專利名稱：紫杉醇衍生物、其制備方法和其藥物組合物與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類新的紫杉醇的衍生物，其制備方法，含有這類化合物的藥物組合物，和化合物用于制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
紫杉醇在1971年由Wani等人從短葉紅豆杉(Taxus brevifolia)分離得到(Wani MC，Taylor HL，Wall ME.The isolation and structure oftaxol，a novel antileukemic and antitumor agent from taus brevifolia.J.Am.Chem.Soc.1971，93，2325)，其結(jié)構(gòu)復(fù)雜，但抗癌作用機制獨特，能夠促進微管聚合并抑制微管解聚(Horwitz SB，F(xiàn)ant J，Schiff PB.Promoton of microtubule assembly in vitro by taxol.Nature，1979，277，665)。經(jīng)深入研究發(fā)現(xiàn)其具有廣譜抗癌活性，已經(jīng)在世界多國批準上市，臨床上用于治療卵巢癌、乳腺癌、肺癌等疾病。但該藥制劑采用聚乙氧代蓖麻油(cremophore EL)作為增溶劑，在臨床應(yīng)用時易引起過敏性反應(yīng)。因此提高紫杉醇的溶解性和開發(fā)安全有效的臨床制劑成為人們研究的重點。多西他賽(taxotere)是通過結(jié)構(gòu)改造合成出來的紫杉醇衍生物，它具有較好的生物利用度，抗癌活性優(yōu)于紫杉醇，且毒副作用較小，水溶性增加使其易制成制劑，目前已在40多個國家上市，成為腫瘤治療的一線用藥。專利WO9638138(Protaxel，Noveltaxoids，Biophysica Foundation)，WO98/58927(巴克·諾頓藥物有限公司)，CN00115426.5(紫杉醇的多羥基水溶性衍生物及其制備方法，復(fù)旦大學(xué))公開了幾種新型的可溶性紫杉醇衍生物，用于治療腫瘤或其它紫杉醇敏感型疾病，但至今仍未發(fā)展成臨床治療藥物。因此，研究開發(fā)水溶性好、高效低毒的紫杉醇衍生物仍具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的一個技術(shù)問題是提供一種水溶性好的新的紫杉醇衍生物。
本發(fā)明要解決的另一個技術(shù)問題是提供制備這種新的紫杉醇衍生物的方法。
本發(fā)明要解決的又一個技術(shù)問題是提供一種藥物組合物，其中包括作為活性成份的通式(I)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明要解決的再一個技術(shù)問題是提供一種新的紫杉醇衍生物及其組合物作為抗腫瘤劑的應(yīng)用。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案，本發(fā)明的紫杉醇衍生物如通式(I)所示 其中R1選自O(shè)H、C2-C8酰氧基；R2和R3獨立的選自(CH2)nR′，其中n＝0-6，R′選自C1-C8烷基，C2-C8鏈烯基，C2-C8炔基，環(huán)烷基，取代或非取代的芳基，取代或非取代的雜環(huán)芳基；所述芳基及雜芳基上的取代基選自羥基，羥甲基，鹵素，C1-5烷基，C1-5烷氧基，C1-5鏈烯基，?；Ｑ趸?，硝基，氨基，C1-5烷胺基，酰胺基，氰基，疊氮基。
優(yōu)選的R1選自O(shè)H、乙酰氧基；優(yōu)選的n＝0、1；優(yōu)選的R′選自環(huán)烷基，鹵代芳基，C1-5烷氧基芳基，C1-5烷胺基芳基，優(yōu)選的R3是苯基；
更優(yōu)選的當n＝1時，R’是氯代芳基，氟代芳基，甲氧基取代芳基，二甲氨基取代芳基；噻唑烷基；更優(yōu)選的當n＝0時，R’是環(huán)戊烷、環(huán)己烷；最優(yōu)選的化合選自下列組群

表1紫杉醇衍生物

本發(fā)明涉及的紫杉醇衍生物的制備見合成路線圖
具有通式(I)的紫杉醇衍生物的制備，可通過適當活化的異絲氨酸鏈IV(R3＝Ph)酰化通式(II)中母核的13-位羥基得到，合成方法參見文獻(A.Commercon，D.Bezard，et al.Improved protection andesterification of a precursor of the taxotere and taxol side chains，Tetranedron Letters，33(36)，5185-5188，1992)。
具體而言，原料10-脫乙?；涂ǘII(II1，R1＝R4＝OH)，巴卡丁III(II2，R1＝AcO，R4＝OH)可從紅豆杉屬植物中分離提取(WaniMC，Taylor HL，et al.The isolation and structure of taxol，a novelantileukemic and antitumor agent from taus brevifolia.J.Am.Chem.Soc.93，2325，1971)。巴卡丁III也能夠從10-脫乙?；涂ǘII制備。R1為C2-C8酰氧基的化合物II能從10-脫乙酰基巴卡丁III(II1，R1＝R4＝OH)合成。
化合物II(R1＝OH或C2-C8酰氧基，R4＝OH)在7-位和10-位進行適當保護后與活化的異絲氨酸鏈IV(R3＝Ph)縮合、水解合成化合物(III，R1＝C2-C8酰氧基，或烷基甲硅烷氧基，2，2，2-三氯乙氧羰氧基，R4＝烷基甲硅烷氧基，2，2，2-三氯乙氧羰氧基)。再以化合物(III)為原料，與不同的醛、酮化合物反應(yīng)生成亞胺，再經(jīng)還原劑NaCNBH3還原，然后用已知方法鋅粉/醋酸脫掉保護基(參見上述文獻)，最后得到化合物I。
本發(fā)明的制備方法簡便，收率較高，可進行工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明還涉及以本發(fā)明化合物作為活性成份的藥物組合物。該藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。可通過將本發(fā)明化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成適于人或動物使用的任何劑型。本發(fā)明化合物在其藥物組合物中的含量通常為0.1-95重量％。
本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。
給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括o/w型、w/o型和復(fù)乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等；固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑等。
本發(fā)明化合物可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。
為了將本發(fā)明化合物制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種賦形劑，包括稀釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤劑可以是水、乙醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉等；潤滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。
還可以將片劑進一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。
為了將給藥單元制成膠囊劑，可以將有效成分本發(fā)明化合物與稀釋劑、助流劑混合，將混合物直接置于硬膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物先與稀釋劑、黏合劑、崩解劑制成顆?；蛭⑼?，再置于硬膠囊或軟膠囊中。用于制備本發(fā)明化合物片劑的各稀釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、助流劑品種也可用于制備本發(fā)明化合物的膠囊劑。
為將本發(fā)明化合物制成注射劑，可以用水、乙醇、異丙醇、丙二醇或它們的混合物作溶劑并加入適量本領(lǐng)域常用的增溶劑、助溶劑、pH調(diào)劑劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑。增溶劑或助溶劑可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羥丙基-β-環(huán)糊精等；pH調(diào)劑劑可以是磷酸鹽、醋酸鹽、鹽酸、氫氧化鈉等；滲透壓調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、磷酸鹽、醋酸鹽等。如制備凍干粉針劑，還可加入甘露醇、葡萄糖等作為支撐劑。
此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑或其它添加劑。
為達到用藥目的，增強治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。
本發(fā)明化合物藥物組合物的給藥劑量依照所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴重程度，患者或動物的個體情況，給藥途徑和劑型等可以有大范圍的變化。一般來講，本發(fā)明化合物的每天的合適劑量范圍為0.001-150mg/Kg體重，優(yōu)選為0.1-100mg/Kg體重，更優(yōu)選為1-60mg/Kg體重，最優(yōu)選為2-30mg/Kg體重。上述劑量可以一個劑量單位或分成幾個劑量單位給藥，這取決于醫(yī)生的臨床經(jīng)驗以及包括運用其它治療手段的給藥方案。
本發(fā)明的化合物或組合物可單獨服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。當本發(fā)明的化合物與其它治療藥物存在協(xié)同作用時，應(yīng)根據(jù)實際情況調(diào)整它的劑量。
本發(fā)明的優(yōu)點，本發(fā)明提供了一種可形成胺鹽的紫杉醇衍生物，該衍生物的側(cè)鏈含有二級胺基團，可和相應(yīng)的酸根生成鹽，提高藥物的溶解性，其水溶性比紫杉醇或多似紫杉醇好，增加生物利用度，與紫杉醇和多西他賽的抗腫瘤活性相似。
具體實施例方式
下面的實施例用來進一步說明本發(fā)明，但是這并不意味著對本發(fā)明的任何限制。
制備例1 制備10-脫乙?；?7，10-TROC-巴卡丁III(II1，R1＝R4＝TROC).
在干燥的反應(yīng)瓶中加入500mg(0.92mmol)10-脫乙?；涂ǘII，以10ml無水吡啶溶解，放置于冰鹽水中冷卻。向反應(yīng)液中滴加0.43ml(32mmol)2，2，2-三氯乙氧羰酰氯，滴加完畢后繼續(xù)反應(yīng)3小時，加水終止反應(yīng)。反應(yīng)液用乙酸乙酯50ml提取三次，合并有機液，用1N鹽酸及飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濃縮得黃色油狀物1.14g，經(jīng)硅膠柱分離，以甲醇重結(jié)晶得到715mg白色固體。收率87％，熔點233-235℃。
制備例2 制備7-TROC-巴卡丁III(II2，R1＝OAc，R4＝TROC).
7.38g(12.6mmol)巴卡丁III，3.4ml(25.2mmol)2，2，2-三氯乙氧羰酰氯，其他條件同制備例1，得到6g白色固體。收率63％，熔點232-235℃。
制備例3 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-氨基-丙?；鵠-10-脫乙?；?7，10-TROC-巴卡丁III(III1，R1＝R4＝TROC，R3＝Ph).
在干燥的反應(yīng)瓶中加入600mg(0.673mmol)10-脫乙?；?7，10-TROC-巴卡丁III(II1，R1＝R4＝TROC)，以30ml無水甲苯溶解，再加入345mg(1.08mmol)(4S，5R)-N-叔丁氧羰基-2，2-二甲基-苯基-5-噁唑烷羧酸，173mg(0.84mmol)二環(huán)己基碳化二亞胺，41mg(0.34mmol)N，N-二甲基氨基吡啶，在80℃反應(yīng)4小時，用水洗滌反應(yīng)液，有機層濃縮至干。向剩余物加7ml甲酸，室溫攪拌至固體溶解，繼續(xù)室溫反應(yīng)5小時。然后將反應(yīng)液加入含18g碳酸氫鈉的冰水中，用二氯甲烷60ml提取三次，合并有機層，再經(jīng)飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濃縮得黃色油狀物700mg，經(jīng)硅膠柱分離，以甲醇/水重結(jié)晶得到520mg白色固體。收率72.9％。
制備例4 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-氨基-丙?；鵠-7-TROC-巴卡丁III(III2，R1＝OAc，R4＝TROC，R3＝Ph).
3g(3.95mmol)7-TROC-巴卡丁III(II2，R1＝OAc，R4＝TROC)，2.0g(6.32mmol)(4S，5R)-N-叔丁氧羰基-2，2-二甲基-苯基-5-噁唑烷羧酸，2.0g(9.8mmol)二環(huán)己基碳化二亞胺，0.48g(3.95mmol)N，N-二甲基氨基吡啶，同上法制備，得到2.7g白色固體。收率47.7％。
實施例1 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-對甲氧基芐基胺-丙?；鵠-10-脫乙?；?巴卡丁III(I1，R1＝R4＝OH，R2＝對甲氧基芐基，R3＝Ph).
取制備例3中400mg(0.38mmol)III1，124mg(0.91mmol)對甲氧基苯甲醛，36mg(0.152mmol)樟腦磺酸，溶于無水二氯甲烷，室溫下攪拌1小時，再加20mg(0.3mmol)NaCNBH3，反應(yīng)4小時。用飽和碳酸氫鈉，食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，經(jīng)硅膠柱分離，得到120mg白色固體。向固體中加冰醋酸3.7ml，鋅粉119mg，50℃反應(yīng)1小時。過濾，濾液用飽和碳酸氫鈉中和，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，得到37mg白色固體。收率12％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)6.84-8.08(m，14H，Ph-H)，5.95(t，1H，J＝8.7Hz，H13)，5.57(d，1H，J＝7.2Hz，H2)，5.17(s，1H，H10)，4.88(d，1H，J＝8.1Hz，H5)，4.79(m，1H，H7)，4.10，4.24(2d，2H，J＝8.1Hz，H20)，4.15(m，1H，H3’)，3.79(m，2H，H2’，H3)，3.74(s，3H，OCH3)，3.70，3.60(2d，2H，J＝11.4Hz，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)828.4(M+，7)，302.1(8)，168.3(18)，121.0(100)。
實施例2 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-間氟芐基胺-丙?；鵠-10-脫乙?；?巴卡丁III(I2，R1＝R4＝OH，R2＝間氟芐基，R3＝Ph).
和實施例1相同的制備方法，不同在于，用113mg(0.91mmol)間氟苯甲醛替換124mg(0.91mmol)對甲氧基苯甲醛，得到36mg白色固體。收率12％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.02-8.08(m，14H，Ph-H)，5.99(t，1H，J＝8.7Hz，H13)，5.57(d，1H，J＝7.2Hz，H2)，5.22(s，1H，H10)，4.90(d，1H，J＝7.8Hz，H5)，4.78(m，1H，H7)，4.11，4.28(2d，2H，J＝9.0Hz，H20)，4.36(m，1H，H3’)，3.97，3.79(m，2H，H2’，H3)，3.53，3.78(2d，2H，J＝13.5Hz，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)816.7(M+，100)，553.6(44)，319.1(45)，277.3(53)。
實施例3 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-芐基胺-丙?；鵠-10-脫乙酰基-巴卡丁III(I3，R1＝R4＝OH，R2＝芐基，R3＝Ph).
和實施例1相同的制備方法，不同在于，用0.91mmol苯甲醛替換0.91mmol對甲氧基苯甲醛，得到50mg白色固體。收率16.6％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.29-8.06(m，15H，Ph-H)，6.02(t，1H，J＝9.3Hz，H13)，5.60(d，1H，J＝6.9Hz，H2)，5.18(s，1H，H10)，4.90(d，1H，J＝9.3Hz，H5)，4.48(m，1H，H7)，4.13，4.26(2d，2H，J＝8.1Hz，H20)，3.92，4.19(m，2H，H2’，H3’)，3.79，4.04(2d，2H，J＝6.6Hz，NHCH2)，3.58(d，1H，J＝12.9Hz，H3)，.
FAB-MS，m/e(％)798.3(M++1，8)，300.7(8)，272.1(100)，196.1(91)。
實施例4 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-噻唑亞甲基胺-丙酰基]-10-脫乙酰基-巴卡丁III(I4，R1＝R4＝OH，R2＝噻唑亞甲基，R3＝Ph).
和實施例1相同的制備方法，不同在于，用0.91mmol噻唑甲醛替換0.91mmol對甲氧基苯甲醛，得到40mg白色固體。收率17.5％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)6.92-8.09(m，13H，Ph-H，雜芳氫)，6.00(t，1H，H13)，5.58(d，1H，J＝7.2Hz，H2)，5.27(s，1H，H10)，4.89(d，1H，J＝8.7Hz，H5)，4.65(m，1H，H7)，4.11，4.28(2d，2H，J＝8.1Hz，H20)，4.36(m，1H，H3’)，4.16(m，2H，H2’，H3’)，3.78(d，1H，J＝4.5Hz，H3)，4.12，3.86(2d，2H，J＝14.1Hz，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)804.2(M+，29)，559.2(9)，278.0(100)，202.1(65)。
實施例5 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-對二甲胺基芐基胺-丙?；鵠-10-脫乙酰基-巴卡丁III(I5，R1＝R4＝OH，R2＝＝對二甲胺基芐基，R3＝Ph).
和實施例1相同的制備方法，不同在于，用0.91mmol對二甲胺基苯甲醛替換0.91mmol對甲氧基苯甲醛，得到35mg白色固體。收率14.7％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.32-8.06(m，14H，Ph-H，雜芳氫)，5.95(m，1H，H13)，5.54(d，1H，J＝6.9Hz，H2)，5.25(s，1H，H10)，4.86(d，1H，J＝9.9Hz，H5)，4.80(m，1H，H7)，4.12-4.33(m，3H，H20，H2’，H3’)，3.6(m，3H，H3，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)840.3(M+，24)，634.5(18)，390.1(25)，300.7(100)。
實施例6 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-對氯芐基胺-丙?；鵠-10-脫乙酰基-巴卡丁III(I6，R1＝R4＝OH，R2＝對氯芐基，R3＝Ph).
和實施例1相同的制備方法，不同在于，用0.91mmol對氯苯甲醛替換0.91mmol對甲氧基苯甲醛，得到80mg白色固體。收率34％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.29-8.12(m，14H，Ph-H，)，5.96(t，1H，H13)，5.57(d，1H，J＝7.2Hz，H2)，5.30(s，1H，H10)，4.90(d，1H，J＝8.7Hz，H5)，4.40(m，1H，H7)，4.09，4.30(2d，2H，J＝8.1Hz，H20)，4.16(m，2H，H2’，H3’)，3.69(m，1H，H3)，3.75(m，2H，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)832.2(M+，60)，391.2(13)，306.0(23)，185.1(63)，137(42)，93.0(100)。
實施例7 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-環(huán)戊基胺-丙?；鵠-10-脫乙?；?巴卡丁III(I7，R1＝R4＝OH，R2＝環(huán)戊基，R3＝Ph).
和實施例1相同的制備方法，不同在于，用0.91mmol環(huán)戊醛替換0.91mmol對甲氧基苯甲醛，得到30mg白色固體。收率20.5％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.31-8.09(m，10H，Ph-H)，5.97(t，1H，J＝8.7Hz，H13)，5.62(d，1H，J＝6.9Hz，H2)，5.28(s，1H，H10)，4.88(d，1H，J＝9.3Hz，H5)，4.59(m，1H，H7)，4.09，4.33(2d，2H，J＝8.7Hz，H20)，4.18(m，2H，H2’，H3’)，3.76(d，1H，J＝7.2Hz，H3).
FAB-MS，m/e(％)776.4(M+，29)，250.2(100)，185.1(45)，105.0(62)。
實施例8 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-環(huán)己基胺-丙酰基]-10-脫乙?；?巴卡丁III(I8，R1＝R4＝OH，R2＝環(huán)己基，R3＝Ph).
和實施例1相同的制備方法，不同在于，用0.91mmol環(huán)己醛替換0.91mmol對甲氧基苯甲醛，得到40mg白色固體。收率26.8％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.29-8.06(m，10H，Ph-H)，6.07(t，1H，J＝9.0Hz，H13)，6.62(d，1H，J＝7.2Hz，H2)，5.21(s，1H，H10)，4.92(d，1H，J＝8.1Hz，H5)，4.45(m，1H，H7)，4.14，4.24(2d，2H，J＝8.7Hz，H20)，4.21(m，2H，H2’，H3’)，3.84(d，1H，J＝7.2Hz，H3).
FAB-MS，m/e(％)790.4(M+，32)，264.2(100)，185.1(66)，93.1(75)。
實施例9 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-芐基胺-丙?；鵠-巴卡丁III(I9，R1＝OAc，R4＝OH，R2＝芐基，R3＝Ph).
取制備例4中300mg(0.325mmol)III2，苯甲醛83mg(0.78mmol)，樟腦磺酸30mg(0.13mmol)，溶于無水二氯甲烷，室溫下攪拌1小時，再加16mg(0.26mmol)NaCNBH3，反應(yīng)4小時。用飽和碳酸氫鈉，食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，經(jīng)硅膠柱分離，得到120mg白色固體。向固體中加冰醋酸12ml，鋅粉380mg，50℃反應(yīng)1小時。過濾，濾液用飽和碳酸氫鈉中和，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，得到103mg白色固體。收率37.9％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.33-8.09(m，15H，Ph-H)，6.27(s，1H，H10)，5.99(t，1H，J＝8.7Hz，H13)，5.57(d，1H，J＝6.6Hz，H2)，4.91(d，1H，J＝9.9Hz，H5)，4.78(m，1H，H7)，4.09，4.25(2d，2H，J＝8.7Hz，H20)，4.35(m，1H，H3’)，3.96，3.77(m，2H，H2’，H3)，3.63-3.73(m，2H，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)841(M+，8)，403.1(13)，272.1(46)，196.1(72)，91.0(100)。
實施例10 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-對氯芐基胺-丙?；鵠-巴卡丁III(I10，R1＝OAc，R4＝OH，R2＝對氯芐基，R3＝Ph).
和實施例9相同的制備方法，不同在于，用0.78mmol對氯苯甲醛替換0.78mmol苯甲醛，得到59mg白色固體。收率20.8％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.21-8.09(m，14H，Ph-H)，6.26(s，1H，H10)，5.94(t，1H，J＝8.7Hz，H13)，5.56(d，1H，J＝6.9Hz，H2)，5.28(m，1H，H7)，4.93(d，1H，J＝9.3Hz，H5)，4.08，4.29(2d，2H，J＝8.4Hz，H20)，4.28(m，2H，H2’，H3’)，4.07(m，H，H3)，3.59-3.80(m，2H，J＝6.9Hz，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)874.2(M++1，13)，391.2(7)，246.0(14)，137.0(42)，93.0(100)。
實施例11 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-間氟芐基胺-丙?；鵠-巴卡丁III(I11，R1＝OAc，R4＝OH，R2＝間氟芐基，R3＝Ph).
和實施例9相同的制備方法，不同在于，用0.78mmol間氟苯甲醛替換0.78mmol苯甲醛，得到54mg白色固體。收率19％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.08-8.12(m，14H，Ph-H)，6.27(s，1H，H10)，5.96(m，1H，H13)，5.59(d，1H，J＝7.2Hz，H2)，4.97(m，1H，H7)，4.94(d，1H，J＝9.0Hz，H5)，4.08，4.27(2d，2H，J＝8.4Hz，H20)，3.79，4.18(m，2H，H2’，H3’)，4.11(d，H，J＝8.7Hz，H3)，3.63-3.80(m，2H，J＝6.9Hz，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)870.3(M+，16)，302.1(6)，226.1(14)，121.0(100)，105.0(29)。
實施例12 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-對甲氧基芐基胺-丙酰基]-巴卡丁III(I12，R1＝OAc，R4＝OH，R2＝對甲氧基芐基，R3＝Ph).
和實施例9相同的制備方法，不同在于，用0.78mmol對甲氧基苯甲醛替換0.78mmol苯甲醛，得到75mg白色固體。收率26.6％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.02-8.07(m，14H，Ph-H)，6.22(s，1H，H10)，5.92(t，1H，H13)，5.63(d，1H，J＝7.2Hz，H2)，5.27(m，1H，H7)，4.92(d，1H，J＝9.3Hz，H5)，4.08，4.26(2d，2H，J＝8.1Hz，H20)，4.09，4.40(m，2H，H2’，H3’)，3.81(s，3H，OCH3)，3.63(d，H，J＝6.9Hz，H3)，3.76(m，2H，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)870.3(M+，13)，302.1(5)，226.1(12)，121.0(100)，105.0(28)。
實施例13 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-噻唑亞甲基胺-丙?；鵠-巴卡丁III(I13，R1＝OAc，R4＝OH，R2＝噻唑亞甲基，R3＝Ph).
和實施例9相同的制備方法，不同在于，用0.78mmol噻唑甲醛替換0.78mmol苯甲醛，得到39mg白色固體。收率14.2％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)6.88-8.08(m，13H，Ph-H)，6.24(s，1H，H10)，6.05(t，1H，H13)，5.60(d，1H，J＝6.9Hz，H2)，4.92(d，1H，J＝7.2Hz，H5)，4.40(m，1H，H7)，4.13，4.26(2d，2H，J＝9.0Hz，H20)，4.10，4.40(m，2H，H2’，H3’)，3.68(d，H，J＝6.9Hz，H3)，3.78(m，2H，J＝14.1Hz，NHCH2).
FAB-MS，m/e(％)846.2(M+，19)，278.0(30)，202.0(45)，132.9(55)，105.0(85)，97.0(100)。
實施例14 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-環(huán)己基胺-丙酰基]-巴卡丁III(I14，R1＝OAc，R4＝OH，R2＝環(huán)己基，R3＝Ph).
和實施例9相同的制備方法，不同在于，用0.78mmol環(huán)己醛替換0.78mmol苯甲醛，得到65mg白色固體。收率23.9％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.30-8.06(m，10H，Ph-H)，6.25(s，1H，H10)，5.94(t，1H，H13)，5.56(d，1H，J＝7.2Hz，H2)，5.28(m，1H，H7)，4.93(d，1H，J＝8.7Hz，H5)，4.09，4.26(2d，2H，J＝8.4Hz，H20)，4.33，4.60(m，2H，H2’，H3’)，3.65(d，H，J＝6.9Hz，H3).
FAB-MS，m/e(％)832.3(M+，20)，264.1(80)，188.1(100)，132.9(24)，105.0(99)。
實施例15 制備13-[(2′R，3′S)-3′-苯基-2′-羥基-3′-環(huán)戊基胺-丙?；鵠-巴卡丁III(I15，R1＝OAc，R4＝OH，R2＝環(huán)戊基，R3＝Ph).
和實施例9相同的制備方法，不同在于，用0.78mmol環(huán)戊醛替換0.78mmol苯甲醛，得到60mg白色固體。收率22.6％。
1H-NMR(300MHz CDCl3)7.32-8.06(m，10H，Ph-H)，6.32(s，1H，H10)，5.99(t，1H，H13)，5.58(d，1H，J＝6.9Hz，H2)，5.22(m，1H，H7)，4.94(d，1H，J＝8.7Hz，H5)，4.09，4.26(2d，2H，J＝8.4Hz，H20)，4.37，4.49(m，2H，H2’，H3’)，3.67(d，H，J＝6.9Hz，H3).
FAB-MS，m/e(％)818.2(M+，12)，250.1(61)，204.1(12)，174.1(100)，105.0(92)。
藥理實驗實驗例1將本發(fā)明合成的化合物進行九種腫瘤細胞系和人正常細胞的細胞毒性篩選，與紫杉醇(taxol)和多似紫杉醇(taxotere)相比較。采用的方法是MTT(四氮唑)法。
將各種對數(shù)生長期的人癌細胞接種于96孔板，每孔800-1500個細胞，培養(yǎng)24小時后加藥，一般每個樣品至少5個濃度，每個濃度設(shè)3個平行孔.在RPMI，1640(GIBCO產(chǎn)品)(含10％小牛血清)培養(yǎng)基、37℃、2％CO2條件下培養(yǎng)4天加(Fluka產(chǎn)品)，用Bio-Red 450酶標儀，在450和570nm雙波長檢測，計算細胞生長抑制率，并求IC50μM(半數(shù)抑制濃度)。具體實驗結(jié)果如下(表2)這些化合物都具有一定的細胞毒作用，尤其是化合物4和化合物13的作用與紫杉醇和多似紫杉醇相近。
表2 化合物I1-15，taxotere，taxol的細胞毒作用(IC50μM)

權(quán)利要求
1.通式(I)所示的紫杉醇類似物 其中R1選自O(shè)H、C2-C8酰氧基；R2和R3獨立的選自(CH2)nR′，其中n＝0-6，R′選自C1-C8烷基，C2-C8鏈烯基，C2-C8炔基，環(huán)烷基，取代或非取代的芳基，取代或非取代的雜環(huán)芳基；所述芳基及雜芳基上的取代基選自羥基，羥甲基，鹵素，C1-5烷基，C1-5烷氧基，C1-5鏈烯基，?；?，酰氧基，硝基，氨基，C1-5烷胺基，酰胺基，氰基，疊氮基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其特征在于，R1選自O(shè)H、乙酰氧基；n＝0、1；R′選自環(huán)烷基，鹵代芳基，C1-5烷氧基芳基，C1-5烷胺基芳基，R3是苯基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其特征在于，當n＝1時，R’選自氯代芳基，氟代芳基，甲氧基取代芳基，二甲氨基取代芳基；噻唑烷基；當n＝0時，R’選自環(huán)戊烷、環(huán)己烷。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其特征在于，所述化合物選自下列組群
5.制備權(quán)利要求1-4化合物的方法，其特征在于，包括如下步驟
A)適當活化的異絲氨酸側(cè)鏈按照已知的方法引入具有通式(II)母核的13-位；B)側(cè)鏈水解開環(huán)；C)與不同的醛或酮反應(yīng)，然后用還原劑還原，再用常規(guī)的方法脫保護，得到相應(yīng)的化合物(I)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其特征在于，所述的還原劑是含硼試劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6中所示的方法，所述的含硼試劑選自NaCNBH3、NaBH(OAc)3。
8.一種藥物組合物，含有藥效學(xué)上可接受的載體，其特征在于，含有至少一種權(quán)利要求1-4的化合物。
9.權(quán)利要求1-4中所示的任一化合物在制備治療癌癥的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一類側(cè)鏈含有二級胺基團，水溶性好的新的紫杉醇衍生物，如通式(I)所示，這類化合物其制備方法，含有這類化合物的藥物組合物，以及化合物用于制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。
文檔編號A61K31/337GK101062925SQ200610078949
公開日2007年10月31日 申請日期2006年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月28日
發(fā)明者吳克美, 葉仙蓉, 籍秀娟, 張福榮, 王鳳 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所