本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及噠嗪酮類衍生物及其應(yīng)用，更具體地，本發(fā)明涉及噠嗪酮類衍生物、包含該噠嗪酮類衍生物的藥物組合物以及該組合物和該噠嗪酮類衍生物在制備預(yù)防或治療疼痛類疾病的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
疼痛是人類天生具有的基本感覺，在保護(hù)人體免受傷害、保持人體內(nèi)環(huán)境等方面具有重要意義。但長期或過度的疼痛會嚴(yán)重影響人的正常生理和生活，慢性疼痛和神經(jīng)痛在醫(yī)學(xué)上已經(jīng)被定義為嚴(yán)重危害人類健康的疾病。其中，神經(jīng)痛是疼痛類疾病中對患者生活危害重大的一類疾病，全球約有8％的人正受到這一疾病的影響。盡管在基礎(chǔ)研究和臨床研究領(lǐng)域中，研究人員做了很多相關(guān)工作，但在臨床上對神經(jīng)痛發(fā)病及其鎮(zhèn)痛機理的研究依然存在巨大的挑戰(zhàn)。目前還沒有廣譜性和特異性的針對神經(jīng)痛的靶向藥物。在臨床上用于治療神經(jīng)痛的藥物主要是具有神經(jīng)痛鎮(zhèn)痛活性的治療抑郁、癲癇等疾病的藥物。
sigma-1受體(σ1受體)是近年來新興的藥物靶點，特別在神經(jīng)痛鎮(zhèn)痛方面表現(xiàn)出優(yōu)異的潛力。σ1受體主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，在外周器官中也有廣泛的分布。關(guān)于σ1受體調(diào)節(jié)人體疼痛的研究始于90年代，當(dāng)時發(fā)現(xiàn)σ1受體拮抗劑能有增敏阿片類鎮(zhèn)痛劑的鎮(zhèn)痛活性，而σ1激動劑則會減弱這一現(xiàn)象。在急性痛覺實驗中，σ1受體的反義寡脫氧核苷酸能明顯增強嗎啡以及阿片μ受體激動劑的鎮(zhèn)痛效果。更多的實驗證明了σ1受體是通過與阿片μ受體直接相互作用而起效的。另一方面，已經(jīng)證明σ1受體拮抗劑本身也具有疼痛、特別是神經(jīng)痛鎮(zhèn)痛效果。目前sigma-1受體拮抗劑研究中最前沿的是S1RA，其對σ1受體有高親和性，同時對與σ1受體具有高選擇性。目前S1RA用于治療多種疼痛的實驗以及進(jìn)入臨床階段，其中單獨用于治療神經(jīng)痛的實驗已經(jīng)進(jìn)入臨床II期。
因此，尋找對σ1受體具有選擇性的σ1受體拮抗劑用于抗疼痛治療，對臨床治療疼痛、神經(jīng)痛具有重要的科學(xué)價值和社會意義。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。為此，本發(fā)明的一個目的在于提出一種能夠用于抗疼痛治療的對σ1受體具有選擇性的σ1受體拮抗劑。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了一種化合物，其為式I所示化合物或者式I所示化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥
其中，
R1為任選取代的C1～5烷基、任選取代的C3～7環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的噻吩基、任選取代的吲哚基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一；
Z為任選取代的-Rc-Rd-，Rc為O、S、NH或CH2，Rd為碳原子數(shù)為1～10的直鏈或支鏈烴基或雜烴基，其中，任選地所述碳原子數(shù)為1～10的直鏈或支鏈烴基或雜烴基中含有至少一個氧原子或亞乙基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一；
Q為N或CH，Ra和Rb分別獨立地為任選取代的含有1～5個碳原子的直鏈或支鏈烷基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一，
或者Q連同與其相連的Ra和Rb共同形成含有至少一個O、N或羰基的五～七元環(huán)，所述五～七元環(huán)任選地被任選取代的含有1～5個碳原子的烷基、任選取代的芳基、任選取代的噻吩、C1～10烷基甲酸酯基取代，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物對σ1受體具有選擇性的拮抗，具有鎮(zhèn)痛活性潛力，也即具有治療疼痛、特別是神經(jīng)痛的潛力。進(jìn)一步，通過動物實驗，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物能夠有效應(yīng)用于治療和預(yù)防包括急性疼痛、慢性疼痛、頑固性疼痛、癌性疼痛和特殊疼痛等多種疼痛類疾病。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明還提供了一種藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明的實施例，該藥物組合物含有前面所述的化合物。發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，含有對σ1受體具有選擇性拮抗的前 述化合物的本發(fā)明的藥物組合物，能夠有效應(yīng)用于治療和預(yù)防包括急性疼痛、慢性疼痛、頑固性疼痛、癌性疼痛和特殊疼痛等多種疼痛類疾病。
根據(jù)本發(fā)明的又一方面，本發(fā)明還提供了前面所述的化合物或者藥物組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于預(yù)防或治療疼痛類疾病。
具體實施方式
下面詳細(xì)描述本發(fā)明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。
定義和一般術(shù)語
除非另外說明，應(yīng)當(dāng)應(yīng)用本文所使用的下列定義。出于本發(fā)明的目的，化學(xué)元素與元素周期表CAS版，和《化學(xué)和物理手冊》(第75版，1994)一致。此外，有機化學(xué)一般原理可參考“Organic Chemistry”,Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito:1999,和“March's Advanced Organic Chemistry”by Michael B.Smith and Jerry March,John Wiley&Sons,New York:2007中的描述，其全部內(nèi)容通過引用并入本文。
本發(fā)明所使用的術(shù)語“患者”是指人(包括成人和兒童)或者其他動物。根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，“患者”是指人。
術(shù)語“立體異構(gòu)體”是指具有相同化學(xué)構(gòu)造，但原子或基團(tuán)在空間上排列方式不同的化合物。立體異構(gòu)體包括對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、構(gòu)象異構(gòu)體(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)、幾何異構(gòu)體(順/反)異構(gòu)體、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體，等等。
術(shù)語“對映異構(gòu)體”是指一個化合物的兩個不能重疊但互成鏡像關(guān)系的異構(gòu)體。
術(shù)語“非對映異構(gòu)體”是指有兩個或多個手性中心并且其分子不互為鏡像的立體異構(gòu)體。非對映異構(gòu)體具有不同的物理性質(zhì)，如熔點、沸點、光譜性質(zhì)和反應(yīng)性。非對映異構(gòu)體混合物可通過高分辨分析操作如電泳和色譜，例如HPLC來分離。
術(shù)語“手性”是具有與其鏡像不能重疊性質(zhì)的分子；而“非手性”是指與其鏡像可以重疊的分子。
術(shù)語“外消旋物”或“外消旋混合物”是指缺少光學(xué)活性的兩個對映異構(gòu)體的等摩爾混合物。
本發(fā)明所使用的立體化學(xué)定義和規(guī)則一般遵循S.P.Parker，Ed.,McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；and Eliel,E.and Wilen,S,“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc,New York,1994。許多有機化 合物以光學(xué)活性形式存在，即它們具有使偏振光的平面發(fā)生旋轉(zhuǎn)的能力。在描述光學(xué)活性化合物時，使用前綴D和L或R和S來表示分子關(guān)于其一個或多個手性中心的絕對構(gòu)型。前綴d和l或(+)和(-)是用于指定化合物所致平面偏振光旋轉(zhuǎn)的符號，其中(-)或l表示化合物是左旋的。前綴為(+)或d的化合物是右旋的。一種具體的立體異構(gòu)體是對映異構(gòu)體，這種異構(gòu)體的混合物稱作對映異構(gòu)體混合物。對映異構(gòu)體的50:50混合物稱為外消旋混合物或外消旋體，當(dāng)在化學(xué)反應(yīng)或過程中沒有立體選擇性或立體特異性時，可出現(xiàn)這種情況。
本發(fā)明公開化合物的任何不對稱原子(例如，碳等)都可以以外消旋或?qū)τ丑w富集的形式存在，例如(R)-、(S)-或(R,S)-構(gòu)型形式存在。在某些實施方案中，各不對稱原子在(R)-或(S)-構(gòu)型方面具有至少50％對映體過量，至少60％對映體過量，至少70％對映體過量，至少80％對映體過量，至少90％對映體過量，至少95％對映體過量，或至少99％對映體過量。
依據(jù)起始物料和方法的選擇，本發(fā)明化合物可以以可能的異構(gòu)體中的一個或它們的混合物，例如外消旋體和非對應(yīng)異構(gòu)體混合物(這取決于不對稱碳原子的數(shù)量)的形式存在。光學(xué)活性的(R)-或(S)-異構(gòu)體可使用手性合成子或手性試劑制備，或使用常規(guī)技術(shù)拆分。如果化合物含有一個雙鍵，取代基可能為E或Z構(gòu)型；如果化合物中含有二取代的環(huán)烷基，環(huán)烷基的取代基可能有順式或反式構(gòu)型。
所得的任何立體異構(gòu)體的混合物可以依據(jù)組分物理化學(xué)性質(zhì)上的差異被分離成純的或基本純的幾何異構(gòu)體，對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體，例如，通過色譜法和/或分步結(jié)晶法。
可以用已知的方法將任何所得終產(chǎn)物或中間體的外消旋體通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方法拆分成光學(xué)對映體，如，通過對獲得的其非對映異構(gòu)的鹽進(jìn)行分離。外消旋的產(chǎn)物也可以通過手性色譜來分離，如，使用手性吸附劑的高效液相色譜(HPLC)。特別地，對映異構(gòu)體可以通過不對稱合成制備，例如，可參考Jacques,et al.,Enantiomers,Racemates and Resolutions(Wiley Interscience,New York,1981)；Principles of Asymmetric Synthesis(2nd Ed.Robert E.Gawley,Jeffrey Aube,Elsevier,Oxford,UK,2012)；Eliel,E.L.Stereochemistry of Carbon Compounds(McGraw-Hill,NY,1962)；Wilen,S.H.Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p.268(E.L.Eliel,Ed.,Univ.of Notre Dame Press,Notre Dame,IN 1972)；Chiral Separation Techniques:A Practical Approach(Subramanian,G.Ed.,Wiley-VCH Verlag GmbH&Co.KGaA,Weinheim,Germany,2007)。
術(shù)語“互變異構(gòu)體”或“互變異構(gòu)形式”是指具有不同能量的可通過低能壘(low energy barrier)互相轉(zhuǎn)化的結(jié)構(gòu)異構(gòu)體。若互變異構(gòu)是可能的(如在溶液中)，則可以達(dá)到互變異構(gòu)體的化學(xué)平衡。例如，質(zhì)子互變異構(gòu)體(protontautomer)(也稱為質(zhì)子轉(zhuǎn)移互變異構(gòu)體 (prototropic tautomer))包括通過質(zhì)子遷移來進(jìn)行的互相轉(zhuǎn)化，如酮-烯醇異構(gòu)化和亞胺-烯胺異構(gòu)化。價鍵互變異構(gòu)體(valence tautomer)包括通過一些成鍵電子的重組來進(jìn)行的互相轉(zhuǎn)化。酮-烯醇互變異構(gòu)的具體實例是戊烷-2,4-二酮和4-羥基戊-3-烯-2-酮互變異構(gòu)體的互變。互變異構(gòu)的另一個實例是酚-酮互變異構(gòu)。酚-酮互變異構(gòu)的一個具體實例是吡啶-4-醇和吡啶-4(1H)-酮互變異構(gòu)體的互變。除非另外指出，本發(fā)明化合物的所有互變異構(gòu)體形式都在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
術(shù)語“任選”或“任選地”是指隨后描述的事件或情形可以但不一定出現(xiàn)，并且該描述包括其中所述事件或情形出現(xiàn)的情況以及其中它不出現(xiàn)的情況。例如，“任選的鍵”是指該鍵可以存在或可以不存在，并且該描述包括單鍵、雙鍵或三鍵。
術(shù)語“包含”為開放式表達(dá)，即包括本發(fā)明所指明的內(nèi)容，但并不排除其他方面的內(nèi)容。
術(shù)語“不飽和”或“不飽和的”表示部分含有一個或多個不飽和度。
像本發(fā)明所描述的，本發(fā)明的化合物可以任選地被一個或多個取代基所取代，如上面的通式化合物，或者像實施例里面特殊的例子，子類，和本發(fā)明所包含的一類化合物。應(yīng)了解“任選取代的”這個術(shù)語與“取代或未取代的”這個術(shù)語可以交換使用。一般而言，術(shù)語“取代的”表示所給結(jié)構(gòu)中的一個或多個氫原子被具體取代基所取代。除非其他方面表明，一個任選的取代基團(tuán)可以在基團(tuán)各個可取代的位置進(jìn)行取代。當(dāng)所給出的結(jié)構(gòu)式中不只一個位置能被選自具體基團(tuán)的一個或多個取代基所取代，那么取代基可以相同或不同地在各個位置取代。
另外，需要說明的是，除非以其他方式明確指出，在本發(fā)明中所采用的描述方式“…分別獨立地為”應(yīng)做廣義理解，其既可以是指在不同基團(tuán)中，相同符號之間所表達(dá)的具體選項之間互相不影響，也可以表示在相同的基團(tuán)中，相同符號之間所表達(dá)的具體選項之間互相不影響。
在本說明書的各部分，本發(fā)明公開化合物的取代基按照基團(tuán)種類或范圍公開。特別指出，本發(fā)明包括這些基團(tuán)種類和范圍的各個成員的每一個獨立的次級組合。例如，術(shù)語“C1-5烷基”特別指獨立公開的甲基、乙基、C3烷基、C4烷基和C5烷基。
除非明確描述，本發(fā)明使用的術(shù)語“烷基”或“烷基基團(tuán)”，表示含有1至20個碳原子，飽和的直鏈或支鏈一價烴基基團(tuán)，其中，所述烷基基團(tuán)可以任選地被一個或多個本發(fā)明描述的取代基所取代。除非另外詳細(xì)說明，烷基基團(tuán)含有1-20個碳原子。根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，烷基基團(tuán)含有1-12個碳原子；根據(jù)本發(fā)明的另一個實施例，烷基基團(tuán)含有1-6個碳原子；根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，烷基基團(tuán)含有1-4個碳原子；根據(jù)本發(fā)明的另一個實施例， 烷基基團(tuán)含有1-3個碳原子。烷基基團(tuán)的實例包含，但并不限于，甲基(Me、-CH3)，乙基(Et、-CH2CH3)，正丙基(n-Pr、-CH2CH2CH3)，異丙基(i-Pr、-CH(CH3)2)，正丁基(n-Bu、-CH2CH2CH2CH3)，異丁基(i-Bu、-CH2CH(CH3)2)，仲丁基(s-Bu、-CH(CH3)CH2CH3)，叔丁基(t-Bu、-C(CH3)3)，正戊基(-CH2CH2CH2CH2CH3)，2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)，3-戊基(-CH(CH2CH3)2)，2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)，3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)，3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)，2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)，正己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)，2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)，3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))，2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)，3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)，4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)，3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)，2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)，2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)，3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3)，正庚基，正辛基，等等。
術(shù)語“羰基”，無論是單獨使用還是和其他術(shù)語連用，如“氨基羰基”或“酰氧基”，表示-(C＝O)-。
術(shù)語“H”表示單個氫原子。這樣的原子團(tuán)可以與其他基團(tuán)連接，譬如與氧原子相連，形成羥基基團(tuán)。
術(shù)語“鹵素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。
術(shù)語“烷氧基”表示烷基基團(tuán)通過氧原子與分子其余部分相連，其中烷基基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的含義。除非另外詳細(xì)說明，所述烷氧基基團(tuán)含有1-12個碳原子。根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，烷氧基基團(tuán)含有1-6個碳原子；根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，烷氧基基團(tuán)含有1-4個碳原子；根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，烷氧基基團(tuán)含有1-3個碳原子。所述烷氧基基團(tuán)任選地被一個或多個本發(fā)明描述的取代基所取代。
烷氧基基團(tuán)的實例包括，但并不限于，甲氧基(MeO、-OCH3)，乙氧基(EtO、-OCH2CH3)，1-丙氧基(n-PrO、n-丙氧基、-OCH2CH2CH3)，2-丙氧基(i-PrO、i-丙氧基、-OCH(CH3)2)，1-丁氧基(n-BuO、n-丁氧基、-OCH2CH2CH2CH3)，2-甲基-l-丙氧基(i-BuO、i-丁氧基、-OCH2CH(CH3)2)，2-丁氧基(s-BuO、s-丁氧基、-OCH(CH3)CH2CH3)，2-甲基-2-丙氧基(t-BuO、t-丁氧基、-OC(CH3)3)，1-戊氧基(n-戊氧基、-OCH2CH2CH2CH2CH3)，2-戊氧基(-OCH(CH3)CH2CH2CH3)，3-戊氧基(-OCH(CH2CH3)2)，2-甲基-2-丁氧基(-OC(CH3)2CH2CH3)，3-甲基-2-丁氧基(-OCH(CH3)CH(CH3)2)，3-甲基-l-丁氧基(-OCH2CH2CH(CH3)2)，2-甲基-l-丁氧基(-OCH2CH(CH3)CH2CH3)，等等。
術(shù)語“環(huán)”包括碳環(huán)，雜環(huán)，芳環(huán)，雜芳環(huán)，等等，其中所述碳環(huán)，雜環(huán)，芳環(huán)，雜芳環(huán) 基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的含義。
術(shù)語“環(huán)烷基”表示含有3-12個碳原子的，單價或多價的飽和單環(huán)，雙環(huán)或三環(huán)體系。雙環(huán)或三環(huán)體系可以包括稠環(huán)、橋環(huán)和螺環(huán)。根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，環(huán)烷基包含3-10個碳原子；根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，環(huán)烷基包含3-8個碳原子；根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，環(huán)烷基包含3-6個碳原子。環(huán)烷基基團(tuán)的實例包括，但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基，等等。所述環(huán)烷基基團(tuán)任選地被一個或多個本發(fā)明所描述的取代基所取代。
術(shù)語“芳基”表示含有6-14個環(huán)原子，或6-12個環(huán)原子，或6-10個環(huán)原子的單環(huán)、雙環(huán)和三環(huán)的碳環(huán)體系，其中至少有一個環(huán)是芳香族的。芳基基團(tuán)通常，但不必須地通過芳基基團(tuán)的芳香性環(huán)與母體分子連接。芳基基團(tuán)的實例可以包括苯基、萘基和蒽。所述芳基基團(tuán)任選地被一個或多個本發(fā)明所描述的取代基所取代。
本發(fā)明所使用的術(shù)語“前藥”，代表一個化合物在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為式(I)所示的化合物。這樣的轉(zhuǎn)化受前體藥物在血液中水解或在血液或組織中經(jīng)酶轉(zhuǎn)化為母體結(jié)構(gòu)的影響。關(guān)于前體藥物的詳細(xì)討論可以參考以下文獻(xiàn)：Higuchi et al.,Pro-drugs as Novel Delivery Systems,Vol.14,A.C.S.Symposium Series；Roche et al.,ed.,Bioreversible Carriers in Drug Design,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987；Rautio et al.,Prodrugs:Design and Clinical Applications,Nature Reviews Drug Discovery,2008,7,255-270,and Hecker et al,Prodrugs of Phosphates and Phosphonates,J.Med.Chem.,2008,51,2328-2345,每篇文獻(xiàn)通過引用包含于此。
本發(fā)明所使用的術(shù)語“代謝產(chǎn)物”是指具體的化合物或其鹽在體內(nèi)通過代謝作用所得到的產(chǎn)物。一個化合物的代謝產(chǎn)物可以通過所屬領(lǐng)域公知的技術(shù)來進(jìn)行鑒定，其活性可以通過如本發(fā)明所描述的那樣采用試驗的方法進(jìn)行表征。這樣的產(chǎn)物可以是通過給藥化合物經(jīng)過氧化，還原，水解，酰氨化，脫酰氨作用，酯化，脫脂作用，酶裂解等等方法得到。相應(yīng)地，本發(fā)明包括化合物的代謝產(chǎn)物，包括將本發(fā)明的化合物與哺乳動物充分接觸一段時間所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。
本發(fā)明所使用的“藥學(xué)上可接受的鹽”是指本發(fā)明的化合物的有機鹽和無機鹽。藥學(xué)上可接受的鹽在所屬領(lǐng)域是為我們所熟知的，如文獻(xiàn)：S.M.Berge et al.,J.Pharmaceutical Sciences,66：1-19,1977所記載的。藥學(xué)上可接受的無毒的酸形成的鹽包括，但并不限于，與氨基基團(tuán)反應(yīng)形成的無機酸鹽有鹽酸鹽，氫溴酸鹽，磷酸鹽，硫酸鹽，高氯酸鹽，和有機酸鹽如乙酸鹽，草酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽，檸檬酸鹽，琥珀酸鹽，丙二酸鹽，或通過書籍文獻(xiàn)上所記載的其他方法如離子交換法來得到這些鹽。其他藥學(xué)上可接受的鹽包括己二酸鹽，藻酸 鹽，抗壞血酸鹽，天冬氨酸鹽，苯磺酸鹽，苯甲酸鹽，重硫酸鹽，硼酸鹽，丁酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，環(huán)戊基丙酸鹽，二葡萄糖酸鹽，十二烷基硫酸鹽，乙磺酸鹽，甲酸鹽，反丁烯二酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，葡萄糖酸鹽，半硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，氫碘酸鹽，2-羥基-乙磺酸鹽，乳糖醛酸鹽，乳酸鹽，月桂酸鹽，月桂基硫酸鹽，蘋果酸鹽，丙二酸鹽，甲磺酸鹽，2-萘磺酸鹽，煙酸鹽，硝酸鹽，油酸鹽，棕櫚酸鹽，撲酸鹽，果膠酸鹽，過硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，苦味酸鹽，特戊酸鹽，丙酸鹽，硬脂酸鹽，硫氰酸鹽，對甲苯磺酸鹽，十一酸鹽，戊酸鹽，等等。通過適當(dāng)?shù)膲A得到的鹽包括堿金屬，堿土金屬，銨和N+(C1-4烷基)4的鹽。本發(fā)明也擬構(gòu)思了任何所包含N的基團(tuán)的化合物所形成的季銨鹽。水溶性或油溶性或分散產(chǎn)物可以通過季銨化作用得到。堿金屬或堿土金屬鹽包括鈉，鋰，鉀，鈣，鎂，等等。藥學(xué)上可接受的鹽進(jìn)一步包括適當(dāng)?shù)?、無毒的銨，季銨鹽和抗平衡離子形成的胺陽離子，如鹵化物，氫氧化物，羧化物，硫酸化物，磷酸化物，硝酸化物，C1-8磺酸化物和芳香磺酸化物。
本發(fā)明的“溶劑化物”是指一個或多個溶劑分子與本發(fā)明的化合物所形成的締合物。形成溶劑化物的溶劑包括，但并不限于，水，異丙醇，乙醇，甲醇，二甲亞砜，乙酸乙酯，乙酸，氨基乙醇。術(shù)語“水合物”是指溶劑分子是水所形成的締合物。
當(dāng)所述溶劑為水時，可以使用術(shù)語“水合物”。根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，一個本發(fā)明化合物分子可以與一個水分子相結(jié)合，比如一水合物；根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，一個本發(fā)明化合物分子可以與多于一個的水分子相結(jié)合，比如二水合物，根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，一個本發(fā)明化合物分子可以與少于一個的水分子相結(jié)合，比如半水合物。應(yīng)注意，本發(fā)明所述的水合物保留有非水合形式的所述化合物的生物有效性。
如本發(fā)明所使用的術(shù)語“治療”任何疾病或病癥，在其中一些實施例中指改善疾病或病癥(即減緩或阻止或減輕疾病或其至少一種臨床癥狀的發(fā)展)。在另一些實施例中，“治療”指緩和或改善至少一種身體參數(shù)，包括可能不為患者所察覺的身體參數(shù)。在另一些實施例中，“治療”指從身體上(例如穩(wěn)定可察覺的癥狀)或生理學(xué)上(例如穩(wěn)定身體的參數(shù))或上述兩方面調(diào)節(jié)疾病或病癥。在另一些實施例中，“治療”指預(yù)防或延遲疾病或病癥的發(fā)作、發(fā)生或惡化。
術(shù)語“預(yù)防”指獲病或障礙的風(fēng)險的減少(即：使疾病的至少一種臨床癥狀在主體內(nèi)停止發(fā)展，該主體可能面對或預(yù)先傾向面對這種疾病，但還沒有經(jīng)歷或表現(xiàn)出疾病的癥狀)。
本發(fā)明的可藥用鹽可以用常規(guī)化學(xué)方法由母體化合物、堿性或酸性部分來合成。一般而言，該類鹽可以通過使這些化合物的游離酸形式與化學(xué)計量量的適宜堿(如Na、Ca、Mg或 K的氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽等)反應(yīng)，或者通過使這些化合物的游離堿形式與化學(xué)計量量的適宜酸反應(yīng)來進(jìn)行制備。該類反應(yīng)通常在水或有機溶劑或二者的混合物中進(jìn)行。一般地，在適當(dāng)?shù)那闆r中，需要使用非水性介質(zhì)如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。在例如“Remington′s Pharmaceutical Sciences”，第20版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)；和“藥用鹽手冊：性質(zhì)、選擇和應(yīng)用(Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use)”，Stahl and Wermuth(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)中可找到另外一些適宜鹽的列表。
另外，本發(fā)明公開的化合物、包括它們的鹽，也可以以它們的水合物形式或包含其溶劑(例如乙醇、DMSO，等等)的形式得到，用于它們的結(jié)晶。本發(fā)明公開化合物可以與藥學(xué)上可接受的溶劑(包括水)固有地或通過設(shè)計形成溶劑化物；因此，本發(fā)明旨在包括溶劑化的和未溶劑化的形式。
本發(fā)明給出的任何結(jié)構(gòu)式也意欲表示這些化合物未被同位素富集的形式以及同位素富集的形式。同位素富集的化合物具有本發(fā)明給出的通式描繪的結(jié)構(gòu)，除了一個或多個原子被具有所選擇原子量或質(zhì)量數(shù)的原子替換?？梢氡景l(fā)明化合物中的示例性同位素包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，如2H，3H，11C，13C，14C，15N，17O，18O，18F，31P，32P，35S，36Cl和125I。
另一方面，本發(fā)明所述化合物包括同位素富集的本發(fā)明所定義的化合物，例如，其中存在放射性同位素，如3H，14C和18F的那些化合物，或者其中存在非放射性同位素，如2H和13C。該類同位素富集的化合物可用于代謝研究(使用14C)、反應(yīng)動力學(xué)研究(使用例如2H或3H)、檢測或成像技術(shù)，如正電子發(fā)射斷層掃描術(shù)(PET)或包括藥物或底物組織分布測定的單光子發(fā)射計算機斷層成像術(shù)(SPECT)，或可用于患者的放療中。18F富集的化合物對PET或SPECT研究而言是特別理想的。同位素富集的化合物可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的常規(guī)技術(shù)或本發(fā)明中的實施例和制備過程所描述使用合適的同位素標(biāo)記試劑替代原來使用過的未標(biāo)記試劑來制備。
化合物
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了一種化合物，其為式I所示化合物或者式I所示化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥
其中，
R1為任選取代的C1～5烷基、任選取代的C3～7環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的噻吩基、任選取代的吲哚基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一；
Z為任選取代的-Rc-Rd-，Rc為O、S、NH或CH2，Rd為碳原子數(shù)為1～10的直鏈或支鏈烴基或雜烴基，其中，任選地所述碳原子數(shù)為1～10的直鏈或支鏈烴基或雜烴基中含有至少一個氧原子或亞乙基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一；
Q為N或CH，Ra和Rb分別獨立地為任選取代的含有1～5個碳原子的直鏈或支鏈烷基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一，
或者Q連同與其相連的Ra和Rb共同形成含有至少一個O、N或羰基的五～七元環(huán)，所述五～七元環(huán)任選地被任選取代的含有1～5個碳原子的烷基、任選取代的芳基、任選取代的噻吩、C1～10烷基甲酸酯基取代，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物對σ1受體具有選擇性的拮抗，具有鎮(zhèn)痛活性潛力，也即具有治療疼痛、特別是神經(jīng)痛的潛力。進(jìn)一步，通過動物實驗，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物能夠有效應(yīng)用于治療和預(yù)防包括急性疼痛、慢性疼痛、頑固性疼痛、癌性疼痛和特殊疼痛等多種疼痛類疾病。
其中，需要說明的是，在本文所使用的表達(dá)方式“R1為任選取代的C1～5烷基、任選取代的C3～7環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的噻吩基、任選取代的吲哚基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一”中，術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)C1～5烷基、C3～7環(huán)烷基、芳基、噻吩基、吲哚基被取代時，用于取代C1～5烷基的取代基、用于取代C3～7環(huán)烷基的取代基、用于取代芳基的取代基、用于取代噻吩基的取代基和用于取代吲哚基的取代基分別獨立地選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
在本文所使用的表達(dá)方式“Z為任選取代的-Rc-Rd-，Rc為O、S、NH或CH2，Rd為碳 原子數(shù)為1～10的直鏈或支鏈烴基或雜烴基，其中，任選地所述碳原子數(shù)為1～10的直鏈或支鏈烴基或雜烴基中含有至少一個氧原子或亞乙基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一”中，術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)-Rc-Rd-被取代時，用于取代-Rc-Rd-的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
在本文所使用的表達(dá)方式“Q為N或CH，Ra和Rb分別獨立地為任選取代的含有1～5個碳原子的直鏈或支鏈烷基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一”中，術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)含有1～5個碳原子的直鏈或支鏈烷基被取代時，用于取代含有1～5個碳原子的直鏈或支鏈烷基的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
在本文所使用的表達(dá)方式“或者Q連同與其相連的Ra和Rb共同形成含有至少一個O、N或羰基的五～七元環(huán)，所述五～七元環(huán)任選地被任選取代的含有1～5個碳原子的烷基、任選取代的芳基、任選取代的噻吩、C1～10烷基甲酸酯基取代，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一”中，術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)含有1～5個碳原子的烷基、芳基、噻吩、C1～10烷基甲酸酯基被取代時，用于取代含有1～5個碳原子的烷基的取代基、用于取代芳基的取代基、用于取代噻吩的取代基、用于取代C1～10烷基甲酸酯基的取代基分別獨立地選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
關(guān)于“烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3”除非明確說明，定義是如本領(lǐng)域技術(shù)人員所通常理解的和在本發(fā)明中定義的。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，R1為任選取代的環(huán)戊烷基、任選取代的苯基、任選取代的萘基、任選取代的噻吩基、任選取代的吲哚基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。這里所使用的術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)環(huán)戊烷基、苯基、萘基、噻吩基、吲哚基被取代時，用于取代環(huán)戊烷基的取代基、用于取代苯基的取代基、用于取代萘基的取代基、用于取代噻吩基的取代基、用于取代吲哚基的取代基分別獨立地選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，Z為任選取代的含有1～5個碳原子的烷氧基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。這里所使用的術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)含有1～5個碳原子的烷氧基被取代時，用于取代含有1～5個碳原子的烷氧基的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，Q連同與其相連的Ra和Rb共同形成
或者
其中R2和R3分別獨立地為任選取代的C1-5烷基，R4和R5分別獨立地為選自氫、任選取代的C1-5烷基，羥基、叔丁氧羰基、羰基中的一種或幾種，其中所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一；
m為0，1或2；以及
X為氧，氮，或CH中的一種。
所述取代的取代基為選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
需要說明的是，針對R2和R3，這里所使用的術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)C1-5烷基被取代時，用于取代C1-5烷基的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一；針對R4和R5，當(dāng)R4和R5為任選取代的C1-5烷基時，這里所使用的術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)C1-5烷基被取代時，用于取代C1-5烷基的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一；針對R5，當(dāng)R5為任選取代的C1-5烷基、羥基、叔丁氧羰基、羰基中的一種或幾種時，這里所使用的術(shù)語“取代的取代基”是指當(dāng)C1-5烷基、羥基、叔丁氧羰基、羰基被取代時，用于取代C1-5烷基的取代基、用于取代羥基的取代基、用于取代叔丁氧羰基的取代基、用于取代羰基的取代基分別獨立地選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述的鹵素為氟、氯、溴、碘。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，R1為苯基、二氯苯基、苯甲基、氟代苯基、氯代苯基、萘基或者環(huán)戊烷基；
Z為乙氧基、丙氧基或者丁氧基；
Q為N、CH，Ra和Rb分別獨立地為甲基、乙基、丙基、異丙基，或者
Q連同與其相連的Ra和Rb共同形成含有至少一個O、N或羰基的五～七元環(huán)，所述五～七元環(huán)任選地被甲基、丙基、苯基、叔丁基甲酸酯基取代。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明的化合物為通式(I)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽：
其中，
Z為取代或未取代的-O(CH2)n-，n為2～4的整數(shù)，所述取代的取代基羥基或甲基，或者Z中的碳鏈上含有雙鍵或氧原子；
R1為氫、取代或未取代的C1-5烷基、取代或未取代的C3-7環(huán)烷基、取代或未取代的芳基，其中所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基或鹵素中的一種或幾種；
Q為N或CH，Ra和Rb分別獨立地為任選取代的含有1～5個碳原子的直鏈或支鏈烷基，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一，
或者Q連同與其相連的Ra和Rb共同形成含有至少一個O、N或羰基的五～七元環(huán)，所述五～七元環(huán)任選地被任選取代的含有1～5個碳原子的烷基、任選取代的芳基、任選取代的噻吩、C1～10烷基甲酸酯基取代，所述取代的取代基選自烷基、氰基、羥基、鹵素、-CN、-N(CN)2和-C(CN)3中的至少之一。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，通式(I)化合物中，所述未取代的C1-5烷基選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、戊基或異戊基，取代的C1-5烷基選自鹵素取代的C1-5烷基，所述鹵素為氟、氯、溴、碘。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，通式(I)化合物中，所述未取代的C3-7環(huán)烷基選自環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基，取代的C3--7環(huán)烷基選自鹵素取代的C3--7環(huán)烷基，C1—5烷基取代的C3--7環(huán)烷基，所述鹵素為氟、氯、溴、碘；所述的C1—5烷基為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、戊基或異戊基中的一種或幾種。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，通式(I)化合物中，所述的取代或未取代的芳基選自取代或未取代的苯基、取代或未取代的芐基、取代或未取代的萘基，所述的取代基選自烷基、氰基、羥基或鹵素中的一種或幾種。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，通式(I)化合物中，所述的鹵素為氟、氯、溴、碘。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，通式(I)化合物中，所述的取代的苯基為甲基苯基、甲氧基苯基、氟苯基、氯苯基；取代的芐基為甲氧基芐基。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述化合物為下列化合物的至少之一，或者所述下列化合物的至少之一的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥：
根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，本發(fā)明還包括式(I)結(jié)構(gòu)化合物及上述各具體化合物的鹽，所述的鹽為含有藥物上可接受的陰離子鹽：如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽或硫酸氫鹽、磷酸鹽或酸式磷酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、甲磺酸鹽、葡糖酸鹽、糖二酸鹽、苯甲酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽等。
用途
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明還提供了一種藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明的實施例，該藥物組合物含有前面所述的化合物。發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，含有對σ1受體具有選擇性拮抗的前述化合物的本發(fā)明的藥物組合物，能夠有效應(yīng)用于治療和預(yù)防包括急性疼痛、慢性疼痛、頑固性疼痛、癌性疼痛和特殊疼痛等多種疼痛類疾病。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明的藥物組合物進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體、佐劑、溶媒或它們的組合。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明的藥物組合物進(jìn)一步包括不同于前面所述的化合物的預(yù)防或治療疼痛類疾病的藥物，所述不同于前面所述的化合物的預(yù)防或治療疼痛類疾病的藥物為選自下列的至少之一：非甾體抗炎止痛藥、中樞性止痛藥、麻醉性止痛藥、中藥復(fù)方止痛藥。
根據(jù)本發(fā)明的另一些實施例，所述不同于前面所述的化合物的預(yù)防或治療疼痛類疾病的藥物為選自下列的至少之一：阿司匹林、布洛芬、消炎痛、撲熱息痛、保泰松、羅非昔布、塞來昔布、曲馬多、芬太尼、嗎啡、杜冷丁、山莨菪堿、萘普生、芬必得、扶他林和鎮(zhèn)痛新。
根據(jù)本發(fā)明的又一方面，本發(fā)明還提供了前面所述的化合物或者藥物組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于預(yù)防或治療疼痛類疾病。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述疼痛類疾病為神經(jīng)痛。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明的藥物組合物，其包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，和藥學(xué)上可接受的輔料(如載體和/或賦形劑等)，該藥物組合物是含有足以產(chǎn)生疼痛、神經(jīng)痛鎮(zhèn)痛活性的化合物。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，有效劑量的本發(fā)明化合物可與如惰性稀釋劑或某種載體一起口服。根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，可將本發(fā)明的化合物包于明膠膠囊中或壓制成片。為口服治療的目的，本發(fā)明化合物可與賦形劑一起使用并以片劑、錠劑、膠囊、混懸劑、糖漿劑等形式使用。根據(jù)本發(fā)明的實施例，上述制劑應(yīng)含有至少0.5wt％的本發(fā)明的活性化合物，但可根據(jù)特定的劑型變化，其中占單位重量的4％至約70％是便利的。在這樣的藥物組合物中活性化合物的量應(yīng)達(dá)到適當(dāng)?shù)膭┝?。本發(fā)明優(yōu)選的藥物組合物和制劑的口服單位劑量含有1.0-300毫克的本發(fā)明活性化合物。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明提供的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，溶劑化物和水合物可以與藥學(xué)上可以接受的載體或稀釋劑聯(lián)合應(yīng)用組成藥物制劑。藥學(xué)上可接受的適當(dāng)?shù)妮d體包括惰性固體填充劑或稀釋劑和無菌水溶液或有機溶液。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明化合物的用量取決于疾病或病癥的類型和嚴(yán)重性，還取決于對象的特征，例如一般健康、年齡、性別、體重和藥物耐受性。技術(shù)人員能夠根據(jù)這些或其它因素來確定適當(dāng)?shù)膭┝俊ＭǔＫ玫闹袠猩窠?jīng)系統(tǒng)藥物的有效劑量是技術(shù)人員熟知的。每日總劑量通常在約0.05mg到2000mg之間。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明涉及藥物組合物，其每單位劑量能提供約0.01到1000mg的活性成分。組合物可通過任何適當(dāng)?shù)耐緩绞┯茫缒z囊形式口服，以注射液的形式胃腸外施用，以膏劑或洗劑的形式局部施用，以栓劑的形式直腸施用，以貼片的傳遞系統(tǒng)的形式經(jīng)皮施用。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明提供的化合物可與適當(dāng)?shù)墓腆w或液體載體或稀釋劑組合形成膠囊、片劑、丸劑、散劑、糖漿劑、溶液劑等。片劑、丸劑、膠囊等包含約0.01到約99重量百分比的活性成分和粘合劑例如明膠、玉米淀粉、阿拉伯樹膠；賦形劑例如磷酸氫鈣；崩解劑例如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉或藻酸；潤滑劑例如硬脂酸鎂；和甜味劑例如蔗糖、乳糖。當(dāng)制劑形式為膠囊時，除上述類型的原料外，還可包含液體載體，例如油脂。
根據(jù)本發(fā)明的實施例，當(dāng)用于胃腸外施用時，可將本發(fā)明提供的化合物與無菌水或有機介質(zhì)組合形成可注射的溶液或懸液。
體外受體結(jié)合試驗表明，本發(fā)明所涉及的化合物對σ1受體具有較高的親和力，而與σ2的親和力低。對σ1受體具有選擇性的拮抗，表明具有鎮(zhèn)痛活性潛力。
另外，動物試驗結(jié)果也顯示，這類化合物既能明顯改善福爾馬林誘導(dǎo)的I相和II相疼痛。由于這些體外作用靶點和體內(nèi)藥理模型與σ1受體介導(dǎo)的神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控的反應(yīng)，特別是疼痛密切相關(guān)，因此本發(fā)明涉及的化合物具有治療疼痛、特別是神經(jīng)痛的潛力。
進(jìn)而，根據(jù)本發(fā)明的另一些實施例，本發(fā)明提供的化合物以及由化合物組成的藥物組合物可應(yīng)用于治療和預(yù)防疼痛；所述疼痛指急性疼痛，如軟組織及關(guān)節(jié)急性損傷疼痛，手術(shù)后疼痛，產(chǎn)科疼痛，急性帶狀皰疹疼痛，痛風(fēng)等；慢性疼痛如軟組織及關(guān)節(jié)勞損性或退變疼痛，椎間盤源性疼痛，神經(jīng)源性疼痛等；頑固性疼痛如三叉神經(jīng)痛，皰疹后遺神經(jīng)痛，椎間盤突出癥，頑固性頭痛等；癌性疼痛如晚期腫瘤痛，腫瘤轉(zhuǎn)移痛等；特殊疼痛類如血栓性脈管炎，頑固性心絞痛，特發(fā)性胸腹痛等。
一般合成方案
本發(fā)明的化合物的通用合成方法是先合成噠嗪酮類母體，然后通過一個碳鏈與含氮類結(jié)構(gòu)連接而成。例如：
其中，R1，R2、R3、R、n的取值如前面所定義的。
合成實施例
以下合成實施例1-47，均是基于上述的一般方法進(jìn)行的，其中各實施例制備的化合物見表1。實施例1、制備6-(2-嗎啉乙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物1)
通過上述反應(yīng)式所示的合成方案，制備6-(2-嗎啉乙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮，具體步驟如下：
1)取鹽酸苯肼14.5g，馬來酸酐9.8g溶于200ml純化水。然后，于攪拌狀態(tài)下，向溶液中緩慢加入40ml濃鹽酸，得到反應(yīng)體系。將所得反應(yīng)體系加熱回流，使其反應(yīng)6小時。反應(yīng)完畢后，將反應(yīng)混合物進(jìn)行冰水浴冷卻，使其析出黃色固體。然后，將經(jīng)過冷卻的反應(yīng)混合物進(jìn)行抽濾，并將濾餅用水洗滌兩次。接著，取出經(jīng)過洗滌的濾餅，并用飽和NaHCO3溶解，然后濾去不溶物，并將清液用濃鹽酸調(diào)到pH值到2～3之間，使其析出白色固體，抽濾干燥后得17.3g產(chǎn)物，收率92.0％。
2)取第一步的產(chǎn)物9.4g，無水碳酸鉀13.8g，1,2-二溴乙烷18.8g，加入100ml丙酮，得到反應(yīng)體系。將所得反應(yīng)體系加熱回流反應(yīng)4小時，然后冷卻至室溫。接著，將反應(yīng)混合物進(jìn)行過濾，并蒸干溶劑，得淺黃色油狀物。然后，將該淺黃色油狀物進(jìn)行快速層析柱得白色固體8.5g，熔點77-79℃，收率61.3％。
3)取第二步產(chǎn)物1.40g，嗎啉0.8g，碳酸鉀2g，加入50ml乙腈，得到反應(yīng)體系。將所得反應(yīng)體系加熱回流反應(yīng)6小時，然后冷卻至室溫。接著，將反應(yīng)混合物蒸干溶劑，并加入適量二氯甲烷，然后進(jìn)行水洗，并分離水層，將有機層用無水硫酸鎂干燥，蒸干溶劑，得黃色油狀物。然后，將該淺黃色油狀物進(jìn)行快速層析柱得目標(biāo)化合物——淡黃色油狀物1.21g，收率80.6％。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.64(d,J＝7.7Hz,2H),7.47–7.42(m,2H),7.33(t,J＝7.4Hz,1H),7.01(q,J＝9.7Hz,2H),4.31(t,J＝5.6Hz,2H),3.72(t,J＝3.9Hz,4H),2.78(t,J＝5.6Hz,2H),2.56(s,4H).MS(ESI)m/z 302.6([M+H]+)
實施例2、6-(3-嗎啉丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物2)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.65–7.63(m,2H),7.45(t,J＝7.9Hz,2H),7.34(t,J＝7.4Hz,1H),7.02–6.95(m,2H),4.32–4.17(m,2H),3.77–3.57(m,4H),2.80–2.62(m,1H),2.53–2.42(m,5H),2.00–1.88(m,2H).
MS(ESI)m/z 316.4([M+H]+)
實施例3、6-(4-嗎啉丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物3)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.66(d,J＝7.6Hz,2H),7.46(t,J＝7.9Hz,2H),7.35(t,J＝7.4Hz,1H),7.05–6.95(m,2H),4.18(t,J＝6.4Hz,2H),3.72(t,J＝4.6Hz,4H),2.53–2.37(m,6H),1.82–1.73(m,2H),1.68-1.63(m,2H).MS(ESI)m/z 330.8([M+H]+)
實施例4、6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物4)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成六氫吡啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.64(d,J＝7.7Hz,2H),7.44(dd,J＝10.8,5.0Hz,2H),7.35–7.30(m,1H),7.00–6.94(m,2H),4.19(t,J＝6.4Hz,2H),2.49–2.32(m,6H),2.00–1.90(m,2H),1.64–1.54(m,4H),1.43(s,2H).MS(ESI)m/z 314.3([M+H]+)
實施例5、6-(3-(4-甲基哌啶-1-基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物5)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成4-甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.66(d,J＝7.7Hz,2H),7.44(t,J＝7.9Hz,2H),7.33(t,J＝7.4Hz,1H),7.01–6.95(m,2H),4.20(t,J＝6.4Hz,2H),2.90(d,J＝11.4Hz,2H),2.52–2.39(m,2H), 2.01–1.85(m,4H),1.66–1.56(m,2H),1.41–1.30(m,1H),1.24(qd,J＝12.5,3.6Hz,2H),0.92(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI)m/z 328.4([M+H]+)
實施例6、6-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物6)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成N-甲基哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.62(dd,J＝8.5,1.0Hz,2H),7.43(dd,J＝11.3,4.6Hz,2H),7.35–7.31(m,1H),6.98(q,J＝9.7Hz,2H),4.19(t,J＝6.3Hz,2H),2.90–2.66(m,8H),2.63–2.54(m,2H),2.50(s,3H),1.99–1.88(m,2H).MS(ESI)m/z 329.4([M+H]+)
實施例7、6-(3-(4-乙基哌嗪-1-基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物7)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成N-乙基哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.61(dd,J＝8.5,1.0Hz,2H),7.41(t,J＝7.9Hz,2H),7.33–7.29(m,1H),7.01–6.93(m,2H),4.39–4.10(m,2H),2.81–2.39(m,12H),2.02–1.81(m,2H),1.14(t,J＝7.3Hz,3H).
MS(ESI)m/z 343.5([M+H]+)
實施例8、6-(3-(3,5-二甲基哌啶-1-基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物8)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成3,5-二甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.68–7.60(m,2H),7.42(t,J＝7.0Hz,2H),7.31(t,J＝7.4Hz,1H),7.00–6.93(m,2H),4.23–4.15(m,2H),2.97–2.87(m,2H),2.59–2.51(m,2H),2.01(dd,J＝14.5,7.1Hz,2H),1.81–1.66(m,2H),1.56(t,J＝11.2Hz,2H),0.83(d,J＝6.6Hz,6H),0.64–0.49(m,2H).MS(ESI)m/z 342.3([M+H]+)
實施例9、6-(3-(4-甲基-1,4-二氮雜庚烷-1-基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物9)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成N-甲基高哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.68–7.65(m,2H),7.49(t,J＝7.4Hz,2H),7.38(t,J＝7.4Hz,1H),7.05(d,J＝9.9Hz,1H),7.01(d,J＝9.8Hz,1H),4.25(t,J＝6.2Hz,2H),3.39–3.09(m,6H),2.95(t,J＝5.9Hz,2H),2.82(dd,J＝15.2,8.0Hz,2H),2.75(s,3H),2.29(s,2H),2.06–1.98(m,2H).MS(ESI)m/z 343.4([M+H]+)
實施例10、6-(3-(二甲氨基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物10)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成二甲胺，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.66–7.59(m,2H),7.47–7.41(m,2H),7.37–7.31(m,1H),7.07–6.98(m,2H),4.32–4.20(m,2H),3.24–3.17(m,2H),2.80(s,6H),2.35–2.21(m,2H).MS(ESI)m/z 274.3([M+H]+)
實施例11、6-(3-(二乙氨基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物11)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成二乙胺，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.67–7.63(m,2H),7.49–7.44(m,2H),7.35(dd,J＝10.7,4.2Hz,1H),7.04–6.98(m,2H),4.25(t,J＝6.1Hz,2H),2.96–2.84(m,6H),2.22–2.08(m,2H),1.24(t,J＝7.2Hz,6H).MS(ESI)m/z 302.4([M+H]+)
實施例12、6-(3-(二異丙氨基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物12)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成二異丙胺，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.63(d,J＝7.6Hz,2H),7.37(t,J＝7.9Hz,2H),7.25(t,J＝7.4Hz,1H),6.96–6.86(m,2H),4.15(t,J＝6.4Hz,2H),2.49(t,J＝7.1Hz,2H),2.35–2.28(m,4H),1.86–1.78(m,2H),1.44–1.32(m,4H),0.80(t,J＝7.4Hz,6H).MS(ESI)m/z 330.3([M+H]+)
實施例13、6-(3-(4-氧代哌啶-1-基)丙氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物13)
將1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啡啉換成4-哌啶酮，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.68–7.63(m,2H),7.49–7.42(m,2H),7.36-7.32(m,J＝11.9,5.4,1.0Hz,1H),7.05–6.93(m,2H),4.46–4.20(m,4H),3.76-3.72(m,4H),2.54–2.37(m,2H),2.26–2.09(m,2H),2.02–1.91(m,2H).MS(ESI)m/z 328.5([M+H]+)
實施例14、6-(4-(哌啶-1-基)丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物14)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啡啉換成六氫吡啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.65(d,J＝7.6Hz,2H),7.48(t,J＝8.2Hz,2H),7.33(t,J＝7.3Hz,1H),7.05–7.02(m,2H),4.25–4.21(m,2H),3.15–3.06(m,2H),2.97–2.88(m,2H),2.78–2.70(m,2H),1.98–1.53(m,10H).
MS(ESI)m/z 328.5([M+H]+)
實施例15、6-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物15)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啡啉換成N-甲基哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.61(t,J＝8.8Hz,2H),7.42(dt,J＝13.1,5.8Hz,2H),7.31(dd,J＝10.1,4.5Hz,1H),7.00–6.94(m,2H),4.13(dd,J＝11.6,5.4Hz,2H),2.77(t,J＝50.6Hz,8H),2.61–2.42(m,5H),1.82–1.50(m,4H).
MS(ESI)m/z 343.9([M+H]+)
實施例16、6-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物16)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啡啉換成N-乙基哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.65–7.61(m,2H),7.43(t,J＝7.9Hz,2H),7.32(t,J＝7.4Hz,1H),6.95–6.90(m,2H),4.43(s,2H),4.13(t,J＝6.4Hz,2H),3.77(t,J＝7.1Hz,2H),3.64–3.56(m,2H),2.62-2.54(m,4H),2.46–2.37(m,2H),2.25(s,2H),1.78–1.68(m,2H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H).
MS(ESI)m/z 357.5([M+H]+)
實施例17、6-(4-(二乙氨基)丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物17)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啡啉換成二乙胺，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.68(d,J＝8.1Hz,2H),7.47(t,J＝7.8Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,1H),7.03(d,J＝9.7Hz,2H),6.98(d,J＝9.7Hz,2H),4.25(s,2H),1.94(s,2H).MS(ESI)m/z316.8([M+H]+)
實施例18、6-(4-(4-甲基-1,4-二氮雜庚烷-1-基)丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮啶(化合物18)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啡啉換成N-甲基高哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝2.4Hz,2H),7.60(d,J＝2.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.7Hz,1H),7.00-6.95(m,2H),4.23(t,J＝6.1Hz,4H),3.51(s,2H),2.85–2.74(m,4H),2.52(s,7H),2.18–2.05(m,4H).MS(ESI)m/z 357.3([M+H]+)
實施例19、6-(4-(4-氧代哌啶-1-基)丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物19)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啡啉換成4-哌啶酮，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.69–7.63(m,2H),7.49–7.43(m,2H),7.37–7.32(m,1H),7.04–6.96(m,2H),4.27–4.09(m,2H),3.10–2.89(m,2H),2.74(t,J＝6.1Hz,2H),2.55–2.39(m,4H),1.88–1.59(m,6H).
MS(ESI)m/z 342.5([M+H]+)
實施例20、6-(4-(3,5-二甲基哌啶-1-基)丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物20)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啡啉換成3,5-二甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.66-7.63(m,2H),7.46–7.42(m,2H),7.34(t,J＝7.4Hz,1H),7.01–6.96(m,2H),4.29–4.16(m,2H),4.16–4.10(m,2H),3.10(t,J＝20.3Hz,2H),2.74–2.64(m,2H),2.07–1.86(m,2H),1.85–1.61(m,2H),0.97(d,J＝8.9Hz,3H),0.83(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI)m/z 356.7([M+H]+)
實施例21、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-嗎啉丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物21)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.88(d,J＝2.4Hz,1H),7.65(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.53–7.49(m,1H),7.05–6.94(m,2H),4.24(t,J＝6.4Hz,2H),3.73(t,J＝4.5Hz,4H),2.51(dd,J＝16.9,9.4Hz,6H),2.02–1.92(m,2H).
MS(ESI)m/z 384.8([M+H]+)
實施例22、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物22)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成N-甲基哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.85(d,J＝2.4Hz,1H),7.62(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.49(d,J＝8.7Hz,1H),7.06–6.93(m,2H),4.21(t,J＝6.3Hz,2H),2.64(d,J＝25.3Hz,8H),2.57–2.53(m,2H),2.42(s,3H),1.99–1.90(m,2H).
MS(ESI)m/z 397.7([M+H]+)
實施例23、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物23)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成六氫吡啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.88(d,J＝2.4Hz,1H),7.65(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.50(d,J＝8.7Hz,1H),7.04–6.96(m,2H),4.22(t,J＝6.4Hz,2H),2.53–2.38(m,6H),2.02–1.92(m,2H),1.66–1.58(m,4H),1.43(d,J＝30.4Hz,2H).
MS(ESI)m/z 382.8([M+H]+)
實施例24、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(4-甲基哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物24)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成4-甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.88(d,J＝2.5Hz,1H),7.65(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.50(d,J＝8.7Hz,1H),6.99(d,J＝10.0Hz,2H),4.22(t,J＝6.4Hz,2H),2.91(d,J＝11.4Hz,2H),2.49–2.45(m,2H),2.02–1.90(m,4H),1.63(d,J＝12.8Hz,2H),1.41–1.33(m,1H),1.29-1.22(m,3H),0.93(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI)m/z 396.9([M+H]+)
實施例25、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(吡咯烷-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物25)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成吡咯烷，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.85(d,J＝2.5Hz,1H),7.61(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.46(d,J＝8.7Hz,1H),6.95(q,J＝9.8Hz,2H),4.21(t,J＝6.4Hz,2H),2.62–2.58(m,2H),2.53(dd,J＝8.5,3.3Hz,4H),2.01–1.94(m,2H),1.81–1.74(m,4H).
MS(ESI)m/z 368.6([M+H]+)
實施例26、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(4-氧代哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物26)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成4-哌啶酮，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.87(d,J＝2.4Hz,1H),7.64(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.49(d,J＝7.4Hz,1H),7.02–6.96(m,2H),4.26(t,J＝6.3Hz,2H),2.78(dd,J＝13.4,7.4Hz,4H),2.62(t,J＝7.2Hz,2H),2.45(t,J＝6.0Hz,4H),2.05–1.96(m,2H).MS(ESI)m/z 396.5([M+H]+)
實施例27、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(4-乙基哌嗪-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物27)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成N-乙基哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝2.4Hz,1H),7.61(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.47(d,J＝8.7Hz,1H),7.00–6.94(m,2H),4.19(t,J＝6.4Hz,2H),2.73–2.41(m,12H),1.98–1.88(m,2H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)m/z 411.4([M+H]+)
實施例28、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(4-甲基-1,4-二氮雜庚烷-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物28)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成N-甲基高哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.82(d,J＝2.4Hz,1H),7.59(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.47(d,J＝8.7Hz,1H),7.01–6.95(m,2H),4.17(t,J＝6.1Hz,2H),3.33–3.22(m,4H),3.06(d,J＝3.9Hz, 2H),2.87(t,J＝6.1Hz,2H),2.78–2.73(m,4H),2.23–2.17(m,2H),1.99–1.91(m,3H).MS(ESI)m/z 411.6([M+H]+)
實施例29、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(3,5-二甲基哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物29)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成3,5-二甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.87(t,J＝2.9Hz,1H),7.65–7.61(m,1H),7.48(d,J＝8.7Hz,1H),7.02–6.94(m,2H),4.27–4.17(m,2H),2.88(d,J＝10.0Hz,2H),2.53–2.48(m,2H),2.06–1.98(m,2H),1.77–1.65(m,2H),1.50(t,J＝11.0Hz,2H),0.85(d,J＝6.5Hz,6H),0.54(q,J＝12.3Hz,2H).MS(ESI)m/z 410.6([M+H]+)
實施例30、叔丁基4-(3-((1-(3,4-二氯苯基)-6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基)氧)丙氧基)哌嗪-1-甲酸酯(化合物30)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成N-Boc哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.79(d,J＝2.4Hz,1H),7.55(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.38(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),6.92–6.85(m,2H),4.13(t,J＝6.3Hz,2H),3.39–3.28(m,4H),2.40(t,J＝7.2Hz,2H),2.30(s,4H),1.90–1.81(m,2H),1.36(s,9H).
MS(ESI)m/z 483.7([M+H]+)
實施例31、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(4-苯基哌嗪-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物31)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成4-苯基哌嗪，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.82(d,J＝2.4Hz,1H),7.57(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38(d,J＝8.8Hz,1H),6.89(q,J＝9.7Hz,2H),4.13(t,J＝6.4Hz,2H),2.52–2.43(m,6H),1.86–1.78(m,2H),0.93(t,J＝7.2Hz,6H).MS(ESI)m/z 370.9([M+H]+)
實施例32、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(二甲氨基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(32)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成二甲胺，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.82(d,J＝2.4Hz,1H),7.57(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38(d,J＝8.8Hz,1H),6.89(q,J＝9.7Hz,2H),4.13(t,J＝6.4Hz,2H),2.50(m,2H),1.86–1.78(m,2H),0.93(t,J＝7.2Hz,6H).MS(ESI)m/z 342.6([M+H]+)
實施例33、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(二乙氨基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物33)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成二乙胺，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.82(d,J＝2.4Hz,1H),7.57(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38(d,J＝8.8Hz,1H),6.89(q,J＝9.7Hz,2H),4.13(t,J＝6.4Hz,2H),2.52–2.43(m,6H),1.86–1.78(m,2H),0.93(t,J＝7.2Hz,6H).MS(ESI)m/z 370.5([M+H]+)
實施例34、2-(3,4-二氯苯基)-6-(3-(二丙氨基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物34)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷，嗎啉換成二丙胺，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.90(d,J＝2.5Hz,1H),7.67(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.51(d,J＝8.7Hz,1H),7.04–6.97(m,2H),4.24(t,J＝6.4Hz,2H),2.57(t,J＝7.1Hz,2H),2.42–2.35(m,4H),1.95–1.85(m,2H),1.51–1.41(m,4H),0.88(t,J＝7.4Hz,6H).MS(ESI)m/z 398.6([M+H]+)
實施例35、2-(3,4-二氯苯基)-6-(4-嗎啉丁氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物35)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.75(d,J＝2.3Hz,1H),7.50(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.30(d,J＝8.8Hz,1H),6.80(dt,J＝9.8,8.3Hz,2H),4.02(t,J＝6.4Hz,2H),3.54–3.48(m,4H),2.22(dd,J＝20.1,12.6Hz,6H),1.66–1.59(m,2H),1.50–1.43(m,2H).MS(ESI)m/z 398.3([M+H]+)
實施例36、2-(3,4-二氯苯基)-6-(4-(4-甲基哌啶-1-基)丁氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物36)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啉換成4-甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.89(d,J＝2.4Hz,1H),7.65(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.51(d,J＝8.7Hz,1H),7.01–6.97(m,2H),4.19(t,J＝6.4Hz,2H),2.91(d,J＝11.4Hz,2H),2.41–2.32(m,2H),1.93(dd,J＝20.6,8.6Hz,2H),1.82–1.75(m,2H),1.71–1.57(m,4H),1.37(ddd,J＝14.6,10.5,5.2Hz,1H),1.30–1.22(m,2H),0.93(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI)m/z 410.4([M+H]+)
實施例37、2-(3,4-二氯苯基)-6-(4-(哌啶-1-基)丁氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物37)
將鹽酸苯肼?lián)Q成3,4-二氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啉換成哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.90-7.88(m,1H),7.68-7.66(m,1H),7.53(dd,J＝8.7,4.8Hz,1H),7.08–6.97(m,2H).4.25–4.21(m,2H),3.15–3.06(m,2H),2.97–2.88(m,2H),2.78–2.70(m,2H),1.98–1.53(m,10H).MS(ESI)m/z 396.7([M+H]+)
實施例38、6-(3-(4-甲基哌啶-1-基)丙氧基)-2-(對甲苯基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物38)
將鹽酸苯肼?lián)Q成對甲苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成4-甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.52(d,J＝8.3Hz,2H),7.23(d,J＝8.2Hz,2H),6.95(q,J＝9.7Hz,2H),4.18(t,J＝6.4Hz,2H),2.88(d,J＝11.3Hz,2H),2.45–2.42(m,2H),2.37(s,3H),1.97–1.86(m,4H),1.60(d,J＝12.8Hz,2H),1.39–1.31(m,1H),1.28–1.18(m,2H),0.91(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI)m/z 342.7([M+H]+)
實施例39、6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)-2-(對甲苯基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物39)
將鹽酸苯肼?lián)Q成對甲苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.48(d,J＝8.3Hz,2H),7.22(d,J＝8.1Hz,2H),6.98–6.93(m,2H),4.17(t,J＝6.2Hz,2H),2.59(dd,J＝18.2,10.4Hz,6H),2.35(s,3H),2.09–1.97(m,2H),1.71–1.61(m,4H),1.46(s,2H).MS(ESI)m/z 328.7([M+H]+)
實施例40、2-(4-氟苯基)-6-(3-(4-甲基哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物40)
將鹽酸苯肼?lián)Q成對氟苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成4-甲基 哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.68–7.63(m,2H),7.15–7.09(m,2H),7.01–6.95(m,2H),4.19(t,J＝6.4Hz,2H),2.88(d,J＝11.1Hz,2H),2.48–2.40(m,2H),1.98–1.84(m,4H),1.61(d,J＝12.8Hz,2H),1.35(d,J＝6.0Hz,1H),1.23(q,J＝11.4Hz,2H),0.91(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI)m/z 346.5([M+H]+)
實施例41、2-(4-氟苯基)-6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物41)
將鹽酸苯肼?lián)Q成對氟苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.65–7.61(m,2H),7.14–7.07(m,2H),6.99(d,J＝9.7Hz,2H),4.20(t,J＝6.2Hz,2H),2.66(dd,J＝17.3,9.3Hz,6H),2.15–2.00(m,2H),1.75–1.68(m,4H),1.50(s,2H).MS(ESI)m/z 332.5([M+H]+)
實施例42、2-(4-氯苯基)-6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物42)
將鹽酸苯肼?lián)Q成對氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.68–7.64(m,2H),7.42–7.38(m,2H),6.97(s,2H),4.20(t,J＝6.4Hz,2H),2.42(dd,J＝22.1,14.4Hz,6H),2.04–1.86(m,2H),1.65–1.53(m,4H),1.43(s,2H).MS(ESI)m/z348.7([M+H]+)
實施例43、2-(4-氯苯基)-6-(3-(4-甲基哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物43)
將鹽酸苯肼?lián)Q成對氯苯肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成4-甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.68–7.65(m,2H),7.43–7.39(m,2H),7.01–6.96(m,2H),4.21(t,J＝6.4Hz,2H),2.89(d,J＝11.4Hz,2H),2.49–2.43(m,2H),1.99–1.87(m,4H),1.62(d,J＝12.9Hz,2H),1.42–1.33(m,1H),1.28-1.21(m,3.6Hz,2H),0.92(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI)m/z 362.8([M+H]+)
實施例44、6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)-2-(萘-2-基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物44)
將鹽酸苯肼?lián)Q成2-萘肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成哌啶，按 實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.20(d,J＝1.7Hz,1H),7.95–7.85(m,3H),7.79(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H),7.54–7.49(m,2H),7.03(dd,J＝22.4,9.7Hz,2H),4.25(t,J＝6.4Hz,2H),2.45(dd,J＝24.5,16.7Hz,6H),2.05–1.92(m,2H),1.66–1.55(m,4H),1.45(s,2H).MS(ESI)m/z 364.5([M+H]+)
實施例45、6-(3-(4-甲基哌啶-1-基)丙氧基)-2-(萘-2-基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物45)
將鹽酸苯肼?lián)Q成2-萘肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成4-甲基哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.20(d,J＝1.8Hz,1H),7.89(ddd,J＝16.8,11.9,6.1Hz,3H),7.79(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H),7.54–7.47(m,2H),7.03(dd,J＝23.3,9.7Hz,2H),4.25(t,J＝6.4Hz,2H),2.90(d,J＝11.4Hz,2H),2.53–2.43(m,2H),2.01–1.89(m,4H),1.62(d,J＝12.8Hz,2H),1.43–1.18(m,3H),0.93(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI)m/z 378.8([M+H]+)
實施例46、2-環(huán)戊基-6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)噠嗪-3(2H)-酮(化合物46)
將鹽酸苯肼?lián)Q成環(huán)戊基肼鹽酸鹽，1,2-二溴乙烷換成1,3-二溴丙烷烷，嗎啉換成哌啶，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ6.67–6.50(m,2H),5.19–5.00(m,1H),3.93(dd,J＝14.8,8.5Hz,2H),2.19(dd,J＝22.9,15.5Hz,6H),1.82–1.51(m,8H),1.35(dd,J＝23.9,18.4Hz,6H),1.18(s,2H).MS(ESI)m/z 306.5([M+H]+)
實施例47、6-(4-(二甲氨基)丁氧基)-2-苯基噠嗪-3(2H)-酮(化合物47)
將1,2-二溴乙烷換成1,4-二溴丁烷，嗎啡啉換成二甲胺，按實施例1的方法制備目標(biāo)化合物。
表1、實施例制備的優(yōu)選化合物編號及其結(jié)構(gòu)式
藥理實施例
在后面的實施例中，采用的勻漿液包括A勻漿液和B勻漿液兩種勻漿液，配置方法分別如下：
A勻漿液含有終濃度為0.01M的Tris-HCl緩沖液和終濃度為0.32M的蔗糖溶液，pH值為7.4。
B勻漿液為0.01M的Tris-HCl緩沖液，pH值為7.4。
C勻漿液為50mM Tris緩沖液，pH值為7.4。
實施例48、σ1受體膜的制備及配體親和性的測定(Ki值)
σ1受體膜的制備
將豚鼠斷頭后，在冰上操作迅速取出腦組織，將所得到的腦組織加入到離心管中。向該離心管中添加5ml A勻漿液后進(jìn)行勻漿。然后繼續(xù)向離心管中添加A勻漿液，達(dá)到10mlA勻漿液/g腦組織。將經(jīng)過勻漿的離心管進(jìn)行1000rpm離心10min。離心后，取上清液，并向上清液中添加A勻漿液調(diào)整至2ml/g，離心，取上清液，在4攝氏度下1000rpm離心10min,取上清液，在4攝氏度下11500rpm離心25min。取沉淀，向所得到的沉淀中加入A勻漿液調(diào)整為3ml A勻漿液/g沉淀，在25攝氏度下孵育15min，然后在4攝氏度下11500rpm離心25min，取沉淀作為σ1受體膜。
受體結(jié)合實驗材料
同位素配基[3H]-(+)-戊唑辛(250μCi,NET-1056250UC)，購自Perkin--Elmer公司；
氟哌啶醇購自Sigma-Aldrich公司；
GF/C玻璃纖維濾紙，購自Whatman公司；
PPO、POPOP及脂溶性閃爍液購自上海試劑一廠。
實驗儀器
Wallace 1450MicroBeta TriLux閃爍發(fā)光計數(shù)器，Perkin Elmer公司產(chǎn)品
實驗方法
1、Bradford法蛋白定量測定
參照市售試劑盒說明書。
2、受體飽和結(jié)合實驗。
(1)將所得到的σ1受體膜與勻漿液B混合并用勻漿機分散均勻，繼續(xù)加入B勻漿液參考蛋白測定定量膜的混懸液，備用；
(2)各反應(yīng)管分別加入膜制備物100μL；
(3)總結(jié)合管(TB)加入100μL勻漿液B，非特異性結(jié)合管(NB)加入100μL氟哌啶醇(終濃度10-5M)；
(4)各反應(yīng)管分別加入放射性配體[3H]-(+)-戊唑辛10μL，其終濃度依次為32.00、16.00、8.00、4.00、2.00、1.00、0.50、0.25nM；
(5)將各反應(yīng)管于25℃下溫孵3h，反應(yīng)完畢后，將各反應(yīng)管中結(jié)合的配基通過減壓快速過濾，并用冰冷的試驗緩沖液充分洗滌，然后將濾片取出放到2ml閃爍杯中，加入1ml的甲苯閃爍液并混勻；
(6)將閃爍瓶放入液閃計數(shù)儀計數(shù)。
3、σ1受體競爭性結(jié)合實驗
(1)先將前述制備的σ1受體膜與B勻漿液混合并用勻漿機分散均勻，繼續(xù)加入B勻漿液形成50ml混懸液，備用；
(2)各反應(yīng)管分別加入膜制備物(即上述混懸液)100μL；
(3)總結(jié)合管(TB)加入100μL B液，非特異性結(jié)合管(NB)加入100μL氟哌啶醇(終濃度10-5M)，各受試化合物特異性結(jié)合管(SB)加入100μL受試化合物(終濃度10-5M)；
(4)各反應(yīng)管分別加入放射性配體[3H]-(+)-戊唑辛10μL(終濃度4nM)，各受試化合物分別為實施例1-47制備的化合物；
(5)將上述各反應(yīng)管于25℃下溫孵3h，反應(yīng)完畢后，將各反應(yīng)管中結(jié)合的配基通過減壓快速過濾(其中Whatman試紙?zhí)崆?h使用0.25％PEI(聚醚酰亞胺(Polyetherimide))溶液飽和)，用冰冷的試驗緩沖液充分洗滌，然后將濾片取出放到2ml閃爍杯中，加入1ml的甲苯閃爍液并混勻；
(6)將閃爍瓶放入液閃計數(shù)儀計數(shù)。
4、數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
首先，通過以下公式計算各受試化合物的抑制率：
抑制率(I％)＝(TB-SB)/(TB-NB)×100％，
其中，
TB：總結(jié)合常數(shù)；
NB：非特異性結(jié)合常數(shù)；
SB：化合物的結(jié)合常數(shù)。
接著，利用logit法計算各受試化合物的IC50。
然后，通過Scatchard作圖得出各放射性配基Kd值及Bmax；
最后，通過以下公式得出所測定受試化合物的Ki值：
Ki＝IC50/(1+C/Kd)，
其中，該公式中C為游離態(tài)同位素濃度。
部分結(jié)果見表2。
實施例49、σ2受體膜的制備及配體親和性的測定(Ki值)
σ2受體膜的制備
將豚鼠斷頭后，在冰上操作迅速取出腦組織，將所得腦組織加入到離心管中。向該離心管中加入0.01M Tris HCl和0.32M蔗糖溶液，然后于4檔3-4s勻漿，勻漿4次，然后繼續(xù)加入0.01M Tris HCl和0.32M蔗糖溶液，調(diào)整為10ml/g，并將勻漿完的試管用天平調(diào)整重量，然后于1000r下離心10min；取上層液，向其中添加0.01M Tris HCl和0.32M蔗糖溶液調(diào)整為2ml/g，然后于1000r，4℃下離心10min；取上清液，再于11000r，4℃下離心30min；取沉淀，將其用0.01M Tris HCl和0.32M蔗糖溶液混懸30s，調(diào)整為3ml/g，然后于25℃下孵育15min，再于11000g下離心30min；取上清，-20℃儲存12h以上，使用時用50Mm-Tris孵育，然后離心，取沉淀作為σ2受體膜。
受體結(jié)合實驗材料
同位素配基[3H]-DTG([3H]-DTG,250μCi,NET-986250UC)，購自Perkin--Elmer公司；DTG)為二-鄰-甲苯基胍。
DTG購自Sigma-Aldrich公司；
(+)-SKF 10047購于Sigma-Aldrich公司；
GF/C玻璃纖維濾紙，購自Whatman公司；
PPO、POPOP及脂溶性閃爍液購自上海試劑一廠。
實驗儀器
Wallace 1450MicroBeta TriLux閃爍發(fā)光計數(shù)器，Perkin Elmer公司產(chǎn)品
實驗方法
1、Bradford法蛋白定量測定
參照市售試劑盒說明書。
2、sigma-2受體競爭性結(jié)合實驗。
(1)先將所得到的σ2受體膜與C勻漿液(為50mM Tris緩沖液，pH值為7.4)混合并用勻漿機分散均勻，得膜制備物，備用；
(2)各反應(yīng)管分別加入膜制備物100μL，C勻漿液100μL；
(3)總結(jié)合管(TB)加入100Μl C勻漿液，非特異性結(jié)合管(NB)加入5uM DTG 100μL(終濃度0.5*10-5M)，各受試化合物特異性結(jié)合管(SB)加入100μL受試化合物(終濃度10-5M)；100nM(+)-NANM(CAS號：133005-41-1)屏蔽sigma-1受體；各受試化合物分別為實施例1-47制備的化合物；
(4)各反應(yīng)管分別加入放射性配體3H-DTG 10μL(終濃度5nM)(各反應(yīng)管均設(shè)2個平行管，加樣時各管置于冰上)；
(5)將各反應(yīng)管于25℃下溫孵120min，反應(yīng)完畢后，將各反應(yīng)管中結(jié)合的配基通過減壓快速過濾(whatman試紙是經(jīng)過0.5％PEI浸泡過的)，用冰冷的試驗緩沖液充分洗滌，然后將濾片取出放到2ml閃爍杯中，加入1ml的甲苯閃爍液并混勻；
(6)將閃爍瓶放入液閃計數(shù)儀計數(shù)。
3、數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
首先，通過以下公式計算各受試化合物的抑制率：
抑制率(I％)＝(TB-SB)/(TB-NB)×100％，
其中，
TB：總結(jié)合常數(shù)；
NB：非特異性結(jié)合常數(shù)；
SB：化合物的結(jié)合常數(shù)。
接著，利用logit法計算各受試化合物的IC50；
然后，通過Scatchard作圖得出各放射性配基Kd值及Bmax；
最后，通過以下公式得出所測定受試化合物的Ki值：
Ki＝IC50/(1+C/Kd)，
部分結(jié)果見表2。
實施例50、σ1受體的配體的功能性的測定
σ1受體膜的制備
按照實施例48中“σ1受體膜的制備”的方法，制備σ1受體膜。
受體結(jié)合實驗材料
同位素配基[3H]-(+)-戊唑辛(250μCi,NET-1056250UC)，購自Perkin--Elmer公司；
氟哌啶醇、苯妥英購自Sigma-Aldrich公司；
GF/C玻璃纖維濾紙，購自Whatman公司；
PPO、POPOP及脂溶性閃爍液購自上海試劑一廠；
實驗儀器
Wallace 1450MicroBeta TriLux閃爍發(fā)光計數(shù)器，Perkin Elmer公司產(chǎn)品
實驗方法
1、Bradford法蛋白定量測定
參照市售試劑盒說明書。
2、σ1受體功能性實驗
(1)先將所得到的σ1受體膜與勻漿液B混合并用勻漿機分散均勻，繼續(xù)加入B勻漿液以形成50ml混懸液，備用；
(1)各反應(yīng)管分別加入膜制備物(即上述混懸液)100μL；
(2)總結(jié)合管(TB)加入100μL B液，非特異性結(jié)合管(NB)加入100μL氟哌啶醇(終濃度10-5M)；
(3)各受試化合物特異性結(jié)合管(SB)加入100μL受試化合物(終濃度10-5M)，各受試化合物分別為實施例1-47制備的化合物；
(4)各反應(yīng)管分別加入放射性配體[3H]-(+)-戊唑辛10μL(終濃度4nM)；
(5)將上述各反應(yīng)管于25℃下溫孵3h，反應(yīng)完畢后，將各反應(yīng)管中結(jié)合的配基通過減壓快速過濾(其中Whatman試紙?zhí)崆?h使用0.25％PEI溶液飽和)，用冰冷的試驗緩沖液充分洗滌，然后將濾片取出放到2ml閃爍杯中，加入1ml的甲苯閃爍液并混勻；
(6)將閃爍瓶放入液閃計數(shù)儀計數(shù)。
3、數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
按照實施例48中“數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理”的方法，計算得出各受試化合物的Ki值。
其中，σ1受體的功能性實驗是通過檢測σ1受體變構(gòu)劑苯妥英對所測試化合物的對受體親和力的變化來判斷的。苯妥英對σ1受體拮抗劑影響較小，或微弱的減弱化合物對受體的親和性，但卻能顯著增加σ1受體激動劑與受體的親和性。通過對比加入苯妥英和不加苯妥 英對所測試化合物的σ1受體親和性(Ki值)的變化可以判斷所測試化合物的σ1受體功能性。
表2、部分化合物對σ1受體和σ2受體的親和力(Ki值)
實施例51、急性毒性研究
將實施例1-47制備的化合物進(jìn)行急性毒性實驗，具體如下：
序貫法之限度實驗
取ICR小鼠，雌雄各半，隨機分為若干組，每組2-5只，分別為各化合物2000mg/kg組和溶劑組(同時設(shè)陽性對照組：加巴噴丁組、SIRA組)，按0.2ml/10g灌胃給藥。觀察動物3日內(nèi)的死亡情況。
其中，如果動物在三日內(nèi)有3只或3只以上存活，生命狀態(tài)無明顯異常時，繼續(xù)觀察，直至7日后實驗結(jié)束。如果動物在三日內(nèi)死亡3只或3只以上時，采用半數(shù)致死量法測定其LD50。
半數(shù)致死量法預(yù)試驗
取ICR小鼠，雌雄各半，隨機分若干組，每組4只，分別為各化合物1500mg/kg、1000mg/kg、500mg/kg組和溶劑組(同時設(shè)陽性對照組：加巴噴丁組、SIRA組)，按0.2ml/10g灌胃給藥，觀察動物1-3日內(nèi)的死亡情況。
結(jié)果
結(jié)果，小鼠單次灌服的LD50大于2000mg/kg，與陽性對照藥S1RA(>2000mg/kg)相當(dāng)，具有較小的急性毒性。部分結(jié)果見表3。
實施例52、福爾馬林誘導(dǎo)的小鼠疼痛模型實驗
將實施例1-47制備的化合物進(jìn)行福爾馬林誘導(dǎo)的小鼠疼痛模型實驗，具體如下：
實驗動物
健康ICR小鼠，雄性，22-40g，由南京青龍山動物養(yǎng)殖中心提供。
主要試劑
受試陽性藥：加巴噴丁、普瑞巴林、S1RA(E-52862)
甲醛溶液，1002012，隴西化工；
氯化鈉注射液，H32026305，徐州市第五制藥廠有限公司；
PEG400，20111202，威爾化工。
實驗儀器
秒表
觀察玻璃裝置
實驗方法
取ICR小鼠，隨機分為陰性對照組、模型組、陽性藥物各劑量組(加巴噴丁、普瑞巴林、S1RA)以及化合物各劑量組(具體給藥劑量見表3)，每組10只。陰性對照組和模型組灌胃給予相應(yīng)溶劑雙蒸水，陽性藥物組灌胃給予相應(yīng)陽性藥物，化合物各劑量組灌胃給予相應(yīng)劑量化合物，灌胃體積為0.1ml/10g。灌胃15min后，在小鼠左后足皮下注射2.5％的福爾馬林20μL造模，以形成皮丘為造模成功標(biāo)準(zhǔn)，陰性對照組在小鼠左后足底皮下注射20μL生理鹽水。造模成功后觀察造模后第0-5分鐘和第15-45分鐘小鼠舔咬注射足部位的時間。
數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示，比較用單因素方差分析；然后，利用概率單位回歸法計算ED50，部分結(jié)果見表4。
表3、加巴噴丁、SIRA，化合物23，24對福爾馬林致痛大鼠抬腿次數(shù)的影響
注：*P<0.05，**P<0.01VS模型組。
表4、優(yōu)選化合物體內(nèi)動物模型實驗結(jié)果
上述體外受體結(jié)合試驗表明，本發(fā)明所涉及的化合物對σ1受體具有較高的親和力，而與σ2的親和力低。對σ1受體具有選擇性的拮抗，表明具有鎮(zhèn)痛活性潛力。
另外，動物試驗結(jié)果也顯示，這類化合物既能明顯改善福爾馬林誘導(dǎo)的I相和II相疼痛。由于這些體外作用靶點和體內(nèi)藥理模型與σ1受體介導(dǎo)的神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控的反應(yīng)，特別是疼痛密切相關(guān)，因此本發(fā)明涉及的化合物具有治療疼痛、特別是神經(jīng)痛的潛力。
制劑實施例
實施例53、片劑制備
分別以實施例1-47制備的化合物作為活性成分，以片劑劑型為例，按照以下配方制備本發(fā)明的藥物組合物：
將原輔料過80目篩備用，稱取處方量活性成分、微晶纖維素、乳糖、聚維酮K30，加入到高速混合制劑機中，低速攪拌混合均勻，加入適量純化水，低速攪拌，高速切割制粒，然后將濕顆粒于60℃干燥3h，24目篩整粒，并加入處方量羧甲淀粉鈉、二氧化硅和硬脂酸鎂，總混，旋轉(zhuǎn)壓片機壓片，即得片劑劑型的藥物組合物。
在本說明書的描述中，參考術(shù)語“一個實施例”、“一些實施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點包含于本發(fā)明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不必須針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點可以在任一個或多個實施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特征進(jìn)行結(jié)合和組合。
盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述實施例進(jìn)行變化、修改、替換和變型。