專利名稱：新型咪唑衍生物及其作為藥劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型咪唑衍生物和它們的可藥用鹽。這些化合物是蛋白-酪氨酸激酶抑制劑，特別是c-met和src激酶的抑制劑，因此是治療癌癥的優(yōu)異的治療劑。本發(fā)明還涉及含有這些新型化合物作為治療癌癥和癌癥相關(guān)疾病的活性劑的藥物組合物。
WO 96/18626公開(kāi)了酪氨酸激酶和c-met激酶的抑制劑，這些抑制劑是2-(2，6-二氯苯基)-4-苯基-5-(吡啶-4基)-1H-咪唑的衍生物(實(shí)施例5、6和55)。但是它們具有不利的與細(xì)胞色素P450的相互作用。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物避免了這個(gè)缺點(diǎn)，并且是具有良好溶解度的c-met激酶和src家族酪氨酸激酶的有效抑制劑。
因此，本發(fā)明涉及通式(I)的新型化合物， 式(I)其中K，L獨(dú)立地表示氫；鹵素；烷基；-OH；或-O-烷基；X是氫；-OR1；-SR2；-S(O)R2；-S(O)2R2；-CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；-CH2-S-(CH2)2-OH或基團(tuán)A1-Q；其中A1表示C1-C3-亞烷基；并且
Q是-OR1；-SR2；-S(O)R2；-S(O)2R2；-NR3R4；-NH-(CH2)2-NR3R4或鹵素；R1是氫；烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-環(huán)氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羥基-1-丙基；(S)-2，3-二羥基-1-丙基；1，3-二羥基-2-丙基；3-羥基-2-羥甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基甲基或基團(tuán)A1-Q1；并且Q1表示-O-烷基；-CN；-C(O)2H；-C(O)2-烷基；-C(O)-NR3R4；-S-烷基；-S(O)-烷基；-S(O)2-烷基，并且在A1表示1，2-亞乙基-或1，3-亞丙基的情況下，Q1是-OH或-NR3R4；R3，R4獨(dú)立地表示氫或烷基；或者R3和R4與它們所連的氮原子一起形成5～7元飽和或不飽和環(huán)，該環(huán)是未取代的或者被甲基取代，并且其中存在一個(gè)另外的氮或氧原子，其余原子是碳原子；R2是烷基；二甲基膦?；谆?；2，3-環(huán)氧基-1-丙基；2，3-二羥基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基甲基或A1-Q1；Y是芳基或雜芳基，其是未取代的或者被以下基團(tuán)取代一、二或三次鹵素；-CH2OR5；-R5；-OR5；-NR6R7；-SR5；-S(O)R5；-S(O)2R5；-S(O)NHR5；-S(O)2NHR5；-S(O)NR6R7；-S(O)2NR6R7；-C(O)NHR5；-C(O)NR6R7；或CN；R5是氫；或烷基，該烷基是未取代的或者被OH、-O-烷基或-NR6R7取代；條件是沒(méi)有兩個(gè)雜原子連接在同一個(gè)碳原子上；R6，R7獨(dú)立地表示氫或烷基；或R6和R7與它們所連的氮原子一起形成5～7元飽和或不飽和環(huán)，該環(huán)是未取代的或者被甲基取代，并且其中存在一個(gè)另外的氮或氧原子，其余原子是碳原子；Z是鹵素；-OH；-O-烯丙基；烷基；甲氧甲氧基；(2-甲氧乙氧基)甲基氧基；甲硫基；乙氧甲氧基；亞甲基二氧基；乙炔基；三甲代甲硅烷基乙炔基；或
-O-烷基，其中烷基是未取代的或者被吡啶基取代；或者芐氧基，所述芐氧基是未取代的或者被鹵素、甲氧基、乙氧基、亞甲基二氧基、-CN、-NO2或-C(O)2H取代；并且n是1或2；和它們的可藥用鹽。
本發(fā)明的化合物顯示出作為蛋白激酶抑制劑的活性，特別是c-met激酶和src家族酪氨酸激酶抑制劑活性，因而可用于治療所述酪氨酸激酶介導(dǎo)的疾病。酪氨酸激酶家族通過(guò)磷酸化肽和蛋白質(zhì)的酪氨酸殘基在細(xì)胞信號(hào)和細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)中起重要作用。已知酪氨酸激酶的不當(dāng)活化和多種病態(tài)有關(guān)，包括炎性的、免疫的、CNS紊亂，或者腫瘤病癥，或者骨病。例如，參見(jiàn)Susva，M.等，Trends Pharmacol.Sci.，21(2000)489-495；Biscardi，J.S.等，Adv.Cancer Res.76(2000)61-119。
C-met突變體已經(jīng)在遺傳和散發(fā)性人乳突狀腎癌中進(jìn)行了充分描述，并且已經(jīng)在卵巢癌、幼年肝細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移性頭和頸鱗狀細(xì)胞癌和胃癌中有報(bào)道。C-met還在非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中，在胸、結(jié)腸和前列腺瘤中過(guò)表達(dá)。由于c-met看來(lái)似乎在各種腫瘤的腫瘤發(fā)生中起重要作用，已經(jīng)采用了各種抑制策略來(lái)治療性地靶向這種受體酪氨酸激酶。
在許多經(jīng)過(guò)證明的臨床前實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)顯示了抑制蛋白-酪氨酸激酶c-met對(duì)于抑制腫瘤生長(zhǎng)的有效性(例如Abounader，R.等，J.Natl.Cancer Inst.91(1999)1548-1556；Laterra，J.等，Lab.Invest.76(1997)565-577；Tomioka，D.，Cancer Res.61(2001)7518-7524；Wang，R.等，J.Cell Biol.153(2001)1023-1033)。
本發(fā)明的化合物是蛋白酪氨酸激酶抑制劑，特別是c-met和src家族激酶抑制劑，因而可用作預(yù)防和治療由所述激酶介導(dǎo)的疾病的活性劑；例如，移植排斥、炎性腸綜合癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、再狹窄、變應(yīng)性哮喘、阿爾茨海默氏病、帕金森癥、中風(fēng)、骨質(zhì)疏松、癌癥以及良性增生。
本發(fā)明的目的是式(I)化合物和它們的可藥用鹽和對(duì)映體形式，上述化合物的制劑，含有它們的藥物和它們的制造方法，以及上述化合物在控制或預(yù)防疾病，特別是上述的疾病，或者在制造相應(yīng)的藥物中的用途。
此處使用的術(shù)語(yǔ)″烷基″是指直鏈或支鏈飽和烴，該飽和烴含有1～6個(gè)、優(yōu)選1～4個(gè)、更優(yōu)選1～3個(gè)碳原子，例如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，2-丁基，叔丁基，正戊基，正己基，以及它們的異構(gòu)體。
此處使用的“C1-C3-亞烷基”表示含有1、2或3個(gè)碳原子的二價(jià)飽和線性或支鏈烴。優(yōu)選所述的C1-C3-亞烷基是線性的，其實(shí)例為亞甲基，亞乙基，亞丙基或亞異丙基。
此處使用的術(shù)語(yǔ)“芳基”表示6～10元的單環(huán)或雙環(huán)芳烴環(huán)。其實(shí)例為苯基，萘基或茚基。優(yōu)選所述的“芳基”是苯基。
此處使用的術(shù)語(yǔ)“雜芳基”表示5～10元的單環(huán)或雙環(huán)芳烴環(huán)，其中1、2或3個(gè)碳原子，優(yōu)選1或2個(gè)碳原子可以被氮、氧或硫取代。其實(shí)例為呋喃基，噻吩基，吡咯基，異噁唑基，咪唑基，吡啶基，嘧啶基，苯并呋喃基，吲哚基。優(yōu)選所述的“雜芳基”是吡啶基。
“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是式(I)化合物，其中K，L都是氯；X是氫；烷基或-O-烷基，所述烷基被-OH取代；Y、Z和n如上定義；和它們的生理上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式(I)化合物，其中K，L都是氯；X是氫；烷基或-O-烷基，所述烷基被-OH取代；Z是鹵素或乙炔基；Y是苯基，其是未取代的或者被以下基團(tuán)取代一次鹵素；-CH2OR5；-R5；-OR5；-NR6R7；-SR5；-S(O)R5；-S(O)2R5；-S(O)NHR5；-S(O)2NHR5；-S(O)NR6R7；-S(O)2NR6R7；-C(O)NHR5；-C(O)NR6R7；或CN；R5是氫；或烷基，其是未取代的或者被OH取代；
-O-烷基或-NR6R7；條件是沒(méi)有兩個(gè)雜原子連接在同一個(gè)碳原子上；R6，R7獨(dú)立地表示氫或烷基；n是1；和它們的可藥用鹽。
這樣的化合物例如為2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-溴苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-二甲基氨基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(N-(2-羥基乙基)-氨磺?；?苯基氨基]-嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-甲基亞磺?；?苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(N-(2-羥基乙基)-氨磺?；?苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-羥基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，
2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-甲氧基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-乙氧基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，或2-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式(I)化合物，其中K，L都是氯；X是氫；Z是鹵素；Y是被-NR6R7取代的苯基，其中R6和R7與它們所連的氮原子一起形成5～7元飽和或不飽和環(huán)，該環(huán)是未取代的或者被甲基取代，并且其中存在一個(gè)另外的氮或氧原子，其余原子是碳原子；n是1；和它們的可藥用鹽。
這樣的化合物例如為2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-嗎啉基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，或2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-嗎啉基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式(I)化合物，其中K，L都是氯；X是氫；
Z是鹵素；Y是雜芳基，其是未取代的或者被以下基團(tuán)取代1、2或3次鹵素；-CH2OR5；-R5；-OR5；-NR6R7；-SR5；-S(O)R5；-S(O)2R5；-S(O)NHR5；-S(O)2NHR5；-S(O)NR6R7；-S(O)2NR6R7；-C(O)NHR5；-C(O)NR6R7；或CN；R5是氫；或烷基，其是未取代的或者被OH取代；-O-烷基或-NR6R7；條件是沒(méi)有兩個(gè)雜原子連接在同一個(gè)碳原子上；R6，R7獨(dú)立地表示氫或烷基；或R6和R7與它們所連的氮原子一起形成5～7元飽和或不飽和環(huán)，該環(huán)是未取代的或者被甲基取代，并且其中存在一個(gè)另外的氮或氧原子，其余原子是碳原子；n是1；和它們的可藥用鹽。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式(I)化合物，其中K，L都是氯；X是氫；Z是鹵素；Y是吡啶基，其是未取代的或者被烷基取代；n是1；和它們的可藥用鹽。
這樣的化合物例如為2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-吡啶基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑。
本發(fā)明的再一實(shí)施方案是制備根據(jù)權(quán)利要求1的化合物的方法，其中a)將通式(VI)化合物
與式Y(jié)-NH2化合物反應(yīng)，得到式(I)化合物；取代基K、L、X、Y、Z以及n如上所定義；并且其中式(VI)化合物是通過(guò)氧化通式(V)表示的硫醚的硫醚基而獲得的， 其中式(V)化合物是通過(guò)通式(IV)化合物的N-脫氧獲得的， 并且所述的通式(IV)化合物是通過(guò)通式(II)化合物
與通式(III)化合物的反應(yīng)而獲得的， b)從反應(yīng)混合物中分離所述的式(I)化合物，和c)如果需要，通過(guò)加入合適的酸或堿，將它們轉(zhuǎn)化成可藥用的鹽。
通式(I)的化合物可以通過(guò)以下方法制備將通式(VI)的化合物與胺Y-NH2，其中K、L、X、Y、Z以及n具有此前定義的含義，在100～250℃范圍內(nèi)的溫度下反應(yīng)，然后分離所述的化合物。優(yōu)選使用化學(xué)計(jì)量比量的或者過(guò)量的所述胺。反應(yīng)可以在沒(méi)有溶劑的情況下，或者在如N-甲基吡咯烷酮、二噁烷、二甲氧基乙烷或甲苯的溶劑中，通過(guò)常規(guī)的加熱或者在微波反應(yīng)器中加熱而進(jìn)行。
通式(VI)的化合物可以通過(guò)氧化由通式(V)表示的硫醚的硫醚基而獲得。為了合成通式(VI)的砜，優(yōu)選使用過(guò)硫酸氫鉀制劑TM，但是3-氯過(guò)苯甲酸也一樣能用。
通式(V)的硫醚 可以通過(guò)通式(IV)化合物的N-脫氧而獲得。這種反應(yīng)優(yōu)選在三乙胺存在下使用溴乙酸乙酯進(jìn)行(Somei，M.和Tsuchiya，M.，Chem.Pharm.Bull.29(1981)3145-3157)。備選地，該還原反應(yīng)可以通過(guò)在二甲基甲酰胺中使用亞磷酸三乙酯而實(shí)現(xiàn)。
通式(IV)的化合物可以通過(guò)通式(III)化合物與通式(II)化合物的反應(yīng)而獲得，其中取代基K、L、X和Z具有此前定義的含義。該反應(yīng)是縮合反應(yīng)，優(yōu)選在氨存在下使用已知的用于其它醛的方法進(jìn)行。
本發(fā)明的再一實(shí)施方案是通式(II)化合物的用途，其中取代基K、L和X具有此前定義的含義，所述用途是按照如上所述的方法制造通式(I)的化合物。
式(I)表示2-苯基-4-苯基-5-(4-嘧啶基)-1H-咪唑，這些化合物是2-苯基-5-苯基-4-(4-嘧啶基)-1H-咪唑的互變異構(gòu)體。兩種互變異構(gòu)體表示相同的結(jié)構(gòu)，它們的命名可以交換使用，并且兩種互變異構(gòu)體都是本發(fā)明的一部分。
通式(I)的化合物可以包含一個(gè)或幾個(gè)手性中心，并且可以以外消旋或光學(xué)活性形式存在。可以依照已知的方法將外消旋體分離成對(duì)映體。例如，可以通過(guò)結(jié)晶分離的非對(duì)映異構(gòu)體鹽是通過(guò)和光學(xué)活性酸反應(yīng)而從外消旋混合物形成的，所述光學(xué)活性酸如D-或L-酒石酸，扁桃酸，蘋果酸，乳酸或樟腦磺酸。作為選擇，可以使用可商購(gòu)的手性HPLC相的色譜來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)映體的分離。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可以以它們的可藥用鹽形式存在。此前使用的術(shù)語(yǔ)“可藥用的鹽”是指保持了式(I)化合物生物效力和性質(zhì)的常規(guī)酸加成鹽或堿加成鹽，這些鹽是從合適的無(wú)毒有機(jī)或無(wú)機(jī)酸、或者有機(jī)或無(wú)機(jī)堿形成的。酸加成鹽的實(shí)例包括那些衍生自無(wú)機(jī)酸的鹽，所述無(wú)機(jī)酸如鹽酸，氫溴酸，氫碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸，以及衍生自有機(jī)酸的鹽，所述有機(jī)酸如對(duì)甲苯磺酸，水楊酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，檸檬酸，蘋果酸，乳酸，富馬酸等。堿加成鹽的實(shí)例包括衍生自銨，鉀，鈉和季銨的氫氧化物的鹽，例如衍生自氫氧化四甲基銨的鹽。將藥物化合物(即，藥物)化學(xué)改性成鹽對(duì)藥物化學(xué)家而言是眾所周知的技術(shù)，以獲得改善的物理和化學(xué)穩(wěn)定性，吸濕性，流動(dòng)性和溶解度(參見(jiàn)例如Ansel，H.等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，第6版，(1995)，196和1456-1457頁(yè))。
通過(guò)如下試驗(yàn)可以評(píng)價(jià)本發(fā)明的化合物作為src-家族酪氨酸激酶抑制劑和c-met激酶抑制劑的活性。
SRC抑制劑試驗(yàn)參數(shù)反應(yīng)混合物ATP5μM
肽(Ro+Ja133-Ro) 10μMJa133-Ro196nMRo 9.8μMPT66230ng/ml試驗(yàn)緩沖液 4mM MgCl22mM TCEP50mM HEPES0.1％吐溫20pH 7.3酶 2.5U/ml抑制劑 最大25μM最小0.42nM材料Eu-標(biāo)記的磷酸酪氨酸抗體-用于Lek Cisbio Mab PT66-K，-用于Src EG&G Wallac PT66 Eu-W1024(均可商購(gòu))。
肽RoNH2-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，和Ja133-RoJa133-G-氨基辛酸-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，其中Ja 133是LightCycler-Red-N-羥基琥珀酰亞胺酯；這兩種肽都是在Zinsser SMP350肽合成儀上用優(yōu)化固相肽合成法合成的(Merrifield，F(xiàn)ed.Proc.Fed.Amer.Soc.Exp.Biol.21(1962)412)。簡(jiǎn)言之，通過(guò)重復(fù)共軛結(jié)合20倍過(guò)量的氨基酸，每種氨基酸都根據(jù)側(cè)鏈功能用臨時(shí)的哌啶不穩(wěn)定的Fmoc-以及永久的酸不穩(wěn)定叔丁基-、BOC-和Otert-Bu-基保護(hù)，在160mg(22.8μmol尺度)的Rink-Linker改性的聚苯乙烯固相上組裝所述肽。將底物序列AEEEIYGEFEAKKKK的N-末端再安裝上間隔氨基酸氨基辛酸和甘氨酸。在斷開(kāi)N-末端臨時(shí)保護(hù)基后，用1.5倍量的LightCycler-Red 640-N-羥基琥珀酰亞胺酯(購(gòu)自Roche Diagnostics GmbH)和三乙胺標(biāo)記仍然附著和保護(hù)著的肽。3小時(shí)后，用二甲基甲酰胺和異丙醇沖洗樹(shù)脂，直至藍(lán)色樹(shù)脂的洗脫物變無(wú)色。將全保護(hù)和標(biāo)記的肽從固相中除去，并且通過(guò)用80％三氟乙酸、10％乙二硫醇、5％苯硫基甲烷(Thioanisol)和5％水的混合物進(jìn)行處理，除去永久保護(hù)基。通過(guò)制備型反相HPLC純化最后分離底物。純化后得到12.2mg RP-HPLC單峰純的藍(lán)色材料(凍干物)。用MALDI質(zhì)譜確認(rèn)[2720.0]。
酶Upstate Lck(p56lck，活性)，Upstate Src(p60c-src，部分純化)，均購(gòu)自UBI。
時(shí)間分辨的熒光分析讀數(shù)器Perkin Elmer，Wallac Viktor 1420-040多標(biāo)記計(jì)數(shù)器；液體處理系統(tǒng)Beckman Coulter，Biomek 2000。
ATP、吐溫20、HEPES購(gòu)自Roche Molecular Biochemicals，MgCl2和MnCl2購(gòu)自Merck Eurolab，TCEP購(gòu)自Pierce，384孔小體積熒光板購(gòu)自Falcon。
試驗(yàn)描述首先將酶和相應(yīng)量的根據(jù)本發(fā)明的抑制劑在水溶液中于15℃預(yù)溫育15分鐘。然后，加入包含ATP、肽和PT66的反應(yīng)混合物并進(jìn)行振蕩，開(kāi)始磷酸化反應(yīng)。立即在合適的孔板讀數(shù)器中使用時(shí)間分辨的熒光光譜監(jiān)測(cè)該反應(yīng)的進(jìn)程。
使用非線性曲線擬合(Excelfit)，可以從反應(yīng)速度獲得IC50值。
結(jié)果
c-met抑制劑試驗(yàn)試驗(yàn)原理C-met是涉及腫瘤轉(zhuǎn)移、增殖/凋亡和血管生成的典型酪氨酸激酶。該試驗(yàn)是使用磷酸-酪氨酸特異性抗體測(cè)量c-met的磷酸化的ELISA型試驗(yàn)。
將已知具有高c-met含量的人結(jié)腸腺癌HT29的細(xì)胞溶解產(chǎn)物通過(guò)抗-hHGF受體抗體(抗-hHGFR)結(jié)合到微量滴定板(MTP)的孔中。使用磷酸-酪氨酸小鼠IgG和POD標(biāo)記的山羊抗-小鼠IgG檢測(cè)體系，在測(cè)試化合物存在或不存在下，檢測(cè)c-met的ATP-磷酸化。使用傳統(tǒng)的POD底物TMB，使用450nm/620nm的吸收來(lái)計(jì)算酶活性。
材料板96孔聚苯乙烯板(NUNC)鏈霉抗生物素-涂布的微量滴定板細(xì)胞系/溶胞產(chǎn)物HT29(ATCC HTB-38)，將人結(jié)腸腺癌(匯合2.5×105細(xì)胞/cm2)用PBS洗滌，并且在冰上用溶胞緩沖液溫育10分鐘。收集上清液，用TBS稀釋。溶胞產(chǎn)物在液氮中速凍，在-80℃儲(chǔ)存。
試劑(除非另外聲明，所有工作溶液都保持在4℃)抗-hHGFR檢測(cè)儲(chǔ)液50μg/ml(R&D Systems，Cat.No.BAF 358)抗體最終濃度1μg/mlp-Tyr(PY99)小鼠儲(chǔ)液200μg/ml(Santa Cruz Biotechnology，單克隆IgG2b Cat.No.SC-7020)最終濃度0.2μg/ml山羊-抗-小鼠IgG2ml(BIO RAD，Cat.No.170-6516)，(H+L)-HRP共軛物；最終濃度1∶2000封閉試劑用于ELISA的Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.1112589，以1∶10稀釋在TBS中ATP腺苷-5’-三磷酸，儲(chǔ)液10mM，儲(chǔ)液10mM(Roche DiagnosticsGmbH，Cat.No.127531)，最終濃度40μMTBSTris-緩沖的鹽水，50mM TRIS pH 7.5(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.708976)，150mM NaCl(SIGMA，Cat.No.S-3014)洗滌緩沖液TBS-TTris-緩沖的鹽水，50mM TRIS pH 7.5 150mMNaCl，含0.5％吐溫20激酶緩沖液Tris-緩沖的鹽水，50mM TRIS pH 7.5，100mM NaCl，60mM MgCl2(SIGMA Chemical Company，Cat.No.M-1028)溶胞緩沖液50mM TRIS pH 7.5，含1％ Nonidet P40(RocheDiagnostics GmbH，Cat.No.1754599)0.5％脫氧膽酸(SIGMA ChemicalCompany，Cat.No.D-6750)，最終濃度1mM 1mM PMSF儲(chǔ)液70mM(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.83709 140μl/ml Complete(RocheDiagnostics GmbH，Cat.No.1836145)，最終濃度40μl/mlTMB四甲基聯(lián)苯胺(Intergen Company，Cat.No.91000)樣品10mM DMSO溶液(于-20℃儲(chǔ)存)，室溫解凍。
程序1.將50μl抗-hHGFR檢測(cè)抗體的封閉試劑溶液加入至試驗(yàn)板上(最終濃度1μg/ml)，在MTP振蕩器上于室溫溫育試驗(yàn)板60分鐘。
2.從試驗(yàn)板上除去抗-hHGFR檢測(cè)抗體溶液。
3.向試驗(yàn)板每孔加入250μl封閉試劑，在4℃溫育試驗(yàn)板20小時(shí)。
4.從試驗(yàn)板上除去封閉試劑。
5.加入50μl HT29溶胞產(chǎn)物，在MTP振蕩器上于4℃溫育試驗(yàn)板180分鐘。
6.用每孔2×200μl TBS緩沖液的量洗滌試驗(yàn)板。
7.向試驗(yàn)板加入40μl在激酶緩沖液中的0.2％DMSO。
8.加入40μl樣品溶液(溶解在激酶緩沖液中-最終濃度22.5μM)。
9.將樣品溶解在MTP中(1∶3比率)。
10.將10μl溶解在激酶緩沖液(200μM)中的ATP加入到樣品中(最終濃度40μM ATP)。陽(yáng)性對(duì)照加入40μl激酶緩沖液+10μl 200μMATP。陰性對(duì)照加入40μl激酶緩沖液+10μl不含ATP的激酶緩沖液。在MTP振蕩器上于室溫溫育試驗(yàn)板60分鐘。
11.用每孔2×200μl TBS緩沖液和2×200μl封閉試劑的量洗滌試驗(yàn)板。
12.將50μl P-Tyr(PY99)小鼠單克隆IgG2b的封閉試劑溶液(最終濃度200ng/ml)加入到試驗(yàn)板，在MTP振蕩器上于4℃溫育試驗(yàn)板過(guò)夜。
13.用每孔2×200μl TBS緩沖液和2×200μl封閉試劑的量洗滌試驗(yàn)板。
14.加入50μl山羊抗-小鼠IgG(H+L)-HRP共軛物的封閉試劑溶液(1∶2000比率)，在MTP振蕩器上于室溫溫育試驗(yàn)板60分鐘。
15.用每孔6×200μl TBS-T緩沖液的量洗滌試驗(yàn)板。
16.加入50μl TMB溶液，在MTP振蕩器上于室溫溫育30分鐘，加入25μl 1M H2SO4。
17.測(cè)量450nm/620nm處的光密度(E)。
18.如下計(jì)算％抑制率1-[(E樣品-E陰性對(duì)照)/(E陽(yáng)性對(duì)照-E陰性對(duì)照)×100]。
結(jié)果
因此，式(I)化合物和式(I)化合物的可藥用鹽可用作藥物，例如以藥物制劑形式用作藥物。藥物制劑可以口服，例如其形式有片劑、包衣片劑、糖錠劑、硬和軟明膠膠囊、溶液劑、乳劑或懸浮劑。但是，還可以進(jìn)行直腸給藥，例如以栓劑形式，或者可以腸胃外給藥，例如以注射液形式。
可以用藥學(xué)惰性的無(wú)機(jī)或有機(jī)載體加工式(I)化合物而制備藥物制劑。例如，可以使用乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其鹽等，作為用于片劑、包衣片劑、糖錠劑和硬明膠膠囊的這種載體。軟明膠膠囊的合適載體為，例如植物油，蠟，半固體和液體多元醇等。但是，根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì)，軟明膠膠囊通常不需要載體。制造溶液或糖漿的合適載體為，例如水，多元醇，甘油，植物油等。栓劑的合適載體為，例如天然或硬化油，蠟，脂肪，半液體或液體多元醇等。
此外，藥物制劑還可以包含防腐劑，增溶劑，穩(wěn)定劑，濕潤(rùn)劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，食用香料，用于改變滲透壓的鹽，緩沖劑，掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以包含其他有治療價(jià)值的物質(zhì)。
使用以下程序獲得優(yōu)選的藥物制劑1、在定制管GL 25，4cm中稱取4.0g玻璃珠(珠子裝滿半管)。
2、加入50mg化合物，用刮勺(spatulum)分散并渦流。
3、加入2ml明膠溶液(珠子∶明膠溶液重量比＝2∶1)并渦流。
4、加蓋并用鋁箔裹上以避光。
5、制備磨粉機(jī)的平衡物。
6、在Retsch磨粉機(jī)中以20/s碾磨4小時(shí)(有些物質(zhì)以30/s碾磨24小時(shí))。
7、在400g下離心2min，用固定在過(guò)濾器支架上并接上接收瓶的兩層過(guò)濾器(100μm)過(guò)濾，從珠子中提取出懸浮液。
8、將提取物移動(dòng)到量筒中。
9、用少量(此處為1ml每步)重復(fù)洗滌，直至達(dá)到最終體積或者提取物變澄清。
10、用明膠填充至最終體積并勻質(zhì)化。
上述制備方法得到式(I)化合物的微懸浮液，其中粒子大小在1到10μm之間。這種懸浮液適合口服。
還優(yōu)選的本發(fā)明化合物的藥物制劑是通過(guò)濕法造粒的片劑，方法如下材料項(xiàng)目 成分mg/片1.式(I)化合物 525100500
2.乳糖無(wú)水DTG125105301503.Sta-R×1500 6 6 6 304.微晶纖維素 30 30 30 1505.硬脂酸鎂 1 1 1 1合計(jì) 167167167 831制造方法1、混合1、2、3和4項(xiàng)，并用純水造粒。
2、在50℃下干燥顆粒。
3、讓顆粒通過(guò)合適的磨粉設(shè)備。
4、加入第5項(xiàng)并混合3分鐘；在合適的壓力機(jī)上壓縮。
另一優(yōu)選的藥物制劑是用以下方法制造含有本發(fā)明化合物的膠囊材料項(xiàng)目 成分 mg/膠囊1.式(I)化合物 5 25 100 5002.含水乳糖 159123 148 ---3.玉米淀粉 25 35 40 704.滑石 10 15 10 255.硬脂酸鎂 1 2 25合計(jì) 200200 300 600制造方法1、在合適的混合器中混合1、2、和3項(xiàng)30分鐘。
2、加入4和5項(xiàng)并混合3分鐘。
3、填充到合適的膠囊中。
向患者給藥的本發(fā)明化合物的劑量可以在寬限度內(nèi)變化，并且還必須在每個(gè)具體病例中根據(jù)個(gè)體需要調(diào)整。日劑量可以以單劑量或者分劑量形式給藥，另外，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有必須治療的跡象時(shí)，可以超過(guò)上限。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是一種藥物組合物，其含有一種或多種式(I)化合物以及可藥用賦形劑。
本發(fā)明的另一目的是用于抑制腫瘤生長(zhǎng)的如上所述的藥物組合物。
本發(fā)明的再一目的是式(I)化合物用于治療癌癥的用途。
本發(fā)明的再一目的是式(I)化合物用于制造藥物的用途，所述的藥物用于治療由c-met或src酪氨酸激酶介導(dǎo)的疾病。
本發(fā)明的再一目的是式(I)化合物用于制造用于抑制腫瘤生長(zhǎng)的藥物的用途。
以下實(shí)施例和制備例舉例說(shuō)明了本發(fā)明，但是無(wú)限制其范圍的含義。
實(shí)施例A取代的2，6-二氯苯甲醛的合成實(shí)施例A12，6-二氯-4-羥基苯甲醛(A1)制備3，5-二氯三異丙基甲硅烷氧基苯(A1.1)于0℃在1小時(shí)內(nèi)向200g 3，5-二氯苯酚和330ml 2，6-二甲基吡啶的3.0升無(wú)水CH2Cl2溶液中加入400g三異丙基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，并且將混合物在此溫度再攪拌3小時(shí)。在用1.0升水水解后，將有機(jī)層用飽和NaCl洗滌，MgSO4干燥，并且蒸發(fā)至干(70℃/80毫巴)。殘余物置于石油醚中，并且通過(guò)硅膠過(guò)濾，得到360g(92％)A1.1無(wú)色油狀物。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)δ＝1.03-1.15(m，18H，CH3)；1.16-1.35(m，3H，CH)；6.73-6.80(m，2H，CH芳族)；6.92-6.98(m，1H，CH芳族)13C-NMR(62.9MHz，CDCl3)δ＝12.7(CH)；18.0(CH3)；119.0，121.6(CH芳族)；135.2，157.4(C芳族)。
2，6-二氯-4-羥基苯甲醛(A1)和2，6-二氯-4-三異丙基甲硅烷氧基-苯甲醛(A1.2)的制備在氮?dú)庀卤３值陀?65℃的溫度，向360g A1.1的2.6升無(wú)水四氫呋喃溶液中加入440ml正丁基鋰(2.7M己烷溶液)。在-70℃攪拌2小時(shí)后，在保持溫度低于-65℃的情況下加入120ml無(wú)水二甲基甲酰胺。將混合物溫?zé)嶂潦覝剡^(guò)夜。在加入700ml 4M HCl后，將混合物在室溫劇烈攪拌1小時(shí)。然后進(jìn)行相分離(加入固體NaCl也許是必要的)，并且將有機(jī)層用硫酸鈉干燥并真空縮減。沉淀物用甲苯/四氫呋喃重結(jié)晶，得到154g(70％)A1，m.p.229-230℃。
1H-NMR(250MHz，DMSO-D6)δ＝6.94(s，2H，CH芳族)；10.25(s，1H，CH＝O)，11.46(s(寬)，1H，OH)13C-NMR(62.9MHz，DMSO-D6)δ＝117.0(CH芳族)；120.7，137.8，162.1(C芳族)；187.2(CH＝O)。
實(shí)施例A22，6-二氯-4-羥甲基苯甲醛(A2)3，5-二氯(三異丙基甲硅烷氧基甲基)苯(A2.1)的制備進(jìn)行類似于實(shí)施例A1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于3，5-二氯芐醇，以類似的產(chǎn)率得到無(wú)色油狀的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)δ＝0.96-1.25(m，21H，異丙基)；4.78(s，2H，OCH2)；7.23(s，2H，CH芳族)13C-NMR(62.9MHz，CDCl3)δ＝12.1(CH)；18.1(CH3)；64.0(OCH2)；124.2，127.0(C芳族H)；134.9，145.3(C芳族)。
2，6-二氯-4-(三異丙基甲硅烷氧基甲基)苯甲醛(A2.2)的制備在保持低于-70℃的溫度的情況下，在氮?dú)庀孪?0g A2.1的220ml無(wú)水四氫呋喃溶液中加入131ml正丁基鋰(1.6M己烷溶液)。在-75℃攪拌45分鐘后，在保持溫度低于-65℃的情況下加入28ml無(wú)水二甲基甲酰胺。在-75℃再攪拌混合物30分鐘后，使其在3小時(shí)內(nèi)升溫到0℃。在0℃2小時(shí)后，加入150ml冰水和150ml乙醚。進(jìn)行相分離，用100ml乙醚萃取水層。合并的有機(jī)層用NaCl水溶液洗滌，硫酸鈉干燥，并且蒸發(fā)至干。產(chǎn)量73g(95％)A3.2，為淺棕色油狀物，在冰上靜置時(shí)凝固。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)δ＝1.03-1.28(m，21H，異丙基)；4.82(s，2H，OCH2)；7.37(s，2H，CH芳族)；10.48(s，1H，CH＝O)13C-NMR(62.9MHz，CDCl3)δ＝12.0(CH)；18.1(CH3)；63.6(OCH2)；126.8(C芳族H)；128.6，137.2，149.0(C芳族)；188.8(CH＝O)。
2，6-二氯-4-羥甲基苯甲醛(A2)的制備向50℃的65g(0.18mol)A2.2的1100ml乙醇溶液中加入180ml 0.25N HCl，并且將混合物在85℃攪拌6小時(shí)。真空下除去乙醇，從而使產(chǎn)物沉淀。加入700ml乙酸乙酯/石油醚(2∶1)，并且將有機(jī)層用水和NaCl水溶液洗滌，硫酸鈉干燥。將溶液減少到約100g，加入200ml溫?zé)崾兔?，并且短暫溫?zé)岬?0℃。在室溫靜置過(guò)夜后，濾出沉淀的A2，并用石油醚/乙酸乙酯(15∶1)洗滌。產(chǎn)量24.3g(66％)。母液用柱色譜純化后得至另外的4g A2，m.p.109-110℃。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)δ＝1.99(t，4.4Hz，1H，OH)；4.74(d，4.4Hz，2H，OCH2)；7.40(s，2H，CH芳族)；10.48(s，1H，CH＝O)13C-NMR(62.9MHz，CDCl3)δ＝63.4(OCH2)；127.5(C芳族H)；129.2，137.4，147.9(C芳族)；188.7(CH＝O)。
實(shí)施例A4(3，5-二氯-4-甲?；窖趸?乙酸甲酯(A4)的制備將382mg(2.0mmol)A1、337mg(2.2mmol)溴乙酸甲酯和387mg(2.8mmol)碳酸鉀在6ml無(wú)水丙酮中的混合物在60℃攪拌2小時(shí)。在過(guò)濾和除去溶劑后，殘余物用硅膠柱色譜純化(己烷/乙酸乙酯4∶1)。產(chǎn)量508mg(97％)A4，無(wú)色固體。
1H-NMR(250MHz，DMSO-D6)δ＝3.72(s，3H，CH3)；5.04(s，2H，CH2)；7.28(s，2H，CH芳族)；10.29(s，1H，CH＝O)。
13C-NMR(62.9MHz，DMSO-D6)δ＝52.1(CH3)，65.2(CH2)；116.5(CH芳族)；123.1，137.5，161.1(C芳族)；168.3(C＝O)；187.8(CH＝O)。
R“Weinreh”-型酰胺的合成實(shí)施例B13-溴-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B1)向冰冷卻的48.9g(0.491mol)N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽和140.0ml(1.00mol)三乙胺的650ml無(wú)水二氯甲烷溶液中，加入100.0g(0.447mol)3-溴苯甲酰氯，歷時(shí)30分鐘。在另外攪拌30分鐘后，加入370ml水，并且用硫酸鈉干燥有機(jī)層。真空分餾得到101.4g(93％)B1，b.p.114-129℃/0.07毫巴，為無(wú)色油狀物。
MS246(API+)1H-NMR(250MHz，CDCl3)δ＝3.35(s，3H，NCH3)，3.56(s，3H，OCH3)，7.27(t，1H，5-H)，7.58(m，1H，4-H)，7.60(m，1H，6-H)，7.82(t，1H，2-H)。
實(shí)施例B23-氯-N-甲氫基-N-甲基苯甲酰胺(B2)進(jìn)行類似于實(shí)施例B1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于3-氯苯甲酰氯，得到B2。
MS200(API+)。
實(shí)施例B34-氯-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B3)進(jìn)行類似于實(shí)施例B2中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于4-氯苯甲酰氯，得到B3。
MS200(API+)。
實(shí)施例B43-碘-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B4)進(jìn)行類似于實(shí)施例B1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于3-碘苯甲酰氯，得到B4。
MS292(API+)。
C“乙酮”的合成實(shí)施例C11-(3-溴苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C1)將19.8ml(140mmol)二異丙基胺溶解在250ml無(wú)水四氫呋喃中并且冷卻至-75℃，加入87.6ml的正丁基鋰溶液(1.6M己烷溶液，140mmol)，歷時(shí)20分鐘。在-75℃攪拌15分鐘后，于-75℃在30分鐘內(nèi)加入13.1g(93mmol)2-甲硫基-4-甲基嘧啶的80ml無(wú)水四氫呋喃溶液，再將混合物攪拌15分鐘。然后于-75℃在30分鐘內(nèi)加入25.1g(103mmol)B1。讓混合物溫?zé)岬绞覝?，并且傾倒在600ml乙酸乙酯/水(1∶1)上。水層用50ml乙酸乙酯萃取，并且將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。真空下除去溶劑，得到23.3g(77％)C1，m.p.98-101℃。
MSM＝325(ESI+)，M＝323(ESI-).
1H-NMR(250MHz，CDCl3)“烯醇(enole)”(75％)δ＝2.62(s，3H，SCH3)，5.97(s，1H，CH＝C)，6.66(s，1H，5-H-嘧啶)，8.34(d，1H，6-H-密啶)，14.7(s，1H，OH)。
“酮”(25％)δ＝2.52(s，3H，SCH3)，4.35(s，2H，CH2)，6.97(d，1H，5-H-嘧啶)，8.46(d，1H，6-H-嘧啶)。
實(shí)施例C21-(3-氯苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C2)進(jìn)行類似于實(shí)施例C1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于B2，得到C2。
MS279(API+)。
實(shí)施例C31-(4-氯苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C3)進(jìn)行類似于實(shí)施例C1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于B3，得到C3。
MS279(API+)。
實(shí)施例C41-(3-碘苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C4)進(jìn)行類似于實(shí)施例C1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于B4，得到C4。
MS371(API+)。
實(shí)施例C51-(3-三甲代甲硅烷基-乙炔基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C5)在氮?dú)庀孪?0℃的16.3g(44.0mmol)C4的260ml無(wú)水THF溶液中加入1.5g(2.2mmol)雙-(三苯膦)鈀-II-氯化物、900mg(4.7mmol)銅-I-碘化物、12ml(85mmol)三甲代甲硅烷基乙炔和30ml二異丙胺，攪拌混合物，并且繼續(xù)讓其升溫溫?zé)岬绞覝亍Ｔ谑覝財(cái)嚢柽^(guò)夜后，加入260ml水，并且用乙醚萃取混合物兩次。分離有機(jī)層，干燥并且蒸發(fā)至干。殘余物的硅膠柱色譜(異己烷/乙酸乙酯3∶1)得到12.5g(83％)C5。
MS341(API+)。
D“酮肟”的合成實(shí)施例D11-(3-溴苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羥基亞氨基-乙酮(D1)將12.75g(39.5mmol)C1溶解在173ml冰醋酸(glacial acid)、136ml四氫呋喃和17ml水的混合物中。在冷卻至5℃后，在保持溫度在5℃～10℃之間的情況下加入3.24g(47.0mmol)亞硝酸鈉的25ml水溶液。撤去冷卻，在室溫下攪拌混合物6小時(shí)。在真空除去溶劑后，加入320ml水和320ml乙酸乙酯。用3N NaOH將pH調(diào)節(jié)到8。進(jìn)行相分離，水層用50ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，并且真空除去溶劑。殘余物用乙醚處理，濾出并且干燥。產(chǎn)量8.33g(60％)D1，m.p.156-158℃。
MSM＝352(ESI+)，M＝340(ESI-)。
1H-NMR(250MHz，D6-DMSO)δ＝2.20(s，3H，SCH3)，7.54(t，1H，5-H-BrPh)，7.66(d，1H，5-H-嘧啶)，7.81(m，1H)，7.92(m，2H)，8.70(d，1H，6-H-嘧啶)，12.9(s，1H，OH)。
實(shí)施例D21-(3-氯苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羥基亞氨基-乙酮(D2)進(jìn)行類似于實(shí)施例D1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于C2，以88％的產(chǎn)率得到D2。
MS308(API+)。
實(shí)施例D31-(4-氯苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羥基亞氨基-乙酮(D3)進(jìn)行類似于實(shí)施例D1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于C3，以76％的產(chǎn)率得到D3。
MS308(API+)。
實(shí)施例D41-(3-三甲代甲硅烷基乙炔基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羥基亞氨基-乙酮(D4)進(jìn)行類似于實(shí)施例D1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于C5，得到D4，產(chǎn)率54％，m.p.140-145℃。
MS370(API+)，368(API-)。
E“N-羥基咪唑”的合成實(shí)施例E1.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-溴苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羥基-咪唑(E1.1)將27.9g(79.3mmol)D1、14.6g(83.2mmol)2，6-二氯苯甲醛和61.0g(793mmol)乙酸銨溶解在550ml冰醋酸中，在100℃攪拌150分鐘。真空蒸餾除去冰醋酸，殘余物用乙酸乙酯/水處理，并且用濃氨水調(diào)節(jié)到pH8。濾出沉淀，用乙酸乙酯洗滌并且干燥，得到24.8g(62％)E1，m.p.251-253℃。水層用乙酸乙酯萃取，合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。真空除去溶劑，并且用乙醚處理，得到另外的8.9g(22％)E1.1。
MSM＝509(API+)，507(API-)。
實(shí)施例E2.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羥基-咪唑(E2.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例E1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于D2，以85％的產(chǎn)率得到E2.1。
MSM＝465(API+)，463(API-)。
實(shí)施例E2.22-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-N-羥基-咪唑(E2.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例E1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于D2和A2，以67％的產(chǎn)率得到E2.2。
MSM＝495(API+)，493(API-)。
實(shí)施例E2.32-(2，6-二氯-4-[甲氧羰基甲氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羥基-咪唑(E2.3)進(jìn)行類似于實(shí)施例E1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于D2和A4，以98％的產(chǎn)率得到E2.3。
MSM＝553(ESI+)，551(ESI-)。
實(shí)施例E3.12-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羥基-咪唑(E3.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例E1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于D3，以96％的產(chǎn)率得到E3.1。
MSM＝465(API+)，463(API-)。
實(shí)施例E4.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-三甲代甲硅烷基乙炔基苯基)-5-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-N-羥基-咪唑(E4.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例E1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于D4，以61％的產(chǎn)率得到E4.1。
MSM＝525(API+)，523(API-)。
實(shí)施例E4.22-(2，6-二氯-4-[甲氧羰基甲氧基]苯基)-4-(3-三甲代甲硅烷基乙炔基-苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羥基-咪唑(E4.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例E1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于D4和A4，以80％的產(chǎn)率得到E4.2。
MSM＝541(ESI+)，539(ESI-)。
F“N-H咪唑”的合成實(shí)施例F1.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-溴苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F1.1)將78.1g(130mmol)E1.1、59.8g(391mmol)溴乙酸甲酯和181.6ml(1.3mol)三乙胺溶解在3.351甲醇中，在60℃攪拌過(guò)夜。在真空除去溶劑后，將殘余物在乙酸乙酯/水之間分配。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，并且蒸發(fā)至干。殘余物用二異丙基醚處理，濾出并且干燥。產(chǎn)量44.1g(69％)F1，m.p.183-186℃。
MSM＝493(ESI+)，M＝491(ESI-)1H-NMR(250MHz，D6-DMSO)δ＝2.18(s，3H，SCH3)，7.43(t，1H，Ar-H)，7.5-7.8(m，5H，Ar-H)，7.87(s，1H，2-H-BrPh)，8.56(d，1H，6-H-嘧啶)，13.4(s，1H，OH)。
實(shí)施例F2.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F2.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例F1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于E2.1，以64％的產(chǎn)率得到F2.1。
MSM＝449(API+)，447(API-)。
實(shí)施例F2.22-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F2.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例F1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于E2.2，以98％的產(chǎn)率得到F2.2。
MSM＝479(API+)，477(API-)。
實(shí)施例F2.32-(2，6-2氯-4-[甲氧羰基甲氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F2.3)進(jìn)行類似于實(shí)施例F1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于E2.3，以定量的產(chǎn)率得到F2.3。
MSM＝535(ESI+)。
實(shí)施例F2.42-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F2.4)于0℃向在氮?dú)庀碌?.30g(4.3mmol)F2.3的50ml無(wú)水THF溶液中加入LiAlH4(1M THF溶液)，直至用HPLC檢測(cè)不到F2.3。在用0.4ml水進(jìn)行水解并除去溶劑后，將殘余物用堿性ALOX柱色譜(乙酸乙酯)純化，得到52％的F2.4。
MSM＝507(API+)。
實(shí)施例F3.12-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F3.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例F1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于E3.1，以80％的產(chǎn)率得到F3.1。
MSM＝449(API+)，447(API-)。
實(shí)施例F4.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F4.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例F1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于E4.1，以99％的產(chǎn)率得到F4.1。
MSM＝437(API+)，435(API-)。
實(shí)施例F4.22-(2，6-二氯-4-[甲氧羰基甲氧基]苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F4.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例F1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于E4.2，以定量的產(chǎn)率得到F4.2。
MSM＝523(ESI-)。
實(shí)施例F4.32-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F4.3)進(jìn)行類似于實(shí)施例F2.4中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于F4.2，以55％的產(chǎn)率得到F4.3。
MSM＝495(ESI-)。
G“N-H-咪唑砜”的合成實(shí)施例G1.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-溴苯基)-5-(2-甲磺酰基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G1.1)向44.3g(90.0mmol)F1.1的2.151甲醇溶液中加入116.2g(189mmol)過(guò)硫酸氫鉀制劑TM的1.71水溶液。室溫?cái)嚢?小時(shí)后，蒸餾除去甲醇，殘余物置于乙酸乙酯中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，硫酸鈉干燥并且蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)硅膠色譜(正庚烷/乙酸乙酯梯度3∶1～1∶1)，得到34.1g(72％)G1.1，m.p.231-233℃。
MSM＝525(ESI+)，M＝523(ESI-)。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)主要互變異構(gòu)體(57％)δ＝3.35(s，3H，CH3)，7.3-7.7(m，6H，Ar-H)，7.84(t，1H，2-H-Br-Ph)，8.64(d，1H，6-H-嘧啶)，11.2(s，1H，NH).
第二互變異構(gòu)體(43％)δ＝2.92(s，3H，CH3)，7.3-7.7(m，5H，Ar-H)，7.74(t，1H，2-H-Br-Ph)，8.23(d，1H，5-H-嘧啶)，8.81(d，1H，6-H-嘧啶)，10.4(s，1H，NH)。
實(shí)施例G2.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲磺?；奏?4-基)-N-H-咪唑(G2.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例G1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于F2.1，以89％的產(chǎn)率得到G2.1。
MSM＝481(API+)，479(API-)。
實(shí)施例G2.22-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲烷-磺酰基-嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G2.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例G1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于F2.2，以62％的產(chǎn)率得到G2.2。
MSM＝511(API+)，509(API-)。
實(shí)施例G2.32-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-甲烷-磺?；?嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G2.3)進(jìn)行類似于實(shí)施例G1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于F2.4，以78％的產(chǎn)率得到G2.3。
MSM＝539(ESI-)。
實(shí)施例G3.12-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-甲磺?；奏?4-基)-N-H-咪唑(G3.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例G1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于F3.1，以87％的產(chǎn)率得到G3.1。
MSM＝481(API+)，479(API-)。
實(shí)施例G4.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-甲磺?；奏?4-基)-N-H-咪唑(G4.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例G1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于F4.1，以98％的產(chǎn)率得到G4.1。
MSM＝469(API+)。
實(shí)施例G4.22-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-甲烷-磺酰基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G4.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例G1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于F4.3，以65％的產(chǎn)率得到G4.2。
MSM＝529(ESI+)，527(ESI-)。
H“N-H-咪唑苯基氨基嘧啶”的合成實(shí)施例H1.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-溴苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氧基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H1.1)將117mg(0.22mmol)G1.1、140mg(0.67mmol)4-(2-二乙基氨基乙氧基)苯胺和60μl(0.78mmol)三氟乙酸的1.0ml無(wú)水N-甲基吡咯烷酮溶液加熱到140℃18小時(shí)。采用制備型HPLC/MS，在RP18(甲醇-水-梯度)上純化，得到39mg(27％)純的H1.1。
MSM＝653(API+)，651(API-)。
實(shí)施例H2.1.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.1.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G2.1，以51％的產(chǎn)率得到H2.1.1。
MSM＝609(API+)，607(API-)。
實(shí)施例H2.1.22-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.1.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G2.1和4-(2-羥基-乙氧基)苯胺，以26％的產(chǎn)率得到H2.1.2。
MSM＝554(API+)，552(API-)。
實(shí)施例H2.1.32-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-二甲基氨基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.1.3)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G2.1和4-二甲基氨基-苯胺，以14％的產(chǎn)率得到H2.1.3。
MSM＝537(API+)，535(API-)。
實(shí)施例H2.1.42-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-嗎啉基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.1.4)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G2.1和4-嗎啉基-苯胺，以22％的產(chǎn)率得到H2.1.4。
MSM＝579(API+)，577(API-)。
實(shí)施例H2.1.52-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(N-(2-羥基乙基)-氨磺酰基)苯基氨基]-嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.1.5)將150mg(0.31mmol)G2.1、135mg(0.62mmol)4-氨基-N-(2-羥基乙基)苯-磺酰胺和156μl(0.62mmol)HCl的二噁烷溶液(4M)在0.2ml N-甲基吡咯烷酮中的溶液在氮?dú)庀掠?00℃加熱17小時(shí)。反應(yīng)混合物用水和Na2CO3處理，并且用乙酸乙酯萃取。柱色譜純化(二氧化硅，氯仿/甲醇95∶5)得到6％H2.1.5。
MSM＝617(ESI+)，615(ESI-)。
實(shí)施例H2.2.12-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.2.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G2.2，以30％的產(chǎn)率得到H2.2.1。
MSM＝637(API+)，635(API-)。
實(shí)施例H2.2.22-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.2.2)將50mg(0.1mmol)G2.2和23mg(0.15mmol)4-(2-羥基乙氧基)苯胺的0.1ml無(wú)水N-甲基-吡咯烷酮溶液在氮?dú)庀掠?40℃加熱1天。反應(yīng)混合物用水處理，并且用乙酸乙酯萃取。采用制備型HPLC/MS，在RP18(甲醇-水-梯度)上純化，得到5％的H2.2.2。
MSM＝580(API-)。
實(shí)施例H2.3.12-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.3.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G2.3，以62％的產(chǎn)率得到H2.3.1。
MSM＝669(ESI+)。
實(shí)施例H2.3.22-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-甲基亞磺?；?苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.3.2)將80mg(0.15mmol)G2.3、47mg(0.3mmol)4-(甲基亞磺酰基)苯胺和152μl(0.3mmol)HCl的乙醚溶液(2M)在0.1ml無(wú)水N-甲基-吡咯烷酮中的溶液在氮?dú)庀掠?40℃加熱過(guò)夜。將反應(yīng)混合物用水、飽和Na2CO3水溶液處理，并且用乙酸乙酯萃取。柱色譜純化(二氧化硅，正庚烷/乙酸乙酯梯度)，得到6％的H2.3.2。
MSM＝618(ESI+)。
實(shí)施例H2.3.32-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(N-(2-羥基乙基)-氨磺?；?ulfamoyl)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H2.3.3)進(jìn)行類似于實(shí)施例H2.1.5中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G2.3，以4％的產(chǎn)率得到H2.3.3。
MSM＝677(ESI+)，675(ESI-)。
實(shí)施例H3.1.12-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H3.1.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G3.1，以45％的產(chǎn)率得到H3.1.1。
MSM＝609(API+)，607(API-)。
實(shí)施例H3.1.22-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-嗎啉基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H3.1.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G3.1和4-嗎啉基苯胺，以31％的產(chǎn)率得到H3.1.2。
MSM＝579(API+)，577(API-)。
實(shí)施例H3.1.32-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-羥基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H3.1.3)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G3.1和4-羥基苯胺，以59％的產(chǎn)率得到H3.1.3。
MSM＝510(API+)，508(API-)。
實(shí)施例H3.1.42-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-甲氧基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H3.1.4)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G3.1和4-甲氧基苯胺，以7％的產(chǎn)率得到H3.1.4。
MSM＝524(API+)，522(API-)。
實(shí)施例H3.1.52-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-乙氧基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H3.1.5)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G3.1和4-乙氧基苯胺，以34％的產(chǎn)率得到H3.1.5。
MSM＝538(API+)，536(API-)。
實(shí)施例H3.1.62-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-吡啶基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H3.1.6)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G3.1和4-氨基吡啶，并且在微波反應(yīng)器中加熱到240℃10分鐘，得到H3.1.6，產(chǎn)率33％。
MSM＝493(API+)。
實(shí)施例H4.1.12-(2，6-二氯苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H4.1.1)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G4.1，以37％的產(chǎn)率得到H4.1.1。
MSM＝597(API+)，595(API-)。
實(shí)施例H4.1.22-(2，6-二氯苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(H4.1.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G4.1和4-(2-羥基-乙氧基)苯胺，以29％的產(chǎn)率得到H4.1.2。
MSM＝542(API+)，540(API-)。
實(shí)施例H4.22-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基))-N-H-咪唑(H4.2)進(jìn)行類似于實(shí)施例H1.1中所述的反應(yīng)，但是開(kāi)始于G4.2，以23％的產(chǎn)率得到H4.2。
MSM＝657(ESI+)。
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1.通式(I)的化合物， 其中K，L獨(dú)立地表示氫；鹵素；烷基；-OH；或-O-烷基；X是氫；-OR1；-SR2；-S(O)R2；-S(O)2R2；-CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；-CH2-S-(CH2)2-OH或基團(tuán)A1-Q；其中A1表示C1-C3-亞烷基；并且Q是-OR1；-SR2；-S(O)R2；-S(O)2R2；-NR3R4；-NH-(CH2)2-NR3R4或鹵素；R1是氫；烷基；烯丙基；二甲基膦?；谆?，3-環(huán)氧基-1-丙基；(R)-2，3-二羥基-1-丙基；(S)-2，3-二羥基-1-丙基；1，3-二羥基-2-丙基；3-羥基-2-羥甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基甲基或基團(tuán)A1-Q1；并且Q1表示-O-烷基；-CN；-C(O)2H；-C(O)2-烷基；-C(O)-NR3R4；-S-烷基；-S(O)-烷基；-S(O)2-烷基，并且在A1表示1，2-亞乙基-或1，3-亞丙基的情況下，Q1是-OH或-NR3R4；R3，R4獨(dú)立地表示氫或烷基；或者R3和R4與它們所連的氮原子一起形成5～7元飽和或不飽和環(huán)，該環(huán)是未取代的或者被甲基取代，并且其中存在一個(gè)另外的氮或氧原子，其余原子是碳原子；R2是烷基；二甲基膦?；谆?；2，3-環(huán)氧基-1-丙基；2，3-二羥基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基甲基或A1-Q1；Y是芳基或雜芳基，其是未取代的或者被以下基團(tuán)取代一、二或三次鹵素；-CH2OR5；-R5；-OR5；-NR6R7；-SR5；-S(O)R5；-S(O)2R5；-S(O)NHR5；-S(O)2NHR5；-S(O)NR6R7；-S(O)2NR6R7；-C(O)NHR5；-C(O)NR6R7；或CN；R5是氫；或烷基，該烷基是未取代的或者被OH、-O-烷基或-NR6R7取代；條件是沒(méi)有兩個(gè)雜原子連接在同一個(gè)碳原子上；R6，R7獨(dú)立地表示氫或烷基；或R6和R7與它們所連的氮原子一起形成5～7元飽和或不飽和環(huán)，該環(huán)是未取代的或者被甲基取代，并且其中存在一個(gè)另外的氮或氧原子，其余原子是碳原子；Z是鹵素；-OH；-O-烯丙基；烷基；甲氧甲氧基；(2-甲氧乙氧基)甲基氧基；甲硫基；乙氧甲氧基；亞甲基二氧基；乙炔基；三甲代甲硅烷基乙炔基；或-O-烷基，其中烷基是未取代的或者被吡啶基取代；或者芐氧基，所述芐氧基是未取代的或者被鹵素、甲氧基、乙氧基、亞甲基二氧基、-CN、-NO2或-C(O)2H取代；并且n是1或2；和它們的可藥用鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中K，L都是氯；X是氫；烷基或-O-烷基，所述烷基被-OH取代；Y、Z和n如權(quán)利要求1所定義；和它們的生理上可接受的鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中K，L都是氯；X是氫；烷基或-O-烷基，所述烷基被-OH取代；Z是鹵素或乙炔基；Y是苯基，其是未取代的或者被以下基團(tuán)取代一次鹵素；-CH2OR5；-R5；-OR5；-NR6R7；-SR5；-S(O)R5；-S(O)2R5；-S(O)NHR5；-S(O)2NHR5；-S(O)NR6R7；-S(O)2NR6R7；-C(O)NHR5；-C(O)NR6R7；或CN；R5是氫；或烷基，其是未取代的或者被OH取代；-O-烷基或-NR6R7；條件是沒(méi)有兩個(gè)雜原子連接在同一個(gè)碳原子上；R6，R7獨(dú)立地表示氫或烷基；n是1；和它們的可藥用鹽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其是2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-溴苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-二甲基氨基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(N-(2-羥基乙基)-氨磺?；?苯基氨基]-嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-羥甲基苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-甲基亞磺酰基-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-(N-(2-羥基乙基)-氨磺?；?苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-羥基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-甲氧基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-乙氧基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-羥基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，或2-(2，6-二氯-4-[2-羥基乙氧基]苯基)-4-(3-乙炔基苯基)-5-(2-[4-(2-二乙基氨基乙氧基)-苯基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中K，L都是氯；X是氫；Z是鹵素；Y是被-NR6R7取代的苯基，其中R6和R7與它們所連的氮原子一起形成5～7元飽和或不飽和環(huán)，該環(huán)是未取代的或者被甲基取代，并且其中存在一個(gè)另外的氮或氧原子，其余原子是碳原子；n是1；和它們的可藥用鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其是2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-嗎啉基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑，或2-(2，6-二氯苯基)-4-(3-氯苯基)-5-(2-[4-嗎啉基苯基-氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中K，L都是氯；X是氫；Z是鹵素；Y是雜芳基，其是未取代的或者被以下基團(tuán)取代1、2或3次鹵素；-CH2OR5；-R5；-OR5；-NR6R7；-SR5；-S(O)R5；-S(O)2R5；-S(O)NHR5；-S(O)2NHR5；-S(O)NR6R7；-S(O)2NR6R7；-C(O)NHR5；-C(O)NR6R7；或CN；R5是氫；或烷基，其是未取代的或者被OH取代；-O-烷基或-NR6R7；條件是沒(méi)有兩個(gè)雜原子連接在同一個(gè)碳原子上；R6，R7獨(dú)立地表示氫或烷基；或R6和R7與它們所連的氮原子一起形成5～7元飽和或不飽和環(huán)，該環(huán)是未取代的或者被甲基取代，并且其中存在一個(gè)另外的氮或氧原子，其余原子是碳原子；n是1；和它們的可藥用鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中K，L都是氯；X是氫；Z是鹵素；Y是吡啶基，其是未取代的或者被烷基取代；n是1；和它們的可藥用鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其是2-(2，6-二氯苯基)-4-(4-氯苯基)-5-(2-[4-吡啶基氨基]嘧啶-4-基)-N-H-咪唑。
10.一種制備根據(jù)權(quán)利要求1的化合物的方法，其中a)將通式(VI)化合物 與式Y(jié)-NH2化合物反應(yīng)，得到式(I)化合物；取代基K、L、X、Y、Z以及n具有如權(quán)利要求1所給的含義；并且其中式(VI)化合物是通過(guò)氧化通式(V)表示的硫醚的硫醚基而獲得的， 其中式(V)化合物是通過(guò)通式(IV)化合物的N-脫氧獲得的， 并且所述的通式(IV)化合物是通過(guò)通式(II)化合物 與通式(III)化合物的反應(yīng)而獲得的， 和b)從反應(yīng)混合物中分離所述的式(I)化合物，以及c)如果需要，通過(guò)加入合適的酸或堿，將它們轉(zhuǎn)化成可藥用的鹽。
11.一種藥物組合物，含有權(quán)利要求1～9中任何一項(xiàng)所述的一種或多種化合物以及可藥用賦形劑。
12.用于抑制腫瘤生長(zhǎng)的根據(jù)權(quán)利要求11的藥物組合物。
13.權(quán)利要求1～9中任何一項(xiàng)的化合物用于治療癌癥的用途。
14.權(quán)利要求1～9中任何一項(xiàng)的化合物用于制造藥物的用途，所述的藥物用于治療由c-met或src酪氨酸激酶介導(dǎo)的疾病。
15.權(quán)利要求1～9中任何一項(xiàng)的化合物用于制造用于抑制腫瘤生長(zhǎng)的藥物的用途。
全文摘要
通式(I)的化合物是治療癌癥和癌癥相關(guān)疾病的有效治療劑。
文檔編號(hào)C07D213/00GK1867563SQ200480030583
公開(kāi)日2006年11月22日 申請(qǐng)日期2004年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月17日
發(fā)明者K·霍諾爾德, S·沙伊布利克, T·馮希施海特, E·福斯 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司