專利名稱：一種木通酸的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種采用高速逆流色譜法從木通中制備高純度木通酸的方法，可廣泛應(yīng)用于生物、制藥、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域中活性物質(zhì)的分離純化。
背景技術(shù)：
木通為木通科木通屬植物木通(俗稱五葉木通)[Akebia quinata (Thunb.)Decne.]、三葉木通[Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.]或白木通[Akebiatrifoliata (Thunb. ) Koidz. var. australis (Diels) Rehd.]的干燥藤莖。木通味苦，性微寒，具有清心火，利小便，通經(jīng)下乳之功效。主治胸中煩熱、喉痹咽痛，尿赤，五淋，水腫，周身攣痛，經(jīng)閉乳少等癥?，F(xiàn)代藥理研究表明，木通具有利尿、抗菌和抗腫瘤活性。木通屬植物化學(xué)成分的研究始于20世紀(jì)20年代初，70年代取得顯著進(jìn)展，主要含 有三萜和三萜皂苷、多糖、氨基酸、留醇和微量元素等。研究報道較多的集中在三萜及三萜皂苷類化合物。木通酸=C3tlH32O4，是三萜類成分，其結(jié)構(gòu)為3 α，24_二羥基-30-去甲齊墩果烷-12，20 (29) - 二烯-28-酸。經(jīng)查閱文獻(xiàn)表明，木通酸僅在木通科木通中存在，為木通的專屬性成分?，F(xiàn)代藥理研究表明，文獻(xiàn)“木通藥理活性成分及質(zhì)量控制的研究”表明通過Writhingtest, hot plate test, tail_f licks test這三個實驗,證明木通的醇提正丁醇萃取部位具有明顯的鎮(zhèn)痛作用?，F(xiàn)有文獻(xiàn)中對木通酸的研究報道較少，尚未見對其的提取研究報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種環(huán)保低污染，產(chǎn)品純度高的木通酸的制備方法。該方法制得的木通酸可作對照品或進(jìn)行藥理研究。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的方法是將木通藥材粉碎，加入乙醇液超聲提取2 4次，提取液初步純化后得浸膏；采用乙酸乙酯、正丁醇、水為溶劑系統(tǒng)，將浸膏室溫條件下經(jīng)高速逆流色譜儀一次分離得木通酸。所述的初步純化步驟可采用正丁醇萃取或采用大孔樹脂通過乙醇液梯度洗脫分離制備木通酸粗品。所述的乙酸乙酯、正丁醇、水溶劑系統(tǒng)采用的體積比為I 3 4 8 3 6。所述的高速逆流色譜儀分離操作為將上述溶劑系統(tǒng)按體積比置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層，待平衡后，將上、下相分開，取上相作為固定相，下相作為流動相，將木通酸粗品溶于流動相中，采用半制備型高速逆流色譜儀分離，UV-紫外檢測；進(jìn)樣前，先用固定相泵滿整個柱子，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速為750 lOOOrpm，以I. 5 3ml/min流速泵入流動相，待系統(tǒng)穩(wěn)定建立動態(tài)平衡后，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，根據(jù)檢測器紫外圖譜，收集目標(biāo)成分，蒸干得木通酸產(chǎn)品。采用本方法制備的木通酸的純度可達(dá)95%以上，能直接進(jìn)大量粗提樣品，分離效果好，純度高；未使用固體填料，沒有不可逆吸附，樣品無損失。
具體實施例方式下面將結(jié)合具體實施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I :取木通藥材1kg，粉碎，加入乙醇液超聲提取4次，提取液濃縮至密度I. 2，加水飽和正丁醇萃取2次，收集正丁醇層濃縮得木通酸粗品；將乙酸乙酯、正丁醇、水按(1:4: 3)體積比量取，置于分液漏斗中，搖勻后靜置分相，將上、下相分開，取上相作為固定相，下相作為流動相，將木通酸粗品溶于下相中，先用固定相泵滿整個柱子，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速為750rpm，再以I. 5ml/min流速泵入流動相，待系統(tǒng)穩(wěn)定建立動態(tài)平衡后，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，根據(jù)檢測器紫外圖譜，收集目標(biāo)成分，蒸干得木通酸產(chǎn)品，含量96. 7 %。··
實施例2:取木通藥材1kg，粉碎，加入乙醇液超聲提取3次，提取液濃縮至密度I. 1，過大孔樹脂吸附，分別用2BV水一3BV40%乙醇一3BV65%乙醇洗脫，收集醇洗液，濃縮干燥得木通酸粗品；將乙酸乙酯、正丁醇、水按(2:7: 5)體積比量取，置于分液漏斗中，搖勻后靜置分相，將上、下相分開，取上相作為固定相，下相作為流動相，將木通酸粗品溶于下相中，先用固定相泵滿整個柱子，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速為850rpm，再以3ml/min流速泵入流動相，待系統(tǒng)穩(wěn)定建立動態(tài)平衡后，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，根據(jù)檢測器紫外圖譜，收集目標(biāo)成分，蒸干得木通酸產(chǎn)品，含量95. 1%。實施例3:取木通藥材10kg，粉碎，加入乙醇液超聲提取3次，提取液濃縮至密度I. 01，過大孔樹脂吸附，分別用2BV水一3BV30%乙醇一3BV55%乙醇洗脫，收集醇洗液，濃縮干燥得木通酸粗品；將乙酸乙酯、正丁醇、水按(3:8: 6)體積比量取，置于分液漏斗中，搖勻后靜置分相，將上、下相分開，取上相作為固定相，下相作為流動相，將木通酸粗品溶于下相中，先用固定相泵滿整個柱子，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速為950rpm，再以2. 5ml/min流速泵入流動相，待系統(tǒng)穩(wěn)定建立動態(tài)平衡后，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，根據(jù)檢測器紫外圖譜，收集目標(biāo)成分，蒸干得木通酸產(chǎn)品，含量97. 1%0實施例4:取木通藥材10kg，粉碎，加入乙醇液超聲提取4次，提取液濃縮至密度I. 15，加水飽和正丁醇萃取4次，收集正丁醇層濃縮得木通酸粗品；將乙酸乙酯、正丁醇、水按(2:7: 4)體積比量取，置于分液漏斗中，搖勻后靜置分相，將上、下相分開，取上相作為固定相，下相作為流動相，將木通酸粗品溶于下相中，先用固定相泵滿整個柱子，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速為lOOOrpm，再以2ml/min流速泵入流動相，待系統(tǒng)穩(wěn)定建立動態(tài)平衡后，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，根據(jù)檢測器紫外圖譜，收集目標(biāo)成分，蒸干得木通酸產(chǎn)品，含量96. 3 %。
權(quán)利要求
1.一種木通酸的制備方法，其特征在于將木通藥材粉碎，加入乙醇液超聲提取2 4次，提取液初步純化后得浸膏；采用乙酸乙酯、正丁醇、水為溶劑系統(tǒng)，將浸膏室溫條件下用高速逆流色譜儀分離。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種木通酸的制備方法，其特征在于所述的初步純化步驟可采用正丁醇萃取或采用大孔樹脂通過乙醇液梯度洗脫分離制備木通酸粗品。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種木通酸的制備方法，其特征在于所述的乙酸乙酯、正丁醇、水溶劑系統(tǒng)采用的體積比為I 3 4 8 3 6。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種木通酸的制備方法，尤其是涉及一種采用高速逆流色譜法從木通中分離制備高純度木通酸的方法，其特征在于將木通藥材粉碎，加入乙醇液超聲提取，提取液濃縮至無醇味，再經(jīng)初步純化后得木通酸粗品；采用乙酸乙酯、正丁醇、水為溶劑系統(tǒng)，將木通酸粗品室溫條件下用高速逆流色譜儀分離。該方法未使用固體填料，沒有不可逆吸附，樣品無損失；制備過程高效、無污染；獲得產(chǎn)品含量高。
文檔編號C07J63/00GK102911242SQ201110218749
公開日2013年2月6日 申請日期2011年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月2日
發(fā)明者李法慶, 劉東鋒 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司