8. 6Hz, 1H),7. 28 (s, 2H),7. 01 (d,J= 8. 8Hz, 2H),6. 62 (d,J= 6. 0Hz, 1H),4. 64 -4. 42 (m, 2H), 3. 94 - 3. 92 (m, 2H) , 3. 68 - 3. 65 (m, 2H), 2. 97-2. 95 (m, 2H) ,2.82- 2. 50 (m, 4H),L40 (s, 9H).
[0150] 實(shí)施例2:
[0151] 1-[5-(叔丁基）異惡唑-3-基]-3-{5-[(7-(3-嗎啉代丙氧基）喹唑啉-4-基） 硫基]-1，3, 4-噻二唑-2-基}脲
[0153] 步驟1) 5-氨基-1，3, 4-噻二唑-2-硫醇
[0154] 將硫代氨基脲（1. 0g, 11.Ommol)和二硫化碳（4.lg, 55mmol)溶于 40mLDMF中，溶 液于80度下反應(yīng)3h，TLC檢測(cè)反應(yīng)已經(jīng)完全，減壓濃縮，直接柱層析分離（V(MeOH)/V(DCM) =1/10)，得到白色固體1.lg，收率76%。
[0155] MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：134. 1[M+1] +
[0156] 步驟2)l-(5-(叔丁基）異惡唑基）(5-疏基 -1，3, 4-卩莖一唑-2-基）脈
[0157] 將5-氨基-1，3, 4-噻二唑-2-硫醇（500mg，3. 76mmol)溶解在乙腈（20mL)中，室 溫下依次加入苯基（5_(叔丁基）異唑-3-基）氨基甲酸酯（1.46g，5. 64mmol)，攪拌均勾 后滴加三乙胺（1. 0mL)，溶液于85度下反應(yīng)24小時(shí)，減壓濃縮，直接柱層析分離（V(MeOH) / V(DCM) = 1/20)，得到白色固體 225mg，收率 20. 1%。
[0158] MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：300. 4[M+1] +
[0159] 步驟3)7-(3-嗎啉丙氧基）喹啉-4 (1H)-酮
[0160] 將3-(4-嗎啉）-1-丙醇（1. 33g, 9. 2mmol)溶于40mL無水DMF中，-10度條件下 分批加入氫化鈉（366mg，30. 5mmol)，保持該溫度條件下繼續(xù)攪拌0. 5小時(shí)，再滴加7-氟喹 啉-4(1H)_酮（1. 0g，6.lmmol)的無水DMF(lOmL)溶液，滴加完畢，100度反應(yīng)10小時(shí)，TLC 檢測(cè)反應(yīng)已經(jīng)完全，加水（50mL)淬滅反應(yīng)，減壓濃縮，直接柱層析分離（V(MeOH)/V(DCM)= 1/20)，得到白色固體350mg，收率20. 1 %。
[0161] MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：289. 2[M+1] +
[0162] 步驟4) 4- (3- ((4-氯喹唑啉-7-基）氧基）丙基）嗎啉
[0163] 將 7-(3-嗎啉基）喹啉-4(1Η)_ 酮（300mg，1.05mmol)，三氯氧磷 (874mg，5. 75mmol)置于100mL單口瓶中，反應(yīng)液于100度反應(yīng)3小時(shí)，然后冷卻至室溫，加 水（50mL)淬滅反應(yīng)，滴加lmol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH= 9,二氯甲燒（500mL)萃取，無 水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，柱層析分離（V(MeOH)/V(DCM) = 1/20)，得到白色固體216mg，收 率 67%。
[0164] MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：308. 2[M+1] +
[0165] 步驟4) 1- [5-(叔丁基）異惡唑-3-基]-3- {5- [ (7- (3-嗎啉代）喹唑啉-4-基） 硫基]-1，3, 4-噻二唑-2-基}脲
[0166] 將1-(5-(叔丁基）異惡唑-3-基）-3-(5-巰基_1，3, 4-噻二唑-2-基）脲 (110.611^，0.371111]1〇1)，4-(3-((4-氯喹挫啉-7-基）氧基）丙基）嗎啉（10011^，0.331111]1〇1) 和碳酸鉀（136. 7mg, 1.Ommol)置于100mL單口瓶中，加入20mL乙腈，溶液于85度下反應(yīng)6 小時(shí)，TLC檢測(cè)反應(yīng)已經(jīng)完全，過濾，濾液減壓濃縮，柱層析分離（V(MeOH)/V(DCM) = 1/20)， 得到白色固體12mg，收率6· 4%。
[0167] MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：571. 3[M+1] +
[0168] 4NMR(400MHz，d6-DMS0)δ10. 16 (s，1H)，8. 94 (s，1H)，8. 15 (d，J= 9.OHz, 1H),7. 43 (dd,J= 11. 6, 2. 4Hz, 2H),6. 81 (s, 1H),6. 57 (s, 1H),4. 27 (t,J= 6. 2Hz, 2H),3. 68 - 3. 54 (m, 6H),2. 46 (s, 4H),1. 99 (t,J= 10.OHz, 2H) ,1-31 (s, 9H).
[0169] 實(shí)施例3-4
[0170] 采用相應(yīng)的原料，按照合成方法所示的步驟合成實(shí)施例3-4:
[0171]
[0172] 生物實(shí)施例1MV4-11細(xì)胞增殖抑制活性
[0173] 實(shí)驗(yàn)方法：
[0174] 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)條件：
[0175]
[0176] 1)細(xì)胞鋪板：
[0177]a.配制完全培養(yǎng)基，充分混勻。
[0178]b.復(fù)蘇細(xì)胞，傳兩代左右選擇生長狀態(tài)良好的細(xì)胞株。
[0179]c.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從培養(yǎng)箱中取出，核對(duì)瓶上標(biāo)記的細(xì)胞名稱，培養(yǎng)基類型及細(xì)胞 代數(shù)。
[0180]d.用移液管將細(xì)胞懸液移入離心管中，800-1000rpm的轉(zhuǎn)速離心3-5分鐘。
[0181]e.吸棄離心管中的細(xì)胞上清液。
[0182]f.向離心管中加適當(dāng)體積的培養(yǎng)基，輕柔吹打使細(xì)胞重懸均勻。
[0183]g.使用Vi-CellXR細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)。
[0184] h.將細(xì)胞懸液調(diào)至合適濃度。
[0185]i.將細(xì)胞懸液加入底透壁白的96孔板中，100微升/孔。標(biāo)記細(xì)胞名稱，種板密 度，日期等詳細(xì)信息，將培養(yǎng)板放置于〇) 2培養(yǎng)箱中過夜。
[0186] 2)化合物的準(zhǔn)備和添加：
[0187] i)化合物板的準(zhǔn)備（在DMS0中稀釋至10個(gè)濃度）：
[0188] 用DMS0將化合物配制成10mm的儲(chǔ)存液，用時(shí)稀釋成4mm，再用DMS0稀釋成0. 4mm， 以0. 4mm為最高濃度，用DMS0逐步3倍稀釋，得到10個(gè)濃度梯度的化合物。Staurosporine 作為陽性對(duì)照藥。
[0189]ii)化合物的添加：
[0190] a.從相應(yīng)的化合物板中移取0.5U1加入過夜培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)板中。
[0191] b.在37°C培養(yǎng)箱中孵育72小時(shí)。
[0192] 3)檢測(cè)及分析
[0193] a.化合物處理72小時(shí)后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，DMS0對(duì)照孔中的細(xì)胞生 長狀態(tài)正常，未見有污染現(xiàn)象。
[0194] b.將細(xì)胞培養(yǎng)板放置室溫中平衡30分鐘。
[0195] c.將細(xì)胞活性檢測(cè)試劑100μ1/孔加入培養(yǎng)板中。
[0196] d.在振板機(jī)上混勻2分鐘，誘導(dǎo)細(xì)胞溶解。
[0197] e.將96孔板在室溫中放置10分鐘，使其發(fā)光信號(hào)穩(wěn)定。
[0198] f.粘貼白色的底膜于培養(yǎng)板底部，使用FleXStation3測(cè)板（相關(guān)設(shè)置為：發(fā)光， 整合時(shí)間500ms)。
[0199] g.記錄分析所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
[0200] 表3本發(fā)明代表化合物的體外細(xì)胞學(xué)抑制活性
[0201]
[0202] 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
[0203] 表3結(jié)果顯示，本發(fā)明的化合物對(duì)MV4-11細(xì)胞增殖均具有較好的抑制活性。
[0204] 雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明、【具體實(shí)施方式】及試驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描 述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見 的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的 范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種如式α)所示的化合物，或如式α)所示的化合物的立體異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體、 互變異構(gòu)體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、酯、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥， 其中：Ε1和Ε 2各自獨(dú)立地為Ν或CH ; Ε3為-0-、-S-、-CH 2_ 或-ΝΗ-; Ε4為一個(gè)鍵、-0_、-S-、-CH 2-或-ΝΗ-; Ε為Q 12亞雜芳基； G 為-0-、-S-、-CH2-、-C ( = 0) -、-C ( = 0) NH-或-NH-; R為C312雜環(huán)基； η 為 1、2、3 或 4 ; 其中，所述的Q 12亞雜芳基和C 3 12雜環(huán)基任選獨(dú)立地被氫、烷基、氟、氯、溴、硝基、三氟 甲基、氨基、羧基或羥基單取代或相同或不同的多取代。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中其中，X、Y、Z、Z1、Z2、Z3和Z 4各自獨(dú)立地為N或CH ; T 為-〇-、-S-、-NH-或者-CH2-。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中， E為4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中，其中，各 X1、X2和 X 3獨(dú)立地為-CH 2_、-0-、-C ( = 0) -、-NH-或-S-; q 為 0、1、2、3 或 4。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中， R為6. -種化合物，其為如下所示結(jié)構(gòu)：或其立體異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、 酯、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥。7. 藥物組合物，包含權(quán)利要求1所述的化合物，進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的載體、賦形 劑、稀釋劑、輔劑和媒介物中的至少一種。8. 根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的化合物或權(quán)利要求7所述的藥物組合物，在制備用 于預(yù)防、處理、減輕或治療患者增殖性疾病、自體免疫疾病、炎性疾病或創(chuàng)傷性腦損傷疾病 藥物中的用途。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，所述的疾病為FLT3介導(dǎo)或FLT3-ITD引起的疾病。10. -種藥物聯(lián)合，其包含權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的化合物或權(quán)利要求7所述的藥物 組合物和一種或多種用于治療增殖性疾病、自體免疫疾病或炎性疾病的其他活性藥劑；其 中所述的其他活性藥劑是指化學(xué)治療藥物，抗增殖劑，免疫抑制劑，免疫刺激劑，抗炎性試 劑，CDK4/6激酶抑制劑，ABL抑制劑，ABL/Scr抑制劑，極光激酶抑制劑，Bcr-ABL的非-ATP 競(jìng)爭性抑制劑，c-KIT突變抑制劑，RET抑制劑，PDGFR抑制劑，VEGFR抑制劑，F(xiàn)LT3抑制劑， FLT3-ITD抑制劑或它們的組合。
【專利摘要】本發(fā)明提供了取代脲類衍生物(如式(I)所示的化合物)或其立體異構(gòu)體，幾何異構(gòu)體，互變異構(gòu)體，氮氧化物，水合物，溶劑化物，代謝產(chǎn)物，酯，藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥，及其藥物組合物。該類化合物能夠用于調(diào)節(jié)FLT3激酶活性和用于抑制FLT3-ITD激酶，同時(shí)能制備用于治療FLT3介導(dǎo)或FLT3-ITD引起的疾病的藥物的用途。
【IPC分類】A61P1/16, A61P35/02, A61P9/12, A61P25/00, A61P9/04, A61P35/04, C07D413/12, A61P9/06, A61P29/00, A61P1/02, A61P13/12, A61P37/02, A61P7/06, A61P17/00, A61P3/10, A61P19/00, A61P5/14, C07D417/14, A61P35/00, A61P11/00, A61K31/5377, A61P3/12, C07D513/04, A61P7/12, A61P9/10, A61P27/02, A61P19/02, A61P7/02, A61P27/06, A61P31/00, A61P7/00
【公開號(hào)】CN105461709
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510628849
【發(fā)明人】劉兵, 龍伯華, 張英俊, 鄭常春, 許娟, 王興安, 歐陽羅
【申請(qǐng)人】廣東東陽光藥業(yè)有限公司
【公開日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2015年9月25日