本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，涉及一種丹參酮類化合物17位酯化衍生物及其制備工藝和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
丹參酮類化合物為丹參中對心血管疾病，有確切療效的重要的脂溶性活性物質(zhì)。藥理研究表明其主要有抗心律失常、保護(hù)心肌、改善心肌缺血缺氧、恢復(fù)血液循環(huán)等作用。丹參酮IIA是丹參脂溶性成分里面含量較多的一種化合物，但是其水溶性弱，不易溶于水，因此其在生物體內(nèi)的利用度較低。近些年來，對丹參酮IIA結(jié)構(gòu)修飾的報道日漸增多，思路主要集中在改善丹參酮IIA的水溶性，進(jìn)而調(diào)節(jié)其油水分配系數(shù)，增加生物利用度等方面。
雖然丹參酮類化合物活性確切顯著，但因其脂溶性強(qiáng)難溶于水，臨床上單體應(yīng)用并不多，至今只有注射用丹參酮IIA磺酸鈉鹽制劑。丹參酮IIA磺酸鈉鹽雖然提高了丹參酮IIA的極性、增加其水溶性從而增強(qiáng)了活性，但半衰期短、代謝快為其顯著缺點(diǎn)，而且具有刺激性。所以如何合成出更好的丹參酮類衍生物，以改善其極性、提高生物利用度、提高活性，是當(dāng)前研究丹參關(guān)注的焦點(diǎn)之一，也是難點(diǎn)之一：因?yàn)榈⑼惤Y(jié)構(gòu)獨(dú)特，其脂溶性強(qiáng)、活性部位對熱不穩(wěn)定、母核上難以引入其它基團(tuán)等因素導(dǎo)致其衍生物合成的困難。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明為解決丹參酮類化合物結(jié)構(gòu)母核上難以引入其它基團(tuán)等因素，導(dǎo)致其衍生物合成的困難的技術(shù)難題，公開了一種丹參酮類化合物17位酯化衍生物及其制備工藝和應(yīng)用。
為解決上述技術(shù)難題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
一種丹參酮類化合物17位酯化衍生物，具有如下結(jié)構(gòu)通式（Ⅰ）：
或結(jié)構(gòu)通式（Ⅱ）：
或結(jié)構(gòu)通式（Ⅲ）：
式中，R是任意選自-H、-OCH3、-CH3、-OH、-CH2OH、-F、-Cl、-NO2中的一種或幾種，
R1、R2是-H或-CH3，
R3、R4是任意選自-OCH3、-CH3、-OH、-CH2OH、-H中的一種，
R5是-OH或-NH2，
n=0、1或2。
具有如下結(jié)構(gòu)通式（Ⅳ）：
或結(jié)構(gòu)通式（Ⅴ）：
或結(jié)構(gòu)通式（Ⅵ）：
式中，R’是任意選自-H、-OCH3、-CH3、-OH、-CH2OH、-F、-Cl、-NO2中的一種或幾種，
R5’是-OH或-NH2，
n1=0、1或2。
所述的丹參酮類化合物17位酯化衍生物的制備工藝，步驟如下：
（1）17-溴代丹參酮類化合物的制備：在無水CCl4中加入丹參酮類化合物，分批加入四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)300~600w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰，回流反應(yīng)1.5～3.5h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮類化合物；
（2）丹參酮類化合物17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入17-溴代丹參酮類化合物溶解，再加入苯酸類化合物，調(diào)pH至7.5～8.5，保持溫度45～65℃，反應(yīng)1～4h之后，利用硅膠柱純化或結(jié)晶法純化產(chǎn)物，完成丹參酮類化合物17位酯化衍生物的制備。
所述步驟（1）中，丹參酮類化合物為丹參酮ⅡA，丹參酮類化合物：四丁基三溴化銨的添加質(zhì)量比為1:（0.5~2.5）:（0.01~0.1）。
所述步驟（2）中，苯酸類化合物為3, 4, 5 - 三甲氧基苯甲酸、鄰羥基苯甲酸、鄰氟苯甲酸、3, 4 – 二甲氧基苯乙酸、鄰羥基苯乙酸、阿魏酸、丹參素或左旋多巴中的任意一種；17-溴代丹參酮類化合物：苯酸類化合物的物質(zhì)的量比為1:（1～2）。
一種丹參酮類化合物17位酯化衍生物，作為制備防治心血管疾病藥物的微囊型緩釋固體分散體的應(yīng)用。
所述微囊型緩釋固體分散體由以下重量份的物質(zhì)組成：丹參酮類化合物17位酰胺類衍生物10~30份，聚乙烯吡咯烷酮20~100份，單硬脂酸甘油酯20~100份，乙基纖維素8~50份。
所述微囊型緩釋固體分散體的制備方法如下：按照丹參酮類化合物17位酰胺類衍生物：聚乙烯吡咯烷酮：單硬脂酸甘油酯：乙基纖維素的質(zhì)量比為1:（1.5~2）:（2~4）:（1~1.5）的比例混合，加入總固體3~10倍質(zhì)量的70%~100%乙醇，待充分溶解后，回收總固體2~5倍質(zhì)量的乙醇，得到混合體系；混合體系以噴霧干燥法制備成微囊。
所述噴霧干燥的參數(shù)為：溫度50~80℃，進(jìn)樣速率30~45 r/min。
本發(fā)明的有益效果在于：
1．本發(fā)明所合成的化合物均為新化合物，而且首次通過17位取代反應(yīng)，將具有活性的兩類化合物合成為1個化合物，所合成的化合物均為新化合物，其工藝更適合產(chǎn)業(yè)化。
2. 本發(fā)明為改善丹參酮的極性、增強(qiáng)功效、提高的生物利用度，對丹參酮類化合物進(jìn)行衍生物修飾研究，得到了系列的丹參酮類化合物17位取代的衍生物，均為新化合物。
3. 本發(fā)明通過薄層層析分析和溶解性能研究，發(fā)現(xiàn)丹參酮類化合物17位酯化衍生物的極性均比丹參酮類化合物增強(qiáng)，提高了生物利用度。
4. 通過大鼠動脈血管環(huán)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)一些衍生物可以提高丹參酮類化合物血管舒張作用，從而增強(qiáng)心肌保護(hù)作用。在大鼠動脈血管環(huán)實(shí)驗(yàn)我們選用剛處死的大鼠胸主動脈，剪成4mm左右的血管環(huán)，在l×10-6 mol/L的重酒石酸去甲腎上腺素刺激胸主動脈血管環(huán)后，加入化合物，結(jié)果表明與丹參酮IIA相比，一些衍生物的血管舒張率明顯高于丹參酮（血管舒張率：2.70 ± 0.95 （1×10-4M））。
5. 通過制作微囊型緩釋固體分散體中間體，以有利于進(jìn)一步制備成成丸劑、片劑、膠囊劑、粉針劑等各種劑型，進(jìn)而在臨床上進(jìn)行應(yīng)用，為心血管疾病防治的新藥開發(fā)和丹參的利用提供了新的可能。
具體實(shí)施方式
一種丹參酮類化合物17位酯化衍生物，具有如下結(jié)構(gòu)通式（Ⅰ）：
或結(jié)構(gòu)通式（Ⅱ）：
或結(jié)構(gòu)通式（Ⅲ）：
式中，R是任意選自-H、-OCH3、-CH3、-OH、-CH2OH、-F、-Cl、-NO2中的一種或幾種，
R1、R2是-H或-CH3，
R3、R4是任意選自-OCH3、-CH3、-OH、-CH2OH、-H中的一種，
R5是-OH或-NH2，
n=0、1或2。
具有如下結(jié)構(gòu)通式（Ⅳ）：
或結(jié)構(gòu)通式（Ⅴ）：
或結(jié)構(gòu)通式（Ⅵ）：
式中，R’是任意選自-H、-OCH3、-CH3、-OH、-CH2OH、-F、-Cl、-NO2中的一種或幾種，
R5’是-OH或-NH2，
n1=0、1或2。
所述的丹參酮類化合物17位酯化衍生物的制備工藝，步驟如下：
（1）17-溴代丹參酮類化合物的制備：在無水CCl4中加入丹參酮類化合物，分批加入四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)300~600w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰，回流反應(yīng)1.5～3.5h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮類化合物；
（2）丹參酮類化合物17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入17-溴代丹參酮類化合物溶解，再加入苯酸類化合物，調(diào)pH至7.5～8.5，保持溫度45～65℃，反應(yīng)1～4h之后，利用硅膠柱純化或結(jié)晶法純化產(chǎn)物，完成丹參酮類化合物17位酯化衍生物的制備。
所述步驟（1）中，丹參酮類化合物為丹參酮ⅡA，丹參酮類化合物：四丁基三溴化銨的添加質(zhì)量比為1:（0.5~2.5）:（0.01~0.1）。
所述步驟（2）中，苯酸類化合物為3, 4, 5 - 三甲氧基苯甲酸、鄰羥基苯甲酸、鄰氟苯甲酸、3, 4 – 二甲氧基苯乙酸、鄰羥基苯乙酸、阿魏酸、丹參素或左旋多巴中的任意一種；17-溴代丹參酮類化合物：苯酸類化合物的物質(zhì)的量比為1:（1～2）。
一種丹參酮類化合物17位酯化衍生物，作為制備防治心血管疾病藥物的微囊型緩釋固體分散體的應(yīng)用。
所述微囊型緩釋固體分散體由以下重量份的物質(zhì)組成：丹參酮類化合物17位酰胺類衍生物10~30份，聚乙烯吡咯烷酮20~100份，單硬脂酸甘油酯20~100份，乙基纖維素8~50份。
所述微囊型緩釋固體分散體的制備方法如下：按照丹參酮類化合物17位酰胺類衍生物：聚乙烯吡咯烷酮：單硬脂酸甘油酯：乙基纖維素的質(zhì)量比為1:（1.5~2）:（2~4）:（1~1.5）的比例混合，加入總固體3~10倍質(zhì)量的70%~100%乙醇，待充分溶解后，回收總固體2~5倍質(zhì)量的乙醇，得到混合體系；混合體系以噴霧干燥法制備成微囊。
所述噴霧干燥的參數(shù)為：溫度50~80℃，進(jìn)樣速率30~45 r/min。
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的解釋說明：
實(shí)施例1
（1）17-溴代丹參酮ⅡA的制備：在無水CCl4中加入10mg丹參酮ⅡA，分批加入15mg 四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)400w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰0.001mg，回流反應(yīng)約3h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮ⅡA；
（2）丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入373.23mg 17-溴代丹參酮ⅡA溶解，再加入236.5mg 3, 4, 5 - 三甲氧基苯甲酸，調(diào)pH至7.5，保持溫度45℃，反應(yīng)1h之后，利用硅膠柱純化產(chǎn)物，完成丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備。
目標(biāo)衍生物為紅色針狀結(jié)晶，其核磁數(shù)據(jù)為：
1H-NMR (400MHz, CDCl3, TMS) δ 7.77 (2H, s, H-6, 7), 7.73 (2H, s, H-22, 26), 7.23 (1H, s, H-15), 5.20 (2H, s，H-17)，3.15 (2H，t，J=6.4Hz，H-1), 3.80 (6H, s,-OCH3×2), 3.70 (3H, s,-OCH3), 2.31-2.37 (1H, m, H-2a), 1.97-2.06 (2H, m, H-2b, 3a), 1.57-1.60 (1H, m, H-3b), 1.02 (6H, s, H-18，19)。
13C-NMR(100MHz, CDCl3, TMS) δ 182.4, 174.7, 165.9, 159.4,153.2, 150.3, 144.4, 141.5, 133.8, 128.1, 127.4, 125.5, 121.1, 118.9, 107.5, 106.6, 56.4 (-OCH3×2), 60.1 (-OCH3×2), 55.3，38.0, 34.8, 31.7 (C-18，19), 27.6, 19.5。
ESI-MS m/z: 505.1 [M + 1]+, 計算值： C29H28O8: 504.2。
丹參酮類化合物17位酯化衍生物，對大鼠胸主動脈的活性研究方法：實(shí)驗(yàn)前樣品和藥品的調(diào)配和K-H液制備，將準(zhǔn)備進(jìn)行檢測的丹參酮IIA衍生物樣品稱量準(zhǔn)確，用DMSO將其溶解，調(diào)配成實(shí)驗(yàn)所需的濃度。同時將NE和硝普鈉也調(diào)配成實(shí)驗(yàn)所需濃度。Krebs-Henseleit(K-H)液依照NaCl: 6.95g/L、KCl: 0.35g/L、NaHCCb: 2.10g/L、MgS04: 0.14g/L、CaCb: 0.28g/L、葡萄糖:2.18g/L、KH2PO4: 0.16g/L、EDTA:0.0047g/L的比例進(jìn)行制備，制備后調(diào)至PH=7.4，將K-H置于冰箱中4℃保存，需要注意的是K-H液需要當(dāng)天制備，當(dāng)天使用。
大鼠離體胸主動脈血管環(huán)的制作和裝備：取4℃保存的K-H液少許置于浴槽中，通入95%O2和5%CO2進(jìn)行預(yù)氧飽和，然后將200g的SD雄性大鼠頸部脫臼處死，打開胸腔，迅速游離出胸主動脈，置于4℃預(yù)氧飽和的K-H液中，小心去除動脈周圍的結(jié)締組織，剪成3nm長的血管環(huán)5根，操作過程中避免過度牽拉，損傷內(nèi)皮。選取4根外形較好的血管環(huán)分別置于盛有K-H液(37℃恒溫保存)的浴槽中，浴槽內(nèi)持續(xù)通入95%O2和5%CO2的混和氣體，每個血管環(huán)用上下兩個L型不銹鋼小鉤小心貫穿入血管環(huán)管腔，一端固定于浴槽底部，另一端通過絲線連接于張力換能器。血管張力變化會通過生物信號采集處理系統(tǒng)(預(yù)先在電腦中對生物信號采集系統(tǒng)進(jìn)行參數(shù)設(shè)定)記錄于電腦中。
大鼠離體胸主動脈血管環(huán)的穩(wěn)定：將血管環(huán)在1.5g張力下穩(wěn)定2h，隨時觀測電腦中張力記錄變化并進(jìn)行微調(diào)。每20分鐘換新鮮K-H液，K-H液預(yù)先置于37℃恒溫浴槽中，以防止在換K-H液后血管環(huán)周圍溫度不至于變化過大。最后一次換K-H液后，將浴槽定容至6mL。
血管環(huán)內(nèi)皮功能完整性的檢測：以l×10-6mol/L (加入浴槽后濃度，下同)的重酒石酸去甲腎上腺素(NE)刺激血管環(huán)，使血管環(huán)收縮，達(dá)到最大收縮張力，穩(wěn)定后給予l×l0-5mol/L的硝普鈉并測定其舒張張力，若加硝普鈉后血管環(huán)的張力值與最大收縮張力值的48SPF等級SD大鼠雄性，200g，購自河南省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心(合格證: sckx (豫)2005-0001)。
丹參酮IIA衍生物對大鼠胸主動脈的活性研究：差值除于最大收縮張力后的數(shù)值(即舒張幅度)>80%，說明操作過程中對血管環(huán)內(nèi)皮的損傷小，內(nèi)皮比較完整性，可以進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。
丹參酮類化合物17位酯化衍生物對大鼠胸主動脈的活性研究：檢測內(nèi)皮功能，確認(rèn)內(nèi)皮完整可以使用后，用K-H液沖洗并再次穩(wěn)定30分鐘，期間每10分鐘換K-H液一次，最后一次沖洗后將浴槽定容至6mL，然后進(jìn)行衍生物對大鼠胸主動脈環(huán)的作用研究：先以1×10-6mol/L的NE刺激血管環(huán)，使血管環(huán)收縮達(dá)到最大收縮張力，穩(wěn)定后直接加入l×10-4mol/L濃度的丹參酮IIA衍生物作用于胸主動脈血管環(huán)，觀察張力變化，待穩(wěn)定后計算此衍生物的舒張幅度。
血管舒張率：36.52 ± 1.20 （1×10-4M）。
該衍生物應(yīng)用于微囊緩釋固體分散體制備方法：將目標(biāo)衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油酯、乙基纖維素按照1:2:2:0.8比例混合，制得固體混合物，加入8倍固體混合物質(zhì)量的90%乙醇，待充分溶解后，回收2.5倍固體混合物質(zhì)量的乙醇，混合體系以噴霧干燥法制備成微囊（溫度62℃，進(jìn)樣速率33 r/min）。
實(shí)施例2
（1）17-溴代丹參酮ⅡA的制備：在無水CCl4中加入10mg丹參酮ⅡA，分批加入5mg 四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)300w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰0.01mg，回流反應(yīng)約1.5h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮ⅡA；
（2）丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入373.23mg 17-溴代丹參酮ⅡA溶解，再加入138mg 鄰羥基苯甲酸，調(diào)pH至8.5，保持溫度65℃，反應(yīng)4h之后，利用硅膠柱純化，完成丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備。
目標(biāo)衍生物為紅色針狀結(jié)晶，其核磁數(shù)據(jù)為：
1H-NMR(400MHz, CDCl3, TMS) δ 7.79 (2H, s, H-6, 7), 7.57(1H, dd, H-23), 7.38(1H, t, H-24), 6.96 (1H, d, H-26), 6.72 (1H, t, H-25), 7.24 (1H, s, H-15), 5.20 (1H, d, J=17.2 Hz H-17), 5.21(2H, s，H-17)，3.14 (2H，t，J=6.4Hz，H-1), 2.34-2.39 (1H, m, H-2a) , 1.96-2.10 (2H, m, H-2b, 3a), 1.60-1.62 (1H, m, H-3b), 1.05 (3H, s, H-18), 1.12 (3H, s, H-19)。
13C-NMR(100MHz, CDCl3, TMS) δ 182.4, 174.6, 165.8, 162.0, 160.9, 150.9, 141.7, 137.0, 135.3, 134.3, 129.7, 128.6, 126.8, 123.3, 121.4, 120.3, 118.7, 117.5, 112.8, 55.5，38.1, 34.8, 31.7 (C-18，19), 27.6, 19.5。
ESI-MS m/z: 430.9 [M + 1]+, 計算值：C26H22O6: 430.1。
參照實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)步驟，計算此衍生物的舒張幅度。
血管舒張率：21.56 ± 1.29 （1×10-4M）。
該衍生物應(yīng)用于微囊緩釋固體分散體制備方法：將目標(biāo)衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油酯、乙基纖維素按照質(zhì)量1:2:2:0.8比例混合，制得固體混合物，加入10倍固體混合物質(zhì)量的90%乙醇，待充分溶解后，回收5倍固體混合物質(zhì)量的乙醇，混合體系以噴霧干燥法制備成微囊（溫度80℃，進(jìn)樣速率45r/min）。
實(shí)施例3
（1）17-溴代丹參酮ⅡA的制備：在無水CCl4中加入10mg丹參酮ⅡA，分批加入5mg 四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)300w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰0.005mg，回流反應(yīng)約1.5h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮ⅡA；
（2）丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入373.23mg 17-溴代丹參酮ⅡA溶解，再加入278mg 鄰氟苯甲酸，調(diào)pH至8，保持溫度50℃，反應(yīng)2h之后，利用結(jié)晶法純化產(chǎn)物，完成丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備。
目標(biāo)衍生物為棕黃色顆粒狀固體，其核磁數(shù)據(jù)為：
1H-NMR(400MHz, CDCl3, TMS) δ 7.78 (2H, s, H-6, 7), 7.74-7.76 (1H, m, H-23), 7.58-7.61 (1H, m, H-26), 7.31-7.36 (1H, m, H-24) , 7.16-7.20 (1H, m, H-25), 7.24 (1H, s, H-15), 5.20 (2H, s，H-17), 5.21 (2H，t，J=17.2 Hz，H-17)，3.14 (2H，t，J=6.4Hz，H-1), 2.34-2.40 (1H, m, H-2a) , 1.95-2.10 (2H, m, H-2b, 3a), 1.58-1.64 (1H, m, H-3b), 1.05 (3H, s, H-18), 1.12 (3H, s, H-19)。
13C-NMR(100MHz, CDCl3, TMS) δ 182.4, 174.7, 164.3, 161.2, 160.9, 150.8, 141.6, 137.4, 134.2, 132.9, 129.8, 128.5, 126.9, 125.5, 123.2, 121.3, 120.3, 119.7, 116.6, 55.5，38.1, 34.8, 31.7 (C-18，19), 27.6, 19.5。
ESI-MS m/z: 433.2 [M + 1]+, 計算值： C26H21FNO5: 432.1。
參照實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)步驟，計算此衍生物的舒張幅度。
血管舒張率：20.32 ± 0.96 （1×10-4M）。
該衍生物應(yīng)用于微囊緩釋固體分散體制備方法：將目標(biāo)衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油酯、乙基纖維素按照質(zhì)量1:2:2:0.8比例混合，制得固體混合物，加入7倍固體混合物質(zhì)量的純乙醇，待充分溶解后，回收3倍固體混合物質(zhì)量的乙醇，混合體系以噴霧干燥法制備成微囊（溫度65℃，進(jìn)樣速率40r/min）。
實(shí)施例4
（1）17-溴代丹參酮ⅡA的制備：在無水CCl4中加入10mg丹參酮ⅡA，分批加入10mg 四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)450w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰0.008mg，回流反應(yīng)約2.5h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮ⅡA；
（2）丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入373.23mg 17-溴代丹參酮ⅡA溶解，再加入424 mg 3, 4 – 二甲氧基苯乙酸，調(diào)pH至7.5，保持溫度45℃，反應(yīng)2h之后，利用硅膠柱純化產(chǎn)物，完成丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備。
目標(biāo)衍生物為紅棕色固體，其核磁數(shù)據(jù)為：
1H-NMR(400MHz, CDCl3, TMS) δ 7.70 (2H, s, H-6, 7), 6.89 (1H, d, J=8.4 Hz, H-26), 6.83 (1H, dd, J=8.4，1.6 Hz，H-27), 6.80(1H, d, J=1.6 Hz，H-23), 3.77 (3H, s, -OCH3), 3.70 (3H, s,-OCH3)，7.27 (1H, s, H-15), 5.01 (2H, s，H-17), 2.97 (2H，t，J=6.4Hz，H-1), 3.56 (2H, dd, H-21), 1.91-2.00 (1H, m, H-2), 1.72-1.82 (1H, m, H-2), 1.47-1.52 (2H, m, H-3), 1.37 (3H, s, H-18), 1.26 (3H, s, H-19)。
13C-NMR(100MHz, CDCl3, TMS) δ 182.6, 174.9, 171.2, 161.0, 159.5, 150.6, 148.6, 143.8, 134.0, 129.3, 128.3, 121.8, 121.3, 120.2, 114.7, 112.7,111.4，106.9，55.8，38.0， 34.8, 31.7 (C-18，19), 27.6, 19.5。
ESI-MS m/z: 448.9 [M + 1]+, 計算值： C29H28NO7: 448.2。
參照實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)步驟，計算此衍生物的舒張幅度。
血管舒張率：29.11 ± 1.56 （1×10-4M）。
該衍生物應(yīng)用于微囊緩釋固體分散體制備方法：將目標(biāo)衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油酯、乙基纖維素按照質(zhì)量1:2:2:0.8比例混合，制得固體混合物，加入3倍固體混合物質(zhì)量的85%乙醇，待充分溶解后，回收5倍固體混合物質(zhì)量的乙醇，混合體系以噴霧干燥法制備成微囊（溫度80℃，進(jìn)樣速率45r/min）。
實(shí)施例5
（1）17-溴代丹參酮ⅡA的制備：在無水CCl4中加入10mg丹參酮ⅡA，分批加入20mg 四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)400w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰0.003mg，回流反應(yīng)約2h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮ⅡA；
（2）丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入373.23mg 17-溴代丹參酮ⅡA溶解，再加入304mg 鄰羥基苯乙酸，調(diào)pH至8.5，保持溫度65℃，反應(yīng)3h之后，利用結(jié)晶法純化產(chǎn)物，完成丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備。
目標(biāo)衍生物為黃棕色油狀物，其核磁數(shù)據(jù)為：
1H-NMR(400MHz, CDCl3, TMS) δ 7.74 (2H, s, H-6, 7), 7.16 (1H, t, J = 7.69 Hz, H-25), 7.04 (1H, dd, H-24), 6.94 (1H, d, J = 8.06 Hz, H-27), 6.83 (1H, t, J = 7.41 Hz, H-26), 7.27 (1H, s, H-15), 5.01(2H, s，H-17), 3.78 (1H, d, J = 15.25 Hz, H-21), 3.50 (1H, d, J = 15.25 Hz, H-21), 2.98 (2H，t，J=6.4Hz，H-1), 1.98-2.02 (1H, m, H-2), 1.78-1.85 (2H, m, H-2, 3), 1.49-1.53 (1H, m, H-3), 1.40 (3H, s, H-18), 1.27 (3H, s, H-19)。
13C-NMR(100MHz, CDCl3, TMS) δ 183.0, 175.1, 172.6, 161.0, 155.3, 150.7, 146.7, 137.1, 134.2, 131.0, 128.9, 128.4, 126.9, 123.2, 121.3, 121.1, 120.6, 120.2, 117.7, 55.8，38.0，34.8, 31.7 (C-18，19), 27.6, 19.5。
ESI-MS m/z: 445.1 [M + 1]+, 計算值： C27H24O6: 444.2。
參照實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)步驟，計算此衍生物的舒張幅度。
血管舒張率：17.81 ± 1.36 （1×10-4M）。
該衍生物應(yīng)用于微囊緩釋固體分散體制備方法：將目標(biāo)衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油酯、乙基纖維素按照1:2:2:0.8比例混合，制得固體混合物，加入9倍固體混合物質(zhì)量的70%乙醇，待充分溶解后，回收4倍固體混合物質(zhì)量的乙醇，混合體系以噴霧干燥法制備成微囊（溫度60℃，進(jìn)樣速率40r/min）。
實(shí)施例6
（1）17-溴代丹參酮ⅡA的制備：在無水CCl4中加入10mg丹參酮ⅡA，分批加入21mg 四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)600w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰0.002mg，回流反應(yīng)約1.5h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮ⅡA；
（2）丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入373.23mg 17-溴代丹參酮ⅡA溶解，再加入196mg阿魏酸，調(diào)pH至7.5，保持溫度65℃，反應(yīng)3h之后，利用結(jié)晶法純化產(chǎn)物，完成丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備。
目標(biāo)衍生物為棕紅色針狀固體，其核磁數(shù)據(jù)為：
1H-NMR(400MHz, CDCl3, TMS) δ 7.75 (2H, s, H-6, 7), 7.63(1H, d, J=1.6 Hz, H-24), 7.59-7.63 (1H, dd, J=1.6, 8.2 Hz， H-28), 7.52-7.54 (1H, d, J=8.2 Hz，H-27), 6.85 (1H, d, J=16 Hz, H-22), 6.19 (1H, d, J=16 Hz, H-21), 7.25 (1H, s, H-15), 5.10 (2H, s，H-17)，3.88 (3H, s, - OCH3), 2.98 (2H，t，J=6.4Hz，H-1)， 1.92 (2H, m, H-2), 1.64 (2H, m, H-3), 1.22 (3H, s, H-18), 1.29 (3H, s, H-19)；
13C-NMR(100MHz, CDCl3, TMS) δ 182.4, 174.9, 168.7, 166.6, 150.4, 147.4, 146.4, 144.6, 143.6, 141.3, 140.5, 134.2, 131.1, 130.1, 122.7, 115.6, 114.4, 109.3, 56.5, 55.6， 38.1，34.7, 30.8, 27.3, 19.5。
ESI-MS m/z: 487.1 [M + 1]+, 計算值： C29H26O7: 486.2。
參照實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)步驟，計算此衍生物的舒張幅度。
血管舒張率：20.52 ± 0.99 （1×10-4M）。
該衍生物應(yīng)用于微囊緩釋固體分散體制備方法：將目標(biāo)衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油酯、乙基纖維素按照質(zhì)量1:2:2:0.8比例混合，制得固體混合物，加入5倍固體混合物質(zhì)量的85%乙醇，待充分溶解后，回收3倍固體混合物質(zhì)量的乙醇，混合體系以噴霧干燥法制備成微囊（溫度60℃，進(jìn)樣速率35r/min）。
實(shí)施例7
（1）17-溴代丹參酮ⅡA的制備：在無水CCl4中加入10mg丹參酮ⅡA，分批加入18mg 四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)550w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰0.009mg，回流反應(yīng)約3h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮ⅡA；
（2）丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入373.23mg 17-溴代丹參酮ⅡA溶解，再加入200mg 丹參素，調(diào)pH至7.8，保持溫度55℃，反應(yīng)3.5h之后，利用結(jié)晶法純化產(chǎn)物，完成丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備。
目標(biāo)衍生物為紅色固體，其核磁數(shù)據(jù)為：
1H-NMR(400MHz, CDCl3, TMS) δ 7.70 (1H, s, H-6), 7.68 (1H, s, H-7), 7.62-7.66 (2H, m, H-24, 28),7.48-7.50(1H, d, J=8.38 Hz， H-27), 4.75(1H, t, H-21), 7.25 (1H, s, H-15), 5.31 (2H, s，H-17)，2.94 (2H，t，J=6.4Hz，H-1)，2.83-2.86 (2H, m, H-22), 2.09-2.10 (1H, m, H-2a), 2.01-2.05 (2H, m, H-2b，3a), 1.48-1.50 (1H, m, H-3), 1.34 (3H, s, H-18), 1.22 (3H, s, H-19)。
13C-NMR(100MHz, CDCl3, TMS) δ 182.6, 175.8, 170.1, 154.0, 150.7, 141.7, 130.8, 130.5, 129.6, 128.8, 128.4, 128.1, 127.9, 125.8, 124.5, 121.4, 72.5, 55.8，40.9，38.2，34.8, 31.7 (C-18，19), 27.6, 19.4。
ESI-MS m/z: 490.9 [M + 1]+, 計算值： C28H26O8: 490.2。
參照實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)步驟，計算此衍生物的舒張幅度。
血管舒張率：31.88 ± 1.73 （1×10-4M）。
該衍生物應(yīng)用于微囊緩釋固體分散體制備方法：將目標(biāo)衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油酯、乙基纖維素按照質(zhì)量1:2:2:0.8比例混合，制得固體混合物，加入9倍固體混合物質(zhì)量的75%乙醇，待充分溶解后，回收4倍固體混合物質(zhì)量的乙醇，混合體系以噴霧干燥法制備成微囊（溫度75℃，進(jìn)樣速率30r/min）。
實(shí)施例8
（1）17-溴代丹參酮ⅡA的制備：在無水CCl4中加入10mg丹參酮ⅡA，分批加入22mg 四丁基三溴化銨，在N2保護(hù)下，經(jīng)500w紅外燈光照后，加入過氧化苯甲酰0.004mg，回流反應(yīng)約3h后，經(jīng)薄層檢識確認(rèn)成分后，結(jié)束反應(yīng)，待反應(yīng)液冷卻至室溫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CCl4，然后經(jīng)硅膠柱純化，得到17-溴代丹參酮ⅡA；
（2）丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備：以無水DMF為溶劑，先加入373.23mg 17-溴代丹參酮ⅡA溶解，再加入197.19mg 左旋多巴，調(diào)pH至7.5，保持溫度45℃，反應(yīng)2h之后，利用硅膠柱純化或結(jié)晶法純化產(chǎn)物，完成丹參酮IIA17位酯化衍生物的制備。
目標(biāo)衍生物為紅色塊狀固體，其核磁數(shù)據(jù)為：
1H-NMR(400MHz, CDCl3, TMS) δ 7.75 (2H, s, H-6,7), 7.63-7.65 (2H, d, J=8.17 Hz， H-24,28), 7.52-7.54 (2H, m, J=8.42 Hz， H-25, 27),7.48-7.50(1H, d, H-27), 4.20 (1H, t, H-21), 7.25 (1H, s, H-15), 5.34 (2H, s, H-17)，3.70 (1H, t, H-21), 2.95 (2H，t，J=6.4Hz，H-1)，2.99 (2H, m, H-22), 2.09-2.10 (1H, m, H-2a), 2.01-2.05 (2H, m, H-2b，3a), 1.48-1.50 (1H, m, H-3), 1.34 (3H, s, H-18), 1.22 (3H, s, H-19)。
13C-NMR (100MHz, CDCl3, TMS) δ 182.7, 175.1, 171.8, 161.0, 155.4, 154.4, 150.6, 141.7, 134.2, 130.4, 126.8, 123.1, 121.3, 120.2, 120.2, 115.3, 55.2, 53.7，40.1，39.2，38.2，34.8, 31.5, 30.9, 27.6, 19.5。
ESI-MS m/z: 474.1 [M + 1]+, 計算值： C28H27NO6: 473.2。
參照實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)步驟，計算此衍生物的舒張幅度。
血管舒張率：20.08 ± 0.66 （1×10-4M）。
該衍生物應(yīng)用于微囊緩釋固體分散體制備方法：將目標(biāo)衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油酯、乙基纖維素按照質(zhì)量1:2:2:0.8比例混合，制得固體混合物，加入9倍固體混合物質(zhì)量的75%乙醇，待充分溶解后，回收4倍固體混合物質(zhì)量的乙醇，混合體系以噴霧干燥法制備成微囊（溫度75℃，進(jìn)樣速率30r/min）。