用于軟骨破壞的組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及關節(jié)健康，特別是本發(fā)明涉及用于預防或治療軟骨破壞或維護關節(jié)健 康的組合物的用途，所述組合物包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇。
【背景技術】
[0002] 骨關節(jié)炎（0A)是一種高發(fā)病率疾病，其具有重要的社會經(jīng)濟影響。它是關節(jié)的關 節(jié)軟骨的變性疾病，是關節(jié)炎的最常見形式，影響成人人群的10%。0A是導致全世界中高 齡殘疾和保健開支的首要原因。
[0003] 關節(jié)軟骨的逐漸破壞和損失是主要的病理學特征，并伴有其他關節(jié)結構的改變， 如滑膜增生、硬化和軟骨下骨的厚度、關節(jié)邊緣的骨贅形成、韌帶松弛和肌肉萎縮，所有這 些都導致了 0A的臨床癥狀。這些癥狀包括嚴重的疼痛、僵硬、關節(jié)運動消失和殘疾。
[0004] 雖然患0A的個體增加了，但仍然沒有治愈手段，當前藥物治療仍是緩和療法，著 力減輕癥狀。例如，使用止痛劑（如對乙酰氨基酚）和非類固醇抗炎藥（NSAID)治療疼痛 和炎癥。此外，這些藥物的使用通常與副作用相關，如胃腸道或心血管風險。
[0005] 因此，用于治療0A的改進的組合物將是有利的，尤其是期待更有效和安全的組合 物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 之前已經(jīng)觀察到橄欖苦苷和羥基酪醇的抗炎和抗氧化性能。然而，本發(fā)明人令人 驚奇地證明這些化合物也具有對軟骨的抗分解代謝作用。
[0007] 因此，本發(fā)明的一個目的涉及提供用于改善關節(jié)健康的組合物。尤其是，本發(fā)明的 一個目的是提供一種通過預防或治療軟骨破壞來改善關節(jié)健康的組合物，并解決了上述現(xiàn) 有技術中副作用（如胃腸道和/或心血管風險）方面的問題。
[0008] 因此，本發(fā)明的一個方面涉及包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇的組合物用于預防或 治療軟骨破壞。
[0009] 本發(fā)明的另一方面涉及制備根據(jù)本發(fā)明使用的組合物的方法。
【附圖說明】
[0010] 圖1A示出了在ILla不存在時（模擬細胞的正常狀態(tài)）ADAMTS-5 mRNA相對于 GAPDH的表達。各條件與CTL-進行統(tǒng)計學比較。
[0011] 圖1B示出了在ILla存在時（模擬細胞的疾病狀態(tài)）ADAMTS-5 mRNA相對于GAPDH 的表達。各條件與ILla進行統(tǒng)計學比較，而ILla與CTL-進行比較（驗證實驗）。
[0012] 圖2A示出了在ILla不存在時（模擬細胞的正常狀態(tài)）COX-2 mRNA相對于GAPDH 的表達。各條件與CTL-進行統(tǒng)計學比較。
[0013] 圖2B示出了在ILla存在時（模擬細胞的疾病狀態(tài)）COX-2 mRNA相對于GAPDH的 表達。各條件與ILla進行統(tǒng)計學比較，而ILla與CTL-進行比較（驗證實驗）。
[0014] 圖3A示出了在ILla不存在時（模擬細胞的正常狀態(tài)）MMP-13 mRNA相對于GAPDH 的表達。各條件與CTL-進行統(tǒng)計學比較。
[0015] 圖3B示出了在ILla存在時（模擬細胞的疾病狀態(tài)）MMP-13 mRNA相對于GAPDH 的表達。各條件與ILla進行統(tǒng)計學比較，而ILla與CTL-進行比較（驗證實驗）。
[0016] 圖4示出了豚鼠膝的組織學切片（蘇木紫、快綠和番紅精0染色）。4A和4B顯示 A組（橄欖苦苷）；4C和4D顯示C組（蘆?。?；4E和4F顯示D組（蘆丁和姜黃素）；4G和 4H顯示B組（對照）。
[0017] 圖5示出了各組總的0A評分。
[0018] 圖6A示出了血漿中炎性PGE2生物標志物的濃度。圖6B示出了在第4和第35周 血漿PGE2水平和相應的0A評分之間的相關性。
[0019] 圖7示出了血漿中Coll 2-1 N02生物標記物的濃度與2型膠原隨時間斷裂的關 聯(lián)。
[0020] 圖8A示出了血漿中Coll 2-1 N02生物標記物與2型膠原分解的關聯(lián)。
[0021] 圖8B示出了在第4和第35周血漿Coll 2-1 N02生物標記物濃度和相應的0A評 分之間的相關性。
[0022] 圖9示出了血漿中纖蛋白3-1生物標記物的濃度與0A患者中軟骨細胞的過度生 長作用的關聯(lián)。
[0023] 圖10A示出了血漿中纖蛋白3-1生物標記物的濃度與0A患者中軟骨細胞的過度 生長作用的關聯(lián)。
[0024] 圖10B示出了在第4和第35周血漿纖蛋白3-1生物標記物濃度和相應的0A評分 之間的相關性。
[0025] 發(fā)明詳述
[0026] 定義
[0027] 在進一步詳細地討論本發(fā)明之前，首先定義下列術語和常用語：
[0028] 在本發(fā)明的上下文中，提及的百分數(shù)都是重量/重量百分比，除非另有說明。
[0029] 在"X和/或Y"的上下文中使用的術語"和/或"應被解釋為"X"、或"Y"、或"X和 Y"。
[0030] 本文所用的數(shù)值范圍旨在包括在該范圍內(nèi)的每個數(shù)字和數(shù)字的子集，無論具體公 開與否。此外，這些數(shù)值范圍應被理解為涉及該范圍內(nèi)的任何數(shù)字或數(shù)字子集的權利要求 提供支持。例如，公開了從1到10應被解釋為支持從1至8、從3至7、從4至9、從3. 6至 4. 6、從3. 5至9. 9的范圍，等等。
[0031] 本發(fā)明所有引用的單數(shù)特征或限制應當包括相應的復數(shù)特征或限制，反之亦然， 除非另有說明或提及該引用的上下文明顯地有相反的暗示。
[0032] 除非另有定義，本文使用的所有技術和科學術語具有與本領域普通技術人員通常 所理解的相同的含義。
[0033] 伸用的組合物
[0034] 橄欖苦苷是一種多酚，先前已證明其對炎癥和骨代謝具有有益作用。羥基酪醇作 為橄欖苦苷的代謝物是一種相關化合物，已經(jīng)表明羥基酪醇也具有這些效果?，F(xiàn)在本發(fā)明 人令人驚奇地表明，橄欖苦苷和羥基酪醇各自也對軟骨破壞具有有益效果。
[0035] 關節(jié)疾病可伴隨較大或較小程度的炎癥。在一些疾病中，炎癥是主要的組成，諸如 例如在類風濕性關節(jié)炎（RA)中。在其他疾病，諸如例如0A，炎癥不占主導地位。然而，這兩 種疾病均有分解代謝組分，其中關節(jié)軟骨被破壞。
[0036] 本發(fā)明人已經(jīng)證明，在0A的動物模型中提供橄欖苦苷可以防止軟骨破壞。羥基酪 醇也已顯示在軟骨模型系統(tǒng)中抑制分解代謝的酶。
[0037] 因此，本發(fā)明在第一方面涉及包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇的組合物，用于預防 或治療軟骨破壞。
[0038] 以另一種方式，本發(fā)明的該方面可被描述為橄欖苦苷和/或羥基酪醇在制備用于 預防或治療軟骨破壞的藥物中的用途。
[0039] 預防或治療軟骨破壞的用途與抑制或減少軟骨破壞的用途是同義的。
[0040] 因此，本發(fā)明的實施方案包括包含橄欖苦苷的組合物用于預防或治療軟骨破壞和 包含羥基酪醇的組合物用于預防或治療軟骨破壞。
[0041] 本發(fā)明的又一實施方案包括包含橄欖苦苷和羥基酪醇的組合物用于預防或治療 軟骨破壞。
[0042] 本發(fā)明進一步的實施方案包括用于本發(fā)明的組合物，其中所述組合物還包含姜黃 素，以及用于本發(fā)明的組合物，其中所述組合物進一步包含槲皮素。
[0043] 在本發(fā)明的實施方案中，用于本發(fā)明的組合物包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇、以 及一種或多種其他多酸，例如選自姜黃素和槲皮素的一種或多種多酸。
[0044] 本發(fā)明的一個實施方案涉及用于本發(fā)明的組合物，其中所述組合物包含橄欖苦苷 和/或羥基酪醇，并且還包含姜黃素。
[0045] 橄欖苦苷和姜黃素的組合，以及羥基酪醇和姜黃素的組合，都被證明在體外軟骨 模型中抑制分解代謝的酶（參見圖1和3,實施例1)。
[0046] 本發(fā)明的另一個實施方案涉及用于本發(fā)明的組合物，其中所述組合物包含橄欖苦 苷和/或羥基酪醇，并且還包括槲皮素。
[0047] 橄欖苦苷和槲皮素的組合、以及羥基酪醇和槲皮素的組合，都被證明在體外軟骨 模型中抑制分解代謝的酶（參見圖1和3,實施例1)。
[0048] 在又一個實施方案中，用于本發(fā)明的組合物包含橄欖苦苷和/或羥基酪醇，并進 一步包含姜黃素和槲皮素。
[0049] 橄欖苦苷+姜黃素+槲皮素的組合、或羥基酪醇+姜黃素+槲皮素的組合，已分別 被證明對軟骨破壞中分解代謝酶的活性具有協(xié)同和特異的效果（參見圖1和3,實施例1)。
[0050] 成分-主要的牛物活件化合物
[0051] 橄欖苦苷、羥基酪醇、姜黃素和槲皮素是本發(fā)明的主要生物活性分子。它們可以來 自任何合適的來源。在優(yōu)選的實施方案中，橄欖苦苷、羥基酪醇、姜黃素和槲皮素從植物來 源獲得。橄欖苦苷和羥基酪醇例如可以從橄欖植物獲得。
[0052] 成分-講一步的牛物活件化合物
[0053] 用于本發(fā)明的組合物也可以包含至少一種其他生物活性化合物，如選自抗氧化 劑、抗炎化合物、糖胺聚糖、益生元、纖維、益生菌、脂肪酸、礦物質(zhì)、微量元素和/或維生素 的化合物。
[0054] 在本申請的上下文中，術語"生物活性"是指該化合物除滿足基本的營養(yǎng)需要之 外，其有助于個體健康、或?qū)θ梭w有效果。
[0055] 至少一個其他生物活性化合物可以來自天然來源。因此，這些化合物可以來自植 物、動物、魚類、真菌、藻類、微生物發(fā)酵物的提取物。認為礦物質(zhì)來自天然來源，屬于此定 義。
[0056] 抗炎化合物和/或抗氣化劑
[0057] 與抗炎化合物組合
[0058] 在一個方面，本發(fā)明涉及組合物，其用于預防或治療軟骨破壞。
[0059] 在本發(fā)明的一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物可與至少一種抗炎化合物組合 使用。
[0060] 所述至少一種抗炎化合物可與本發(fā)明的組合物組合施用，例如相繼或同時施用。
[0061] 所述至少一種抗炎化合物可以與本發(fā)明的組合物在相同的組合物中提供，或者可 以在單獨的組合物中提供，例如在多部分試劑盒中提供，或以一系列相互作用的產(chǎn)品提供。 [0062] 如果用于本發(fā)明的組合物與至少一種抗炎化合物存在于一個或多個單獨的組合 物中，它們可以在使用之前混合，或可同時或相繼施用。
[0063] 在進一步的實施方案中，用于本發(fā)明的組合物包含作為至少一種其他生物活性化 合物的至少一種抗炎化合物。在其他優(yōu)選的實施方案中，用于本發(fā)明的組合物包含作為至 少一種其他生物活性化合物的至少一種抗氧化劑。
[0064] 所述至少一種抗炎和/或抗氧化劑化合物可以是任何具有抗炎和/或抗氧化作用 的合適的化合物。
[0065] 值得注意的是，一些抗炎化合物還具有抗氧化作用?？梢愿鶕?jù)其具有一種或兩種 特性選擇包含該化合物。
[0066] 可以包含在本發(fā)明組合物中的抗炎化合物的實例是天然來源的抗炎化合物。
[0067] 因此，本發(fā)明的一個實施方案涉及用于本發(fā)明的組合物