專(zhuān)利名稱(chēng)：新的氨基醇衍生物、其生產(chǎn)方法以及含有這些化合物的藥物制劑和試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的氨基醇衍生物、其生產(chǎn)方法以及含有這些化合物的藥物制劑和試劑。
本發(fā)明涉及通式Ⅰ的藥物及其生理上可耐受的鹽，
其中A 表示氫原子、基團(tuán)NR1R2、基團(tuán)NR1(CH2)pNR3R4、基團(tuán)(C=NH)NH2或吡啶基，B和D 相同或不同，分別表示一個(gè)鍵、C1-C6亞烷基或基團(tuán)NR5-C2-C6亞烷基，C 表示哌啶二基或哌嗪二基，W和X 相同或不同，分別表示一個(gè)鍵或羰基，Y和Z 相同或不同，分別表示含有7-24個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴基，R1-R5相同或不同，分別表示氫或C1-C6烷基，m 是整數(shù)0、1或2，其中，如果m=2，則兩個(gè)基團(tuán)C可以相同或不同，n和o 相同或不同，分別表示整數(shù)2、3或4，p 是2-6的整數(shù)，條件是不包括肼衍生物，并且如果A表示氫或基團(tuán)(C=NH)NH2而B(niǎo)和D彼此相同或不同地表示一個(gè)鍵或亞烷基，則m不能是0。
B、D、Y、Z和R1至R5的定義中所包括的烷基、亞烷基和烴基可以是直鏈或支鏈的。吡啶基應(yīng)理解為是指未取代的吡啶或被直鏈或支鏈C1-C6任選多次取代的吡啶。
m優(yōu)選為1或2。優(yōu)選的通式Ⅰ的化合物是含有2個(gè)氮以上，或當(dāng)A表示(C=NH)NH2時(shí)，含3個(gè)氮以上的化合物。
本發(fā)明還涉及通式Ⅰ的新型氨基醇衍生物及其生理可耐受的鹽，
其中A 表示氫原子、基團(tuán)NR1R2、基團(tuán)NR1(CH2)pNR3R4、基團(tuán)(C=NH)NH2或吡啶基，B和D 相同或不同，分別表示一個(gè)鍵、C1-C6亞烷基或基團(tuán)NR5-C2-C6亞烷基，C 表示哌啶二基或哌嗪二基，W和X 相同或不同，分別表示一個(gè)鍵或羰基，Y和Z 相同或不同，分別表示含有7-24個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴基，R1-R5相同或不同，分別表示氫或C1-C6烷基，m 是整數(shù)0、1或2，其中，如果m=2，則兩個(gè)基團(tuán)C可以相同或不同，n和o 相同或不同，分別表示整數(shù)2、3或4，p 是2-6的整數(shù)，條件是不包括肼衍生物，并且如果A表示氫或基團(tuán)(C=NH)NH2而B(niǎo)和D彼此相同或不同地表示一個(gè)鍵或亞烷基，則m不能是0，并且不包括如下化合物十八酸-[(3-二乙氨基丙基)亞氨基]-二(甲基-2,1-亞乙基)-酯鹽酸鹽，十八酸-[(3-二甲氨基-丙基)亞氨基]二-3,1-亞丙基)酯-二鹽酸鹽，十八酸-[(3-二甲氨基-丙基)亞氨基]二-3,1-亞丙基酯，
十八酸-[(3-二甲氨基-丙基)亞氨基]二-2,1-亞乙基酯-鹽酸鹽，二十二酸-2-[(3-二甲氨基-丙基)-[2-[(1-氧代十二烷基)氧基]乙基]氨基]乙酯，十六酸-[[2-(乙基甲基氨基)乙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯，十八酸-[[3-(二甲氨基)丙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯，十八酸-[[3-(二甲氨基)丙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯-二鹽酸鹽，十八酸-[[3-(二甲氨基)丙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯，N,N-二[3-(十二烷氧基)丙基]-1,2-乙二胺，十八酸-[[2-[(2-氨基乙基)氨基]乙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯，硬脂酸-亞氨基二-(亞乙基亞氨基亞乙基)-酯-單乙酸鹽。
在本發(fā)明中，式Ⅰ化合物中的如下含義是優(yōu)選的。這適用于化合物以及含有所述化合物的藥物和運(yùn)些化合物的各項(xiàng)治療應(yīng)用。
A 表示NH2或N(CH3)2，或者B和D 相同或不同，分別表示一個(gè)鍵、C1-C3亞烷基，或者如果m=0時(shí)，表示N(CH3)C3-C4亞烷基，或者C 表示哌啶二基，或者m 表示0或1，或者W和X 分別表示CO，或者Y 表示C13H27或C17H33，或者，Z 表示C13H27或C17H33，或者，n和o 分別表示2。
特別優(yōu)選同時(shí)滿(mǎn)足上述含義的化合物。
式Ⅰ化合物具有非常有用的藥理學(xué)特性，具體地講，它們可以促進(jìn)生物活性分子運(yùn)送到原核或真核細(xì)胞內(nèi)。因此，它們特別適用于將蛋白質(zhì)、核酸如DNA、cDNA、mRNA、PNA、反意多核苷酸等以及治療活性小分子化合物如肽激素、細(xì)胞抑制劑和抗生素等引入到生物體體內(nèi)或體外的靶細(xì)胞內(nèi)。因此，本發(fā)明的新化合物特別適用于通過(guò)基因療法有效地治療哺乳動(dòng)物、特別是人類(lèi)患者。這些化合物還適用于生產(chǎn)癌癥治療、抗病毒治療、感染治療和治療調(diào)節(jié)障礙所引起之疾病的藥物結(jié)合物。與用于基因構(gòu)建體的病毒載體相比，非病毒基因載體通常僅有很低的致免疫性。但是，由非病毒基因載體介導(dǎo)的基因表達(dá)的有效性和持續(xù)性仍不能令人滿(mǎn)意。除了可以改善基因表達(dá)外，通式Ⅰ化合物的優(yōu)點(diǎn)還在于，由于在式Ⅰ的叔氮N上有C2-C4-烷基-O-鏈，它們比較容易被降解掉。
除實(shí)施例中所列的化合物外，本發(fā)明還包括具有實(shí)施例中所述變量之含義的所有可能的組合的物質(zhì)。
根據(jù)本發(fā)明，生產(chǎn)式Ⅰ化合物的方法的特征在于，將通式Ⅱ的化合物
其中A、B、C、D、m、n和o具有上述含義，與通式Ⅲ的化合物和通式Ⅳ的化合物反應(yīng)，E-W-Y G-X-Z(Ⅲ) (Ⅳ)其中W、X、Y和Z具有上述含義，E和G表示活潑基團(tuán)，然后，如需要，脫除A、B或D中所含的保護(hù)基，將A代表的氫原子轉(zhuǎn)變成基團(tuán)(C=NH)NH2，將酸加成鹽形式的化合物轉(zhuǎn)變成游離堿或?qū)A形式的化合物通過(guò)用無(wú)毒的酸中和轉(zhuǎn)變成生理可耐受的鹽。
活潑基團(tuán)E和G是親核基團(tuán)，例如鹵原子、磺酸根或硫酸根基團(tuán)，或活潑酯、酸酐或混合酸酐的酸殘基。
優(yōu)選將式Ⅱ化合物同式Ⅲ和Ⅳ的化合物在惰性溶劑如醚如四氫呋喃或酰胺如二甲基甲酰胺或吡啶中任選地在堿如三乙胺或乙基二異丙基胺或堿金屬醇鹽存在下進(jìn)行反應(yīng)，但是，通式Ⅲ或Ⅳ的試劑也可以是未稀釋的，或者，如果W和X表示羰基，則可以使用酸如乙酸或三氟乙酸作為溶劑。
A、B或D中所含保護(hù)基的裂解根據(jù)該保護(hù)基的化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行，例如通過(guò)酸水解或堿水解或氫解來(lái)完成?？杀凰崃呀獾谋Ｗo(hù)基是例如叔丁氧羰基。A代表的氫原子可以通過(guò)例如與氨基氰或吡唑-1-甲酰脒反應(yīng)轉(zhuǎn)變成脒基。
大部分通式Ⅱ的原料化合物是新的(特別當(dāng)m表示1或2時(shí))，這些化合物也是本發(fā)明的目的之一。這些化合物可以通過(guò)文獻(xiàn)中已知的方法從已知的原料制得。
可能的可藥用鹽具體地講是與無(wú)毒的無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸如鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸、苯甲酸、水楊酸、丙二酸、馬來(lái)酸、琥珀酸或二氨基己酸形成的鹽。
所述的鹽可以通過(guò)常規(guī)方法例如將式Ⅰ化合物用相應(yīng)的酸中和制得。
為了生產(chǎn)藥物制劑或轉(zhuǎn)移試劑，可將本發(fā)明的化合物單獨(dú)地或以結(jié)合物的形式與生物活性分子如多核苷酸以適宜的比例混合，如需要，可使用輔助脂類(lèi)(co-lipids)，然后以液體(優(yōu)選水溶液)或固體(優(yōu)選冷凍干燥的形式)進(jìn)行體內(nèi)給藥或體外應(yīng)用。體內(nèi)給藥可通過(guò)口服、胃腸外給藥、局部給藥、經(jīng)粘膜給藥或通過(guò)引入到患者體腔內(nèi)來(lái)完成。還可以從生物可降解的基質(zhì)中緩釋或以氣霧劑或可吸入粉末的形式給藥。
給藥劑量取決于用藥者的年齡、健康情況和體重、疾病的程度、可能同時(shí)在進(jìn)行的其它治療的類(lèi)型、治療的頻率和所需效果的類(lèi)型，并且可由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。
除實(shí)施例中所提到的化合物外，本發(fā)明還優(yōu)選如下化合物1．油酸-2-[(2-油酰氧基-乙基)-哌啶-4-基-甲基)-氨基]-乙酯2．十四烷酸-2-[(2-十四烷酰氧基-乙基)-(哌啶-4-基-甲基)-氨基]-乙酯3．十二烷酸-2-[(2-十二烷酰氧基-乙基)-(哌啶-4-基-甲基)-氨基]-乙酯4．油酸-2-[(2-油酰氧基-乙基)-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基-氨基]-乙酯5．十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[3-([1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙酯6．十二烷酸-2-{(2-十二烷酰氧基-乙基)-[3-([1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙酯7．油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[3-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙酯8．十二烷酸-2-[{ 3-[(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯9．十四烷酸-2-[{3-[(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯10．十二烷酸-2-[{3-[(3-二乙氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯11．十四烷酸-2-[{3-[(3-二乙氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯12．十二烷酸-2-{[3-(4-氨基-丁基氨基)-丙基]-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯13．十二烷酸-2-{(2-十二烷酰氧基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基]氨基}-乙酯14．油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基]氨基}-乙酯15．十二烷酸-2-{(2-十二烷酰氧基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基-甲基]氨基}-乙酯16．油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基-甲基]氨基}-乙酯17．十二烷酸-2-{[2-(4-氨基-哌啶-1-基)-乙基]-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯18．十二烷酸-2-{[4-(4-氨基-哌啶-1-基)-丁基]-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯19．十四烷酸-2-{[2-(4-氨基-哌啶-1-基)-乙基]-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯20．十四烷酸-2-{[4-(4-氨基-哌啶-1-基)-丁基]-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯21．油酸-2-{[2-(4-氨基-哌啶-1-基)-乙基]-(2-油酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯22．油酸-2-{[4-(4-氨基-哌啶-1-基)-丁基]-(2-油酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯23．油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯24．油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯25．油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯26．4-二甲氨基-1-{3-[二-(2-十四烷基氧基-乙基)-氨基]丙基}-哌啶27．4’-{[二-(2-十四烷酰氧基-乙基)]-氨基}-[4,1’]-聯(lián)哌啶-1-甲酰脒實(shí)施例1癸酸-2-{(2-癸酰氧基-乙基)-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)丙基]-氨基}-乙酯-鹽酸鹽將2.1ml(15mmol)三乙胺加入到1.35g(5.5mmol)2-{(2-羥基-乙基)-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)丙基]-氨基}-乙醇的30ml四氫呋喃溶液中，然后滴加2.3ml(11mmol)癸酰氯的20ml四氫呋喃溶液并加熱回流20小時(shí)。冷卻后過(guò)濾，將濾液蒸發(fā)濃縮并將殘余物進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/甲醇1∶1洗脫得到1.28g油狀的所需化合物，將其溶于乙酸乙酯并與過(guò)量的氯化氫乙醚溶液混合。蒸發(fā)濃縮濾液后過(guò)濾收集沉淀，得到1.3g標(biāo)題化合物(42％理論產(chǎn)量)，熔點(diǎn)208-212℃。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)丙基]-氨基}-乙醇可以通過(guò)如下方法制得
將50mg碘化鉀加入到4.1g(40mmol)二乙醇胺和7.8g(44mmol)3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基氯化物的40ml二甲基甲酰胺溶液中并加熱至60℃5小時(shí)。真空濃縮后，將殘余物進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/甲醇1∶1洗脫得到2.7g(27％理論產(chǎn)量)油狀的所需化合物。
實(shí)施例2油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)丙基]-氨基}-乙酯-鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)丙基]-氨基}-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率35％。
實(shí)施例3油酸-2-[(2-油酰氧基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基)-氨基]-乙酯-鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-羥乙基-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得粘稠油狀的標(biāo)題化合物，收率53％。
用作原料的2-羥乙基-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基)-氨基]-乙醇可以通過(guò)如下方法制得a)將62.9g(0.33mol)1-芐基-哌啶基-4-酮、34.8g二乙醇胺和300ml甲苯的混合物在分水器中加熱回流2小時(shí)。分離了5ml水后，將其濃縮并將殘余物真空蒸餾。分離得到73.2g 2-(8-芐基-1-氧雜-4,8-二氮雜-螺[4.5]-癸-4-基)-乙醇(80％理論產(chǎn)量)，b.p.0.08185-190℃。
b)將87.6g(0.32mol)上述化合物的900ml甲醇溶液先用2g二氧化鉑、然后用2g10％鈀炭在4巴氫氣壓力下氫化。在已經(jīng)攝取了計(jì)算量的氫后，過(guò)濾并濃縮。得到55.0g(91％理論產(chǎn)量)油狀的2-[(2-羥基-乙基)-(吡啶-4-基)-氨基]-乙醇。
c)將24g(127mmol)上述化合物和7.2g(64mmol)4-氯-吡啶的混合物加熱至150℃2小時(shí)，然后加入10N氫氧化鈉溶液并用二氯甲烷和甲醇萃取。將萃取液濃縮并用乙酸乙酯研制，得到14.3g(91％理論產(chǎn)量)2-[(2-羥基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基)氨基]-乙醇，m.p.126-128℃。
實(shí)施例4十四烷酸-2-[(2-十四烷酰氧基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基)-氨基]-乙酯-鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基)-氨基]-乙醇和十四烷酰氯制得無(wú)定形粉末狀的標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)100-120℃，收率51％。
實(shí)施例5十二烷酸-2-[(2-十二烷酰氧基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基)-氨基]-乙酯-鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基)-氨基]-乙醇和十二烷酰氯制得無(wú)定形粉末狀的標(biāo)題化合物，收率48％。
實(shí)施例6油酸-2-[(2-油酰氧基乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基-甲基)-氨基]-乙酯-鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基-甲基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率37％。
用作原料的2-羥乙基-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基-甲基)-氨基]-乙醇可以通過(guò)如下方法制得a)將23.8g(0.1mol)1-苯甲?；?4-氯甲基-哌啶和21.0g(0.1mol)二乙醇胺加熱至150℃1小時(shí)，然后加入10N氫氧化鈉溶液并將其用二氯甲烷萃取。蒸發(fā)濃縮后，得到30.4g(99％理論產(chǎn)量)油狀的2-[(2-羥基-乙基)-(1-苯甲?；?哌啶-4-基-甲基)-氨基]-乙醇。
b)將30.3g上述化合物和200ml 6N鹽酸一起加熱回流5小時(shí)。冷卻后，將其用乙醚洗滌，將水相濃縮，用10N氫氧化鈉溶液調(diào)至堿性，用二氯甲烷萃取，干燥并蒸發(fā)濃縮。得到16.0g(79％理論產(chǎn)量)油狀的2-[(2-羥基-乙基)-(哌啶-4-基-甲基)-氨基]-乙醇。
c)按照與3c)中所述相似的方法，從上述化合物和4-氯-吡啶制得油狀的2-[(2-羥基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基-甲基)-氨基]-乙醇，收率44％。
實(shí)施例7十四烷酸-2-[(2-十四烷酰氧基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基-甲基)-氨基]-乙酯-鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基-甲基)-氨基]-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率86％。
實(shí)施例8十二烷酸-2-[(2-十二烷酰氧基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基-甲基)-氨基]-乙酯-鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基-甲基)-氨基]-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率81％。
實(shí)施例9油酸-2-[(2-油酰氧基-乙基)-(3-哌啶-1-基-丙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(3-哌啶-1-基-丙基)-氨基]-乙醇(J.Organomet.Chem.251,289(1983))和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率39％。
實(shí)施例10十二烷酸-2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯將1.0g(5mmol)十二烷酰氯滴加到0.7g(2mol)2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇鹽酸鹽的10ml三氟乙酸溶液中并將其室溫?cái)嚢?8小時(shí)。蒸發(fā)濃縮，與10ml冷的1N氫氧化鈉溶液混合，用乙酸乙酯萃取，蒸發(fā)濃縮并進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/甲醇4∶1洗脫得到0.87g(71％理論產(chǎn)量)油狀的所需化合物。
用作原料的2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇鹽酸鹽可按照如下方法制得
a)將56.2g(0.2mol)4-苯甲酰氨基-1-(3-氯-丙基)-哌啶、19.8g(0.19mol)二乙醇胺、16.6g(0.12mol)碳酸鉀和500ml正丙醇的混合物加熱回流32小時(shí)。過(guò)濾，將濾液蒸發(fā)濃縮并進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/甲醇9∶1洗脫得到32.2g(48％理論產(chǎn)量)無(wú)定形固體狀的2-{[3-(4-苯甲酰氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇。
b)將17.2g(0.05mol)上述化合物與190ml 6N鹽酸一起回流18小時(shí)。將其冷卻，用二氯甲烷洗滌并將水相蒸發(fā)濃縮。得到17.0g(96％理論產(chǎn)量)油狀的2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇鹽酸鹽。
實(shí)施例11十四烷酸-2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-2-(十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇鹽酸鹽和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率64％。
實(shí)施例12油酸-2-[(2-油酰氧基-乙基)-(2-哌啶-4-基-乙基)-氨基]-乙酯鹽酸鹽將3.1ml(9.5mmol)油酰氯加入到0.95g(3.8mmol)2-[(2-羥基-乙基)-(2-哌啶-4-基-乙基)-氨基]-乙醇鹽酸鹽的20ml二甲基甲酰胺溶液中并于50℃加熱4小時(shí)。將其蒸發(fā)濃縮并進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/甲醇9∶1洗脫得到0.4g(14％理論產(chǎn)量)油狀的標(biāo)題化合物。
用作原料的2-[(2-羥基-乙基)-(2-哌啶-4-基-乙基)-氨基]-乙醇鹽酸鹽按照如下方法制得將1.0g活化的氧化釕加入到57g(0.27mol)2-[(2-羥基-乙基)-(2-吡啶-4-基-乙基)-氨基]-乙醇(化學(xué)文摘，1960,13129)的700ml甲醇溶液中并在100℃及150巴氫氣壓力下氫化16小時(shí)。過(guò)濾，蒸發(fā)濃縮并進(jìn)行硅膠色譜。用甲醇洗脫得到47.9g(82％理論產(chǎn)量)油狀的所需化合物。
實(shí)施例13
十四烷酸-2-[(2-十四烷酰氧基-乙基)-(2-哌啶-4-基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(2-哌啶-4-基-乙基)-氨基]-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率71％。
實(shí)施例14十二烷酸-2-[(2-十二烷酰氧基-乙基)-(2-哌啶-4-基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(2-哌啶-4-基-乙基)-氨基]-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率90％。
實(shí)施例15十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[2-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]-聯(lián)吡啶基-4-基)-乙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[2-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]-聯(lián)吡啶基-4-基)-乙基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率95％。
實(shí)施例16十二烷酸-2-{(2-十二烷酰氧基-乙基)-[2-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]-聯(lián)吡啶基-4-基)-乙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[2-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]-聯(lián)吡啶基-4-基)-乙基]-氨基}-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率65％。
實(shí)施例17十四烷酸-2-[(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1,4’]-聯(lián)哌啶基4-基-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基-氨基]-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率35％。
用作原料的2-[(2-羥基-乙基)-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基-氨基]-乙醇按照如下方法制得將24g(90mmol)3c)中所描述的2-[2-羥基-乙基-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]-聯(lián)吡啶基-4-基)-氨基]-乙醇按照與實(shí)施例12中所述類(lèi)似的方法用氧化釕進(jìn)行氫化。得到17g(70％理論產(chǎn)量)油狀的所需化合物。
實(shí)施例18十二烷酸-2-[(2-十二烷酰氧基-乙基)-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基-氨基]-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率32％。
實(shí)施例19油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[2-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]-聯(lián)吡啶基-4-基)-乙基]-氨基}-乙酯鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[2-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]-聯(lián)吡啶基-4-基)-乙基]-氨基}-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率57％。
實(shí)施例20油酸-2-[(2-油酰氧基-乙基)-(1’-甲基-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(1’-甲基-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率37％。
用作原料的2-[(2-羥基-乙基)-(1’-甲基-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙醇可以按照如下方法制得a)將5.4g(20mmol)實(shí)施例17中所描述的2-[(2-羥基-乙基)-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基-氨基]-乙醇與20ml甲酸乙酯和1ml水一起回流5小時(shí)，然后蒸發(fā)濃縮。得到6.2g(定量收率)油狀的2-[(2-羥基-乙基)-(1’-甲?；?[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙醇。
b)將6.0g(20mmol)上述化合物滴加到2.9g氫化鋰鋁的150ml四氫呋喃懸浮液中并回流3小時(shí)。放置過(guò)夜后，加入乙酸乙酯和飽和鹽水，過(guò)濾并將濾液蒸發(fā)濃縮。將其進(jìn)行硅膠色譜，用乙酸乙酯/氨的甲醇溶液9∶1洗脫得到1.8g(32％理論產(chǎn)量)油狀的2-[(2-羥基-乙基)-(1’-甲基-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙醇。
實(shí)施例21十二烷酸-2-{(2-十二烷酰氧基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率37％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得a)將5.5g(29mmol)和3b)中所述的2-[(2-羥基-乙基)-(哌啶-4-基)-氨基]-乙醇、60ml甲醇和1.9ml(29mmol)丙烯腈的混合物室溫?cái)嚢?4小時(shí)，然后真空濃縮。得到6.7g(96％理論產(chǎn)量)油狀的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(2-氰基-乙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇。
b)將6.7g(28mmol)上述化合物用阮內(nèi)鎳在150ml氨的甲醇溶液中于100℃及100巴的氫氣壓力下氫化。過(guò)濾，蒸發(fā)濃縮得到6.8g(定量)油狀的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇。
實(shí)施例22十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率34％。
實(shí)施例23十二烷酸-2-{(2-十二烷酰氧基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率44％。
所用原料可以從實(shí)施例6b)的化合物類(lèi)似于實(shí)施例21a)與丙烯腈進(jìn)行反應(yīng)并隨后類(lèi)似于實(shí)施例21b)進(jìn)行氫化制得。
實(shí)施例24十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率38％。
實(shí)施例25十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[3-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[3-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率29％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[3-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得a)將46g(0.4mol)4-氯吡啶和123.5g(0.86mol)4-哌啶酮乙二醇縮酮的溶液在400ml對(duì)二甲苯中回流48小時(shí)。冷卻，過(guò)濾，將濾液蒸發(fā)濃縮并進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/氨的甲醇溶液9∶1洗脫得到79.7g(90％理論產(chǎn)量)8-吡啶-4-基-1,4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸烷，熔點(diǎn)65℃。
b)將79.7g上述縮酮的2升四氫呋喃溶液與1000ml 6N鹽酸混合并室溫?cái)嚢?小時(shí)。將其蒸發(fā)濃縮，用半濃的氨水調(diào)至堿性并用二氯甲烷萃取。將萃取液蒸發(fā)濃縮后得到64.2g(定量)2,3,4,5-四氫-[1,4’]-聯(lián)吡啶-4-酮，熔點(diǎn)102℃。
c)將15g(85mmol)上述酮、13.8g(85mmol)2-[(3-氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇(美國(guó)化學(xué)會(huì)志，66，728(1944))、100mg 4-甲苯磺酸和200ml甲苯的混合物在分水器上加熱3小時(shí)，然后蒸發(fā)濃縮。將殘余物加入200ml甲醇中，加入500mg氧化鉑并將其在1巴氫氣壓力下氫化10小時(shí)。過(guò)濾并蒸發(fā)濃縮，然后進(jìn)行硅胺色譜，用乙酸乙酯/甲醇1∶1洗脫得到22.4g油狀的2-{(2-羥基-乙基)-[3-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙醇。
實(shí)施例26十二烷酸-2-{(2-十二烷酰氧基-乙基)-[3-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[3-(3,4,5,6-四氫-2H-[1,4’]聯(lián)吡啶基-4-基氨基)-丙基]-氨基}-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率34％。
實(shí)施例27油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1’-(3-二甲氨基-丙基)-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1’-(3-二甲氨基-丙基)-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基]-氨基}-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率23％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1’-(3-二甲氨基-丙基)-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得將4.05g(15mmol)實(shí)施例17所述的2-[(2-羥基-乙基)-[1,4’]-聯(lián)哌啶基-4-基-氨基]-乙醇、2.0g碳酸鉀、2.2g 3-二甲氨基丙基氯和25ml正丙醇的混合物回流5小時(shí)，冷卻，過(guò)濾并將濾液蒸發(fā)濃縮。將其進(jìn)行硅膠色譜，用乙酸乙酯/氨的甲醇溶液1∶1洗脫得到2.0g(37％理論產(chǎn)量)油狀的所需化合物。
實(shí)施例28油酸-2-{[3-(4-二甲氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-油酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-{[3-(4-二甲氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率65％。
用作原料的2-{[3-(4-二甲氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得a)按照與實(shí)施例12所述相似的方法，通過(guò)用氧化釕進(jìn)行氫化從4-二甲氨基-吡啶制得油狀的4-二甲氨基-哌啶，收率75％。
b)將15.6g(0.15mol)二乙醇胺、30.9g(0.3mol)1-溴-3-氯-丙烷、300ml四氫呋喃和12.6g碳酸鉀的混合物回流5小時(shí)，過(guò)濾，蒸發(fā)濃縮并進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/甲醇9∶1洗脫得到16.7g(62％理論產(chǎn)量)油狀的N-(3-氯-丙基)-二乙醇胺。
c)將1.92g(15mmol)哌啶a)、2.72g(15mmol)鹵化物b)、1.2g碳酸鉀和50ml正丙醇的混合物回流6小時(shí)，過(guò)濾，蒸發(fā)濃縮并進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/氨的甲醇溶液1∶1洗脫得到2.7g(66％理論產(chǎn)量)油狀的2-{[3-(4-二甲氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇。
實(shí)施例29油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率24％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得將5.84g(30mmol)實(shí)施例3b)中所述的2-[(2-羥基-乙基)-(吡啶-4-基)-氨基]-乙醇、4.0g(33mmol)3-二甲氨基丙基氯、2.5g碳酸鉀和20ml正丙醇的混合物回流5小時(shí)，過(guò)濾，蒸發(fā)濃縮并進(jìn)行硅膠色譜。用乙酸乙酯/氨的甲醇溶液1∶1洗脫得到4.4g(54％理論產(chǎn)量)油狀的所需化合物。
實(shí)施例30油酸-2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-油酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯將4.5g(4mmol)實(shí)施例10所述的2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇鹽酸鹽的100ml二氯甲烷懸浮液與3.5g N-乙基-二異丙基胺和0.87g(4mmol)二碳酸二叔丁酯混合，將其回流18小時(shí)，滴加2.4g(8mmol)油酰氯的40ml二氯甲烷溶液，將其加熱回流18小時(shí)，與15ml氯化氫乙醚溶液混合并室溫?cái)嚢?小時(shí)。將其蒸發(fā)濃縮，用N氫氧化鈉溶液調(diào)至pH9，用二氯甲烷和甲醇萃取，干燥并蒸發(fā)濃縮。經(jīng)硅膠色譜(洗脫劑∶乙酸乙酯/甲醇1∶1)分離得到1.1g(36％理論產(chǎn)量)油狀的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例31油酸-2-{[3-(4-氨甲基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-油酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例30所述相似的方式從2-{[3-(4-氨基-甲基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率28％。
用作原料的2-{[3-(4-氨基甲基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇可以按照與28c中所述化合物類(lèi)似的方法從4-氨甲基-哌啶制得。
實(shí)施例32油酸-2-[(2-油酰氧基-乙基)-(1’-乙基-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-羥基-乙基)-(1’-乙基-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率22％。
用作原料的2-[(2-羥基-乙基)-(1’-乙基-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙醇可以按照如下方法制得a)將5.4g(20mmol)實(shí)施例17中所述的2-[(2-羥基-乙基)-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基-氨基]-乙醇在20ml二甲基甲酰胺和60ml二氯甲烷中與1.6ml乙酰氯和1.7g碳酸氫鈉室溫?cái)嚢?小時(shí)。過(guò)濾，干燥并蒸發(fā)濃縮。得到6.4g(定量)油狀的2-[(2-羥基-乙基)-(1’-乙酰基-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙醇。
b)將5.6g(18mmol)上述化合物類(lèi)似于實(shí)施例20b)進(jìn)行還原。得到2.1g(39％理論產(chǎn)量)油狀的2-[(2-羥基-乙基)-(1’-乙基-[1,4’]聯(lián)哌啶基-4-基)-氨基]-乙醇。
實(shí)施例33油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例30所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇(實(shí)施例21b)和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率25％。
實(shí)施例34十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率31％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得按照與實(shí)施例27所述相似的方法，將實(shí)施例6b)中所述的化合物用3-二甲氨基-丙基氯烷基化制得油狀的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇，收率29％。
實(shí)施例35油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率26％。
實(shí)施例36十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-2-[[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率44％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇可以按照與實(shí)施例21a)和21b)中所述相似的方法從丙烯腈和實(shí)施例12的前體制得，收率47％。
實(shí)施例37十二烷酸-2-{(2-十二烷酰氧基-乙基)-2-[[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(3-氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率61％。
實(shí)施例38十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-2-[[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率50％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇可以按照與實(shí)施例27的前體相似的方法從實(shí)施例12的前體和3-二甲氨基-丙基氯制得，收率66％。
實(shí)施例39油酸-2-{(2-油酰氧基-乙基)-2-[[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率41％。
實(shí)施例40十四烷酸-2-{[3-(4-(2-氨基-乙基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[3-(4-(2-氨基-乙基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率32％。
用作原料的2-{[3-(4-(2-氨基-乙基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得a)按照與實(shí)施例12所述相似的方法將4-(2-氨基-乙基)-吡啶(美國(guó)化學(xué)會(huì)志，78,4129(1956))氫化得到4-(2-氨基-乙基)-哌啶，收率68％。
b)將9.0g(70mmol)上述化合物與6.4g(35mmol)實(shí)施例28b)的化合物一起于150℃加熱1小時(shí)。冷卻，加入到15ml 2N氫氧化鈉溶液中并10N氫氧化鈉溶液調(diào)至強(qiáng)堿性。用二氯甲烷萃取，干燥，將萃取液蒸發(fā)濃縮，用硅膠進(jìn)行色譜分離。用乙酸乙酯/甲醇3∶1洗脫得到6.0g(63％理論產(chǎn)量)2-{[3-(4-(2-氨基-乙基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇。
實(shí)施例41十二烷酸-2-{[3-(4-(2-氨基-乙基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[3-(4-(2-氨基-乙基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率35％。
實(shí)施例42十二烷酸-2-{[3-(4-(3-氨基-丙基氨基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[3-(4-(3-氨基-丙基氨基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率18％。
用作原料的2-{[3-(4-(3-氨基-丙基氨基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得將實(shí)施例10所述的2-{[3-(4-氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇類(lèi)似于實(shí)施例21a)與丙烯腈進(jìn)行反應(yīng)并隨后類(lèi)似于實(shí)施例21b)進(jìn)行氫化制得油狀的所需化合物。
實(shí)施例43十四烷酸-2-{[3-(4-(3-氨基-丙基氨基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[3-(4-(3-氨基-丙基氨基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率12％。
實(shí)施例444-<2-{[二-(2-十四烷酰氧基-乙基)]-氨基}-乙基>-哌啶-1-甲酰脒將1.92g(3mmol)實(shí)施例13的化合物、0.25g氨基氰和5ml正丁醇的混合物于120℃加熱2小時(shí)，冷卻，將殘余物加入到二氯甲烷中，用少量水洗滌，干燥并蒸發(fā)濃縮。在硅膠上進(jìn)行色譜分離，用乙酸乙酯/甲醇1∶1洗脫得到0.96g(47％理論產(chǎn)量)蠟狀的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例45N-[3-(4-<2-[二-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙基>-哌啶-1-基)-丙基]-胍按照與實(shí)施例44所述相似的方式從實(shí)施例36的化合物和氨基氰制得油狀的標(biāo)題化合物，收率64％。
實(shí)施例46油酸-2-[(2-乙氨基-乙基)-(2-油酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(2-乙氨基-乙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率36％。
用作原料的2-[(2-乙氨基-乙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇可以按照如下方法制得將11.0g(58mmol)N-{2-[二-(2-羥基-乙基)-氨基]乙基}-乙酰胺(藥物化學(xué)雜志，36,1839(1993))類(lèi)似于實(shí)施例20b)進(jìn)行還原。分離得到8.3g(81％理論產(chǎn)量)油狀的所需化合物。
實(shí)施例47油酸-2-[(2-二乙氨基-乙基)-(2-油酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯鹽酸鹽按照與實(shí)施例12所述相似的方式從2-[(2-二乙氨基-乙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率44％。
實(shí)施例48油酸-2-[(2-氨基-乙基)-(2-油酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯鹽酸鹽按照與實(shí)施例12所述相似的方式從2-[(2-氨基-乙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇(美國(guó)化學(xué)會(huì)志，81,3984(1959))和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率25％。
實(shí)施例49油酸-2-{[3-(3-氨基-丙基氨基)-丙基]-(2-油酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯鹽酸鹽按照與實(shí)施例12所述相似的方式從2-{[3-(3-氨基-丙基氨基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率29％。
用作原料的2-{[3-(3-氨基-丙基氨基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇可以通過(guò)將2-[(3-氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇(美國(guó)化學(xué)會(huì)志，66,728(1944))類(lèi)似于實(shí)施例21a)與丙烯腈反應(yīng)并隨后類(lèi)似于實(shí)施例21b)進(jìn)行氫化制得。b.p.0.06176-177℃。
實(shí)施例50油酸-2-[(3-二甲氨基-丙基)-(2-油酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯鹽酸鹽按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(3-二甲氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率65％。
用作原料的2-[(3-二甲氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇可以按照與實(shí)施例27類(lèi)似的方法從二乙醇胺和3-二甲氨基-丙基氯制得。b.p.1.5135-136℃。
實(shí)施例51油酸-2-[(3-二乙氨基-丙基)-(2-油酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(3-二乙氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇(化學(xué)藥物通訊，9,313(1961))和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率65％。
實(shí)施例52十四烷酸-2-[(3-二甲氨基-丙基)-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(3-二甲氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率78％。
實(shí)施例53十二烷酸-2-[(3-二甲氨基-丙基)-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(3-二甲氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率79％。
實(shí)施例54十四烷酸-2-[(3-二乙氨基-丙基)-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(3-二乙氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率50％。
實(shí)施例55十二烷酸-2-[(3-二乙氨基-丙基)-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[(3-二乙氨基-丙基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和十二烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率60％。
實(shí)施例56油酸-2-[{3-[(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-油酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[{3-[(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率63％。
用作原料的2-[{3-[(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇可以按照與實(shí)施例28c)類(lèi)似的方法，通過(guò)將N,N,N’-三甲基-丙烷-1,3二胺(化學(xué)會(huì)志(C)1966,527)用N-(3-氯-丙基)-二乙醇胺烷基化制得。
實(shí)施例57油酸-2-[{3-[(3-二乙氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-油酰氧基-乙基)-氨基]-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[{3-[(3-二乙氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇和油酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率59％。
用作原料的2-[{3-[(3-二乙氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇可以按照與實(shí)施例56類(lèi)似的方法，通過(guò)將N,N-二乙基-N’-甲基-丙烷-1,3-二胺(Monatsh.Chem.112,825(1981))用N-(3-氯-丙基)-二乙醇胺烷基化制得。
實(shí)施例58十二烷酸-2-{[4-(3-氨基-丙基氨基)-丁基]-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯鹽酸鹽按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[4-(3-氨基-丙基氨基)-丁基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十二烷酰氯制得蠟狀的標(biāo)題化合物，收率31％。
用作原料的2-{[4-(3-氨基-丙基氨基)-丁基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇可以通過(guò)將2-[(4-氨基-丁基)-(2-羥基-乙基)-氨基]-乙醇(美國(guó)化學(xué)會(huì)志，81,3984(1959))類(lèi)似于實(shí)施例21a)與丙烯腈反應(yīng)并隨后類(lèi)似于實(shí)施例21b)進(jìn)行氫化制得。
實(shí)施例59十二烷酸-2-{[3-(3-氨基-丙基氨基)-丙基]-(2-十二烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯鹽酸鹽按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[3-(3-氨基-丙基氨基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇(參見(jiàn)實(shí)施例49)和十二烷酰氯制得標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)245-246℃，收率49％。
實(shí)施例60十四烷酸-2-{[4-(3-氨基-丙基氨基)-丁基]-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[4-(3-氨基-丙基氨基)-丁基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率27％。
實(shí)施例61十四烷酸-2-[{3-[(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[{3-[(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀標(biāo)題化合物，收率35％。
實(shí)施例62十四烷酸-2-[{3-[(3-二乙氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例1所述相似的方式從2-[{3-[(3-二乙氨基-丙基)-甲基-氨基]-丙基}-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀標(biāo)題化合物，收率61％。
實(shí)施例63N-<3-{4-[二-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基]-哌啶-1-基}-丙基>-胍按照與實(shí)施例44所述相似的方式從實(shí)施例22的化合物和氨基氰制得油狀的標(biāo)題化合物，收率91％。
實(shí)施例64N-[3-(4-<[二-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基]-甲基>-哌啶-1-基)-丙基]-胍按照與實(shí)施例44所述相似的方式從實(shí)施例24的化合物和氨基氰制得油狀的標(biāo)題化合物，收率82％。
實(shí)施例65N-[2-(1-<3-[二-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基]-丙基>-哌啶-4-基)-乙基]-胍按照與實(shí)施例44所述相似的方式從實(shí)施例40的化合物和氨基氰制得油狀的標(biāo)題化合物，收率94％。
實(shí)施例66十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率38％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得a)將8.5g(45mmol)實(shí)施例3b)所述的2-[(2-羥基-乙基)-(哌啶-4-基)-氨基]-乙醇、150ml二甲基甲酰胺、3.4g(45mmol)氯乙腈、14.5g碳酸鉀和100mg碘化鉀的混合物于60℃下攪拌2小時(shí)。過(guò)濾并將濾液真空蒸發(fā)濃縮。得到10.5g(定量)油狀的2-{(2-羥基-乙基)-[1-氰基甲基-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇粗產(chǎn)物。
b)將4.1g(18mmol)上述化合物在175ml氨的甲醇溶液中用阮內(nèi)鎳于35℃及100巴氫氣壓力下氫化。過(guò)濾，蒸發(fā)濃縮，經(jīng)硅膠色譜后得到2.3g(55％理論產(chǎn)量)油狀的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇。
實(shí)施例67十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率29％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得a)將實(shí)施例6b)中所述的中間體產(chǎn)物按照與實(shí)施例66a)所述相似的方法與氯乙腈反應(yīng)。
b)將以上得到的粗產(chǎn)物按照實(shí)施例66b)進(jìn)行氫化。以47％理論產(chǎn)量的收率得到所需的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇。
實(shí)施例68十四烷酸-2-{[3-(4-(氨甲基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[3-(4-(氨甲基)-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率27％。
用作原料的2-{[3-(4-氨甲基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇可以類(lèi)似于實(shí)施例28c中所述的化合物從4-氨甲基-哌啶制得。
實(shí)施例69十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基乙基)[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率25％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-二甲氨基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇如實(shí)施例29所述。
實(shí)施例70十四烷酸-2-{[3-(4-二甲氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-十四烷酰氧基-乙基)-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{[3-(4-二甲氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率62％。
用作原料的2-{[3-(4-二甲氨基-哌啶-1-基)-丙基]-(2-羥基-乙基)-氨基}-乙醇如實(shí)施例28所述。
實(shí)施例71十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率22％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得a)將18.8g(100mmol)實(shí)施例3b)所述的2-[(2-羥基-乙基)-(哌啶-4-基)-氨基]-乙醇、100ml二甲基甲酰胺、11ml(110mmol)4-溴-丁腈、18.9ml N-乙基二異丙基胺和100mg4-二甲基氨基-吡啶的混合物于90℃下攪拌8小時(shí)，然后真空蒸發(fā)濃縮。將其加入到二氯甲烷中，過(guò)濾并將濾液濃縮。得到15.0g(59％理論產(chǎn)量)油狀的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(3-氰基-丙基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇。
b)將15.0g(59mmol)上述化合物在300ml氨的甲醇溶液中用阮內(nèi)鎳于35℃及100巴氫氣壓力下氫化。過(guò)濾，蒸發(fā)濃縮，得到10.9g(71％理論產(chǎn)量)油狀的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇。
實(shí)施例72十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率23％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得0℃下，將4.7ml甲酸和5.6ml飽和福爾馬林溶液滴加到6.5g(25mmol)2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基}-乙醇(實(shí)施例71b)中，將其加熱到95-100℃并繼續(xù)攪拌9小時(shí)。冷卻，與6.5ml濃鹽酸混合，回流3小時(shí)，用10N氫氧化鈉溶液調(diào)至強(qiáng)堿性并用二氯甲烷萃取。干燥后將萃取液蒸發(fā)濃縮，得到6.0g(84％理論產(chǎn)量)油狀的所需化合物。
實(shí)施例73十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率33％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得將2-[(2-羥基-乙基)-(哌啶-4-基-甲基)-氨基]-乙醇(實(shí)施例6b)和4-溴-丁腈類(lèi)似于實(shí)施例71a)進(jìn)行反應(yīng)并隨后類(lèi)似于實(shí)施例71b)進(jìn)行氫化制得油狀的所需化合物。
實(shí)施例74十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率43％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇可以按照實(shí)施例72所述的方法，通過(guò)將實(shí)施例73中所述的2-{(2-羥基-乙基)-[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基-甲基]-氨基}-乙醇與甲酸和福爾馬林溶液反應(yīng)制得(收率69％理論產(chǎn)量)。
實(shí)施例75十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基-乙基)-2-[[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率17％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇可以按照如下方法制得將實(shí)施例12所述的2-[(2-羥基-乙基)-(2-哌啶-4-基-乙基)-氨基]-乙醇和4-溴-丁腈類(lèi)似于實(shí)施例71a)進(jìn)行反應(yīng)并隨后類(lèi)似于實(shí)施例71b)進(jìn)行氫化制得油狀的所需化合物。
實(shí)施例76十四烷酸-2-{(2-十四烷酰氧基乙基)-2-[[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙酯按照與實(shí)施例10所述相似的方式從2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇和十四烷酰氯制得油狀的標(biāo)題化合物，收率33％。
用作原料的2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(4-二甲氨基-丁基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇可以按照實(shí)施例72所述的方法，通過(guò)將實(shí)施例75所述的2-{(2-羥基-乙基)-2-[[1-(4-氨基-丁基)-哌啶-4-基]-乙基]-氨基}-乙醇與甲酸和福爾馬林溶液反應(yīng)制得(收率72％理論產(chǎn)量)。
實(shí)施例77藥理學(xué)試驗(yàn)1．試驗(yàn)原理DOTAP或本發(fā)明化合物的試驗(yàn)包括試驗(yàn)細(xì)胞的轉(zhuǎn)雜、通過(guò)BCA方法(Pierce)測(cè)定蛋白質(zhì)并進(jìn)行CAT Elisa，現(xiàn)在以DOTAP(Boehringer Mannheim)為例進(jìn)行描述。超聲處理后，陽(yáng)離子類(lèi)脂DOTAP在水溶液中形成單層小泡(脂質(zhì)體)，該單層小泡自發(fā)地與DNA(pCMV-CAT)形成穩(wěn)定的復(fù)合物。運(yùn)些復(fù)合物粘著于細(xì)胞表面，與細(xì)胞膜融合并將pCMV-CAT釋放到胞漿內(nèi)。在細(xì)胞溶解產(chǎn)物檢測(cè)短暫表達(dá)的CAT。
1.1試驗(yàn)細(xì)胞HeLa，來(lái)自子宮頸的人癌癥上皮細(xì)胞系，ATCCCCL2RPMI1640，來(lái)自鼻中隔的人癌癥上皮細(xì)胞系，ATCCCCL30CALU1，來(lái)自肺的人癌癥上皮細(xì)胞系，ECACC93120818或其它適宜的試驗(yàn)細(xì)胞系1.2試驗(yàn)培養(yǎng)基用于各細(xì)胞系的試驗(yàn)培養(yǎng)基的組成與各培養(yǎng)基的組成相對(duì)應(yīng)，僅是FCS含量減少了50％(FCS僅有5％而不是10％)。
2．測(cè)定方法2.1培養(yǎng)試驗(yàn)所用的細(xì)胞-將2.0ml細(xì)胞懸浮液(1.5×105細(xì)胞/ml)置于6孔平板的各孔中-在37℃、5％CO2下培養(yǎng)24小時(shí)。
2.2轉(zhuǎn)染混合物將DOTAP/DNA復(fù)合物在無(wú)菌的96孔園底平板中混合。
例如首先加入60μlHBS(Hank’s緩沖鹽水)緩沖液，然后加入20μlDOTAP。將DNA用HBS以1∶20稀釋。然后向轉(zhuǎn)染混合物中加入40μl=20μgDNA并充分混合。將混合物室溫放置15分鐘。
轉(zhuǎn)染的方法-從所有的孔中吸出TM(轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基)-加入2mlTM/孔-迅速加入轉(zhuǎn)染混合物-通過(guò)輕柔的漩渦振蕩使各孔中所含的物質(zhì)充分混合-將細(xì)胞在37℃、5％CO2下培養(yǎng)6小時(shí)-吸出DOTAP/DNA混合物-加入2mlTM/孔將細(xì)胞在37℃、5％CO2下培養(yǎng)40-44小時(shí)2.3細(xì)胞的溶解
-吸出TM并將細(xì)胞用2ml冰冷的PBS/孔洗滌兩次，全部吸出-向洗滌過(guò)的細(xì)胞中加入0.5ml溶解緩沖液(來(lái)自CAT-Elisa試劑盒，Boehringer Mannheim Co.)并將其室溫放置30分鐘-30分鐘后將溶解產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到微量離心管中并用Biofuge以13000rpm離心10分鐘-從上清液中取出等分試樣根據(jù)BCA方法進(jìn)行蛋白質(zhì)分析。將剩余的物質(zhì)用液氮速凍并保存在-80℃下直至進(jìn)行CAT-Elisa。
2.4用BCA(二金雞寧酸(bicinochronic acid))法對(duì)溶解產(chǎn)物進(jìn)行蛋白質(zhì)測(cè)定-將試劑盒(Boehringer Mannheim Co.)中所含的BSA(牛血清白蛋白)溶液通過(guò)用溶解緩沖液稀釋制備蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物-將10μl蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物、空白(溶解緩沖液)和未知樣品用移液管轉(zhuǎn)移到微量滴定板中。向各孔中加入200μl工作溶液并將該平板在振蕩器上振蕩30分鐘。在37℃下保溫30分鐘后，將其在ELISA閱讀器中于550nm下進(jìn)行測(cè)定。用求值程序測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度。
2.5 CAT-Elisa原理CAT(氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶)-Elisa可定量測(cè)定用含有CAT作為受體基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)雜后真核細(xì)胞內(nèi)CAT的表達(dá)。CAT-Elisa是一種夾心酶免疫分析?？?CAT抗體吸附結(jié)合在模塊的各孔內(nèi)。在第一步中，來(lái)自細(xì)胞提取物的CAT特異性地結(jié)合在帶有涂層的模塊上。第二步中，固定的CAT與用地高辛配基標(biāo)記抗CAT抗體(抗-CAT-DIG)結(jié)合。在第三步中，通過(guò)過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗地高辛配基的抗體(抗-DIG-POD)檢測(cè)抗-CAT-DIG并在隨后的底物反應(yīng)中目測(cè)檢驗(yàn)。
方法根據(jù)試劑盒中所含的操作指導(dǎo)進(jìn)行CAT-Elisa的操作步驟。
將微量滴定板在405nm下測(cè)定，Elisa閱讀器的參考波長(zhǎng)為492nm。
權(quán)利要求
1．含有至少一種式Ⅰ化合物及其生理上可耐受鹽的藥物制劑，
其中A 表示氫原子、基團(tuán)NR1R2、基團(tuán)NR1(CH2)pNR3R4、基團(tuán)(C=NH)NH2或吡啶基，B和D相同或不同，分別表示一個(gè)鍵、C1-C6亞烷基或基團(tuán)NR5-C2-C6亞烷基，C 表示哌啶二基或哌嗪二基，W和X相同或不同，分別表示一個(gè)鍵或羰基，Y和Z相同或不同，分別表示含有7-24個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴基，R1-R5相同或不同，分別表示氫或C1-C6烷基，m 是整數(shù)0、1或2，其中，如果m=2，則兩個(gè)基團(tuán)C可以相同或不同，n和o相同或不同，分別表示整數(shù)2、3或4，p 是2-6的整數(shù)，條件是不包括肼衍生物，并且如果A表示氫或基團(tuán)(C=NH)NH2而B(niǎo)和D彼此相同或不同地表示一個(gè)鍵或亞烷基，則m不能是0。
2．式Ⅰ化合物及其生理上可耐受的鹽，
其中A 表示氫原子、基團(tuán)NR1R2、基團(tuán)NR1(CH2)pNR3R4、基團(tuán)(C=NH)NH2或吡啶基，B和D相同或不同，分別表示一個(gè)鍵、C1-C6亞烷基或基團(tuán)NR5-C2-C6亞烷基，C 表示哌啶二基或哌嗪二基，W和X相同或不同，分別表示一個(gè)鍵或羰基，Y和Z相同或不同，分別表示含有7-24個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴基，R1-R5相同或不同，分別表示氫或C1-C6烷基，m 是整數(shù)0、1或2，其中，如果m=2，則兩個(gè)基團(tuán)C可以相同或不同，n和o相同或不同，分別表示整數(shù)2、3或4，p 是2-6的整數(shù)，條件是不包括肼衍生物，并且如果A表示氫或基團(tuán)(C=NH)NH2而B(niǎo)和D彼此相同或不同地表示一個(gè)鍵或亞烷基，則m不能是0，并且不包括如下化合物十八酸-[(3-二乙氨基-丙基)亞氨基]-二(甲基-2,1-亞乙基)-酯鹽酸鹽，十八酸-[(3-二甲氨基-丙基)亞氨基]二-3,1-亞丙基酯-二鹽酸鹽，十八酸-[(3-二甲氨基-丙基)亞氨基]二-3,1-亞丙基酯，十八酸-[(3-二甲氨基-丙基)亞氨基]二-2,1-亞乙基酯-鹽酸鹽，二十二酸-2-[(3-二甲氨基-丙基)-[2-[(1-氧代十二烷基)氧基]乙基]氨基]乙酯，十六酸-[[2-(乙基甲基氨基)乙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯，十八酸-[[3(二甲氨基)丙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯，十八酸-[[3-(二甲氨基)丙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯-二鹽酸鹽，十八酸-[[3-(二甲氨基)丙基]亞氨基]二-2,1-亞乙基酯，N,N-二[3-(十二烷氧基)丙基]-1,2-乙二胺，十八酸-[[2-[(2-氨基乙基)氨基]乙基]亞氨基]-2,1-亞乙基酯，硬脂酸-亞氨基二-(亞乙基亞氨基亞乙基)-酯-單乙酸鹽。
3．權(quán)利要求1-2中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中W和X分別表示CO。
4．權(quán)利要求1-3中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Y表示C13H27或C17H33。
5．權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Z表示C13H27或C17H33。
6．式Ⅱ化合物，
其中A、B、C、D、n和o具有權(quán)利要求1中所述的含義，條件是不包括肼衍生物，并且如果A表示氫或基團(tuán)(C=NH)NH2而B(niǎo)和D彼此相同或不同地表示一個(gè)鍵或亞烷基，則m不能是0。
7．權(quán)利要求1-6中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中A表示NH2或N(CH3)2。
8．權(quán)利要求1-7中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中B和D相同或不同，分別表示一個(gè)鍵、C1-C3亞烷基，或者如果m=0時(shí)，表示N(CH3)C3-C4亞烷基。
9．權(quán)利要求1-8中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中C表示哌啶二基。
10．權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中m表示0或1。
11．權(quán)利要求1-10中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中n和o是2。
12．權(quán)利要求1、3-5、7-11中任意一項(xiàng)所述的藥物制劑，其中還含有核酸。
13．權(quán)利要求1、3-5、7-11中任意一項(xiàng)所述的藥物制劑，其中還含有治療劑。
14．式Ⅰ化合物用于生產(chǎn)含有治療劑的基因載體或轉(zhuǎn)染載體的用途，
其中A、B、C、D、m、n和o具有權(quán)利要求1-11中任意一項(xiàng)中所述的含義，條件是不包括肼衍生物，并且如果A表示氫或基團(tuán)(C=NH)NH2而B(niǎo)和D彼此相同或不同地表示一個(gè)鍵或亞烷基，則m不能是0。
15．權(quán)利要求1-12中任意一項(xiàng)所述的化合物在生產(chǎn)用于基因治療的藥物組合物中的用途。
16．權(quán)利要求1-13中任意一項(xiàng)所述的化合物用于體外轉(zhuǎn)染的用途。
17．權(quán)利要求1-13中任意一項(xiàng)所述的化合物用于生產(chǎn)體內(nèi)轉(zhuǎn)染劑的用途。
18．權(quán)利要求1-13中任意一項(xiàng)所述的化合物在生產(chǎn)用于癌癥治療、抗病毒治療、感染治療和治療由于調(diào)節(jié)障礙所引起之疾病的聯(lián)合用藥的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的氨基醇衍生物、其生產(chǎn)方法以及含有這些化合物的藥物制劑和試劑。本發(fā)明的主題是具有通式Ⅰ的藥物及其生理上可耐受的鹽,其中A表示氫原子、基團(tuán)NR
文檔編號(hào)C07C219/06GK1237161SQ97199651
公開(kāi)日1999年12月1日 申請(qǐng)日期1997年9月10日 優(yōu)先權(quán)日1996年9月12日
發(fā)明者W·G·弗里貝, N·摩迪斯, U·邁克爾斯, B·克尼普 申請(qǐng)人:羅赫診斷器材股份有限公司