專利名稱：：使用增強(qiáng)p53活性的取代哌啶的方法使用增強(qiáng)p53活性的取代哌啶的方法發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及作為人類雙微體2("HDM2")蛋白抑制劑、調(diào)控劑或調(diào)節(jié)劑的化合物的用途；含有該化合物的藥用組合物的用途；和使用該化合物和組合物治療諸如癌癥、涉及異常細(xì)胞增殖的疾病、與riDM2相關(guān)的疾病或與不當(dāng)P53活性相關(guān)的疾病的治療方法。
背景技術(shù)：
：腫瘤抑制蛋白p53通過調(diào)控負(fù)責(zé)DNA修復(fù)、細(xì)胞周期和生長(zhǎng)停滯與細(xì)胞凋亡的一系列不同基因的表達(dá)而對(duì)維持細(xì)胞中基因組的完整性起到重要作用[May等人，Oncogene18(53)(1999)第7621-7636頁；Oren,CellDeathDiffer.10(4)(2003)第431-442頁；Hall和Peters，Adv.CancerRes.,68:(1996)第67-108頁;Hainaut等人，NucleicAcidRes.，(1997)第151-157頁；Sherr，C露erRes.,巡(2000)第3689-95頁〗。細(xì)月包對(duì)致癌應(yīng)^H言號(hào)(oncogenicstresssignals)應(yīng)答而觸發(fā)p53轉(zhuǎn)錄因子，從而活化細(xì)胞周期調(diào)控中所涉及的基因，由此起始細(xì)胞凋亡或細(xì)胞周期停滯。細(xì)胞凋亡有助于受損細(xì)胞自有機(jī)體中除去，而細(xì)胞周期停滯使得受損細(xì)胞能夠修復(fù)基因損傷[Ko等人.，Genes&Devel.途(1996)第1054-1072頁；Levine,￡^11巡(1997)第323-331頁中評(píng)論]。p53安全保障功能的喪失易于使受損細(xì)胞發(fā)展成癌狀態(tài)。使小鼠體內(nèi)的p53失活始終會(huì)導(dǎo)致異常高的腫瘤發(fā)生率[Donehower等人，Nature,356:(1992)第215-221頁]。p53轉(zhuǎn)錄因子促進(jìn)多種細(xì)胞周期調(diào)控基因的表達(dá)，所述基因包括其自身的負(fù)調(diào)控劑，即編碼小鼠雙微體2(Mdm2)蛋白的基因[Chene，NatureReviewsCancer3:(2003)第102-109頁；Momand,Gene242(l匿2}:(2000)第15-29頁；Zheleva等人Mini.Rev.Med.Chem.3(3):(2003)第257-270頁]。Mdm2蛋白(對(duì)于人類稱為HDM2)以自體調(diào)控的方式起到下調(diào)P53活性的作用[Wu等人，GenesDev.,2:(1993)第1126-1132頁，Bairak等人，EMBOJ，12:(1993)第461-468頁]。在無致癌應(yīng)激信號(hào)的情況下(也即，在正常細(xì)胞條件下)，Mdm2蛋白起到將p53活性維持在低水平的作用[Wu等人，GenesDev.,2:(1"3)第1126-1132頁；Barak等人，EMBOJ,12:(1993)第461-468頁]。然而，回應(yīng)于細(xì)胞DNA損傷或在細(xì)胞應(yīng)激下，p53活性會(huì)增強(qiáng)，從而通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期和生長(zhǎng)停滯或細(xì)胞凋亡而有助于防止永久受損細(xì)胞克隆的繁殖。對(duì)p53功能的調(diào)控依賴于該p53-Mdm2自體調(diào)控系統(tǒng)中兩組分之間的適當(dāng)平衡。事實(shí)上，該平衡似乎對(duì)于細(xì)胞存活至關(guān)重要。Mdm2起到下調(diào)p53活性的作用存在至少三種途徑。第一，Mdm2可以與p53的N末端轉(zhuǎn)錄活化域結(jié)合以阻斷p53效應(yīng)基因的表達(dá)[Kussie等人，Science,274:(1996)第948-953頁;Oliner等人，Nature.362:(1993)第857-860頁；Momand等人，兇，巡(1992)第1237-1245頁]。第二，Mdm2使p53由細(xì)胞核穿梭至細(xì)胞質(zhì)，從而有助于p53的蛋白水解降解[Roth等人，EMBOJ,17:(1998)第554-564頁；Freedman等人，MolCellBiol,(1998)第7288-7293頁；Tao和Levine，Proc.Natl.Acad.Sci,(1999)第3077-3080頁]。最終，在依賴遍在蛋白的26S蛋白體途徑中，Mdm2具有使遍在蛋白與p53綴合以使其降解的內(nèi)在E3連接酶活性[Honda等人，F(xiàn)EBSLett,420:(1997)第25-27頁；Yasuda,Oncogene12:(2000)第1473-1476頁]。因此，Mdm2通過與細(xì)胞核內(nèi)的p53結(jié)合而妨礙p53轉(zhuǎn)錄因子促進(jìn)其靶基因表達(dá)的能力。弱化p53-Mdm2自體調(diào)控系統(tǒng)可對(duì)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)具有關(guān)鍵作用。一直以來，已報(bào)道Mdm2的過量表達(dá)與腫瘤形成之間的相關(guān)性[Chene，Nature^(2003)第102-109頁]。在許多類型的人類腫瘤中發(fā)現(xiàn)野生型p53的功能失活。通過抗MDM2療法恢復(fù)腫瘤細(xì)胞中p53的功能將導(dǎo)致腫瘤增殖減緩且刺激細(xì)胞凋亡。故當(dāng)前對(duì)作用的能力的新型抗癌藥做出的實(shí)質(zhì)努力也在意料之中[Chene，Nature2:(2003)第102-109頁]。已證實(shí)抗體、肽和反義寡核苷酸破壞p53-Mdm2的相互作用，此會(huì)將p53自Mdm2的負(fù)控制下釋放，導(dǎo)致p53途徑活化，從而允許生長(zhǎng)停滯和/或細(xì)胞凋亡的正常信號(hào)發(fā)揮作用，此將提供一種治療癌癥和以異常細(xì)胞增殖為特征的其他疾病的潛在治療方法[例如參見Blaydes等人，Oncogene14:(1997)第1859-1868頁；Bottger等人，Oncogene13HO):(1996)第2141-2147]。美國(guó)公開說明書第2005/0037383Al號(hào)中描述經(jīng)修飾的可溶性HDM2蛋白；編碼該HDM2蛋白的核酸；適于X射線結(jié)晶分析的該蛋白質(zhì)晶體；該蛋白質(zhì)和晶體用于鑒別、選擇或設(shè)計(jì)可用作抗癌藥的化合物的用途；及與經(jīng)修飾的HDM2結(jié)合的部分化合物本身(Schering-PloughCorp.)。對(duì)于拮抗p53-Mdm2相互作用的小分子已有描述。WO00/15657(ZenecaLimited)描述了作為Mdm2與p53相互作用的抑制劑的哌嗪-4-苯基衍生物。Grasberger等人".Med.Chem.,4§(2005)p.909-912)(Johnson&JohnsonPharmaceuticalResearch&DevelopmentL丄.C.)描述有關(guān)作為活化細(xì)胞中p53的HDM2拮抗劑的苯并二氮雜草二酮的發(fā)現(xiàn)和共晶體結(jié)構(gòu)。Galatin等人(J.Med.Chem.47(2004)第4163-4165頁)描述p53-Mdm2相互作用的非肽磺酰胺抑制劑和mdm2過度表達(dá)的細(xì)胞中p53依賴性轉(zhuǎn)錄的活化劑。Vassilev(J.Med.Chem.(Perspective)第48巻，第14期,(2005)第1-8頁)(Hoffmann-LaRocheInc.)描述胂瘤學(xué)中應(yīng)用的若干小分子p53活化劑，包括下式上文所列的前四種化合物也于Totouhi等人(CurrentTopicsinMedicinalChemistry第三巻3，第2期(2005)第159-166頁，第161處)(HoffmannLaRocheInc.)中進(jìn)行描述。上文所列的后三種化合物也已于Vassilev等人(Science第303巻(2004):第844-848頁)(HoffmannLaRocheInc.)中進(jìn)行描述且其白血病活性的關(guān)聯(lián)已于Kojima等人(Blood,，第108巻，第9期(2005年11月)第3150-3159頁)中進(jìn)行研究。Ding等人QLAm.Chem.Soc.第127巻(2005):10130-10131)和仏Med.Chem.第49巻(2006):3432-3435)中描述了作為Mdm2-p53抑制劑的若干螺-羥基吲咮化合物。Lu等人(J.Med.Chem.第49巻(2006):3759-3762)中描述作為MDM2-p53相互作用的小分子抑制劑的7-[苯氨基(苯基)曱基]-2-曱基-8-羥基喹啉。Chdne(MolecularCancerResearch第2巻(2006年1月)第20-28頁)中描述通過耙向蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)界面而對(duì)p53-Mdm2相互作用進(jìn)行抑制。美國(guó)公開說明書第2004/0259867Al號(hào)和第2004/0259884Al號(hào)中描述順式-咪唑(HoffmannLaRocheInc.),WO2005/U0996A1號(hào)和WO03/051359號(hào)中描述順式-咪唑啉(HoffmannLaRocheInc.),其作為抑制Mdm2與p53樣肽相互作用從而導(dǎo)致抗增殖作用的化合物。WO2004/080460Al描述作為Mdm2-p53抑制劑用于治療癌癥的經(jīng)取代哌啶化合物(HoffmannLaRocheInc.)。EP0947494Al描述苯氧基乙酸衍生物和苯氧基甲基四唑，其充當(dāng)Mdm2的拮抗劑且干擾Mdm2與p53之間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用，從而導(dǎo)致抗腫瘤特性(HoffmannLaRocheInc.)。Duncan等人，.Am.Chem.Soc.123(4):(2001)第554-560頁中描述來自鐮孢(FusariumSp.)的p-53-Mdm2拮抗劑綠褐素(chlorofUsin)。Stoll等人，Biochemistry40(2)(2001)第336-344頁中描述拮抗人類癌蛋白Mdm2與p53之間相互作用的查耳酮(chalcone)衍生物。需要HDM2或MDM2蛋白的有效抑制劑，以便治療或預(yù)防癌癥、與細(xì)胞增殖相關(guān)的其他疾病病況、與HDM2相關(guān)的疾病或由不當(dāng)p53活性引起的疾病。本申請(qǐng)揭示具有抑制或拮抗HDM2-p53和Mdm2-p53相互作用和/或活化細(xì)胞中的p53蛋白的效能的化合物。先前尚未揭示該化合物的HDM2-p53和Mdm2-p53抑制活性。發(fā)明概述本發(fā)明提供一種抑制HDM2蛋白的方法，其包括向需要該抑制的患者給予治療有效量的至少一種具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥。發(fā)明詳述在一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供抑制HDM2蛋白的方法，其包括向需要該抑制的患者給予治療上可接受量的至少一種具有上述化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明揭示治療一種或多種與HDM2相關(guān)的疾病的方法，其包括向需要該治療的患者給予治療有效量的至少一種上述化合物。在再一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療一種或多種與p53相關(guān)的疾病的方法，其包括向需要該治療的患者給予治療有效量的至少一種上述化合物。在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明揭示治療一種或多種與HDM2蛋白與p53蛋白相互作用相關(guān)的疾病的方法，其包括向需要該治療的患者給予治療有效量的至少一種上述化合物。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療一種或多種與HDM2相關(guān)的疾病的方法，其包括向需要該治療的哺乳動(dòng)物給予下列藥物一定量的第一化合物，其中該第一化合物選自上述化合物；和一定量的至少一種第二化合物，其中該第二化合物為與第一化合物不同的抗癌藥；其中該量的該第一化合物與該第二化合物產(chǎn)生治療作用。在再一實(shí)施方案中，本發(fā)明揭示治療一種或多種與p53蛋白相關(guān)的疾病的方法，其包括向需要該治療的哺乳動(dòng)物給予下列各物一定量的第一化合物，其中該第一化合物選自上述化合物；和一定量的至少一種第二化合物，其中該第二化合物為與該第一化合物不同的抗癌藥；其中該量的該第一化合物與該第二化合物產(chǎn)生治療作用。在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療一種或多種與HDM2蛋白與p53蛋白相互作用相關(guān)的疾病的方法，其包括向需要該治療的哺乳動(dòng)物給予下列各物一定量的第一化合物，其中該第一化合物選自上述化合物；和一定量的至少一種第二化合物，其中該第二化合物為與第一化合物不同的抗癌藥；其中該量的該第一化合物與該第二化合物產(chǎn)生治療作用。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明揭示治療選自以下的疾病的方法癌，包括(但不限于)膀胱癌、乳癌、結(jié)腸癌、直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、肝癌、肺癌、頭頸癌、食道癌、膽嚢癌、宮頸癌、胰腺癌、前列腺癌、喉癌、卵巢癌、胃癌、子宮癌、肉瘤和曱狀腺癌；淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤，包括白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、急性淋巴母細(xì)胞白血病、B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤(Hodgkinslymphoma)、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤、骨髓瘤和伯基特氏淋巴瘤(Burkett，slymphoma);骨髓系造血系統(tǒng)腫瘤，包括急性和慢性髓細(xì)胞性白血病、骨髓發(fā)育不良綜合征和前髓細(xì)胞性白血病；間質(zhì)起源的腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；2中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤，包括星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)力交質(zhì)瘤和神經(jīng)鞘瘤；和其他腫瘤，包括黑素瘤、皮膚(非黑素瘤)癌、間皮瘤(細(xì)胞)、精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、著色性干皮病、角化棘皮瘤、曱狀腺濾泡狀癌和卡波西氏肉瘤(Kaposi，ssarcoma)。在再一實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法還包括放射療法、手術(shù)、化學(xué)療法、生物療法、激素療法、光動(dòng)力學(xué)療法或骨髓移植。在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種治療方法，其中上文所述的抗癌藥選自細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑、細(xì)胞毒性劑、對(duì)抗癌癥和贅生性疾病的靶向治療劑(小分子、生物制劑、siRNA和微小腦A(micro脂A)):抗代謝物，諸如曱氨喋呤(methoxtrexate)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、吉西他濱(gemcitabine)、氟達(dá)拉濱(fludarabine)、卡培他濱(capecitabine);烷化劑，諸如替莫唑胺(temozolomide)、環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide);與DNA相互作用和破壞DNA的藥物，諸如順鉑(cisplatin)、奧沙利柏(oxaliplatin)、多柔比星(doxorubicin);電離輻射，諸如放射療法；拓樸異構(gòu)酶II抑制劑，諸如依托泊苷(etoposide)、多柔比星(doxorubicin);拓樸異構(gòu)酶I抑制劑，諸如伊立替康(irinotecan)、托泊替康(topotecan);微管蛋白相互作用劑，諸如紫杉醇(paclitaxel)、多西他賽(docetaxel)、Abraxane、埃坡霉素(epothilones);驅(qū)動(dòng)蛋白紡錘體蛋白抑制劑；紡錘體檢查點(diǎn)抑制劑；聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制劑；基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)抑制劑；蛋白酶抑制劑，諸如組織蛋白酶D和組織蛋白酶K抑制劑；蛋白體或遍在蛋白化抑制劑，諸如硼替佐米(bortezomib);用于恢復(fù)野生型p53活性的突變型p53的活化劑；腺病毒-p53;Bcl-2抑制劑，諸如ABT-263;熱休克蛋白(HSP)調(diào)節(jié)劑，諸如格爾德霉素(geldanamycin)和17-AAG;組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑，諸如伏林司他(vorinostat,SAHA);性激素調(diào)節(jié)劑；抗雌激素，諸如他莫昔芬(tamoxifen)、氟維司群(fulvestrant)，選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM),諸如雷洛昔芬(raloxifene),抗雄激素，諸如比卡魯胺(bicalutamide)、氟他胺(flutamide),LHRH激動(dòng)劑，諸如亮丙立德(leuprolide),5a-還原酶抑制劑，諸如非那雄胺(finasteride)，細(xì)胞色素P450C17裂合酶(CYP450cl7)抑制劑，諸如阿比特龍(Abiraterone),芳化酶抑制劑，諸如雷他曲唑(letrozole)、阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane);EGFR激酶抑制劑，諸如吉非替尼(geftinib)、厄洛替尼(erlotinib)、^立普替尼(laptinib);雙重erbBl和erbB2抑制劑，諸如拉帕替尼(Lapatinib);多目標(biāo)激酶(絲氨酸/蘇氨酸和/或酪氨酸激酶)抑制劑；ABL激酶抑制劑，伊馬替尼(imatinib)和尼洛替尼(nilotinib)、達(dá)沙替尼(dasatinib)，VEGFR扁1、VEGFR-2、PDGFR、KDR、FLT、c-Kit、Tie2、Raf、MEK和ERK抑制劑，諸如舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、凡德他尼(Vandetanib)、帕峻帕尼(pazopanib)、阿昔替尼(Axitinib)、PTK787,Polo樣激酶抑制劑，Aurora激酶抑制劑，JAK抑制劑，c-MET激酶抑制劑，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑，諸如CDK1和CDK2抑制劑SCH727965，PI3K抑制劑，mTOR抑制劑，諸如雷帕霉素(Rapamycin)、坦羅莫司(Temsirolimus)和RAD001;和其他抗癌藥(也稱抗腫瘤藥)，其包括(但不限于)ara-C、阿霉素(adriamycin)、環(huán)磷酰胺(cytoxan)、卡鉑(Carboplatin)、尿嘧咬氮芥(Uracilmustard)、氮芥(Clormethine)、異環(huán)磷酰胺(Ifosfsmide)、美法侖(Melphalan)、苯丁酸氮芥(Chlorambucil)、哌泊溴烷(Pipobroman)、三亞乙基蜜胺(Triethylenemelamine)、三亞乙基硫代磷酰銨(Triethylenethiophosphoramine)、白消安(Busulfan)、卡莫司汀(Carmustine)、洛莫司汀(Lomustine)、鏈佐星(Streptozocin)、達(dá)卡巴。秦(Dacarbazine)、氟尿苷(Floxuridine)、阿糖胞苷(Cytarabine)、6-巰噤呤(6-Mercaptopurine)、6-硫鳥噪呤(6-Thioguanine)、磷酸氟達(dá)拉濱(Fludarabinephosphate)、噴司他丁(Pentostatine)、長(zhǎng)春堿(Vinblastine)、長(zhǎng)春新堿(Vincristine)、長(zhǎng)春地辛(Vindesine)、長(zhǎng)春瑞濱(Vinorelbine)、諾維本(Navelbine)、博來霉素(Bleomycin)、放線菌素D(Dactinomycin)、道諾霉素(Daunorubicin)、多柔比星(Doxorubicin)、表柔比星(Epirubicin)、替尼泊苦(teniposide)、阿糖月包27苦(cytarabine)、培美曲塞(pemetrexed)、伊達(dá)比星(Idarubicin)、光神霉素(Mithramycin)、脫氧考福霉素(Deoxycoformycin)、絲裂霉素C(Mitomycin-C)、L-天冬酰胺酶(L-Asparaginase)、替尼泊苦(Teniposide)17a-炔雌醇(Ethinylestradiol)、己烯雌酚(Diethylstilbestrol)、睪酮(Testosterone)、潑尼松(Prednisone)、氟曱睪酮(Fluoxymesterone)、丙酸屈4也力,酮(Dromostanolonepropionate)、睪內(nèi)酉旨(Testolactone)、醋酸曱地孕酮(Megestrolacetate)、曱潑尼龍(Methylprednisolone)、曱基睪酉同(Methyltestosterone)、》發(fā)尼+》龍(Prednisolone)、曲安西龍(Triamcinolone)、氯烯雌醚(Chlorotrianisene)、羥孕酮(Hydroxyprogesterone)、氨魯米特(Aminoglutethimide)、站,莫司汀(Estramustine)、氟他胺(Flutamide)、醋酸曱羥孕酮(Medroxyprogesteroneacetate)、托瑞米芬(Toremifene)、戈舍瑞林(goserelin)、卡柏(Carboplatin)、羥基脲(Hydroxyurea)、安吖啶(Amsacrine)、丙卡巴肼(Procarbazine)、米托坦(Mitotane)、米托蒽醌(Mitoxantrone)、左S走。米哇(Levamisole)、屈；各昔芬(Drolloxafine)、六曱蜜胺(Hexamethylmelamine)、Bexxar、Zevalin、Trisenox、Profimer、塞替派(Thiotepa)、六曱蜜胺(Altretamine)、Doxil、昂他克(Ontak)、Depocyt、Aranesp、Neupogen、Neulasta、Kepivance;法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，諸如SARASAR(4-[2-[4-[(llR)-3,10-二溴-8-氯-6，11-二氫-511-苯并[5,6]環(huán)庚烷并[1，2七]吡啶-11-基-]-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-哌啶曱酰胺、替吡法呢(tipifarnib);干才尤素，i者^口IntronA、Peg-Intron;抗erbB1抗體，諸如西妥昔單抗(cetuximab)、帕尼單抗(panitumumab);抗erbB2抗體，諸如曲妥珠單抗(trastuzumab);抗CD52抗體，諸如阿侖珠單抗(Alemtuzumab);抗CD20抗體，諸如利妥昔單抗(Rituximab);抗CD33抗體，諸如吉妥昔單抗奧佐米星(Gemtuzumabozogamicin);抗VEGF抗體，諸如阿瓦斯丁(Avastin);TRIAL配體，諸如來沙木單抗(Lexatumumab)、馬帕木單抗(mapat腦腿ab)和AMG-655;抗CTLA-4、CTA1、CEA、CD5、CD19、CD22、CD30、CD44、CD44V6、CD55、CD56、EpCAM、FAP、MHCII、HGF、IL隱6、MUC1、PSMA、TAL6、TAG陽72、T認(rèn)LR、VEGFR、IGF畫2、FGF的抗體；抗IGF-1R抗體，諸如SCH717454。上文所述的所有表示人類雙微體2蛋白的等效名稱包括(但不限于)HDM2、hDM2、hdm2、Hdm2、人類雙微體2、HDM-2、hDM-2、hdm-2、Hdm-2、人類雙微體-2、hDM2、hdm2、Hdm2、人類雙微體2(HumanDoubleMinutetwo、humandoubleminutetwo)、HDM-2、hDM-2、hdm-2、Hdm-2、人類雙微體-2(HumanDoubleMinute-two、humandoubleminute-two)、hDM2、hdm2、Hdm2、人類雙微體2(HumanDoubleMinuteTwo、humandoubleminuteTwo)、HDM-2、hDM畫2、hdm-2、Hdm-2、人類雙微體曙2(HumanDoubleMinute-Two或humandoubleminuteTwo)。同樣，小鼠雙微體2蛋白可以與上文所述的人類雙微體2蛋白以相同的方式表示，但分別以"M，，或"小鼠"替換"H，，或"人類"。上文所述的所有表示p53蛋白的等效名稱包括(但不限于)P-53、p53、p-53、P53、p53或p53。除非另作說明，否則如上文和本申請(qǐng)公開內(nèi)容通篇所使用的以下術(shù)語應(yīng)理解為具有以下含義"患者"包括人類與動(dòng)物。"哺乳動(dòng)物"意味人類及其他哺乳動(dòng)物。關(guān)于化合物的術(shù)語"經(jīng)純化"、"純化形式"或"經(jīng)分離和純化的形式，，是指自合成方法(例如，自反應(yīng)混合物中)或天然來源或其組合中分離之后該化合物的物理狀態(tài)。因此，關(guān)于化合物的術(shù)語"經(jīng)純化"、"純化形式"或"經(jīng)分離和純化的形式"是指自本文所述的或技術(shù)人員熟知的一種或多種純化方法(例如層析、再結(jié)晶及其類似方法)獲得之后該化合物的物理狀態(tài)，其具有足夠純度從而可以用本文所述或技術(shù)人員熟知的標(biāo)準(zhǔn)分析技術(shù)加以表征。也應(yīng)注意，在本文正文、流程、實(shí)施例和表格中具有不飽和價(jià)態(tài)的任何碳以及雜原子均假定具有足夠數(shù)量的氬原子以使價(jià)態(tài)飽和。如本文所使用的術(shù)語"組合物"意欲涵蓋包含指定量的指定成分的產(chǎn)物，以及由指定量的指定成分的組合直接或間接產(chǎn)生的任何產(chǎn)物。本發(fā)明化合物的前藥和溶劑化物也涵蓋于本文中。有關(guān)前藥的討i侖才是供于A.C.S.SymposiumSeries的T.Higuchi和V.Stella,drwg^as7Vove/Z)Wve/^S少5teww(1987)j_4中和S/orevera/6/eCam'era/"Dn/gZ)&s/g",(1987)EdwardB.Roche編,AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress中。術(shù)語"前藥，，意味在活體內(nèi)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生上文所述的化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑化物的化合物(例如藥物前體)。轉(zhuǎn)化可經(jīng)多種機(jī)制(例如，經(jīng)代謝或化學(xué)過程)發(fā)生，諸如經(jīng)血液中的水解發(fā)生。在A.C.S.SymposiumSeries的T.Higuchi和W.Stella,"Pro-drugsasNovelDeliverySystems,"第14巻中和BioreversibleCarriersinDrugDesign,EdwardB.Roche編,AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress,1987中已提供有關(guān)前藥使用的論述。舉例而言，若上文所述的化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑化物含有羧酸官能團(tuán)，則前藥可包含由諸如以下基團(tuán)的基團(tuán)置換酸基的氫原子所形成的酯(C廣Q)烷基、(C2-C,2)烷酰氧基曱基、具有4-9個(gè)碳原子的l-(烷酰氧基)乙基、具有5-10個(gè)碳原子的l-曱基-l-(烷酰氧基)-乙基、具有3-6個(gè)碳原子的烷氧基羰氧基曱基、具有4-7個(gè)碳原子的l-(烷氧基羰氧基)乙基、具有5-8個(gè)碳原子的l-曱基-I-(烷氧基羰氧基)乙基、具有3-9個(gè)碳原子的N-(烷氧羰基)氨基曱基、具有4-10個(gè)碳原子的l-(N-(烷氧羰基)氨基)乙基、3-苯并[c]呋喃酮基、4-巴豆酸內(nèi)酯基、丫-丁內(nèi)酯-4-基、二-N,N-(C廣C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(諸如(3-二甲氨基乙基)、氨曱?；?(C,-C2)烷基、N，N-二(C,-C2)烷基氨曱?；?(C1-C2)烷基和哌啶子基(CVC3)烷基、吡咯烷基(C2-C3)烷基或嗎啉代(C2-C3)烷基及其類似基團(tuán)。類似地，若上文所述的化合物含有醇官能團(tuán)，則前藥可由諸如下列的基團(tuán)置換醇基的氫原子而形成(C,-C6)烷酰氧基曱基、l-((C「Q)烷酰氧基)乙基、l-曱基-l-((C,-C6)烷酰氧基)乙基、(C,-C6)烷氧基羰氧基曱基、N-(C廣C6)烷氧羰基氨基曱基、琥珀?；?C,-C6)烷?；-氨基(CrCO鏈烷基、芳基酰基和a-氨基?；騩c-氨基?；?a-氨基?；?，其中各a-氨基?；?dú)立地選自天然存在的L-氨基酸、p(o)(OH)2、氺(0)(0((:1-(:6)烷基)2或糖基(由移除半縮醛形式的碳水化合物的羥基而產(chǎn)生的基團(tuán))及其類似基團(tuán)。若上文所述的化合物中摻入胺官能團(tuán)，則前藥可由以諸如下列的基團(tuán)置換氨基中的氫原子而形成R-羰基、RO-羰基、NRR，-羰基，其中r和r，各自獨(dú)立地為(C,-C,o)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、苯曱基，或R-羰基為天然a-氨基酰基或天然a-氨基?；?C(OH)C(O)OY1,其中Y1為H、(C,-Q)烷基或苯曱基；-C(OY2)Y3，其中Y2為(Q-CO烷基且Y3為(Q-C6)烷基、羧基(C,-C6)烷基、氨基(C,-C4)烷基或單-N-(d-C6)烷基氨基烷基或二-N，N-(CrC6)烷基氨基烷基；-C(Y4)Y5,其中Y"為H或曱基且YS為單-N-或二-N,N-(C,-C6)烷基氨基-嗎啉代、哌啶-l-基或吡咯烷-l-基；及其類似基團(tuán)。一種或多種本發(fā)明的化合物可以非溶劑化物形式以及與藥學(xué)上可接受的溶劑(諸如水、乙醇及其類似物)形成的溶劑化物的形式存在，且預(yù)期本發(fā)明包括溶劑化物與非溶劑化物形式。"溶劑化物"意味本發(fā)明的化合物與一個(gè)或多個(gè)溶劑分子的物理性締合。該物理性締合涉及不同程度的離子鍵合和共價(jià)鍵合，包括氬鍵合。在某些情況中，例如當(dāng)一個(gè)或多個(gè)溶劑分子摻入結(jié)晶固體的晶格時(shí)，溶劑化物將能夠分離。"溶劑化物"涵蓋溶液相與可分離的溶劑化物。適當(dāng)溶劑化物的非限制性實(shí)例包括乙醇化物、曱醇化物及其類似物。"水合物，，為溶劑分子為H20的溶劑化物。一種或多種本發(fā)明的化合物可任選轉(zhuǎn)化為溶劑化物。一般已知〉容劑化物的制備。因此，例如M.Caira等人，J尸/7arwacew"ca/5W.,93(3),601-611(2004)中描述抗真菌氟康唑(fluconazole)于乙酸乙酯以及水中的溶劑化物的制備。溶劑化物、半溶劑化物、水合物及其類似物的類似制備已描述于E.C.vanTonder等人，」」/^尸/2flA7w5Wrec/z.,5(1),article12(2004);和A.L.Bingham等人，C7ze附.603-604(2001)中。典型的非限制性方法涉及在高于環(huán)境溫度的溫度下將本發(fā)明的化合物溶解于所需量的所需溶劑(有機(jī)物或水或其混合物)中，且以足夠形成晶體的速率冷卻該溶液，隨后用標(biāo)準(zhǔn)方法分離。諸如I.R.光譜學(xué)的分析技術(shù)展示溶劑化物(或水合物)形式的晶體中是否存在溶劑(或水)。"有效量，，或"治療有效量，，意欲描述可有效抑制上述疾病且因此產(chǎn)生所需治療、改善、抑制、調(diào)節(jié)、拮抗或預(yù)防作用的本發(fā)明的化合物或組合物的量。上文所述的化合物可形成鹽，該鹽也在本發(fā)明的范疇內(nèi)。應(yīng)了解，除非另有說明，否則本文中對(duì)上述化合物的提及包括其鹽的提及。本文使用的術(shù)語"鹽"表示與無機(jī)酸和/或有機(jī)酸形成的酸鹽，以及與無機(jī)石咸和/或有機(jī)堿形成的堿鹽。另外，當(dāng)上文所述的化合物含有諸如(但不限于)吡啶或咪唑的堿性部分與諸如(但不限于)羧酸的酸性部分時(shí)，可形成兩性離子("內(nèi)鹽")，且該兩性離子也包括于本文所用的術(shù)語"鹽"內(nèi)。盡管其他鹽也適用，但藥學(xué)上可接受(也即無毒、生理上可接受)的鹽較佳。可(例如)通過上文所述的化合物與一定量(諸如等量)的酸或堿在介質(zhì)(諸如所述鹽在其中沉淀的介質(zhì))中或在水性介質(zhì)中反應(yīng)隨后冷凍干燥，形成上文所述的化合物的鹽。例示性酸加成鹽包括乙酸鹽、抗壞血酸鹽、苯曱酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氬碘酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、曱磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、曱苯磺酸鹽(也稱為tosylates)等等。另外，一般認(rèn)為適合由堿性藥用化合物形成藥學(xué)上適用的鹽的酸例如討論于P.Stahl等人CamilleG.編)//aw^/Z)ooA:o/尸/z"nwacew/7.ca//Vo/eW/as,5"e/ecWowf/se.(2002)Zurich:Wiley-VCH;S.Berge等人Jow7a/o/尸/fl/"macewma/5Wewc&s(1977)1陽19;P.Gould，/"&rwa".owa//o/^/zanwacewh'cs(1986)S201-217;Anderson等人7Tze尸racriceo/MW"Vza/CAem/s^y(1996),AcademicPress,NewYork;和7Te(9rawge5ooA:(Food&DrugAdministration,Washington,D.C.的網(wǎng)頁)中。這些揭示內(nèi)容是以引用的方式并入本文中。例示性的堿鹽包括銨鹽；堿金屬鹽，諸如鈉鹽、鋰鹽和鉀鹽；堿土金屬鹽，諸如鈣鹽和鎂鹽；與有機(jī)堿(例如有機(jī)胺，諸如二環(huán)己胺、叔丁胺)形成的鹽；及與諸如精氨酸、賴氨酸等的氨基酸形成的鹽。可以用諸如低級(jí)烷基卣(例如曱基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二曱酯、硫酸二乙酯和硫酸二丁酯)、長(zhǎng)鏈卣化物(例如癸基、月桂基和硬脂?；穆然?、溴化物和碘化物)、芳烷基卣(例如苯曱基渙和苯乙基溴)等試劑使含氮基團(tuán)季銨化。預(yù)期所有該等酸鹽和堿鹽均為處于本發(fā)明范疇內(nèi)的藥學(xué)上可接受的鹽，且認(rèn)為對(duì)于本發(fā)明而言，所有酸鹽和堿鹽等同于游離形式的相應(yīng)化合物。本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的酯包括以下基團(tuán)(l)通過羥基酯化獲得的羧酸酯，其中酯基的羧酸部分的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基(例如乙酰基、正丙基、叔丁基或正丁基)、烷氧基烷基(例如曱氧基曱基)、芳烷基(例如苯曱基)、芳氧基烷基(例如苯氧基曱基)、芳基(例如任選經(jīng)例如卣素、C^烷基或CM烷氧基或氨基取代的苯基；(2)磺酸酯，諸如烷基磺?；蚍纪榛酋；?例如曱磺?；?；(3)氨基酸酯(例如L-纈氨酰基或L-異亮氨?；?；(4)磷酸酯；和(5)單磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯。磷酸酯可進(jìn)一步經(jīng)例如C,.2o醇或其反應(yīng)性衍生物酯化或經(jīng)2,3-二((:6.24)?；视王セＩ衔乃龅幕衔锛捌潲}、溶劑化物、酯和前藥可以其互變異構(gòu)形式(例如以酰胺或亞氨基醚形式)存在。所有該互變異構(gòu)形式均作為本發(fā)明的部分涵蓋于本文中。上文所述的化合物可含有不對(duì)稱中心或手性中心，因此可以不同的立體異構(gòu)形式存在。預(yù)期所有上文所述的化合物的立體異構(gòu)形式以及其混合物(包括外消旋混合物)形成本發(fā)明的部分。另外，本發(fā)明包括所有幾何異構(gòu)體和位置異構(gòu)體。舉例而言，若上文所述的化合物中帶入雙鍵或稠環(huán)，則順式與反式以及混合物均包括于本發(fā)明的范疇內(nèi)?？苫谖锢砘瘜W(xué)差異用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法(諸如層析法和/或分步結(jié)晶法)將非對(duì)映異構(gòu)體混合物分離成其個(gè)別非對(duì)映異構(gòu)體?？山逵扇缦虏襟E來分離對(duì)映異構(gòu)體使對(duì)映異構(gòu)體混合物與適當(dāng)旋光化合物(例如手性助劑諸如手性醇或摩歇爾氏酰氯(Mosher，sacidchloride)反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化為非對(duì)映異構(gòu)體混合物，分離非對(duì)映異構(gòu)體且將個(gè)別非對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化(例如水解)為相應(yīng)的純對(duì)映異構(gòu)體。又，某些上文所述的化合物可為阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(例如經(jīng)取代的聯(lián)芳基)且也被視為本發(fā)明的部分。對(duì)映異構(gòu)體也可使用手性HPLC色譜柱加以分離。也可能上文所述的化合物可以不同的互變異構(gòu)體形式存在，且所有該形式均包括在本發(fā)明的范疇內(nèi)。又例如該化合物的所有酮-烯醇和亞胺-烯胺形式均包括于本發(fā)明中。本發(fā)明的范疇內(nèi)涵蓋本發(fā)明化合物的所有立體異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體等等)(包括該等化合物的鹽、溶劑化物、酯和前藥以及該前藥的鹽、溶劑化物和酯的立體異構(gòu)體)，諸如可因各種取代基上的不對(duì)稱碳而存在的立體異構(gòu)體，包括對(duì)映異構(gòu)形式(其甚至可在不存在對(duì)稱碳的情況下存在)、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)形式、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)形式，也包括位置異構(gòu)體(諸如4-吡啶基和3-吡啶基)。(舉例而言，若上文所述化合物中帶入雙鍵或稠環(huán)，則順式與反式以及混合物均包括于本發(fā)明的范疇內(nèi)。又，例如該化合物的所有酮-烯醇和亞胺-烯胺形式均包括在本發(fā)明中。)本發(fā)明化合物的個(gè)別立體異構(gòu)體可(例如)基本上無其他異構(gòu)體，或可(例如)混合為消旋體，或與其他立體異構(gòu)體或其他所選擇的立體異構(gòu)體混合。本發(fā)明的手性中心可具有如由/WMC1974規(guī)則所定義的S或R構(gòu)型。預(yù)期術(shù)語"鹽"、"溶劑化物"、"酯"、"前藥"等術(shù)語的使用同樣適用于本發(fā)明化合物的對(duì)映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、位置異構(gòu)體、外消旋體或前藥的鹽、溶劑化物、酯和前藥。本發(fā)明也包括經(jīng)同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物，該經(jīng)同位素標(biāo)記的化合物與本文所述的化合物相同，但事實(shí)上一個(gè)或多個(gè)原子經(jīng)原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)與通常發(fā)現(xiàn)于自然界的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同的原子置換?？蓳饺氡景l(fā)明化合物的同位素的實(shí)例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分別諸如2H、3H、l3C、14C、15n、180、170、31P、32P、35S、'8f和36Q。某些經(jīng)同位素標(biāo)記的上文所述的化合物(例如經(jīng)SH和"C標(biāo)記的彼等化合物)可用于化合物和/或基質(zhì)組織分布測(cè)定中。氚化(也即3印和碳-14(也即"C)同位素因其易于制備和可檢測(cè)性而尤其較佳。此外，以諸如氖(也即2巧的較重同位素進(jìn)行的取代可因?yàn)榇x穩(wěn)定性較強(qiáng)而提供某些治療優(yōu)勢(shì)(例如活體內(nèi)半衰期增加或劑量需求減少)，因此可在某些情況下較佳。經(jīng)同位素標(biāo)記的上文所述的化合物一般可按照與下文流程和/或?qū)嵤├兴沂镜某绦蝾愃频某绦?，藉由用適當(dāng)?shù)慕?jīng)同位素標(biāo)記的試劑取代未經(jīng)同位素標(biāo)記的試劑來進(jìn)行制備。本發(fā)明中意欲包括上文所述的化合物和上文所述化合物的鹽、溶劑化物、酯和前藥的多晶型形式。上文所述的化合物可為人類雙微體2蛋白或小鼠雙微體2蛋白與P-53蛋白相互作用的抑制劑或拮抗劑，且其可為細(xì)胞中P-53蛋白的活化劑。另外，上文所述的化合物的藥理學(xué)特性可用于治療或預(yù)防癌癥；治療或預(yù)防與異常細(xì)胞增殖相關(guān)的其他疾病病況；以及治療或預(yù)防由細(xì)胞中的不當(dāng)p53蛋白含量引起的疾病。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，術(shù)語"癌癥"為機(jī)體細(xì)胞可能變得異常且不受控制地分裂的疾病的名稱。上文所述的化合物可用于治療多種癌癥，包括(但不限于)癌，包括(但不限于)膀胱癌、乳癌、結(jié)腸癌、直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、肝癌、肺癌、頭頸癌、食道癌、膽嚢癌、宮頸癌、胰腺癌、前列腺癌、喉癌、卵巢癌、胃癌、子宮癌、肉瘤和曱狀腺癌；淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤，包括白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、急性淋巴母細(xì)胞白血病、B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤、骨髓瘤和伯基特氏淋巴瘤；骨髓系造血系統(tǒng)腫瘤，包括急性和慢性髓細(xì)胞性白血病、骨髓發(fā)育不良綜合征和前髓細(xì)胞性白血?。婚g質(zhì)細(xì)胞起源的腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤，包括星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和神經(jīng)鞘瘤；和其他胂瘤，包括黑素瘤、皮膚(非黑素瘤)癌、間皮瘤(細(xì)胞)、精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、著色性干皮病、角化棘皮瘤、曱狀腺濾泡狀癌和卡波西氏肉瘤。歸因于p53于調(diào)控細(xì)胞凋亡(細(xì)胞死亡)方面的關(guān)鍵作用，式(I)的化合物可充當(dāng)誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的藥物，其可用于治療特征為異常細(xì)胞增殖的任何疾病過程，例如各種起源和組織類型的癌癥、炎癥、免疫病癥。歸因于HDM2和p53于調(diào)控細(xì)胞增殖方面的關(guān)^l定作用，上文所述的化合物可充當(dāng)可逆性細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑，其可用于治療特征為異常細(xì)胞增殖的任何疾病過程，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤性息肉病、神經(jīng)纖維瘤、動(dòng)脈粥樣硬化、肺纖維化、關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、腎小球性腎炎、血管成形術(shù)或血管手術(shù)后再狹窄、變形性瘢痕形成、炎癥性腸病、移植排斥、內(nèi)毒素休克和真菌感染。上文所述的化合物也可用于化學(xué)預(yù)防癌癥?；瘜W(xué)預(yù)防定義為藉由阻斷誘變事件的起始或藉由阻斷已受損害的癌前細(xì)胞的進(jìn)展來抑制侵入性癌癥的發(fā)展，或抑制腫瘤復(fù)發(fā)。上文所述的化合物也可用于抑制腫瘤血管生成和癌轉(zhuǎn)移。較佳劑量為每天每公斤體重大約0.001mg-500mg上文所述的化合物。尤其較佳的劑量為每天每公斤體重大約0.01mg-25mg上文所述的化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥。若調(diào)配為固定劑量，則該組合產(chǎn)物使用在本文所述的劑量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物和在其劑量范圍內(nèi)的其他藥用活性劑或治療。當(dāng)組合調(diào)配不適當(dāng)時(shí)，上文所述的化合物也可與已知抗癌藥或細(xì)胞毒性劑依次給予。本發(fā)明不受給藥次序的限制；上文所述的化合物可在給予已知抗癌藥或細(xì)胞毒性劑之前給予或在其之后給予。該技術(shù)在本領(lǐng)域技術(shù)人員以及主治醫(yī)師的技術(shù)范圍內(nèi)。較佳化合物可展現(xiàn)出小于大約15(im、較佳為大約0.001|am-大約15.0|_im、更佳為大約0.001fim-大約9pm、更佳為大約0.001-大約3(im的ICso或EQo值。37在再一實(shí)施方案中，本發(fā)明揭示用于制備包含上文所述的化合物作為活性成分的藥用組合物的方法。在本發(fā)明的藥用組合物和方法中，活性成分通常將以與關(guān)于預(yù)定給藥形式適當(dāng)選擇且與常規(guī)醫(yī)藥實(shí)踐相符的適當(dāng)載體材料的混合物形式給予，該預(yù)定給藥形式也即口服片劑、膠嚢劑(固體填充、半固體填充或液體填充)、重建用散劑、口服凝膠劑、酏劑、可分散顆粒劑、糖漿劑、混懸劑等形式。舉例而言，就經(jīng)口給藥的片劑或膠嚢劑形式而言，可將活性藥物組分與任何經(jīng)口無毒的藥學(xué)上可接受的惰性載體組合，所述載體諸如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石、甘露醇、乙醇(液體形式)等等。此外，當(dāng)需要時(shí)或視需要，也可將適當(dāng)?shù)恼澈蟿?、?rùn)滑劑、崩解劑和著色劑摻入混合物中。散劑和片劑可包含大約5%至大約95%的本發(fā)明組合物。適當(dāng)粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖、玉米甜味劑、天然和合成樹膠(諸如阿拉伯膠)、海藻酸鈉、羧曱基纖維素、聚乙二醇和蠟。這些劑型中的潤(rùn)滑劑包括硼酸、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等等。崩解劑包括淀粉、曱基纖維素、瓜爾膠等等。適當(dāng)時(shí)也可包括甜味劑和調(diào)味劑和防腐劑。上文所述的一些術(shù)語，即崩解劑、稀釋劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑等將于下文中進(jìn)行更詳細(xì)地討論。性成分中任一種或一種以上以受控速率釋放，從而使治療作用(也即抗細(xì)胞增殖活性等)最佳化。用于持續(xù)釋放的適當(dāng)劑型包括含有浸透活性組分且成形為片劑形式的、崩解速率不同或控釋的多層聚合基質(zhì)的多層片劑；或含有這種浸透或封裝多孔聚合基質(zhì)的膠嚢。液體形式的制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑。舉例而言，非經(jīng)腸注射劑中可包括水或水-丙二醇溶液，或可加入甜味劑和安慰劑(pacifiers)用于口服溶液劑、混懸劑和乳劑。液體形式的制劑也可包括鼻內(nèi)給藥的溶液。適于吸入的氣霧劑可包括溶液劑和粉末形式的固體，其可與藥學(xué)上可接受的載體(諸如惰性壓縮氣體，例如氮?dú)?組合。對(duì)于制備栓劑而言，首先將諸如脂肪酸甘油脂混合物(諸如可可油)的低熔點(diǎn)蠟熔融，且通過攪拌或類似混合將活性成分均勻分散于其中。接著將熔融的均勻混合物傾入便利尺寸的模具中，使其冷卻固化。也包括意欲在臨用前轉(zhuǎn)化為經(jīng)口或非經(jīng)腸給藥的液體形式制劑的固體形式的制劑。這些液體形式包括溶液劑、混懸劑和乳劑。本發(fā)明的化合物也可經(jīng)皮傳遞。經(jīng)皮組合物可采取乳膏、洗劑、氣霧劑和/或乳劑的形式，并可包括在用于該目的的本領(lǐng)域常規(guī)的基質(zhì)或儲(chǔ)庫型透皮貼劑中。較佳經(jīng)口給予化合物。藥用制劑較佳采用單位劑型。在該形式中，將制劑再分為含有適量(例如達(dá)成所需目的的治療量)活性組分的適宜大小的單位劑量。根據(jù)特定應(yīng)用，單位劑量制劑中本發(fā)明活性組合物的量一般可在大約大約1.0毫克-大約1,000毫克、較佳大約1.0毫克-大約500毫克且通常大約1毫克-大約250毫克內(nèi)變化或在該范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。所使用的實(shí)際劑量可視患者的年齡、性別、體重和所治療病況的嚴(yán)重程度而變化。該技術(shù)已為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。所使用的實(shí)際劑量可視患者的需求和所治療病況的嚴(yán)重程度而變化。特定情況下適當(dāng)劑量方案的確定在本領(lǐng)域的技術(shù)范圍內(nèi)。為方便起見，視需要可將總?cè)談┝糠殖蓴?shù)份并在一天內(nèi)逐份給予。一般而言，含有活性成分的人類口服劑型可每天給予1或2次。給藥量和頻率將根據(jù)主治臨床醫(yī)師的判斷加以調(diào)控。經(jīng)口給藥的一般推薦每日劑量方案可以單次或分次劑量在每天大約1.0毫克-大約1,000毫克的范圍內(nèi)。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含上文所述化合物作為活性成分的藥用組合物用于治療癌癥、異常細(xì)胞增殖和其他與HDM2或p53相關(guān)的疾病的用途。該藥用組合物一般另外包含藥學(xué)上可接受的載體稀釋劑、賦形劑或載劑(在本文中統(tǒng)稱為載體材料)。本發(fā)明的再一方面為一種制備藥盒的方法，該藥盒包含一定量的至少一種上文所述的化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥和一定量的至少一種上文所列的抗癌療法和/或抗癌藥，其中該量的該兩種或兩種以上成分產(chǎn)生所需治療作用。本發(fā)明的又一方面為藥盒的用途，該藥盒包含一定量的至少一種上文所述的化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥和一定量的至少一種上文所列的抗癌療法和/或抗癌藥，其中該量的該兩種或兩種以上成分產(chǎn)生治療有此需要的哺乳動(dòng)物的所需治療作用。膠嚢是指由曱基纖維素、聚乙烯醇或變性明膠或淀粉所制成的用于保持或容納包含活性成分的組合物的特殊容器或外殼。硬殼膠嚢通常由具有相對(duì)高凝膠強(qiáng)度的骨骼和豬皮明膠的混合物制成。膠嚢本身可含有少量染料、遮光劑、增塑劑和防腐劑。片劑是指含有活性成分和適當(dāng)稀釋劑的壓縮或模制固體劑型。可通過壓縮經(jīng)濕法制粒、干法制粒或由壓實(shí)所獲得的混合物或顆粒來制備片劑?？诜z是指分散或溶解于親水性半固體基質(zhì)中的活性成分。重建用散劑是指含有活性成分與適當(dāng)稀釋劑的粉末摻和物，其可懸浮于水或汁液中。稀釋劑是指通常組成組合物或劑型的主要部分的物質(zhì)。適當(dāng)稀釋劑包括糖，諸如乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨糖醇；得自小麥、玉米、稻和馬鈴薯的淀粉；和纖維素，諸如微晶纖維素。組合物中稀釋劑的量可在占總組合物大約10重量％-大約90重量％、較佳大約25重量％-大約75重量％、更佳大約30重量％-大約60重量%、甚至更佳大約12重量％-大約60重量％的范圍內(nèi)。崩解劑是指加入至組合物中以幫助其破裂(崩解)并釋放藥物的物質(zhì)。適當(dāng)崩解劑包括淀粉；"冷水可溶"的改性淀粉，諸如羧曱基淀粉鈉；天然和合成樹膠，諸如槐豆膠、刺梧桐樹膠、瓜爾膠、西黃蓍膠和瓊脂；纖維素衍生物，諸如曱基纖維素和羧曱基纖維素鈉；微晶纖維素和交聯(lián)微晶纖維素，諸如交聯(lián)羧曱基纖維素鈉；海藻酸鹽，諸如海藻酸和海藻酸鈉；翻土，諸如膨潤(rùn)土；和起泡混合物。組合物中崩解劑的量可在占組合物大約2重量％-大約15%、更佳大約4重量％-大約10重量°/。的范圍內(nèi)。粘合劑是指將粉末粘合或"膠粘"在一起且藉由形成顆粒使其粘合從而用作制劑中的"粘著劑"的物質(zhì)。粘合劑使稀釋劑或膨脹劑中已獲得的粘合強(qiáng)度增加。適當(dāng)粘合劑包括糖，諸如蔗糖；得自小麥、玉米、稻和馬鈴薯的淀粉；天然樹膠，諸如阿拉伯膠、明膠和西黃蓍膠；海藻衍生物，諸如海藻酸、海藻酸鈉和海藻酸鈣銨；纖維素材料，諸如曱基纖維素、羰曱基纖維素鈉和羥丙基曱基纖維素；聚乙烯吡咯烷酮；和無機(jī)物，諸如硅酸鎂鋁。組合物中粘合劑的量可在占組合物大約2重量％-大約20重量％、更佳大約3重量％-大約10重量％、甚至更佳大約3重量％-大約6重量％的范圍內(nèi)。潤(rùn)滑劑是指加入至劑型中以使片劑、顆粒劑等在壓縮后能夠藉由減小摩擦或磨損而自模具或沖模中釋放的物質(zhì)。適當(dāng)潤(rùn)滑劑包括金屬硬脂酸鹽，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鉀；硬脂酸；高熔點(diǎn)蠟；和水溶性潤(rùn)滑劑，諸如氯化鈉、苯曱酸鈉、乙酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇和d，l-亮氨酸。由于潤(rùn)滑劑必須存在于顆粒表面和顆粒與壓片部件之間，故一般在壓縮前的最后一個(gè)步驟加入潤(rùn)滑劑。組合物中潤(rùn)滑劑的量可在占組合物大約0.2重量％-大約5重量％、較佳大約0.5重量％-大約2重量％、更佳大約0.3重量％-大約1.5重量°/。的范圍內(nèi)。助流劑為防止結(jié)塊且改良顆粒的流動(dòng)性從而使流動(dòng)平滑和均勻的材料。適當(dāng)助流劑包括二氧化硅和滑石。組合物中助流劑的量可在占總組合物大約0.1重量％-大約5重量％、較佳大約0.5重量％41-大約2重量％的范圍內(nèi)。著色劑為對(duì)組合物或劑型提供著色的賦形劑。該賦形劑可包括食品級(jí)染料和吸附于適當(dāng)吸附劑(諸如粘土或氧化鋁)上的食品級(jí)染料。著色劑的量可在占組合物大約0.1重量°/。-大約5重量％、較佳大約0.1重量％-大約1重量％的范圍內(nèi)變化。在再一實(shí)施方案中，本發(fā)明揭示用于制備包含上文所述化合物作為活性成分的藥用組合物的方法。在本發(fā)明的藥用組合物和方法中，活性成分通常將以與關(guān)于預(yù)定給藥形式適當(dāng)選擇且與常規(guī)醫(yī)藥實(shí)踐相符的適當(dāng)載體材料的混合物形式給予，該預(yù)定給藥形式也即口服片劑、膠嚢劑(固體填充、半固體填充或液體填充)、重建用散劑、口服凝膠劑、酏劑、可分散顆粒劑、糖漿劑、懸浮劑等等。舉例而言，就經(jīng)口給予片劑或膠嚢劑形式而言，可將活性藥物組分與任何經(jīng)口無毒的藥學(xué)上可接受的惰性載體組合，所述載體諸如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石、甘露醇、乙醇(液體形式)等等。此外，當(dāng)需要時(shí)或視需要，也可將適當(dāng)?shù)恼澈蟿?、?rùn)滑劑、崩解劑和著色劑摻入混合物中。散劑和片劑可包含大約5%至大約95%的本發(fā)明組合物。適當(dāng)粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖、玉米甜味劑、天然和合成樹膠(諸如阿拉伯膠、海藻酸鈉、羰曱基纖維素、聚乙二醇和蠟。這些劑型中的潤(rùn)滑劑包括硼酸、苯曱酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等等。崩解劑包括淀粉、曱基纖維素、瓜爾膠等等。適當(dāng)時(shí)也可包括甜味劑和調(diào)味劑和防腐劑。上文所述的一些術(shù)語，即崩解劑、稀釋劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑將于下文中進(jìn)4亍更詳細(xì)地討i侖。此外，本發(fā)明的組合物可調(diào)配為持續(xù)釋放形式以使該組分或活性成分中任一種或一種以上以受控速率釋放，從而使治療作用(也即抗細(xì)胞增殖活性等)最佳化。用于持續(xù)釋放的適當(dāng)劑型包括含有浸透活性組分且成形為片劑形式的、多層崩解速率不同或受控釋放的聚合基質(zhì)的多層片劑；或含有這種浸透或封裝多孔聚合基質(zhì)的膠嚢劑。液體形式的制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑。舉例而言，非經(jīng)腸注射劑中可包括水或水-丙二醇溶液，或可加入甜味劑和安慰劑(pacifiers)用于口服溶液劑、混懸劑和乳劑。液體形式的制劑也可包括鼻內(nèi)給藥用的溶液劑。適于吸入的氣霧劑可包括溶液和粉末形式的固體，其可與藥學(xué)上可接受的載體(諸如惰性壓縮氣體，例如氮?dú)?組合。對(duì)于制備栓劑而言，首先將諸如脂肪酸甘油脂混合物(諸如可可油)的低熔點(diǎn)蠟熔融，且通過攪拌或類似的混合將活性成分均勻分散于其中。接著將熔融的均勻混合物傾入便利尺寸的模具中，使其冷卻固化。也包括意欲在臨用前轉(zhuǎn)化為經(jīng)口或非經(jīng)腸給藥的液體形式制劑的固體形式的制劑。該液體形式包括溶液劑、混懸劑和乳劑。本發(fā)明的化合物也可經(jīng)皮傳遞。經(jīng)皮組合物可采取乳膏、洗劑、氣霧劑和/或乳劑的形式，并可包括在用于該目的的在本領(lǐng)域中常規(guī)的基質(zhì)或儲(chǔ)庫型透皮貼劑中。較佳經(jīng)口給予化合物。藥用制劑較佳采用單位劑型。在該形式中，將制劑再分為含有適量(例如達(dá)成所需目的的治療量)活性組分的適宜大小的單位劑量。根據(jù)特定應(yīng)用，單位劑量制劑中本發(fā)明活性組合物的量一般可在大約大約1.0毫克-大約1,000毫克、較佳大約1.0毫克-大約500毫克且通常大約1毫克-大約250毫克內(nèi)變化或在該范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。所使用的實(shí)際劑量可視患者的年齡、性別、體重和所治療的病況的嚴(yán)重程度而變化。該技術(shù)已為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。所使用的實(shí)際劑量可視患者的需求和所治療病況的嚴(yán)重程度而變化。特定情況下適當(dāng)劑量方案的確定在本領(lǐng)域的技術(shù)范圍內(nèi)。為方便起見，視需要可將總?cè)談┝糠殖蓴?shù)份并在一天內(nèi)逐份給予。一般而言，含有活性成分的人類口服劑型可每天給予1或2次。給藥量和給藥頻率將根據(jù)主治臨床醫(yī)師的判斷加以調(diào)控。經(jīng)口給藥的一般推薦每日劑量方案可以單次或分次劑量在每天大約1.0毫克-大約1,000毫克的范圍內(nèi)。生物利用度是指當(dāng)與標(biāo)準(zhǔn)或?qū)φ障啾葧r(shí)將活性藥物成分或治療部分自所給予的劑型吸收至全身循環(huán)中的速率和程度。已知用于制備片劑的常規(guī)方法。這些方法包括干法，諸如直接壓縮和壓縮由壓實(shí)產(chǎn)生的顆粒；或濕法或其他特殊程序。制備其他給藥劑型(諸如膠嚢劑、栓劑等等)的常規(guī)方法也為人所熟知。由以下制備和實(shí)施例例示說明本文所揭示的本發(fā)明，不應(yīng)將該制備和實(shí)施例解釋為限制本發(fā)明的范疇。替代性機(jī)制途徑和類似結(jié)構(gòu)將為本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見。實(shí)施例除非另作說明，否則以下實(shí)施例中的以下縮寫將具有指定含義N，N-二異丙基乙胺iPr2Net高分辨質(zhì)譜HRMS高效液相色譜HPLC低分辨質(zhì)譜LRMS納摩爾濃度nM底物/受體復(fù)合物的抑制常數(shù)Ki結(jié)合聚苯乙烯的碳二亞胺樹脂PS-CDI四氟硼酸O-(苯并三唑-l-基)-N,N,N',N'-四曱基脲輸TBTU質(zhì)子核》茲共振'HNMR提供液相層析質(zhì)譜資料，使用AppliedBiosystemsAPI-100質(zhì)i普儀和ShimadzuSCL-10ALC管柱進(jìn)行分析(提供母體離子的觀察值(M+)):LCMS:44TEA/CH2CI27種衍生物(A-G)3AR=4-PhBR=4-OMeCR=4-CH3DR=4-CIER=4-CF3F:R=3-PhG.R=2-CH3達(dá)成50%最大活性的有效濃度EC50達(dá)成50°/。最大活性的抑制濃度IC50毫升mL毫摩爾mmol微升pi克g毫克mg室溫rt(環(huán)境)大約25。C本發(fā)明所使用的上文所述的化合物用本領(lǐng)域中已知的方法(例如根據(jù)流程1及其后的制備實(shí)施例所示的通用反應(yīng)次序)制備流程OH"PhCH2Br,NaOMe/MeOH-2)NaBH4步驟l:苯曱基-1,2,5,6-四氫-3-吡啶基.苯甲基醚n)向由600mL曱醇制備的甲醇鈉(62.4g,1.16mol)溶液中加入3-羥基吡啶(100g，1.05mol)。加入苯曱基溴(375mL,3.15mol)后，使溶液回流過夜。冷卻至室溫后，分?jǐn)?shù)份加入硼氬化鈉(79.4g,2.1mol)。在真空中除去溶劑且將殘余物與650mL水、64g碳酸鉀和800mL乙醚一起攪拌1小時(shí)，得到兩個(gè)均勻液相。分離乙醚相，用碳酸鉀干燥且在真空中蒸發(fā)得到褐色油狀物。在用力攪拌下，向此油狀物于20mL乙醚中的溶液緩慢加入2.1L乙醚和35gC鹽521(Ceite521)，并再持續(xù)攪拌30分鐘。在真空中蒸發(fā)濾液，得到所需物質(zhì)苯曱基-l，2,5,6-四氫-3-吡啶基.苯甲基醚(294g，100%)。步驟2:1-苯甲基-3.3-二羥基哌啶氫溴酸鹽(2)使苯曱基-1，2，5,6-四氫-3-吡啶基.苯甲基醚(1，294g,1.05mol)于48%HBr(385mL，7.77mol)中的溶液回流3小時(shí)。冷卻至室溫后，用乙醚(4X300mL)萃取反應(yīng)混合物。在真空中蒸發(fā)水層得到油狀物，使其結(jié)晶(丁酮)得到所需物質(zhì)1-苯曱基-3,3-二羥基哌啶氫溴酸鹽(129g.43%)。步驟3:1-苯甲基-3-哌啶酮(3)向懸浮于3.5LCH2C12中的1-苯曱基-3-哌啶酮?dú)滗逅猁}(2，464g，1.61mol)中加入三乙胺(247mL,1.77mol),隨后攪拌3小時(shí)。用H20(3.5LX2)和4L鹽水洗滌所得混合物，隨后用MgS04干燥，過濾且除去CH2Cl2，得到所需物質(zhì)l-苯曱基-3-哌啶酮(305g,100%)。步驟4:使用7種酚制備7種衍生物(4):A.l-笨曱基-3-(聯(lián)苯-4-基氧基V哌啶-3-甲酸將氫氧化鈉(212g,5.28mol)加入至攪拌的4-苯基酚(100g,0.588mol)于3L無水四氫呋喃中的溶液中。3小時(shí)后，加入l-苯甲基-3-哌咬酮(3,444g,2.35mol),將混合物冷卻至0。C且逐滴加入無水氯仿(282mL，2.52mol)。使反應(yīng)混合物在0。C保持1小時(shí)且隨后將其加熱至40。C歷時(shí)23小時(shí)，在室溫下攪拌過夜。減壓除去四氬呋喃。將殘余物懸浮于水(3L)中且用乙醚(3L)加以洗滌。用6NHC1將水層酸化至pH5，過濾且用CH2C12洗滌，得到所需物質(zhì)l-苯曱基-3-(聯(lián)苯-4-基氧基)-哌啶-3-曱酸(156g,68.5%)。B.l-笨曱基-3-(4-曱氧基-苯氧基V哌啶-3-曱酸將氫氧化鈉(290g,7.26mol)加入至經(jīng)攪拌的4-甲氧基酚(100g,0.8mol)于無水四氫呋喃(3L)中的溶液中。3小時(shí)后，加入l-苯曱基-3-哌咬酮(3,610g，3.22mol)，將混合物冷卻至0。C且逐滴加入無水氯仿(386mL，4.84mol)。使反應(yīng)混合物在0。C保持]小時(shí)且隨后將其加熱至40°C歷時(shí)23小時(shí)，在室溫下攪拌過夜。減壓除去四氫呋喃。將殘余物懸浮于水(3L)中且用乙醚(3L)加以洗滌。用6NHC1將水層酸化至pH5，過濾且用CH2C12洗滌，得到所需物質(zhì)1-苯曱基-3-(4-甲氧基-苯氧基)-哌啶-3-曱酸(135g，49.0%)。C.l-苯曱基-3-對(duì)曱苯氧基-哌啶-3-曱酸將氫氧化鈉(260g,6.5mol)加入至經(jīng)攪拌的對(duì)曱酚(78g，0.72mol)于3L無水四氬呋喃中的溶液中。3小時(shí)后，加入l-笨曱基-3-哌啶酮(3，547g，2.89mol)，將混合物冷卻至0。C且逐滴加入無水氯仿(347mL，4.33mol)。使反應(yīng)混合物在0。C保持1小時(shí)且隨后使其加熱至40。C歷時(shí)23小時(shí)，在室溫下攪拌過夜。減壓除去四氫呋喃。將殘余物懸浮于水(2.5L)中且用乙醚(2.5L)加以洗滌。用6NHC1將水層酸化至pH5，過濾且用CH2Cl2洗滌，得到所需物質(zhì)l-苯曱基-3-對(duì)曱苯氧基-哌啶-3-曱酸(120g,52.0%)。D.-笨曱基-3-(4-氯-笨氧基)-哌啶-3-曱酸將氫氧化鈉(381g，9.53mol)加入至攪拌的4-氯酚(136g,1.06mol)于無水四氫呋喃(3L)中的溶液中。3小時(shí)后，加入l-苯曱基-3-哌咬酮(3,801g,4.23mol)，將混合物冷卻至0。C且逐滴加入無水氯仿(508mL,6.35mol)。使反應(yīng)混合物在0。C保持1小時(shí)且隨后將其加熱至40。C歷時(shí)23小時(shí)，在室溫下攪拌過夜。減壓除去四氬呋喃。將殘余物懸浮于水(3L)中且用乙醚(3L)加以洗滌。用6NHC1將水層酸化至pH5,過濾且用CH2Cl2洗滌，得到所需物質(zhì)1-苯曱基-3-(4-氯-苯氧基)-哌啶-3-曱酸(210g，57.4%)。E.1-苯甲基-3-(4-三氟曱基-笨氧基)-哌啶-3-曱酸將氫氧化鈉(222g，5.55mol)加入至經(jīng)攪拌的4-三氟曱基苯酚(100g，0.62mol)于無水四氫呋喃(3L)中的溶液。3小時(shí)后，加入1-苯曱基-3-p底。定S同(3，467g,2.47mol)，將混合物冷卻至0。C且逐滴加入無水氯仿(2%mL,3.7mol)。使反應(yīng)混合物在0。C保持1小時(shí)且隨后使其達(dá)到40°C歷時(shí)23小時(shí)，在室溫下攪拌過夜。減壓除去四氫呋喃。將殘余物懸浮于水(3L)中且用乙醚(3L)加以洗滌。用6NHC1將水層酸化至pH7，過濾且用CH2Cl2洗滌，得到所需物質(zhì)1-苯甲基-3-(4-三氟曱基-苯氧基)-哌啶-3-甲酸(146g,62.4%)。F.l-苯甲基-3-(聯(lián)笨-3-基氧基)-哌啶-3-曱酸將氬氧化鈉(212g，5.28mol)加入至經(jīng)攪拌的3-苯基酚(100g，0.588mol)于無水四氫^^喃(3L)中的溶液中。3小時(shí)后，加入1-苯甲基-3-哌咬酮(3,444g，2.35mol)，將混合物冷卻至0。C且逐滴加入無水氯仿(282mL,2.52mol)。使反應(yīng)混合物在0。C保持1小時(shí)且隨后使其達(dá)到40。C歷時(shí)23小時(shí)，在室溫下攪拌過夜。減壓除去四氫呋喃。將殘余物懸浮于水(3L)中且用乙醚(3L)加以洗滌。用6NHC1將48水層酸化至pH5，過濾且用CH2Cl2洗滌，得到所需物質(zhì)1-苯曱基-3-(聯(lián)苯-3-基氧基)-哌啶-3-甲酸(80g,35.2%)。G.l-苯曱基-3-鄰曱苯氧基-哌啶-3-曱酸將氫氧化鈉(332g，8.3mol)加入至經(jīng)攪拌的鄰曱酚(100g,0.925mol)于無水四氬呋喃(2L)中的溶液中。3小時(shí)后，加入l-苯甲基-3-哌咬酮(3，700g,3.67mol),將混合物冷卻至0°C且逐滴加入無水氯仿(440mL，5.55mol)。使反應(yīng)混合物在0。C保持1小時(shí)且隨后將其加熱至60。C歷時(shí)23小時(shí)，在室溫下攪拌過夜。減壓除去四氫呋喃。將殘余物懸浮于水(2.5L)中且用乙醚(2.5L)加以洗滌。用6NHC1將水層酸化至pH7,用二氯甲烷萃取且以MgS04進(jìn)行干燥。將粗混合物(380g)懸浮于乙酸乙酯(4L)中并加入環(huán)己胺(170mL)。攪拌混合物1小時(shí)且將其在冰箱中儲(chǔ)存2天。過濾沉淀且用CH2Cb加以洗滌。將鹽(100g)懸浮于二氯曱烷(1L)中，加入6NHCl(43mL,0.26mol),隨后過濾固體并用二氯曱烷和乙醚洗滌，得到所需物質(zhì)1-苯曱基-3-鄰曱苯氧基-哌咬-3-曱酸(40g，13.3%)。流程2R1和R2為藉由偶聯(lián)相應(yīng)胺而形成的衍生物。R3為藉由加入相應(yīng)羧酸而形成的衍生物。49在室溫下，向完全溶解于25%乙醇/75%乙酸乙酯(400mL)中的4(1當(dāng)量，18mmol,6.9g)和N,N-二異丙基乙胺(5當(dāng)量，91mmol，15.8mL)中加入二碳酸二叔丁酯(l當(dāng)量，18mmol,4.0g)于乙酸乙酯(50mL)中的溶液，隨后加入5%披鈀碳(30重量％，2.0g)。用隔片密封反應(yīng)容器，用氬氣進(jìn)行凈化且使氫氣通過溶劑歷時(shí)2分鐘。室溫下，在氬氣氛下攪拌反應(yīng)混合物15小時(shí)，隨后使其經(jīng)硅藻土過濾且在真空中濃縮，得到呈灰白色固體狀的相應(yīng)二異丙基乙胺鹽形式的5，不經(jīng)進(jìn)一步純化即加以使用。步驟6:R1HN"PS-CDI,HOBt,iPr2NEt,DMFR2)HCI,二哪烷.NHHCI向N,N-二曱基曱酰胺(0.67mL)和N，N-二異丙基乙胺(3.0當(dāng)量，0.3mmol，52uL)中的5(即步驟1的產(chǎn)物)(O.lmmol)中加入1-羥基苯并三峻(l.O當(dāng)量，0.1mmol,14mg)、6(1.5當(dāng)量，0.15mmol，29mg)和以1.3mmol/g裝載的結(jié)合聚苯乙烯的碳二亞胺樹脂(3.0當(dāng)量，0.3過夜且用四氫呋喃(3mL)中的MP-三胺和MP-異氰酸酯樹脂(過量)凈化2小時(shí)。過濾除去樹脂且在真空中除去溶劑。將粗反應(yīng)混合物溶解于1，4-二噁烷(3mL)中的4N鹽酸且在室溫下震蕩2小時(shí)，隨后在真空中進(jìn)行蒸發(fā)。不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用粗殘余物(7)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>向7(即步驟2的產(chǎn)物)(l.O當(dāng)量，0.2mmol,100mg)中加入N,N-二甲基曱酰胺(6.7mL)和N,N-二異丙基乙胺(4.0當(dāng)量，0.8mmol，140uL)中的8(1.5當(dāng)量，0.3mmol,58mg)和l-羥基苯并三唑(l.O當(dāng)量，0.2mmol,27mg)。加入以1.3mmol/g裝載的結(jié)合聚苯乙烯的碳二亞胺樹脂(3.0當(dāng)量，0.6mmol，462mg)且在室溫下震蕩過夜。過濾除去樹脂，在真空中除去溶劑且藉由HPLC-MS純化粗殘余物，得到TFA鹽形式的制備的目標(biāo)化合物。將固體溶解于乙腈/H20溶液(l:l，共1.0mL)和1.0N鹽酸(200uL)中且冷凍干燥，得到相應(yīng)鹽酸鹽形式的制備1(9)的目標(biāo)化合物(M+:636.2)?？山逵梢阎椒ㄈ菀椎卦u(píng)估本發(fā)明的化合物以測(cè)定對(duì)HDM2蛋白的活性，諸如測(cè)量達(dá)成50。/。最大活性的抑制濃度(FPIC5o)和抑制劑結(jié)合的解離常數(shù)(FPKi)的熒光偏振篩選測(cè)定法。[Zhang等人，J.AnalyticalBiochemistry331:138-146(2004)]。此外，使用細(xì)胞活力測(cè)定法測(cè)試化合物對(duì)HDM2蛋白的活性，該細(xì)胞活力測(cè)定法在經(jīng)本發(fā)明的化合物處理一段時(shí)間(例如72小時(shí))后基于量化所存在的ATP量(細(xì)胞活力ICsQ)來測(cè)定培養(yǎng)物中存活細(xì)胞的數(shù)量[CellTiter-G1。⑧LuminescentCellViabilityAssay,來自Promega]。本申請(qǐng)的化合物展現(xiàn)出低于50.0jiM的FPIC50、FPKi和細(xì)胞活力ICso值。代表性化合物的HDM2抑制活性展示于下表1中。<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>根據(jù)上述測(cè)試結(jié)果，本領(lǐng)域技術(shù)人員將了解，本發(fā)明的化合物于治療與HDM2蛋白和不當(dāng)p53蛋白含量相關(guān)的疾病(包括(但不限于)導(dǎo)致諸如癌癥的過度細(xì)胞增殖的疾病)中具有效用。權(quán)利要求1.一種抑制HDM2蛋白的方法，其包括向需要此抑制的哺乳動(dòng)物給予治療上可接受量的至少一種具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物和或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥。2.—種治療或預(yù)防一種或多種與HDM2相關(guān)的疾病的方法，其包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的至少一種具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑、酯或前藥。3.—種治療或預(yù)防一種或多種與p53相關(guān)的疾病，其包含向需要此治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的至少一種具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥。4.一種治療或預(yù)防一種或多種可與HDM2與p53的相互作用相關(guān)的疾病的方法，其包括向需要該治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的至少一種具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥。5.權(quán)利要求2的方法，其包括向需要該治療的哺乳動(dòng)物給予下列各物一定量的權(quán)利要求2所揭示的第一化合物；和一定量的至少一種第二化合物，其中該第二化合物為與權(quán)利要求2所揭示的化合物不同的抗癌藥；其中該量的該第一化合物和該第二化合物產(chǎn)生治療作用。6.權(quán)利要求3的方法，其包括向需要該治療的哺乳動(dòng)物給予下列各物一定量的權(quán)利要求3所揭示的第一化合物；和一定量的至少一種第二化合物，其中該第二化合物為與權(quán)利要求3所揭示的化合物不同的抗癌藥；其中該量的該第一化合物和該第二化合物產(chǎn)生治療作用。7.權(quán)利要求4的方法，其包括向需要該治療的哺乳動(dòng)物給予下列各物一定量的權(quán)利要求4所揭示的第一化合物；和一定量的至少一種第二化合物，其中該第二化合物為與權(quán)利要求4所揭示的化合物不同的抗癌藥；其中該量的該第一化合物和該第二化合物產(chǎn)生治療作用。8.權(quán)利要求2-7中任一項(xiàng)的方法，其中該疾病選自癌，包括但不限于膀胱癌、乳癌、結(jié)腸癌、直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、肝癌、肺癌、頭頸癌、食道癌、膽嚢癌、宮頸癌、胰腺癌、前列腺癌、喉癌、卵巢癌、胃癌、子宮癌、肉瘤和曱狀腺癌；淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤，包括白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、急性淋巴母細(xì)胞白血病、B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤、骨髓瘤和伯基特氏淋巴瘤；骨髓系造血系統(tǒng)腫瘤，包括急性和慢性髓細(xì)胞性白血病、骨髓發(fā)育不良綜合征和前髓細(xì)胞性白血??；間質(zhì)細(xì)胞起源的腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤，包括星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和神經(jīng)鞘瘤；和其他腫瘤，包括黑素瘤、皮膚(非黑素瘤)癌、間皮瘤(細(xì)胞)、精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、著色性干皮病、角化棘皮瘤、曱狀腺濾泡狀癌和卡波西氏肉瘤。9.權(quán)利要求2-7中任一項(xiàng)的方法，其另外包括放射療法、手術(shù)、化學(xué)療法、生物療法、激素療法、光動(dòng)力學(xué)療法或骨髓移植。10.權(quán)利要求5、6或7的方法，其中該抗癌藥選自細(xì)胞毒性劑、對(duì)抗癌癥和贅生性疾病的靶向治療劑(小分子、生物制劑、siRNA和微小RNA),抗代謝物，諸如曱氨喋呤、5-氟尿嘧啶、吉西他濱、氟達(dá)拉濱、卡培他濱；烷基化劑，諸如替莫唑胺、環(huán)磷酰胺；與DNA相互作用和破壞DNA的藥劑，諸如順鉑、奧沙利鉑、多柔比星；電離輻射，諸如放射療法；拓樸異構(gòu)酶II抑制劑，諸如依托泊苷、多柔比星；拓樸異構(gòu)酶I抑制劑，諸如伊立替康、托泊替康；微管蛋白相互作用劑，諸如紫杉醇、多西他賽、Abraxane、埃坡霉素；驅(qū)動(dòng)蛋白紡錘體蛋白抑制劑；紡錘體檢查點(diǎn)抑制劑；聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制劑；基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)抑制劑；蛋白酶抑制劑，諸如組織蛋白酶D和組織蛋白酶K的抑制劑；蛋白體或遍在蛋白化抑制劑，諸如硼替佐米；用于恢復(fù)野生型p53活性的突變型p53的活化劑；A泉病毒-p53;Bcl-2抑制劑，諸如ABT-263;熱休克蛋白(HSP)調(diào)節(jié)劑，諸如格爾德霉素和17-AAG;組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑，諸如伏林司他(SAHA);性激素調(diào)節(jié)劑；抗雌激素，諸如他莫昔芬、氟維司群，選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM),諸如雷洛昔芬，抗雄激素，諸如比卡魯胺、氟他胺，LHRH激動(dòng)劑，諸如亮丙立德，5a-還原酶抑制劑，諸如非那雄胺，細(xì)胞色素P450C17裂合酶(CYP450cl7)抑制劑，諸如阿比特龍，芳化酶抑制劑，諸如雷曲唑、阿那曲唑、依西美坦，EGFR激酶抑制劑，諸如吉非替尼、厄洛替尼、拉普替尼；雙重erbBl和erbB2抑制劑，諸如拉帕替尼；多目標(biāo)激酶(絲氨酸/蘇氨酸和/或酪氨酸激酶)抑制劑ABL激酶抑制劑，伊馬替尼和尼洛替尼，達(dá)沙替尼，VEGFR-1、VEGFR-2、PDGFR、KDR、FLT、c-Kit、Tie2、Raf、MEK和ERK抑制劑，諸如舒尼替尼、索拉非尼、凡德他尼、帕唑帕尼、阿昔替尼、PTK787，Polo樣激酶抑制劑，Aurora激酶抑制劑，JAK抑制劑，c-MET激酶抑制劑，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑，諸如CDK1和CDK2抑制劑SCH727965，PI3K抑制劑，mTOR抑制劑，諸如雷帕霉素、坦羅莫司和RAD001;和其他抗癌藥(也稱抗腫瘤藥)，其包括但不限于ara-C、阿霉素、環(huán)磷酰胺、卡鉑、尿嘧啶氮芥、氮芥、異環(huán)磷酰胺、美法侖、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三亞乙基蜜胺、三亞乙基硫代磷酰銨、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、鏈佐星、達(dá)卡巴嗪、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巰噤呤、6-硫鳥嘌呤、磷酸氟達(dá)拉濱、噴司他丁、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春瑞濱、諾維本、博來霉素、放線菌素D、道諾霉素、多柔比星、表柔比星、替尼泊苷、阿糖胞苷、培美曲塞、伊達(dá)比星、光神霉素、脫氧考福霉素、絲裂霉素C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷17a-炔雌醇、己烯雌酚、睪酮、潑尼松、氟曱睪酮、丙酸屈他雄酮、睪內(nèi)酯、醋酸曱地孕酮、曱潑尼龍、曱基睪酮、潑尼松龍、曲安西龍、氯烯雌醚、羥孕酮、氨魯米特、雌莫司汀、氟他胺、醋酸曱羥孕酮、托瑞米芬、戈舍瑞林、卡鉑、羥基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、屈洛昔芬、六曱蜜胺、貝克薩、Zevalin、Trisenox、Profimer、塞替派、六曱蜜胺(Altretamine)、Doxil、昂他克、Depocyt、Aranesp、Neupogen、Neulasta、Kepivance;法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，諸如SARASARtm(4-[2-[4-[(UR)-3，10-二溴-8-氯-6，1l-二氬-5H-苯并[5,6]環(huán)庚烷并[l,2-b]吡啶-ll-基-]-l-哌啶基]-2-氧代乙基]-哌啶甲酰胺、替吡法呢；干擾素,諸如IntronA、Peg-Intron;抗erbBl抗體，諸如西妥昔單抗、帕尼單抗；抗erbB2抗體，諸如曲妥珠單抗；抗CD52抗體，諸如阿侖珠單抗；抗CD20抗體，諸如利妥昔單抗；抗CD33抗體，諸如吉妥昔單抗奧佐米星；抗VEGF抗體，諸如阿瓦斯??；TRIAL配體，諸如來沙木單抗、馬帕木單抗和AMG-655;抗CTLA-4、CTA1、CEA、CD5、CD19、CD22、CD30、CD44、CD44V6、CD55、CD56、EpCAM、FAP、MHCII、HGF、IL-6、MUC1、PSMA、TAL6、TAG-72、TRAILR、VEGFR、IGF-2、FGF的才元體；抗IGF-1R抗體，諸如SCH717454。11.權(quán)利要求1的方法，其另外包括將藥學(xué)上可接受的載體加入至權(quán)利要求1所揭示的化合物中。12.—種靶向HDM2-p53相互作用以藉由激活p53活性來治療哺乳動(dòng)物疾病的方法，其包括向需要該治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥。13.權(quán)利要求1-7和12中任一項(xiàng)的方法，其中哺乳動(dòng)物為人類。14.一種保護(hù)哺乳動(dòng)物的正常健康細(xì)胞免受細(xì)胞毒性誘導(dǎo)的副作用的影響的方法，其包括向具有突變型P53的哺乳動(dòng)物給予至少一種權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或前藥，隨后給予不同于權(quán)利要求1的化合物的抗癌藥。15.權(quán)利要求14的方法，其中該另一抗癌藥為紫杉醇。16.權(quán)利要求12的方法，其中一定量的該第一化合物可與一定量的至少一種第二化合物同時(shí)、連續(xù)或相繼給予，該第一化合物為權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受之鹽、溶劑化物或酯，該第二化合物為與權(quán)利要求1的化合物不同的抗癌藥。全文摘要本發(fā)明揭示使用具有HDM2蛋白拮抗劑活性的化合物的方法，用以治療或預(yù)防癌癥、由異常細(xì)胞增殖引起的疾病、與HDM2相關(guān)的疾病或由不當(dāng)p53活性引起的疾病。文檔編號(hào)A61K31/4545GK101511361SQ200780032593公開日2009年8月19日申請(qǐng)日期2007年6月27日優(yōu)先權(quán)日2006年6月30日發(fā)明者B·R·萊惠,G·W·小奇普,王永霖,章魯明,耀馬申請(qǐng)人:先靈公司