Virosaine A的哌嗪基和咪唑基衍生物的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及Virosaine A的哌嗪基和咪唑基衍生物的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有防治肝臟損傷的作用，具有開發(fā)防治肝臟損傷藥物的價值。
【專利說明】
Vi rosa i ne A的哌嗪基和咪唑基衍生物的組合物在防治肝臟 損傷藥物中的應用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 引起肝損傷的原因有多個：1、病毒感染：由多種肝炎病毒引起，具有傳染性強，傳 播途徑復雜，流行面廣泛，發(fā)病率高等特點。2、藥物或化學毒物:許多藥物和化學毒物都可 引起肝臟損傷，發(fā)生藥物性肝炎或中毒性肝炎。3、酗酒:酒精對肝臟的損害是很嚴重的，損 害的后果包括酒精性肝炎、酒精性脂肪肝、酒精性肝硬化，主要是由于酒精（乙醇)及其代謝 產(chǎn)物乙醛的毒性對肝細胞直接損害造成的。4、其他原因：原發(fā)和繼發(fā)的肝臟腫瘤、心功能不 全導致肝臟淤血、某些先天性肝臟疾病、靜脈高價營養(yǎng)等，都可以造成不同程度的肝損害， 這些肝損害的早期表現(xiàn)往往是ALT(轉(zhuǎn)氨酶)或膽紅素的升高，不祛除病因，肝臟的損害會進 一步加重。目前在我國由于上述原因每年發(fā)生肝損傷的人數(shù)眾多，形勢不容樂觀。急需研發(fā) 高效低毒的防治肝臟損傷藥物。
[0003] 肝臟損傷的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產(chǎn)物中尋 找化合物或先導化合物并進行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物具有 重要價值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個2012年發(fā)表（Bing-Xin Zhao et al .， 2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的化合物，我們對化合物I進行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化 合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗肝臟損傷活性進行了評 價，其具有抗肝臟損傷活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為10%和90%。
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 藥效學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗肝臟損傷作用。本發(fā)明的藥學上 可接受的鹽具有同樣的藥效。
[0009] 以下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1化合物Virosaine A的制備
[0011] 化合物Virosaine A(I)的制備方法參照Bing-Xin Zhao等人發(fā)表的文獻(Bing-Xin Zhao et al.,2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的方法 D
[0013] 實施例2Virosaine A的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(235mg，1.00mmol)溶于20mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙烷(3.76(^，20.00臟〇1)和51^的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5攝氏 度攪拌Shdh之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相溶液。然后 對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除溶 劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮=100:1. 〇，v/V)，收 集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(26lmg，78% )。
[0015] 4 MMR(500MHz，DMS0-d6)S5.91(s，lH)，4.07(s，lH)，3.81(s，2H)，3.59(s，lH)， 3.43(s，2H)，3.33(s，lH)，2.26(s，lH)，1.58(d，J=9.8Hz，3H)，1.41(s，2H).
[0016] 13C 匪R(125MHz，DMS0-d6)Sl71.81(s),106.71(s)，79.95(s)，74.33(s),69.81 (s),66.68(s),44.21(s),35.56(s),33.28(s),25.85(s),21.88(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci4Hi7BrN〇4:342.0341 ；found 342.0343. L〇〇19」 買施例3Virosaine A的
0-(呢嗪基）乙基佑生物（III)的合成
[0020] 將化合物II(17lmg，0.5mmo 1)溶于20mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(690mg， 5.0mmol)，碘化鉀（168mg，1 .Ommol)和無水哌嗪（3446mg，40mmol)，混合物加熱回流3h。反應 結(jié)束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100: l.〇，v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮 去溶劑即得到化合物III的淡棕色固體(123.2mg，71 % )。
[0021] MMR(500MHz，DMS0-d6)S5.90(s，lH)，4.04(s，lH)，3.59(s，lH)，3.50(s，2H)， 3.40(d，J=65.9Hz，lH)，2.64(s，4H)，2.54(s，2H)，2.31(s，4H)，2.22(s，lH)，1.62(s，2H)， 1.56(s，lH)，1.43(s，2H)，0.97(s，lH).
[0022] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl71.84(s)，106.72(s)，79.94(s)，74.33(s)，66.72(d， J=9.2Hz),54.45(s),54.16(s),45.25(s),44.20(s),35.56(s),25.86(s),21.87(s).
[0023] HRMS(ESI):m/z[M+H].calcd for Ci8H26N3〇4:348.1923;found:348.1927。
[0026] 實施例4Virosaine A的0_(咪唑基）乙基衍生物（IV)的合成
[0027] 將化合物II(17lmg，0.5mmo 1)溶于25mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(690mg， 5 ? Ommo 1)，碘化鉀（2 5 2mg，1 ? 5mmo 1)和咪唑（8 7 Omg，1 Ommo 1)，混合物加熱回流2h。反應結(jié)束 后將反應液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取3次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:0.3，v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮 去溶劑即得到化合物IV的淡棕色固體(144. lmg，71 % )。
[0028] XH NMR(500MHz,DMS0-d6)87.86(s,lH),7.12(s,lH),6.71(s,lH),5.99(s,lH), 4.09(s,lH),3.89(d,J=16.4Hz,2H),3.80(s,2H),3.58(s,lH),3.35(s,lH),2.31(s,lH), 1.68(s,lH),1.58(s,2H),1.44(s,2H).
[0029] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)13C 匪R(125MHz，Common 匪R Solvents)Sl71.82(s), 139.64(s),128.67(s),119.31(s),106.70(s),79.92(s),74.31(s),67.61(s),66.66(s), 44.20(s),43.75(s),35.52(s),25.85(s),21.86(s).
[0030] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for Ci7H2〇N3〇4:330.1454;found:330.1458。
[0032]實施例5組合物防治肝損傷的作用
[0033]( -）組合物對D-氨基半乳糖胺(D-galactosamine，D-GalN)誘導的小鼠急性肝損 傷的防護作用
[0034] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的10mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的90mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到lOOmg組合物， 使用時用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0035] 小鼠分5組。對照組以生理鹽水灌胃（0.3mL ? cf1)，連續(xù)7d;且于第7d還要腹腔注射 生理鹽水（〇.15mL ? log"1)，腹腔注射16h后取血，測AST及ALT活力。D-GalN組、組合物 3.Omg ? kg"1組、化合物III組和化合物IV組分別以生理鹽水、組合物、化合物III和化合物IV 灌胃（0.3mL ? d-連續(xù)7d;且于第7d還要腹腔注射D-GalN(800mg ? kg-So.lSmL ? 10g-4， 腹腔注射16h后取血，測AST及ALT活力。
[0036]表1組合物對D-GalN誘導的急性肝損傷的防護作用
[0038] 注 JpSO.Olvs對照組，幻p〈〇.〇lvs
D-GalN組
[0039] 由表1可知，組合物能有效抑制D-GalN引起的小鼠AST及ALT活性的顯著上升?；?物III和化合物IV無此作用。
[0040] (二)組合物對CC14誘導的小鼠急性肝損傷的防護作用
[0041 ] 小鼠分5組，對照組以生理鹽水灌胃（0.3mL ? cf1)，連續(xù)5d，第6d腹腔注射植物油每 只O.lmL ? 10g_ScCl4組及組合物、化合物III和化合物IV給藥組(3.0mg ? kg"1)分別以生理 鹽水及組合物、化合物III和化合物IV灌胃（0.3mL ? cf1)，連續(xù)5d，于第6d腹腔注射0.1 % CC14 O.lmL. lOg-^2411后處死動物，取血清測AST及ALT活力。
[0042]表2組合物對CC14誘導的急性肝損傷的防護作用
[0045] 注fpSO.Olvs對照組，2)p〈0.01vs CC14組
[0046] 由表2可知，組合物能抑制CC14引起的小鼠AST及ALT活性的顯著上升?；衔颕II 和化合物IV無此作用。
[0047]結(jié)論:組合物能有效保護D-GalN引起的小鼠肝損傷，組合物能有效保護CCU引起 的小鼠肝損傷，可以用來制備抗肝損傷藥物?；衔颕II和化合物IV不能有效保護D-GalN引 起的小鼠肝損傷，不能有效保護CC1 4引起的小鼠肝損傷，不可以用來制備抗肝損傷藥物。
[0048] 實施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0049] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0050] 實施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0051] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為10%和90%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分數(shù)分別為10%和90%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為:所述肝臟損傷 為化學物質(zhì)誘導所致的肝臟損傷。5. 如權(quán)利要求4所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為:所述化學物質(zhì) 為D-氨基半乳糖胺。6. 如權(quán)利要求4所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為:所述化學物質(zhì) 為四氯化碳。
【文檔編號】A61K31/439GK105853431SQ201610279434
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年4月28日
【發(fā)明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司