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羥基酪醇在制備抗血管性癡呆的藥物中的應(yīng)用_3

文檔序號(hào):9460763閱讀:來(lái)源:國(guó)知局
0. 05)。徑基酪醇低、中劑量 組與模型組相比較A化E活性均顯著性降低(P< 0. 05),Ve組與模型組相比較也顯著性降 低(P< 0. 05),化拉西坦片組與模型組相比較也顯著降低(P< 0. 01)。
[00財(cái) 2. 5徑基酪醇對(duì)小鼠血清中一氧化氮(NO)含量的影響:
[0086] 取血清50y1,按NO測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公式要求進(jìn)行,用 酶標(biāo)儀在530皿處讀數(shù),測(cè)定血清中NO含量。血清中NO含量(ymol/L)=(測(cè)定管吸光 度-空白管吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度)X標(biāo)準(zhǔn)品濃度X稀釋倍數(shù)。用 SPASS16. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0087] 結(jié)果,模型組NO含量顯著性高于空白對(duì)照組任<0.05)。徑基酪醇低、中、高劑 量組與模型組相比較NO含量均顯著性降低(P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片組與模型組相 比較也顯著性降低(P< 0. 01)。各給藥組與空白對(duì)照組相比較也顯著降低(P< 0. 05或P < 0. 01)。
[008引 2. 6徑基酪醇對(duì)小鼠血清中一氧化氮合酶(NO巧活性的影響:
[0089] 取血清30y1,按N0S測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公式要求進(jìn)行,用 酶標(biāo)儀在530nm處讀數(shù),測(cè)定血清中N0S活性。血清中N0S活力扣/ml)=(測(cè)定管吸光 度-對(duì)照管吸光度)/(呈色物納摩爾消光系數(shù))X反應(yīng)液總體積/取樣量X1/比色光徑X 反應(yīng)時(shí)間今1000。用SPASS16. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0090] 結(jié)果,模型組N0S活性顯著性高于空白對(duì)照組(P< 0. 01)。徑基酪醇低、中、高劑 量組與模型組相比較N0S活性均顯著性降低(P< 0. 05或P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片 組與模型組相比較也顯著性降低(P< 0.01)。徑基酪醇高劑量組、Ve組和化拉西坦片組與 空白對(duì)照組相比較也顯著降低(P< 0. 01)。
[00川 2. 7徑基酪醇對(duì)小鼠血清中總抗氧化能力(T-A0C)的影響:
[0092] 取血清20y1,按T-A0C測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公式要求進(jìn)行, 用酶標(biāo)儀在520nm處讀數(shù),測(cè)定血清中T-A0C。血清中T-A0C扣/ml)=(測(cè)定管吸光度-對(duì) 照管吸光度)/〇. 01/30X反應(yīng)總體積/取樣量X樣本測(cè)試前稀釋倍數(shù)。用SPASS16. 0軟 件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0093] 結(jié)果,模型組T-A0C顯著性低于空白對(duì)照組(P< 0.05)。徑基酪醇高劑量組、Ve組 和化拉西坦片組與模型組相比較T-AOC均顯著升高(P< 0. 01)。
[0094] 2. 8徑基酪醇對(duì)小鼠血清中丙二醒(MDA)含量的影響:
[0095] 取血清20y1,按MDA測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公式要求進(jìn)行,用 酶標(biāo)儀在532nm處讀數(shù),測(cè)定血清中MDA含量。
[0096]
[0097] 用SPASS16. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0098] 結(jié)果,與空白對(duì)照組比較,衰老模型小鼠血清中MDA含量明顯升高(P< 0. 05)。與 模型組比較,各徑基酪醇給藥組、Ve組和化拉西坦片組可明顯降低MDA含量(P< 0. 05或P < 0. 01)。
[0099] 2. 9徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中膽堿乙酷基轉(zhuǎn)移酶(CMT)活性的影響:
[0100] 取10%腦組織勻漿液30y1,按ChAT測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算 公式要求進(jìn)行,用酶標(biāo)儀在324nm處讀數(shù),測(cè)定腦組織中ChAT含量。組織中ChAT活力 扣/m甜rot)=(測(cè)定管吸光度-空白對(duì)照管吸光度)/反應(yīng)時(shí)間X反應(yīng)總體積/取樣 量X1/10%腦勻漿的濃度。用SPASS16. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0101] 結(jié)果,與空白對(duì)照組相比較,模型組小鼠腦組織ChAT活性降低(P< 0. 05)。與模 型組相比較,徑基酪醇低、中、高劑量組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P> 0. 05),而Ve組和化拉西坦片組 CMT活性明顯升高(P< 0. 05)。
[0102] 2. 10徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中一氧化氮(NO)含量的影響:
[0103] 取10 %腦組織勻漿90y1,按NO測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公式 要求進(jìn)行,用酶標(biāo)儀在530nm處讀數(shù),測(cè)定腦組織中NO含量。腦組織中NO含量(ymol/ mgprot)=(測(cè)定管吸光度-空白管吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度)X標(biāo)準(zhǔn)品 濃度X稀釋倍數(shù)-待測(cè)樣本濃度。用SPASS16. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0104] 結(jié)果,模型組NO含量顯著性高于空白對(duì)照組(P< 0. 05)。徑基酪醇中、高劑量組 與模型組相比較NO含量均顯著性降低(P< 0. 05或P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片組與模 型組相比較也顯著性降低(P< 0. 01)。徑基酪醇高劑量組和化拉西坦片組與空白對(duì)照組相 比較也顯著降低(P< 0.01)。
[0105] 2. 11徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中一氧化氮合酶(NO巧活性的影響:
[0106] 取10%腦組織勻漿100yl,按N0S測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公 式要求進(jìn)行,用酶標(biāo)儀在530皿處讀數(shù),測(cè)定腦組織中N0S活性。腦組織中N0S活力扣/ mgprot)=(測(cè)定管吸光度-對(duì)照管吸光度)/(呈色物納摩爾消光系數(shù))X反應(yīng)液總體積 /取樣量X1/比色光徑X反應(yīng)時(shí)間今待測(cè)樣本蛋白濃度(m甜rot/L)。用SPASS16. 0軟 件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0107] 結(jié)果,模型組N0S活性顯著性高于空白對(duì)照組(P< 0. 01)。徑基酪醇4低、高劑量 組與模型組相比較N0S活性顯著性降低(P< 0. 05),Ve組和化拉西坦片組與模型組相比較 也顯著性降低(P< 0. 01)。徑基酪醇中劑量組與模型組相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P> 0. 05)。
[0108] 2. 12徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中總抗氧化能力(T-A0C)的影響:
[0109] 取10 %腦組織勻漿20y1,按T-A0C測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公 式要求進(jìn)行,用酶標(biāo)儀在520皿處讀數(shù),測(cè)定腦組織中T-AOC。腦組織中T-AOC扣/m甜rot) =(測(cè)定管吸光度-對(duì)照管吸光度)/0.01/30X反應(yīng)總體積/取樣量/勻漿液蛋白濃度 (m甜rot/ml)。用SPASS16. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0110] 結(jié)果,模型組T-A0C顯著性低于空白對(duì)照組任<0.01)。徑基酪醇低、中、高劑量 組與模型組相比較T-A0C均顯著升高(P< 0. 05或P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片組也均 顯著升高,但徑基酪醇低、中、高劑量組和化拉西坦片組T-A0C活性明顯低于空白對(duì)照組(P < 0. 05 或P< 0. 01)。
[0111] 2. 13徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響:
[0112] 取0. 15 %腦組織勻漿液20^1,按T-S0D測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作 步驟和計(jì)算公式要求進(jìn)行,用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù),測(cè)定腦組織中T-S0D含量。 =(A對(duì)照-A對(duì)照空白)-(A測(cè)定-A測(cè)定空白)X10日 組織中T-S弧誦率(%) -(A對(duì)照-A對(duì)照空白)-
[0113] SOD活力扣/m甜rot) =SOD抑制率今50 %X反應(yīng)體系稀釋倍數(shù)(0. 24ml/0. 02ml) 今待測(cè)樣本蛋白濃度(m甜rot/ml)。用SPASS16. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0114] 結(jié)果,與空白對(duì)照組比較,模型小鼠腦組織SOD活性明顯下降任<0.01)。與模型 組相比較,徑基酪醇低、中劑量組明顯提高SOD活性(P< 0. 01),Ve組和化拉西坦片組也均 顯著提高SOD活性(P< 0. 05或P< 0. 01)。
[0115] 2. 14徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中丙二醒(MDA)含量的影響:
[0116] 取10%腦組織勻漿液100y1,按MDA測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公 式要求進(jìn)行,用紫外分光光度計(jì)在532nm處比色,測(cè)定腦組織中MDA含量。組織中MDA含量 (nmol/mgprot)=(測(cè)定管吸光度-測(cè)定空白管吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-標(biāo)準(zhǔn)空白管吸 光度)X標(biāo)準(zhǔn)品濃度(10皿1〇/1111) 待測(cè)樣本蛋白濃度(111甜1'〇1:/1]11)。用SPASS16. 0軟件 進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0117] 結(jié)果,與空白對(duì)照組比較,模型小鼠腦組織中MDA含量明顯升高任<0.01)。與模 型組比較,徑基酪醇低、中、高劑量給藥組可明顯降低MDA含量任<0.01),Ve組和化拉西 坦片組也均顯著降低MDA含量(P< 0. 01),但徑基酪醇中、高劑量組MDA含量明顯高于空白 對(duì)照組(P< 0. 05)。
[0118] 2. 15徑基酪醇對(duì)APP、PS-1蛋白表達(dá)影響:
[0119] 應(yīng)用west-bolt方法檢測(cè)各組小鼠腦組織APP和PS-1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果,與正 常對(duì)照組相比較,模型組小鼠腦內(nèi)APP和PS-1蛋白表達(dá)水平顯著增加任<0.01)。與模型 組相比較,徑基酪
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