Virosaine A的四氫吡咯基和嗎啉基衍生物的組合物在升高白細胞的藥物中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開一種Virosaine A的四氫吡咯基和嗎啉基衍生物的組合物在升高白細胞的藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備升高白細胞藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有升高白細胞的作用，具有開發(fā)升高白細胞藥物的價值。
【專利說明】
Vi rosa i ne A的四氫吡咯基和嗎啉基衍生物的組合物在升高 白細胞的藥物中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 白細胞減少癥是由于原因不明和繼發(fā)于其他疾病之后而引起的疾病，分為原發(fā)性 和繼發(fā)性兩大類。原發(fā)性者原因不明；繼發(fā)性者認為其病因可由急性感染，物理、化學因素， 血液系統(tǒng)疾病，伴脾腫大的疾病，結(jié)締組織疾病，過敏性疾病，遺傳性疾病等，獲得性或原因 不明性粒細胞減少等。
[0003] 白細胞減少的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產(chǎn)物中 尋找化合物或先導化合物并進行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物有 重要價值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個2012年發(fā)表（Bing-Xin Zhao et al .， 2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的化合物，我們對化合物I進行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化 合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物升高白細胞活性進行了評 價，其具有升高白細胞活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為70%和30%。
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物在制備升高白細胞藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明組合物可以 顯著升高失血和化學物品引起的白細胞降低。
[0009]以下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1化合物Virosaine A的制備
[0011] 化合物Virosaine A(I)的制備方法參照Bing-Xin Zhao等人發(fā)表的文獻(Bing-Xin Zhao et al.,2012.Virosaines A and B, Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的方法。
[0013] 實施例2 Virosaine A的ο-溴乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(235mg，1.00mmol)溶于20mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（ΤΒΑΒ) (0.08 8)，1，2-二溴乙烷(3.76(^，20.00臟〇1)和51^的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5攝氏 度攪拌Shdh之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相溶液。然后 對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除溶 劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮=100:1. 〇，v/V)，收 集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(26lmg，78% )。
[0015] 4 MMR(500MHz，DMS0-d6)S5.91(s，lH)，4.07(s，lH)，3.81(s，2H)，3.59(s，lH)， 3.43(s,2H),3.33(s,lH),2.26(s,lH),1.58(d,J=9.8Hz,3H),1.41(s,2H).
[0016] 13C 匪R(125MHz，DMS0-d6)Sl71.81(s),106.71(s),79.95(s),74.33(s),69.81 (s),66.68(s),44.21(s),35.56(s),33.28(s),25.85(s),21.88(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci4Hi7BrN〇4:342.0341 ；found 342.0343.
[0019] 實施例3 Virosaine A的0_(四氫吡咯基）乙基衍生物（III)的合成
[0020] 將化合物II(17lmg，0.5mmo 1)溶于15mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2.5mmo 1)，碘化鉀(84mg，0.5mmo 1)和吡略燒（1420mg，20mmo 1)，混合物加熱回流lh。反應(yīng)結(jié) 束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽水 洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品 用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮=100:1.5，v/v)，收集淡黃色集中洗脫帶即得 到Virosaine A的0-(四氫吡咯基）乙基衍生物（III)的淡黃色膠狀固體(111.6mg，67% )。
[0021] 4 MMR(500MHz，DMS0-d6)S5.92(s，lH)，4.11(s，lH)，3.66(s，lH)，3.53(s，2H)， 3.45(d,J=66.9Hz,lH),2.64(s,2H),2.52(s,4H),2.29(s,lH),1.71(s,4H),1.64(s,2H), 1.61(s,lH),1.50(s,2H).
[0022] 13C NMR( 125MHz，DMS0-d6)Sl71.83(s), 106.73(s),79.97(s),74.35(s),66.72((1, J = 9.2Hz),54.42(d ,J = 17.1Hz),44.23(s),35.58(s),25.86(s),25.23(s),21.90(s).
[0023] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for Ci8H25N2〇4:333.1814;found:333.1811。
[0025] 實施例4 Virosaine A的0_(嗎啉基）乙基衍生物的合成
[0026] 將化合物II(17lmg，0.5mmo 1)溶于15mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmo 1)，碘化鉀(84mg，0 · 5mmo 1)和嗎啉（1742mg，20mmo 1)，混合物加熱回流lh。反應(yīng)結(jié)束 后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100: l.〇，v/v)，收集黃色集中洗脫帶即得 到Virosaine A的0-(嗎啉基）乙基衍生物的黃色固體(IV) (125.3mg，72% )。
[0027] 咕 MMR(500MHz，DMS0-d6)S5.95(s，lH)，4· 12(s，lH)，3.68(s，lH)，3.63((1, J = 8·4Ηζ，1Η)，3.61(s，4H)，3.57-3.26(m，3H)，2.61(s，2H)，2.56(s，2H)，2.51-2.03(m，5H)， 1.70(d ,J = 3.1Hz,lH),1.65(d ,J = 25.6Hz,lH),1.52(s,2H).
[0028] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl71.85(s)，106.73(s)，79.95(s)，74.34(s)，66.75(t, J=4.6Hz),54.46(s),52.93(s),44.22(s),35.55(s),25.88(s),21.89(s).
[0029] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for Ci8H25N2〇5:349.1763;found:349.1761。
[0031]實施例5組合物升高白細胞活性 [0032] 一、組合物對失血小鼠的治療作用
[0033] 對失血小鼠的影響ICR小鼠50只，罕d各半，均分成5組(η = 10)。除生理鹽水組外， 其它組每只小鼠從眼眶靜脈放血0.5ml，24h后再取血測全部各組白細胞指標，然后連續(xù)灌 胃給藥1周，末次給藥lh后，從眼眶靜脈叢取血用F-800全血小板分析儀測白細胞指標。 [0034] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的70mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的30mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合物， 使用時用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0035]表1組合物對因失血所致白細胞減少的治療作用（109/L)
[0037] 與模型組比較:*ρ〈0·05
[0038] 結(jié)果表明，放血小鼠經(jīng)服用組合物治療7天后，組合物給藥組與模型組比較，白細 胞顯著高于模型組，接近生理鹽水組。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0039] 二、組合物對環(huán)磷酰胺致白細胞減少的治療作用
[0040] 對小鼠骨髓造血功能損傷的防治作用ICR小鼠50只，??用，均分成5組(η=10)， 即生理鹽水組、造模組、組合物1.2mg/kg組、化合物III 1.2mg/kg組和化合物IV 1.2mg/kg 組，口服給藥，每天1次。第0、5、10日除生理鹽水組外，其它各組小鼠分別腹腔注射環(huán)磷酸胺 80mg/kg，然后繼續(xù)給藥3天。于末次給藥后lh，從眼眶靜脈叢取血，測白細胞。
[0041] 表2組合物對環(huán)磷酰胺所致白細胞減少的治療作用（109/L)
[0042]
[0043] 與模型組比較:*ρ〈0·05
[0044] 結(jié)果表明，與生理鹽水組比較，環(huán)磷酸胺能使小鼠骨髓損傷，造成外周血細胞下 降，組合物組與模型組比較，均可明顯對抗環(huán)磷酸胺所致小鼠白細胞下降。而化合物III和 化合物IV不具有此活性。
[0045]三、組合物對苯所致白細胞減少的治療作用
[0046] 對再生障礙性貧血小鼠的影響：昆明種小鼠50只，罕c?兼用，均分成5組(η = 10)，除 生理鹽水組外，其它組小鼠皮下注射苯0.5ml/kg，連續(xù)12天，造模的當日，同時口服給藥，每 天1次，共18天，末次給藥后lh，眼眶靜脈叢取血，測白細胞。
[0047] 表3組合物對苯所致血細胞減少的治療作用（109/L)
[0048]
[0049] 與模型組比較:*p〈0.05
[0050] 結(jié)果表明，組合物組與模型組比較，可明顯對抗苯所致再生障礙性貧血小鼠白細 胞的下降。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0051] 結(jié)論：組合物能夠顯著升高白細胞，可以用來制備抗白細胞降低藥物。而化合物 III和化合物IV不具有顯著升高白細胞的活性，不可以用來制備抗白細胞降低藥物。
[0052] 實施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0053] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0054] 實施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0055] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物HI和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為70%和30%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分數(shù)分別為70%和30%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在升高白細胞藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在升高白細胞藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述組合物升 高失血所致白細胞的降低。5. 如權(quán)利要求3所述的組合物在升高白細胞藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述組合物升 高化學品所致白細胞的降低。6. 如權(quán)利要求5所述的組合物在升高白細胞藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述化學品為 環(huán)憐酷胺。7. 如權(quán)利要求5所述的組合物在升高白細胞藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述化學品為 苯D
【文檔編號】A61P7/00GK105832742SQ201610277881
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年4月28日
【發(fā)明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司