專利名稱：氨基酸化合物及其作為nep、ace和ece抑制劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的N-巰基酰基氨基酸化合物、其制備方法以及含有該化合物的藥物組合物。
有許多專利申請描述了用作中性內(nèi)肽酶(NEP)抑制劑(EP449523)、內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶(ECE)抑制劑(WO97/32874)或NEP和血管緊張素I轉(zhuǎn)化酶(ACE)的混合抑制劑的氨基酸化合物。
這些酶的藥理學(xué)作用是-對于ACE，將血管緊張素I轉(zhuǎn)化成血管緊張素II并將緩激肽降解成無活性的肽，-對于NEP，將緩激肽和心鈉素轉(zhuǎn)化成無活性的肽，-對于ECE，將大內(nèi)皮素-1轉(zhuǎn)化成內(nèi)皮素-1。
血管緊張素II、內(nèi)皮素、緩激肽和心鈉素是迄今發(fā)現(xiàn)的與調(diào)節(jié)血管緊張性、心血管重塑和水電解質(zhì)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定有關(guān)的最重要的肽。它們的代謝基本是由這三種酶所控制。對這些酶中的一種和/或另一種的抑制可以通過使血管舒張、抗?fàn)I養(yǎng)和促尿鈉排泄的肽(緩激肽、心鈉素)超過血管收縮、營養(yǎng)和抗尿鈉排泄的肽(血管緊張素II、內(nèi)皮素1)而達(dá)到最佳的肽平衡，從而產(chǎn)生心血管的治療益處。
現(xiàn)有技術(shù)中描述的混合ACE/NEP抑制劑的藥理學(xué)特性忽略了內(nèi)皮素系統(tǒng)的重要的心血管作用(Haynes W.G.等，Journal of Hypertension，1998，16(8)，1081-1098頁)以及經(jīng)證實的NEP在內(nèi)皮素-1的降解中的作用(Vijayaraghavan J.等，J.Biol.Chem.，1990，265，14150-14155頁)。因此，用混合ACE/NEP抑制劑治療會引起內(nèi)皮素-1水平的增加，當(dāng)內(nèi)皮素-1的水平長時間增加時，會對預(yù)期的治療效果產(chǎn)生不利影響。該問題可以通過用同一分子達(dá)到三種類型的抑制作用、能夠反相調(diào)節(jié)該激活作用而解決，從而產(chǎn)生持續(xù)加強的治療效果。因此，開發(fā)能夠抑制這三種酶的分子構(gòu)成了治療高血壓和心血管疾病的非常重要的進展。
本發(fā)明的化合物是新的，并且是優(yōu)異的三重抑制劑，也就是說，它們可以同時抑制NEP、ACE和ECE。
更具體地講，本發(fā)明涉及式(I)的化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體及其與可藥用酸或堿的加成鹽 其中n表示整數(shù)，其中0≤n≤3，m表示整數(shù)，其中0≤m≤6，R3和R4與攜帶它們的兩個碳原子合在一起形成苯基，所述苯基是未取代的或被1至3個相同或不同的基團所取代，所述基團選自烷基、鏈烯基、鏈炔基、烷氧基、羥基、烷硫基、巰基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、多鹵代烷基、疊氮基、羧基、烷氧基羰基、酰氨基、氨基甲?；⒓柞；Ⅴ；⒎蓟?、雜芳基和鹵原子，B表示雜芳基，R2表示氫原子或烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、?；?、芳基、芳基烷基或芳?；?，R1表示氫原子、?；?、芳酰基或環(huán)烷基羰基或式(II)的基團
其中m、n、R2、R3、R4如上所定義，應(yīng)當(dāng)理解的是-“烷基”是指含有1至6個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，-“鏈烯基”是指含有2至6個碳原子和一個或多個雙鍵的烷基，-“鏈炔基”是指含有2至6個碳原子和一個或多個叁鍵的烷基，-“環(huán)烷基”是指含有3至8個碳原子的環(huán)狀烷基，-“酰基”是指RCO基團，其中R表示如上所定義的烷基，“烷基”、“鏈烯基”和“鏈炔基”可以被一個或多個相同或不同的選自羥基、烷氧基、多鹵代烷基、氨基和鹵原子的基團所取代，并且“環(huán)烷基”和“環(huán)烷基烷基”可以在環(huán)狀部分被一個或多個相同或不同的選自羥基、烷氧基、多鹵代烷基、氨基和鹵原子的基團所取代，-“芳基”是指未取代的或被一個或多個相同或不同的選自下列的基團取代的苯基或萘基烷基、鏈烯基、鏈炔基、烷氧基、羥基、烷硫基、巰基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、多鹵代烷基、疊氮基、羧基、烷氧基羰基、酰氨基、氨基甲酰基、甲?；Ⅴ；望u原子，-“雜芳基”是指含有1至3個選自氧、硫和氮的雜原子的任何單環(huán)或多環(huán)芳香族基團，這些基團可以是未取代的或被一個或多個相同或不同基團所取代，所述基團選自烷基、鏈烯基、鏈炔基、烷氧基、羥基、烷硫基、巰基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、多鹵代烷基、疊氮基、羧基、烷氧基羰基、酰氨基、氨基甲?；⒓柞；?、酰基和鹵原子，對于多環(huán)的基團，其中的一個環(huán)還可以是部分或完全氫化的。
可以提到的可藥用酸的非限定性的例子是鹽酸、氫溴酸、硫酸、膦酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、酒石酸、馬來酸、檸檬酸、抗壞血酸、甲磺酸、樟腦酸、草酸等。
可以提到的可藥用堿的非限定性的例子是氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁基胺等。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物是其中R1表示氫原子或酰基的式(I)化合物。
優(yōu)選的m和n的值是1。
優(yōu)選的R2基團是氫原子以及烷基和芳基烷基。
優(yōu)選本發(fā)明涉及其中R3和R4與攜帶它們的兩個碳原子合在一起形成取代的苯基的式(I)化合物。
更優(yōu)選本發(fā)明涉及其中R3和R4與攜帶它們的兩個碳原子合在一起形成被鹵原子、更優(yōu)選被溴原子或被烷氧基或烷硫基、更優(yōu)選被甲氧基或甲硫基取代的苯基的式(I)化合物。
仍更優(yōu)選本發(fā)明涉及在2位被二氫化茚基團取代、而所述二氫化茚基團又在5位被鹵原子、更優(yōu)選被溴原子或被烷氧基、更優(yōu)選被甲氧基取代的式(I)化合物。
優(yōu)選的B基團是含有NH基團的雜芳基，例如吲哚基、咪唑基、吡咯并吡啶基、吡咯并喹啉基、吡咯基和吡咯并吡嗪基，更優(yōu)選吲哚基、1H-吡咯并[2，3-b]吡啶和1H-吡咯并[3，2-h]喹啉基。
式(I)化合物的優(yōu)選構(gòu)型是2S-3R，更優(yōu)選2S-3R-4S。
更優(yōu)選地，本發(fā)明涉及*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸(2S-3R-4S)，*N-[2-(5-氯-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸，*N-[(2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]色氨酸，*N-[3-巰基-2-(1，2，3，4-四氫-1-萘基)丙?；鵠色氨酸，*N-[2-(5-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸，*N-[2-(4-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸，*N-[2-(5-乙氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸，*N-[2-(5-羥基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸，*N-{2-[5-(甲硫基)-2，3-二氫-1H-茚-1-基]-3-巰基丙?；鶀色氨酸，*N-[2-(5-氰基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)丙氨酸，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)丙氨酸(2S-3R-4S)，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-1-甲基-色氨酸，*3-(1-苯并噻吩-3-基)-N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基-丙?；鵠丙氨酸，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(3-吡啶基)-丙氨酸，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(2-喹啉基)-丙氨酸，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-5-甲氧基-色氨酸(2S-3R-4S)，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-5-氟色氨酸(2S-3R-4S)，*N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]-3-(1H-吡咯并[3，2-h]喹啉-3-基)丙氨酸(2S-3R-4S)。
本發(fā)明還涉及式(I)化合物的制備方法，其特征在于使用式(III)的化合物作為原料 其中R3、R4和n如式(I)中所定義，將其用還原劑例如NaBH4處理得到式(IV)化合物 其中n、R3和R4如上所定義，將式(IV)化合物用鹵化試劑例如Me3SiBr轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的式(V)的鹵代化合物
其中R3、R4和n如上所定義，將式(V)化合物在堿性介質(zhì)中與2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯縮合得到式(VI)化合物 其中R3、R4和n如上所定義，將式(VI)化合物在堿性介質(zhì)中與甲醛反應(yīng)得到式(VII)化合物 其中R3、R4和n如上所定義，將式(VII)化合物在氫氧化鈉的存在下水解得到式(VIII)化合物 其中R3、R4和n如上所定義，將式(VIII)化合物與式(IX)化合物縮合 其中R′1表示烷基、芳基或環(huán)烷基，得到式(X)化合物 其中R3、R4、R′1和n如上所定義，將式(X)化合物在偶聯(lián)劑例如1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺的存在下與式(XI)化合物縮合 其中B和m如式(I)中所定義，和R′2表示烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、?；?、芳基烷基或芳?；玫绞?I/a)化合物，式(I)化合物的一種具體情況 其中R′1、R3、R4、R′2、m、n和B如上所定義，可將式(I/a)化合物在堿性介質(zhì)中部分或完全水解得到式(I/b)化合物，式(I)化合物的一種具體情況
其中R3、R4、m、n和B如上所定義，R″1表示基團R′1或氫原子，R″2表示基團R′2或氫原子，條件是基團R″1和R″2中至少有一個表示氫原子，當(dāng)R″1表示氫原子時，可將式(I/b)化合物置于氧化介質(zhì)中得到式(I/c)化合物，式(I)化合物的一種具體情況 其中R2、R3、R4、m、n和B如上所定義，R1表示式(II)的基團，式(I/a)至(I/c)的化合物構(gòu)成了本發(fā)明化合物的全部，這些化合物可以按照常規(guī)的分離技術(shù)純化，如需要，可以轉(zhuǎn)化成與可藥用酸或堿的加成鹽，并且可以在需要時將其按照常規(guī)的分離技術(shù)分離成它們的異構(gòu)體。
本發(fā)明還涉及式(I)化合物的制備方法，其特征在于使用以上所定義的式(X)化合物作為原料，將其非對映異構(gòu)體通過色譜法分離得到式(Xa)和(Xb)的化合物 其中R′1、R3、R4和n如上所定義，其中，式(Xb)化合物可與手性的胺例如(R)-(+)-α-甲基芐基胺形成鹽，在經(jīng)過連續(xù)的重結(jié)晶操作進行拆分后得到式(Xb′)的化合物 其中R′1、R3、R4和n如上所定義，將式(Xb′)化合物在偶聯(lián)劑例如EDCI的存在下與式(XIa)的化合物偶聯(lián) 其中R′2、m和B如上所定義，得到式(I/a′)的化合物，式(I/a)化合物的一種具體情況 其中R′1、R′2、R3、R4、m、n和B如上所定義，非對映異構(gòu)體(2R，3S)、(2R，3R)和(2S，3R)通過類似的方法用相應(yīng)的式(Xa)和(Xb)的化合物作為原料制得，還可以通過將式(XIa)化合物與式(Xa)或(Xb)的化合物縮合然后通過色譜法分離得到這些化合物。
式(III)的化合物可以購買到或者很容易由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過常規(guī)的化學(xué)反應(yīng)得到。
本發(fā)明的化合物具有非常有價值的藥理學(xué)特性，因為它們可以同時抑制-血管緊張素I轉(zhuǎn)化酶(ACE)，其負(fù)責(zé)將血管緊張素I轉(zhuǎn)化成血管緊張素II并將緩激肽降解成無活性的肽，-中性內(nèi)肽酶(NEP)，其負(fù)責(zé)將緩激肽和心鈉素降解成無活性的肽，-內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶(ECE)，其負(fù)責(zé)將大內(nèi)皮素-1轉(zhuǎn)化成內(nèi)皮素-1。
這些酶在建立血管舒張、抗?fàn)I養(yǎng)和促尿鈉排泄的肽(緩激肽、心鈉素)以及血管收縮、營養(yǎng)和抗尿鈉排泄的肽(血管緊張素II、內(nèi)皮素1)之間的平衡中起重要作用。
此外，最近證實中性內(nèi)肽酶與內(nèi)皮素-1的降解機制有關(guān)。對這些酶中的一種和/或另一種的抑制可以調(diào)節(jié)肽的平衡。
在文獻中記載了大量可以增加血管舒張肽相對于血管收縮肽的比例的混合ACE/NEP抑制劑。但是，該方案忽略了內(nèi)皮素系統(tǒng)所起的作用，而這是更加有害的，因為這些混合的抑制劑可以通過抑制NEP增加內(nèi)皮素-1的水平，這會減弱預(yù)期的治療效果。
三重抑制避免了內(nèi)皮素-1的蓄積，從而導(dǎo)致了治療效力的持續(xù)加強以及化合物活性譜的增寬。
這些特性意味著可將其用于治療高動脈壓，包括肺動脈高血壓、心肌缺血、心絞痛、心功能不足、血管病，包括糖尿病性血管病、動脈粥樣硬化和血管成形術(shù)后的再狹窄、急性或慢性腎功能不足、腦血管疾病，包括中風(fēng)和蛛網(wǎng)膜下出血、外周局部缺血以及對環(huán)孢菌素中毒。
本發(fā)明還涉及單獨含有至少一種式(I)化合物或含有該化合物和一種或多種可藥用賦形劑的藥物組合物。
在本發(fā)明的藥物組合物中，可以具體提到的是適于口服、胃腸外、經(jīng)鼻、經(jīng)皮、直腸、經(jīng)舌、眼部或呼吸給藥的組合物，例如片劑或糖衣丸、舌下含片、小藥囊、paquets、明膠膠囊、glossettes、錠劑、栓劑、霜劑、軟膏、皮膚用凝膠和可飲用或可注射的安瓿。
劑量根據(jù)患者的性別、年齡和體重、給藥途徑、治療適應(yīng)癥的性質(zhì)以及任何所伴隨的治療而改變，其范圍從每24小時0.1mg至1g，分一次或多次給藥。
以下實施例舉例說明了本發(fā)明，但并不以任何方式限定其范圍。以下制備例制得了本發(fā)明的化合物或用于本發(fā)明制備方法的合成中間體。制備例15-溴-1-二氫茚酮步驟A1-(4-溴苯基)-3-氯-1-丙酮將45.3g氯化鋁于室溫下在80ml CH2Cl2中攪拌。劇烈攪拌下，緩慢倒入β-丙酰氯(38.09g，28.7ml，0.3mol)的20ml CH2Cl2溶液。迅速形成CH2Cl2-AlCl3-酰氯復(fù)合物，溶液變?yōu)樯罴t色。然后滴加溴苯(47.1g，31.6ml，0.3mol)的20ml CH2Cl2溶液。將溶液室溫攪拌15小時。將混合物用加入了7.6ml濃乙酸的190g冰水解。將有機相洗滌至中性然后減壓蒸除溶劑。得到深紅色的油，通過用熱的石油醚萃取得到黃色固體狀的標(biāo)題化合物。熔點60-61℃步驟B5-溴-1-二氫茚酮將448g AlCl3(335.98mmol)和112g NaCl的混合物在反應(yīng)器中加熱至180℃。將該混合物攪拌的同時用刮鏟向其中緩慢加入步驟A所得到的化合物(44.77g，180.9mmol)。將溫度保持在180-220℃。反應(yīng)持續(xù)30分鐘。用4.5kg冰在135ml乙酸的存在下水解得到深棕色的沉淀，濾出沉淀，用水洗滌然后真空干燥。用甲醇重結(jié)晶得到標(biāo)題化合物。熔點126-127℃制備例21-氧代-5-二氫化茚甲腈將5g制備例1得到的化合物(23mmol)和2.65g CuCN在6ml DMF中的混合物在氬氣氛下回流。于120℃攪拌15小時后，將混合物加入到11.2gFeCl3在35ml水和6ml濃鹽酸中的溶液中。將混合物在60-71℃保持15分鐘。將混合物用3×20ml 10％的NaHCO3萃取，用Na2SO4干燥然后真空濃縮得到淺黃色固體狀的標(biāo)題化合物。熔點129-130℃制備例35-(甲硫基)-1-二氫茚酮將1.27g CH3SNa(18.13mmol；1.2當(dāng)量)于0℃下加入30ml DMF中。加入制備例1得到的化合物(3.19g；15.11mmol)并將混合物室溫攪拌3小時。然后將反應(yīng)混合物倒入150ml水中并用AcOEt萃取。將有機相用硫酸鈉干燥然后真空濃縮得到棕色結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物。熔點99-102℃制備例45-羥基-1-二氫茚酮將5g 5-甲氧基-1-二氫茚酮(30.9mmol)在氬氣氛下加入到10.31g氯化鋁的150ml無水甲苯懸浮液中。將該懸浮液劇烈攪拌并加熱至回流。反應(yīng)30分鐘后，使混合物恢復(fù)到室溫，加入30g冰。分出有機相。將水相用2×30ml乙酸乙酯洗滌。將有機相合并，用4×50ml水洗滌，用Na2SO4干燥然后真空濃縮得到淺棕色固體狀的標(biāo)題化合物。熔點183℃制備例55-乙氧基-1-二氫茚酮將3g制備例4得到的化合物(20.2mmol)、5ml碘乙烷和8.4g碳酸鉀在200ml丙酮中攪拌回流。反應(yīng)3小時后，將懸浮液過濾并將沉淀用丙酮洗滌。減壓蒸除丙酮。將固體殘余物加入25ml氯仿中，用2×10ml水洗滌，預(yù)先用飽和氯化鈉溶液干燥，用Na2SO4過濾然后真空濃縮。得到淺橙色固體狀的標(biāo)題化合物。熔點82-83℃制備例65-氯-1-二氫茚酮按照制備例1的方法從氯苯開始制備。制備例75-(二甲基氨基)-1-二氫茚酮步驟AN-(2，3-二氫-1H-茚-5-基)乙酰胺將70ml乙酸酐和15g乙酸鈉的混合物在攪拌下滴加到50g 5-氨基二氫化茚中。放熱反應(yīng)結(jié)束時，將溶液于100℃加熱1小時。然后將溶液倒入500g冰中；觀察到有沉淀形成，過濾收集沉淀然后加入400ml乙酸乙酯中。將該溶液用2×250ml水、2×200ml 20％的碳酸氫鈉溶液洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。得到黃色固體狀的標(biāo)題化合物。熔點105-106℃步驟BN-(1-氧代-2，3-二氫-1H-茚-5-基)乙酰胺將50g三氧化鉻在35ml水和150ml乙酸的混合物中的溶液在攪拌下滴加到62g步驟A得到的化合物在175ml乙酸和50ml乙酸酐的混合物中的溶液中并使反應(yīng)混合物的溫度保持在10℃以下。室溫下攪拌過夜后，將溶液倒入1升冰冷的水中。觀察到有沉淀形成，過濾收集沉淀。將沉淀用水洗滌至中性然后用干燥器干燥得到黃色固體狀的標(biāo)題化合物。熔點172℃步驟C5-氨基-1-二氫茚酮將47g步驟B得到的化合物溶于700ml 1.5N的鹽酸并加熱至回流。反應(yīng)1小時后，原料完全溶解，使溶液恢復(fù)至室溫。將反應(yīng)混合物倒入800ml2M氫氧化鈉溶液中。濾出沉淀并用水洗滌至中性得到黃色固體狀的標(biāo)題化合物。熔點184℃步驟D5-(二甲基氨基)-1-二氫茚酮將5g步驟C得到的化合物(20.2mmol)、8.1ml碘甲烷和7.2g碳酸鈉在30ml丙酮中在攪拌下加熱至回流。攪拌過夜后，真空溶劑，將得到的固體加入100ml乙酸乙酯和50ml水的混合物中。分出有機相，用4×50ml水洗滌，然后用50ml飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。得到淺橙色結(jié)晶狀的產(chǎn)物，將其通過色譜法在中性氧化鋁上純化。熔點116℃實施例12-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯步驟A5-溴-1-二氫茚醇將制備例1得到的化合物(72.99mmol)懸浮在380ml MeOH中并在室溫下分批加入硼氫化鈉(145.97mmol，5.54g)。當(dāng)開始劇烈的放熱反應(yīng)時，立即用冰浴控制溫度(T＜40℃)。將反應(yīng)混合物室溫攪拌4小時，加入60ml水然后進行減壓濃縮。向殘余的油中加入100ml水，將其用1×200ml AcOEt萃取。分出有機相，用飽和NaCl洗滌，用硫酸鈉干燥然后減壓濃縮得到油狀的標(biāo)題化合物，該油可以形成結(jié)晶。熔點79-80℃步驟B1，5-二溴二氫化茚將步驟A得到的化合物(70.19mmol)溶于420ml CHCl3，然后于室溫下加入三甲基溴硅烷(13.90ml，105.28mmol，1.5當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜。減壓蒸除溶劑和過量的三甲基溴硅烷。將得到的油加入150ml CHCl3中，用2×80ml水和3×100ml飽和NaCl洗滌然后用硫酸鈉干燥。然后將有機相減壓濃縮得到棕色油狀的標(biāo)題化合物。
步驟C2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-2-(二乙氧基磷?；?乙酸乙酯將膦酰基乙酸三乙酯(15.47g，13.63ml，69.06mmo l)于0℃及氬氣氛下溶于345ml脫氣的DMF，然后每次少量地加入60％NaH(3.04g，75.97mmol，1.1當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物室溫攪拌30分鐘然后一次性加入步驟B得到的化合物(69.06mmol)。將混合物室溫攪拌過夜。減壓蒸除溶劑并將殘余物加入150ml水中，然后用2×200ml AcOEt萃取。將有機相用水(2×100ml)、飽和NaCl(2×150ml)洗滌，用硫酸鈉干燥然后減壓濃縮得到油狀的標(biāo)題化合物。
步驟D2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙烯酸乙酯將步驟C得到的化合物(76.18mmol)、低聚甲醛(4.60g，152.36mmol，2當(dāng)量)和K2CO3(20.98g，2當(dāng)量)在350ml THF中回流15小時。將混合物濃縮至四分之三，加入100ml水并將混合物用乙醚萃取。將有機相用水、飽和NaCl洗滌，用Na2SO4干燥然后減壓濃縮得到油狀的標(biāo)題化合物。
步驟E2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙烯酸將步驟D得到的化合物(76.18mmol)和57.1ml 2N氫氧化鈉(114.27mmol，1.5當(dāng)量)在240ml丙酮中于室溫下攪拌24小時。蒸除溶劑并將殘余物加入水中。將水相用乙醚萃取然后用3N HCl調(diào)至酸性，然后用乙醚萃取。將有機相用水、飽和NaCl洗滌，用硫酸鈉干燥然后減壓濃縮得到標(biāo)題的酸。
步驟F3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酸將步驟E得到的乙烯化合物(48.83mmol)溶于100ml CHCl3并加入硫代乙酸(170.89mmol，3.5當(dāng)量)。將混合物回流攪拌16小時。減壓蒸除溶劑和過量的硫代乙酸得到四種立體異構(gòu)體形式的標(biāo)題化合物，可將其分成兩個對映體對-通過HPLC色譜HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)60-40Rt(2S-3S/2R-3R)＝11.44分鐘Rt(2S-3R/2R-3S)＝12.05分鐘ESI質(zhì)譜343-345(MH+)-通過手性的胺拆分將8.36g(24.37mmol)所得到的混合物溶于50ml Et2O，然后加入R(+)-(α)-甲基芐基胺(1.05當(dāng)量，25.59mmol，3.30ml)。將混合物于4℃的冷藏室內(nèi)放置7天。將沉淀懸浮在乙醚中并加入2N HCl直至pH1。將有機相用水洗滌然后用Na2SO4干燥得到(2S-3R)異構(gòu)體。
步驟G2-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯可應(yīng)用于四種非對映異構(gòu)體的混合物或?qū)τ丑w對的一般方法將步驟F得到的化合物(混合物或?qū)τ丑w對)(100mg)溶于2mlTHF-CHCl3(1-1)混合物。向該溶液中加入1.5當(dāng)量EDCI、1.5當(dāng)量HOBT、1.5當(dāng)量Et3N和1.5當(dāng)量(L)色氨酸甲酯鹽酸鹽。將形成的混合物室溫攪拌4小時。減壓蒸除溶劑。將殘余物加入15ml乙酸乙酯中，將有機相用3×10ml10％碳酸氫鈉溶液、3×10ml 10％檸檬酸溶液和3×10ml飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。
實施例1a)2S-3S-4S}油，通過HPLC色譜分離實施例1b)2R-3R-4S實施例1c)2S-3R-4S}油，通過HPLC色譜分離實施例1d)2R-3S-4S實施例22-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-氰基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例1的方法從制備例2制得的化合物開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例32-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-甲硫基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯步驟A5-甲硫基-1-二氫茚醇按照實施例1，步驟A的方法從制備例3制得的化合物開始制備。
步驟B2-(5-甲硫基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯攪拌及氬氣氛下，將22mmol三甲基溴硅烷于-78℃下加入到20mmol步驟A的化合物的50ml無水THF溶液中。使混合物的溫度升至-20℃。將該溶液加入到通過將氫化鈉(20mmol)與膦?；宜崛阴?22mmol)反應(yīng)生成的膦酰基乙酸三乙酯陰離子的溶液中。室溫下過夜后，蒸除溶劑并將殘余物通過硅膠色譜純化。得到油狀的標(biāo)題化合物。
步驟C2-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-甲硫基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯采用實施例1的步驟D、E、F和G的方法。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例42-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例3的方法從5-甲氧基-1-二氫茚酮開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例52-{[3-(乙酰硫基)-2-(4-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例1的方法從4-甲氧基-1-二氫茚酮開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例62-{[3-(乙酰硫基)-2-(6-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例3的方法從6-甲氧基-1-二氫茚酮開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例72-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-羥基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯步驟A3-(乙酰硫基)-2-(5-羥基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酸將實施例1的步驟F得到的化合物(4種非對映異構(gòu)體的混合物)(0.4g，1.4mmol)溶于3ml CH2Cl2并將形成的溶液冷卻至0℃。向混合物中加入1.3ml 1M三溴化硼的CH2Cl2溶液。室溫攪拌15分鐘后，將混合物保持在40℃下30分鐘。然后將溶液用6ml水水解，然后用2ml 1N的HCl調(diào)至酸性。將溶液用2×15ml乙醚萃取。將有機相合并，用20ml水洗滌兩次然后用15ml飽和氯化鈉溶液預(yù)干燥，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮得到油，將其通過半制備HPLC純化。
步驟B2-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-羥基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯采用實施例1步驟G的方法。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例82-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-乙氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例3的方法從制備例5制得的化合物開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例92-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-氯-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例1的方法從制備例6制得的化合物開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例102-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-二甲基氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例3的方法從制備例7制得的化合物開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例112-{[3-(乙酰硫基)-2-(2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例1的方法從二氫茚酮開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例122-{[3-(乙酰硫基)-2-(1，2，3，4-四氫-1-萘基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例1的方法從3，4-二氫-1(2H)-萘酮開始制備。最后一步在四種異構(gòu)體的混合物上進行。油。實施例13N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]色氨酸將實施例1制得的化合物溶于2ml脫氣的甲醇。室溫攪拌10分鐘后，向溶液中加入6當(dāng)量脫氣的1M氫氧化鈉溶液。將形成的溶液在氬氣氛下室溫攪拌。通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)的進程。當(dāng)反應(yīng)結(jié)束時，用1N鹽酸將溶液酸化至pH＝1。真空蒸除甲醇，向殘余物中加入10ml水并用10ml氯仿萃取。將有機相用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。
實施例13a)2S-3S-4S[α]15D＝+8.80熔點(分解)＝163-165℃實施例13b)2R-3R-4S[α]15D＝-27.20熔點(分解)＝135-136℃
實施例13c)2S-3R-4S[α]15D＝+20.80熔點(分解)＝126-128℃實施例13d)2R-3S-4S[α]15D＝-66.80熔點(分解)＝130-132℃實施例14至24按照實施例13的方法用適宜的化合物作為原料制得。實施例14N-[2-(5-氰基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]色氨酸原料實施例2固體。ESI質(zhì)譜434(MH+)實施例15N-[2-(5-甲硫基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸原料實施例3固體。ESI質(zhì)譜455(MH+)實施例16N-[2-(5-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]色氨酸原料實施例4固體。ESI質(zhì)譜439(MH+)實施例17N-[2-(4-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸原料實施例5固體。ESI質(zhì)譜439(MH+)實施例18N-[2-(6-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸原料實施例6固體。ESI質(zhì)譜439(MH+)實施例19N-[2-(5-羥基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸原料實施例7固體。ESI質(zhì)譜425(MH+)實施例20N-[2-(5-乙氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸原料實施例8固體。ESI質(zhì)譜453(MH+)實施例21N-[2-(5-氯-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸原料實施例9固體。ESI質(zhì)譜443-445(MH+)實施例22N-[2-(5-二甲基氨基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸原料實施例10固體。ESI質(zhì)譜452(MH+).實施例23N-[2-(2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]色氨酸原料實施例11固體。ESI質(zhì)譜409(MH+)實施例24N-[2-(1，2，3，4-四氫-1-萘基)-3-巰基丙酰基]色氨酸原料實施例12固體。ESI質(zhì)譜423(MH+)實施例252-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯將實施例1的步驟F制得的化合物(4種非對映異構(gòu)體的混合物)(100mg)溶于2ml THF-CHCl3(1-1)的混合物。向該溶液中加入1.5當(dāng)量EDCI、1.5當(dāng)量HOBT、1.5當(dāng)量Et3N和1.5當(dāng)量(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將形成的混合物室溫攪拌4小時。減壓蒸除溶劑。將殘余物加入15ml乙酸乙酯中，將有機相用3×10ml 10％碳酸氫鈉溶液、3×10ml 10％檸檬酸溶液和3×10ml飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。通過HPLC色譜得到標(biāo)題化合物。油。實施例262-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用(S)-2-氨基-3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。油。實施例272-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2R-3S)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)40-60。
實施例27a)2R-3S-4SRt＝9.71分鐘-油實施例27b)2R-3S-4RRt＝12.47分鐘-油實施例282-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1-苯并噻吩-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用(S)-2-氨基-3-(1-苯并噻吩-3-基)丙酸甲酯代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。油。實施例292-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-咪唑-4-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用(S)-2-氨基-3-(1H-咪唑-4-基)丙酸甲酯代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。實施例302-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(3-吡啶基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用(S)-2-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸甲酯代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。實施例31N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(2-喹啉基)丙氨酸將實施例25制得的化合物溶于2ml脫氣甲醇。室溫攪拌10分鐘后，向溶液中加入6當(dāng)量脫氣的1M氫氧化鈉溶液。將形成的溶液在氬氣氛下室溫攪拌。通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)的進程。當(dāng)反應(yīng)結(jié)束時，用1N鹽酸將溶液酸化至pH＝1。真空蒸除甲醇，向殘余物中加入10ml水并用10ml氯仿萃取。分出有機相，用硫酸鈉干燥，真空濃縮然后通過HPLC色譜純化。固體。ESI質(zhì)譜＝499-501(MH+)實施例32至36通過實施例31的方法用適宜的底物作為原料制得。實施例32N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-1-甲基色氨酸原料實施例26固體。ESI質(zhì)譜501-503(MH+)實施例33N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)丙氨酸原料實施例27a)或?qū)嵤├?7b)固體。ESI質(zhì)譜488-490(MH+)實施例33a)2S-3R-4SRt＝4.99分鐘實施例33b)2S-3R-4RRt＝5.49分鐘實施例343-(1-苯并噻吩-3-基)-N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠丙氨酸原料實施例28固體。ESI質(zhì)譜500-502(MH+)實施例35N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠組氨酸原料實施例29固體。ESI質(zhì)譜43g-440(MH+)實施例36N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(3-吡啶基)丙氨酸原料實施例30固體。ESI質(zhì)譜448-450(MH+)實施例372-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)丙酸甲酯將實施例1的步驟F制得的化合物(300mg)溶于8ml THF-CHCl3(1-1)的混合物。向該溶液中加入l.5當(dāng)量EDCI、l.5當(dāng)量HOBT、1.5當(dāng)量Et3N和1.5當(dāng)量(S)-2-氨基-3-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)丙酸甲酯。將形成的混合物室溫攪拌4小時。減壓蒸除溶劑。將殘余物加入15ml乙酸乙酯中，將有機相用3×20ml 10％碳酸氫鈉溶液、3×20ml 10％檸檬酸溶液和3×20ml飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮然后通過HPLC色譜純化。油。實施例38N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]-1-三苯甲基組氨酸將實施例37制得的化合物溶于5ml脫氣甲醇。室溫攪拌10分鐘后，向溶液中加入4當(dāng)量脫氣的1M氫氧化鈉溶液。將形成的溶液在氬氣氛下室溫攪拌5小時。通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)的進程。當(dāng)反應(yīng)結(jié)束時，用1N鹽酸將溶液酸化至pH＝1。真空蒸除甲醇，向殘余物中加入10ml水并用10ml氯仿萃取。分出有機相，用硫酸鈉干燥，真空濃縮然后通過HPLC色譜純化。固體。注實施例35的化合物可用實施例38的化合物作為原料按照如下方法制得將實施例38制得的化合物溶于10ml 95/2.5/2.5 TFA/H2O/乙二硫醇的混合物。在氬氣氛下室溫攪拌30分鐘后，真空蒸除溶劑。將產(chǎn)物通過HPLC純化。實施例392-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(7-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(7-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例39a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝11.72分鐘-油實施例39b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝12.28分鐘-油實施例402-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(5-羥基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(5-羥基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)60-40。
實施例40a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝9.20分鐘-油實施例40b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝9.29分鐘-油實施例412-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例41a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝9.54分鐘-油實施例41b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝10.11分鐘-油實施例422-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(5-溴-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(5-溴-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例42a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝16.36分鐘-油實施例42b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝16.83分鐘-油實施例432-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例43a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝14.10分鐘-油實施例43b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝14.53分鐘-油實施例442-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例44a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝14.00分鐘-油實施例44b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝14.54分鐘-油實施例452-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(6-氟-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(6-氟-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)60-40。
實施例45a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝11.09分鐘-油實施例45b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝11.90分鐘-油實施例462-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙酰基]氨基}-3-(5-氟-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(5-氟-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例46a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝11.13分鐘-油實施例46b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝11.77分鐘-油實施例472-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吲唑-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(1H-吲唑-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。Rt混合物(HPLCKromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30)＝7.87分鐘油實施例482-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)50-50。
實施例48a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝4.70分鐘-油實施例48b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝5.62分鐘-油實施例492-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(9-吖啶基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用3-(9-吖啶基)-2-氨基丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)50-50。
實施例49a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝6.48分鐘-油實施例49b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝7.00分鐘-油實施例502-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(1H-吡咯并[3，2-h]喹啉-3-基)丙酸甲酯按照實施例25的方法，用實施例1的步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體作為原料并用2-氨基-3-(1H-吡咯并[3.2-h]喹啉-3-基)丙酸甲酯(外消旋混合物)代替(S)-2-氨基-3-(2-喹啉基)丙酸甲酯。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例50a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝3.30分鐘-油實施例50b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝3.87分鐘-油實施例512-{[3-(乙酰硫基)-2-(5-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(5-羥基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例1的方法，用5-甲氧基-1-二氫茚酮作為原料并在步驟G中將5-羥基色氨酸甲酯鹽酸鹽與步驟F制得的化合物的純化的(2S-3R)非對映異構(gòu)體縮合。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLCKromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)60-40。
實施例51a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝5.80分鐘-油實施例51b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝6.10分鐘-油實施例52N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]-7-甲氧基色氨酸按照實施例13的方法，用實施例39制得的化合物(混合物)作為原料。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例52a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝6.57分鐘-固體實施例52b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝6.16分鐘-固體ESI質(zhì)譜517-519(MH+)實施例53N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-5-羥基色氨酸按照實施例13的方法，用實施例40a)制得的化合物作為原料實施例53a)(2S-3R-4S)Rt＝3.91分鐘(HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30)固體-ESI質(zhì)譜503-505(MH+)實施例54N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-5-甲氧基色氨酸按照實施例13的方法，用實施例41制得的化合物(混合物)作為原料。將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例54a)(2S-3R-4S)Rt＝5.55分鐘-固體-ESI質(zhì)譜517-519(MH+)實施例54b)(2S-3R-4R)Rt＝5.77分鐘-固體-ESI質(zhì)譜517-519(MH+)實施例555-溴-N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸按照實施例13的方法，用實施例42制得的化合物(混合物)作為原料，將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例55a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝7.94分鐘-固體-ESI質(zhì)譜565-567-569(MH+)實施例55b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝8.63分鐘-固體-ESI質(zhì)譜565-567-569(MH+)實施例56N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-5-甲基色氨酸按照實施例13的方法，用實施例43制得的化合物(混合物)作為原料，將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例56a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝6.94分鐘-固體-ESI質(zhì)譜501-503(MH+)實施例56b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝7.42分鐘-固體-ESI質(zhì)譜501-503(MH+)實施例57N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]-6-甲基色氨酸按照實施例13的方法，用實施例44制得的化合物(混合物)作為原料，將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例57a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝7.13分鐘-固體-ESI質(zhì)譜501-503(MH+)實施例57b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝7.67分鐘-固體-ESI質(zhì)譜501-503(MH+)實施例58N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-6-氟色氨酸按照實施例13的方法，用實施例45制得的化合物(混合物)作為原料，將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例58a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝6.10分鐘-固體-ESI質(zhì)譜505-507(MH+)實施例58b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝6.40分鐘-固體-ESI質(zhì)譜505-507(MH+)實施例59N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]-5-氟色氨酸按照實施例13的方法，用實施例46制得的化合物(混合物)作為原料，將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)70-30。
實施例59a)(2S-3R-4S)Rt＝6.09分鐘-固體-ESI質(zhì)譜505-507(MH+)實施例59b)(2S-3R-4R)Rt＝5.99分鐘-固體-ESI質(zhì)譜505-507(MH+)實施例60N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(1H-吲唑-3-基)丙氨酸按照實施例13的方法，用實施例47制得的化合物(混合物)作為原料，將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)60-40。
實施例60a)(2S-3R-4S)Rt＝7.22分鐘-固體-ESI質(zhì)譜488-490(MH+)實施例60b)(2S-3R-4R)Rt＝7.75分鐘-固體-ESI質(zhì)譜488-490(MH+)實施例61N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)丙氨酸按照實施例13的方法，用實施例48制得的化合物(混合物)作為原料，將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)50-50。
實施例61a)(第一種非對映異構(gòu)體)Rt＝3.35分鐘-固體-ESI質(zhì)譜488-490(MH+)實施例61b)(第二種非對映異構(gòu)體)Rt＝3.62分鐘-固體-ESI質(zhì)譜488-490(MH+)實施例623-(9-吖啶基)-N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠丙氨酸按照實施例13的方法，用實施例49制備的化合物(混合物)作為原料。Rt混合物(HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)50-50)＝4.02分鐘固體-ESI質(zhì)譜546-548(MH+)實施例63N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]-3-(1H-吡咯并[3，2-h]喹啉-3-基)丙氨酸按照實施例13的方法，用實施例50制得的化合物(混合物)作為原料，將得到的兩種非對映異構(gòu)體通過HPLC色譜分離HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)60-40。
實施例63a)(2S-3R-4S)Rt＝3.50分鐘-固體-ESI質(zhì)譜538-540(MH+)實施例63b)(2S-3R-4R)Rt＝3.19分鐘-固體-ESI質(zhì)譜538-540(MH+)實施例645-羥基-N-[3-巰基-2-(5-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠色氨酸按照實施例13的方法，用實施例51制得的化合物(混合物)作為原料。Rt混合物(HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)60-40)＝4.00分鐘固體實施例652-{[3-(乙酰硫基)-2-(5，6-二甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)丙?；鵠氨基}-3-(5-羥基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯按照實施例1的方法，用5，6-二甲氧基-1-二氫茚酮作為原料并在步驟G中將5-羥基色氨酸甲酯鹽酸鹽與步驟F制得的化合物(混合物)縮合。油。實施例66N-[2-(5，6-二甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基-丙?；鵠-5-羥基色氨酸按照實施例13的方法，用實施例65制得的化合物(混合物)作為原料。Rt混合物(HPLC Kromasil C18 5μ100A，250×4.6mm，CH3CN-H2O(0.05％TFA)60-40)＝5.16分鐘固體藥理學(xué)研究實施例A對中性內(nèi)肽酶的抑制按照Aubry等描述的方法(Biochem.Cell Biol.，1987，65，1037-1042頁)從兔腎臟純化中性內(nèi)肽酶。
用熒光底物丹磺酰基-Gly(p-NO2)Phe-β-Ala-(DGNPA)，Km＝37μM(Goudreau N.等，Anal.Biochem.，1994，219，87-95頁)測定酶活性。
本發(fā)明的化合物顯示優(yōu)異的抑制中性內(nèi)肽酶的能力，其Ki值為2至50nM。
例如，實施例33(2S-3R-4S)、13(2S-3R-4S)和63(2S-3R-4S)的化合物的Ki值分別為2.91±0.67nM、3.28±0.35nM和10.2±0.3nM。實施例B對血管緊張素I轉(zhuǎn)化酶的抑制按照Pantaliano等描述的方法(Biochemistry，1984，23，1037-1042頁)從大鼠睪丸純化ACE。
用合成的底物N-Cbz-Phe-His-Leu，Km＝50mM(Piquilloud Y.等，Biochem.Biophys.Acta，1970，206，136-142頁)測定酶活性。
本發(fā)明的化合物顯示優(yōu)異的抑制血管緊張素I轉(zhuǎn)化酶的活性，其Ki值為2至50nM。
例如，實施例33(2S-3R-4S)、13(2S-3R-4S)和63(2S-3R-4S)的化合物的Ki值分別為1.32±0.17nM、4.09±0.49nM和3.7±0.38nM。實施例C對內(nèi)皮素(ET)轉(zhuǎn)化酶的抑制將ECE-1c(酶的膜形式，Biochem.J.，1997，328，871-877頁)的cDNA插入pcDNA3真核表達(dá)載體中然后通過電穿孔轉(zhuǎn)染并在Cos-7細(xì)胞中表達(dá)。
為了測定ECE活性，將細(xì)胞勻化并回收膜部分。通過在β-辛基葡萄糖(1％)中溶解提取酶。a)底物的合成通過固相合成用Fmoc化學(xué)方法制備肽BigET-1(19-35)并通過半制備HPLC純化。通過將N-琥珀酰亞氨基-[2，3-3H]-丙酸酯與肽BigET-1(19-35)反應(yīng)將肽丙酰化并將放射標(biāo)記的產(chǎn)物通過HPLC純化。底物的比活性為97Ci/mmol。b)酶活性將ECE-1c(10μl以1/10稀釋的溶液)在250mM NaCl的存在下溶于400μl三馬來酸鹽50mM，pH6.5。通過加入10μl放射性的底物(終濃度1×10-9M)引發(fā)反應(yīng)。于37℃保溫1小時后，加入600μl乙酸乙酯終止反應(yīng)。通過液液萃取將代謝物與完整的底物分離。通過液體閃爍的方法測定代謝物的放射性。底物的動力學(xué)常數(shù)為Km＝17.1±0.6μM，Vmax＝2.98±0.24nmol/mg.prot./分鐘。
為了測定抑制劑的Ki值，在加入底物前將不同的濃度(10-4至10-10M)的抑制劑于37℃下預(yù)保溫10分鐘。通過將底物分別與滅活的酶和天然酶一起在不含抑制劑的條件下保溫獲得0％和100％降解的對照值。
本發(fā)明的化合物顯示優(yōu)異的抑制大內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶的能力，其Ki值為2至50nM。
例如，實施例33(2S-3R-4S)、13(2S-3R-4S)和63(2S-3R-4S)的化合物的Ki值分別為23.3±3.2nM、24.4±1.4nM和21.2±2.5nM。實施例D藥物組合物1000片劑量為5mg N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸(2S-3R-4S)(實施例13c))的片劑N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸(2S-3R-4S)(實施例13c))…………………………………5g小麥淀粉………………………………………20g玉米淀粉………………………………………20g乳糖……………………………………………30g硬脂酸鎂………………………………………2g二氧化硅………………………………………1g羥丙基纖維素…………………………………2g
權(quán)利要求
1.式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體及其與可藥用酸或堿的加成鹽 其中n表示整數(shù)，其中0≤n≤3，m表示整數(shù)，其中0≤m≤6，R3和R4與攜帶它們的兩個碳原子合在一起形成苯基，所述苯基是未取代的或被1至3個相同或不同的基團所取代，所述基團選自烷基、鏈烯基、鏈炔基、烷氧基、羥基、烷硫基、巰基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、多鹵代烷基、疊氮基、羧基、烷氧基羰基、酰氨基、氨基甲?；?、甲酰基、?；?、芳基、雜芳基和鹵原子，B表示雜芳基，R2表示氫原子或烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、酰基、芳基、芳基烷基或芳?；?，R1表示氫原子、?；?、芳?；颦h(huán)烷基羰基或式(II)的基團 其中m、n、R2、R3、R4如上所定義，應(yīng)當(dāng)理解的是-“烷基”是指含有1至6個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，-“鏈烯基”是指含有2至6個碳原子和一個或多個雙鍵的烷基，-“鏈炔基”是指含有2至6個碳原子和一個或多個叁鍵的烷基，-“環(huán)烷基”是指含有3至8個碳原子的環(huán)狀烷基，-“?；笔侵窻CO基團，其中R表示如上所定義的烷基，“烷基”、“鏈烯基”和“鏈炔基”可以被一個或多個相同或不同的選自羥基、烷氧基、多鹵代烷基、氨基和鹵原子的基團所取代，并且“環(huán)烷基”和“環(huán)烷基烷基”可以在環(huán)狀部分被一個或多個相同或不同的選自羥基、烷氧基、多鹵代烷基、氨基和鹵原子的基團所取代，-“芳基”是指未取代的或被一個或多個相同或不同的選自下列的基團取代的苯基或萘基烷基、鏈烯基、鏈炔基、烷氧基、羥基、烷硫基、巰基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、多鹵代烷基、疊氮基、羧基、烷氧基羰基、酰氨基、氨基甲?；⒓柞；?、?；望u原子，-“雜芳基”是指含有1至3個選自氧、硫和氮的雜原子的任何單環(huán)或多環(huán)芳香族基團，這些基團可以是未取代的或被一個或多個相同或不同基團所取代，所述基團選自烷基、鏈烯基、鏈炔基、烷氧基、羥基、烷硫基、巰基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、多鹵代烷基、疊氮基、羧基、烷氧基羰基、酰氨基、氨基甲?；⒓柞；?、?；望u原子，對于多環(huán)的基團，其中的一個環(huán)還可以是部分或完全氫化的。
2.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中R1表示氫原子。
3.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中R1表示酰基。
4.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中R2表示氫原子。
5.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中R2表示烷基。
6.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中R3和R4合在一起形成取代的苯基。
7.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中R3和R4合在一起形成被鹵原子或甲氧基取代的苯基。
8.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中n表示1。
9.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中m表示1。
10.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中B表示含有NH的雜芳基。
11.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中B表示吲哚基。
12.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中B表示吡咯并吡啶基。
13.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽，其中B表示吡咯并喹啉基。
14.權(quán)利要求1所述的構(gòu)型為2S-3R的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽。
15.權(quán)利要求1所述的構(gòu)型為2S-3R-4S的式(I)化合物、其對映體和非對映異構(gòu)體、其與可藥用酸或堿的加成鹽。
16.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸，其對映體和非對映異構(gòu)體及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
17.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠色氨酸(2S-3R-4S)及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
18.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-甲硫基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基-丙?；鵠色氨酸，其對映體和非對映異構(gòu)體及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
19.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]色氨酸，其對映體和非對映異構(gòu)體及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
20.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙酰基]-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)丙氨酸，其對映體和非對映異構(gòu)體及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
21.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基)丙氨酸(2S-3R-4S)及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
22.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-5-甲氧基色氨酸(2S-3R-4S)及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
23.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-5-氟色氨酸(2S-3R-4S)及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
24.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，所述化合物是N-[2-(5-溴-2，3-二氫-1H-茚-1-基)-3-巰基丙?；鵠-3-(1H-吡咯并[3，2-h]喹啉-3-基)丙氨酸(2S-3R-4S)及其與可藥用酸或堿形成的加成鹽。
25.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物的制備方法，其特征在于使用式(III)的化合物作為原料 其中R3、R4和n如式(I)中所定義，將其用還原劑例如NaBH4處理得到式(IV)化合物 其中n、R3和R4如上所定義，將式(IV)化合物用鹵化試劑例如Me3SiBr轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的式(V)的鹵代化合物 其中R3、R4和n如上所定義，將式(V)化合物在堿性介質(zhì)中與2-(二乙氧基磷?；?乙酸乙酯縮合得到式(VI)化合物 其中R3、R4和n如上所定義，將式(VI)化合物在堿性介質(zhì)中與甲醛反應(yīng)得到式(VII)化合物 其中R3、R4和n如上所定義，將式(VII)化合物在氫氧化鈉的存在下水解得到式(VIII)化合物 其中R3、R4和n如上所定義，將式(VIII)化合物與式(IX)化合物縮合 其中R′1表示烷基、芳基或環(huán)烷基，得到式(X)化合物 其中R3、R4、R′1和n如上所定義，將式(X)化合物在偶聯(lián)劑例如1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺的存在下與式(XI)化合物縮合 其中B和m如式(I)中所定義，和R′2表示烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、?；?、芳基烷基或芳酰基，得到式(I/a)化合物，式(I)化合物的一種具體情況 其中R′1、R3、R4、R′2、m、n和B如上所定義，可將式(Ia)化合物在堿性介質(zhì)中部分或完全水解得到式(I/b)化合物，式(I)化合物的一種具體情況 其中R3、R4、m、n和B如上所定義，R″1表示基團R′1或氫原子，R″2表示基團R′2或氫原子，條件是基團R″1和R″2中至少有一個表示氫原子，當(dāng)R″1表示氫原子時，可將式(I/b)化合物置于氧化介質(zhì)中得到式(I/c)化合物，式(I)化合物的一種具體情況 其中R2、R3、R4、m、n和B如上所定義，R1表示式(II)的基團，式(I/a)至(I/c)的化合物構(gòu)成了本發(fā)明化合物的全部，這些化合物可以按照常規(guī)的分離技術(shù)純化，如需要，可以轉(zhuǎn)化成與可藥用酸或堿的加成鹽，并且可以在需要時將其按照常規(guī)的分離技術(shù)分離成它們的異構(gòu)體。
26.權(quán)利要求25所述的制備權(quán)利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于使用以上所定義的式(X)化合物作為原料，將其非對映異構(gòu)體通過色譜法分離得到式(Xa)和(Xb)的化合物 其中R′1、R3、R4和n如上所定義，其中，式(Xb)化合物可與手性的胺例如(R)-(+)-α-甲基芐基胺形成鹽，在經(jīng)過連續(xù)的重結(jié)晶操作進行拆分后得到式(Xb′)的化合物 其中R′1、R3、R4和n如上所定義，將式(Xb′)化合物在偶聯(lián)劑例如EDCI的存在下與式(XIa)的化合物偶聯(lián) 其中R′2、m和B如上所定義，得到式(I/a′)的化合物，式(I/a)化合物的一種具體情況 其中R′1、R′2、R3、R4、m、n和B如上所定義，非對映異構(gòu)體(2R，3S)、(2R，3R)和(2S，3R)通過類似的方法用相應(yīng)的式(Xa)和(Xb)的化合物作為原料制得，還可以通過將式(XIa)化合物與式(Xa)或(Xb)的化合物縮合然后通過色譜法分離得到這些化合物。
27.含有作為活性成分的至少一種權(quán)利要求1至24中任意一項所述的式(I)化合物或其與可藥用酸或堿的加成鹽或其與一種或多種可藥用賦形劑的混合物的藥物組合物。
28.權(quán)利要求27所述的藥物組合物，用于生產(chǎn)治療高動脈壓，包括肺動脈高血壓、心肌缺血、心絞痛、心功能不足、血管病，包括糖尿病性血管病、動脈粥樣硬化和血管成形術(shù)后的再狹窄、急性或慢性腎功能不足、腦血管疾病，包括中風(fēng)和蛛網(wǎng)膜下出血、外周局部缺血以及對環(huán)孢菌素中毒的藥物。
全文摘要
式(I)化合物,其中0≤n≤3，0≤m≤6，R
文檔編號C07D209/20GK1400974SQ0180509
公開日2003年3月5日 申請日期2001年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2000年2月17日
發(fā)明者B·P·羅克斯, M-C·富尼耶-扎武斯基, N·因古伯特, H·波拉斯, E·斯卡爾伯特, C·貝內(nèi)讓, P·雷納德 申請人:因瑟瑞姆國立醫(yī)學(xué)研究所, 瑟維爾實驗室