利用提取sod后的血渣再提取純化氯化血紅素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體說是一種利用提取SOD后的血渣再提取純化氯化血紅素的方法，氯化血紅素產(chǎn)品應(yīng)用于普通食品、保健食品及藥品等領(lǐng)域。
[0002]
【背景技術(shù)】
[0003]氯化血紅素是動(dòng)物血液中的天然色素，具有重要的生理功能和實(shí)用價(jià)值，在化工、食品、醫(yī)藥及化妝品行業(yè)中都有應(yīng)用。如在制藥行業(yè)中，氯化血紅素可以作為半合成膽紅素的原料，膽紅素再制備人工牛黃;氯化血紅素還可以合成血卟啉衍生物，血卟啉衍生物已證實(shí)具有抗癌功效，1998年我國正式批準(zhǔn)以氯化血紅素為原料合成的血卟啉衍生物可作為抗腫瘤藥物。另外，氯化血紅素在臨床上已作為補(bǔ)鐵劑，治療由缺鐵導(dǎo)致的貧血癥。雖然目前常使用的為非氯化血紅素的補(bǔ)鐵劑，如葡萄糖酸亞鐵、硫酸亞鐵、富馬酸鐵等，但這些物質(zhì)在人體內(nèi)吸收率很低，并存在一定的毒副作用;而氯化血紅素作為補(bǔ)鐵劑不僅副作用小，還可以被腸粘膜上的絨毛細(xì)胞直接吸收，吸收率高達(dá)20%以上，且對(duì)胃腸道不會(huì)造成損傷，有望取代當(dāng)前的常用補(bǔ)鐵劑，成為深受歡迎的一代產(chǎn)品。
[0004]在食品行業(yè)中，氯化血紅素也有廣闊的發(fā)展前景。如在傳統(tǒng)的肉制品加工中常利用亞硝酸鹽發(fā)色，會(huì)存在一定的致癌風(fēng)險(xiǎn)，而人工合成色素的使用也存在一定的毒副作用。氯化血紅素可替代肉制品中的損害人體健康的人工合成色素如亞硝酸鹽，不僅能很好的保持肉質(zhì)固有的天然色，色澤均勻，口感韌性強(qiáng)，同時(shí)還增加了營養(yǎng)價(jià)值。
[0005]—個(gè)多世紀(jì)以來，圍繞氯化血紅素的提取與純化，國內(nèi)外眾多科研人員一直在不斷地探索。到目前為止，主要有五種提取方法:冰醋酸法、乙酸鈉法、蒸餾法、鞣酸法和羧甲基纖維素法。這五種制備方法之間優(yōu)劣性的對(duì)比已有大量的文獻(xiàn)報(bào)道，這里不再贅述。
[0006]這五種方法都是以離心后的紅血球?yàn)樵?，而以提取SOD后的血渣為原料再提取純化氯化血紅素鮮見報(bào)道，僅有丁建平等《豬紅細(xì)胞中超氧化物歧化酶和血紅素同步提取純化的研究》(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào))[J]，1996，18(2):65?68)的一篇研究論文。本發(fā)明提取純化氯化血紅素的生產(chǎn)方法與該論文有較大差別，且在本公司實(shí)現(xiàn)了規(guī)模化生產(chǎn)。在提取SOD時(shí)，血液中加入了無機(jī)鹽，因而血渣中含有一定濃度的鹽份，而且許多蛋白質(zhì)在提取SOD時(shí)已變性，故在提取和純化方法上，與直接用紅血球?yàn)樵咸崛〖兓然t素有較大差升。
[0007]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是提供了一種利用提取SOD后的血渣再提取純化氯化血紅素的方法，可進(jìn)行規(guī)模化生產(chǎn)。
[0009]一種利用提取SOD后的血渣再提取純化氯化血紅素的方法，是在動(dòng)物血塊提取SOD后產(chǎn)生的血渣經(jīng)干燥、粉碎、抽提、過濾、沉淀、酸洗、堿溶、絮凝、中和、m)TA洗、水洗、干燥后制得氯化血紅素，其步驟如下:
I)、提取SOD后的血渣經(jīng)日光暴曬或干燥機(jī)烘干，再經(jīng)40?80目篩的粉碎機(jī)粉碎，得到血渣粉；
2 )、將300?600份的丙酮，5?1份的工業(yè)鹽酸，30?60份的水混合均勻，得到抽提液，該抽提液pH值為1.0?3.0之間；
3)、將步驟I的血渣粉加入到步驟2的抽提液中，攪拌120?180分鐘，攪拌途中取樣測pH值并補(bǔ)加工業(yè)鹽酸，使pH值維持在2.0?3.0之間，得到懸濁液；
4)、將懸濁液抽入到帶夾套的搪瓷過濾器中，搪瓷過濾器的四氟濾板上預(yù)先鋪墊濾布，懸濁液經(jīng)過濾后，得到氯化血紅素丙酮液；
5)、在氯化血紅素丙酮液中加入1.0?3.0%的沉淀劑，使氯化血紅素沉淀下來，過濾得到氯化血紅素濾餅。所述的沉淀劑是乙酸鈉溶液，或乙酸鉀溶液；
6)、用pHl.0?3.0的分析純鹽酸液洗滌氯化血紅素濾餅；
7)、將步驟6的氯化血紅素濾餅用0.08?0.12mol/L的堿溶液溶解，經(jīng)離心得到氯化血紅素堿溶液;所述的堿溶液是氫氧化鈉溶液，或氫氧化鉀溶液；
8 )、在氯化血紅素堿溶液中加入0.5?2.5%的絮凝劑，使氯化血紅素絮凝下來，離心收集氯化血紅素沉淀;所述的絮凝劑是氯化鈣，或乳酸鈣；
9)、先用水溶散步驟8的氯化血紅素沉淀，再用2?3mol/L的分析純鹽酸液調(diào)pH值至5.5?7.0，離心收集氯化血紅素沉淀。
[0010]10)、用0.1?0.5%的EDTA溶液洗滌步驟9的氯化血紅素沉淀；所述的EDTA溶液是EDTA.2Na的水溶液，或EDTA.4Na的水溶液；
II)、用純凈水洗滌步驟10的氯化血紅素沉淀至中性，所述的純凈水是二級(jí)反滲透水，或蒸餾水；
12)、將步驟11的氯化血紅素沉淀置于80?105°C的烘箱中烘干，粉碎并過80目篩，得到氯化血紅素。
[0011 ]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及其有益效果是:
1、本發(fā)明利用提取SOD后產(chǎn)生的副產(chǎn)物一一血渣，再提取純化氯化血紅素，使血渣變廢為寶，實(shí)現(xiàn)了資源化利用。
[0012]2、本發(fā)明步驟4過濾結(jié)束后，夾套通蒸汽而蒸餾回收殘留在濾渣中的丙酮，該回收丙酮可循環(huán)使用;蒸餾后的濾渣經(jīng)水洗、干燥，可做蛋白飼料。
[0013]3、本發(fā)明工藝簡單，操作方便，獲得的氯化血紅素產(chǎn)率達(dá)1.0%以上(相對(duì)于血渣粉而言)，鐵含量達(dá)8.0%以上，純度達(dá)92%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說明。
[0015]實(shí)施例1
新鮮黃牛血塊，經(jīng)破碎、乳化、溶血、沉淀、壓濾得到SOD壓濾液和壓干的血渣;其中，SOD壓濾液經(jīng)超濾、熱變性、柱色譜、修飾、丙酮沉淀、凍干得到修飾SOD凍干粉;而壓干的血渣經(jīng)以下步驟的提取和純化，得到氯化血紅素產(chǎn)品。
[0016]氯化血紅素的生產(chǎn)步驟如下: 1)、提取SOD后的黃牛血渣經(jīng)日光暴曬或干燥機(jī)烘干，再經(jīng)40目篩的粉碎機(jī)粉碎，得到血渣粉；
2)、將300份的丙酮，5份的工業(yè)鹽酸，30份的水混合均勻，得到抽提液，該抽提液pH值為
1.2；
3)、將步驟I的血渣粉加入到步驟2的抽提液中，攪拌120分鐘，攪拌途中取樣測pH值并補(bǔ)加工業(yè)鹽酸，使pH值維持在2.0，得到懸濁液；
4)、將懸濁液抽入到帶夾套的搪瓷過濾器中，搪瓷過濾器的四氟濾板上預(yù)先鋪墊濾布，懸濁液經(jīng)過濾后，得到氯化血紅素丙酮液；
5)、在氯化血紅素丙酮液中加入1.0%的乙酸鈉溶液，使氯化血紅素沉淀下來，過濾得到氯化血紅素濾餅。
[0017]6)、用pHl.0的分析純鹽酸液洗滌氯化血紅素濾餅；
7)、將步驟6的氯化血紅素濾餅用0.08mol/L的氫氧化鈉溶液溶解，經(jīng)離心得到氯化血紅素堿溶液；
8 )、在氯化血紅素堿溶液中加入0.5%的氯化鈣，使氯化血紅素絮凝下來，離心收集氯化血紅素沉淀；
9)、先用水溶散氯化血紅素沉淀，再用2mol/L的分析純鹽酸液調(diào)pH值至6.0，離心收集氯化血紅素沉淀。
[0018]10)、用0.2%的EDTA.2Na的水溶液洗滌步驟9的氯化血紅素沉淀；
11)、用蒸餾水洗滌步驟10的氯化血紅素沉淀至中性；
12)、將步驟11