專利名稱：積雪酸在制備預(yù)防或治療胰腺纖維化的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及積雪酸在制藥中的應(yīng)用，尤其涉及積雪酸在制備預(yù)防或治療胰腺纖維化的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
積雪草是一種植物藥，積雪苷是從積雪草中提取的物質(zhì)，也稱為積雪甙(Asiaticoside)，結(jié)構(gòu)見(jiàn)式II。
式II研究發(fā)現(xiàn)積雪苷外用抗皮膚粘膜損傷后，其具有纖維疤痕過(guò)增生作用。該物質(zhì)作為相關(guān)用途的化妝品和藥品均有上市，在這些產(chǎn)品中積雪苷是其主要活性成份。積雪酸是積雪苷脫糖后即形成的甙元，其結(jié)構(gòu)見(jiàn)式I所示 式I

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于通過(guò)設(shè)計(jì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法，研究積雪酸的抗胰腺纖維化作用。
因此，本發(fā)明的目的是提供積雪酸在制備預(yù)防或治療胰腺纖維化的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于本發(fā)明通過(guò)用積雪酸對(duì)大鼠胰腺纖維化的影響，證實(shí)了積雪酸具有抗胰腺纖維化的作用。因而，積雪酸可作為活性成份用于制備抗胰腺纖維化的藥物。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例11材料1.1動(dòng)物Wistar大鼠，雄性，體重180g-200g，中科院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供1.2樣品名稱積雪酸廣西昌州天然產(chǎn)物開(kāi)發(fā)有限公司或上海醫(yī)藥工業(yè)研究院制造2實(shí)驗(yàn)方法2.1造模方法Wistar大鼠以腹腔注射二乙基二硫代氨基甲酸鹽(DDC)500mg/kg，每周2次，連續(xù)4周，可出現(xiàn)胰臟廣泛出血、淤血、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和小葉間、小葉內(nèi)的纖維化。
2.2分組及給藥方法模型大鼠隨機(jī)分為模型組、積雪酸3mg/kg、9mg/kg和27mg/kg劑量組，另設(shè)空白對(duì)照組，于造模開(kāi)始后給藥，口服連續(xù)28天，給藥結(jié)束次日剖解動(dòng)物。
2.3檢測(cè)指標(biāo)2.3.1實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取胰臟稱重，計(jì)算臟器系數(shù)。
2.3.2胰臟羥脯氨酸含量測(cè)定取100mg樣本在水中勻漿，110℃10N HCl中水解20h。HCl用氮?dú)鈸]發(fā)，水解產(chǎn)物用雙蒸水溶解后過(guò)濾。取0.5ml液體與3ml枸櫞酸磷酸緩沖液(0.15M枸櫞酸加0.6M磷酸氫二鈉)和0.5ml溶于9M磷酸的1M過(guò)碘酸混合。加1.75ml提取緩沖液(5份甲苯5份2-甲基-1-丙醇2份1-丙醇)，震蕩30min，離心。組織相(0.6ml)與Ehrlich’s試劑混合放置15min。在565nm測(cè)定吸收度，用4-羥-1-脯氨酸制作標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度，含量以μg/g組織表示。
2.3.3組織學(xué)檢查胰臟組織用10％福爾馬林固定，石蠟包埋，染色后鏡檢。對(duì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、間質(zhì)水腫，纖維化、腺房細(xì)胞壞死和出血情況評(píng)分(0-3分)。
3結(jié)果3.1積雪酸對(duì)大鼠胰臟重量和臟器系數(shù)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，將大鼠處死、解剖，稱量體重和胰贓重并計(jì)算其與體重的比值，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1

*表示p＜0.05；**表示p＜0.01，與對(duì)照組比較+表示p＜0.05；++表示p＜0.01，與模型組比較3.2胰臟羥脯氨酸含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)各組大鼠進(jìn)行肺部羥脯氨酸含測(cè)定，結(jié)果如表2。
表2


*表示p＜0.05；**表示p＜0.01，與對(duì)照組比較+表示p＜0.05；++表示p＜0.01，與模型組比較3.3組織學(xué)檢查實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，將大鼠處死、解剖；標(biāo)本常規(guī)包埋、固定、HE染色，鏡檢。
結(jié)果模型組第60天可見(jiàn)胰導(dǎo)管周圍嚴(yán)重炎癥反應(yīng)。嗜中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)水腫，出血以及偶見(jiàn)腺泡細(xì)胞壞死。腺泡細(xì)胞消失位置及腺泡間出現(xiàn)纖維化。積雪酸呈劑量依賴性減少炎癥反應(yīng)，組織水腫和纖維化，評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表3。
表3

+表示p＜0.05；++表示p＜0.01，與模型組比較結(jié)論本發(fā)明的積雪酸具有抗胰腺纖維化的作用，可作為活性成份用于制備抗胰腺纖維化的藥物。
權(quán)利要求
1.積雪酸在制備預(yù)防或治療胰腺纖維化的藥物中的應(yīng)用，其中該積雪酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)如式I所示 式I。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了積雪酸在制備預(yù)防或治療胰腺纖維化的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)用積雪酸對(duì)大鼠胰腺纖維化的影響，證實(shí)了積雪酸具有抗胰腺纖維化的作用。因而，積雪酸可作為活性成份用于制備抗胰腺纖維化的藥物。
文檔編號(hào)A61P1/18GK101032492SQ200610024398
公開(kāi)日2007年9月12日 申請(qǐng)日期2006年3月6日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月6日
發(fā)明者王光鳳, 劉全海, 劉珉宇, 吳學(xué)軍, 李莉 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院