專利名稱：紫杉醇－脂肪酸結(jié)合物及其藥物組合物的制作方法
描述于本申請(qǐng)中的發(fā)明是在國(guó)家健康協(xié)會(huì)的基金(the NationalInstitutes of Health)支持下做出的，批準(zhǔn)號(hào)為R01 GM427980和R01CA103314。美國(guó)政府享有本發(fā)明的某些權(quán)利。
本申請(qǐng)要求于2003年10月30日提交的系列號(hào)為60/515,783的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)，將其全部?jī)?nèi)容通過引證結(jié)合于此作為參考。
背景技術(shù)：
帕利他西(紫素或紫杉醇，paclitaxel)(Taxol)和多西他賽(docetaxel)(Taxotere)是準(zhǔn)許臨床用于對(duì)人的腫瘤進(jìn)行化療的兩種最重要的抗腫瘤藥。帕利他西是天然產(chǎn)生的紫杉烷(taxane)，其最初是從太平洋紫杉樹(短葉紅豆杉樹，Taxus brevifolia)的樹皮中分離出來的。
多西他賽是帕利他西的半合成同源物。多西他賽是由FDA批準(zhǔn)用于臨床使用的第一個(gè)“紫杉醇”，即類紫杉醇化合物。
這兩種第一代紫杉烷抗癌劑已在臨床上用來治療各種腫瘤，包括轉(zhuǎn)移性乳癌、晚期卵巢癌、頭頸癌、非小細(xì)胞肺癌、以及卡波西肉瘤。盡管帕利他西和多西他賽都對(duì)部分腫瘤具有有效的抗腫瘤活性，但是它們對(duì)其他的如結(jié)腸癌、胰腺癌、黑素瘤癌、以及腎癌沒有表現(xiàn)出效力。
另外，第一代紫杉烷在治療上存在不希望的副作用以及多藥物抗性(MDR)。MDR通常歸因于過度表達(dá)P-糖蛋白(Pgp)的細(xì)胞。Pgp是一種有效的ATP結(jié)合盒(ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(轉(zhuǎn)運(yùn)子)，其外流(effux)疏水的抗癌劑，包括帕利他西和多西他賽。
目前的癌癥化療是基于這樣一個(gè)前提快速增殖的腫瘤細(xì)胞比健康細(xì)胞更可能被細(xì)胞毒性藥物殺死。然而，事實(shí)上，目前的藥物對(duì)腫瘤組織的活性與健康組織相比差別相對(duì)很小。
例如，眾所周知，代表性的細(xì)胞毒性化療藥劑像帕利他西、順鉑、阿霉素、以及其它廣泛使用的抗癌藥物不能從正常分裂的細(xì)胞中辨別癌細(xì)胞。因此，在癌癥化療中產(chǎn)生與這些藥物有關(guān)的各種不希望的副作用。
因此，在癌癥化療中的長(zhǎng)期挑戰(zhàn)是開發(fā)對(duì)腫瘤細(xì)胞比對(duì)健康細(xì)胞具有更大選擇性的新的細(xì)胞毒性劑。
已經(jīng)顯示出，用作生化前體和能量源的特殊天然脂肪酸被腫瘤大量地吸收。這些脂肪酸包括ω-3脂肪酸，如二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、以及α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸(LNA)。
DHA是細(xì)胞膜的構(gòu)成成分，并用作代謝途徑和生化通道的前體。其也是在人乳中發(fā)現(xiàn)的脂肪酸，并由美國(guó)食品及藥品管理局歸類為一種營(yíng)養(yǎng)添加劑。
美國(guó)專利第5,795,909、5,919,815以及6,080,877披露了結(jié)合于第一代紫杉烷抗癌劑如帕利他西和多西他賽的DHA。DHA-帕利他西結(jié)合物(軛合物)在動(dòng)物研究中已經(jīng)顯示出抗腫瘤活性。DHA-帕利他西結(jié)合物在降低不希望的副作用方面的能力歸因于該結(jié)合物選擇性瞄準(zhǔn)腫瘤細(xì)胞以及與未結(jié)合的帕利他西相比使用較低的劑量。
例如，據(jù)報(bào)道(Bradley et al.Clinical Cancer Research(2000)7，3229-3238)，DHA-帕利他西導(dǎo)致麥迪遜109個(gè)皮下肺腫瘤模型中的肺腫瘤異種移植完全消退的最佳劑量為120mg/kg。該消退在所有小鼠體內(nèi)持續(xù)六十天。在小鼠體內(nèi)，DHA-帕利他西表現(xiàn)出比帕利他西低74倍的分布體積和低94倍的清除率。DHA-帕利他西在血漿中是穩(wěn)定的，并且在小鼠血漿中長(zhǎng)時(shí)間地保持高濃度。相反，以最佳劑量20mg/kg的帕利他西，對(duì)任何小鼠體內(nèi)的腫瘤既不引起完全消退也不引起部分消退。該結(jié)合物藥物作為細(xì)胞毒性藥劑似乎是無活性的，直到通過腫瘤細(xì)胞代謝釋放出帕利他西。
因此，DHA-帕利他西比單獨(dú)的帕利他西的毒性低。從而，可以給予更高摩爾劑量的該結(jié)合物?；谠趧?dòng)物模型中證實(shí)的效能，DHA-帕利他西進(jìn)入了人類臨床試驗(yàn)，并且目前處于第III期。
根據(jù)所提出的藥物遞送機(jī)理，DHA-帕利他西由腫瘤細(xì)胞吸收、內(nèi)在化、并由癌細(xì)胞中的酯酶慢慢水解而釋放活性細(xì)胞毒性劑(例如，帕利他西)。但是，如果癌細(xì)胞過度表達(dá)活性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(即，“流出泵(efflux pump)”)，那么即使當(dāng)從DHA中慢慢被釋放時(shí)，帕利他西分子也會(huì)被流出泵捕獲并從癌細(xì)胞中除去。因此，DHA-帕利他西的效能可能致使不足以活性地對(duì)抗抗藥性癌癥。
在本發(fā)明人的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系(SAR)研究已經(jīng)表明帕利他西在C-2、C-3’、以及C-3’N位置的苯基部分對(duì)它的有效細(xì)胞毒性和微管蛋白結(jié)合能力是不必要的(Ojima et al.J.Med.Chem.(1996)39，3889-3896)。本發(fā)明人和他的同事發(fā)現(xiàn)在C-3’添加較簡(jiǎn)單的烷基或烯基取代基顯著增加對(duì)藥物敏感性以及抗藥性癌細(xì)胞系的活性。更重要地，在C-10和C-3’位置的適當(dāng)修飾已經(jīng)導(dǎo)致“第二代”紫杉醇抗癌劑的開發(fā)。這一系列紫杉醇的最重要的結(jié)果是其對(duì)藥物敏感的人癌細(xì)胞系實(shí)質(zhì)增加的效能以及對(duì)于抗藥性的、表達(dá)MDR表型的細(xì)胞系的顯著活性(例如，對(duì)人的乳癌細(xì)胞系MCF7-MDR的IC50＝2.1-9.1nM；帕利他西IC50＝300-800nM)。第二代紫杉醇還包括一系列具有來源于14-羥基漿果赤霉素III的五環(huán)二萜烯骨架的紫杉醇。
因此，與帕利他西和多西他賽明顯不同，包括ortataxel(在包括Bay59-8862，IDN5109以及SB-T-101131的出版物中的代碼名稱)、SB-T-1213以及SB-T-121303的第二代紫杉醇對(duì)表達(dá)MDR表型的抗藥性癌細(xì)胞表現(xiàn)出優(yōu)異的活性。例如，ortataxel對(duì)小鼠體內(nèi)的人結(jié)腸癌SW-620異種移植表現(xiàn)出顯著的活性(Vredenburg et al.J.Nat’l Cancer Inst.(2001)93，1234-1245)。
但是，這些高度有效的第二代紫杉醇不是腫瘤特效藥。因此，在臨床使用期間會(huì)產(chǎn)生各種不希望的副作用。
因此，需要改進(jìn)的抗癌藥物，用于有效地治療所有類型的癌癥，包括多藥物抗性腫瘤，同時(shí)減少副作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明通過提供改進(jìn)的結(jié)合物(軛合物)而滿足了上述需要。改進(jìn)的結(jié)合物包括第二代紫杉醇和ω-3脂肪酸。該改進(jìn)涉及第二代紫杉醇的使用。
在另一實(shí)施例中，本發(fā)明提供了改進(jìn)的包括一種結(jié)合物的藥物組合物。該結(jié)合物包括第二代紫杉醇和ω-3脂肪酸。該改進(jìn)涉及第二代紫杉醇的使用。
在又一實(shí)施例中，本發(fā)明提供了改進(jìn)的用于在對(duì)其有需要的人類體內(nèi)治療癌癥的方法。該方法包括給予有效量的結(jié)合物。該結(jié)合物包括第二代紫杉醇和ω-3脂肪酸。該改進(jìn)涉及第二代紫杉醇的使用。


圖1DHA-紫杉醇結(jié)合物(軛合物)對(duì)人結(jié)腸腫瘤異種移植(pgp+)DLD-1的效應(yīng)。
圖2DHA-紫杉醇結(jié)合物對(duì)人卵巢腫瘤外源移植(exograft)(pgp-)A121的效應(yīng)。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明涉及改進(jìn)的紫杉醇和ω-3脂肪酸的結(jié)合物。本發(fā)明中有用的紫杉醇是通式I的第二代紫杉醇， 化學(xué)式I其中FA是一ω-3脂肪酸殘基；R1表示C1-C6烷基或鏈烯基、二烷基氨基或烷基氨基、或烷氧基；R2表示C3-C5烷基、或鏈烯基、或三氟甲基；
R3表示H、甲基、甲氧基、氯、氟、或疊氮基；R4表示C3-C6環(huán)烷基、或環(huán)烯基、或烷氧基；R5和R6都表示氫、或R5和R6一起表示氧羰基，由此形成環(huán)碳酸酯(參見化學(xué)式II)。
第二代紫杉醇的實(shí)例包括ortataxel、SB-T-1103、SB-T-11033、SB-T-1104、SB-T-11043、SB-T-1107、SB-T-11073、SB-T-1213、SB-T-121303、SB-T-1214、SB-T-121403、SB-T-1216、SB-T-121603、SB-T-1217、SB-T-121703、SB-T-12821、以及SB-T-128221-3，其結(jié)構(gòu)在下面示出(參見化學(xué)式II和III) 化學(xué)式IIOrtataxel(Bay59-8862；IDN5109；SB-T-101131) 化學(xué)式IIISB-T-1103R1＝C2H5，R2＝2-甲基丙基；R3＝HSB-T-11033R1＝C2H5，R2＝2-甲基丙基；R3＝CH3OSB-T-1104R1＝環(huán)丙基，R2＝2-甲基丙基；R3＝HSB-T-11043R1＝環(huán)丙基，R2＝2-甲基丙基；R3＝CH3O
SB-T-1107R1＝CH3O，R2＝2-甲基丙基；R3＝HSB-T-11073R1＝CH3O，R2＝2-甲基丙基；R3＝CH3OSB-T-1213R1＝C2H5，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝HSB-T-121303R1＝C2H5，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝CH3OSB-T-1214R1＝環(huán)丙基，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝HSB-T-121403R1＝環(huán)丙基，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝CH3OSB-T-1216R1＝(CH3)2N，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝HSB-T-121603R1＝(CH3)2N，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝CH3OSB-T-1217R1＝CH3O，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝HSB-T-121703R1＝CH3O，R2＝2-甲基-1-丙烯基；R3＝CH3OSB-T-12821R1＝(CH3)2N，R2＝三氟甲基；R3＝HSB-T-128221-3R1＝C2H5，R2＝三氟甲基；R3＝CH3O本發(fā)明中有用的第二代紫杉醇的合成和結(jié)構(gòu)由Ojima等人披露于其出版物(Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999)9，3423-3428；J.Med.Chem.(1996)39，3889-3896；J.Med.Chem.(1997)40，267-278；Bioorg.Med.Chem.Lett.，(1997)7，133-138)和美國(guó)專利第6,096,909、6,100,411、6,458,976以及6,500,858號(hào)中。將在上述這些論文和專利中披露的合成和結(jié)構(gòu)通過引證結(jié)合于此作為參考。例如，在Ojima等人的出版物(Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999)9，3423-3428)中的表1列出的化合物7a-7q；表2列出的化合物1a-1s、3a-3s以及4a-4s；在Ojima等人的出版物(J.Med.Chem.(1996)39，3889-3896)中的表3列出的化合物5a-5e及5s；在Ojima等人的出版物(Bioorg.Med.Chem.Lett.，(1997)7，133-138)中的表2列出的化合物7a-7i；以及在Ojima等人的出版物(J.Med.Chem.(1997)40，267-278)中的表6列出的化合物17b-17g、22b、22d、以及22e的合成和結(jié)構(gòu)通過引證結(jié)合于此作為參考。
將第二代紫杉醇結(jié)合于(共軛于)ω-3脂肪酸。任何ω-3脂肪酸都可以根據(jù)本發(fā)明來使用。ω-3脂肪酸的實(shí)例包括二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、以及α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸(α-十八碳三烯酸，LNA)。這些脂肪酸的結(jié)構(gòu)表示如下(參見化學(xué)式IV、V以及VI) 化學(xué)式IV二十二碳六烯酸(DHA) 化學(xué)式V二十碳五烯酸(EPA) 化學(xué)式VIα-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸(LNA)DHA可以從例如魚油中分離，或者可以化學(xué)合成。優(yōu)選地，DHA由生物合成產(chǎn)生，如利用在美國(guó)專利第5,374,657、5,492,938、5,407,957以及5,397,591號(hào)中披露的方法，將其說明書通過引證結(jié)合于此作為參考。DHA也可以例如從馬里蘭州哥倫比亞的瑪爾特克生物科學(xué)公司(Martek Biosciences Corporation，Columbia，MD)購買。
EPA可以從例如海生動(dòng)物油(marine oil，即，魚和貝類)中分離。海生動(dòng)物油由多脂魚的軀體、少脂肪魚的肝、以及由海生哺乳動(dòng)物如鯨和海豹產(chǎn)生。工業(yè)魚油包括尤其是鳳尾魚(Engraulis spp.)、鱗魚(Mallotus spp.)、鱈魚和鱈魚的肝(Gadus spp.)、鯡魚(青魚，Cupea spp.)、金槍魚(horse mackerel，Scomber spp.)、鮪魚(Euthynnusspp.)、鯡魚(Brevoortia spp.)、鮭魚(Salmo salar，syn.Oncorhynchusspp.)、虹鱒魚(Oncorhynchus mykiss)、以及沙丁魚(Sardina spp.)的油。海生動(dòng)物油構(gòu)成了世界范圍的食用油生產(chǎn)的重要部分。
可選替換地，EPA可以用任何本領(lǐng)域已有的方法進(jìn)行合成。例如，EPA可以通過食物L(fēng)NA的去飽和及延長(zhǎng)來合成(A.Kamal-Eldinand N.V.Yanishlieva，Eur.J.Lipid Sci.Technol.(2002)，104，825-836)。EPA也可以從例如Sigma-Aldrich化學(xué)品公司(St.Louis，MO)商購得到。
LNA的主要來源包括亞麻子(Linum usitatissimum)、紫蘇(Perilla frutescens)、大豆(Glycine max)、油菜籽/菜籽油(canola，Brassica spp.)、以及胡桃(Juglans regia)的種子和油(R.A.Riemersma，Eur.J.Lipid Sci.Technol.(2001)103，372-373；A.Kamal-Eldin and R.Andersson，J.Am.Oil Chem.Soc.(1997)74，375-380；G.P.Savage，P.C.Dutta，and D.L.McNeil，J.Am.Oil Chem.Soc.(1999)76，1059-1063)。其他的堅(jiān)果、豆類、莢果、以及綠葉蔬菜也提供了大量的食用LNA(M.A.Allman，F(xiàn)ood Australia(1995)47，S14-S17；P.J.Ghafoorunissa，J.Agric.Food Chem.(1993)47，121-124)。LNA可以從例如Sigma-Aldrich化學(xué)品公司商購得到。
第二代紫杉醇-ω-3脂肪酸結(jié)合物可以通過利用任何本領(lǐng)域已有的方法將ω-3脂肪酸偶聯(lián)到第二代紫杉醇上來制備。例如，ω-3脂肪酸可以被偶聯(lián)到第二代紫杉醇的C-2’羥基或者C-7羥基上。優(yōu)選地，將ω-3脂肪酸偶聯(lián)到第二代紫杉醇的C-2’位置上。
偶聯(lián)反應(yīng)可以在一步或多步中發(fā)生。例如，ω-3脂肪酸選擇性偶聯(lián)到第二代紫杉醇的C-2’羥基上可以通過利用本領(lǐng)域已有的任何脫水劑以單一步驟就可以實(shí)現(xiàn)。合適的脫水劑的實(shí)例包括二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)和二異丙基碳化二亞胺(DIC)。脫水劑可以在有或沒有胺類堿(如，例如4-N，N-二甲基氨基吡啶(DMAP))的情況下使用。
用于制備ω-3脂肪酸-紫杉醇結(jié)合物的一般方案表示如下。在該方案中，DHA用作ω-3脂肪酸。其他的ω-3脂肪酸，如上述的那些，可以以相同的方式偶聯(lián)到紫杉醇的C-2’羥基上。
ω-3脂肪酸在氧存在的情況下會(huì)不穩(wěn)定?？梢圆扇〈胧┮苑€(wěn)定第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物。例如，可以在合成后將抗氧劑加入到結(jié)合物中。合適的抗氧劑的實(shí)例包括但不限于抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸二月桂酯、對(duì)苯二酚、丁基化羥基苯甲醚、焦亞硫酸鈉、t-β-胡羅卜素以及α-生育酚。也可以使用重金屬鰲合劑，如乙二胺四乙酸(EDTA)。
本發(fā)明的第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物對(duì)于在對(duì)其有需要的人類體內(nèi)治療癌癥是很有用的。癌癥可以是任何類型的對(duì)第二代紫杉醇敏感的癌癥。癌癥的實(shí)例包括乳癌、卵巢癌、肺癌、頭頸癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、黑素瘤癌、腦癌、前列腺癌以及腎癌。
本發(fā)明的方法包括給予有效量的第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物。第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物的有效量為有效治療癌癥的任何量。
第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物對(duì)于特定情形的實(shí)際量將根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的各種因素而變化，如癌癥的類型、使用的具體第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物、給藥方式、以及治療的具體患者?？梢栽谟冕t(yī)師和臨床醫(yī)生熟悉的方法進(jìn)行臨床前試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)期間確定有效量。
給予人的第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物的最小量為能夠治療癌癥的最低量。最大量為不會(huì)引起不希望的副作用的最高有效量。通常，第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物的每天口服劑量可以為從約0.01mg/kg/天到1000mg/kg/天。通?？山o予的全身性劑量在約1到1000mg/m2/天的范圍內(nèi)?？梢圆捎没颊吣褪苄栽试S的更高劑量來治療癌癥。
第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物可以通過任何本領(lǐng)域已有的合適方法給予。給藥方式的部分實(shí)例包括口服和全身性給藥。通常，本發(fā)明的結(jié)合物為全身性給藥。全身性給藥可以經(jīng)腸道或腸道外給予。
第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物的腸道外給藥包括，例如靜脈內(nèi)注射、肌肉注射、以及皮下注射或輸注。例如，第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物可以通過本領(lǐng)域熟知的持續(xù)釋放給予患者。持續(xù)釋放給藥是一種藥物遞送的方法，用以在一特定時(shí)間段內(nèi)達(dá)到一定的藥物水平。
給藥的其他途徑包括口服、局部、支氣管內(nèi)、或鼻內(nèi)給藥。對(duì)于口服給藥，可以使用液體或固體制劑。適用于口服給藥的制劑的部分實(shí)例包括片劑、明膠膠囊、丸劑、錠劑、酏劑、混懸劑、糖漿劑、以及糯米紙囊劑。支氣管內(nèi)給藥可以包括吸入器噴霧。對(duì)于鼻內(nèi)給藥，第二代脂肪酸結(jié)合物的給予可以通過噴霧器或液體霧劑(liquid mist)的方式來實(shí)施。
本發(fā)明進(jìn)一步包括在合適的藥物載體中的第二代脂肪酸結(jié)合物。在本說明書中，認(rèn)為藥物載體與本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員理解的賦形劑具有相同的含義。載體的實(shí)例包括硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、滑石、植物油脂或植物油、樹膠以及乙二醇。
第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物還可以包括一種或多種穩(wěn)定劑、表面活性劑(優(yōu)選為非離子表面活性劑)、以及可選的鹽和/或緩沖劑。
穩(wěn)定劑可以例如為氨基酸，如，例如甘氨酸；或寡糖，如，例如蔗糖、tetralose、乳糖或葡聚糖?？蛇x替換地，穩(wěn)定劑可以為糖醇，如，例如甘露醇；或其組合。優(yōu)選地，穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑的組合構(gòu)成第二代脂肪酸結(jié)合物重量的約0.1％到約10％。
表面活性劑優(yōu)選為非離子表面活性劑，如聚山梨醇酯。合適的表面活性劑的部分實(shí)例包括吐溫20、吐溫80；聚乙二醇或聚氧乙烯聚氧丙烯二醇(醚)，如從約0.001％(w/v)到約10％(w/v)的Pluronic F-68(一種聚丙二醇與環(huán)氧乙烷的加聚物)。
鹽或緩沖劑可以為任何鹽或緩沖劑，如，例如分別為氯化鈉、或磷酸鈉和/或鉀。優(yōu)選地，緩沖劑將第二代脂肪酸結(jié)合物的pH維持在約5到約8的范圍內(nèi)。鹽和/或緩沖劑還對(duì)將摩爾滲透壓濃度維持在適于對(duì)人給藥的水平很有用。優(yōu)選地，鹽或緩沖劑以大致約150mM到約300mM的等滲壓濃度存在。
第二代脂肪酸結(jié)合物可以另外含有一種或多種常規(guī)添加劑。如上面所述的，這樣的添加劑的部分實(shí)例包括增溶劑，如，例如甘油；抗氧劑，如，例如苯扎氯銨(一種季銨化合物的混合物，稱為“quart”)、苯甲醇、氯惹酮或氯代丁醇；麻醉劑，如，例如嗎啡衍生物；或等滲劑等。作為進(jìn)一步對(duì)氧化或其他酸敗的預(yù)防，第二代脂肪酸結(jié)合物可以用氣密性塞子密封的小瓶在氮?dú)庀聝?chǔ)存。
下面的非限制性實(shí)施例用于描述說明本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)注意到在不脫離本發(fā)明范圍的情況下，對(duì)下述實(shí)施例及其中的方法可以作出各種變化。為此，本申請(qǐng)的描述說明性具體實(shí)施方式
應(yīng)解釋為是描述說明性的而不是在任何意義上的限制。
實(shí)施例12’-二十二碳六烯酰基-3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙基)-10-(甲氧羰基)多西他賽(DHA-SB-T-1107)在氬氣下向二氯甲烷(3.5mL)中的3’-脫苯基-10-(甲氧基羰基)-3’-(2-甲基-2-丙基)-2’-二十二碳六烯?；?多西他賽(SB-T-1107)(63.9mg；75μmol)的溶液中加入4-二甲氨基吡啶(9mg；75μmol)、1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(19mg，150μmol)、以及DHA(27mg；83μmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h。在用二氯甲烷稀釋后，將反應(yīng)混合物用5％的鹽酸、水、以及鹽水洗滌。有機(jī)層用無水硫酸鎂進(jìn)行干燥，并在真空下濃縮。將粗產(chǎn)物通過在硅膠上的層析法(乙酸乙酯/己烷＝1/3到1/1)進(jìn)行提純，得到呈白色固體的78.5mg(產(chǎn)率為90％)的DHA-SB-T-1107熔點(diǎn)m.p.102-105℃，[α]D22-45.0(c1.0，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.96(m，9H)，1.14(s，3H)，1.22(s，3H)，1.30(s，9H)，1.67(m，3H)，1.69(s，3H)，1.88(m，1H)，1.96(s，3H)，2.07(m，2H)，2.37(s，3H)，2.47(m，6H)，2.55(m，1H)，2.85(m，10H)，3.78(d，J＝6.8Hz，1H)，3.86(s，3H)，4.19(d，J＝8.2Hz，1H)，4.29(d，J＝8.2Hz，1H)，4.37(m，1H)，4.43(m，1H)，4.60(d，J＝9.3Hz，2H)，4.91(s，1H)，4.97(d，J＝8.0Hz，1H)，5.25-5.50(m，12H)，5.66(d，J＝7.0Hz，1H)，6.12(s，1H)，6.20(t，J＝8.8Hz，1H)，7.47(t，J＝8.0Hz，2H)，7.59(t，J＝8.0Hz，1H)，8.11(d，J＝8.0Hz，2H)；13C NMR(CDCl3，400MHz)δ9.6，14.3，20.6，21.9，22.1，22.5，22.6，23.2，24.7，25.6，25.7，25.7，25.8，26.6，28.2，33.7，35.5，35.6，41.4，43.1，45.6，48.9，55.5，58.5，71.5，72.0，74.4，75.1，76.4，76.9，78.3，79.2，79.7，80.9，84.4，126.9，127.4，127.7，127.8，127.9，128.3，128.3，128.4，128.5，128.7，129.2，129.5，130.1，130.2，130.2，131.9，133.4，144.2，155.1，155.6，166.8，168.1，169.4，172.1，203.9。
實(shí)施例2-9其他的DHA-紫杉醇以如在實(shí)施例1中所述的用于合成DHA-SB-T-1107的同樣方式進(jìn)行合成。用于這些DHA-紫杉醇的表征數(shù)據(jù)如下所示。
實(shí)施例22’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基丙基)-10-丙酰基多西他賽(DHA-SB-T-1103)75％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.94-98℃，[α]D22-37.9(c 1.08，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.97(m，9H)，1.13(s，3H)，1.22-1.27(m，6H)，1.31(s，9H)，1.56(s，3H)，1.67(s，3H)，1.90(m，1H)，1.94(s，3H)，2.08(m，2H)，2.39(s，3H)，2.40(m，2H)，2.46-2.60(m，7H)，2.85(m，10H)，3.82(d，J＝7.0Hz，1H)，4.20(d，J＝8.4Hz，1H)，4.30(d，J＝8.4Hz，1H)，4.35(m，1H)，4.46(dd，J＝10.2，6.7Hz，1H)，4.60(d，J＝10.4Hz，1H)，4.92(d，J＝2.4Hz，1H)，4.98(d，J＝7.6Hz，1H)，5.40(m，12H)，5.67(d，J＝7.6Hz，1H)，6.23(m，1H)，6.31(s，1H)，7.48(t，J＝7.6Hz，2H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，8.12(d，J＝7.6Hz，2H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)δ9.0，9.6，14.1，14.3，14.8，20.5，21.9，22.2，22.4，22.5，22.6，23.2，24.5，25.5，25.6，26.6，27.5，28.1，28.3，33.7，35.5，41.3，43.2，45.6，48.9，58.8，71.5，72.2，74.4，75.2，75.5，76.4，77.3，79.3，79.8，81.0，84.4，127.0，127.5，127.8，127.9，128.0，128.3，128.4，128.5，128.6，129.3，129.6，130.2，130.0，132.4，133.5，143.4，155.3，167.0，168.4，169.6，172.3，174.6，204.0。
實(shí)施例32’-二十二碳六烯酰基-3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙烯基)-10-環(huán)丙羰基多西他賽(DHA-SB-T-1214)69％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.64-67℃，[α]D22-52.2(c 1.8，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.99(t，J＝7.5Hz，3H)，1.15(m，4H)，1.28(s，3H)，1.36(s，9H)，1.68(s，3H)，1.75(m，1H)，1.78(s，6H)，1.93(m，1H)，1.95(s，3H)，2.09(q，J＝7.5，15.0Hz，2H)，2.39(s，3H)，2.48(m，2H)，2.56(m，2H)，2.65(d，J＝3.9Hz，1H)，2.87(m，10H)，3.83(d，J＝6.9Hz，1H)，4.20(d，J＝8.7Hz，1H)，4.33(d，J＝8.1Hz，1H)，4.46(m，1H)，4.82(d，J＝8.8Hz，1H)，4.95(s，1H)，4.99(d，J＝9.3Hz，1H)，5.21(d，J＝7.8Hz，1H)，5.41(m，12H)，5.69(d，J＝7.2Hz，1H)，6.21(t，J＝8.8Hz，1H)，6.32(s，1H)，7.50(t，J＝8.1Hz，2H)，7.63(t，J＝7.5Hz，1H)，8.13(d，J＝7.2Hz，2H)；13CNMR(CDCl3)δ9.14，9.36，9.47，9.53，12.98，14.25，14.76，14.81，18.48，18.54，20.52，22.22，22.39，22.47，25.59，25.74，26.67，28.13，28.18，29.67，33.62，35.42，43.12，45.52，45.58，48.86，58.42，71.70，72.17，74.45，74.57，75.19，75.38，75.44，76.35，79.25，79.86，80.92，84.40，84.52，119.95，127.50，127.84，128.02，128.26，128.60，129.21，129.58，130.14，132.40，133.59，137.94，143.48，154.85，166.96，168.30，169.61，172.29，175.12，204.10。
實(shí)施例42’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙基)-10-環(huán)丙羰基多西他賽(DHA-SB-T-1104)
73％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.65-68℃，[α]D-53.4(c 2.5，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.99(m，9H)，1.15(m，6H)，1.27(s，3H)，1.33(s，9H)，1.69(s，6H)，1.78(m，1H)，1.95(s，3H)，2.09(q，J＝7.2，14.7Hz，2H)，2.43(s，3H)，2.48(m，2H)，2.56(m，2H)，2.65(d，J＝3.6Hz，2H)，2.87(m，10H)，3.83(d，J＝7.2Hz，1H)，4.21(d，J＝8.1Hz，1H)，4.32(d，J＝8.1Hz，1H)，4.46(m，1H)，4.63(d，J＝10.2Hz，1H)，4.93(d，J＝2.1Hz，1H)，4.99(d，J＝8.1Hz，1H)，5.41(m，12H)，5.68(d，J＝6.9Hz，1H)，6.23(t，J＝8.7Hz，1H)，6.31(s，1H)，7.50(t，J＝8.1Hz，2H)，7.63(t，J＝7.5Hz，1H)，8.13(d，J＝7.2Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ3.9，4.1，4.3，7.8，9.0，9.6，15.3，16.6，17.0，17.1，17.3，17.5，18.0，19.4，20.2，20.3，20.4，21.4，22.8，22.9，28.4，36.0，36.1，37.9，40.4，43.6，53.2，67.0，69.2，70.0，70.2，70.9，70.95，71.1，71.15，71.2，71.7，72.2，74.1，74.6，75.7，79.2，92.8，121.8，122.3，122.6，122.7，122.8，123.1，123.15，123.2，123.4，123.45，124.1，124.4，125.0，126.8，127.2，127.25，128.3，138.3，150.1，161.8，163.2，164.4，167.1，169.9，198.9。
實(shí)施例52’-二十二碳六烯酰基-3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙烯基)-10-丙?；辔魉?DHA-SB-T-1213)72％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.67-69℃，[α]D22-72.7(c 0.73，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.99(t，J＝7.5，3H)，1.16(s，3H)，1.27(m，8H)，1.28(s，3H)，1.36(s，9H)，1.68(s，3H)，1.75(m，1H)，1.78(s，9H)，1.93(m，1H)，1.95(s，3H)，2.09(q，J＝7.5，15.0Hz，2H)，2.40(s，3H)，2.46(m，3H)，2.53(m，2H)，2.56(m，2H)，2.65(d，J＝3.9Hz，2H)，2.87(m，10H)，3.84(d，J＝6.9Hz，1H)，4.20(d，J＝8.4Hz，1H)，4.33(d，J＝8.4Hz，1H)，4.48(m，1H)，4.82(d，J＝8.8Hz，1H)，4.93(s，1H)，4.99(d，J＝9.6Hz，1H)，5.21(d，J＝7.8Hz，1H)，5.41(m，12H)，5.69(d，J＝6.9Hz，1H)，6.21(t，J＝8.8Hz，1H)，6.33(s，1H)，7.50(t，J＝8.1Hz，2H)，7.63(t，J＝7.5Hz，1H)，8.13(d，J＝7.2Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ9.28，9.79，9.86，14.53，15.00，15.06，18.76，18.83，20.81，22.35，22.68，22.76，25.87，26.83，27.80，28.41，28.47，29.94，33.91，35.72，43.42，45.90，49.15，58.70，71.98，72.37，74.74，75.42，75.68，75.75，76.64，79.50，80.16，81.19，84.67，84.80，127.78，128.11，128.30，128.59，128.90，129.50，129.86，130.42，132.71，133.89，138.24，143.56，155.17，167.24，168.60，169.92，172.60，174.90，204.28。
實(shí)施例62’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基丙基)-10-乙酰基多西他賽-1，14-碳酸酯(DHA-Ortataxel)68％的產(chǎn)率；白色固體；熔點(diǎn)m.p.72-75℃，[α]D22-40(c 0.6，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.99(t，3H)，1.00(m，3H)，1.25(s，3H)，1.28(s，3H)，1.36(s，9H)，1.36-1.47(m，2H)，1.63-1.70(m，2H)，1.72(s，3H)，1.90(d，3H)，2.07(m，2H)，2.25(s，3H)，2.35(s，1H)，2.47(m，4H)，2.49(s，3H)，2.50-2.62(m，2H)，2.83(m，10H)，3.71(d，1H)，4.20-4.30(m，2H)，4.38-4.44(m，2H)，4.57-4.62(d，2H)，4.850(d，1H)，4.951(d，1H)，5.09(d，1H)，5.40(m，12H)，6.11(d，1H)，6.27(s，1H)，6.44(d，1H)，7.49(t，2H)，7.61(t，1H)，8.03(d，2H)；13C NMR(CDCl3)δ9.68，14.10，14.20，15.0，20.5，20.6，22.0，22.5，22.6，23.1，23.4，23.4，24.7，25.5，25.6，25.9，28.2，28.2，29.7，33.9，35.4，41.7，45.0，58.7，69.5，71.7，74.3，74.4，74.8，75.9，79.5，80.1，80.5，84.2，88.1，127.0，127.4，127.8，128.0，128.3，128.4，128.6，128.9，129.7，129.9，132.0，133.3，134.0，140.5，151.8，155.1，164.8，167.8，170.2，170.8，172.3，202.3。
實(shí)施例72’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙基)-2-脫苯甲?；?2-(3-甲氧基苯甲?；?-10-(甲氧基羰基)多西他賽(SB-T-110703-DHA)
62％的產(chǎn)率；白色固體；1H-NMR(CDCl3，300Hz)δ7.74(d，1H，J＝7.5Hz)，7.67(d，1H，J＝1.2Hz)，7.39(dd，1H，J＝8.1Hz)，7.16(dd，1H，J＝2.7Hz，J＝8.1Hz)，6.24(dd，1H，J＝8.7Hz)，6.14(s，1H)，5.686(d，1H，J＝7.2Hz)，5.62-5.24(m，12H)，5.03-4.98(m，1H)，4.93(d，1H，J＝2.4Hz)，4.63(d，1H，J＝10.5)，4.48-4.29(m，3H)，4.21(d，1H，J＝8.1Hz)，3.9(s，3H)，3.88(s，3H)，3.81(d，1H，J＝6.9Hz)，2.91-2.78(m，10H)，2.65-2.22(m，11H)，2.19-2.06(m，2H)，1.98(s，3H)，1.97-1.82(m，1H)，1.4-1.1(m，15H)，1.02-0.94(m，9H)；13C-NMR(CDCl3，75.5MHz)δ9.8，14.5，15.1，20.8，21.9，22.3，22.8，23.5，23.7，24.9，25.8，25.9，26.8，28.3，33.9，35.6，35.8，41.5，43.3，45.8，49.0，55.8，58.7，71.7，72.3，74.8，75.4，76.6，78.6，79.5，80.1，81.2，84.7，114.2，120.9，123.3，127.3，127.8，128.1，128.2，128.3，128.6，128.7，128.8，129.9，130.7，132.3，144.6，155.5，156.1，159.9，167.1，168.6，169.9，172.6，204.5。
實(shí)施例82’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙烯基)-2-脫苯甲?；?2-(3-甲氧基苯甲?；?-10-丙?；辔魉?DHA-SB-T-121303)67％的產(chǎn)率；白色固體；1H NMR(CDCl3)δ0.99(t，J＝7.5Hz，3H)，1.14(s，3H)，1.28(m，8H)，1.33(s，9H)，1.66(m，3H)，1.73(s，3H)，1.75(s，3H)，1.89(m，5H)，2.10(m，2H)，2.37(m，6H)，2.53(m，7H)，2.87(m，10H)，3.80(d，J＝6.9Hz，1H)，3.86(s，3H)，4.12(d，J＝8.5Hz，1H)，4.31(d，J＝8.5Hz，1H)，4.40(dd，J＝10.6，6.8Hz，1H)，4.72(m，2H)，4.95(m，2H)，5.30(d，J＝7.6Hz，1H)，5.41(m，12H)，5.65(d，J＝7.0Hz，1H)，6.16(t，J＝8.6Hz，1H)，6.30(s，1H)，7.13(d，J＝7.9Hz，1H)，7.33(t，J＝8.0Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.69(d，J＝7.6Hz，1H)。
實(shí)施例92’-二十二碳六烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙基)-2-脫苯甲酰基-2-(3-甲氧基苯甲?；?-10-丙酰基多西他賽(DHA-SB-T-11033)81％的產(chǎn)率；熔點(diǎn)m.p.68-70℃；1H NMR(CDCl3)δ1.00(m，9H)，1.28(m，9H)，1.36(s，9H)，1.73(s，3H)，1.91(m，1H)，1.99(s，3H)，2.15(m，2H)，2.40-2.70(m，12H)，2.91(m，10H)，3.89(d，J＝7Hz，1H)，3.95(s，3H)，4.24(d，J＝8Hz，1H)，4.40(m，2H)，4.52(m，1H)，4.66(d，J＝10Hz，1H)，4.97(bd，J＝1.8Hz，1H)，5.00(bd，J＝8Hz，1H)，5.45(m，12H)，5.73(d，J＝7Hz，1H)，6.28(m，1H)，6.37(s，1H)，7.20(m，1H)，7.40(m，1H)，7.70(m，1H)，7，80(m，1H)；13C NMR(CDCl3)δ9.3，9.9，14.6，15.0，20.8，22.0，22.5，22.8，23.5，24.9，25.8，25.9，26.9，27.8，28.4，33.9，35.7，41.6，43.4，45.8，49.1，55.6，58.7，71.7，72.5，74.8，75.5，75.7，76.7，79.5，80.1，81.4，84.7，127.3，127.8，128.1，128.2，128.3，128.6，128.7，128.9，129.9，130.7，132.3，132.7，143.6，155.6，167.1，168.7，169.9，172.6，174.9，204.3。
實(shí)施例10-12α-順式-9，12，15-十八碳三烯酸-紫杉醇以如實(shí)例1中所述的用于合成DHA-SB-T-1107的同樣方式進(jìn)行合成。用于這些α-順式-9，12，15-十八碳三烯酸-紫杉醇的表征數(shù)據(jù)如下所示。
實(shí)施例102’-順式-9，12，15-十八碳三烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙烯基)-10-丙?；辔魉?LNA-SB-T-1213)42％的產(chǎn)率；白色固體；1H NMR(400Hz，CDCl3)δ0.99(t，J＝7.65Hz，3H)，1.15(s，3H)，1.23(s，3H)，1.25(s，3H)，1.25-1.35(m，12H)，1.34(s，9H)，1.67(s，3H)，1.76(s，6H)，1.85(m，1H)(H6a)，1.93(s，3H)，2.04(q，J＝6.4Hz，4H)，2.36(s，3H)(OAc)，2.45(m，8H)，2.53(m，3H)(H6b)，2.77(t，J＝6.4Hz，2H)，3.82(m，3H)，4.17(d，J＝8.4Hz，1H)(H20a)，4.31(d，J＝8.4Hz，1H)(H20b)，4.46(dd，J＝10.6，6.6Hz，1H)，4.77(d，J＝8.8Hz 1H)，4.98(m，3H)(H5)，5.18(d，J＝8.0Hz，1H)，5.36(m，6H)，5.68(d，J＝6.8Hz，1H)(H2)，6.19(t，J＝8.5Hz，1H)，6.31(s，1H)(H10)，7.48(t，J＝7.6Hz，2H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，8.12(d，J＝7.6Hz，2H)。
實(shí)施例112’-順-9，12，15-十八碳三烯?；?3’-脫苯基-3’-(2-甲基-2-丙烯基)-2-脫苯甲?；?2-(3-甲氧基苯甲酰基)-10-丙?；辔魉?LNA-SB-T-121303)67％的產(chǎn)率；白色固體；1H NMR(400Hz，CDCl3)δ0.99(t，J＝7.65Hz，3H)，1.13(s，3H)，1.16(s，3H)，1.25(s，3H)，1.25-1.35(m，8H)，1.33(s，9H)，1.66(m，3H)，1.73(s，3H)，1.75(s，3H)，1.89(m，5H)，2.10(m，4H)，2.37(m，6H)，2.52(m，4H)，2.81(m，4H)，3.80(m，3H)，3.86(s，3H)，4.19(d，J＝8.8Hz，1H)，4.35(d，J＝8.8Hz，1H)，4.40(dd，J＝10.6，6.8Hz，1H)，4.75(d，J＝8.8Hz，1H)，4.96(d，J＝8.3Hz，3H)，5.19(d，J＝8.4Hz，1H)，5.36(m，6H)，5.67(d，J＝6.8Hz，1H)，6.19(t，J＝8.8Hz，1H)，6.31(s，1H)，7.14(d，J＝6.0Hz，1H)，7.38(t，J＝7.6Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.71(d，J＝7.6Hz，1H)。
實(shí)施例122’-順-9，12，15-十八碳三烯酰基-3’-脫苯基-3’-(2-甲基-1-丙基)-10-丙?；辔魉?LNA-SB-T-1103)70％的產(chǎn)率；熔點(diǎn)m.p.67-70℃；1H NMR，(CDCl3)δ1.00(m，9H)，1.20-1.40(m，24H)，1.74(m，9H)，1.99(s，4H)，2.15(m，4H)，2.40-2.70(m，11H)，2.91(m，4H)，3.89(d，J＝7Hz，1H)，4.24(d，J＝8.0Hz，1H)，4.40(m，2H)，4.52(m，1H)，4.67(d，1H，J＝10，Hz)，4.97(bd，J＝1.8Hz，1H)，5.00(bd，J＝8Hz，1H)，5.45(m，6H)，5.73(d，J＝7.0Hz，1H)，6.28(m，1H)，6.37(s，1H)，7.54(m，2H)，7.66(m，1H)，8.19(d，J＝7.0Hz，2H)；13CNMR(CDCl3)δ9.3，9.9，14.6，15.0，20.8，22.0，22.5，22.8，23.5，24.9，25.0，25.8，25.9，26.9，27.4，27.8，28.4，29.3，29.4，29.5，29.9，33.9，35.7，41.6，43.4，45.8，49.1，58.7，71.8，72.5，74.6，75.5，75.7，76.7，79.5，80.1，81.2，84.7，127.3，128.1，128.5，128.6，128.9，129.5，130.5，132.3，132.6，133.8，143.7，155.6，167.3，168.8，169.9，173.2，174.9，204.3。
實(shí)施例13第二代紫杉醇-ω-3脂肪酸結(jié)合物效能的體內(nèi)評(píng)價(jià)結(jié)合物的合成具有不同C-2、C-10、C-3’部分的第二代紫杉醇是以良好至優(yōu)異的產(chǎn)率由10-脫乙?；鶟{果赤霉素III開始進(jìn)行合成的。紫杉醇與DHA的偶聯(lián)反應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)條件下(DIC，DMAP)進(jìn)行，并以良好的產(chǎn)率獲得相應(yīng)的結(jié)合物。在C-2’OH基團(tuán)處發(fā)生發(fā)應(yīng)(參見反應(yīng)A和表A)。
反應(yīng)A
表A

動(dòng)物和腫瘤異種移植從羅斯韋爾公園癌癥研究所(Roswell Park Cancer Institute)或者塔康(Taconic)(Germantown，NY)的內(nèi)部繁殖設(shè)施獲得6到8周齡的雌性嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的小鼠。動(dòng)物照管的各個(gè)方面都符合研究所動(dòng)物照管與使用委員會(huì)(Institutional Animal Careand Use Committee)的指南。使用或者不表達(dá)MDR蛋白pgp的人卵巢腫瘤A121，或者表達(dá)pgp的人結(jié)腸腫瘤DLD-1。通過利用12-號(hào)套管針將約50mg的非壞死腫瘤片斷移植到右側(cè)腹肉上而引發(fā)腫瘤。當(dāng)腫瘤被評(píng)估為可觸知的團(tuán)塊(約50-100mm3大小)時(shí)開始進(jìn)行化療。治療由間隔3天實(shí)施4次通過尾部靜脈的體內(nèi)注射構(gòu)成。每個(gè)藥物處理(治療)組或每個(gè)無藥物的賦形劑組包括4-5只小鼠、未處理的對(duì)照組每組有10只小鼠。
用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的藥物制備將帕利他西和DHA-帕利他西制成Cremophor ELP(BASF，Ludwigshafen，Germany)和無水乙醇的7.5mg/mL的等份儲(chǔ)備溶液。將這些溶液用于對(duì)照目的。將DHA-紫杉醇和其他的ω-3脂肪酸-紫杉醇制成吐溫80(Tween 80，聚氧乙烯-失水山梨醇單油酸酯；購自Sigma化學(xué)公司)和無水乙醇的30mg/mL的等份儲(chǔ)備溶液。為了使DHA-紫杉醇和其他的ω-3脂肪酸-紫杉醇的制劑穩(wěn)定，加入抗氧劑L-抗壞血酸(3.9mM)和α-生育酚(2.0mM)。將每種儲(chǔ)備溶液在使用之前在0.9％的NaCl(鹽水)中進(jìn)一步稀釋，以便對(duì)20g的小鼠以約0.4mL的體積通過尾部靜脈將適當(dāng)濃度的每種藥物注射到體內(nèi)。每種藥物在第5、8、11天每天給藥一次。
體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)試驗(yàn)對(duì)于每個(gè)動(dòng)物，利用電子卡鉗測(cè)量以mm計(jì)的腫瘤長(zhǎng)度(l)和寬度(w)，并且每3-4天進(jìn)行記錄。利用公式v＝0.4(l×w2)計(jì)算以mm3計(jì)的腫瘤體積(v)。將對(duì)于600mm3的預(yù)定目標(biāo)腫瘤體積的以天計(jì)的時(shí)間線性插入到log(體積)對(duì)時(shí)間的曲線圖中。在對(duì)照與藥物處理的小鼠之間的腫瘤體積的統(tǒng)計(jì)顯著性差異通過Cox-Mantel檢驗(yàn)來確定。對(duì)于Cox-Mantel檢驗(yàn)，將或者因?yàn)殚L(zhǎng)期治愈(定義為在實(shí)驗(yàn)結(jié)論中那些仍然活著的動(dòng)物，其腫瘤或者完全消退或者未達(dá)到預(yù)設(shè)的目標(biāo)體積)或者由于藥物毒性早死而未達(dá)到目標(biāo)腫瘤體積的動(dòng)物的時(shí)間過程數(shù)據(jù)(time-to-event data)作為經(jīng)過檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。所有統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)都為雙邊的。
結(jié)果評(píng)估了第二代紫杉醇-脂肪酸結(jié)合物對(duì)于在SCID小鼠體內(nèi)針對(duì)抗藥性人結(jié)腸腫瘤異種移植(pgp+)DLD-1和藥物敏感性人卵巢腫瘤異種移植(pgp-)A121的抗腫瘤活性(表1)。中間值(中值)的腫瘤大小表示在圖1中。
表1.體內(nèi)遞送到具有pgp+人結(jié)腸腫瘤異種移植DLD-1的SCID小鼠的DHA-紫杉醇結(jié)合物的抗腫瘤效應(yīng)

1將在DLD-1人結(jié)腸腫瘤移植后的第5、8、11天體內(nèi)給予SCID小鼠的處理。帕利他西和DHA-帕利他西在CremophorEtOH中制成；IND5109和DHA-紫杉醇結(jié)合物在吐溫EtOH中制成。
2基于利用Cox-Mantle檢驗(yàn)的每組與對(duì)照的比較。
3或者死亡或者體重?fù)p失大于20％的動(dòng)物的數(shù)量。
4在第201天具有的腫瘤小于600mm3的SCID鼠。
如表1清楚表明的，第二代紫杉醇-DHA結(jié)合物、DHA-SB-T-1214對(duì)SCID鼠體內(nèi)的抗藥性人結(jié)腸腫瘤異種移植表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤效應(yīng)。對(duì)于DHA-SB-T-1214，所有的小鼠在第201天都活著，并且在用DHA-SB-T-1214處理的小鼠體內(nèi)沒有檢測(cè)到腫瘤痕跡。DHA-SB-T-1213引起了在54天后的腫瘤生長(zhǎng)延遲。這些結(jié)果清楚地證實(shí)了DHA-第二代紫杉醇不同尋常的效能。
DHA-SB-T-1213對(duì)于人卵巢腫瘤異種移植(pgp-)A121也表現(xiàn)出優(yōu)異的結(jié)果(參見圖2和表2)。當(dāng)施加90mg/kg的總劑量時(shí)，結(jié)合物對(duì)4只存活的小鼠(5只中的4只)體內(nèi)的腫瘤生長(zhǎng)顯示出大于186天的延遲。另外，DHA-SB-T-1216和DHA-SB-T-1104也表現(xiàn)出了有效的腫瘤生長(zhǎng)延遲。
表2.體內(nèi)遞送到具有人卵巢腫瘤異種移植A121的SCID小鼠的DHA-紫杉醇結(jié)合物的抗腫瘤效應(yīng)

1在A121人卵巢腫瘤移植后第5天體內(nèi)給予SCID小鼠的處理。帕利他西和DHA-帕利他西在CremophorEtOH中制成；DHA-紫杉醇結(jié)合物在吐溫EtOH中制成。
2基于利用Cox-Mantle檢驗(yàn)的每組與對(duì)照的比較。
3或者死亡或者體重?fù)p失大于20％的動(dòng)物的數(shù)量。
4在第197天沒有可觸知的腫瘤的SCID小鼠。
權(quán)利要求
1.一種包括紫杉醇和ω-3脂肪酸的結(jié)合物，其改進(jìn)在于所述紫杉醇為一種第二代紫杉醇。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1214。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1213。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1216。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1103。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為ortataxel。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11033。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1104。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11043。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1107。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11073。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121303。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121403。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121603。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121703。
16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-12821。
17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-128221-3。
18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述ω-3脂肪酸為二十二碳六烯酸。
19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述ω-3脂肪酸為二十碳五烯酸。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合物，其中，所述ω-3脂肪酸為α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸。
21.一種含有包括紫杉醇和ω-3脂肪酸的結(jié)合物的藥物組合物，其改進(jìn)在于所述紫杉醇為第二代紫杉醇。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為ortataxel。
23.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121303。
24.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1103。
25.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1214。
26.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1216。
27.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11033。
28.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1104。
29.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11043。
30.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1107。
31.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11073。
32.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1213。
33.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121403。
34.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121603。
35.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121703。
36.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-12821。
37.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-128221-3。
38.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述ω-3脂肪酸為二十二碳六烯酸。
39.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述ω-3脂肪酸為二十碳五烯酸。
40.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中，所述ω-3脂肪酸為α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸。
41.一種用于在對(duì)其有需要的人類體內(nèi)治療癌癥的方法，所述方法包括給予有效量的包括紫杉醇和ω-3脂肪酸的結(jié)合物，其改進(jìn)在于所述紫杉醇為第二代紫杉醇。
42.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為ortataxel。
43.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121303。
44.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1103。
45.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1214。
46.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1216。
47.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11033。
48.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1104。
49.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11043。
50.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1107。
51.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-11073。
52.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-1213。
53.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121403。
54.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121603。
55.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-121703。
56.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-12821。
57.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述第二代紫杉醇為SB-T-128221-3。
58.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述ω-3脂肪酸為二十二碳六烯酸。
59.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述ω-3脂肪酸為二十碳五烯酸。
60.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述ω-3脂肪酸為α-順式-9，12，15-十八碳-三烯酸。
61.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為乳癌。
62.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為卵巢癌。
63.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為肺癌。
64.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為頭癌。
65.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為頸癌。
66.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為結(jié)腸癌。
67.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為胰腺癌。
68.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為黑素瘤癌。
69.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為腦癌。
70.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為腎癌。
71.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中，所述癌癥為前列腺癌。
全文摘要
本發(fā)明涉及第二代脂肪酸結(jié)合物及其藥物組合物。所述第二代脂肪酸結(jié)合物在對(duì)其有需要的人類體內(nèi)治療癌癥中很有用。
文檔編號(hào)C07D305/14GK1901901SQ200480039307
公開日2007年1月24日 申請(qǐng)日期2004年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月30日
發(fā)明者伊瓦奧·奧吉馬 申請(qǐng)人:紐約州州立大學(xué)研究基金會(huì)