專(zhuān)利名稱：新的α－氨基酸化合物、其制備方法和包含它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的α-氨基酸化合物、其制備方法和包含它們的藥物組合物以及它們作為二肽基肽酶IV(DPP IV)的抑制劑的用途。
二肽基肽酶IV是一種存在于許多人體組織并且與許多病理學(xué)有關(guān)的膜絲氨酸蛋白酶。
具體地，已經(jīng)證明，DPP IV與GLP-1(胰升糖素樣肽-1)的失活有關(guān)。GLP-1是一種刺激胰腺分泌胰島素的重要試劑，因而對(duì)血液中葡萄糖的水平具有直接的有益影響。
因此，抑制DPP IV構(gòu)成了一種極有前景的治療葡萄糖不耐受癥(glucose intolerance)以及與高血糖癥有關(guān)的疾病例如非胰島素依賴型糖尿病(II型糖尿病)或肥胖的方法。
文獻(xiàn)中已經(jīng)描述了DPP IV抑制劑，例如在專(zhuān)利申請(qǐng)EP0490379和期刊Adv.Exp.Med.Biol.1997，421，157-160中描述了酰胺化合物，以及在專(zhuān)利申請(qǐng)DE19826972中描述了氨基甲酸酯化合物。
而且，在專(zhuān)利申請(qǐng)WO96/27593中描述了作為NO-合成酶抑制劑的α-氨基酸化合物—精氨酸類(lèi)似物在治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)疾病、胃腸道系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)功能障礙疾病以及與心血管系統(tǒng)或肺支氣管系統(tǒng)有關(guān)的疾病中的用途。
本發(fā)明的化合物具有二肽基肽酶IV抑制性能，這使得它們特別地可用于治療葡萄糖不耐受癥以及與高血糖癥有關(guān)的疾病。
更特別地，本發(fā)明涉及式(I)的化合物、其可能存在的互變異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體及其與藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽 其中 代表一個(gè)任選地被氰基取代的5-元含氮雜環(huán)，Ak代表一個(gè)直鏈或支鏈的(C1-C6)亞烷基鏈，X代表一條單鍵或一個(gè)亞苯基，R1和R2可以相同或不同，各自代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，Y代表NR4或CH-NO2，R4代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，當(dāng)Y代表CH-NO2時(shí)，R3代表一個(gè)選自直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基、硝基和氰基的基團(tuán)；或當(dāng)Y代表NR4時(shí)，R3代表一個(gè)選自硝基和氰基的基團(tuán)，其中不包括這樣的化合物其中 代表一個(gè)未取代的5-元含氮雜環(huán)，同時(shí)Ak代表基團(tuán)-(CH2)3-，同時(shí)X代表一條單鍵，同時(shí)Y代表NH，并且R3代表硝基。
在藥學(xué)上可接受的酸中，例如可以非限定性的地提到鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、谷氨酸、富馬酸、酒石酸、馬來(lái)酸、檸檬酸、抗壞血酸、甲磺酸、樟腦酸、草酸等。
應(yīng)當(dāng)明白，“5-元含氮雜環(huán)”是指含有一、二或三個(gè)雜原子、其中一個(gè)雜原子是氮原子而其它存在的雜原子選自氧原子、氮原子和硫原子原子的5-元飽和單環(huán)基團(tuán)。
優(yōu)選的5-元含氮雜環(huán)是吡咯烷基和噻唑烷基。
其中R2代表氫原子的式(I)化合物以式(Ia)和(Ib)所代表的兩種互變異構(gòu)體形式存在 它們都構(gòu)成了本發(fā)明整體的一部分。
其中R3代表氫原子的式(I)化合物以式(Ic)和(Id)所代表的兩種互變異構(gòu)體形式存在 它們都構(gòu)成了本發(fā)明整體的一部分。
優(yōu)選的式(I)化合物是其中 代表一個(gè)任選地被一個(gè)氰基取代的1-吡咯烷基或任選地被一個(gè)氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基。
優(yōu)選的式(I)化合物是其中酰胺官能團(tuán)的α-位構(gòu)型為(S)的那些化合物。
本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方面涉及其中Ak代表基團(tuán)(CH2)4的式(I)化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選方面涉及其中 代表一個(gè)任選地被一個(gè)氰基取代的1-吡咯烷基或任選地被一個(gè)氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基并且Ak代表基團(tuán)(CH2)3的式(I)化合物。
本發(fā)明的另外一個(gè)優(yōu)選方面涉及其中X代表一條單鍵的式(I)化合物。
本發(fā)明的又一個(gè)優(yōu)選方面涉及其中Y代表一個(gè)基團(tuán)NR4(其中R4代表氫原子或直鏈的或支鏈的(C1-C6)烷基)的式(I)化合物。
本發(fā)明還有一個(gè)優(yōu)選方面涉及其中R3代表硝基的式(I)化合物。
在本發(fā)明的優(yōu)選化合物中，可以更具體地提到N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍、其互變異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體及其與一種藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽，N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其互變異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體及其與一種藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽，和N-{(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其互變異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體及其與一種藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽。
本發(fā)明還涉及一種制備式(I)化合物的方法，其特征在于使一種式(II)的化合物 其中Ak和X如式(I)所定義，P1代表一種氨基官能團(tuán)的保護(hù)基，而P2代表一種不同于P1的氨基官能團(tuán)的保護(hù)基，與一種式(III)的化合物在常規(guī)的肽偶聯(lián)條件下反應(yīng) 其中 如式(I)所定義，脫保護(hù)后，得到一種式(IV)的化合物 其中 ，P1、Ak和X如前面所定義，然后通過(guò)常規(guī)的有機(jī)化學(xué)反應(yīng)，再經(jīng)過(guò)脫保護(hù)反應(yīng)，把它轉(zhuǎn)變?yōu)槭?I)的化合物，如果需要的話，按照常規(guī)的純化技術(shù)對(duì)該化合物進(jìn)行純化，如果需要的話，按照常規(guī)的分離技術(shù)把它分離為旋光異構(gòu)體，并且，如果需要的話，用一種藥學(xué)上可接受的酸把它轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N加成鹽。
式(Ie)的化合物—式(I)化合物的一種特例 其中 、R1、Ak和X如式(I)所定義，也可以以式(V)的化合物為原料而制得 其中P1、Ak和X如前面所定義，使該原料與式(III)的化合物在常規(guī)的肽偶聯(lián)條件下反應(yīng)，在脫保護(hù)(如果需要的話)后，得到式(Ie)的化合物，如果需要的話，按照常規(guī)的純化技術(shù)對(duì)該化合物進(jìn)行純化，如果需要的話，按照常規(guī)的分離技術(shù)把它分離成它的旋光異構(gòu)體，并且，如果需要的話，用一種藥學(xué)上可接受的酸把它轉(zhuǎn)變?yōu)榧映甥}。
本發(fā)明的化合物除了是新穎的外，還具有很有價(jià)值的藥理活性。它們具有二肽基肽酶IV-抑制性能，使得它們可用于治療葡萄糖不耐受癥以及與高血糖癥有關(guān)的疾病例如II型糖尿病或肥胖。
本發(fā)明還涉及包含至少一種式(I)的化合物作為活性成份和一種或多種合適的惰性的無(wú)毒賦形劑的藥物組合物。在本發(fā)明的藥物組合物中，可以更特別地提到適用于口服、非腸胃給藥(靜脈注射、肌肉內(nèi)注射或皮下注射)或鼻腔給藥的那些組合物、片劑或糖錠劑、適用于舌下給藥的片劑、明膠膠囊、錠劑、栓劑、可注射制劑、可飲用懸浮液等。
使用的劑量可以根據(jù)疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度、給藥方式和病人的年齡和體重以及任意相關(guān)的治療而進(jìn)行調(diào)整。每24小時(shí)的劑量在從0.5mg至2g的范圍內(nèi)變化，一次或分多次給藥。
下列實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明但是不以任何方式限制本發(fā)明。
所用的原料是已知的產(chǎn)物或者可以按照已知的方法制備。
實(shí)施例中所描述的化合物的結(jié)構(gòu)是按照常規(guī)的光譜技術(shù)(紅外、核磁共振、質(zhì)譜)進(jìn)行測(cè)定的。
應(yīng)當(dāng)明白，術(shù)語(yǔ)“構(gòu)型(2α)或(2β)的化合物”是指一種選自絕對(duì)構(gòu)型為(2R)和(2S)的化合物中的一種化合物，應(yīng)當(dāng)明白，當(dāng)化合物(2α)代表絕對(duì)構(gòu)型為(2R)的化合物時(shí)，則化合物(2β)代表化合物(2S)。實(shí)施例1N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽步驟AN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍把10mmol(2S)-2-氰基-吡咯烷、10mmol 1-羥基苯并三唑和10mmol二環(huán)己基碳化二亞胺加入10mmol N2-(叔丁氧基羰基)-N5-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]鳥(niǎo)氨酸的二甲基甲酰胺溶液中，在室溫下攪拌過(guò)夜，把生成的二環(huán)己基脲過(guò)濾出來(lái)，然后通過(guò)蒸發(fā)除去二甲基甲酰胺。通過(guò)硅膠色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/乙醇＝95/5)所得的殘留物，得到預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟BN-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽把4N鹽酸的二噁烷溶液加入10mmol前一步驟中得到的化合物的二噁烷溶液中，在室溫下攪拌24小時(shí)后，通過(guò)蒸發(fā)除去溶劑，加入水，冷凍干燥溶液，得到預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計(jì)算值 39.58 6.04 29.37 10.62測(cè)定值 40.35 6.00 29.00 10.90實(shí)施例2N-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍倍半鹽酸鹽步驟A1-[(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酰基]吡咯烷按照實(shí)施例1步驟A中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酸和吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟B1-[(S)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨?；鵠吡咯烷在10％鈀/炭存在下，在室溫和常壓下，把10mmol前一步驟中得到的化合物的乙醇溶液氫化6小時(shí)，然后過(guò)濾反應(yīng)混合物，蒸發(fā)，然后加入水后進(jìn)行冷凍干燥，得到預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N’-氰基胍按照Synthesis 1975，332中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物和NaN(CN)2為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟DN-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍倍半鹽酸鹽按照實(shí)施例1的步驟B中描述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計(jì)算值 43.03 7.06 27.37 17.32測(cè)定值 43.26 7.23 26.82 16.85實(shí)施例3N-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍步驟A3-{(S)-N5-(叔丁氧基羰基)-N2-[(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鳥(niǎo)氨酰基]-1，3-噻唑烷按照實(shí)施例1步驟A中所述的方法，以(S)-N5-(叔丁氧基羰基)-N2-(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鳥(niǎo)氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟B3-{(S)-N2-[(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鳥(niǎo)氨?；鶀-1，3-噻唑烷鹽酸鹽按照實(shí)施例1步驟B中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，得到預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟CN-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍按照Synthesis 1975，332中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物和NaN(CN)2為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計(jì)算值 44.43 6.71 31.08 11.86測(cè)定值 44.41 6.68 30.18 10.52實(shí)施例4N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N’-氰基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例2中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸代替(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酸作為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例5N1-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽步驟A1-[(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨?；鵠吡咯烷按照實(shí)施例1步驟A中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酸和吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟B1-[(2S)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酰基]吡咯烷在10％鈀/炭存在下，在室溫和常壓下，把10mmol前一步驟中得到的化合物的乙醇溶液氫化6小時(shí)，然后過(guò)濾反應(yīng)混合物，蒸發(fā)，然后加入水后進(jìn)行冷凍干燥，得到預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟CN1-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺按照Bioorg.Med.Chem.1997，7(23)，3045-3048中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物和N-甲基-1-甲硫基-2-硝基-乙二胺為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟DN1-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實(shí)施例1的步驟B中描述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％計(jì)算值40.23 7.03 19.55測(cè)定值40.17 6.98 18.92實(shí)施例6N-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N″-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽步驟A1-[(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨?；鵠吡咯烷按照實(shí)施例1步驟A中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酸和吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟B1-[(2S)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨?；鵠吡咯烷在10％鈀/炭存在下，在室溫和常壓下，把10mmol前一步驟中得到的化合物的乙醇溶液氫化6小時(shí)，然后過(guò)濾反應(yīng)混合物，蒸發(fā)，然后加入水后進(jìn)行冷凍干燥，得到預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N″-氰基-N’-甲基胍按照Chem.Pharm.Bull.1997，45(1)，53-61中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物、N-氰基亞氨基-S，S-二甲基二硫代碳酸酯和甲胺為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟DN-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N″-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1的步驟B中描述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。質(zhì)譜[M+H]+＝267；[M+C1]+＝301；[M-H]-＝265實(shí)施例7N-{(4S)-4-氨基-5-[(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1中描述的方法，以(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷代替(2S)-2-氰基吡咯烷，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％ S％ Cl％計(jì)算值 34.14 5.16 27.87 9.11 10.08測(cè)定值 34.32 5.11 27.70 9.23 10.44實(shí)施例8N-{(4S)-4-氨基-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽步驟AN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[2-氨基甲?；?1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1步驟A中所述的方法，以(±)-1，3-噻唑烷-2-甲酰胺(carboxamide)代替(2S)-2-氰基吡咯烷，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟BN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2α)-2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽通過(guò)硅膠色譜分離前一步驟A中得到的非對(duì)映異構(gòu)體的混合物(洗脫劑二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝90/10/0.5)。預(yù)期的產(chǎn)物是以此方式從非對(duì)映異構(gòu)體中分離出的第一個(gè)組份。
步驟CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍把20mmol咪唑加入10mmol前一步驟中得到的化合物的吡啶溶液中，然后把反應(yīng)混合物冷卻到-30℃，滴加40mmol POCl3，然后用1小時(shí)的時(shí)間把溫度調(diào)節(jié)到-20℃。通過(guò)蒸發(fā)除去吡啶，把殘留物溶于乙酸乙酯中。洗滌溶液，干燥，濃縮，殘留物通過(guò)硅膠色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝95/5/0.5)，得到預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟DN-{(4S)-4-氨基-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1的步驟B中描述的方法，以前一步驟C中得到的化合物為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計(jì)算值 34.145.1627.879.1110.08測(cè)定值 34.414.9327.679.359.71實(shí)施例9N-{(4S)-4-氨基-5-[(2β)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例8的步驟C和D中描述的方法，以實(shí)施例8的步驟B中分離出來(lái)的非對(duì)映異構(gòu)體的第二個(gè)組份為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。質(zhì)譜LC/ESI/HR和MS/MS[M+H]+＝316。實(shí)施例10N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例11N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計(jì)算值41.44 6.38 28.19 10.19測(cè)定值41.66 6.31 27.78 10.18實(shí)施例12N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。質(zhì)譜[M+H]+＝305，[M-H]-＝303實(shí)施例13N-{(5S)-5-氨基-6-[(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計(jì)算值 36.115.5126.808.769.69測(cè)定值 36.365.4926.688.8110.04實(shí)施例14N-{(5S)-5-氨基-6-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽步驟AN-{(5S)-5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-6-[2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1步驟A中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和(±)-1，3-噻唑烷-2-甲酰胺為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟BN-{(5S)-5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-6-[(2α)-2-氨基甲?；?1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽通過(guò)硅膠色譜分離前一步驟A中得到的非對(duì)映異構(gòu)體的混合物(洗脫劑二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝90/10/0.5)。預(yù)期的產(chǎn)物是以此方式從非對(duì)映異構(gòu)體中分離出的第一個(gè)組份。
步驟CN-{(5S)-5-氨基-6-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例8的步驟C和D中描述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％S％ Cl％計(jì)算值 36.11 5.5126.808.769.69測(cè)定值 36.52 5.4926.859.269.51實(shí)施例15N-{(5S)-5-氨基-6-[(2β)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例8的步驟C和D中描述的方法，以實(shí)施例14的步驟B中分離出來(lái)的非對(duì)映異構(gòu)體的第二個(gè)組份為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計(jì)算值 36.115.5126.808.769.69測(cè)定值 36.505.4926.009.669.66實(shí)施例16N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-氰基胍倍半鹽酸鹽按照實(shí)施例2中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％N％ Cl％計(jì)算值43.03 7.06 27.37 17.32測(cè)定值43.26 7.23 26.82 16.85實(shí)施例17N-[(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基]-N’-氰基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例2中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。質(zhì)譜[M+H]+＝292，[M-H]-＝290實(shí)施例18N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N’-氰基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例2中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例19N1-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實(shí)施例5中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％S％ Cl％計(jì)算值 35.11 6.1618.618.5218.84測(cè)定值 35.54 5.9918.048.6119.51實(shí)施例20N1-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實(shí)施例5中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％N％ Cl％計(jì)算值41.94 7.31 18.81 19.05測(cè)定值41.87 7.26 18.34 19.75實(shí)施例21N1-[(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基吡咯烷基]-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實(shí)施例5中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。質(zhì)譜ESI/FIA/HR和MS/MS[M+H]+＝325；[M+Na]+＝347。實(shí)施例22N1-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實(shí)施例5中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計(jì)算值 36.936.4617.948.2218.17測(cè)定值 37.086.4917.178.1118.63實(shí)施例23N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N”-氰基-N’-甲基胍二鹽酸鹽按照實(shí)施例6中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例24N-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例6中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥(niǎo)氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例25N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例6中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例26N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例6中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例27N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例6中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例28N-{4-[(2S)-2-氨基-3-((2S)-2-氰基-1-吡咯烷基)-3-氧代丙基]苯基}-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例6中所述的方法，以(S)-4-[(芐氧基羰基)氨基]-N2-(叔丁氧基羰基)苯丙氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。實(shí)施例29N-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍鹽酸鹽步驟A4-[(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯胺按照實(shí)施例1步驟A中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-(4-氨基苯基)-丙酸和吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟BN-{4-[(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍按照J(rèn).Am.Chem.Soc.1949，71，1968-1970中所述的方法，使前一步驟中得到的化合物與N-甲基-N’-2-二氧代肼甲酰亞氨基酰肼-2-氧化物反應(yīng)，得到預(yù)期的產(chǎn)物。
步驟CN-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例1步驟B中所述的方法，以前一步驟B中得到的化合物為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計(jì)算值47.13 5.93 23.55 9.94測(cè)定值48.06 5.77 23.60 10.00實(shí)施例30N-[(6S)-6-氨基-7-(1，3-噻唑烷-3-基)-7-氧代庚基]-N’-硝基胍二鹽酸鹽按照實(shí)施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-7-氨基庚酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計(jì)算值 34.736.2822.098.4315.84測(cè)定值 34.786.1921.248.5815.56實(shí)施例31N-[(6S)-6-氨基-7-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-7-氧代庚基]-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-7-氨基庚酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。元素微量分析C％H％ N％Cl％計(jì)算值 43.156.6927.109.80測(cè)定值 43.756.5926.939.94實(shí)施例32N-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]丙基]苯基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實(shí)施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-(4-氨基苯基)丙酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預(yù)期的產(chǎn)物。
本發(fā)明化合物的藥理學(xué)研究實(shí)施例33在體外對(duì)二肽基肽酶IV的抑制作用按照如下方式評(píng)價(jià)了化合物在體外對(duì)DPPIV酶活性的影響。使用一種產(chǎn)色素的底物—能水解釋放對(duì)硝基苯胺(在405nm處有吸收)的甘氨?；?脯氨?；?對(duì)硝基苯胺(glycyl-prolyl-p-nitroanilide)(1.4mM)，對(duì)來(lái)自豬腎臟的酶進(jìn)行分析。通過(guò)在不同濃度的待評(píng)價(jià)化合物的存在下(大多數(shù)為10-4-10-9M)的吸光值來(lái)測(cè)定酶的活性。根據(jù)得到的數(shù)據(jù)可以確定能抑制50％的對(duì)照活性時(shí)的有效劑量(IC50)，本發(fā)明化合物的IC50為1nM-10μM。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物、其可能存在的互變異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體及其與藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽 其中 代表一個(gè)任選地被氰基取代的5-元含氮雜環(huán)，Ak代表一個(gè)直鏈或支鏈的(C1-C6)亞烷基鏈，X代表一條單鍵或一個(gè)亞苯基，R1和R2可以相同或不同，各自代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，Y代表NR4或CH-NO2，R4代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，當(dāng)Y代表CH-NO2時(shí)，R3代表一個(gè)選自直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基、硝基和氰基的基團(tuán)；或當(dāng)Y代表NR4時(shí)，R3代表一個(gè)選自硝基和氰基的基團(tuán)，其中不包括這樣的化合物其中 代表一個(gè)未取代的5-元含氮雜環(huán)，同時(shí)Ak代表基團(tuán)-(CH2)3-，同時(shí)X代表一條單鍵，同時(shí)Y代表NH，并且R3代表硝基。應(yīng)當(dāng)明白，“5-元含氮雜環(huán)”是指含有一、二或三個(gè)雜原子，其中一個(gè)雜原子是氮原子、而其它存在的雜原子選自氧原子、氮原子和硫原子原子的5-元飽和單環(huán)基團(tuán)。
2.權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中 代表一個(gè)任選地被一個(gè)氰基取代的1-吡咯烷基或任選地被一個(gè)氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基。
3.權(quán)利要求1或2的式(I)化合物，其中酰胺官能團(tuán)的α-位構(gòu)型為(S)。
4.權(quán)利要求1-3的任意一項(xiàng)的式(I)化合物，其中Ak代表基團(tuán)(CH2)4。
5.權(quán)利要求1-3的任意一項(xiàng)的式(I)化合物，其中 代表一個(gè)被一個(gè)氰基取代的1-吡咯烷基或一個(gè)被一個(gè)氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基，并且Ak代表基團(tuán)(CH2)3。
6.權(quán)利要求1-5的任意一項(xiàng)的式(I)化合物，其中X代表一條單鍵。
7.權(quán)利要求1-6的任意一項(xiàng)的式(I)化合物，其中Y代表基團(tuán)NR4，其中R4代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基。
8.權(quán)利要求1-7的任意一項(xiàng)的式(I)化合物，其中R3代表硝基。
9.權(quán)利要求1的式(I)化合物，它是N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍、其旋光異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及其與一種藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽。
10.權(quán)利要求1的式(I)化合物，它是N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其旋光異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及其與一種藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽。
11.權(quán)利要求1的式(I)化合物，它是N-{(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其旋光異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及其與一種藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽。
12.合成權(quán)利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于使式(II)的化合物 其中Ak和X如式(I)所定義，P1代表一種氨基官能團(tuán)的保護(hù)基，并且P2代表一種不同于P1的氨基官能團(tuán)的保護(hù)基，與一種式(III)的化合物在常規(guī)的肽偶聯(lián)條件下反應(yīng) 其中 如式(I)所定義，脫保護(hù)后，得到一種式(IV)的化合物 其中 P1、Ak和X如前面所定義，然后通過(guò)常規(guī)的有機(jī)化學(xué)反應(yīng)，再經(jīng)過(guò)脫保護(hù)反應(yīng)，把它轉(zhuǎn)變?yōu)槭?I)的化合物，如果需要的話，按照常規(guī)的純化技術(shù)對(duì)該化合物進(jìn)行純化，如果需要的話，按照常規(guī)的分離技術(shù)把它分離為其旋光異構(gòu)體，并且，如果需要的話，用一種藥學(xué)上可接受的酸把它轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N加成鹽。
13.藥物組合物，其中包含權(quán)利要求1-11的任意一項(xiàng)的化合物作為活性組份以及一種或多種惰性的無(wú)毒的藥學(xué)上可接受的載體。
14.權(quán)利要求13的藥物組合物作為二肽基肽酶IV抑制劑在治療葡萄糖不耐受癥以及與高血糖癥有關(guān)的疾病例如II型糖尿病或肥胖中的用途。
15.權(quán)利要求14的藥物組合物作為抗糖尿病藥物的用途。
全文摘要
作為藥物的式(I)的化合物、其可能存在的互變異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體及其與藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽，其中:(a)代表一個(gè)任選取代的5－元含氮雜環(huán),Ak代表一個(gè)亞烷基鏈,X代表一條單鍵或一個(gè)亞苯基,R
文檔編號(hào)C07D277/04GK1385421SQ0211990
公開(kāi)日2002年12月18日 申請(qǐng)日期2002年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月15日
發(fā)明者G·德南圖爾, B·波特文, A·本諾斯特, N·里文斯, O·諾斯簡(jiǎn), B·哈森－羅伯特, M·鮑蘭格 申請(qǐng)人:瑟維爾實(shí)驗(yàn)室