。
6.一種藥物組合物，包括至少一種作為有效成分的權利要求1至3的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其藥理上可接受的鹽，所述的化合物可以結合至少一種藥理上可接受的賦形劑或載體。
7.根據(jù)權利要求6的藥物組合物在制備用于治療病毒感染性疾病的藥物中的應用。
8.根據(jù)權利要求7的應用，其特征在于，所述病毒感染性疾病為由乙型肝炎病毒和艾滋病病毒引起的感染性疾病。
全文摘要
本發(fā)明提供一類由式(I)所示的嘌呤類化合物雙氨基酸酯及其藥理上可接受無機或有機鹽，其中R
文檔編號A61P31/18GK101033238SQ20061002440
公開日2007年9月12日 申請日期2006年3月6日 優(yōu)先權日2006年3月6日
發(fā)明者楊玉社, 付曉鐘, 李戰(zhàn), 嵇汝運 申請人:中國科學院上海藥物研究所, 南京長澳醫(yī)藥科技有限公司