1-(2-(金剛烷-1-基)-1h-吲哚-5-基)-3-取代脲衍生物及制備和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及含嗎I噪結(jié)構(gòu)的脈類衍生物，尤其是設(shè)及一類1-(2-(金剛 燒-1-基）-1H-嗎I噪-5-基）-3-取代脈衍生物及其制備方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 腫瘤是威脅人類生命的常見病和多發(fā)病，其死亡率僅次于屯、血管疾病而位居 第二。近年來，由于細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物具有難W避免的選擇性差、毒副作用強(qiáng)、易產(chǎn) 生耐藥等缺點(diǎn)，抗腫瘤藥物的研發(fā)巳從傳統(tǒng)的細(xì)胞毒藥物轉(zhuǎn)向針對特定祀點(diǎn)和作用機(jī) 制的祀向治療藥物，發(fā)現(xiàn)選擇性作用于特定祀點(diǎn)的高效、低毒、特異性強(qiáng)的新型抗腫 瘤藥物已成為抗腫瘤藥物研發(fā)的重要方向（[1]M.Sun,X.Wu,J.Chen,J.Cai,M.Cao,M. Ji,Design,synthesis,曰ndinvitroantitumorev曰lu曰tionofnoveldi曰rylure曰s derivatives,EurJMedQiem, 45(2010)2299-2306.)。
[0003] 蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinases, PTKs)與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密 切相關(guān)，酪氨酸激酶的活性過高，導(dǎo)致其下游信號途徑激活，從而導(dǎo)致細(xì)胞分化、增殖、 遷移、抑制細(xì)胞調(diào)亡，最終導(dǎo)致腫瘤的形成和轉(zhuǎn)移（[2] J.化0, J.化en，Z.胎，W. Sun, W. Xu, Design, synthesis and biological activities of thiourea containing sorafenib analogs as antitumor agents, Bioorgan Med Qiem, 20(2012)2923-2929.)。因此，酪氨酸 激酶抑制劑已成為發(fā)展最迅速的一類抗腫瘤藥物，與傳統(tǒng)的細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物相比，運(yùn) 類藥物選擇性好，療效高、不良反應(yīng)小，已成為當(dāng)前抗腫瘤藥物研究的熱點(diǎn)。
[0004] 含嗎I噪結(jié)構(gòu)的脈類衍生物作為一類重要的酪氨酸激酶抑制劑，已有索拉非尼等藥 物上市，還有一系列處于臨床研究的化合物。通過在嗎I噪上引入金剛燒并在脈的另一端改 變?nèi)〈?，研究了其對腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一類1- (2-(金剛燒-1-基）-1H-嗎I噪-5-基）-3-取代脈 衍生物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的第二目的在于提供所述一類1-(2-(金剛燒-1-基）-lH-嗎I 噪-5-基）-3-取代脈衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0007] 所述1-(2-(金剛燒-1-基）-lH-嗎I噪-5-基）-3-取代脈衍生物的結(jié)構(gòu)式為：
[0008]
[0009] 其中，R代表Ci-Cs的烷基，取代或未取代的芳基。
[0010] 所述一類1- (2-(金剛燒-1-基）-1H-嗎I噪-5-基）-3-取代脈衍生物的制備方法， 包括w下步驟：
[0011] 1)2'-甲基金剛燒酷苯胺的合成
[0012] 在反應(yīng)瓶中，依次加入2-甲基苯胺、碳酸鐘、1-金剛燒甲酯氯和甲苯；升溫反應(yīng)， 反應(yīng)液冷卻至室溫，抽濾，水洗濾餅，烘干得白色固體產(chǎn)物2' -甲基金剛燒酷苯胺粗品，再 用乙醇重結(jié)晶；
[0013] 在步驟1)中，所述2-甲基苯胺、碳酸鐘、1-金剛燒甲酯氯、甲苯、乙醇的摩爾配比 可為1 : (0.7~1) : 1 :巧~10) : (12~20);所述升溫反應(yīng)的溫度可為70~80°C， 升溫反應(yīng)的時間可為化；所述升溫反應(yīng)可采用薄層色譜法（TLC)檢測反應(yīng)是否完全，反應(yīng) 完全后停止反應(yīng)；其收率可達(dá)到80 %~90%。
[0014] 2)中間體2-金剛燒-1H-日引噪的制備
[0015] 在反應(yīng)瓶中，依次加入2'-甲基金剛燒酷苯胺和四氨巧喃；再在攬拌狀態(tài)降溫到 0~10°C，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入正下基裡，保溫反應(yīng)，用鹽酸調(diào)抑至7~7. 5 ;分液，有機(jī)相用 無水硫酸鋼干燥后，過濾，濾液減壓濃縮得到的粗產(chǎn)物用硅膠柱層析分離得白色固體產(chǎn)物 2-金剛燒嗎I噪，反應(yīng)液冷卻至室溫，加入冰水，抽濾，收集濾餅，烘干得綠色中間體2-金剛 燒-1H-嗎I噪；
[0016] 在步驟2)中，所述2'-甲基金剛燒酷苯胺、四氨巧喃、正下基裡的摩爾配比可為 1 : (20~30) : 10。所述保溫反應(yīng)的時間可為3~地；所述鹽酸可采用質(zhì)量百分濃度為 5%的鹽酸；所述用硅膠柱層析分離的洗脫劑可為石油酸/乙酸乙醋，石油酸與乙酸乙醋的 體積比可為10 : 1;收率可達(dá)60%~70%。
[0017] 3)中間體2-金剛燒-5-硝基-1H-日引噪的制備
[001引在反應(yīng)瓶中，依次加入2-金剛燒-1H-嗎I噪和硫酸，攬拌狀態(tài)降溫到0~5°C，再加 入硝酸鋼的硫酸溶液，保溫反應(yīng)，在反應(yīng)液中加入冰水，析出黃色固體，抽濾，濾餅水洗，干 燥得到粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物用硅膠柱層析分離得黃色中間體2-金剛燒-5-硝基-1H-嗎I噪；
[001引在步驟如中，所述2-金剛燒-1H-嗎I噪、硫酸、硝酸鋼的摩爾配比可為1 : (15~ 20) : 1.05;所述保溫反應(yīng)的時間可為1~化；所述粗產(chǎn)物用硅膠柱層析分離的洗脫劑 可為石油酸/乙酸乙醋，石油酸與乙酸乙醋的體積比可為5 : 1;得黃色固體產(chǎn)物2-金剛 燒-5-硝基-1護(hù)嗎|噪，收率可達(dá)70%~85%。
[0020] 4)中間體2-金剛燒-5-氨基-1H-日引噪的制備
[0021] 在反應(yīng)瓶中，依次加入乙醇、水、乙酸和鐵粉；再在攬拌狀態(tài)升溫到65~75°C，加 入2-金剛燒-5-硝基-1H-嗎I噪，保溫反應(yīng)，反應(yīng)液熱過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑；濃縮后 濾液里加入水，后在攬拌下加入乙酸乙醋，最后用碳酸氨鋼調(diào)抑至7~8;過濾，分液，有機(jī) 相用無水硫酸鋼干燥后，過濾，濾液減壓濃縮得到的粗產(chǎn)物用硅膠柱層析分離得紅色中間 體2-金剛燒-5-氨基-1H-嗎I噪；
[002引在步驟4)中，所述2-金剛燒-5-硝基-1H-嗎I噪、鐵粉、乙醇、水和乙酸的摩爾配 比可為1 : 4 : (30~50) : (80~100):巧~10);所述保溫反應(yīng)的時間可為1~化； 所述濃縮后濾液里加入水的量可與乙醇等體積；所述在攬拌下加入乙酸乙醋的量可與乙醇 等體積；所述硅膠柱層析分離的洗脫劑可為石油酸/乙酸乙醋，石油酸與乙酸乙醋的體積 比可為3 : 1;收率可達(dá)65%~75%。
[002引 5)中間體2-金剛燒-5-異氯酸-1H-日引噪的制備
[0024] 在反應(yīng)瓶中，依次加入Ξ光氣和二氯甲燒，再在攬拌狀態(tài)降溫到0~5°C，加入 2-金剛燒-5-氨基-1H-嗎I噪的二氯甲燒溶液，繼續(xù)加入Ξ乙胺，升到室溫反應(yīng)3-地，過 濾，濾液減壓濃縮得到的粗產(chǎn)物用硅膠柱層析分離得白色中間體2-金剛烷基-5-異氯 酸-1H-嗎I噪；
[002引在步驟5)中，所述Ξ光氣、2-金剛燒-5-氨基-1H-嗎I噪的摩爾配比可為1 : 1;所述硅膠柱層析分離的洗脫劑可為石油酸/乙酸乙醋，石油酸與乙酸乙醋的體積比可為 10 : 1;收率可達(dá)60%~70%。
[0026] 6) 1- (2-(金剛燒-1-基）-1H-嗎I噪-5-基）-3-取代脈衍生物的制備
[0027] 在反應(yīng)瓶中，依次加入2-金剛烷基-5-異氯酸-1H-嗎I噪、甲苯、脂肪氨或未取代 或取代的芳基氨，再在攬拌狀態(tài)升溫至70~80°C，保溫反應(yīng)，再冷卻，抽濾，濾餅用甲苯洗 涂，干燥，得白色固體產(chǎn)物1-(2-(金剛燒-1-基）-1H-嗎I噪-5-基）-3-取代脈衍生物。 [002引在步驟6)中，所述2-金剛烷基-5-異氯酸-1H-嗎I噪、脂肪氨或未取代或取代的 芳基氨的摩爾配比可為1 : 1。所述保溫反應(yīng)的時間可為8~lOh;收率可達(dá)85%~90%。
[0029] 所述1- (2-(金剛燒-1-基）-1H-嗎I噪-5-基）-3-取代脈衍生物可在制備治療腫 瘤藥物中應(yīng)用。
[0030] 首先，利用Μ?Τ法對化合物進(jìn)行體外抗腫瘤活性測試。測定特定濃度的化合物 在多種腫瘤細(xì)胞中的生長抑制率，確定敏感細(xì)胞。W1-(2-(金剛燒-1-基）-lH-嗎I 噪-5-基）-3-取代脈衍生物用Μ?Τ法進(jìn)行體外抗腫瘤活性測試。結(jié)果表明該類化合物對多 種腫瘤細(xì)胞有生長抑制作用。其中化合物1-(2-金剛燒-1H-嗎I噪-5-基）-3-(2-氣-6-甲 基苯基）脈抑制腫瘤細(xì)胞H460生長效果比較明顯。在本實(shí)驗(yàn)中設(shè)置0. 2μΜ、2μΜ、20μΜ 共3個濃度，并取2地、4她、72h、9化共4個時間點(diǎn)，測定其0D值，并計算各自的生長抑制率 IR值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，H460細(xì)胞對該化合物較敏感，能夠呈時間和劑量依賴地抑制腫瘤細(xì) 胞生長，如圖1。為進(jìn)一步確定該化合物是否具有促調(diào)亡作用，采用westernblotting檢測 Pa巧切割情況，Pa巧切割是細(xì)胞早期調(diào)亡的標(biāo)志，因此能簡便且有效地檢測化合物促調(diào)亡 作用。仍采用上述較敏感的H460細(xì)胞，設(shè)置5μM、10μM、15μΜ共3個濃度，處理24h后進(jìn) 行檢測，結(jié)果表明該化合物能引起Pa巧切割，且呈一定的劑量依賴性，如圖2。
[0031] 本發(fā)明提供一類具有新結(jié)構(gòu)的1- (2-(金剛燒-1-基）-1H-嗎I噪-5-基）-3-取代 脈衍生物及其制備方法，反應(yīng)成本低，產(chǎn)率高，反應(yīng)過程簡單易控制，適用于工業(yè)化生產(chǎn)，且 該類衍生物具有抗癌活性，可用于制備抗腫瘤藥物和研究該類化合物的構(gòu)效關(guān)系。
【附圖說明】
[0032] 圖1為1-(2-金剛燒-1H-日引噪-5-基）-3-(2-氣-6-甲基苯基）脈呈劑量和時 間依賴地抑制腫瘤細(xì)胞H460生長。在圖1中，橫坐標(biāo)為時間化our);縱坐標(biāo)為生長抑制率 (% )。
[003引圖2為1- (2-金剛燒-1H-日引噪-5-基）-3- (2-氣-6-甲基苯基）脈能夠引起Pa巧 切害d。在圖2中，設(shè)置濃度梯度5μM、10μM、15μM，WDMS0作為對照，該化合物能夠明顯引 起Pa巧切割，且具有劑量依賴性。β-actin為內(nèi)參。
【具體實(shí)施方式】
[0034] 為了便于理解本發(fā)明，現(xiàn)結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，W進(jìn)一步i全 釋本發(fā)明，但不構(gòu)成對本發(fā)明的任何方式的限制。
[0035] 實(shí)施例1 : 2'-甲基金剛燒酷苯胺的合成
[0036] 在50血干燥單口瓶中依次加入2-甲基苯胺（l.〇7g，〇. Olmol)，碳酸鐘（1.38邑， 0.0 lmol)，1-金剛燒甲酯氯（1. 98g, 0.0 lmol)，甲苯（20血），在攬拌狀態(tài)下升溫至70~ 80°C，反應(yīng)化，TLC檢測反應(yīng)已結(jié)束，停止反應(yīng)。反應(yīng)液冷卻至室溫，抽濾，水洗濾餅，烘干得 白色固體產(chǎn)物2' -甲基金剛燒酷苯胺粗品2. 6g，粗品用15血乙醇重結(jié)晶，得2' -甲基金剛 燒酷苯胺2.35g，收率87.0%。
[0037]波譜數(shù)據(jù)：1護(hù)醒R(600MHz,CDCI3):δ7.88(d,J=8. 07Hz, 1H), 7. 18 ~ 7. 24 (m，2H)