專利名稱：16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑及其制備方法，該制劑主要用于宮頸癌疾病的治療。
背景技術(shù)：
宮頸癌是女性第二常見的惡性腫瘤(僅次于乳腺癌)，是女性生殖道最常見的惡性腫瘤。患者年齡分布呈雙峰狀，35-39歲和60-64歲為高發(fā)年齡，平均年齡為52. 2歲。全世界每年大約有50萬個新發(fā)子宮頸癌病例，中國約占30萬個，居世界之首。宮頸癌又稱宮頸浸潤癌，由癌前病變發(fā)展至宮頸癌一般需5-10年時間，使得宮頸癌易于早期診斷與早期治療。近40年來，國內(nèi)外通過宮頸細胞學(xué)檢查、陰道鏡檢查、宮頸活檢，多數(shù)患者在CIN時獲得診斷和治療，宮頸癌發(fā)病率明顯下降，早期宮頸癌的比例較以前明顯增加，宮頸癌的死亡率也隨之不斷下降。但近年來我國宮頸癌發(fā)病率有增加的趨勢，發(fā)病有年輕化的趨勢。宮頸癌的治療應(yīng)根據(jù)臨床分期、患者年齡、全身情況、設(shè)備條件和醫(yī)療技術(shù)水平?jīng)Q定治療措施，手術(shù)和放療是治療宮頸癌的兩大主要治療手段，早期以手術(shù)治療為主，中晚期大多采用放射治療，近年來的研究表明化療有重要的輔助作用。大量研究顯示，手術(shù)及放射治療這兩種局部治療手段不能控制腫瘤周圍肉眼看不見的微小轉(zhuǎn)移灶以及可能存在的全身亞臨床轉(zhuǎn)移，這是晚期宮頸癌治療后復(fù)發(fā)的主要原因。為了提高晚期宮頸癌的治療效果，近十多年來化療逐漸引起各國學(xué)者的重視，化療成為局部晚期宮頸癌和晚期宮頸癌綜合治療的一個重要組成部分?，F(xiàn)在，市售的主要抗癌化學(xué)藥物有一類順鉬、卡鉬、紫杉醇；二類5_氟尿嘧啶、異環(huán)磷酰胺、托泊替康、吉西他濱等。紫杉醇、5-氟尿嘧啶、托泊替康和氟尿嘧啶都為周期性特異性藥物，紫杉醇能特異性將細胞阻滯于G2期和M期；抗代謝藥5-氟尿嘧啶和吉西他濱對S期細胞作用顯著，主要為干擾細胞DNA合成；托泊替康為拓撲異構(gòu)酶I抑制劑，在S期干擾DNA合成。順鉬、卡鉬和異環(huán)磷酰胺為周期非特異性抗腫瘤藥，前兩者為類烷化劑藥物，后者為烷化劑藥物，對增殖細胞各期，以及GO期細胞都有殺傷作用，導(dǎo)致DNA損傷。16-妊娠雙稀醇麗(16-dehydropregnenolone, 16-DHP),化學(xué)名3 β -輕基-孕甾-5，16- 二烯-20-酮，分子式為C21H2tlO2,分子量為314. 46，結(jié)構(gòu)式如下
在國外，對于16-DHP研究最多的機構(gòu)屬印度的Central Drug Research Institute。該機構(gòu)下，s. K. Singh等人采用HPLC-UV法進行了 16-DHP在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究，測定了大鼠血衆(zhòng)、尿液、膽汁和糞便中的16-DHP含量。Satyendra Suryawanshi等人建立了 HPLC/ESI-MS/MS法同時測定家兔血漿中16-DHP及其5種主要代謝物的含量。后來，他又進行了 16-DHP在大鼠體內(nèi)的臨床前藥動學(xué)、劑量關(guān)系、性別差異和蛋白結(jié)合率的研究。Devendra Kumar等人研究發(fā)現(xiàn)16-DHP是一種新的法尼酯X受體拮抗劑,具有顯著地降血脂活性。另有專利報道，16-DHP在正常人和高血脂患者體內(nèi)有顯著的降血脂作用，且沒有激素樣作用。現(xiàn)在，16-DHP正被開發(fā)為一種聯(lián)合洛伐他汀的抗高血脂癥的口服制劑，此種制劑能夠提高高密度脂蛋白水平，抑制血小板聚集，減少膽固醇在肝臟中的生物合成。在長期毒性研究中發(fā)現(xiàn)，16-DHP的毒副作用很小，且有良好的治療窗。從毒性和藥效學(xué)角度可以看出，16-DHP有望開發(fā)為具有自主知識產(chǎn)權(quán)的抗腫瘤新藥。在國內(nèi)，孫立新等在對白英進行抗腫瘤活性追蹤提取分離活性成分中，首次分離得到16-DHP，并進行了體內(nèi)抗腫瘤實驗，結(jié)果表明16-DHP可以顯著抑制荷瘤小鼠S180和 H22實體瘤的生長。并首次發(fā)現(xiàn)其體外對多種腫瘤細胞的增殖具有抑制作用，并對其誘導(dǎo)人宮頸癌HeLa細胞死亡的機制作了初步研究16_妊娠雙烯醇酮呈時間和劑量依賴性誘導(dǎo)Hela細胞凋亡，誘導(dǎo)Hela細胞凋亡時激活了 caspase-3,降解caspase-3底物ICAD和PARP，使DNA有序化降解；16_妊娠雙烯醇酮上調(diào)了促凋亡蛋白Bax的表達，下調(diào)了抗凋亡蛋白Bcl-2，激活以線粒體為中心的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑而誘導(dǎo)細胞凋亡；16_妊娠雙烯醇酮處理后的Hela細胞被阻滯于GcZG1期，且呈時間和濃度依賴關(guān)系。16-妊娠雙烯醇酮是一種脂溶性強的留體類化合物，在水中幾乎不溶，目前尚無16-妊娠雙烯醇酮亞微乳制劑的文獻公開。亞微乳注射劑是目前醫(yī)藥領(lǐng)域中發(fā)展較快的劑型之一，亞微乳主要是以植物油(脂肪酸甘油三酯)為油相，加乳化劑、助乳化劑和注射用水，可供靜脈注射用，能完全被機體代謝利用，因此又被稱為靜脈注射用脂肪乳劑。目前制備亞微乳劑所應(yīng)用的設(shè)備主要有高速攪拌器、超聲波乳化器、高速分散均質(zhì)機、高壓均質(zhì)機和微射流儀等。其中高壓均質(zhì)方法憑借所得產(chǎn)品粒徑較小、粒度分布均勻，適宜工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢已成為目前制備亞微乳劑的主流技術(shù)。近年來，脂肪乳劑作為藥物傳遞系統(tǒng)在制藥領(lǐng)域也正發(fā)揮著越來越重要的作用。脂肪乳劑的特殊的理化特性和低毒性決定了其可以作為脂溶性藥物，特別是抗癌藥物的良好載體。作為給藥載體，脂肪亞微乳可以保護被包封藥物，而且具有載藥量大、能提高藥物穩(wěn)定性、延長藥物作用、降低毒副作用、使藥物具有緩控釋和靶向等作用。另外，亞微乳制備工藝簡單、質(zhì)量可控，適合工業(yè)化生產(chǎn)，因此亞微乳注射劑具有很好的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種安全性高、療效顯著、毒副作用小、穩(wěn)定性強、制備工藝簡單并且適合工業(yè)化生產(chǎn)的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑及其制備方法，可有效解決抗宮頸癌藥物的生產(chǎn)及臨床需要問題。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的以16-妊娠雙烯醇酮為主藥，以注射用植物油、乳化劑及助乳化劑為輔料，與注射用水配制成亞微乳注射劑，各組分的重量百分比為16-妊娠雙烯醇酮O. 01-3%,注射用植物油O. 1-30%,乳化劑O. 01_6%，助乳化劑O. 001-3%，抗氧劑O. 001-0. 3%，等滲調(diào)節(jié)劑O. 001_10%，pH調(diào)節(jié)劑O. 000001-2%，余量為注射用水。本發(fā)明16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑由以下步驟實現(xiàn)
(1)制備水相按照權(quán)利要求I的組分量，將助乳化劑、等滲調(diào)節(jié)劑加入注射用水中，在40-80 °C條件下，攪拌均勻，形成水相；
(2)制備油相按照權(quán)利要求I的組分量，將16-妊娠雙烯醇酮、乳化劑、抗氧劑加入注射用植物油中，在40-80 °C條件下，攪拌均勻，形成油相；
(3)制備初乳在溫度為40-80°C并不斷攪拌下，將水相緩緩注入到油相中，在均質(zhì)速度5000-25000 rpm下均質(zhì)3-15 min,用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為5-9，得初乳；
(4)制備終乳將初乳過高壓均質(zhì)機，在200-1400bar的壓力下反復(fù)均質(zhì)3_20次，過O. 22 μ m微孔濾膜，得16-妊娠雙烯醇酮亞微乳；
(5)將16-妊娠雙烯醇酮亞微乳分裝于安瓿瓶中，充氮氣，封口，在115°C滅菌30 min 或在121 °C滅菌15 min，得16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑。本發(fā)明16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑組成科學(xué)、制備工藝簡單，質(zhì)量穩(wěn)定可控，成本低廉，適合工業(yè)化生產(chǎn)；本發(fā)明提供的制劑載藥量及包封率高，可長期穩(wěn)定貯存，有利于16-妊娠雙烯醇酮更好地發(fā)揮藥效，降低毒副作用。
具體實施例方式以下通過實施例對本發(fā)明的具體實施方式
作詳細說明。本發(fā)明在實施中，可由以下實施例給出，但本發(fā)明的保護范圍不局限于此。實施例I_
權(quán)利要求
1.一種治療宮頸癌的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑，其特征在于組分如下 16-妊娠雙烯醇酮O. 01-3% ； 注射用植物油O. 1-30% ； 乳化劑O. 01-6% ； 助乳化劑O. 001-3% ；抗氧劑 O. 001-0. 3% ； 等滲調(diào)節(jié)劑O. 001-10% ； pH 調(diào)節(jié)劑 O. 000001-2% ； 余量為注射用水。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑，其特征在于所述的注射用植物油為大豆油、玉米油、花生油、橄欖油、中鏈脂肪酸甘油酯的一種或兩種以上的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑，其特征在于所說的乳化劑為大豆磷脂、蛋黃卵磷脂、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油的一種或兩種以上的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑，其特征在于所說的助乳化劑為泊洛沙姆188、泊洛沙姆407的一種或兩種的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑，其特征在于所說的抗氧劑為維生素E。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑，其特征在于所說的等滲調(diào)節(jié)劑為甘油、氯化鈉、葡萄糖的一種或兩種的混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求I-所述的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑，其特征在于所說的pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉或鹽酸中的一種或兩種的混合物。
8.—種權(quán)利要求1-7所述的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑的制備方法，其特征在于，制備方法如下 (1)制備水相按照權(quán)利要求I的組分量，將助乳化劑、等滲調(diào)節(jié)劑加入注射用水中，在40-80 °C條件下，攪拌均勻，形成水相； (2)制備油相按照權(quán)利要求I的組分量，將16-妊娠雙烯醇酮、乳化劑、抗氧劑加入注射用植物油中，在40-80 °C條件下，攪拌均勻，形成油相； (3)制備初乳在溫度為40-80°C并不斷攪拌下，將水相緩緩注入到油相中，在均質(zhì)速度5000-25000 rpm下均質(zhì)3-15 min，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為5-9，得初乳； (4)制備終乳將初乳過高壓均質(zhì)機，在200-1400bar的壓力下反復(fù)均質(zhì)3_20次，過O.22 μ m微孔濾膜，得16-妊娠雙烯醇酮亞微乳； (5)將16-妊娠雙烯醇酮亞微乳分裝于安瓿瓶中，充氮氣，封口，在115°C滅菌30 min或在121 °C滅菌15 min，得16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射劑。
全文摘要
本發(fā)明提供一種治療宮頸癌的16-妊娠雙烯醇酮亞微乳注射液及其制備方法，可有效解決抗宮頸癌藥物的生產(chǎn)及臨床需要問題。將水不溶性藥物16-妊娠雙烯醇酮溶于注射用植物油中，加入乳化劑、助乳化劑及其他添加劑，制備水包油(O/W)亞微乳。亞微乳不含有有機溶劑等助溶劑，與葡萄糖注射液或生理鹽水可按任意比例混合，貯存、使用或配伍時不易產(chǎn)生不溶性微粒，安全性高，穩(wěn)定性好。本發(fā)明提供的制劑載藥量及包封率高，可長期穩(wěn)定貯存。
文檔編號A61K9/107GK102920657SQ20121050265
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月30日
發(fā)明者孫立新, 畢開順, 李清, 張石 申請人:沈陽藥科大學(xué), 沈陽藥科大學(xué)(本溪)醫(yī)藥科技有限公司