本發(fā)明涉及藥物化學(xué)和藥物治療學(xué)領(lǐng)域。具體涉及一種由通式I所示的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物、其制備方法、包含該化合物的藥物組合物及其用途。本發(fā)明的取代哌啶類化合物可以作為nAChRs的配體小分子用于制備防治神經(jīng)退行性疾病或抑郁癥的藥物。
背景技術(shù)：
阿爾茨海默癥(Alzheimer’s disease，下文簡稱AD)，又稱早老性癡呆，是常見于老年人群的一種慢性神經(jīng)退行性疾病，其臨床表現(xiàn)為進(jìn)行性加重的智能障礙、記憶力減退、精神行為異常等。它嚴(yán)重威脅著老年人的健康，尤其是當(dāng)今社會逐漸老齡化，這一情況越加嚴(yán)峻，引起了人們的普遍關(guān)注。抑郁癥是一種以情感病態(tài)變化為主要癥狀的精神病，全球抑郁癥患者達(dá)3.5億人。抑郁癥已成為世界的第四大疾病，該疾患治療的臨床需求巨大。目前治療抑郁癥的一線藥物有選擇性5-羥色胺(5-HT)重攝取抑制劑(selective serotonin reuptake inhibitor,SSRI)和5-HT/NE雙重重攝取抑制劑(5-HT/NE reuptake inhibitor,SNRI)。但是這些藥物都存在起效時間慢、部分患者治療無效、不能有效改善快感缺乏、對患者認(rèn)知能力改善緩慢、易導(dǎo)致性功能障礙等問題。
目前乙酰膽堿酯酶抑制劑仍然是臨床治療AD的主要藥物，實踐顯示，雖然其可以逆轉(zhuǎn)膽堿功能損傷導(dǎo)致的學(xué)習(xí)、記憶缺陷，使部分病人癥狀減輕，但并不能從根本上改變疾病狀態(tài)(Barril,X.et al Mini Rev.Med.Chem.2001,1,255)。
研究顯示，腦內(nèi)膽堿能受體有兩類：毒蕈堿型(mAChRs)和煙堿型(nAChRs)，前者在AD腦內(nèi)并無改變，而后者的數(shù)目卻明顯減少。而且nAChRs的激動劑尼古丁可改善認(rèn)知和記憶。因此nAChRs開始成為人們關(guān)注的重點。研究表明，nAChRs具有調(diào)節(jié)神經(jīng)元興奮性的功能，可使神經(jīng)元處于一種合適的生理狀態(tài)，維持正常的行為反應(yīng)，尤其是認(rèn)知過程。目前已有較多的nAChRs的配體小分子在治療AD方面進(jìn)入臨床II期，如，雅培公司的ABT-089、賽諾菲公司的SSR-180711、阿斯利康公司的AZD-1446。
早在1972年，Janowsky等就發(fā)現(xiàn)膽堿-腎上腺素失衡會導(dǎo)致抑郁樣作用。2006年Gotti提出廣泛分布于基底節(jié)，紋狀體，丘腦，下丘腦，杏仁核，腹側(cè)被蓋區(qū)，藍(lán)斑和中縫背核的α4β2(nAChRs的一種亞型)被激活時會管理單胺類如多巴胺的釋放。臨床數(shù)據(jù)也表明，抑郁癥患者服用藥物varenicline(α4β2部分激動劑)后抑郁癥狀會減輕。而在小鼠強迫游泳實驗中，服用α4β2激動劑后會增強西酞普蘭和瑞波西汀的抗抑郁作用。相反對于β2基因敲除的小鼠，在強迫游泳實驗中運動性降低，即使服用三環(huán)類抗抑郁藥也完全沒有作用。西班牙的馬德里自治大學(xué)研究的nAChRs配體小分子BB-243，目前在治療抑郁領(lǐng)域處于臨床前研究階段。另外輝瑞公司的nAChRs配體小分子CP601927，在小鼠懸 尾實驗和強迫游泳實驗中表現(xiàn)良好，并于2010年進(jìn)入臨床II期。
2003年Miyazawa于Nature上發(fā)表了電鰩的nAChRs低溫電子顯微圖像。這讓有關(guān)研究者對nAChRs的基本結(jié)構(gòu)有個大體的了解。但是由于nAChRs是一個跨膜蛋白，故其純化和分離非常困難，截止到目前尚未獲得完整的晶體結(jié)構(gòu)。但是在新藥研究中，有關(guān)研究者需要了解nAChRs與不同配體結(jié)合時結(jié)構(gòu)域的變化以及異同，這就更加迫切地希望了解nAChRs的晶體結(jié)構(gòu)。
綜上所述，鑒于現(xiàn)有技術(shù)中AChBP已經(jīng)被證明與nAChRs具有相類似的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域和相同藥理特性，目前通用的是使用乙酰膽堿結(jié)合蛋白(AChBP)來間接研究nAChRs的辦法，本申請的發(fā)明人擬尋求完整晶體結(jié)構(gòu)的蛋白代替nAChRs，由于AChBP與nAChRs的配體結(jié)合域具有同源性，兩者基本特征、結(jié)構(gòu)特點、結(jié)合位點的位置等均具有相似性，本申請擬通過乙酰膽堿結(jié)合蛋白(AChBP)研究nAChRs，提供一類具有乙酰膽堿結(jié)合蛋白(AChBP)結(jié)合活性的取代哌啶類化合物，用于制備預(yù)防和/或治療神經(jīng)退行性疾病或癡呆癥或抑郁癥藥物。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個目的在于提供通式I的具有乙酰膽堿結(jié)合蛋白(AChBP)結(jié)合活性的取代哌啶類化合物，該類化合物可以作為nAChRs的配體小分子用于制備防治神經(jīng)退行性疾病或抑郁癥的藥物。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種由下文通式I表示的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物。
本發(fā)明的又一個目的在于提供一種含有由通式I表示的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物的制備方法。
本發(fā)明的還一個目的在于提供一種含有由通式I表示的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物的藥物組合物。
本發(fā)明的又一個目的在于提供由通式I表示的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物以及包含該化合物的藥物組合物的用途。
具體而言，本發(fā)明提供了一種由如下通式I表示的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物以及包含該化合物的藥物組合物；X、Y、R1、R2、m、n定義如下；
其中：
X、Y各自獨立地為氮或碳，并且X、Y中的一個為氮另一個為碳；
R1為H、烷基或是芳香基團(tuán)。烷基為C1～C10的直鏈或支鏈烷基、C3～C6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基；芳香基團(tuán)為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等苯系芳基，或吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等雜芳基，芳香基團(tuán)上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，羥基，氨基，烷氧基，環(huán)烷氧基，烷氧烷基，環(huán)烷氧烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，烯基，炔基，苯基，-NR’R”，-(C＝O)NR’R’‘或是-NR’(C＝O)R”；
R2為芳香基團(tuán)，芳香基團(tuán)為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等苯系芳基，或吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等雜芳基，芳香基團(tuán)上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、羥基、氨基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基、-NR’R”、-(C＝O)NR’R”或是-NR’(C＝O)R”；
m為1-4的整數(shù)；n為1-4的整數(shù)。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)X為碳，Y為氮時：
R1為H、烷基或是芳香基團(tuán)。烷基為C1～C10的直鏈或支鏈烷基、C3～C6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基；芳香基團(tuán)為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等苯系芳基，或吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等雜芳基，芳香基團(tuán)上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，羥基，氨基，烷氧基，環(huán)烷氧基，烷氧烷基，環(huán)烷氧烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，烯基，炔基，苯基，-NR’R”，-(C＝O)NR’R’‘或是-NR’(C＝O)R”；
R2為芳香基團(tuán)，芳香基團(tuán)為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等苯系芳基，或吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等雜芳基，芳香基團(tuán)上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、羥基、氨基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基、-NR’R”、-(C＝O)NR’R”或是-NR’(C＝O)R”；
m為1-4的整數(shù)；n為1-4的整數(shù)。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)X為氮，Y為碳時：
R1為雜芳基，雜芳基為吡啶環(huán)(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等，雜芳基上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，羥基，氨基，烷氧基，環(huán)烷氧基，烷氧烷基，環(huán)烷氧烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，烯基，炔基，苯基，-NR’R”，-(C＝O)NR’R’‘或是-NR’(C＝O)R”；
R2為芳香基團(tuán)，芳香基團(tuán)為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等苯系芳基，或吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等雜芳基，芳香基團(tuán)上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、羥基、氨基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基、-NR’R”、-(C＝O)NR’R”或是-NR’(C＝O)R”；
m為1-4的整數(shù)；n為1-4的整數(shù)。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)X為氮，Y為碳時：
R1為H、烷基或苯系芳基。烷基為C1～C10的直鏈或支鏈烷基、C3～C6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基；苯系芳基為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等，苯系芳基上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，羥基，氨基，烷氧基，環(huán)烷氧基，烷氧烷基，環(huán)烷氧烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，烯基，炔基，苯基，-NR’R”，-(C＝O)NR’R’‘或是-NR’(C＝O)R”；
R2為雜芳環(huán)，雜芳環(huán)為吡啶環(huán)(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶環(huán)(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯環(huán)、咪唑環(huán)、稠雜環(huán)等。雜芳環(huán)上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、羥基、氨基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基、-NR’R”、-(C＝O)NR’R”或是-NR’(C＝O)R”；
m為1-4的整數(shù)；n為1-4的整數(shù)。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)X為氮，Y為碳時：
R1為H、烷基或苯系芳基。烷基為C1～C10的直鏈或支鏈烷基、C3～C6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基；苯系芳基為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等，苯系芳基上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，羥基，氨基，烷氧基，環(huán)烷氧基，烷氧烷基，環(huán)烷氧烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，烯基，炔基，苯基，-NR’R”，-(C＝O)NR’R’‘或是-NR’(C＝O)R”；
R2為苯系芳基，苯系芳基為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等，苯系芳基上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、羥基、氨基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基、-NR’R”、-(C＝O)NR’R”或是-NR’(C＝O)R”；
m為1-4的整數(shù)，n為1-4的整數(shù)，但m、n不同時為1。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，X、Y各自獨立地為氮或碳，并且X、Y中的一個為氮另一個為碳；
R1為芳香基團(tuán)，芳香基團(tuán)為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等苯系芳基，或吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等雜芳基，芳香基團(tuán)可選擇性地由下列一個或多個取代基取代： 鹵素，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，羥基，氨基，烷氧基，環(huán)烷氧基，烷氧烷基，環(huán)烷氧烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，烯基，炔基，苯基，-NR’R”，-(C＝O)NR’R’‘或是-NR’(C＝O)R”；
R2為雜芳基，雜芳基為吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等。雜芳基上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、羥基、氨基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基、-NR’R”、-(C＝O)NR’R”或是-NR’(C＝O)R”；
m為1-4的整數(shù)；n為1-4的整數(shù)。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，X、Y各自獨立地為氮或碳，并且X、Y中的一個為氮另一個為碳；
R1為芳香基團(tuán)，芳香基團(tuán)為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等苯系芳基，或吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、吡咯基、咪唑基、稠雜環(huán)基等雜芳基，芳香基團(tuán)上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基；
R2為雜芳基，雜芳基為吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)、稠雜環(huán)基等。雜芳基上可選擇性地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基；
m為1-4的整數(shù)；n為1-4的整數(shù)。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)X為碳，Y為氮時：
R1、R2各自獨立地為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)、吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)等芳基，R1、R2上可獨立地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基；
m、n各自獨立地為1或2或3。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)X為氮，Y為碳時：
R1為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)、吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)等芳基，R2為吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基)等雜芳基。R1、R2上可獨立地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基；
m、n各自獨立地為1或2或3。
在本發(fā)明一優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)X為氮，Y為碳時：
R1、R2各自獨立地為苯基、萘基(1-萘基或2-萘基)等苯系芳基，R1、R2上可獨立地由下列一個或多個取代基取代：鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧烷基、環(huán)烷氧烷基、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基、炔基、苯基；
m、n各自獨立地為1或2或3，但m、n不同時為1。
本發(fā)明中，除非另作說明或指出，術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘；
除非另作說明或指出，術(shù)語“烷基”均指單價飽和直鏈或帶支鏈的碳?xì)滏湣Ｌ細(xì)滏溡话愫?-6個碳，包括戊烷基，異戊烷基，新戊烷基，叔戊烷基，己基，異己基。一種較好的烷基類型代表含1-4個碳的碳?xì)滏?，包括丁基，異丁基，仲丁基及叔丁基。另一種較好的烷基類型代表含1-3個碳的碳?xì)滏?，尤其是甲基，乙基，丙基，異丙基?/p>
除非另作說明或指出，術(shù)語“烯基”均只含有一個或多個雙鍵的碳鏈，包括二烯、三烯、聚烯烴。一種較好的烯基類型代表含2-6個碳的碳?xì)滏?，包含至少一個雙鍵。一種最好的烯基類型為乙烯基；1-或2-丙烯基；1-,2-或3-丁烯基；1,3-丁二烯基；1-,2-,3-,4-或5-己烯基；1,3-己二烯基或1,3,5-己三烯基；
除非另作說明或指出，術(shù)語“炔基”均只含有一個或多個三鍵的碳鏈，包括二炔，三炔和聚炔基。一種較好的炔基類型代表含有2-6個碳的碳?xì)滏?，包含至少一個三鍵。在這其中最好的炔基類型為乙炔基；1-或2-丙炔基；1-，2-或3-丁炔基；1,3-丁二炔基；1-,2-,3-或4-戊炔基；1,3-戊二炔基；1-,2-,3-,4-或5-己炔基；1,3-己二炔基或1,3,5-己三炔基；
環(huán)氧烷基均指環(huán)化的烷基，較好的包含3-7個碳原子，包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊烷基，環(huán)己烷基和環(huán)庚基。
除非另作說明或指出，術(shù)語“烷氧基”是指O-烷基，烷基定義如上；
除非另作說明或指出，術(shù)語“環(huán)氧烷基”是指O-環(huán)烷基，環(huán)烷基定義如上；
除非另作說明或指出，術(shù)語“芳香基團(tuán)”是指芳香碳鏈如苯基，萘基(1-萘基或2-萘基)或芴基；
除非另作說明或指出，所述的一個或多個取代基中，鹵素取代為2-氯，3-氯，4-氯，2,3-二氯，2,4-二氯取代；所述的三氟甲基取代為2-三氟甲基，3-三氟甲基，4-三氟甲基取代；所述的烷基取代為2-甲基，3-甲基，4-甲基取代；
除非另作說明或指出，通式I所述的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物，其特征在于，所述的立體異構(gòu)體可以是手性化合物的左旋體、右旋體、外消旋體，及其任意比例的混合物；
除非另作說明或指出，通式I所述的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物，其特征在于，所述的鹽類由所述的取代哌啶類化合物與無機酸或有機酸形成藥學(xué)上可接受的酸加成鹽；
除非另作說明或指出，通式I所述的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上 可接受的鹽或其溶劑化物，其特征在于，所述的無機酸為鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、硫酸、磷酸中的一種或任意兩種或以上的組合物；所述有機酸為酒石酸、乙酸、扁桃酸、馬來酸、富馬酸、苯甲酸、琥珀酸、乳酸、檸檬酸、葡糖酸、甲磺酸、苯磺酸和對甲苯磺酸中的一種或任意兩種或以上的組合物；
本發(fā)明提供了取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物的制備方法，該方法使用以下合成路線：
反應(yīng)步驟如下：
a)以化合物A為原料，經(jīng)三乙胺作用下與Boc酸酐反應(yīng)得到化合物B；
b)化合物B在LDA作用下與鹵代烷發(fā)生親核取代反應(yīng)得到化合物C；
c)化合物B與丙二酸環(huán)異丙酯，硼酸三異丙酯反應(yīng)生成化合物E；
d)化合物E在碘化亞銅催化下與一種或多種不同碳鏈長度的芳烷基格氏試劑發(fā)生親核取代反應(yīng)得到化合物F；
e)化合物F在DMSO-H2O的混合溶液中加熱至135℃反應(yīng)兩天得到化合物G；
f)化合物G以硼烷為還原劑，在THF中回流24-48h得到化合物H；
g)化合物C經(jīng)四氫鋰鋁的THF溶液還原得到化合物D；
h)化合物D和化合物H在氫化鈉作用下與氟代化合物發(fā)生親核取代反應(yīng)得到化合物J；
i)化合物J在三氟乙酸作用下脫除保護(hù)基得到目標(biāo)化合物。
根據(jù)本發(fā)明所提供的取代哌啶類化合物、其立體異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物，優(yōu)選為如下化合物之一：
本發(fā)明提供了有乙酰膽堿結(jié)合蛋白結(jié)合活性的哌啶類化合物，在用于制備nAChRs的配體小分子進(jìn)一步用于預(yù)防、延緩或治療神經(jīng)退行性疾病、阿爾茨海默癥、帕金森癥、癡呆癥、抑郁癥方面的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的取代哌啶類化合物，具有明顯的乙酰膽堿結(jié)合蛋白結(jié)合活性，為進(jìn)一步研究可能的高活性nAChRs的配體小分子、研究可能具有改善認(rèn)知功能，同時緩解AD和抑郁癥等疾病進(jìn)展的創(chuàng)新藥物提供了有價值的信息。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，以下實施方式只能以舉例的方式描述本發(fā)明。很明顯，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可在本發(fā)明的范圍和實質(zhì)內(nèi)，對本發(fā)明進(jìn)行各種變通和修改。需要了解的是，本發(fā)明意欲涵蓋所附權(quán)利要求書中包括的變通和修改。
實驗及樣品分析所用儀器：
1HNMR和13CNMR均在Varian Mercury plus 400核磁共振儀上測定。
LS-MS由Agilent 1100Series LC/MSD1946D型質(zhì)譜儀測定。
特殊化學(xué)試劑購自sigma，Alfa，Acros，安耐吉等試劑公司。一般化學(xué)試劑購自國藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司，均為國產(chǎn)分析純。
主要溶劑包括石油醚，乙酸乙酯，二氯甲烷，甲醇等，購自國藥集團(tuán)，均為合成級。
柱層析硅膠采用青島海洋化工廠化學(xué)純硅膠，一般為300-400目。
TLC硅膠板為煙臺化工生產(chǎn)的HSF-254薄層層析預(yù)制板。
紫外燈為上海顧村電光儀器廠ZF-1型三用紫外分析儀。
制備實施例
實施例1：化合物I-1 3-((4-芐基哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成路線：
反應(yīng)步驟：
a)將原料A(4-哌啶甲酸乙酯)(67.5g,0.43mol)溶于500ml無水二氯甲烷中，攪拌下加入三乙胺(72.4ml,0.52mol)，冰浴下加入Boc2O(104.2g,0.47mmol)的二氯甲烷溶液，加完后體系逐漸升溫至室溫反應(yīng)過夜。反應(yīng)完畢后體系中加入200ml水，有機相稀鹽酸洗，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，得一膠狀黃色固體90g。產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。收率：95％
MS(m/z):280[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.11-4.05(q,J＝7.2Hz,2H),4.02-3.88(m,2H),2.84-2.70(m,2H),1.84-1.77(m,2H),1.62-1.51(m,2H),1.39(s,9H),1.19(t,J＝6.8Hz,3H).
b)在制備化合物C的過程中，首先進(jìn)行LDA的制備，將二異丙基胺(3.1ml,21.7mmol)溶于20ml無水THF中，-78℃下加入正丁基鋰11ml(2.4N,26.4mmol)，加完后在該溫度下反應(yīng)5min后置于冰浴下反應(yīng)30min。LDA制備完畢后，重新冷卻至-78℃下，緩慢滴加上步產(chǎn)物B(3.1g,12.1mmol)的THF溶液10ml，滴加完畢后體系于-30℃ 下反應(yīng)30min。繼續(xù)冷卻至-78℃，緩慢滴加芐基溴(4.1g,24.2mmol)，加完后在該溫度下反應(yīng)2h，然后體系逐漸升溫至室溫過夜。反應(yīng)完成后，冰浴下加入10ml飽和氯化銨溶液淬滅反應(yīng)，100ml乙酸乙酯萃取，有機相水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干，殘余物硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝15:1)，得一無色油狀物1.9g。收率：45％
MS(m/z):370[M+Na]+
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.25-7.19(m,3H),7.05-7.02(m,2H),4.11-4.06(m,2H),3.95-3.90(m,2H),2.84-2.78(m,4H),2.10-2.06(m,2H),1.46-1.42(m,11H),1.16(t,J＝7.2Hz,3H).
g)在制備化合物D的過程中，將上步產(chǎn)物C(482mg,1.39mmol)溶于50ml無水THF中，冰浴下加入四氫鋁鋰的THF溶液1.39ml(1N,1.39mmol)，加完后在該溫度下反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢后冰浴下加入10ml淬滅，10ml 20％的NaOH溶液，攪拌1min后加入200ml乙酸乙酯萃取，有機相水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干得一無色油狀物，久置稱為白色膠裝固體420mg。產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。收率：95％
MS(m/z):328[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.22-7.16(m,2H),7.15-7.10(m,3H),3.70-3.58(brs,1H),3.49-3.41(m,2H),3.36-3.28(m,4H),2.67(s,2H),1.44-1.32(m,13H).
h)在制備化合物I的過程中，將上步產(chǎn)物D(396mg,1.63mmol)溶于10ml無水DMSO中，攪拌下加入氫化鈉(72mg,1.79mmol)，3-氟吡啶(155μl,1.79mmol)，反應(yīng)升溫至60℃下過夜。反應(yīng)完畢后，小心加入冰水淬滅反應(yīng)。60ml乙酸乙酯萃取，有機相水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，殘余物硅膠柱層析(PE:EA＝3:1)，得一無色油狀物280mg。收率：45％
MS(m/z):383[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35-8.19(m,2H),7.25-7.14(m,5H),7.05-7.01(m,2H),3.62(s,2H),3.59-3.51(m,2H),3.46-3.35(m,2H),2.84(s,2H),1.59-1.54(m,4H),1.45-1.43(m,9H).
i)在制備化合物I-1的過程中，將上步產(chǎn)物I(100mg,0.26mmol)溶于10ml二氯甲烷:TFA＝3:1的混合溶液中，反應(yīng)于室溫下反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢后氮氣吹干溶劑，殘余物溶于50ml二氯甲烷中，加入20％NaOH溶液2ml調(diào)節(jié)體系為強堿性，有機相無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干，殘余物制備硅膠板分離(二氯甲烷:甲醇＝15:1)，得一淡黃色油狀物72mg。收率：99％
MS(m/z):283[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.80-9.00(brs,1H),8.33-8.30(brs,1H),8.22-8.19(brs,1H),7.24-7.14(m,5H),7.02-6.98(m,2H),3.67(s,2H),3.40-3.20(m,4H),2.86(s,2H), 1.94-1.88(m,4H).。
實施例2：化合物I-2 3-((4-(2-氯芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用2-氯芐溴替換芐基溴，總收率：18.1％。
MS(m/z):317[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.23-8.21(m,1H),8.20-8.16(m,1H),7.28-7.17(m,1H),7.16-7.06(m,5H),3.80(s,2H),3.00-2.90(m,2H),2.84-2.80(m,2H),2.35-2.25(brs,1H),1.78-1.59(m,4H).。
實施例3：化合物I-3 3-((4-(2-(三氟甲基)芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用2-三氟甲基芐溴替換芐基溴，總收率：18.3％。
MS(m/z):351[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.30-8.19(s,2H),7.68-7.62(m,1H),7.48-7.41(m,1H),7.40-7.35(m,1H),7.35-7.25(m,1H),7.18-7.10(m,1H),3.98-3.92(m,2H),3.38-3.34(m,2H),3.12-3.09(m,2H),2.01-2.00(m,4H).。
實施例4：化合物I-43-((4-(2-甲基芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用2-甲基芐溴替換芐基溴，總收率：18.8％。
MS(m/z):297[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.29-8.28(m,1H),8.19-8.17(m,1H),7.50-7.46(m,1H),7.43-7.39(m,1H),7.18-7.08(m,4H),3.98(s,2H),3.28-3.14(m,4H),2.97(s,2H),2.32(s,3H),2.01-1.94(m,2H),1.92-1.82(m,2H).。
實施例5：化合物I-5 3-((4-(3-氯芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，其中，用3-氯芐溴替換芐基溴，總收率：19.1％。
實施例6：化合物I-6 3-((4-(3-(三氟甲基)芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，其中用3-三氟甲基芐溴替換芐基溴，總收率：19.2％。
MS(m/z):351[M+H]
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.35-8.33(m,1H),8.26-8.24(m,1H),7.47-7.43(m,1H),7.35-7.31(m,2H),7.27-7.22(m,2H),7.20-7.16(m,1H),4.91-4.88(brs,1H),3.68(s,2H),3.18-3.12(m,2H),3.05-3.00(m,2H),2.96(s,2H),1.78-1.73(m,4H).。
實施例7：化合物I-7 3-((4-(3-甲基芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，其中用3-甲基芐溴替換芐基溴，總收率：19.3％。
MS(m/z):297[M+H]
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.36-8.35(m,1H),8.24-8.22(m,1H),7.25-7.19(m,2H),7.12-7.09(m,1H),7.01-6.99(m,1H),6.87-6.85(m,2H),4.46-4.45(brs,1H),3.70(s,2H),3.16-3.11(m,2H),3.06-3.01(m,2H),2.85(s,2H),2.21(s,3H),1.76-1.72(m,4H).。
實施例8：化合物I-8 3-((4-(4-氯芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，其中用4-氯芐溴替換芐基溴，總收率：18.3％。
MS(m/z):317[M+H]
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.78-8.26(m,1H),8.18-8.16(m,1H),7.18-7.15(m,1H),7.14-7.09(m,3H),6.94-6.91(m,2H),3.58(s,2H),3.54-3.49(m,2H),3.38-3.33(m,2H),2.79(s,2H),1.54-1.49(m,4H),1.41(s,9H).。
實施例9：化合物I-9 3-((4-(4-(三氟甲基)芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，其中用4-三氟甲基芐溴替換芐基溴，總收率：18.8％。
MS(m/z):351[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.32-8.31(m,1H),8.20-8.18(m,1H),7.56-7.53(m,2H),7.51-7.47(m,1H),7.43-7.39(m,1H),7.37-7.34(m,2H),3.86(s,2H),3.33-3.28(m,2H),3.24-3.16(m,2H),3.05(s,2H),1.94-1.80(m,4H).。
實施例10：化合物I-10 3-((4-(4-甲基芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用4-甲基芐溴替換芐基溴，總收率：19.8％。
MS(m/z):297[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.32-8.31(m,1H),8.20-8.17(m,1H),7.51-7.47(m,1H),7.43-7.39(m,1H),7.06-7.00(m,4H),3.83(s,2H),3.42-3.36(m,2H),3.34-3.26(m,2H),2.91(s,2H),2.26(s,3H),1.96-1.84(m,4H).。
實施例11：化合物I-11 3-((4-([1,1'-聯(lián)苯]-4-基甲基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用4-溴甲基聯(lián)苯替換芐基溴，總收率：18.1％。
MS(m/z):359[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.33-8.31(m,1H),8.19-8.17(m,1H),7.56-7.53(m,2H), 7.49-7.45(m,3H),7.42-7.36(m,3H),7.32-7.27(m,1H),7.20-7.18(m,2H),3.85(s,2H),3.40-3.34(m,2H),3.29-3.22(m,2H),2.96(s,2H),1.96-1.84(m,4H).。
實施例12：化合物I-12 3-((4-(2,3-二氯苯甲酰基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用2,3-二氯芐溴替換芐基溴，總收率：18.1％。
MS(m/z):351[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.20-8.15(m,2H),7.43-7.37(m,3H),7.24-7.15(m,2H),4.00(s,2H),3.15(s,2H),3.11-3.04(m,2H),3.02-2.95(m,2H),1.88-1.75(m,4H).。
實施例13：化合物I-13 3-((4-(3,4-二氯芐基)哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用3,4-二氯芐溴替換芐基溴，總收率：18.6％。
MS(m/z):351[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.31-8.29(m,1H),8.19-8.17(m,1H),7.42-7.37(m,3H),7.26-7.25(m,1H),7.07-7.03(m,1H),3.81(s,2H),3.22-3.15(m,2H),3.12-3.04(m,2H),2.89(s,2H),1.84-1.70(m,4H).。
實施例14：化合物I-14 3-((3-(3,4-二氯芐基)哌啶-3-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用3,4-二氯芐溴替換芐基溴，3-哌啶甲酸乙酯替換4-哌啶甲酸乙酯；總收率：20.1％；對其進(jìn)行手性柱分離得到I-14A和I-14B，它們的核磁譜圖完全一致；
MS(m/z):351[M+H]
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36-8.34(m,1H),8.25-8.22(m,1H),7.28-7.19(m,4H),6.94-6.90(m,1H),3.82-3.78(m,1H),3.72-3.68(m,1H),2.90-2.82(m,3H),2.78-2.69(m,3H),2.36-2.22(brs,1H),1.70-1.54(m,3H),1.50-1.42(m,1H).。
實施例15：化合物I-15 3-((4-苯乙基哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用苯乙基溴替換芐基溴，總收率：13.2％。
MS(m/z):297[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.32-8.30(m,1H),8.19-8.16(m,1H),7.55-7.51(m,1H),7.43-7.39(m,1H),7.26-7.18(m,4H),7.16-7.11(m,1H),4.07(s,2H),3.32-3.27(m,4H),2.66-2.60(m,2H),2.06-1.98(m,2H),1.94-1.86(m,4H).。
實施例16：化合物I-18 2-((4-芐基哌啶-4-基)甲氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例1中所述，只是用2-氟吡啶替換3-氟吡啶，總收率：15.2％。
MS(m/z):283[M+H]
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13-8.09(m,1H),7.63-7.57(m,1H),7.24-7.16(m,3H),7.12-7.07(m,2H),6.91-6.86(m,1H),6.82-6.80(m,1H),4.09(s,2H),3.34-3.26(m,2H),3.21-3.14(m,2H),2.86(s,2H),1.94-1.82(m,4H).。
實施例17：化合物I-16 3-(2-(4-苯乙基哌啶-4-基)乙氧基)吡啶
合成路線：
反應(yīng)步驟：
c)將原料4-叔丁氧羰基哌啶酮(化合物B)(31.2g,0.16mol)、丙二酸環(huán)異丙酯(25g,0.17mmol)、硼酸三異丙酯(72.5ml,0.32mol)溶于300ml乙酸乙酯中，攪拌下加入醋酸(1.8ml,0.03mol)和氨水(1.1ml,0.03mol)，加完之后體系于室溫反應(yīng)過夜。體系中逐漸生成較多固體。反應(yīng)完畢后，過濾，濾餅用少許乙酸乙酯洗滌，烘干，為白色粉末狀固體28g。收率：55％
MS(m/z):348[M+Na]+
1H NMR(400MHz,d-DMSO)δ3.49(t,J＝6.4Hz,4H),3.07(t,J＝5.4Hz,4H),1.71(s,6H),1.42(s,9H).
d)在合成化合物F的過程中，將原料碘化亞銅(300mg,1.58mmol)懸浮于200ml無水THF中，-10℃下加入苯乙基基氯化鎂77ml(1N,77mmol)，加完在該溫度下反應(yīng)30min。將上步產(chǎn)物E(10g,30.8mmol)分10次1h內(nèi)加完。加完后體系從-10℃自然升溫至0℃反應(yīng)3h。反應(yīng)完畢后體系中加入濃氨水:飽和氯化銨:水＝1:2:3的混合溶液100ml淬滅反應(yīng)，乙酸乙酯萃取(60ml*3)，有機相合并，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，得一白色固體。固體用少許乙醚洗滌，烘干。得3.8g白色粉末狀固體。收率：30％
MS(m/z):454[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.24-7.20(m,2H),7.12-7.06(m,3H),3.70-3.60(m,2H),3.10-3.04(m,2H),2.85-2.65(m,2H),1.99(s,2H),1.72-1.62(m,2H),1.48(s,6H),1.38(s,9H),1.18(t,J＝7.6Hz,2H).
e)在合成化合物G的過程中，將上步產(chǎn)物F(10.3g,24.0mmol)溶于DMF/H2O(1/1)的400ml溶液中，體系加熱到135℃反應(yīng)2天。反應(yīng)完畢后，體系中加入1N的NaOH溶液100ml，水500ml。500ml乙醚萃取，有機相用6N鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH＜2，水相乙醚萃取(200ml*2)，合并有機相，有機相水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干得一白色粉末狀固體6.4g。產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。收率：80％
MS(m/z):370[M+Na]+
1H NMR(400MHz,d-DMSO)δ7.26-7.22(m,2H),7.18-7.10(m,3H),3.41-3.35(m,2H),3.30-3.20(m,2H),2.58-2.50(m,2H),2.33(s,2H),1.65-1.58(m,2H),1.55-1.48(m,2H),1.43-1.35(m,11H).
f)在合成化合物H的過程中，將上步產(chǎn)物G(500mg,1.44mmol)溶于50ml無水THF中，攪拌下加入硼烷二甲硫醚溶液2.16ml(2N,4.32mmol)，體系回流過夜。反應(yīng)完畢后，加入50ml水，200ml乙酸乙酯萃取，有機相飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干。得一無色透明油狀物450mg。產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。收率：99％
MS(m/z):356[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.26-7.20(m,2H),7.16-7.10(m,3H),3.72-3.66(m,2H),3.42-3.35(m,4H),2.55-2.48(m,2H),1.74-1.66(m,2H),1.61-1.55(m,2H),1.48-1.38 (m,13H).
h)在合成化合物J的過程中，將上步產(chǎn)物H(543mg,1.63mmol)溶于10ml無水DMSO中，攪拌下加入氫化鈉(72mg,1.79mmol)，3-氟吡啶(155μl,1.79mmol)，反應(yīng)升溫至60℃下過夜。反應(yīng)完畢后，小心加入冰水淬滅反應(yīng)。60ml乙酸乙酯萃取，有機相水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，殘余物硅膠柱層析(PE:EA＝3:1)，得一無色油狀物300mg。收率：45％
MS(m/z):411[M+H]
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33-8.26(brs,1H),8.22-8.18(m,1H),7.29-7.24(m,2H),7.19-7.15(m,5H),4.06(t,J＝8Hz,2H),3.48-3.41(m,4H),2.61-2.55(m,2H),1.94(t,J＝6.8Hz,2H),1.72-1.66(m,2H),1.53(t,J＝5.2Hz,4H),1.45(s,9H).
i)在制備化合物I-16的過程中，將上步產(chǎn)物J(100mg,0.26mmol)溶于10ml二氯甲烷:TFA＝3:1的混合溶液中，反應(yīng)于室溫下反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢后氮氣吹干溶劑，殘余物溶于50ml二氯甲烷中，加入20％NaOH溶液2ml調(diào)節(jié)體系為強堿性，有機相無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干，殘余物制備硅膠板分離(二氯甲烷:甲醇＝15:1)，得一淡黃色油狀物80mg。收率：99％
MS(m/z):311[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.25-8.24(m,1H),8.16-8.14(m,1H),7.49-7.46(m,1H),7.42-7.37(m,1H),7.30-7.22(m,4H),7.19-7.13(m,1H),4.21(t,J＝6Hz,2H),3.29-3.23(m,4H),2.67-2.62(m,2H),2.07(t,J＝5.6Hz,2H),1.87-1.76(m,6H).。
實施例18：化合物I-17 3-(2-(4-芐基哌啶-4-基)乙氧基)吡啶
合成技術(shù)路線參照實施例17中所述，只是用芐基氯化鎂替換苯乙基氯化鎂，總收率：14.2％。
MS(m/z):297[M+H]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.28-8.26(m,1H),8.17-8.15(m,1H),7.52-7.48(m,1H),7.43-7.39(m,1H),7.35-7.30(m,2H),7.28-7.22(m,3H),4.26(t,J＝8Hz,2H),3.34-3.28(m,4H),2.86(s,2H),1.96(t,J＝6.4Hz,2H),1.82-1.77(m,4H).。
實施例19化合物I-19 4-((萘-2-基氧基)甲基)-4-苯乙基哌啶
合成技術(shù)路線參照實施例17中所述，只是用2-氟萘替換3-氟吡啶，總收率：12.2％。
MS(m/z):346[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01-7.94(m,1H),7.82-7.76(m,3H),7.52-7.47(m,1H),7.41-7.36(m,1H),7.32-7.27(m,2H),7.23-7.16(m,5H),4.02(s,2H),3.40-3.24(m,4H),2.64-2.58(m,2H),2.11-1.93(m,6H).。
實施例20化合物I-20 4-(2-(萘-2-基氧基)乙基)-4-苯乙基哌啶
合成技術(shù)路線參照實施例17中所述，只是用2-氟萘替換3-氟吡啶，總收率：12.6％。
MS(m/z):360[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.80-7.74(m,3H),7.66-7.58(brs,1H),7.50-7.45(m,1H),7.38-7.30(m,3H),7.25-7.20(m,3H),7.16-7.11(m,2H),4.16(t,J＝6.8Hz,2H),3.32-3.24(m,4H),2.66-2.60(m,2H),2.07-2.02(m,2H),1.94-1.88(m,4H),1.83-1.77(m,2H).。
實施例21化合物I-21 4-(2-(萘-2-基氧基)乙基)-4-苯乙基哌啶
合成技術(shù)路線參照實施例17中所述，只是用2-氟萘替換3-氟吡啶，總收率：12.6％。
MS(m/z):346[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.79-7.73(m,3H),7.50-7.44(m,1H),7.39-7.28(m,4H),7.20-7.11(m,4H),4.21(t,J＝6Hz,2H),3.43-3.36(m,2H),3.33-3.24(m,2H),2.81(s,2H),1.98-1.82(m,2H).。
實施例22取代哌啶類化合物的乙酰膽堿結(jié)合蛋白結(jié)合活性測定：
本部分生物活性測試于復(fù)旦大學(xué)放射性同位素實驗室完成。
①實驗材料：
1 AChBP蛋白：通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染表達(dá)的方法獲取。
2 [3H]Epibatidine(54.1Cimmol)：購自Perkin-Elmer Life Scince公司
3 尼古丁(煙堿受體激動劑)：購自安耐吉公司
4 Epibatidine(煙堿受體激動劑)：購自Sigma Adrich公司
5 閃爍試劑：購自Perkin-Elmer公司
6 DMSO：購自上海生工生物公司
7 水：純水儀為ELGA公司生產(chǎn)，編號CLXXUVFM2
8 超濾離心管：購自merk公司，型號10kd
9 PBS-TRIs緩沖液：配置濃度為1.4mM KH2PO4,4.3mM Na2HPO4,137mM NaCl,2.7mM KCl,20mM Trizma base,4％DMSO,0.05％Tween 20,pH 7.4，所用無機鹽等都為國藥集團(tuán)的分析純試劑。
②主要儀器：
1閃爍儀：購自Perkin-Elmer公司型號：Tri-Carb 2910TR
2離心機：型號：sigma 3k15
③實驗方法
該實驗原理上是[3H]Epibatidine競爭性結(jié)合實驗。具體實驗方法如下：用PBS-TRIs緩沖液將AChBP蛋白配成PBS-TRIs的溶液，同樣將[3H]Epibatidine配成PBS-TRIs溶液，向每個測試管加入10μL蛋白溶液和20μL[3H]Epibatidine溶液。孵育3分鐘后加入待測的不同濃度配體小分子的DMSO溶液2μL，空白組加入同等體積的緩沖液。之后用緩沖液補齊至200μL?；靹蚝蠓跤?分鐘。然后將溶液轉(zhuǎn)移至超濾離心管中，10000rpm離心10min，在離心的過程中準(zhǔn)備好測試液閃讀數(shù)的玻璃小瓶，向每個瓶子中加入2mL親脂閃爍液。離心結(jié)束后，取離心下來的50μL溶液置于玻璃小瓶中，混勻，由液體閃爍計數(shù)儀測定放射性強度，放射性總量的測定通過在玻璃小瓶里加入20μL[3H]Epibatidine溶液來測定，每組實驗兩副管。
結(jié)合率＝(樣品管dpm–空白dpm)/(放射性總量dpm)*100％
所得化合物活性如表1所示：
表1：部分化合物的乙酰膽堿結(jié)合蛋白結(jié)合活性
通過在分子水平上的篩選，結(jié)果顯示部分化合物表現(xiàn)出一定的乙酰膽堿結(jié)合蛋白結(jié)合活性，為進(jìn)一步研究可能的高活性nAChRs的配體小分子、研究可能具有改善認(rèn)知功能，同時緩解AD和抑郁癥等疾病進(jìn)展的創(chuàng)新藥物提供了有價值的信息。