專利名稱：：L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種二肽衍生物，特別涉及L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，還涉及其制備方法和在醫(yī)藥方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：糖尿病(DiabetesMellitus)是一種以高血糖為主要特征、嚴(yán)重危害健康的內(nèi)分泌代謝疾病，是世界上第三大非傳染性慢性疾病。據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)最新數(shù)據(jù)顯示，2007年全球約有2.39億糖尿病患者。預(yù)計(jì)2010年糖尿病患者將達(dá)到2.46億，2025年將達(dá)到3.8億，即成年人口的7.1%。目前，中國(guó)糖尿病患者人數(shù)已居世界第二位，預(yù)計(jì)2025年將達(dá)到5931萬。2006年，糖尿病位居中國(guó)住院患者病因第十位、城市居民死亡原因第六位。因此，糖尿病的防治是國(guó)際糖尿病界研究的重大課題。目前抗糖尿病藥物種類繁多，類型各異，臨床上使用的II型糖尿病治療藥物主要有磺酰脲類和非磺酰脲類促胰島素分泌劑、雙胍類、噻唑烷二酮類等胰島素增敏劑、肝糖生成抑制劑、a-葡萄糖苷酶抑制劑及新型降糖藥二肽基肽酶-IV(DPP-IV)抑制劑，但這些藥物的治療效果還不理想或存在較大副作用，因此，研發(fā)具有新穎化學(xué)結(jié)構(gòu)、高效低毒的糖尿病藥物仍然是糖尿病防治工作中的重要任務(wù)。核過氧化酶增殖體激活受體(PPAR)是配體激活轉(zhuǎn)錄因子，屬于核受體基因家族，在調(diào)節(jié)血糖、胰島素敏感性、脂肪貯存與代謝等方面起著至關(guān)重要的作用。PPAR有3種亞型PPARa、PPARS、PPARy，其中PPARy的激活可以提高胰島素敏感性，減少炎癥的發(fā)生，降低游離脂肪酸的脂質(zhì)濃度以及降低血壓。近年來突破傳統(tǒng)治療藥物的基本結(jié)構(gòu)，研制開發(fā)以PPAR為靶點(diǎn)的新型抗糖尿病藥物已成為藥物研究的一大熱點(diǎn)。葛蘭素公司合成了一系列新型的L-酪氨酸衍生物，其中包括GI262570、GW1929和GW7845。活性測(cè)定發(fā)現(xiàn)此類化合物的PPARY結(jié)合活性比噻唑烷二酮類高出10100倍，其中部分化合物的活性已經(jīng)達(dá)到O.lnmol/L數(shù)量級(jí)，是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的合成PPARy激動(dòng)劑。此外，HQL-975等類型的衍生物也陸續(xù)被合成出來。L-苯丙氨酸是人體必需但自身無法合成的八大氨基酸之一，也是一種重要的醫(yī)藥和食用化學(xué)品中間體，用于制備氨基酸輸液、復(fù)合氨基酸制劑、營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑、氨基酸類抗癌藥物、腎上腺素、甲狀腺素、黑色素和甜味劑阿斯巴甜等。新型的餐時(shí)血糖調(diào)節(jié)劑那格列奈(Nateglinide)是苯丙氨酸衍生物，直接作用于胰腺P細(xì)胞，促使其釋放胰島素，能有效控制餐時(shí)血糖水平，起效快，作用時(shí)間短。此外，文獻(xiàn)報(bào)道，L-對(duì)硝基苯丙氨酸作為天然氨基酸的替代物可用于研究tRNA運(yùn)轉(zhuǎn)核糖核酸，也可作為生物物理探針應(yīng)用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的研究，并且在某些不對(duì)稱催化方面表現(xiàn)出優(yōu)異的活性。因此，L-對(duì)硝基苯丙氨酸及其衍生物有廣闊的應(yīng)用前景。
發(fā)明內(nèi)容有鑒于此，本發(fā)明的目的之一在于提供一種L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物；目的之二在于提供所述L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的制備方法；目的之三在于提供所述L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物在醫(yī)藥方面的應(yīng)用。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案1、L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，具有通式I所示結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>&為H或_CH3，R2為9-荷甲氧羰基(Fmoc)、節(jié)氧羰基、對(duì)甲苯磺酰基、對(duì)氯苯磺?；?qū)︿灞交酋；?，R3為H、-CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、_CH(CH3)CH2CH3、_CH2C6H5、_CH2(C6H4(4-OH))、-CH20C(CH3)3、-CH(CH3)0C(CH3)3、_CH2CH2SCH3、_CH2SC(C6H5)3、_CH2CH2C02C(CH3)3或-CH2C02C(CH3)3;或者，R丄為H，R2為H，R3為H、_CH3、_CH(CH3)2、_CH2CH(CH3)2、_CH(CH3)CH2CH3、_CH2C6H5、-CH2(C6H4(4-OH))、_CH20C(CH3)3、_CH(CH3)0C(CH3)3、-CH2CH2SCH3、_CH2SC(C6H5)3、_CH2CH2C02C(CH3)3或-CH2C02C(CH3)3。進(jìn)一步，所述&為H或-CH3，R2為9-芴甲氧羰基，R3為H、-CH3、_CH(CH3)2、_CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH2CH3、_CH2C6H5、_CH2(C6H4(4-OH))、-CH(CH3)OC(CH3)3或_CH2SC(C6H5)3;進(jìn)一步，所述R3為H、-CH(CH3)2、_CH2CH(CH3)2或_CH(CH3)CH2CH3;進(jìn)一步，所述&為_CH3，R3為_CH(CH3)2;進(jìn)一步，所述&為H，R2為H，R3為H、_CH2CH(CH3)2或_CH2C6H5。2、所述L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的制備方法，包括以下步驟a、將L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽與通式II所示保護(hù)氨基酸在縮合劑的作用下偶聯(lián)，得通式I-l所示化合物；化學(xué)反應(yīng)式如下,C02CH3O〇0入,CH;3-+Ah-^02NvNH2.HCISIII-lb、將通式I-l所示化合物在弱堿性條件下水解，得通式1-2所示化合物；化學(xué)反應(yīng)式如下X1.OH-,H202.H+,H20I-l1-2或者，將通式I-l所示化合物在強(qiáng)堿性條件下水解，得通式I-3a所示化合物或結(jié)構(gòu)式I_3b所示化合物；化學(xué)反應(yīng)式如下I-3b在通式1-1、1-2、I-3a和II中，X、&、R2和R3具有通式I中所述定義。進(jìn)一步，步驟a中所述縮合劑為N，N'-二異丙基碳二亞胺(DIC)、1_羥基苯并三氮唑(H0Bt)和N，N'-二異丙基乙胺(DIPEA)的組合物；進(jìn)一步，步驟b中所述弱堿性條件為濃度為lmol/L的氫氧化鋰；所述強(qiáng)堿性條件為濃度為2mol/L的氫氧化鋰；進(jìn)一步，步驟a中所述L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽的制備方法包括以下步驟①將體積比為1:1.251.5的濃硝酸與濃硫酸的混合液冷卻至溫度0°C，分批緩慢加入L-苯丙氨酸，L-苯丙氨酸與濃硝酸的投料摩爾比為1:1.3，加畢，溫度0t:攪拌反應(yīng)60分鐘，再升溫至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)60分鐘，反應(yīng)完畢后，加入冰水混合物，攪拌冷卻至溫度0°C，再在冰浴條件下用濃氨水調(diào)節(jié)pH至6，析出沉淀，過濾，濾餅洗滌，干燥，得L-對(duì)硝基苯丙氨酸；②將無水甲醇冷卻至溫度ot:，緩慢加入氯化亞砜，加畢，溫度ot:攪拌反應(yīng)20分鐘，分批加入L-對(duì)硝基苯丙氨酸，攪拌至原料逐漸溶解呈白色渾濁液，再升溫至7(TC攪拌反應(yīng)，待L-對(duì)硝基苯丙氨酸反應(yīng)完畢后，減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾至干，殘余物加入甲醇使溶解再減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾至干，重復(fù)操作3次，最后真空干燥，得L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽。3、所述L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物在制備抗糖尿病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明提供了一種L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，經(jīng)檢測(cè)具有較好的PPAR激動(dòng)活性，是優(yōu)良的抗糖尿病先導(dǎo)化合物，可進(jìn)一步開發(fā)制備成抗糖尿病藥物，在糖尿病治療領(lǐng)域具有潛在、廣闊的應(yīng)用前景；本發(fā)明還提供了所述L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的制備方法，反應(yīng)條件溫和，后處理方便，收率高，成本低。具體實(shí)施例方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。主要試劑和儀器保護(hù)氨基酸Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Val-0H、Fmoc_Leu_0H、Fmoc-Ile-0H、Fmoc_Phe_0H、Fmoc_Pro_0H、Fmoc-Thr(t_Bu)_0H、Fmoc_Tyr_0H和Fmoc-Cys(Trt)-OH(成都凱泰新技術(shù)有限責(zé)任公司)，DIC(山東淄博暢順工貿(mào)有限公司)、H0Bt(化學(xué)純，成都凱泰新技術(shù)有限責(zé)任公司)，DIPEA(化學(xué)純，浙江新德化工有限公司)，四氫呋喃(THF)、乙酸乙酯、石油醚和甲醇等(分析純，重慶川東化工有限公司)；熔點(diǎn)測(cè)定儀(X-6型，北京福凱儀器有限公司)，核磁共振儀(AV-300型，德國(guó)Bruker公司；TMS為內(nèi)標(biāo))，傅里葉變換紅外光譜儀(SpectrumGX型，美國(guó)PerkinElmer公司)，大氣壓電噴霧離子源(API-ES)質(zhì)譜儀(LC-MSD-1100型，美國(guó)Agilent公司)。實(shí)施例1、L-對(duì)硝基苯丙氨酸(化合物III)的制備L-對(duì)硝基苯丙氨酸可直接從市場(chǎng)上購得，也可自行制備。本發(fā)明采用如下改進(jìn)方法制得在圓底燒瓶中，加入體積比為l:1.3的濃硝酸與濃硫酸的混合液，冰浴冷卻至溫度ot:，分批緩慢加入L-苯丙氨酸，L-苯丙氨酸與濃硝酸的投料摩爾比為1:1.3，加畢，溫度ot:攪拌反應(yīng)60分鐘，再升溫至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)60分鐘，反應(yīng)完畢后，加入少量冰水混合物，攪拌冷卻至溫度0°C，再在冰浴條件下用濃氨水調(diào)節(jié)pH至6，析出大量沉淀，冷藏，過濾，濾餅依次用冰水和乙醇洗滌，干燥，得L-對(duì)硝基苯丙氨酸；m.p.229.0231.2°C;[a]D+7.8°;IR(KBr，v隨/cm—0:3297(s)，2896(bs)，1570(s)，1666(s)，1348(s)，1536(s)，877(s);ESMS(m/z):[M+H]+211(100%)，[L-Phe]+165(20%);L-Boc-Phe(p_N02)-OH的力NMR(CDCl3，S/ppm):1.42(s，9H)，3.17—3.22(m，1H)，3.43—3.51(m，1H)，4.65—4.68(m，1H，CH)，4.97-4.99(m，1H)，7.37(d，2H，J=8.5Hz)，8.18(d，2H，J=8.5Hz)。7本發(fā)明從反應(yīng)溫度、混酸比例、原料投料比、后處理pH值四個(gè)方面對(duì)L-對(duì)硝基苯丙氨酸的制備方法進(jìn)行了優(yōu)化，建立了最佳制備條件，并通過放大實(shí)驗(yàn)證實(shí)了方法的可靠性。1、反應(yīng)溫度的影響本發(fā)明考察了兩種反應(yīng)溫度控制方式①先在溫度ot:條件下投料并保溫反應(yīng)1小時(shí)，再在溫度0、20、30、40或6(TC條件下保溫反應(yīng)1小時(shí)，結(jié)果見表l，產(chǎn)物收率為53.2%58.6%，各組之間相差不大，推測(cè)L-苯丙氨酸在加料之后的1小時(shí)內(nèi)基本反應(yīng)完全，后續(xù)反應(yīng)溫度對(duì)反應(yīng)無較大影響。②直接在溫度0、20、30、40或60°C條件下投料并保溫反應(yīng)2小時(shí)，結(jié)果見表2，產(chǎn)物收率為47.3%63.8%，各組之間有較大差別，(TC的反應(yīng)收率為63.8%，而6(TC的反應(yīng)收率僅47.3%且產(chǎn)物色澤較差。究其原因，可能是該反應(yīng)為放熱反應(yīng)，降溫有利于反應(yīng)進(jìn)行，但溫度較低時(shí)體系粘度較大，會(huì)影響攪拌效果且延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間；而升高溫度時(shí)苯環(huán)發(fā)生多取代的可能性增加，會(huì)降低產(chǎn)物收率且影響產(chǎn)物質(zhì)量。因此，優(yōu)選反應(yīng)溫度為先在溫度ot:條件下投料并保溫反應(yīng)1小時(shí)，再升溫至室溫反應(yīng)1小時(shí)。表l反應(yīng)溫度的影響(l)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2、混酸比例的影響固定L-苯丙氨酸與濃硝酸的比例，改變濃硫酸的用量來選擇混酸比例，將8mmo1的L-苯丙氨酸分批緩慢加入到冰浴冷卻至溫度0°C的混酸中，加畢，溫度(TC攪拌反應(yīng)1小時(shí)，再升溫至室溫，攪拌反應(yīng)1小時(shí)，結(jié)果見表3，當(dāng)濃硝酸與濃硫酸的體積比為1:1.25和i:1.5時(shí)，產(chǎn)物收率相對(duì)較高；當(dāng)濃硝酸與濃硫酸的體積比為i:i和i:2時(shí)，產(chǎn)物收率相差不大，但產(chǎn)物顏色隨著濃硫酸用量的增加而逐漸加深。因此，優(yōu)選濃硝酸與濃硫酸的體積比為1.251.5。表3混酸比例的影響編號(hào)混酸(mL)產(chǎn)物HN03H2S04質(zhì)量/g顏色收率/%1210.133淺黃色7.92221.015淺黃色60.42,51.046淺黃色62.3421.082淺黃色64.44l扁黃色59.6620.852深黃色50.73、原料投料比的影響固定濃硝酸與濃硫酸的體積比為1:1.3來選擇L--苯丙氨酸與混酸的比例，將8mmo1的L-苯丙氨酸分批緩慢加入到冰浴冷卻至溫度0°C的混酸中，加畢，溫度0"C攪拌反應(yīng)1小時(shí)，再升溫至室溫，攪拌反應(yīng)1小時(shí)，結(jié)果見表4，當(dāng)L-苯丙氨酸與濃硝酸的投料摩爾比為1:1.3時(shí)，產(chǎn)物收率達(dá)到75.0%;隨著混酸量的增加，產(chǎn)物收率有下降趨勢(shì)且產(chǎn)物顏色加深，可能是生成了多硝化產(chǎn)物。因此，優(yōu)選L-苯丙氨酸與濃硝酸的投料摩爾比為1:1.3。表4原料投料比的影響編號(hào)L-Phe:HNO;產(chǎn)物摩爾比HM)3H2S04質(zhì)量/g顏色收率/%11:1.311.31.264淺黃色75.021:2.622.5l馬淺黃色62.31:3.933.81.084黃色64.541:5.245.01.002深黃色59.64、后處理pH的影響苯丙氨酸是兩性分子，硝化后分子的兩性本性沒有改變，但pl值會(huì)有所變化，可以用濃氨水調(diào)節(jié)反應(yīng)液的pH使產(chǎn)物析出。后處理pH的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5，當(dāng)pH為45時(shí)，產(chǎn)物收率最低；當(dāng)pH為56時(shí)，產(chǎn)物收率最高；當(dāng)pH為68時(shí)，產(chǎn)物收率稍有降低；當(dāng)pH大于8時(shí)，產(chǎn)物收率明顯降低。因此，優(yōu)選后處理pH為6。表5后處理pH的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>根據(jù)上述研究結(jié)果，得出L-對(duì)硝基苯丙氨酸的最佳制備條件為①先在溫度0t:條件下投料并保溫反應(yīng)1小時(shí)，再升溫至室溫反應(yīng)1小時(shí)；②濃硝酸與濃硫酸的體積比為1.251.5;③L-苯丙氨酸與濃硝酸的投料摩爾比為1:1.3;后處理pH為6。5、放大實(shí)驗(yàn)在上述最佳制備條件下進(jìn)行放大實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表6，產(chǎn)物收率高達(dá)83.4%，且收率表6放大實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例2、L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(化合物IV)的制備L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽可直接從市場(chǎng)上購得，也可自行制備。本發(fā)明采用如下改進(jìn)方法制得在圓底燒瓶中加入無水甲醇，冰浴冷卻至溫度ot:，緩慢加入氯化亞砜，加畢，溫度ot:攪拌反應(yīng)20分鐘，分批加入化合物III即L-對(duì)硝基苯丙氨酸，攪拌至原料逐漸溶解呈白色渾濁液，再升溫至7(TC攪拌反應(yīng)，可見原料很快全部溶解呈黃色澄清液，用薄層色譜法(TLC)監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)程；待L-對(duì)硝基苯丙氨酸反應(yīng)完畢后，減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾至干，殘余物加入適量甲醇使溶解再減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾至干，重復(fù)操作3次，最后真空干燥，得L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽。制備條件及結(jié)果見表7。表7L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽的制備條件及結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>文獻(xiàn)報(bào)道的眾多合成氨基酸甲酯鹽酸鹽的方法中，在后處理時(shí)一般采用加入大量乙醚來析出產(chǎn)物沉淀，或采用無水乙醇和無水乙醚反復(fù)重結(jié)晶來純化產(chǎn)物，但是用乙醚析出產(chǎn)物沉淀常常不完全，而反復(fù)重結(jié)晶易造成產(chǎn)物損失。本發(fā)明方法采用先減壓蒸餾除去過量氯化亞砜，再加入甲醇溶解并減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾以除去殘留的氯化亞砜、氯化氫以及二氧化硫等雜質(zhì)，產(chǎn)物純度和收率都較高。實(shí)施例3、L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物Fmoc-AA-Phe(p_N02)-OMe的制備通法將Fmoc-AA-0H(20mmol)溶于無水THF10mL中，冰浴、攪拌下加入H0Bt(24mmo1)、DIC(24mmo1)和DIPEA(20mmol)，加畢，冰浴下攪拌反應(yīng)3060分鐘，用TLC法監(jiān)測(cè)活化酯生成情況；將化合物IV即L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(20mmol)溶于無水THF15mL中，加入DIPEA(30mmol)，攪拌，備用；將上述兩種溶液混合，室溫下攪拌反應(yīng)，用TLC法監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)程；反應(yīng)完畢后，減壓蒸餾除去THF，向殘余液中加入水150mL，用乙酸乙酯150mL萃取，分別收集水層和有機(jī)層，水層再用乙酸乙酯80mL萃取，合并所有有機(jī)層，依次用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的檸檬酸水溶液(150mLX2)、濃度為0.5mol/L的碳酸氫鈉水溶液(150mLX2)、飽和氯化鈉水溶液(150mLX2)洗滌，再用無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化，得Fmoc-AA-Phe(p_N02)-OMe。制備條件及結(jié)果見表8。表8Fmoc-AA-Phe(p_N02)-OMe的制備條件及結(jié)果Fmoc-AA-Phe(p-N02)-OMeFmoc-AA-OH質(zhì)量/g顏色收率/%Fmoc-Gly-Phe(p-N02)-OMe*Fmoc-Gly-OH5.86白色57.69Fmoc-Ala-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Ala-OH5.96雪白色57.62Fmoc-Val-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Val-OH8.51淡黃色77.85Fmoc-Leu-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Leu-OH7.70灰白色68.68Fmoc-Ile-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Ile-OH8.13淡黃色72.72Fmoc-Phe-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Phe-OH7.93白色66.33Fmoc-Pro-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Pro-OH9.13淡黃色84.45Fmoc-Thr(t-Bu)-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Thr(t-Bu)-OH8.64白色71.58Fmoc-Tyr-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Tyr-OH6.40黃色52.41Fmoc墨Cys(Trt)-Phe(p-N02)-OMeFmoc-Cys(Trt)墨OH8.11淡黃色88.08*在制備過程中，由于Gly的活化酯及其偶聯(lián)產(chǎn)物在THF中的溶解性較差，故加入少量N，N-二甲基甲酰胺(DMF)作為溶劑，使反應(yīng)能在均相體系中進(jìn)行。所得化合物的結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下FmOC-Gly-Phe(p-N02)-0Me:2-(2_((9H-芴甲氧基)羰基氨基)乙酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯11m.p.182.2183.1°C,HNMR(300MHz，DMS0_d6)S:8.40(d，J=7.7Hz，lH，H-12)，8.12(d，J=8.lHz，2H，H_2)，7.88(d，J=7.3Hz，2H，H-20)，7.70(d，J=7.2Hz，2H，H-17)，7.49(m，3H，H_3，H_9)，7.41(t，2H，H—19)，7.32(t，2H，H—18)，4.59(t，1H，H—15)，4.254.21(m，3H，H_6，H_14)，3.62(s，3H，H_8)，3.58(s，2H，H_ll)，3.203.07(m，2H，H-5);13CNMR(75MHz,DMS0_d6)S:171.5(C=0，C_7)，169.3(C=0，C-10)，156.4(C=0，C-13)，146.6(C-1)，145.5(C_4)，143.8(C-16)，140.7(C-21)，130.6(C_3)，127.7(C-19)，127.1(C_20)，125.2(C_18)，123.3(C_2)，120.1(C_17)，65.7(C_14)，52.9(C_6)，52.1(C-8)，46.6(C-15)，43.1(C-12)，36.4(C_5)。Fmoc-Ala-Phe(p-N02)-OMe:2-(2_((9H-芴甲氧基)羰基氨基)丙酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯m.p.177.6178.rC一HNMR(300MHz，DMS0_d6)S:8.39(d，J=7.6Hz，1H，H-12)，8.12(d，J=8.3Hz，2H，H_2)，7.8(d，J=7.4Hz，2H，H_20)，7.71(d，J=3.5Hz，2H，H_17)，7.51(d，J=7.6Hz，3H，H_3，H_9)，7.42(t，2H，H—19)，7.32(t，2H，H—18)，4.57(m，1H，H—15)，4.22(d，J=6.4，2H，H—14)，4.05(t，2H，H_6，H—ll)，3.61(s，3H，H_8)，3.243.10(m，2H，H-5)，1.7(d，J=7.0Hz，3H，H—22);13CNMR(75MHz,DMS0_d6)S:172.7(C=0，C_7)，171.4(C=0，C-10)，155.5(C=0，C-13)，146.3(C_l)，145.5(C_4)，143.9，143.7(C-16)，140.7(C_21)，130.5(C_3)，127.6(C_19)，127.0(C_20)，125.2(C_18)，123.2(C_2)，120.0(C-17)，65.8(C-14)，52.8(C_l1)，52.0(C_6)，49.7(C_8)，46.6(C-15)，36.2(C_5)，19.0(C-22)。FmOC-Val-Phe(p-N02)-OMe:2_(3-甲基_2_((9H-芴甲氧基)羰基氨基)丁酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯m.p.189.7°C191.3°C,HNMR(300MHz,DMS0_d6)S:8.49(d，J=7.6Hz，2H，H-12)，8.09(d，J=8.lHz，2H，H_2)，7.89(d，J=7.4Hz，2H，H-20)，7.73(d，J=6.2Hz，12，J=8.3Hz，2H，H_3)，7.447.30(m，5H，H_9，H_18，H—19)，4.58(m，1H，H-ll)，4.274.20(m，3H，H_14，H—15)，3.83(m，1H，H_6)，3.60(s，3H，H_8)，3.233.06(m，2H，H-5)，1.941.87(m，1H，H_22)，0.82(d，J=6.0Hz，6H，H—23);13CNMR(75MHz，DMS0-d6)S:171.4(2C=0，C_7，C—10)，155.9(C=0，C—13)，146.3(C_l)，145.5(C_4)，143.9，143.7(C-16)，140.7(C-21)，130.5(C_3)，127.6(C-19)，127.0(C-20)，125.3(C-18)，123.1(C-2)，120.1(C-17)，65.7(C-14)，60.1(C_l1)，52.6(C_6)，51.9(C_8)，46.7(C-15)，38.7(C-5)，30.3C-22)，19.0，18.3(C-23)。FmOC-Leu-Phe(p-N02)-OMe:2_(4-甲基_2_((9H-芴甲氧基)羰基氨基)戊酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯m.p.171.3°C173.2°C,HNMR(300MHz,DMS0_d6)S:8.40(d，J=7.7Hz，2H，H-12)，8.10(d，J=8.2Hz，2H，H-2)，7.89(d，J=7.3Hz，2H，H-20)，7.71(d，J=7.lHz，2H，H-17)，7.51(d，J=8.2Hz，2H，H_3)，7.42(t，2H，H_19)，7.40(d，J=7.6Hz，1H，H_9)，7.32(t，2H，H-18)，4.58(m，1H，H—15)，4.27(d，J=8.3Hz，2H，H—14)，4.19(t，1H，H—ll)，4.01(m，1H，H-6)，3.60(s，3H，H_8)，3.203.08(m，2H，H_5)，1.56(m，1H，H_23)，1.34(m，2H，H-22)，0.84(d，J=6.0Hz，6H，H-24);13CNMR(75MHz，DMS0_d6)S:173.4(C=0，C_7)，172.3(C=0，C-10)，156.7(C=0，C—13)，147.2(C_l)，146.4(C_4)，144.9、144.6(C—16)，141.6(C_21)，131.5(C_3)，128.5(C_19)，127.9(C_20)，126.2(C_18)，124.1(C_2)，121.0(C-17)，66.4(C-14)，53.797(C-ll)，53.5(C_6)，52.9(C_8)，47.6(C-15)，37.1(C_5)，25.0(C-23)，23.8(C-24)。FmOC-Ile-Phe(p-N02)-OMe:2_(3-甲基_2_((9H_芴甲氧基)羰基氨基)-戊酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯m.p.177.6°C178.8°C,HNMR(300MHz,DMS0_d6)S:8.49(d，J=7.5Hz，1H，H-12)，8.08(d，J=8.lHz，2H，H_2)，7.88(d，J=7.3Hz，2H，H_20)，7.72(d，J=7.OHz，2H，H-17)，7.51(d，J=8.lHz，3H，H_2，H_9)，7.41(t，2H，H—19)，7.32(t，2H，H—18)，4.59(t，1H，H-15)，4.274.19(t，3H，H-ll，H-14)，3.85(t，1H，H_6)，3.6(s，3H，H_8)，3.213.07(m，2H，H-5)，1.66(m，1H，H_22)，1.34(m，2H，H_24)，1.00(d，J=6.4Hz，3H，H_23)，0.78(t，133H，H-25);13CNMR(75MHz，DMS0-d6)S:174.7(C=0，C_7)，171.5(C=0，C—10)，155.9(C=0，C-13)，146.3(C-1)，145.6(C_4)，144.0、143.7(C-16)，140.8(C-21)，130.6(C_3)，127.7(C_19)，127.1(C_20)，125.4(C_18)，123.2(C_2)，120.2(C_17)，65.7(C_14)，59.O(C-ll)，52.7(C-6)，52.0(C-8)，46.8(C-15)，36.2(C_5)，25.0(C-22)，23.4(C-24)，15.1(C-23)，10.8(C-25)。Fmoc-Phe-Phe(p-N02)-OMe:2-(3_苯基_2_((9H_荷甲氧基)羰基氨基)丙酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯m.p.186.7°C188.6°C,HNMR(300MHz,DMS0_d6)S:8.56(d，J=7.7Hz，1H，H-12)，8.ll(d，J=8.4Hz，2H，H—2)，7.88(d，J=7.4Hz，2H，H—20)，7.647.59(m，3H，H-9，H-17)，7.52(d，J=8.4Hz，2H，H_3，H_9)，7.40(t，2H，H_19)，7.337.18(m，7H，H-18，H-24H-26)，4.64(m，1H，H—ll)，4.164.10(m，4H，H_6，H_14，H—15)，3.62(s，3H，H-8)，3.223.10(m，2H，H_5)，2.922.73(m，2H，H-22);13CNMR(75MHz,DMS0_d6)S:171.8(C=0，C-7)，171.4(C=0，C-10)，155.7(C=0，C-13)，146.3(C_l)，145.4(C_4)，143.8，143.7(C-16)，140.7(C-21)，138.0(C-23)，130.6(C_3)，129.2(C-25)，128.0(C-24)，127.6(C_19)，127.0(C_20)，126.3(C_26)，125.7(C_18)，123.2(C_2)，120.1(C_17)，65.6(C-14)，55.8(C_l1)，52.8(C_6)，52.1(C_8)，46.5(C-15)，37.3(C_5)，36.2(C-22)。Fmoc-Pro-Phe(p_N02)-OMe:2-(1_((9H_荷甲氧基)羰基)吡咯烷_2_甲酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯m.p.166.1°C167.3°C,HNMR(300MHz,DMS0_d6)S:8.41(d，J=7.7Hz，1H，H-12)，8.12(d，J=8.OHz，2H，H_2)，7.90(d，J=7.4Hz，2H，H_20)，7.79(d，J=8.OHz，2H，H-17)，7.52(d，J=8.3Hz，3H，H_2，H_9)，7.40(t，2H，H—19)，7.27(t，2H，H—18)，4.59(t，1H，H-15)，4.264.17(m，3H，H_6，H—14)，3.95(t，1H，H_l1)，3.58(s，3H，H_8)，3.213.04(t，2H，H-24)，2.192.04(m，4H，H_22，H_23)。Fmoc-Thr(t_Bu)-Phe(p_N02)-OMe:2-(2_((9H_荷甲氧基)羰基氨基)_3_叔丁氧基丁酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯m.p.136.8°C138.1°C,HNMR(300MHz,DMS0_d6)S:8.24(d，J=7.7Hz，1H，H-12)，8.12(d，J=8.3Hz，2H，H_2)，7.89(d，J=7.4Hz，2H，H—20)，7.73(d，J=6.lHz，2H，H-17)，7.50(d，J=8.4Hz，2H，H_3)，7.42(t，2H，H—19)，7.31(t，2H，H—18)，6.93(d，J=9.2Hz，lH，H-9)，4.66(d，J=9.2Hz，lH，H_ll)，4.334.21(m，3H，H_14，H_15)，3.97(t，1H，H-6)，3.753.72(m，1H，H—22)，3.61(s，3H，H_8)，3.213.10(m，2H，H_5)，1.11(s，3H，H-23)，1.03(s，9H，H-25);13CNMR(75MHz，DMS0_d6)S:171.2(C=0，C-7)，169.7(C=0，C-10)，155.8(C=0，C-13)，146.4(C_l)，145.2(C_4)，144.0，143.6(C—16)，140.7(C—21)，130.6(C_3)，127.6(C_19)，127.0(C_20)，125.3(C_18)，123.3(C_2)，120.1(C_17)，73.7(C-24)，67.5(C-22)，65.8(C-14)，59.6(C_l1)，52.7(C_6)，52.0(C_8)，46.7(C-15)，36.5(C-5)，28.0(C-25)，19.2(C-23)。Fmoc-Tyr-Phe(p_N02)-OMe:2-(2_((9H_荷甲氧基)羰基氨基)_3_(4_羥基苯基)丙酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯m.p.171.8174.7°C,HNMR(300MHz,DMS0_d6)S:8.41(d，J=7.7Hz，lH，H-12)，8.ll(d，J=8.0Hz，2H，H—2)，7.87(d，J=7.3Hz，2H，H—20)，7.64(d，J=7.OHz，2H，H-17)，7.58(d，J=8.9Hz，1H，H_9)，7.52(d，J=8.2Hz，2H，H_3)，7.40(t，2H，H—19)，7.30(t，2H，H-18)，7.17(d，J=7.8Hz，2H，H—24)，6.80(d，J=7.8Hz，2H，H—25)，4.62(t，1H，H-15)，4.234.10(m，4H，H_6，H_ll，H—14)，3.62(s，3H，H_8)，3.213.11(m，2H，H-5)，2.882.70(m，2H，H-22);13CNMR(75MHz，DMS0_d6)S:171.8(C=0，C-7)，171.4(C=0，C-10)，155.7(C=0，C-13)，153.4(C—26)，146.3(C_l)，145.4(C_4)，143.7(C—16)，140.7(C_21)，132.5(C_23)，130.6(C_3)，129.7(C_24)，127.7(C_19)，127.1(C_20)，125.3(C_18)，123.2(C_2，25)，120.0(C_17)，65.7(C_14)，55.9(C_11)，52.7(C_6)，52.0(C-8)，46.5(C-15)，36.7(C-22)，36.2(C_5)。Fmoc-Cys(Trt)-Phe(p-N02)-OMe:2-(2_((9H_荷甲氧基)羰基氨基)-3-(三苯甲基巰基)丙酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸甲酯27OHm.p.137.1140.5。C,HNMR(300MHz，DMS0_d6)S:8.36(d，J=7.7Hz，1H，H-12)，8.02(d，J=7.9Hz，2H，H_2)，7.89(d，J=7.4Hz，2H，H—20)，7.73(d，J=7.lHz，2H，H—17)，7.66(d，J=8.7Hz，1H，H_9)，7.457.29(m，21H，H_3，H_18，H_19，H_25，H_26，H—27)，4.264.23(m，3H，H_14，H—15)，4.044.02(m，3H，H_6，H—ll)，3.55(s，3H，H_8)，3.213.16(m，2H，H-5)，2.292.27(m，2H，H-22);13CNMR(75MHz，DMS0_d6)S:171.4(C=0，C-7)，170.1(C=0，C-10)，155.6(C=0，C—13)，146.2(C_l)，145.4(C_4)，144.3(C—24)，143.9，143.6(C-16)，140.7(C-21)，130.6(C_3)，129.1(C-26)，128.1(C-25)，127.7(C-19)，127.1(C_20)，126.8(C_27)，125.3(C_18)，123.1(C_2)，120.1(C_17)，65.9(C_14)，59.8(C-l1)，52.7(C-6)，52.1(C_8)，46.6(C-15)，36.0(C_5)，33.8(C-22)。由于氨基酸是兩性化合物，因此，在將L-對(duì)硝基苯丙氨酸與其它氨基酸進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)之前必須分別對(duì)分子中的其它反應(yīng)基團(tuán)進(jìn)行保護(hù)。本發(fā)明優(yōu)選保護(hù)策略是將L-對(duì)硝基苯丙氨酸的羧基用甲酯保護(hù)，待偶聯(lián)氨基酸的氨基用Fmoc保護(hù)，再將兩種保護(hù)的氨基酸進(jìn)行偶聯(lián)以得到目標(biāo)產(chǎn)物。生成酰胺鍵的縮合方式很多，有活化酯法、混合酸酐法、迭氮物法等，不管采用哪種方法，其關(guān)鍵都是選擇適合的縮合劑?？s合劑主要分為碳二亞胺型、苯并三唑鎗鹽型、吡啶并三唑鎗鹽型、磷酸酯型以及其他類型。本發(fā)明在前期研究工作的基礎(chǔ)上，優(yōu)選碳二亞胺型縮合劑使Fmoc-AA-OH生成活性酯的方式進(jìn)行偶聯(lián)，同時(shí)采用H0Bt以降低消旋。由于L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽中的氨基處于成鹽狀態(tài)，在偶聯(lián)反應(yīng)前應(yīng)通過加堿中和使氨基游離出來。堿的用量過少會(huì)使L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽的氨基釋放不徹底，不利于?；磻?yīng)；但用量過多會(huì)使Fmoc-AA-0H的Fmoc發(fā)生部分脫除，副產(chǎn)物增多，產(chǎn)物收率降低。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，堿的用量以達(dá)到pH為89的弱堿性條件為宜?，F(xiàn)有方法中常用堿為三乙胺，但三乙胺容易引起消旋，為了減少消旋，本發(fā)明中此處的堿優(yōu)選DIPEA。實(shí)施例4、L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物Fmoc-AA-Phe(p_N02)_0H的制備通法將Fmoc-AA-Phe(p_N02)-OMe(lOmmol)溶于THF20mL中，冰浴、攪拌下加入濃度為lmol/L的氫氧化鋰水溶液50mL，加畢，繼續(xù)攪拌5分鐘，再加入乙酸乙酯200mL和濃度為0.3mol/L的鹽酸水溶液150mL，繼續(xù)攪拌5分鐘，停止反應(yīng)，靜置分層，分別收集水層和有機(jī)層，水層再用乙酸乙酯(80mLX3)萃取，合并所有有機(jī)層，用水(80mLX2)洗滌，再用無水硫酸鈉干燥，旋轉(zhuǎn)蒸餾除去乙酸乙酯，最后用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶或柱層析純化，得Fmoc-AA-Phe(p_N02)_0H。制備條件及結(jié)果見表9。表9Fmoc-AA-Phe(p_N02)_0H的制備條件及結(jié)果16Fmoc-AA-Phe(p-N02)-OHFmoc-AA-Phe(p-N02)-OMe質(zhì)量/g收率m.p.廠CFmoc-Gly-Phe(p-N02)-OHFmoc-Gly-Phe(p-N02)-OMe4.4188.7189.9-490.6Fmoc-Ala-Phe(p-N02)-OHFmoc-Ala-Phe(p-NO2)誦OMe5.2276.5143.3-444.6Fmoc-Val-Phe(p-N02)-OHFmoc-Val-Phe(p-N02)-OMe4.1270.7166.6-467.4Fmoc-Leu-Phe(p-N02)-OHFmoc-Leu-Phe(p-NO2)-OMe4.7887.9146.8--148.2Fmoc-Ile-Phe(p-N02)-OHFmoc-Ile-Phe(p-N02)-OMe6.2960.0167》掘.5Fmoc-Phe-Phe(p-N02)-OHFmoc-Phe-Phe(p-N02)-OMe5.3190.4189.9--190.6Fmoc-Pro-Phe(p-N02)-OHFmoc-Pro-Phe(p-NO2)-OMe6.5280.0137.8--139.6Fmoc-Thr(t-Bu)-Phe(p-N02)-OHFmoc-Thr(t-Bu)-Phe(p-N02)-OMe3.8164.4114》-116.6Fmoc-Tyr-Phe(p-N02)-OHFmoc-Tyr-Phe(p-N02)-OMe4.4175.9166.5--167.2所得化合物的化學(xué)名和結(jié)構(gòu)式如下基)_3-基)-3-基)-3-基)-3-Fmoc-Gly-Phe(p_N02)_0H(4-硝基苯基)丙酸:2-(2-((9H-荷甲氧基)羰基氨基)-乙酰氨oo、、Fmoc-Ala-Phe(p_N02)-OH(4-硝基苯基)丙酸2-(2-((9H-荷甲氧基)羰基氨基)-丙酰氨Fmoc-Val-Phe(p_N02)-OH(4-硝基苯基)丙酸2-(3-甲基-2-((9H-荷甲氧基)羰基氨基)-丁酰氨Fmoc-Leu-Phe(p_N02)-OH(4-硝基苯基)丙酸2-(4-甲基-2-((9H-荷甲氧基)羰基氨基)-戊酰氨17<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>基)-3-Fmoc-Ile-Phe(p_N02)_0H(4-硝基苯基)丙酸:2-(3-甲基-2-((9H-荷甲氧基)羰基氨基)-戊酰氨基)-3-Fmoc-Phe-Phe(p_N02)-OH(4-硝基苯基)丙酸2-(3-苯基-2-((9H-荷甲氧基)羰基氨基)-丙酰氨<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>基)_3-Fmoc-Pro-Phe(p_N02)-OH(4-硝基苯基)丙酸:2-(l-((9H-荷甲氧基)羰基)-吡咯烷_2-甲酰氨FmoC-Thr(t-Bu)-Phe(p-N02)-0H:2-(2-((9H-芴甲氧基)羰基氨基)-3-叔丁氧基丁酰氨基)_3-(4-硝基苯基)丙酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>Fmoc-Tyr-Phe(p-N02)-OH:2-(2-((9H-芴甲氧基)羰基氨基)_3_(4_羥基苯基)丙酰氨基)_3-(4-硝基苯基)丙酸實(shí)施例5、L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物H-AA-Phe(p_N02)_0H的制備以H-Gly-Phe(p-N02)-0H:2-(2-氨基乙酰氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸為例將Fmoc-Gly-Phe(p-N02)-OMe5.05g(lOmmol)溶于THF15mL中，冰浴、攪拌下加入濃度為2mol/L的氫氧化鋰水溶液20mL，加畢，繼續(xù)攪拌反應(yīng)，用TLC法監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)程，4小時(shí)后反應(yīng)完畢，減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾濃縮，向殘余液中加入水20mL，用石油醚(30mLX3)萃取，棄去石油醚萃取液，收集水層，減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾濃縮，再在冰浴下滴加濃度為2mol/L的鹽酸水溶液，調(diào)節(jié)pH至5，析出白色固體，抽濾，真空干燥，得H-Gly-Phe(p_N02)-OH2.19g，收率為81.2%。參照上述方法，可制得本發(fā)明其它H-AA-Phe(p_N02)_0H。實(shí)施例6、L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的抗糖尿病活性檢測(cè)本發(fā)明將制備的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物進(jìn)行PPAR激動(dòng)活性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)此類化合物具有較好的PPAR激動(dòng)活性，是優(yōu)良的抗糖尿病先導(dǎo)化合物，可進(jìn)一步開發(fā)制備成抗糖尿病藥物。具體檢測(cè)方法和檢測(cè)結(jié)果如下將轉(zhuǎn)染了含有PPAR基因和螢火蟲熒光素酶(Luc)報(bào)告基因的質(zhì)粒pPPRE-Luc的人肝癌細(xì)胞(H印G2)接種于96孔板，培養(yǎng)過夜后換用含有待測(cè)樣品的低糖DMEM培養(yǎng)基，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照(培養(yǎng)基中不加入待測(cè)樣品)和陽性對(duì)照(培養(yǎng)基中加入PPARY受體激動(dòng)劑吡格列酮)，每組設(shè)雙復(fù)孔，培養(yǎng)24小時(shí)后檢測(cè)熒光素酶活性(即化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度L值)，重復(fù)測(cè)定兩次，按照下述公式計(jì)算激動(dòng)率絕對(duì)激動(dòng)率(％)=(L#ffl/Lse-1)X100;相對(duì)激動(dòng)率(％)=樣品的絕對(duì)激動(dòng)率/陽性對(duì)照的絕對(duì)激動(dòng)率X100;相對(duì)激動(dòng)率大于70%的待測(cè)樣品進(jìn)一步測(cè)定半數(shù)效應(yīng)濃度(EC50)，應(yīng)用Xlfit軟件中的4ParameterLogisticModel計(jì)算EC50。表10、L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的激動(dòng)率測(cè)定結(jié)果19<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>最后說明的是，以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過參照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以在形式上和細(xì)節(jié)上對(duì)其作出各種各樣的改變，而不偏離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍。權(quán)利要求L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，其特征在于具有通式I所示結(jié)構(gòu)其中，X為R1為H或-CH3，R2為9-芴甲氧羰基、芐氧羰基、對(duì)甲苯磺?；?、對(duì)氯苯磺?；?qū)︿灞交酋；琑3為H、-CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH2CH3、-CH2C6H5、-CH2(C6H4(4-OH))、-CH2OC(CH3)3、-CH(CH3)OC(CH3)3、-CH2CH2SCH3、-CH2SC(C6H5)3、-CH2CH2CO2C(CH3)3或-CH2CO2C(CH3)3；或者，R1為H，R2為H，R3為H、-CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH2CH3、-CH2C6H5、-CH2(C6H4(4-OH))、-CH2OC(CH3)3、-CH(CH3)OC(CH3)3、-CH2CH2SCH3、-CH2SC(C6H5)3、-CH2CH2CO2C(CH3)3或-CH2CO2C(CH3)3。F2009101919065C00011.tif,F2009101919065C00012.tif2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，其特征在于所述&為H或_CH3，R2為9-荷甲氧羰基，R3為H、-CH3、-CH(CH3)2、_CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH2CH3、_CH2C6H5、-CH2(C6H4(4-OH))、-CH(CH3)0C(CH3)3或_CH2SC(C6H5)3。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，其特征在于所述R3為H、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2或-CH(CH3)CH2CH3。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，其特征在于所述I^為-CH3，R3為-CH(CH3)2。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，其特征在于所述&為H，R2為H，R3為H、-CH2CH(CH3)2或_CH2C6H5。6.權(quán)利要求l所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的制備方法，其特征在于包括以下步驟a、將L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽與通式II所示保護(hù)氨基酸在縮合劑的作用下偶聯(lián)，得通式1-1所示化合物；化學(xué)反應(yīng)式如下b、將通式I-l所示化合物在弱堿性條件下水解，得通式I-2所示化合物；化學(xué)反應(yīng)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>或者，將通式1-1所示化合物在強(qiáng)堿性條件下水解，得通式I-3a所示化合物或結(jié)構(gòu)式I-3b所示化合物；化學(xué)反應(yīng)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>在通式1-1、1-2、I-3a和II中，X、RpR2和R3具有通式I中所述定義。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的制備方法，其特征在于步驟a中所述縮合劑為N，N'-二異丙基碳二亞胺U-羥基苯并三氮唑和N，N'-二異丙基乙胺的組合物。8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的制備方法，其特征在于步驟b中所述弱堿性條件為濃度為lmol/L的氫氧化鋰；所述強(qiáng)堿性條件為濃度為2mol/L的氫氧化鋰。9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的制備方法，其特征在于步驟a中所述L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽的制備方法包括以下步驟①將體積比為1:1.251.5的濃硝酸與濃硫酸的混合液冷卻至溫度0t:，分批緩慢加入L-苯丙氨酸，L-苯丙氨酸與濃硝酸的投料摩爾比為i:1.3，加畢，溫度ot:攪拌反應(yīng)60分鐘，再升溫至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)60分鐘，反應(yīng)完畢后，加入冰水混合物，攪拌冷卻至溫度0°C，再在冰浴條件下用濃氨水調(diào)節(jié)pH至6，析出沉淀，過濾，濾餅洗滌，干燥，得L-對(duì)硝基苯丙氨酸；②將無水甲醇冷卻至溫度0°C，緩慢加入氯化亞砜，加畢，溫度(TC攪拌反應(yīng)20分鐘，分批加入L-對(duì)硝基苯丙氨酸，攪拌至原料逐漸溶解呈白色渾濁液，再升溫至7(TC攪拌反應(yīng)，待L-對(duì)硝基苯丙氨酸反應(yīng)完畢后，減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾至干，殘余物加入甲醇使溶解再減壓旋轉(zhuǎn)蒸餾至干，重復(fù)操作3次，最后真空干燥，得L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽。10.權(quán)利要求1所述的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物在制備抗糖尿病藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了通式I所示的L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物，經(jīng)檢測(cè)具有較好的PPAR激動(dòng)活性，是優(yōu)良的抗糖尿病先導(dǎo)化合物，可進(jìn)一步開發(fā)制備成抗糖尿病藥物，在糖尿病治療領(lǐng)域具有潛在、廣闊的應(yīng)用前景；本發(fā)明還提供了所述L-對(duì)硝基苯丙氨酸二肽衍生物的制備方法，將L-對(duì)硝基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽與保護(hù)氨基酸在縮合劑的作用下偶聯(lián)即得，反應(yīng)條件溫和，后處理方便，收率高，成本低。文檔編號(hào)C07K5/078GK101724017SQ20091019190公開日2010年6月9日申請(qǐng)日期2009年12月14日優(yōu)先權(quán)日2009年12月14日發(fā)明者劉建,葉飛,孔令強(qiáng),張坤,晏菊芳,楊大成,汪林發(fā),范莉,蔣漢文,陳欣申請(qǐng)人:西南大學(xué);成都地奧制藥集團(tuán)有限公司