腦組織中T-S0D含量。
[0049]SOD活力扣/m甜rot) =SOD抑制率今50 %X反應(yīng)體系稀釋倍數(shù) (0. 24ml/0. 02ml)今待測樣本蛋白濃度（m甜rot/ml)。用陽MS3. 1軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué) 處理。見表5 :
[0050] 表5徑基酪醇對小鼠腦組織中過氧化物酶活性的影響（xAs?，打口姑）
[0051]
[005引注：與空白對照組相比，*P< 0. 05;與模型組相比，#P< 0. 05。
[0053] 結(jié)果，模型組SOD活性顯著低于空白對照組（P< 0. 05)。徑基酪醇高劑量組和陽 性對照組與模型組比較均顯著增高（P< 0. 05)。而徑基酪醇低劑量組和中劑量組與模型組 相比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P> 0. 05)，且徑基酪醇中劑量組與空白對照組相比較顯著降低（P < 0. 0巧。
[0054] 3. 6徑基酪醇對小鼠腦組織中還原型谷脫甘膚氧化酶（GSH-P、）活性的影響：
[00巧]取10%腦組織勻漿液200ml，按GSH-P、測定試劑盒說明書的具體操作步驟和 計(jì)算公式要求進(jìn)行，用紫外分光光度計(jì)在412nm處比色，測定腦組織中GSH-P、活性。 組織中GSH-Px活
X標(biāo)準(zhǔn)管濃度（20umot/L)X綺釋僖徽巧稽)-反應(yīng)時(shí)間子（取樣量X樣本蛋白濃度）。[005引用陽MS3. 1軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。見表6 :
[0057] 表6 徑基酪醇對小鼠腦組織中還原型谷脫甘膚氧化酶（GSH-P、）活性的影響 (X±Sy 11=12)
[0058]
[0059]注：與空白對照組相比，*P< 0. 05;與模型組相比，#P< 0. 05,##P< 0. 01。
[0060] 結(jié)果，模型組GSH-Px活性顯著低于空白對照組（P< 0. 05)。徑基酪醇低劑量、中 劑量、高劑量組和陽性對照組與模型組比較均顯著增高（P< 0. 05或P< 0. 01)，而與空白 對照組相比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P> 0. 05)。
[00川 4小結(jié)及討論：
[0062] 4. 1 小結(jié)：
[0063] 4. 1. 1動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用3mg/kg東賞窘堿腹腔注射制備短暫性記憶獲得 性缺失小鼠模型時(shí)，模型組較空白對照組小鼠學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降。給藥各組小鼠學(xué)習(xí) 記憶能力均有不同程度的增強(qiáng)趨勢。
[0064] 4. 1. 2通過對各組動(dòng)物腦組織中各項(xiàng)指標(biāo)的檢測，結(jié)果模型組超氧化物歧化酶 (T-S0D)和還原型谷脫甘膚氧化酶（GSH-P訝活性均明顯低于正常對照組，模型組乙酷膽堿 醋酶（A化巧活性和丙二醒（MAD)含量明顯高于空白對照組，表明東賞窘堿腹腔注射制備小 鼠記憶缺失動(dòng)物模型與臨床檢測指標(biāo)相似，可部分模擬老年癡呆的臨床癥狀。
[0065] 4. 1. 3各給藥組均能明顯改善和增強(qiáng)模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
[0066] 4. 1. 4徑基酪醇各給藥組均能明顯升高腦組織中超氧化物歧化酶（T-S0D)和還原 型谷脫甘膚氧化酶（GSH-P訝活性，降低乙酷膽堿醋酶（A化巧活性和丙二醒（MAD)含量。
[0067] 由W上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用3mg/kg東賞窘堿腹腔注射制備短暫性記憶獲得性缺 失小鼠模型，能夠模擬臨床觀察的部分指標(biāo)，通過給藥組與模型組的比較，徑基酪醇各組能 夠改善造模對小鼠各項(xiàng)指標(biāo)的影響，表明徑基酪醇有很好的治療作用，與陽性對照藥療效 相當(dāng)。
[0068] 實(shí)施例2徑基酪醇提高腦缺血缺氧小鼠模型學(xué)習(xí)記憶能力：
[006引 1實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br>[0070] 通過雙側(cè)頸總動(dòng)脈反復(fù)夾閉再通可W造成急性腦缺血W及缺氧損傷，引起神經(jīng)元 缺血缺氧后功能減退，包括學(xué)習(xí)記憶功能降低。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察徑基酪醇對雙側(cè)頸總動(dòng)脈 反復(fù)夾閉再通小鼠模型學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
[0071] 2實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果：
[0072] 2. 1造模及給藥方法：
[007引KM小鼠，體質(zhì)量20±2g，實(shí)驗(yàn)分6組，每組12只：（1)正常組；似模型組； (3) 0. 5mg/kg的徑基酪醇給藥組；（4) 5mg/kg的徑基酪醇給藥組；（5) 50mg/kg的徑基酪醇 給藥組；（6)lOOmg/kg的徑基酪醇給藥組；正常組和模型組連續(xù)灌胃等計(jì)量生理鹽水7山各 徑基酪醇給藥組連續(xù)灌胃徑基酪醇7d，除正常組外，其余實(shí)驗(yàn)組小鼠，末次給藥后比，用質(zhì) 量百分比為4%的水合氯醒腹腔注射麻醉，體積百分比為75 %的酒精頸前皮膚消毒，頸正 中切口，分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈，用微動(dòng)脈夾反復(fù)夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈，夾閉在通（夾閉2次，每 次15min，中間再通lOmin)，模型組和各徑基酪醇給藥組術(shù)后第7d與正常組一起開始進(jìn)行 Morris水迷宮和小鼠跳臺(tái)測試，檢測其學(xué)習(xí)記憶能力。
[0074] 2. 2小鼠跳臺(tái)測試：
[00巧]學(xué)習(xí)記憶能力測試：將正常組、術(shù)后的模型組和各徑基酪醇給藥組中的小鼠放在 箱內(nèi)適應(yīng)3min后通W36V的交流電，當(dāng)小鼠為了躲避電擊刺激時(shí)而跳上絕緣平臺(tái)時(shí)，開 始計(jì)時(shí)，記錄從計(jì)時(shí)開始至小鼠跳下平臺(tái)遭受電擊的時(shí)間，作為小鼠潛伏期（Stepdown latency,SDL)，S化大于300s，則按300s記錄，同時(shí)記錄5min內(nèi)小鼠跳下平臺(tái)遭受電擊的 次數(shù)（即錯(cuò)誤次數(shù)），W此作為學(xué)習(xí)成績，24h后再重復(fù)進(jìn)行1次，測其記憶保持能力。
[0076] 結(jié)果，與空白對照組相比較，模型組小鼠逃避潛伏期明顯縮短（P< 0. 05)，錯(cuò)誤次 數(shù)明顯減少（P< 0.05)。與模型組相比較，化拉西坦組可延長小鼠逃避潛伏期和減少錯(cuò)誤 次數(shù)（P<〇. 05)，而徑基酪醇低、中劑量組可顯著延長小鼠逃避潛伏期（P<0.01)和減少 錯(cuò)誤次數(shù)（P< 0. 05或P< 0. 01)，而徑基酪醇高劑量組和Ve組與模型組相比較無統(tǒng)計(jì)學(xué) 差異。
[0077] 2. 3Morris水迷宮測試：
[0078] 第84d，給藥后化參照Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)方法測定小鼠空間識(shí)別能力，分為定位 航行和空間探索兩部分。實(shí)驗(yàn)室溫度保持在23-25°C，水迷宮中加入墨汁，水面高過安全平 臺(tái)1cm，水溫保持在22°C左右，水中不能明顯見到安全平臺(tái)。實(shí)驗(yàn)過程中室內(nèi)所有物體的擺 放位置固定，W免對小鼠產(chǎn)生干擾。實(shí)驗(yàn)時(shí)平臺(tái)位置固定不變，置于第二象限中央。選擇第 =、四象限的池壁中作為入水點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)時(shí)將動(dòng)物面朝池壁輕輕放入水中，避免應(yīng)激和將小鼠 頭部浸入水中。實(shí)驗(yàn)歷時(shí)6山每天訓(xùn)練2次，小鼠面向池壁入水，每次入水點(diǎn)不相同，記錄小 鼠自入水到找到站臺(tái)后四肢爬上站臺(tái)時(shí)所需的時(shí)間，作為潛伏期。同時(shí)在記錄小鼠入水后 的游泳軌跡，將此作為分析小鼠捜索目標(biāo)時(shí)所采用何種策略的依據(jù)。將捜索策略分為4類： (1)邊緣式，小鼠沿水池邊緣運(yùn)動(dòng)，無尋找動(dòng)機(jī)：似隨機(jī)式，小鼠捜索時(shí)無明確方向；做趨 向式，小鼠己記得平臺(tái)的大概位置，在發(fā)現(xiàn)平臺(tái)前轉(zhuǎn)彎少于4次；(4)直線式，大鼠已明確記 得平臺(tái)的位置，直接游向平臺(tái)。
[0079] 定位航行實(shí)驗(yàn)共5d，每天連續(xù)重復(fù)訓(xùn)練兩次。將小鼠放在站臺(tái)上站立15s。然后 從不同象限將小鼠放入水池，第1次將小鼠放入第二象限固定的起點(diǎn)，第2次將小鼠放入第 立象限固定的起點(diǎn)，使其自由游泳，尋找隱藏于水中的平臺(tái)。若小鼠在入水后90s內(nèi)未找到 水池中的站臺(tái)或未能爬上站臺(tái)，可將小鼠放置于站臺(tái)上站立15s，然后將動(dòng)物從站臺(tái)上拿下 來，休息化W后，再進(jìn)行下一次訓(xùn)練。每天取兩次潛伏期平均值作為當(dāng)天學(xué)習(xí)記憶成績。
[0080] 定位航行實(shí)驗(yàn)后即第6山開始空間捜索實(shí)驗(yàn)，測Id, 2次/d。第1次將小鼠從第S 象限的起點(diǎn)置入水中，記錄小鼠在90s內(nèi)的潛伏期和上臺(tái)的捜索策略。第2次移除平臺(tái)， 將小鼠從第四象限的起點(diǎn)置入水中，記錄小鼠在90s內(nèi)穿越平臺(tái)所在區(qū)域的次數(shù)和捜索策 略，及小鼠在原平臺(tái)所在象限的捜索時(shí)間及捜索距離（W小鼠在原平臺(tái)所在象限的游泳距 離占總距離的百分比校正捜索距離W消除每只小鼠游泳速度的差異）。用SPASS16. 0軟件 進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0081] 結(jié)果，與空白對照組相比較，模型組小鼠尋找平臺(tái)平均潛伏期均有不同程度的延 長，從d2W后明顯增加（P< 0. 01)。與模型組相比較，徑基酪醇各給藥組平均潛伏期均縮 短，d2W后其差別愈明顯（P< 0. 05或P< 0. 01)，Ve組平均潛伏期也縮短，d2W后差異明 顯（P< 0. 05或P< 0. 01)，而化拉西坦片組的平均潛伏期縮短d3W后差異明顯（P< 0. 05 或P< 0.01)。另外，與空白對照組相比較，模型組穿臺(tái)次數(shù)明顯減少（P< 0.01)。與模型 組相比較，徑基酪醇各給藥組穿臺(tái)次數(shù)明顯增多（P< 0. 05或P< 0. 01)，Ve組和化拉西坦 組穿臺(tái)次數(shù)也明顯增多（P< 0. 05)。
[0082] 2. 4徑基酪醇對小鼠血清中乙酷膽堿醋酶（A化巧活性的影響：
[0083] 取血清30y1，按A化E測定試劑盒說明書的具體操作步驟和計(jì)算公式要求進(jìn)行， 用酶標(biāo)儀在412nm處讀數(shù)，測定血清中M：hE活性。血清中M：hE活力扣/ml)=(測定管吸 光度-對照管吸光度）/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度）X標(biāo)準(zhǔn)管濃度（1ymol/ml)。用 SPASS16. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0084] 結(jié)果，模型組A化E活性顯著性高于空白對照組（P<