專利名稱：3－取代哌嗪三氮唑醇類抗真菌化合物及其鹽類的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是一種新型3-取代哌嗪三氮唑醇類抗真菌化合物1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-取代哌嗪基-2-丙醇類化合物及其鹽類。
背景技術(shù)：
近三十年來，由于臨床上廣譜抗生素的大量使用，癌癥放療、化療和器官移植患者人數(shù)的增加，皮質(zhì)激素和免疫抑制劑的廣泛使用，以及艾滋病的流行，深部真菌感染率已經(jīng)上升了40倍。最新統(tǒng)計(jì)資料表明，艾滋病患者中60％的直接死亡原因?yàn)樯畈空婢腥?。深部真菌感染正日益成為一種常見病、多發(fā)病，已成為癌癥及免疫缺陷性疾病患者死亡的主要原因之一。因此，臨床上迫切需要高效、低毒、選擇性高的新型深部抗真菌藥物。但目前臨床常用抗真菌藥物如兩性霉素B(Amphotericin B)、酮康唑(Ketoconazole)、氟康唑(Fluconazole)和伊曲康唑(Itraconazole)等都存在毒副作用大、抗菌譜窄、耐藥菌株日趨增多等問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種高效、低毒、廣譜的新型三唑醇類化合物，及其常見藥用鹽類如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、甲烷磺酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、葡萄酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽或丁二酸鹽。
本發(fā)明化合物的結(jié)構(gòu)通式如下 其中X代表氫或甲基，優(yōu)選甲基。
M代羥基或酯基；這里的酯基指具有1～4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈酯基，如甲酸酯基、乙酸酯基、丙酸酯基、異丙酸酯基，優(yōu)選具有1～3個(gè)碳原子的酯基，特別優(yōu)選乙酸酯基；Y代表芳環(huán)上的各種取代基，取代位置可位于鄰、間、對(duì)位，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.鹵素，如F、Cl、Br、I，優(yōu)選2，4-二氟或2，4-二氯取代；b.具有1～4個(gè)碳原子的脂肪鏈，如甲基、乙基、三氟甲基、叔丁基等，優(yōu)選三氟甲基取代；特別優(yōu)選2，4-二氟基；R代表(1)雜環(huán)甲?；蛞阴；?、取代雜環(huán)甲酰基或乙?；s環(huán)指常見的五員或六員雜環(huán)，如呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、異噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、嗎啉和哌啶等，優(yōu)選六員雜環(huán)，特別優(yōu)選吡啶或嘧啶，取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，如甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基等；b.鹵素，如F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，如硝基、氰基、氨甲?；-甲基氨甲?；?、N-乙基氨甲?；，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲?；?、甲氧?；?、乙氧?；?、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基等；(2)雜環(huán)甲基或取代雜環(huán)甲基雜環(huán)指常見的五員或六員雜環(huán)，如呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、異噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、嗎啉和哌啶等，優(yōu)選六員雜環(huán)，特別優(yōu)選吡啶或嘧啶，取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，如甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基等；b.鹵素，如F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，如硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲?；?、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲?；?、N，N-二乙基氨甲?；?、甲氧?；?、乙氧?；?、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基等；(3)雜環(huán)甲氧基苯基或取代雜環(huán)甲氧基苯基雜環(huán)指常見的五員或六員雜環(huán)，如呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、異噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、嗎啉和哌啶等，優(yōu)選六員雜環(huán)，特別優(yōu)選吡啶或嘧啶，取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，如甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基等；b.鹵素，如F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，如硝基、氰基、氨甲?；?、N-甲基氨甲?；-乙基氨甲?；，N-二甲基氨甲?；，N-二乙基氨甲?；⒓籽貂；?、乙氧?；?、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基等；(4)3’，4’-雜環(huán)稠和的苯基在苯基3，4-位的雜環(huán)可以是五員環(huán)，也可以是六員環(huán)；可以是脂肪雜環(huán)，也可以是芳香雜環(huán)，如1，3-二氧戊環(huán)，內(nèi)酯環(huán)，內(nèi)酰胺環(huán)，吡咯，咪唑，三氮唑，噁唑，噻唑，吡啶，嘧啶，嗎啉和哌啶等。優(yōu)選五員環(huán)，特別優(yōu)選1，3-二氧戊環(huán)和咪唑。雜環(huán)取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代。取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，如甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基等；b.鹵素，如F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，如硝基、氰基、氨甲?；?、N-甲基氨甲?；-乙基氨甲?；?、N，N-二甲基氨甲?；?、N，N-二乙基氨甲?；?、甲氧?；?、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基等；(5)3’，4’-雜環(huán)稠和的芐氧苯基在芐基3，4-位的雜環(huán)可以是五員環(huán)，也可以是六員環(huán)；可以是脂肪雜環(huán)，也可以是芳香雜環(huán)，如1，3-二氧戊環(huán)，內(nèi)酯環(huán)，內(nèi)酰胺環(huán)，吡咯，咪唑，三氮唑，噁唑，噻唑，吡啶，嘧啶，嗎啉和哌啶等，優(yōu)選五員環(huán)，特別優(yōu)選1，3-二氧戊環(huán)和咪唑，雜環(huán)取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，如甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基等；b.鹵素，如F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，如硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲?；?、N-乙基氨甲?；，N-二甲基氨甲?；?、N，N-二乙基氨甲酰基、甲氧酰基、乙氧?；?、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基等。
本發(fā)明化合物的鹽類包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、甲烷磺酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、葡萄酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽和丁二酸鹽等常見藥用鹽類。
本發(fā)明化合物的制備方法如下1.中間體的制備根據(jù)目標(biāo)化合物所帶基團(tuán)的不同，由Y為不同基團(tuán)的取代苯制得1-(2-取代苯基-2，3-環(huán)氧丙基)-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽或1-(2-取代苯基-2，3-環(huán)氧丁基)-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽環(huán)中間體。
2.目標(biāo)化合物的制備中間體1-(2-取代苯基-2，3-環(huán)氧丙基)-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽與不同R基團(tuán)的單取代哌嗪化合物在堿性條件下發(fā)生開環(huán)反應(yīng)就生成X為H、M為羥基的本發(fā)明化合物；中間體1-(2-取代苯基-2，3-環(huán)氧丁基)-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽與不同R基團(tuán)的單取代哌嗪化合物在堿性條件下發(fā)生開環(huán)反應(yīng)就生成X為甲基、M為羥基的本發(fā)明化合物；M為羥基的本發(fā)明化合物再與酰氯或酸酐反應(yīng)就得到相應(yīng)的酯類。
以Y為2，4-二氟基、X為H為例，制備方法如下1.中間體1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-環(huán)氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽(III)的制備(參見孫青龔和劉超美等第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2001；22(9)871) 以間二氟苯為起始原料，在三氯化鋁的催化作用下，以摩爾比1∶1與氯乙酰氯在二氯甲烷中于50～55℃發(fā)生傅-克(Friedel Crafts)反應(yīng)，攪拌反應(yīng)8小時(shí)形成2-氯-2′，4′-二氟苯乙酮(IV)；(IV)在甲苯中與三唑反應(yīng)24小時(shí)形成2′，4′-二氟-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)苯乙酮(V)；(V)與硫伊立德(ylid)試劑三甲基氧硫碘化物在60℃發(fā)生羰基的親核加成反應(yīng)，形成環(huán)氧化物，它可與甲烷磺酸成鹽，得中間體1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-環(huán)氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽(III)。
2.目標(biāo)化合物1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-取代哌嗪-2-丙醇的制備 中間體環(huán)氧化物(III)與單取代哌嗪化合物在堿性條件下發(fā)生開環(huán)反應(yīng)即生成哌嗪取代的三唑醇類化合物(I)。
3.鹽類的制備本發(fā)明3-取代哌嗪三唑醇類化合物鹽類的制備方法是將上述制備的3-取代哌嗪三唑醇類抗真菌化合物(I)與等摩爾的酸反應(yīng)1～2小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液得沉淀，過濾就得到相應(yīng)的鹽類。
表1列出的是本發(fā)明中部分優(yōu)選目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)、產(chǎn)率、熔點(diǎn)和分子式。
本發(fā)明的制備方法將結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)敘述。
表1部分優(yōu)選化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、產(chǎn)率、熔點(diǎn)(a，b)和分子式 化合物 R基團(tuán) 產(chǎn)率 熔點(diǎn) 分子式編號(hào) (％) (℃)12-呋喃甲?；?4.4 123-5C20H21F2N5O322-噻吩甲?；?9.9 105-7C20H21F2N5O2S32-吡啶甲酰基76.6 144-6C21H22F2N6O243-吡啶甲?；?3.2 132-3C21H22F2N6O254-吡啶甲?；?1.8 156-8C21H22F2N6O266-喹啉甲?；?4.2 134-6C25H24F2N6O275-NO2-2-呋喃甲酰基 90.1 118-9C20H20F2N6O585-Cl-2-噻吩甲?；? 59.9 107-9C20H20ClF2N5O2S92-噻吩乙?；?9.2 107-8C21H23F2N5O2810 2-吡啶乙?；?0.5 154-6C22H24F2N6O211 4-吡啶乙?；?6.9 138-40 C22H24F2N6O212 1-(1，2，4-三唑-1-基)乙?；?79.6 121-2C19H22F2N8O213 1-咪唑乙?；?8.2 123-4C20H23F2N7O214 4-(2-呋喃甲氧基)苯基48.5 96-8 C26H27F2N5O315 4-(5-NO2-2-呋喃甲氧基)苯基 55.6 115-7C26H26F2N6O516 4-(2-吡啶甲氧基)苯基52.2 142-4C27H28F2N6O217 4-(3-吡啶甲氧基)苯基62.5 90-2 C27H28F2N6O218 4-(4-吡啶甲氧基)苯基56.5 122-4C27H28F2N6O219 4-(2-嘧啶甲氧基)苯基63.1 114-7C26H27F2N7O220 4-(4-嘧啶甲氧基)苯基67.1 123-4C26H27F2N7O221 4-(4-CF3-2-吡啶甲氧基)苯基 80.1 117-8C28H27F5N6O222 4-(5-CF3-2-吡啶甲氧基)苯基 59.2 125-8C28H27F5N6O223 4-(6-CF3-3-吡啶甲氧基)苯基 69.7 121-3C28H27F5N6O224 4-(2-CF3-4-吡啶甲氧基)苯基 80.1 166-8C28H27F5N6O225 4-(4-F-2-吡啶甲氧基)苯基57.3 115-6C27H27F3N6O226 4-(5-Cl-2-吡啶甲氧基)苯基 60.3 109-10 C27H27ClF2N6O227 4-(3-CN-2-吡啶甲氧基)苯基 64.1 111-3C28H27F2N7O2
28 4-(5-Cl-3-吡啶甲氧基)苯基 76.2 107-9 C27H27ClF2N6O229 4-(4-OCH3-2-吡啶甲氧基)苯基 67.2 93-5 C28H30F2N6O330 4-(4-喹啉甲氧基)苯基 82.1 136-8 C31H30F2N6O231 4-(6-喹啉甲氧基)苯基 79.9 141-3 C31H30F2N6O232 4-(5-異噁唑甲氧基)苯基 84.8 132-4 C25H30F2N6O333 4-(苯并[d]1，3-二氧戊環(huán)-5-甲氧基)苯67.8 145-7 C29H29F2N5O4基34 4-(苯并[d]噻唑-5-甲氧基)苯基 74.7 152-4 C29H28F2N6O2S35 4-(苯并[d]噁唑-5-甲氧基)苯基 71.8 163-5 C29H28F2N6O336 4-(1-異丙基苯并[d]咪唑-5-甲氧基)苯基 58.3 138-9 C32H35F2N7O237 4-(1-乙基苯并[d]三氮唑-5-甲氧基)苯基 60.6 126-8 C30H32F2N8O2(a).C，H，N三種元素分析的測(cè)定值與理論計(jì)算值相差小于0.3％。
(b).溫度計(jì)未校正。
藥理實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明化合物具有較強(qiáng)的抗真菌活性，抗菌譜廣，且對(duì)臨床耐氟康唑菌株有效，因此可用于制備抗真菌藥物。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例11-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(2-呋喃甲?；?哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物1)的制備取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-環(huán)氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽(III)1.65g(5mmol)，2-巰基吡啶1.08g(6mmol)，無水碳酸鉀2.07g(15mmol)和相轉(zhuǎn)移催化劑十六烷基三甲基溴化銨0.1g，二甲基甲酰胺30ml，在90-95℃油浴中加熱攪拌反應(yīng)8小時(shí)。冷卻，在攪拌下加入50ml水中，乙酸乙酯提取(3×70ml)，水洗(30ml×3)，無水Na2SO4干燥，回收溶劑，用無水乙醇重結(jié)晶得白色固體1.76g，熔點(diǎn)123～5℃，產(chǎn)率84.4％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.24(1H，s，triazole C3-H)，7.82(1H，s，triazoleC5-H)，6.77～8.30(6H，m，Ar-H)，5.10(1H，s，OH)，4.49-4.58(2H，AB體系，triazole-CH2)，3.33-3.35(4H，m，N(CH2)4N)，3.04-3.08(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.66-2.72(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.32-2.34(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3341，3057，2970，2806，1615，1588，1559，1272，1102，1060實(shí)施例21-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酰基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物12)的制備取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-環(huán)氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽(III)1.65g(5mmol)，2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酰哌嗪1.17g(6mmol)，無水碳酸鉀2.07g(0.015mol)和相轉(zhuǎn)移催化劑十六烷基三甲基溴化銨0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加熱攪拌反應(yīng)8小時(shí)。冷卻，在攪拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，無水Na2SO4干燥，過濾，回收溶劑后得粗品，將粗品進(jìn)行柱層析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脫，得淡黃色固體1.72g，熔點(diǎn)121～2℃，產(chǎn)率79.6％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.12-8.15(2H，m，triazole C3-H)，7.75-7.78(2H，m，triazole C5-H)，6.75～7.58(3H，m，Ar-H)，5.20(1H，s，OH)，4.56-4.64(2H，AB體系，triazole-CH2)，3.60-3.68(4H，m，N(CH2)4N)，3.17-3.20(1H，d，J＝13.2Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.80-2.84(1H，d，J＝13.2Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.60-2.66(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3234，3077，2975，2891，2806，1612，1564，1273，1249，1060實(shí)施例31-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(2-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物16)的制備取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-環(huán)氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽(III)1.65g(5mmol)，4-(4-(2-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪1.62g(6mmol)，無水碳酸鉀2.07g(0.15mol)和相轉(zhuǎn)移催化劑十六烷基三甲基溴化銨0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加熱攪拌反應(yīng)8小時(shí)。冷卻，在攪拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，無水Na2SO4干燥，過濾，回收溶劑后得粗品，將粗品進(jìn)行柱層析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脫，得黃色固體1.32g，熔點(diǎn)142～4℃，產(chǎn)率52.2％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.29(1H，s，triazole C3-H)，7.75(1H，s，triazoleC5-H)，6.80～8.56(11H，m，Ar-H)，5.62(1H，s，OH)，5.08(2H，s，-OCH2-)，4.59(2H，s，triazole-CH2)，2.90-2.94(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.87-2.90(4H，m，N(CH2)4N)，2.71-2.75(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.50-2.56(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3421，3137，2806，2230，2180，1621，1580，1561，1174，1024實(shí)施例41-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(3-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物17)的制備取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-環(huán)氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽(III)1.65g(5mmol)，4-(4-(3-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪1.62g(6mmol)，無水碳酸鉀2.07g(0.15mol)和相轉(zhuǎn)移催化劑十六烷基三甲基溴化銨0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加熱攪拌反應(yīng)8小時(shí)。冷卻，在攪拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，無水Na2SO4干燥，過濾，回收溶劑后得粗品，粗品進(jìn)行柱層析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脫，得黃色固體1.58g，熔點(diǎn)90～2℃，產(chǎn)率62.5％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.28(1H，s，triazole C3-H)，7.74(1H，s，triazoleC5-H)，6.80～8.63(11H，m，Ar-H)，5.57(1H，s，OH)，5.08(2H，s，-OCH2-)，4.60(2H，s，triazole-CH2)，2.91-2.95(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.87-2.90(4H，m，N(CH2)4N)，2.72-2.76(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.51-2.56(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3432，3154，3118，2941，1617，1610，1551，1301，1271，1015
實(shí)施例51-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(4-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物18)的制備取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-環(huán)氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽(III)1.65g(5mmol)，4-(4-(4-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪1.62g(6mmol)，無水碳酸鉀2.07g(0.15mol)和相轉(zhuǎn)移催化劑十六烷基三甲基溴化銨0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加熱攪拌反應(yīng)8小時(shí)。冷卻，在攪拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，無水Na2SO4干燥，過濾，回收溶劑后得粗品，粗品進(jìn)行柱層析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脫，得黃色固體1.43g，熔點(diǎn)122～4℃，產(chǎn)率56.5％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.28(1H，s，triazole C3-H)，7.75(1H，s，triazoleC5-H)，6.80～8.56(11H，m，Ar-H)，5.62(1H，s，OH)，5.08(2H，s，-OCH2-)，4.59(2H，s，triazole-CH2)，2.89-2.93(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.87-2.89(4H，m，N(CH2)4N)，2.71-2.75(1H，d，J＝13.6Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.50-2.57(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3431，3154，3020，2838，1621，1598，1574，1428，1138，1063實(shí)施例61-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(苯并[d]1，3-二氧戊環(huán)-5-甲氧基)苯基哌嗪)]-2-丙醇(表1中化合物33)的制備取1-[2-(2，4-二氟苯基)-2，3-環(huán)氧丙基]-1H-1，2，4-三唑甲烷磺酸鹽(III)1.65g(5mmol)，4-(4-(苯并[d]1，3-二氧戊環(huán)-5-甲氧基)苯基哌嗪1.87g(6mmol)，無水碳酸鉀2.07g(0.15mol)和相轉(zhuǎn)移催化劑十六烷基三甲基溴化銨0.1g，二甲基甲酰胺25ml，在90-95℃油浴中加熱攪拌反應(yīng)8小時(shí)。冷卻，在攪拌下加入50ml水中，用乙酸乙酯提取(60ml×3)，合并提取液，水洗(25ml×3)，無水Na2SO4干燥，過濾，回收溶劑后得粗品，粗品進(jìn)行柱層析，用CHCl3∶C2H5OH＝9∶1洗脫，得白色固體1.86g，熔點(diǎn)145～7℃，產(chǎn)率67.8％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm8.13(1H，s，triazole C3-H)，7.79(1H，s，triazoleC5-H)，6.77～7.61(10H，m，Ar-H)，5.94(1H，s，-OCH2O-)，5.19(1H，s，OH)，4.89(2H，s，-OCH2-)，4.50-4.59(2H，AB體系，triazole-CH2)，3.10-3.14(1H，d，J＝13.2Hz，-N(CH2)4N-CHa)，2.94-2.97(4H，m，N(CH2)4N)，2.72-2.76(1H，d，J＝13.2Hz，-N(CH2)4N-CHb)，2.51-2.53(4H，m，N(CH2)4N)IR(cm-1，KBr)3442，3346，3178，2930，1618，1592，1564，1440，1235，1088實(shí)施例71-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(3-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-2-丙醇(表1中化合物18)富馬酸鹽的制備取1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-[4-(4-(3-吡啶甲氧基)苯基)哌嗪]-丙醇-2(表1中化合物18)2.53g(5mmol)，富馬酸0.58g(5mmol)，加入25ml甲醇，攪拌回流1小時(shí)，放冷，加入25ml二氯甲烷，放置，過濾出固體，用無水乙醇重結(jié)晶得白色固體2.73g，產(chǎn)率87.8％。
其余目標(biāo)化合物可重復(fù)上述實(shí)施例的操作步驟，以不同的單取代哌嗪在堿性條件下與關(guān)鍵中間體環(huán)氧化物(III)反應(yīng)，就可得到各種3-取代哌嗪三唑醇類化合物及其鹽類。實(shí)施例中所用試劑均為市售分析純。
本發(fā)明合成的1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-3-取代哌嗪-2-丙醇類化合物及其鹽類具有抗真菌作用，其抑菌實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果如下采用美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS)推薦的標(biāo)準(zhǔn)化抗真菌敏感性實(shí)驗(yàn)方法測(cè)試其體外抗真菌活性，以目標(biāo)化合物抑制所選真菌80％生長的濃度作為判斷終點(diǎn)(MIC80，參考Antimicrob Agents Chemother 45(9)2420，2001)。
(一)、材料與方法1、實(shí)驗(yàn)真菌菌株本發(fā)明選用兩種ATCC標(biāo)準(zhǔn)株和六種臨床株，ATCC標(biāo)準(zhǔn)株由上海長征醫(yī)院菌種保存中心提供，臨床株由上海長海醫(yī)院真菌室提供，并經(jīng)形態(tài)學(xué)和生化學(xué)鑒定。
選用的8種真菌包括4種深部真菌，1種淺表真菌，2種皮下真菌和薰煙曲霉菌。
深部真菌白色念珠菌(Candida albicans)ATCC76615(簡(jiǎn)稱Ca.)新生隱球菌(Cryptococcus neoformans)ATCC32609(簡(jiǎn)稱Cn.)熱帶念珠菌(Candida tropicalis)(簡(jiǎn)稱Ct.)近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)(簡(jiǎn)稱Cp.)淺表真菌紅色毛癬菌(Trichophyton rubrum)(簡(jiǎn)稱Tr.)皮下真菌申克氏孢子絲菌(Sporothrix schenckii)(簡(jiǎn)稱Ss.)裴氏著色真菌(Fonsecaea pedrosoi)(簡(jiǎn)稱Fp.)薰煙曲霉菌(Aspergillus fumigatus)(簡(jiǎn)稱Af.)2、培養(yǎng)液RPMI1640培養(yǎng)液RMPI1640(Gibco BRL)10g，NaHCO32.0g，嗎啡啉丙磺酸(morpholinepropanesulfonic acid，MOPS)(Sigma)34.5g(0.165M)加三蒸水900ml溶解，1N NaOH調(diào)pH至7.0(25℃)，定溶至1000ml，濾過消毒，4℃保存。
沙堡葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)蛋白胨10g，葡萄糖40g，瓊脂18g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，調(diào)整pH至7.0，定溶至1000ml，高壓滅菌后4℃保存。
YEPD培養(yǎng)液酵母浸膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，定溶至1000ml，高壓滅菌后4℃保存。
3、實(shí)驗(yàn)方法菌液取酵母菌接種至1mlYEPD培養(yǎng)液，35℃培養(yǎng)16h，以RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)整菌液濃度至1×103～5×103個(gè)/ml；取霉菌接種至SDA斜面，35℃培養(yǎng)一周，以RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)整孢子濃度至1×103～5×103個(gè)/ml。
藥液受試藥物和對(duì)照藥氟康唑及酮康唑分別用二甲基亞砜配成6.4g/L溶液，實(shí)驗(yàn)前用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋成640mg/L。
藥敏板取無菌96孔板，于每排1號(hào)孔加RPMI1640培養(yǎng)液100μl作空白對(duì)照；3～12號(hào)孔各加新鮮配制的菌液100μl；2號(hào)孔分別加菌液190μl和受試化合物溶液10μl；2～11號(hào)孔10級(jí)倍比稀釋；12號(hào)孔不含藥物，作陽性對(duì)照。
二、MIC值判定念珠菌、新生隱球菌及絲狀菌分別于35℃培養(yǎng)24h、72h和一周后，用酶標(biāo)分析儀于630nm測(cè)各孔OD值。與陽性對(duì)照孔比，以O(shè)D值下降80％以上的最低濃度孔中的藥物濃度為MIC80(真菌生長80％被抑制時(shí)的濃度)。
當(dāng)藥物的MIC80值超過測(cè)定濃度范圍時(shí)，按以下方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)MIC80值高于最高濃度64mg/L時(shí)，記為“＞64mg/L”；MIC80值為最低濃度或在最低濃度以下時(shí)，不作區(qū)別，均記為“≤0.125mg/L”。
上述實(shí)驗(yàn)均平行操作2到3次，當(dāng)MIC80值能準(zhǔn)確重復(fù)或只差一個(gè)濃度時(shí)才被接受，并以較高濃度作為MIC80值；當(dāng)MIC80值相差兩個(gè)濃度以上時(shí)，則需重新實(shí)驗(yàn)，直到符合要求為止。結(jié)果見表2。
表2目標(biāo)化合物的體外抗真菌活性MIC80(μg/ml)表1中化合物 Ca.Cn. Ct. Cp.Ss. Fp. Tr. Af.
編號(hào)1 ≤0.1251 2 16 ＞64 ≤0.125 64 83 ≤0.1252 ≤0.125 ≤0.125＞64 ≤0.125 2 45 0.125 1 2 16 ＞64 ≤0.125 64 812 ≤0.125≤0.125 ≤0.125 ≤0.12516≤0.125 32 1613 ≤0.1250.250.5 16 16≤0.125 ＞643216 ≤0.125≤0.125 ≤0.125 ≤0.125＞64 ≤0.125 4 6417 ≤0.125≤0.125 ≤0.125 ≤0.125＞64 ≤0.125 16 6418 ≤0.125≤0.125 ≤0.125 0.25 640.258 833 ≤0.1251 ≤0.125 ≤0.125＞64 ≤0.125 4 8酮康唑 ≤0.1250.5 ≤0.125 ≤0.1254 ≤0.125 ≤0.125 8氟康唑 0.516 0.5 0.5＞64 2 8 ＞64上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明雜環(huán)三唑醇類化合物及其鹽類有較好的抗真菌活性，大多數(shù)化合物對(duì)所選真菌的體外抑制活性均強(qiáng)于氟康唑，與酮康唑相當(dāng)或更優(yōu)，說明本發(fā)明化合物及其鹽類可用于制備治療真菌感染的藥物。
權(quán)利要求
1.一種 3-取代哌嗪三氮唑醇類抗真菌化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)通式為 其中X 代表氫或甲基；M 代表羥基或酯基；這里的酯基指具有1～4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈酯基，選自甲酸酯基、乙酸酯基、丙酸酯基、異丙酸酯基；Y 代表芳環(huán)上的各種取代基，取代位置可位于鄰、間、對(duì)位，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指(1) 鹵素，選自F、Cl、Br、I；(2) 具有1～4個(gè)碳原子的脂肪鏈，選自甲基、乙基、三氟甲基、叔丁基；R代表(1)雜環(huán)甲?；蛞阴；?、取代雜環(huán)甲?；蛞阴；s環(huán)指五員或六員雜環(huán)選自呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、異噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、嗎啉和哌啶，雜環(huán)上取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，選自甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基；b.鹵素，選自F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，選自硝基、氰基、氨甲?；?、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲?；?、N，N-二乙基氨甲?；?、甲氧?；?、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基；(2)雜環(huán)甲基或取代雜環(huán)甲基雜環(huán)指五員或六員雜環(huán)，選自呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、異噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、嗎啉和哌啶，雜環(huán)上取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，選自甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基；b.鹵素，選自F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，選自硝基、氰基、氨甲?；-甲基氨甲?；?、N-乙基氨甲?；?、N，N-二甲基氨甲?；?、N，N-二乙基氨甲?；?、甲氧?；?、乙氧?；?、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基；(3)雜環(huán)甲氧基苯基或取代雜環(huán)甲氧基苯基雜環(huán)指五員或六員雜環(huán)，選自呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、三氮唑、噁唑、噻唑、異噁唑、吡喃、吡啶、嘧啶、嗎啉和哌啶，雜環(huán)上取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，選自甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基；b.鹵素，選自F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，選自硝基、氰基、氨甲?；?、N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲?；，N-二甲基氨甲?；?、N，N-二乙基氨甲?；?、甲氧?；?、乙氧酰基、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基；(4)3’，4’-雜環(huán)稠和的苯基在苯基3，4-位的雜環(huán)可以是五員環(huán)，也可以是六員環(huán)；可以是脂肪雜環(huán)，也可以是芳香雜環(huán)，選自1，3-二氧戊環(huán)，內(nèi)酯環(huán)，內(nèi)酰胺環(huán)，吡咯，咪唑，三氮唑，噁唑，噻唑，吡啶，嘧啶，嗎啉和哌啶，雜環(huán)取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，選自甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基；b.鹵素，選自F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，選自硝基、氰基、氨甲酰基、N-甲基氨甲?；?、N-乙基氨甲酰基、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲?；⒓籽貂；?、乙氧?；被?、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基；(5)3’，4’-雜環(huán)稠和的芐氧苯基在芐基3，4-位的雜環(huán)可以是五員環(huán)，也可以是六員環(huán)；可以是脂肪雜環(huán)，也可以是芳香雜環(huán)，選自1，3-二氧戊環(huán)，內(nèi)酯環(huán)，內(nèi)酰胺環(huán)，吡咯，咪唑，三氮唑，噁唑，噻唑，吡啶，嘧啶，嗎啉和哌啶，雜環(huán)取代基可位于雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代，取代基指a.1-4個(gè)碳原子的脂肪鏈，選自甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基；b.鹵素，選自F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，選自硝基、氰基、氨甲?；-甲基氨甲?；?、N-乙基氨甲?；?、N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲?；?、甲氧?；⒁已貂；被?、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基。
2.按權(quán)利要求1所述的3-取代哌嗪三唑醇類抗真菌化合物，其特征在于M、X、Y和R基團(tuán)分別為(1)M為羥基，X為H，Y為2，4-二氟基，R為呋喃甲酰基；(2)M為羥基，X為甲基，Y為2，4-二氟基，R為4-吡啶甲?；?；(3)M為羥基，X為甲基，Y為2，4-二氟基，R為2-(1，2，4-三唑-1-基)乙酰基；(4)M為羥基，X為H，Y為2，4-二氟基，R為苯并[d]噻唑-5-基；(5)M為羥基，X為H，Y為2，4-二氟基，R為4-(2-吡啶甲氧基)苯基；(6)M為羥基，X為H，Y為2，4-二氟基，R為4-(3-吡啶甲氧基)苯基；(7)M為羥基，X為H，Y為2，4-二氟基，R為4-(4-吡啶甲氧基)苯基；(8)M為羥基，X為甲基，Y為2，4-二氟基，R為4-(2-吡啶甲氧基)苯基；(9)M為羥基，X為甲基，Y為2，4-二氟基，R為4-(苯并[d]1，3-二氧戊環(huán)-5-甲氧基)苯基。
3.權(quán)利要求1或2所述的3-取代哌嗪三唑醇類化合物的鹽類，選自該類化合物的鹽酸鹽、氫溴酸鹽、甲烷磺酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、葡萄酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽或丁二酸鹽。
4.權(quán)利要求1或2或3所述的3-取代哌嗪三唑醇類抗真菌化合物或鹽類在制備抗真菌藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是一種新型的3－取代哌嗪三氮唑醇類抗真菌化合物及其鹽類，其化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如右式，其中X為氫或甲基；M為氫、羥基、酯基；Y為2，4－二氟基；R代表(1)雜環(huán)甲?；蛞阴；?、取代雜環(huán)甲?；蛞阴；?；(2)雜環(huán)甲基或取代雜環(huán)甲基；(3)雜環(huán)甲氧基苯基或取代雜環(huán)甲氧基苯基；(4)3’，4’－雜環(huán)稠和的苯基；(5)3’，4’－雜環(huán)稠和的芐氧苯基。取代基指a.1－4個(gè)碳原子的脂肪鏈，如甲基、乙基、三氟甲基、羥甲基、甲氧甲基、乙氧甲基、異丙基和叔丁基；b.鹵素，如F、Cl、Br、I；c.吸電子基團(tuán)或供電子基團(tuán)，如硝基、氰基、氨甲酰基、N－甲基氨甲?；?、N－乙基氨甲酰基、N，N－二甲基氨甲酰基、N，N－二乙基氨甲?；?、甲氧?；?、乙氧?；?、氨基、甲酰氨基、乙酰氨基、羥基、甲氧基、乙氧基。取代基可以在雜環(huán)的各個(gè)位置，可以是單取代，也可以是多取代。該類化合物可與多種無機(jī)和有機(jī)酸成鹽。本發(fā)明的3－取代哌嗪三唑醇類抗真菌化合物及其鹽類顯示出很強(qiáng)的抗真菌活性，可用于抗真菌藥物的制備。
文檔編號(hào)C07D407/12GK1557808SQ20041001618
公開日2004年12月29日 申請(qǐng)日期2004年2月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月10日
發(fā)明者劉超美, 何秋琴, 姜遠(yuǎn)英, 曹永兵, 梁爽, 門秀峰 申請(qǐng)人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)