專(zhuān)利名稱(chēng)：飽和噻喔啉衍生物及其作為代謝型谷氨酸受體配體的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類(lèi)新型化合物、含有所述化合物的藥物組合物，及所述化合物在治療中的用途。本發(fā)明還涉及制備所述化合物的方法及其制備過(guò)程中所用的新型中間體。
背景技術(shù)：
谷氨酸是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)。谷氨酸通過(guò)結(jié)合并從而活化細(xì)胞表面受體而對(duì)中樞神經(jīng)產(chǎn)生作用。根據(jù)受體蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征、受體將信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞中的方式以及藥理學(xué)特征，可將這些受體分為兩大類(lèi)離子型的和代謝型的谷氨酸受體。
代謝型谷氨酸受體(mGluRs)是G蛋白質(zhì)-偶合受體，它在與谷氨酸結(jié)合之后能活化許多種細(xì)胞內(nèi)第二信使系統(tǒng)。在完整哺乳動(dòng)物神經(jīng)元內(nèi)mGluRs的活化可誘發(fā)一種或多種下列響應(yīng)磷脂酶C的活化；磷酸肌醇(PI)水解的增加；細(xì)胞內(nèi)鈣的釋放；磷脂酶D的活化；腺苷酸環(huán)化酶的活化或抑制；環(huán)腺苷酸(cAMP)形成的增加或減少；鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶的活化；環(huán)鳥(niǎo)苷酸(cGMP)形成的增加；磷脂酶A2的活化；花生四烯酸釋放的增加；增加或降低電壓-和配體-控制的離子通道的活性。Schoepp等，Trends Pharmacol.Sci.1413(1993)；Schoepp，Neurochem.Int.24439(1994)；Pin等，Neuropharmacology 341(1995)；Bordi和Ugolini，Prog.Neurobiol.5955(1999)。
已通過(guò)分子克隆鑒定出八種不同的mGluR亞型，稱(chēng)為mGluR1至mGluR8。見(jiàn)Nakanishi，Neuron 131031(1994)；Pin等，Neuropharmacology 341(1995)；Knopfel等，J.Med.Chem.381417(1995)。通過(guò)某些mGluR亞型的另路剪接形式的表達(dá)還產(chǎn)生了進(jìn)一步的受體多樣性。Pin等，PNAS 8910331(1992)；Minakami等，BBRC 1991136(1994)；Joly等，J.Neurosci.153970(1995)。
根據(jù)氨基酸序列同源性、受體所使用的第二信使系統(tǒng)和它們的藥理學(xué)特征，代謝型谷氨酸受體亞型可細(xì)分為三組，組I、組II和組III mGluRs。組I mGluR包括mGluR1、mGluR5及其另路剪接變異體。激動(dòng)劑與這些受體的結(jié)合導(dǎo)致磷脂酶C的活化，和隨后的細(xì)胞內(nèi)鈣的遷移。
神經(jīng)病學(xué)、精神病學(xué)以及疼痛學(xué)疾病在闡明組I mGluRs的生理學(xué)作用的嘗試中，認(rèn)為這些受體的活化引發(fā)了神經(jīng)元刺激。各種研究證明組I mGluRs激動(dòng)劑在應(yīng)用于海馬、大腦皮質(zhì)、小腦和丘腦以及其它CNS區(qū)域中的神經(jīng)元時(shí)產(chǎn)生突觸后刺激。證據(jù)顯示這種刺激是由于突觸后mGluRs的直接活化，但也認(rèn)為發(fā)生突觸前的mGluRs活化，導(dǎo)致增加的神經(jīng)遞質(zhì)釋放。Baskys，Trends Pharmacol.Sci.1592(1992)；Schoepp，Neurochem.Int.24439(1994)；Pin等，Neuropharmacology 341(1995)；Watkins等，Trends Pharmacol.Sci.1533(1994)。
已知代謝型谷氨酸受體參與哺乳動(dòng)物CNS的許多正常過(guò)程。已表明mGluRs的活化對(duì)于誘導(dǎo)海馬長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)和小腦長(zhǎng)時(shí)程壓抑是需要的。Bashir等，Nature 363347(1993)；Bortolotto等，Nature 368740(1994)；Aiba等，Cell79365(1994)；Aiba等，Cell 79377(1994)。還證明了mGluR活化在傷害感受和止痛中的作用。Meller等，Neuroreport 4879(1993)；Bordi和Ugolini，Brain Res.871223(1999)。此外，認(rèn)為mGluR活化作用在許多其它正常過(guò)程中，包括突觸傳導(dǎo)、神經(jīng)元發(fā)育、神經(jīng)元凋亡、突觸塑性、空間認(rèn)知、嗅覺(jué)記憶、心臟活動(dòng)的中樞控制、覺(jué)醒、運(yùn)動(dòng)控制以及前庭眼球反射控制中起調(diào)節(jié)作用。Nakanishi，Neuron 131031(1994)；Pin等，Neuropharmacology 341；Knopfel等，J.Med.Chem.381417(1995)。
此外，也認(rèn)為組I的代謝型谷氨酸受體在許多種影響CNS的急性和慢性病理生理學(xué)過(guò)程和病癥中起作用。它們包括中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷、缺氧和局部缺血損傷、低血糖、癲癇和神經(jīng)變性疾病，例如阿耳茨海默氏病、精神疾病以及疼痛。Schoepp等，Trends Pharmacol.Sci.1413(1993)；Cunningham等，Life Sci.54135(1994)；Hollman等，Ann.Rev.Neurosci.1731(1994)；Pin等，Neuropharmacology 341(1995)；Knopfel等，J.Med Chem.381417(1995)；Spooren等，Trends Pharmacol.Sci.22331(2001)；Gasparini等，Curr.Opin.Pharmacol.243(2002)；Neugebauer Pain 981(2002)。這些病癥中許多病理被認(rèn)為是由于過(guò)量谷氨酸誘導(dǎo)的CNS神經(jīng)元的刺激引起的。由于組I mGluRs能通過(guò)突觸后機(jī)制和增強(qiáng)的突觸前谷氨酸釋放增加谷氨酸介導(dǎo)的神經(jīng)元刺激，這些活化過(guò)程可能對(duì)病理學(xué)起作用。因此，組I mGluRs受體的選擇性拮抗劑在由過(guò)量谷氨酸誘導(dǎo)的CNS神經(jīng)元刺激造成的所有病癥中是治療有效的，特別是作為神經(jīng)保護(hù)劑、鎮(zhèn)痛劑或抗驚厥劑。
在說(shuō)明一般代謝型谷氨酸受體，以及特別是組I的神經(jīng)生理學(xué)作用的最新進(jìn)展中，已確定這些受體在治療急性和慢性神經(jīng)疾病和精神疾病以及慢性和急性疼痛疾病中可作為有前途的藥物靶標(biāo)。
胃腸疾病食管下括約肌(LES)易于間歇性松弛。因此，由于機(jī)械屏障在此時(shí)暫時(shí)性地喪失，胃液可進(jìn)入食管，即以下稱(chēng)之“反流”的現(xiàn)象。
胃-食管反流疾病(GERD)是最普遍的上胃腸道疾病。目前的藥物療法致力于減少胃酸分泌，或中和食管中的酸。反流的主要機(jī)理被認(rèn)為是取決于張力減退的食管下括約肌。然而，例如Holloway & Dent(1990)Gastroenterol.Clin.N.Amer.19，pp.517-535中表明大多數(shù)反流發(fā)作發(fā)生在短暫性食管下括約肌松弛(TLESRs)期間，即非吞咽引發(fā)的松弛作用。還指出GERD患者的胃酸分泌通常是正常的。
根據(jù)本發(fā)明的新型化合物被認(rèn)為對(duì)于抑制短暫性食管下括約肌松弛(TLESRs)是有效的，從而可用于治療胃-食管反流疾病(GERD)。
術(shù)語(yǔ)“TLESR”——短暫性食管下括約肌松弛，此處定義參照Mittal，R.K.，Holloway，R.H.，Penagini，R.，Blackshaw，L.A.，Dent，J.，1995；Transient loweresophageal sphincter relaxation.Gastroenterology 109，pp.601-610。
術(shù)語(yǔ)“反流”此處被定義為由于機(jī)械屏障在此時(shí)暫時(shí)性喪失而使胃液能夠從胃中流入食管。
術(shù)語(yǔ)“GERD”——胃-食管反流疾病，此處定義參照van Heerwarden，M.A.，Smout A.J.P.M.，2000；Diagnosis of reflux disease.Bailliere’s Clin.Gastroenterol.14，pp.759-774。
由于它們?cè)谏韺W(xué)和病理生理學(xué)上的重要性，需要一種新的有效的能夠?qū)GluR亞型，特別是組I受體亞型顯示出高選擇性的mGluR激動(dòng)劑和拮抗劑。
現(xiàn)有技術(shù)在制藥工業(yè)中，優(yōu)選開(kāi)發(fā)在服用后易于吸收的化合物。通常來(lái)說(shuō)，改善化合物的溶解度將會(huì)提高服用后該化合物的吸收。
其中，WO 99/26927描述了喹喔啉化合物對(duì)mGluR組I受體表現(xiàn)出抑制作用。
本發(fā)明的目的是提供能夠?qū)Υx型谷氨酸受體(mGluRs)，特別是組I受體亞型表現(xiàn)出活性的化合物，該化合物較WO 99/26927中描述的化合物具有改善的溶解度。
其中，這將通過(guò)式I化合物中環(huán)Q的飽和作用而實(shí)現(xiàn)。
發(fā)明概要本發(fā)明提供式I的化合物 其中X1為O或S；X2為一個(gè)鍵或C1-3烷基；P為C3-7環(huán)烷基或C4-7環(huán)烯基；R1為氫、C1-6烷基、氰基、鹵素和C1-6烷基鹵，并且一個(gè)或多個(gè)R1可互相連接或連接到組成P的一個(gè)原子上形成橋或螺環(huán)；R2為氫、C1-3烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C0-3烷基氨基、C0-3烷基羥基或C0-3烷基二甲基氨基；R4為氫、C1-3烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C0-3烷基氨基、C0-3烷基羥基或C0-3烷基二甲基氨基；Q為含有4、5、6或7個(gè)獨(dú)立選自C、S、O和N原子的環(huán)，它可為飽和的或部分不飽和的，且所述環(huán)可進(jìn)一步含有獨(dú)立選自SO、SO2、CO、氰基和CS的基團(tuán)；R3為氫、羥基、鹵素、硝基、氰基、OC1-3烷基鹵、C1-3烷基鹵、C1-3烷基、C1-3烷氧基C0-3烷基、C0-3烷基OC2-4烷醇C1-3烷醇、氨基、C1-3烷基氨基C0-3烷基、(C1-3烷基)2氨基C0-3烷基、酰胺、C1-3烷基酰胺C0-3烷基或(C1-3烷基)2酰胺C0-3烷基；
n為0、1、2、3或4；和m為0、1、2、3或4；或其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或其溶劑化鹽。
本發(fā)明的另一方面提供了藥物組合物，其包括治療有效量的式I化合物和藥學(xué)上可接受的稀釋劑、賦形劑和/或惰性載體。
本發(fā)明的另一方面還提供了一種藥物組合物，其含有用于治療組I mGluR受體介導(dǎo)的疾病，和用于治療神經(jīng)病學(xué)上的疾病、精神病學(xué)上的疾病、胃腸疾病以及疼痛疾病的式I化合物。
本發(fā)明的又一方面還提供了一種用于治療的式I化合物，該化合物特別用于治療組I mGluR受體介導(dǎo)的疾病，和用于治療神經(jīng)病學(xué)上的疾病、精神病學(xué)上的疾病、胃腸疾病以及疼痛疾病。
本發(fā)明的另一方面提供了一種制備式I化合物的方法，及其制備中所用的中間體。
下面對(duì)本發(fā)明的這些方面和其它方面進(jìn)行詳細(xì)描述。
發(fā)明詳述本發(fā)明的目的是提供對(duì)代謝型谷氨酸受體(mGluRs)，特別是對(duì)組I受體表現(xiàn)出活性，且具有良好的吸收性的化合物。
下面列出的是對(duì)于描述本發(fā)明的說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求中使用的各種術(shù)語(yǔ)的定義。
為避免含義不清，應(yīng)理解的是在本說(shuō)明書(shū)中，在一個(gè)基團(tuán)被稱(chēng)作“如前定義”、“定義如前”或“定義如上”的情形，所述基團(tuán)包含第一次出現(xiàn)的和最寬的定義，同樣也包含對(duì)該基團(tuán)的所有的其它定義。
為避免含義不清，應(yīng)理解的是在說(shuō)明書(shū)中，‘C1-6’意味著具有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的含碳基團(tuán)。
在下標(biāo)為整數(shù)0的情況下，表明該下標(biāo)所指定的基團(tuán)不存在。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“烷基”包括直鏈和支鏈烷基，且可為，但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、叔戊基、新戊基、正己基或異己基、叔己基。術(shù)語(yǔ)C1-3烷基具有1-3個(gè)碳原子，且可為甲基、乙基、正丙基或異丙基。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指的是任選被取代的、飽和的環(huán)烴環(huán)系。術(shù)語(yǔ)“C3-7環(huán)烷基”可為環(huán)丙基、環(huán)丁基環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”指的是任選被取代的、含有一個(gè)或兩個(gè)雙鍵的非芳香環(huán)烴環(huán)系。術(shù)語(yǔ)“C4-7環(huán)烯基”可為，但不限于環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基且環(huán)戊烯基可為例如環(huán)戊烯-3-基或環(huán)戊烯-4-基。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“烷氧基”包括直鏈和支鏈烷氧基團(tuán)。C1-3烷氧基可為，但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基或異丙氧基。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“烷醇”包括直鏈和支鏈烷醇基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)具有1-3個(gè)碳原子和一個(gè)羥基的C1-3烷醇可為，但不限于甲醇、乙醇或丙醇，且丙醇基團(tuán)可為例如1-丙醇或2-丙醇。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“含有4、5、6或7個(gè)獨(dú)立地選自C、S、O和N的原子的環(huán)，該環(huán)可為飽和的或部分不飽和的，且所述環(huán)可進(jìn)一步含有獨(dú)立地選自SO、SO2、CO、C＝N和CS的基團(tuán)”包括非芳香碳環(huán)和雜環(huán)。這些環(huán)的例子可為，但不限于環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、咪唑烷基、咪唑啉基、嗎啉基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡咯烷基、吡咯啉基、四氫吡喃基或硫代嗎啉基。例如，在以下結(jié)構(gòu)中，Q被定義為環(huán)己基。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“鍵”可為飽和的或不飽和鍵。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“鹵”或“鹵素”可為氟、氯或溴。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“烷基鹵”是指如上所述的烷基，其被如上所述的鹵素所取代。
術(shù)語(yǔ)“C1-6烷基鹵”可包括，但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氟乙基、二氟乙基或溴丙基。
術(shù)語(yǔ)“OC1-6烷基鹵”可包括，但不限于氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氟乙氧基或二氟乙氧基。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“橋”意味著含有一個(gè)或多個(gè)原子的分子片段，或連接一個(gè)環(huán)上的兩個(gè)相距較遠(yuǎn)的原子的鍵，由此形成二-或三環(huán)系。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“螺環(huán)”定義為兩個(gè)環(huán)通過(guò)單獨(dú)一個(gè)原子彼此連接的分子或片段，其中該原子同時(shí)為每個(gè)環(huán)上的組成原子。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，P為C3-7環(huán)烷基或C4-7環(huán)烯基。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，P為C5-7環(huán)烷基。在本發(fā)明的進(jìn)一步的實(shí)施方案中，P選自環(huán)戊烷、環(huán)己烷和環(huán)庚烷。在另一個(gè)實(shí)施方案中，P為環(huán)己烷。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，P為C4-7環(huán)烯基。在一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，P選自環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基和環(huán)庚烯基。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，P被0、1、2、3或4個(gè)基團(tuán)R1所取代，其中P環(huán)上的R1取代基的數(shù)量由術(shù)語(yǔ)m指定。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，m為1或2。
在本發(fā)明的進(jìn)一步的實(shí)施方案中，以X2的連接點(diǎn)為1位計(jì)，環(huán)P在2、3和/或4位被R1取代。在另一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)P在4位上被一個(gè)或兩個(gè)R1取代。
在本發(fā)明的進(jìn)一步的實(shí)施方案中，環(huán)P為環(huán)己基且在4位上被一個(gè)或兩個(gè)甲基取代。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自氫、C1-6烷基、氰基、鹵素和C1-6烷基鹵。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為氫、C1-6烷基且一個(gè)或多個(gè)R1可彼此連接或連接到組成P的一個(gè)原子上以形成橋或螺環(huán)。
在本發(fā)明的進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1為C1-6烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為甲基。
本發(fā)明涉及的式I化合物，其中P為被一個(gè)或多個(gè)R1所取代的C3-7環(huán)烷基，其中R1為氫、C1-6烷基、氰基、鹵素或C1-6烷基鹵，且一個(gè)或多個(gè)R1可彼此連接或連接到組成P的一個(gè)原子上以形成橋或螺環(huán)。
本發(fā)明還涉及式I的化合物，其中P為被一個(gè)或多個(gè)R1所取代的C5-7環(huán)烷基，其中R1為甲基。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及式I的化合物，其中P為被一個(gè)或多個(gè)R1所取代的C4-7環(huán)烯基，其中R1為C1-6烷基、氰基、鹵素或C1-6烷基鹵，且一個(gè)或多個(gè)R1可彼此連接或連接到組成P的一個(gè)原子上以形成橋或螺環(huán)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，X1為O或S。本發(fā)明涉及式I的化合物，其中X1為O。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，P環(huán)通過(guò)X2連接到N上，其中X2可為一個(gè)鍵或連接基團(tuán)C1-3烷基。本發(fā)明進(jìn)一步涉及式I的化合物，其中X2為一個(gè)鍵。
在本發(fā)明的進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R2選自氫、C1-3烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C0-3烷基氨基、C0-3烷基羥基和C0-3烷基二甲基氨基。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案還涉及式I的化合物，其中R2為氫或甲基。本發(fā)明還涉及式I的化合物，其中R2為氫。
在本發(fā)明的進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R4選自氫、C1-3烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C0-3烷基氨基、C0-3烷基羥基和C0-3烷基二甲基氨基。本發(fā)明還涉及式I的化合物，其中R4為氫或甲基。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及式I的化合物，其中R2為氫且R4為甲基。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，Q為含有4、5、6或7個(gè)獨(dú)立選自C、S、O和N的原子的環(huán)，其可為飽和的或部分不飽和的，且所述環(huán)可進(jìn)一步含有獨(dú)立選自SO、SO2、CO和CS的基團(tuán)。
本發(fā)明涉及式I的化合物，其中Q為含有5、6或7個(gè)獨(dú)立選自C、O和N的原子的環(huán)，其可為飽和的或部分不飽和的。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Q為飽和的C5-7環(huán)烷基環(huán)。在一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Q為環(huán)戊烷、環(huán)己烷或環(huán)庚烷。
Q可被0、1、2、3或4個(gè)R3基團(tuán)所取代，其中Q環(huán)上R3取代基的數(shù)量由術(shù)語(yǔ)n指定。在本發(fā)明的一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，n為0、1、2或3。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，R3選自氫、羥基、鹵素、硝基、氰基、OC1-3烷基鹵、C1-3烷基鹵、C1-3烷基、C1-3烷氧基C0-3烷基、C0-3烷基OC2-4烷醇、C1-3烷醇、氨基、C1-3烷基氨基C0-3烷基、(C1-3烷基)2氨基C0-3烷基、酰胺、C1-3烷基酰胺C0-3烷基和(C1-3烷基)2酰胺C0-3烷基。
在本發(fā)明的一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R3為氫、羥基、鹵素、氰基、C1-3烷基或C1-3烷氧基C0-3烷基。
本發(fā)明涉及式I的化合物，其中R3為氫、羥基、鹵素、氰基、C1-3烷基或C1-3烷氧基C0-3烷基。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，R3為氫、羥基、氟、氰基、氟甲基、甲基、甲氧基、甲醇、氨基或甲酰胺。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，R3為羥基或甲基。
本發(fā)明還涉及式I的化合物，其中Q為被一個(gè)或多個(gè)R3所取代的飽和C5-7環(huán)烷基環(huán)，其中R3為氫、羥基、鹵素、硝基、OC1-3烷基鹵、C1-3烷基鹵、C1-3烷基、C1-3烷氧基C0-3烷基、C1-3烷醇、氰基、氨基或甲酰胺。
本發(fā)明涉及如上定義的式I的化合物，及其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或溶劑化鹽。
本發(fā)明還涉及下列化合物N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-3-甲基-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，8-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，7-羥基-5，7-二甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺，N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7，8，9-四氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺，7-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，6-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺，N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-2-甲酰胺，N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺，7-羥基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，6-羥基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺4-氧化物以及6，7-二甲基-N-(4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-羧酰胺，或其鹽、溶劑化物或溶劑化鹽。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及式I的化合物
其中X1為O或S；X2為單鍵或C1-3烷基；P為C3-7環(huán)烷基或C4-7環(huán)烯基；R1為氫、C1-6烷基、氰基、鹵素和C1-6烷基鹵，且一個(gè)或多個(gè)R1可互相連接或連接到一個(gè)組成P的原子上以形成橋或螺環(huán)；R2為氫、C1-3烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；R4為氫；Q為含有4、5、6或7個(gè)獨(dú)立地選自C、S、O和N的原子的環(huán)，其可為飽和的或部分不飽和的，且所述環(huán)可進(jìn)一步含有獨(dú)立地選自SO、SO2、CO、氰基和CS的基團(tuán)；R3為氫、羥基、鹵素、硝基、OC1-3烷基鹵、C1-3烷基鹵、C1-3烷基、C1-3烷氧基C0-3烷基、C1-3烷醇、氰基、氨基或酰胺；n為0、1、2、3或4；且m為0、1、2、3或4；或其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或溶劑化鹽。
用于藥物組合物的鹽應(yīng)為藥學(xué)上可接受的鹽，但其它的鹽可用于式I的化合物的制備中。
本發(fā)明化合物的合適的藥學(xué)上可接受的鹽為，例如，酸加成鹽，例如無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸。此外，本發(fā)明化合物的合適的藥學(xué)上可接受的鹽為堿金屬鹽、堿土金屬鹽或與有機(jī)堿形成的鹽。
其它的藥學(xué)上可接受的鹽以及制備這些鹽的方法可參見(jiàn)，例如，Remington’s Pharmaceutical Sciences(18thEdition，Mack Publishing Co.)1990。
式I的一些化合物可具有手性中心和/或幾何異構(gòu)中心(E-和Z-異構(gòu)體)，且應(yīng)理解的是本發(fā)明包括所有這些光學(xué)上的、非對(duì)映異構(gòu)的以及幾何異構(gòu)體。
本發(fā)明涉及在P環(huán)上R1和X2具有反式構(gòu)型關(guān)系的式I化合物，此時(shí)P為環(huán)己烷，R1和X2分別在4位和1位上與P連接。
本發(fā)明還涉及式I化合物的所有任何互變異構(gòu)形式。
藥物組合物根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面提供了一種藥物組合物，其包括作為有效成分的具有治療有效量的式I化合物，或其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或溶劑化鹽，以及一種或多種藥學(xué)上可接受的稀釋劑、賦形劑和/或惰性載體。
該組合物的形式可為適合口服的，例如片劑、丸劑、糖漿劑、粉劑、顆粒劑或膠囊劑，適合以無(wú)菌溶液、懸浮液或乳劑進(jìn)行非腸道注射的(包括靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、血管內(nèi)或輸液)，適合局部服用的，例如作為軟膏劑、貼劑或乳膏，或適合直腸服用的，例如作為栓劑。
一般而言，上述組合物可使用一種或多種常規(guī)賦形劑、藥學(xué)上可接受的稀釋劑和/或惰性載體以常規(guī)方法制備。
式I化合物在治療哺乳動(dòng)物，包括人類(lèi)時(shí)的合適日劑量，口服為約0.01-250mg/kg體重，非腸道服用為0.001-250mg/kg體重。
典型的有效成分日劑量可在寬范圍內(nèi)變化，并依賴(lài)于各種因素如相關(guān)指征、所治療疾病的嚴(yán)重度、服藥途徑、患者年齡、重量和性別以及所使用的特定化合物，這可由主治醫(yī)師來(lái)確定。
醫(yī)療用途已發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的化合物，或其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或溶劑化鹽，對(duì)個(gè)體代謝型谷氨酸受體(mGluRs)亞型表現(xiàn)出高效力和高選擇性。因此，本發(fā)明的化合物可望用于治療與mGluR組I受體的興奮活化作用相關(guān)的癥狀以及抑制由mGluR組I受體的興奮活化作用引起的神經(jīng)元損傷。該化合物可用于在哺乳動(dòng)物，包括人類(lèi)中對(duì)mGluR組I產(chǎn)生抑制作用。
mGluR組I受體在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)以及在其它組織中能夠高度表達(dá)。因此，可望本發(fā)明的化合物能夠較好地適于治療mGluR組I受體-介導(dǎo)的疾病，如急性的和慢性的神經(jīng)病學(xué)上的和精神病學(xué)上的疾病、胃腸疾病、以及慢性的和急性的疼痛性疾病。
本發(fā)明涉及如上定義的用于治療的式I化合物。
本發(fā)明涉及如上定義的的式I化合物，該化合物用于治療mGluR組I受體-介導(dǎo)的疾病。
本發(fā)明涉及如上定義的的式I化合物，該化合物用于治療阿耳茨海默氏病老年性癡呆、AIDS-引發(fā)的癡呆、帕金森氏病、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化、杭廷頓氏舞蹈病、偏頭痛、癲癇癥、精神分裂癥、抑郁癥、焦慮癥、急性焦慮癥，眼科疾病如視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、青光眼，聽(tīng)覺(jué)性神經(jīng)疾病如耳鳴，化學(xué)治療引起的神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛，以及三叉神經(jīng)痛、耐受性(tolerance)、依賴(lài)性(dependency)、脆性X綜合癥、孤獨(dú)癥、精神發(fā)育遲緩、精神分裂癥以及唐氏(Down’s)綜合癥。
本發(fā)明涉及如上定義的的式I化合物，該化合物用于治療涉及偏頭痛、炎癥性頭痛，神經(jīng)性疼痛疾病如糖尿病性神經(jīng)病，關(guān)節(jié)炎和類(lèi)風(fēng)濕性疾病、腰部疼痛、手術(shù)后疼痛以及與包括咽痛、腎或膽絞痛、月經(jīng)、偏頭痛和痛風(fēng)各種情況相關(guān)的疼痛。
本發(fā)明涉及如上定義的的式I化合物，該化合物用于治療中風(fēng)、頭部外傷、缺氧性和局部缺血性傷害、低血糖、心血管疾病以及癲癇癥。
本發(fā)明還涉及如上定義的式I化合物在制造用于治療mGluR組I受體介導(dǎo)的疾病以及所有上述疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及根據(jù)式I的化合物在治療胃腸疾病中的用途。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及根據(jù)式I的化合物在制造用于抑制短暫性食管下括約肌松弛、用于治療GERD、用于阻止反流、用于治療反胃、治療哮喘、治療喉炎、治療肺病以及處理發(fā)育不良的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了一種治療罹患或可能遭受所述病癥的患者的mGluR組I受體介導(dǎo)的疾病以及所有上述疾病的方法，該方法包括對(duì)患者施以有效量的如上定義的式I化合物。
為治療和預(yù)防某種具體病癥所需的劑量應(yīng)根據(jù)待治療的宿主、服藥途徑以及待治療疾病的嚴(yán)重程度進(jìn)行變化。
在本說(shuō)明書(shū)的內(nèi)容中，除非有相反的特定指示，術(shù)語(yǔ)“治療”和“處理”包括阻止或預(yù)防。術(shù)語(yǔ)“治療的”和“治療地”應(yīng)相應(yīng)地進(jìn)行解釋。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另外說(shuō)明，術(shù)語(yǔ)“拮抗劑”和“抑制劑”應(yīng)意味著通過(guò)任何方式，部分地或完全地阻斷導(dǎo)致配體引起響應(yīng)產(chǎn)生的轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的化合物。
術(shù)語(yǔ)“疾病”，除非另外說(shuō)明，意味著與代謝型谷氨酸受體活性相關(guān)的任何癥狀和疾病。
非醫(yī)療性用途式I的化合物，或其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或溶劑化鹽除了在治療醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用外，作為尋找新型治療劑研究的一部分，它們也可在用于評(píng)價(jià)在實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物如貓、狗、兔、猴、大鼠和小鼠中mGluR相關(guān)活性的抑制劑的作用的活體外和活體內(nèi)測(cè)試系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)和標(biāo)準(zhǔn)化中用作藥理學(xué)工具。
制備方法本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了制備式I化合物，或其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或溶劑化鹽的方法。
在該方法的全部以下說(shuō)明中，應(yīng)該理解的是，在適當(dāng)場(chǎng)合，合適的保護(hù)基可以以有機(jī)合成領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法添加到各種反應(yīng)劑和中間體中，并隨后從其中移除。使用這些保護(hù)基的常規(guī)操作方式以及合適的保護(hù)基實(shí)例參見(jiàn)，例如，“Protective Group in Organic Synthesis”，T.W.Green，P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience，New York，(1999)(Ref.1)。其它合適反應(yīng)的參考文獻(xiàn)和詳細(xì)說(shuō)明可參見(jiàn)有機(jī)化學(xué)教科書(shū)，例如，“Advanced Organic Chemistry”，March，4thed.McGraw Hill(1992)(Ref.2)或，“Organic Synthesis”，Smith，McGrawHill，(1994)(Ref.3)。吡嗪化學(xué)的代表性實(shí)例參見(jiàn)例如，“HeterocyclicChemistry”，J.A.Joule，K.Mills，G.F.Smith，3rded。Chapman and Hall(1995)，p.189-224(Ref.4)以及“Heterocyclic Chemistry”，T.L.Gilchrist，2nded。LongmanScientific and Technical(1992)，p.248-282(Ref.5)。
除非另有規(guī)定，術(shù)語(yǔ)“室溫”以及“環(huán)境溫度”應(yīng)意味著溫度在16-25℃。
制備中間體的方法制備中間體的方法，除非另有規(guī)定，其中P、Q、X1、X2、R1、R2、R3、R4、m和n如在式I中所定義，包括
(i-a)使式II化合物與例如催化量的四氧化鋨以及化學(xué)計(jì)量的叔胺N-氧化物反應(yīng)，得到式IIIa的化合物，如Van Rheenen等，Tetrahedron Letters(1976)，Vol.17，p.1973或如Ref.2所述，或，(i-b)進(jìn)行開(kāi)鏈二醛的頻哪醇環(huán)化反應(yīng)以得到如Ref.2中所述的式IIIa的化合物， 或二者擇一地，(i-c)如Ref.2所述進(jìn)行開(kāi)鏈二酯的偶姻縮合反應(yīng)，以得到式IIIb的化合物， (ii)通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法進(jìn)行式IIIa或式IIIb化合物的氧化反應(yīng)，例如Swern氧化(Ref.1或2)以得到式IV的化合物?；蛘吒鶕?jù)例如Hunter等，Tetrahedron Letters(1984)，Vol.25，p 603-606，通過(guò)式IIIc化合物的α-氧化反應(yīng)得到式IV的化合物。所有化合物的R3基團(tuán)可通過(guò)例如保護(hù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)牟僮骰蛟谥苽涫絀化合物的任何步驟中引入。
(iii-a)如例如Jones等，J.Med.Chem.，(1998)，Vol.41，p.3062中所述，在合適的溶劑中，例如二氯甲烷、乙腈、DMF、水或如甲醇的醇，或優(yōu)選在乙醚或苯中，使式IV的化合物與自由堿或鹽例如鹽酸鹽或氫溴酸鹽的形式的式V化合物進(jìn)行反應(yīng)，后種情況下先使用合適的堿例如氫氧化鈉或氫氧化鉀、三乙胺或二異丙基乙胺在合適的溶劑中如醇，例如甲醇，或乙腈、二氯甲烷，或優(yōu)選在二乙醚或苯中，將式V化合物中和，所述的反應(yīng)任選在路易斯酸或干燥劑如分子篩存在下，于根據(jù)所使用的溶劑和取代基的性質(zhì)所確定的-20-120℃溫度下進(jìn)行，在氧氣存在下于自發(fā)性芳構(gòu)化之后得到式VIa的化合物，其中X1為CH2、O或S，且Rx可為支鏈的C1-6烷基，例如叔丁基，或取代的苯基或芐基。
或者，如果未發(fā)生自發(fā)性芳構(gòu)化，可在金屬鹽的存在下，將相應(yīng)的縮合產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步的氧化反應(yīng)，根據(jù)，例如Kobayashi等，Tetrahedron，(1990)，Vol.55，p.13179中所述的方法，或，(iii-b)使環(huán)氧化物與式V的二胺化合物在氧化條件下進(jìn)行反應(yīng)以得到式VIa的化合物，如Antoniotti和Dunach，Tetrahedron Letters，(2002)，Vol.43，p.3971中所述，因此X1可在縮合反應(yīng)前便攜帶在式V化合物上，或當(dāng)X1＝O(Ref.2或3)時(shí)通過(guò)合適的試劑例如五硫化磷的處理或當(dāng)X1＝CH2(Ref.2或3)時(shí)通過(guò)在例如氧化性臭氧分解條件下的氧化反應(yīng)將其引入到式VIa化合物上。
Ar＝吸電子取代苯基
或，(iii-c)在合適的質(zhì)子惰性溶劑例如苯、二氯甲烷或乙醚中，使式X的二胺與式XIIb的三羰基化物進(jìn)行縮合反應(yīng)，以生成式VIa的化合物，其中X1為O，式XIIb由式XIIa化合物通過(guò)堿處理原位生成，根據(jù)，例如Hoffman等，J.Org.Chem.，(1990)，Vol.55，p.2820-2822， (iv)使式VIa的化合物與合適的氧化劑例如mCPBA反應(yīng)得到式VIb的N1-氧化物。這也可根據(jù)存在的官能團(tuán)的相容性在合成的后期完成。
(v-a)在強(qiáng)堿如氫氧化鉀或氫氧化鋰，或酸，如鹽酸的存在下，使式VIa或VIb的化合物，其中X1和Rx如上所定義，進(jìn)行反應(yīng)得到式VII的化合物，其中Ry為氫，或得到作為式VII的化合物的鹽，其中Ry為有機(jī)或無(wú)機(jī)陽(yáng)離子，如鈉或鉀，或，(v-b)使式VIII的化合物，其中R4為氫，與合適的烷基鋰試劑如甲基鋰或丁基鋰反應(yīng)，然后通過(guò)與二氧化碳反應(yīng)得到式VII的化合物，或與烷基氯甲酸酯或烷基氰甲酸酯反應(yīng)得到式VIa的化合物，如例如Yves，F(xiàn)ort等，J.Org.Chem.，(2002)，Vol.67，p.234中對(duì)吡啶化合物的類(lèi)似反應(yīng)所述，或(v-c)式VIII化合物與草酸單酯進(jìn)行Minisci反應(yīng)以得到式VIa的化合物，根據(jù)，例如Coppa等，Tetrahedron Letters，(1992)，Vol.33，p.3057-3060， (vi)式VIII化合物可通過(guò)在合適的溶劑如二氯甲烷、乙腈、DMF、水、乙醚、苯、或醇如甲醇中使式IV的化合物與式IX的化合物反應(yīng)，或X與XI反應(yīng)得到，如例如Justus K.Landquist，J.Chem.Soc.，(1953)，p.2816所述， (vii)式XVb的化合物可通過(guò)式XIII的N保護(hù)的氨基酸與式XIV的胺進(jìn)行合適的偶合反應(yīng)得到，使用合成酰胺的標(biāo)準(zhǔn)方法，例如在DMF中于0-50℃下，使用化學(xué)計(jì)量的N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺與催化量的1-羥基苯并三唑反應(yīng)，然后如Ref.1所述除去保護(hù)基(圖中的PG)。優(yōu)選的保護(hù)基實(shí)例為BOC，(viii)攜帶氫作為R2的式XIV的胺，可通過(guò)兩步制得使相應(yīng)的醛或酮與羥胺進(jìn)行縮合反應(yīng)，然后在回流乙醇中使用例如鈉將所得的肟還原。式XIV的胺也可以通過(guò)相應(yīng)的醛或酮的還原胺化反應(yīng)而制得。
式I最終化合物的制備本發(fā)明的另一個(gè)目的是制備式I化合物的方法，除非另有規(guī)定，其中P、Q、X1、X2、R1、R2、R3、R4、m和n如在式I中所定義，該方法包括 使式VII的化合物，其中Ry為氫，與活化劑，例如草酰氯或亞硫酰氯反應(yīng)，然后將所得酰基鹵，或者親核體活化的酸衍生物，在非親核性堿如三乙胺或二異丙基乙胺的存在下，在合適的溶劑如二氯甲烷或二乙醚中，與式XIV的胺進(jìn)行反應(yīng)，得到式I化合物。
或者， 在合適的水抽取偶合試劑(water abstracting coupling reagent)如HBTU或EDC存在下，可使用或不使用親核催化劑例如羥基苯并三唑，于合適的溶劑如乙腈或DMF中使用非親核性堿如三乙胺或二異丙基乙胺，或使用其他酰胺偶合的標(biāo)準(zhǔn)方法，使式XIV的胺與式VII的化合物進(jìn)行反應(yīng)，其中Ry為氫，得到式I化合物?；?br> 使式VIa的化合物或其N(xiāo)1-氧化物(VIb)以自由堿或鹽例如鹽酸鹽或氫溴酸鹽的形式與合適的胺例如式XIV的化合物進(jìn)行反應(yīng)，得到式I化合物，其中Rx可為支鏈的C1-6烷基，例如叔丁基，或取代的苯基或芐基。該反應(yīng)可無(wú)溶劑進(jìn)行或使用合適的溶劑如N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷或乙酸乙酯，在環(huán)境溫度至+150℃范圍內(nèi)進(jìn)行。該反應(yīng)可通過(guò)使用堿如碳酸鉀、三乙胺或1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯或酸如三甲基鋁或?qū)妆交撬醽?lái)輔助進(jìn)行，或， 類(lèi)似于上述由IV和V合成式VIa中間體的反應(yīng)，式IV和XVb的中間體直接縮合，可得到式I化合物。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及式VII、XVb以及XIV化合物，這些化合物可用作制備式I化合物的中間體。
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及式VII的化合物，
其中Q、R3、R4、X1和n如上所定義，且Ry為H。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及式XIV的化合物或其鹽， 其中P、R1、R2、X2和m如上述所定義。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及式XVb的化合物或其鹽， 其中P、R1、R2、R4、X2和m如上述所定義。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及下列化合物，其可作為制備式I化合物的中間體3-甲基-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸乙酯，3-甲基-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸，2，3-二氨基-N-(4-甲基-環(huán)己基)-丙酰胺，4-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-環(huán)己烷-1，2-二酮，6，7-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并吡嗪-2-羧酸甲酯，5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸甲酯，5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸。
實(shí)施例本發(fā)明將通過(guò)下面的非限制性實(shí)施例進(jìn)行闡述。
一般方法所有起始原料都可市售獲得或公開(kāi)在現(xiàn)有文獻(xiàn)中。1H和13C NMR光譜分別以400MHz和100MHz記錄在Brucker 400或Varian 400上。利用電噴霧(LC-MS；LCWaters 2790，柱XTerra MS C82.5μm 2.1×30mm，緩沖梯度H2O+0.1％TFACH3CN+0.04％TFA，MS微量ZMD)電離技術(shù)記錄質(zhì)譜。
實(shí)施例1N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺將5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸(100mg)溶于二氯甲烷(25ml)中。加入反式-甲基-環(huán)己胺HCl(83.6mg)和催化量的DMAP(刮勺尖)，然后在冰/水浴上冷卻。加入EDC(113.1mg)和三乙胺(80μl)。溫?zé)嶂潦覝睾髮⒒旌衔镌诘獨(dú)夥障聰嚢?8小時(shí)，加入數(shù)滴HCl水溶液，該混合物用水洗滌兩次，用稀釋的氫氧化鈉溶液洗滌一次，然后用鹽水洗滌。分離有機(jī)層并用硫酸鈉干燥，濃縮后得到白色固體，將其在庚烷/乙酸乙酯(1/1)中用4g二氧化硅純化，得到41.8mg(27％)的N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ9.08(s，1H)，7.58(brd，1H)，3.94-3.81(m，1H)，2.99(br，2H)，2.93(br，2H)，2.09-1.86(m，6H)，1.79-1.67(br，2H)，1.40-1.05(m，5H)，0.89(d，3H)。13C NMR(CDCl3)δ162.6，156.1，151.0，141.5，140.9，48.3，33.8，33.0，32.11，31.9，31.8，22.4，22.3，22.2。MS(ES)m/z 274(M+1)。
5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸甲酯將氫氧化鉀(150mg)溶于甲醇(1ml)中，然后將其加入到2，3-二氨基-丙酸甲酯二氫氯化物的甲醇(1ml)溶液中。超聲處理后，將該混合物過(guò)濾到1，2-環(huán)己二酮(112mg)的甲醇(2ml)溶液中。向該溶液中加入數(shù)粒4分子篩，然后加熱回流3h。冷卻到環(huán)境溫度后，通過(guò)過(guò)濾除去分子篩。蒸發(fā)干燥得到固體，將其置于水和乙醚中并萃取。用乙醚將含水層另外萃取4次。收集有機(jī)層，用硫酸鎂進(jìn)行干燥，并蒸發(fā)干燥。通過(guò)色譜法使用乙酸乙酯/庚烷(1/2)用二氧化硅進(jìn)行純化，得到46.4mg(25％)的5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸甲酯。1H NMR(CDCl3)δ8.96(s，1H)，3.94(s，3H)，2.99(br m，4H)，1.91(br m，4H)。13C NMR(CDCl3)δ194.，157.2，153.1，142.9，139.，52.8，32.2，31.9，22.2，22.0。MS(ES)m/z193(M+1)。
5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸方法1將氫氧化鈉(76.2mg)溶于甲醇(3ml)中，并加入到5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸甲酯(169mg)的甲醇(8ml)溶液中，然后在室溫下攪拌23h。加入1N HCl(190ml)和水(50ml)，然后蒸除甲醇。該含水混合物用乙醚萃取三次。合并有機(jī)層后，用硫酸鈉進(jìn)行干燥并蒸發(fā)干燥，得到白色固體，將其在真空下進(jìn)一步干燥，得到100mg(46％)的5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸。1H NMR(CDCl3)δ9.16(s，1H)，3.08(br，2H)，3.01(br，2H)，1.98(br m，4H)。MS(ES)m/z 179(M+1)。
方法2將正-BuLi(80ml)在氬氣氛下在冰/水浴上冷卻，然后在20分鐘內(nèi)滴加N，N-二甲基氨基乙醇(10.0ml)的無(wú)水己烷(80ml)溶液。在乙醇/干冰浴上冷卻該混合物，之后加入5，6，7，8-四氫喹喔啉(6.3g)的己烷(40ml)溶液。1h后于-75--78℃下將該反應(yīng)倒在乙醚中的干冰上。該反應(yīng)于-75--78℃下維持30分，之后加入1M鹽酸直至達(dá)到pH 5，將該漿料溫?zé)嶂潦覝?。分離水層并用乙醚萃取兩次，合并醚相并用碳酸氫鈉水溶液萃取，然后酸化并用乙醚萃取三次。合并有機(jī)相，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并蒸發(fā)干燥。使用從庚烷/乙酸乙酯4/1到純乙酸乙酯到純甲醇的梯度的硅膠色譜法得到1.3g 15％的5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸。
實(shí)施例2N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺將氫氧化鉀(47.2mg)和5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸甲酯(30mg)溶于甲醇(5ml)中，然后于室溫下攪拌18h。然后將該反應(yīng)混合物蒸發(fā)干燥，溶于DMF(2ml)中，并用三氟乙酸(0.76ml)進(jìn)行處理。向該混合物中加入乙基二異丙胺(0.35ml)，隨后加入胺4，4-二甲基-環(huán)己胺HCl(33.2mg)、HBTU(60.2mg)以及另外的DMF(1ml)。于室溫、氮?dú)夥障聰嚢?9h后，將該反應(yīng)混合物蒸發(fā)干燥。用二氯甲烷(20ml)進(jìn)行稀釋?zhuān)孟Cl洗滌，隨后用1M NaOH和鹽水洗滌，接著用硫酸鈉對(duì)有機(jī)層進(jìn)行干燥，蒸發(fā)干燥后得到粗產(chǎn)品，通過(guò)使用庚烷/乙酸乙酯(3/1)的硅膠色譜法進(jìn)行純化。得到31mg(72％)黃色油狀的標(biāo)題化合物。1H NMR(CDCl3)δ9.09(s，1H)，7.66(brd，1H)，3.95-3.85(m，1H)，2.99(br，2H)，2.94(br，2H)，1.98-1.79(m，8H)，1.54-1.20(m，5H)，0.93(d，6H)。13C NMR(CDCl3)δ162.7，156.1，151.0，141.5，140.9，48.3，37.6，32.1，31.8，29.5，28.7，22.4，22.3。
MS(ES)m/z 288(M+1)。
實(shí)施例3N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-3-甲基-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺將3-甲基-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸(10.5mg)、HBTU(25mg)和二異丙基乙胺(28.5μl)的DMF(1ml)溶液攪拌5分鐘。然后加入4，4-二甲基環(huán)己胺鹽酸鹽(10mg)，將所得溶液在氮?dú)夥障聰嚢?h。將該反應(yīng)混合物用2ml水稀釋?zhuān)⒂肊tOAc萃取兩次。合并的有機(jī)相用1M HCl、飽和NaHCO3、水和鹽水進(jìn)行洗滌，干燥并濃縮?？焖賹游龇?SiO2，庚烷/EtOAc 4∶1)得到4.1mg的標(biāo)題化合物。1H NMR(CDCl3)δ7.85(bd，1H)，3.79-3.89(m，1H)，2.91-2.96(m，4H)，2.90(s，3H)，1.92(m，4H)，1.84(m，2H)，1.22-1.50(m，8H)，0.95(s，3H)，0.93(s，3H)。MS(ES)m/z 302(M+1)。
3-甲基-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸乙酯將乙酰乙酸乙酯(253μl)加入到[羥基(2，4-二硝基苯磺酰氧)碘]苯(1030mg)(參見(jiàn)Koser，G.F.；Wettach，R.H.；J.Org.Chem.42，8，(1977)，p 1476-1478)的乙腈(28ml)混合物中。將反應(yīng)混合物加熱回流1h。冷卻并濃縮該反應(yīng)混合物。粗產(chǎn)物用己烷進(jìn)行洗滌，然后溶于苯(25ml)中。加入三乙胺(1ml)，將所得紅色溶液攪拌45分鐘。加入pTsOH(10mg)，隨后加入1，2-氨基環(huán)己烷(490μl)(順式/反式混合物)。該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過(guò)夜，并濃縮。將該粗產(chǎn)品于空氣中放置24h。產(chǎn)品通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 6∶1)純化，然后通過(guò)制備型HPLC純化得到13.5mg所需產(chǎn)品。1H NMR(CDCl3δ4.45(q，2H)，2.96(m，4H)，2.73(s，3H)，1.92(m，4H)，1.41(t，3H)。
3-甲基-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸將LiOH水合物(3.9mg)加入到3-甲基-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸乙酯(13.5mg)的THF/水1∶1(2ml)溶液中，所得溶液于室溫下攪拌過(guò)夜。將該反應(yīng)混合物用1M HCl進(jìn)行酸化處理，然后用醚和EtOAc進(jìn)行萃取。干燥并濃縮有機(jī)相得到10.5mg可直接用于下步的酸。
實(shí)施例48-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺將2，3-二氨基-N-(4-甲基-環(huán)己基)-丙酰胺(100mg)和3-甲基-環(huán)己烷-1，2-二酮(63mg)與10mg的PPTS(10mg)溶于苯(50ml)中。將溶液回流過(guò)夜，然后減壓濃縮。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 4∶1)得到32mg標(biāo)題產(chǎn)物。1HNMR(CDCl3)δ9.08(s，1H)，7.57(bd，1H)，3.88(m，1H)，3.00(m，3H)，2.04(m，4H)，1.86(m，1H)，1.75(m，2H)，1.63(m，1H)，1.37(d，3H)，1.28(m，2H)，1.10(m，2H)，0.92(d，3H)。MS(ES)m/z 288(M+1)。
2，3-二氨基-N-(4-甲基-環(huán)己基)-丙酰胺將BOC2O(17.1g)加入到D，L-2，3-二氨基丙酸(5.0g)和三乙胺(24.8ml)的二氧六環(huán)/水l∶1(76ml)的溶液中。該溶液攪拌過(guò)夜。加入EtOAc(100ml)，水相用1M HCl進(jìn)行酸化處理。分離這些相，有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥并濃縮得到8.5g白色固體狀的2，3-雙-叔丁氧基羰基氨基丙酸。將6.0g的產(chǎn)品以及HBTU(8.95g)和二異丙基乙胺(10.2ml)溶于DMF(180ml)中。所得溶液在加入4，4-二甲基-環(huán)己胺鹽酸鹽(3.25g)之前攪拌10分鐘。該溶液于室溫下攪拌3.5h，然后用250ml CH2Cl2稀釋。該混合物用1M HCl、水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥并濃縮得到無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用的7.63g粗產(chǎn)品。
將7.0g的偶合產(chǎn)品加入到30ml冰冷的2.5M HCl/MeOH溶液中。然后將該混合物在用1M NaOH中和前于室溫下攪拌6h。該水溶液繼而用CH2Cl2進(jìn)行萃取。干燥并濃縮有機(jī)相得到2.66g標(biāo)題產(chǎn)物。1H NMR(DMSO)δ7.62(bd，1H)，2.98(m，1H)，2.64(m，1H)，1.72(m，2H)，1.63(m，2H)，1.28(m，1H)，1.15(m，2H)，0.94(m，2H)，0.84(d，3H)。
實(shí)施例57-羥基-5，7-二甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺將2，3-二氨基-N-(4-甲基-環(huán)己基)-丙酰胺(100mg)和3，5-二甲基-環(huán)戊-1，2-二酮(63mg)與PPTS(10mg)一起溶于苯(50ml)中。將溶液回流過(guò)夜，然后減壓濃縮。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 1∶1)得到6.5mg標(biāo)題產(chǎn)物。1HNMR(CDCl3)δ9.17(s，1H)，7.63(bd，1H)，3.90(m，1H)，3.43(m，1H)，2.65(m，1H)，2.00-2.11(m，2H)，1.80-1.85(m，1H)，1.73-1.79(m，2H)，1.70(s，3H)，1.39(d，3H)，1.24-1.36(m，3H)，1.06-1.17(m，2H)，0.92(d，3H)。MS(ES)m/z 304(M+1)。
實(shí)施例6N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7，8，9-四氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺將2，3-二氨基-N-(4-甲基-環(huán)己基)-丙酰胺(106mg)、環(huán)戊-1，2-二酮(67mg)和PPTS(13mg)的苯(10ml)溶液回流過(guò)夜。冷卻后減壓除去溶劑，殘余物放置于空氣中72h。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 4∶1)得到86mg標(biāo)題產(chǎn)物。1HNMR(CDCl3)δ8.99(s，1H)，7.59(bd，1H)，3.81-3.91(m，1H)，3.00-3.08(m，4H)，1.98-2.05(m，2H)，1.90(m，2H)，1.66-1.76(m，6H)，1.29-1.40(m，1H)，1.21-1.29(m，2H)，1.02-1.14(m，2H)，0.88(d，3H)。MS(ES)m/z 288(M+1)。
實(shí)施例77-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺以及6-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺將2，3-二氨基-N-(4-甲基環(huán)己基)-丙酰胺(150mg)、4-甲基-環(huán)己-1，2-二酮(95mg)和PPTS(13mg)的苯(10ml)溶液回流過(guò)夜。冷卻后減壓除去溶劑，殘余物放置于空氣中72h。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 4∶1)得到19mg異構(gòu)體1和10mg的異構(gòu)體2。
異構(gòu)體11H NMR(CDCl3)δ9.09(s，1H)，7.58(d，1H)，3.83-3.93(m，1H)，3.05-3.11(m，1H)，2.92-3.02(m，2H)，2.60(dd，1H)，1.98-2.07(m，4H)，1.70-1.79(m，2H)，1.55(m，1H)，1.32-1.42(m，1H)，1.27(m，2H)，1.13(d，3H)，1.05-1.11(m，3H)，0.91(d，3H)。MS(ES)m/z 288(M+1)。
異構(gòu)體21H NMR(CDCl3)δ9.09(s，1H)，7.58(d，1H)，3.83-3.94(m，1H)，2.93-3.12(m，3H)，2.56(dd，1H)，2.03(m，4H)，1.70-1.79(m，2H)，1.49-1.59(m，1H)，1.33-1.38(m，1H)，1.24-1.31(m，2H)，1.13(d，3H)，1.05-1.13(m，2H)，0.91(d，3H)。MS(ES)m/z 288(M+1)。
實(shí)施例8N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺將2，3-二氨基-N-(4-甲基環(huán)己基)-丙酰胺(102mg)、環(huán)戊-1，2-二酮(50mg)和PPTS(13mg)的苯(10ml)溶液回流過(guò)夜。冷卻后減壓減壓除去溶劑，殘余物放置于空氣中72h。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 4∶1)得到2.4mg標(biāo)題產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ9.09(s，1H)，7.62(s，1H)，3.84-3.95(m，1H)，3.07(m，3H)，2.20-2.31(m，2H)，2.00-2.09(m，2H)，1.70-1.81(m，2H)，1.24-1.34(m，3H)，1.05-1.17(m，2H)，0.91(d，3H)。MS(ES)m/z 260(M+1)。
實(shí)施例9N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-2-甲酰胺將2，3-二氨基-N-(4-甲基-環(huán)己基)-丙酰胺(154mg)、4-羥基-6H-吡喃-3-酮(88mg)和PPTS(20mg)的苯(15ml)溶液于室溫下攪拌過(guò)夜。減壓除去溶劑，殘余物放置于空氣中72h。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 4∶1)得到9.6mg N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-2-甲酰胺和11.8mg N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺。
N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-2-甲酰胺1HNMR(CDCl3)δ9.15(s，1H)，7.56(bd，1H)，4.86(s，2H)，4.10(m，2H)，3.84-3.95(m，1H)，3.07(t，2H)，2.00-2.08(m，2H)，1.71-1.79(m，2H)，1.34-1.39(m，1H)，1.25-1.32(m，2H)，1.05-1.17(m，2H)，0.91(d，3H)。MS(ES)m/z 276(M+1)。
4-羥基-6H-吡喃-3-酮在0℃下將氯化2，2，6，6-四甲基-1-氧代-哌啶鎓(383mg)緩慢加入四氫-4H-吡喃-4-酮(200mg)和pTsOH(7.6mg)的乙腈(2ml)溶液中。攪拌該反應(yīng)混合物30分鐘，此時(shí)所有物質(zhì)均溶解且深橙色消失。然后該溶液回流15分鐘。冷卻后，加入醚并過(guò)濾除去鹽。減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 4∶1)得到88mg標(biāo)題產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ6.14(t，1H)，4.43(dd，2H)，4.24(d，2H)。
實(shí)施例10N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺制備方法如實(shí)施例9所述。
N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺1HNMR(CDCl3)δ9.20(s，1H)，7.49(bd，1H)，4.82(s，2H)，4.11(m，2H)，3.85-3.93(m，1H)，3.13(t，2H)，2.04(m，2H)，1.75(m，2H)，1.33-1.41(m，1H)，1.23-1.32(m，2H)，1.05-1.16(m，2H)，0.91(d，3H)。MS(ES)m/z 276(M+1)。
實(shí)施例117-羥基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺以及6-羥基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺將TBAF(350μl，1.0M的THF)滴加到異構(gòu)體1(106mg)的THF(5ml)溶液中。該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過(guò)夜。溶液用水稀釋?zhuān)⒂肊tOAc萃取。有機(jī)相用鹽水和水進(jìn)行洗滌，干燥并濃縮。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 1∶1)得到9mg標(biāo)題產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ9.12(s，1H)，7.58(bd，1H)，4.36-4.46(m，1H)，3.83-3.94(m，1H)，3.29(dd，1H)，3.18(m，1H)，3.04(dd，1H)，2.95(m 1H)，2.01-2.12(m，4H)，1.71-1.80(m，2H)，1.35-1.39(m，1H)，1.24-1.32(m，2H)，1.05-1.17(m，2H)，0.91(d，3H)。MS(ES)m/z 290(M+1)。
將TBAF(510μl，1.0M的THF溶液)滴加到異構(gòu)體2(151mg)的THF(5ml)溶液中。該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過(guò)夜。溶液用水稀釋?zhuān)⒂肊tOAc萃取。有機(jī)相用鹽水和水進(jìn)行洗滌，干燥并濃縮。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc1∶1)得到48mg標(biāo)題產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ9.08(s，1H)，7.58(bd，1H)，4.39(m，1H)，3.86(m，1H)，3.16-3.26(m，2H)，3.00(m，2H)，1.99-2.11(m，4H)，1.74(m，2H)，1.34-1.39(m，2H)，1.23-1.33(m，2H)，1.03-1.14(m，2H)，0.90(d，3H)。MS(ES)m/z 290(M+1)。
4-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-環(huán)己烷-1，2-二酮將767mg(4mmol)的氯化2，2，6，6-四甲基-1-氧代-哌啶鎓(767mg)于0℃下緩慢加入到4-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-環(huán)己酮(1.41g)和pTsOH(15mg)的乙腈/CH2Cl24∶1(25ml)溶液中。攪拌該反應(yīng)混合物直到所有物質(zhì)均溶解。該溶液繼而在90℃下加熱20，冷卻后濃縮。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 6∶1)得到970mg可直接用于下步的互變異構(gòu)體混合物的產(chǎn)品。
7-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸(4-甲基-環(huán)己基)-酰胺以及6-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸(4-甲基-環(huán)己基)-酰胺將2，3-二氨基-N-(4-甲基-環(huán)己基)-丙酰胺(500mg)、4-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-環(huán)己烷-1，2-二酮(970mg，互變異構(gòu)體混合物)和PPTS(63mg)的苯溶液(50ml)于室溫下攪拌過(guò)夜。減壓下除去溶劑，殘余物放置于空氣中72h。通過(guò)快速層析法(SiO2，庚烷/EtOAc 4∶1)得到106mg的異構(gòu)體1和151mg的異構(gòu)體2。
異構(gòu)體11H NMR(CDCl3)δ9.11(s，1H)，7.67(dd，2H)，7.60(dd，2H)，7.32-7.43(m，6H)，4.35(m，1H)，3.90(m，1H)，3.18-3.28(m，1H)，3.05(m，2H)，2.84(m，1H)，1.98-2.11(m，3H)，1.84-1.94(m，1H)，1.75(m，2H)，1.29-1.38(m，1H)，1.24-1.28(m，3H)，1.05-1.16(m，2H)，1.01(s，9H)，0.91(d，3H)。MS(ES)m/z 528(M+1)。
異構(gòu)體21H NMR(CDCl3)δ9.11(s，1H)，7.67(dd，2H)，7.58(dd，2H)，7.32-7.44(m，6H)，4.34-4.41(m，1H)，3.89(m，1H)，3.21-3.31(m，1H)，2.99(m，2H)，2.89(m，1H)，1.98-2.09(m，3H)，1.84-1.95(m，1H)，1.70-1.80(m，2H)，1.22-1.33(m，3H)，1.05-1.17(m，2H)，1.01(s，9H)0.91(d，3H)。MS(ES)m/z528(M+1)。
實(shí)施例12N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺4-氧化物將5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸(4，4-二甲基 環(huán)己基)-酰胺(13.5mg)和mCPBA(88.0mg)溶于二氯甲烷(2ml)中，于室溫下攪拌過(guò)夜。該反應(yīng)混合物在使用庚烷/乙酸乙酯2∶1作為洗脫劑的二氧化硅上進(jìn)行純化，分離的產(chǎn)品置于二氯甲烷用Na2S2O4水溶液洗滌，然后用NaHCO3水溶液洗滌，最后用水洗滌。用NaSO4干燥后，在真空中蒸發(fā)和干燥，得到標(biāo)題產(chǎn)物(4.1mg，29％)。1HNMR(CDCl3)δ8.73(s，1H)，7.64(br d，1H)，3.96-3.80(m，1H)，2.99-2.84(brm，4H)，2.01-1.77(m，2H)，1.56-1.26(m，5H)，0.94(d，6H)。13C NMR(CDCl3)δ160.9，155.4，145.3，131.0，48.7，37.6，31.8，29.7，29.6，28.7，24.0，21.7，21.3。MS(ES)m/z 304(M+1)。
實(shí)施例136，7-二甲基-N-(4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺將6，7-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并吡嗪-2-羧酸甲酯(6mg)溶于甲醇(1.5ml)中。加入1M氫氧化鈉(50ml)，該反應(yīng)于室溫下攪拌4h。該溶液用1M鹽酸酸化，蒸發(fā)除去甲醇。用乙醚洗滌水相，干燥有機(jī)層，過(guò)濾并蒸發(fā)。
將二異丙基乙胺(25ml)、HBTU(15.5mg)和反式-4-甲基環(huán)己胺(5.2mg)加入到溶解在DMF(1ml)中的殘余物中。該反應(yīng)于室溫下攪拌48h，蒸發(fā)并通過(guò)硅膠色譜柱(庚烷/乙酸乙酯3∶1)純化，得到4mg的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ9.1(s，1H)，7.6(d，1H)，3.9(m，1H)，3.2(dd，1H)，2.7(dd，1H)，1.4(d，3H)，1.3(d，3H)，0.95(d，3H)。MS(ES)m/z 288(M+1)。
6，7-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并吡嗪-2-羧酸甲酯將2，3-二氨基丙酸甲酯二鹽酸化物(90mg)在甲醇(0.5ml)中的混合物用甲醇的氫氧化鉀溶液(在0.5ml中的94mg)進(jìn)行處理，并在室溫下劇烈攪拌5分鐘。過(guò)濾該溶液并用溶于甲醇(1ml)的3，4-二甲基-環(huán)戊烷-1，2-二酮(64mg)進(jìn)行處理。加入分子篩(4)，該反應(yīng)回流40h。
將該混合物進(jìn)行過(guò)濾，用1M鹽酸酸化，分配在水和乙醚中。有機(jī)層進(jìn)行干燥、過(guò)濾、蒸發(fā)以及用硅膠色譜柱(庚烷/乙酸乙酯3∶1)純化，得到6mg的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ9.0(s，1H)，4.0(s，3H)，3.2(dd，1H)，2.7(dd，1H)，1.4(d，3H)，1.3(d，3H)。MS(ES)m/z 207(M+1)。
縮寫(xiě)詞BOC 叔丁氧基羰基nBu 正丁基mCPBA 間氯過(guò)苯甲酸DMAP4-(N，N-二甲基氨基)吡啶DMF 二甲基甲酰胺EDC 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺HBTU六氟磷酸鄰-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓PPTS對(duì)甲苯磺酸吡啶鎓
TBAF 氟化四丁銨THF四氫呋喃pTsOH 對(duì)甲苯磺酸藥理學(xué)本發(fā)明化合物的藥理特性可使用功能活性的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定法進(jìn)行分析。谷氨酸受體測(cè)定法的實(shí)例在本領(lǐng)域是公知的，如Aramori等，Neuron 8757(1992)；Tanabe等，Neuron 8169(1992)；Miller等，J.Neuroscience 156103(1995)；Balazs等，J.Neurochemistry 69151(1997)所述。在這些文獻(xiàn)中描述的方法在此引用作為參考。本發(fā)明的化合物可方便地通過(guò)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)鈣——表達(dá)mGluR5的細(xì)胞中的[Ca2+]i——的遷移測(cè)定法進(jìn)行研究。
對(duì)于FLIPR分析，如WO97/05252中所述，將表達(dá)人體mGluR5d或重組mGluR1的細(xì)胞接種在帶有黑色側(cè)面的涂覆膠原的透明底96孔平板上，并在接種24小時(shí)后進(jìn)行[Ca2+]I遷移的分析。FLIPR實(shí)驗(yàn)使用一臺(tái)0.800W的激光裝置和0.4秒的CCD攝影快門(mén)速度進(jìn)行。每個(gè)FLIPR實(shí)驗(yàn)均以細(xì)胞平板的每個(gè)孔中存在的160μl的緩沖液為起始。每次添加完化合物后，以1秒的時(shí)間間隔內(nèi)抽取50次熒光信號(hào)，然后每5秒的時(shí)間間隔內(nèi)測(cè)量3次。以測(cè)樣期間響應(yīng)的峰高來(lái)量度響應(yīng)。從雙份的8-點(diǎn)濃度響應(yīng)曲線(CRC)中獲得的數(shù)據(jù)來(lái)確定EC50和IC50。通過(guò)將對(duì)于平板所觀察到的所有響應(yīng)按比例縮放至最大響應(yīng)而產(chǎn)生激動(dòng)劑CRC。拮抗劑對(duì)激動(dòng)劑激發(fā)的阻斷可規(guī)一成在相同平板上的14個(gè)對(duì)照孔中的激動(dòng)劑激發(fā)的平均響應(yīng)。
我們已經(jīng)驗(yàn)證了基于肌醇磷酸(IR3)轉(zhuǎn)換的如WO97/05252中所述的mGluR5d或重組mGluR1的第二功能性試驗(yàn)。作為受體調(diào)節(jié)的磷脂酶C轉(zhuǎn)換的指標(biāo)而測(cè)量了IP3積聚作用。穩(wěn)定地表達(dá)人體mGluR5d或重組mGluR1受體的GHEK細(xì)胞與[3H]肌醇培養(yǎng)過(guò)夜，在HEPES緩沖鹽水中洗滌三次，并與10mM LiCl預(yù)培養(yǎng)10分鐘。加入化合物(激動(dòng)劑)并于37℃培養(yǎng)30分鐘。通過(guò)預(yù)培養(yǎng)測(cè)試化合物15分鐘，然后在谷氨酸(80μM)或DHPG(30μM)存在下培養(yǎng)30分鐘來(lái)確定拮抗劑活性。通過(guò)加入高氯酸(5％)而終止反應(yīng)。收集并中和樣品，使用重力自流離子交換柱分離肌醇磷酸。
下列試驗(yàn)提供了測(cè)試本發(fā)明化合物的詳細(xì)方案。
組I受體拮抗劑活性試驗(yàn)對(duì)于FLIPR分析，如WO97/05252中所述，將表達(dá)人體mGluR5d或重組mGluR1的細(xì)胞接種在帶有黑色側(cè)面的涂覆膠原的透明底96孔平板上，并在接種后24小時(shí)進(jìn)行[Ca2+]I遷移的分析。向在96-孔平板中的細(xì)胞培養(yǎng)物中加入在0.01％聚醚(pluronic)中的乙酰氧基甲酯形式的熒光鈣指示劑fluo-3(分子探針，Eugene，Oregon)的4μM的溶液。所有的測(cè)定均在含有127mM NaCl、5mMKCl、2mM MgCl2、0.7mM NaH2PO4、2mM CaCl2、0.422mg/ml NaHCO3、2.4mg/ml HEPES、1.8mg/ml葡萄糖以及1mg/ml BSA Fraction IV(pH 7.4)的緩沖液中進(jìn)行。FLIPR實(shí)驗(yàn)使用0.800W的激光裝置和0.4秒的CCD攝影快門(mén)速度進(jìn)行，激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為488nm和562nm。每個(gè)FLIPR實(shí)驗(yàn)均以每孔細(xì)胞平板中存在的160μ1的緩沖液為起始。從拮抗劑板加入40μl后繼而從激動(dòng)劑板加入50μl。每次添加完后，以1秒的時(shí)間間隔內(nèi)抽取50次熒光信號(hào)，然后每5秒的時(shí)間間隔內(nèi)測(cè)樣3次。以測(cè)樣期間響應(yīng)的峰高來(lái)量度響應(yīng)。
從兩份8-點(diǎn)濃度響應(yīng)曲線(CRC)中獲得的數(shù)據(jù)來(lái)確定EC50和IC50。激動(dòng)劑CRC是通過(guò)將對(duì)于平板所觀察到的所有響應(yīng)按比例縮放至最大響應(yīng)而產(chǎn)生的。拮抗劑對(duì)激動(dòng)劑激發(fā)的阻斷可規(guī)一成在相同平板上的14個(gè)對(duì)照孔中的激動(dòng)劑激發(fā)的平均響應(yīng)。
完整全細(xì)胞中肌醇磷酸轉(zhuǎn)換的測(cè)量以40×104細(xì)胞/孔將穩(wěn)定地表達(dá)人體mGluR5d或重組mGluR1受體的GHEK接種在涂覆聚-L-賴(lài)氨酸的24孔平板上含有1μCi/孔[3H]肌醇的介質(zhì)中。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)夜(16h)，然后洗滌三次并于37℃在補(bǔ)充了1單元/ml谷氨酸丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶和2mM丙酮酸的HEPES緩沖鹽水(146mM NaCl、4.2mM KCl、0.5mM MgCl2、0.1％葡萄糖、20mM HEPES，pH 7.4)中培養(yǎng)1h。細(xì)胞在HEPES緩沖鹽水中洗滌一次，并在含有10mM LiCl的HEPES緩沖鹽水中預(yù)培養(yǎng)10分鐘。加入化合物(激動(dòng)劑)并于37℃培養(yǎng)30分鐘。通過(guò)預(yù)培養(yǎng)測(cè)試化合物15分鐘，然后在谷氨酸(80μM)或DHPG(30μM)存在下培養(yǎng)30分鐘來(lái)確定拮抗劑活性。通過(guò)加入在冰上的0.5ml高氯酸(5％)而終止反應(yīng)，并于4℃培養(yǎng)至少30分鐘。收集樣品于15ml Falcon管中，使用Dowex柱分離肌醇磷酸，如下所述。
使用重力自流離子交換柱的肌醇磷酸試驗(yàn)離子交換柱的制備將離子交換樹(shù)脂(Dowex AG1-X8甲酸鹽形式，200-400目，BIORAD)用蒸餾水洗滌三次，于4℃下儲(chǔ)存。向每個(gè)柱中加入1.6ml樹(shù)脂，并用3ml 2.5mMHEPES、0.5mM EDTA、pH 7.4洗滌。
a)樣品處理將樣品收集到15ml Falcon管中，并用0.375M HEPES、0.75M KOH中和。加入4ml HEPES/EDTA(2.5/0.5mM，pH 7.4)以沉淀出高氯酸鉀。向所制得的Dowex管中加入上層清液。
b)肌醇磷酸的分離用8ml 30mM甲酸銨洗脫甘油磷脂酰肌醇。
用8ml 700mM甲酸銨/100mM甲酸洗脫全部的肌醇磷酸，將洗出液收集在閃爍管中。對(duì)混合8ml閃爍體的洗出液進(jìn)行計(jì)數(shù)。
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及一種抑制組I mGluR受體的活化的方法，包括處理用有效量的式I化合物處理含有所述受體的細(xì)胞。
篩選具有抗TLESR活性的化合物使用經(jīng)訓(xùn)練站在Pavlov吊臺(tái)中的兩種性別的成年拉布拉多犬。
形成粘膜到皮膚的食管造口術(shù)，狗在做任何實(shí)驗(yàn)之前可完全恢復(fù)。
能動(dòng)性測(cè)試簡(jiǎn)言之，在禁食約17h但可自由進(jìn)水后，利用食管造口術(shù)引入多腔套管/側(cè)洞裝置(Dentsleeve，Adelaide，南澳大利亞)以測(cè)量胃、食管下括約肌(LES)和食管的壓力。使用低柔量測(cè)壓灌注泵(Dentsleeve，Adelaide，南澳大利亞)向該裝置灌注水。充氣管沿口的方向通過(guò)以測(cè)量吞咽，用高于LES 3cm的銻電極監(jiān)測(cè)pH。所有信號(hào)均以10Hz被放大和獲取在個(gè)人電腦上。
當(dāng)不再禁食而進(jìn)行基準(zhǔn)測(cè)量得到胃/LES第III階段運(yùn)動(dòng)活性時(shí)，在前腿靜脈內(nèi)靜脈注射安慰劑(0.9％ NaCl)或測(cè)試化合物(靜脈注射，0.5ml/kg)。靜脈注射10分鐘后，通過(guò)裝置的中腔以100ml/min向胃里注入營(yíng)養(yǎng)餐(10％蛋白胨、5％D-葡萄糖、5％ Intralipid、pH 3.0)直至達(dá)到最終30ml/kg的量。注入營(yíng)養(yǎng)餐后，以500ml/min的速率注入空氣直至胃內(nèi)的壓力為10±1mmHg。繼而通過(guò)使用注入泵進(jìn)一步注入空氣或從胃中排放空氣，使在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中維持該壓力在這一水平。從開(kāi)始注入營(yíng)養(yǎng)餐到結(jié)束空氣吹入的實(shí)驗(yàn)時(shí)間為45分鐘。已證實(shí)該過(guò)程為觸發(fā)TLESRs的可靠方法。
定義TLESRs為食管下括約肌壓力以＞1mmHg/s的速率減少(相對(duì)于胃內(nèi)壓力)。該松弛作用在其開(kāi)始前≤2s內(nèi)不應(yīng)有咽信號(hào)，否則該松弛作用被歸為吞咽誘發(fā)的。LES和胃之間的壓力差應(yīng)小于2mmHg，整個(gè)松弛作用的持續(xù)時(shí)間應(yīng)長(zhǎng)于1s。
縮寫(xiě)詞BSA 牛血清白蛋白CCD 電荷偶合裝置CRC 濃度響應(yīng)曲線DHPG3，5-二羥基苯基甘氨酸EDTA乙二胺四乙酸FLIPR 熒光成像板閱讀器GHEK含有GLAST的人胚胎腎GLAST 谷氨酸鹽/門(mén)冬氨酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白HEPES 4(2-羥基乙基)-1-哌嗪乙磺酸(緩沖劑)IP3 肌醇三磷酸結(jié)果上述試驗(yàn)中測(cè)量的典型IC50值為10μM或更低。在本發(fā)明的一種情形，IC50低于2μM。在本發(fā)明的另一種情形，IC50低于0.2μM。在本發(fā)明的又一種情形，IC50低于0.05μM。
權(quán)利要求
1.式I化合物 其中X1為O或S；X2為一個(gè)鍵或C1-3烷基；P為C3-7環(huán)烷基或C4-7環(huán)烯基；R1為氫、C1-6烷基、氰基、鹵素和C1-6烷基鹵，并且一個(gè)或多個(gè)R1可互相連接或連接到一個(gè)組成P的原子上以形成橋或螺環(huán)；R2為氫、C1-3烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C0-3烷基氨基、C0-3烷基羥基或C0-3烷基二甲基氨基；R4為氫、C1-3烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、C0-3烷基氨基、C0-3烷基羥基或C0-3烷基二甲基氨基；Q為含有4、5、6或7個(gè)獨(dú)立選自C、S、O和N的原子的環(huán)，該環(huán)可為飽和的或部分不飽和的，且所述環(huán)可進(jìn)一步含有獨(dú)立選自SO、SO2、CO、氰基和CS的基團(tuán)；R3為氫、羥基、鹵素、硝基、氰基、OC1-3烷基鹵、C1-3烷基鹵、C1-3烷基、C1-3烷氧基C0-3烷基、C0-3烷基OC2-4烷醇C1-3烷醇、氨基、C1-3烷基氨基C0-3烷基、(C1-3烷基)2氨基C0-3烷基、酰胺、C1-3烷基酰胺C0-3烷基或(C1-3烷基)2酰胺C0-3烷基；n為0、1、2、3或4；且m為0、1、2、3或4；或其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或溶劑化鹽。
2.一種式I化合物 其中X1為O或S；X2為一個(gè)鍵或C1-3烷基；P為C3-7環(huán)烷基或C4-7環(huán)烯基；R1為氫、C1-6烷基、氰基、鹵素和C1-6烷基鹵，并且一個(gè)或多個(gè)R1可互相連接或連接到一個(gè)組成P的原子上以形成橋或螺環(huán)；R2為氫、C1-3烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；R4為氫；Q為含有4、5、6或7個(gè)獨(dú)立選自C、S、O和N的原子的環(huán)，該環(huán)可為飽和的或部分不飽和的，且所述環(huán)可進(jìn)一步含有獨(dú)立選自SO、SO2、CO、氰基和CS的基團(tuán)；R3為氫、羥基、鹵素、硝基、OC1-3烷基鹵、C1-3烷基鹵、C1-3烷基、C1-3烷氧基C0-3烷基、C1-3烷醇、氰基、氨基或酰胺；n為0、1、2、3或4；且m為0、1、2、3或4；或其N(xiāo)1-氧化物、鹽、溶劑化物或溶劑化鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2任意之一的化合物，其中P為被一個(gè)或多個(gè)R1所取代的C3-7環(huán)烷基，其中R1為氫、C1-6烷基、氰基、鹵素或C1-6烷基鹵，且一個(gè)或多個(gè)R1可彼此連接或連接到組成P的一個(gè)原子上以形成橋或螺環(huán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中P為被一個(gè)或多個(gè)R1所取代的C5-7環(huán)烷基，其中R1為甲基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任意之一的化合物，其中X1為O。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任意之一的化合物，其中X2為一個(gè)鍵。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任意之一的化合物，其中R2為氫。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任意之一的化合物，其中R4為氫或甲基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任意之一的化合物，其中Q為含有5、6或7個(gè)獨(dú)立選自C、O和N的原子的環(huán)，該環(huán)可為飽和的或部分不飽和的。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任意之一的化合物，其中R3為氫、羥基、鹵素、氰基、C1-3烷基或C1-3烷氧基C0-3烷基。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10任意之一的化合物，其中該化合物在P環(huán)上R1和X2之間具有反式關(guān)系，此時(shí)P為環(huán)己烷，R1和X2分別在4位和1位上與P相連。
12.化合物N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，或其鹽、溶劑化物或其溶劑化鹽。
13.化合物N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-3-甲基-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，8-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，7-羥基-5，7-二甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺，N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7，8，9-四氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺，7-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，6-甲基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，N-(反-4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺，N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-2-甲酰胺，N-(反-4-甲基環(huán)己基)-7，8-二氫-5H-吡喃并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺，7-羥基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，6-羥基-N-(反-4-甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺，N-(4，4-二甲基環(huán)己基)-5，6，7，8-四氫喹喔啉-2-甲酰胺4-氧化物以及6，7-二甲基-N-(4-甲基環(huán)己基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[b]吡嗪-2-甲酰胺，或其鹽、溶劑化物或溶劑化鹽。
14.一種藥物組合物，其包括作為活性成分的具有治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-13任意之一的化合物，以及一種或多種藥學(xué)上可接受的稀釋劑、賦形劑和/或惰性載體。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的藥物組合物，其用于治療組I mGluR介導(dǎo)的疾病。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-13任意之一的化合物，其用于治療。
17.根據(jù)權(quán)利要求1-13任意之一的化合物，其用于治療組I mGluR介導(dǎo)的疾病。
18.根據(jù)權(quán)利要求1-13任意之一的化合物在生產(chǎn)用于治療組I mGluR介導(dǎo)的疾病的藥物中的用途。
19.一種治療組I mGluR介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括向需要這種治療的哺乳動(dòng)物，包含人類(lèi)施以治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-13任意之一的化合物。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，用于治療神經(jīng)疾病。
21.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，用于治療精神疾病。
22.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，用于治療慢性的和急性的疼痛性疾病。
23.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，用于治療腸胃疾病。
24.一種用于抑制組I mGluR受體活化的方法，該方法包括用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物來(lái)處理含有所述受體的細(xì)胞。
25.制備根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物的方法，其中除非另有規(guī)定，P、Q、X1、X2、R1、R2、R3、R4、m和n如在式I中所定義，該方法包括 使式VII的化合物，其中Ry為氫，與活化劑反應(yīng)，然后用式XIV的胺處理所得的?；u，或被親核試劑活化的酸衍生物，以得到式I化合物，或者， 使式XIV的胺與式VII的化合物反應(yīng)，其中Ry為氫，得到式I化合物，或 使式VIa的化合物或其N(xiāo)1-氧化物，其中RX為C1-6的烷基，與合適的胺例如式XIV的化合物進(jìn)行反應(yīng)，得到式I化合物，或， 使式IV和XVb中間體直接縮合得到式I化合物。
26.化合物5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸甲酯和5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸。
27.化合物3-甲基-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸乙酯，3-甲基-5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸，2，3-二氨基-N-(4-甲基-環(huán)己基)-丙酰胺，4-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-環(huán)己烷-1，2-二酮，6，7-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并吡嗪-2-羧酸甲酯，5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸甲酯和5，6，7，8-四氫-喹喔啉-2-羧酸。
28.根據(jù)權(quán)利要求26和27的化合物，其用作制備根據(jù)權(quán)利要求1的化合物的中間體。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的新型化合物，其中Q為部分飽和的環(huán)，或該化合物的N
文檔編號(hào)A61K31/4985GK1742001SQ200480002600
公開(kāi)日2006年3月1日 申請(qǐng)日期2004年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月31日
發(fā)明者H·吉貝克, M·約翰松, A·米尼迪斯, G·諾爾德瓦爾, P·拉博伊松, D·溫斯布羅 申請(qǐng)人:阿斯利康(瑞典)有限公司, Nps藥物有限公司