鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，通過(guò)采用電導(dǎo)檢測(cè)，離子色譜法對(duì)鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪進(jìn)行定量分析。本方法進(jìn)行測(cè)定，方法簡(jiǎn)單，精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好。
【專利說(shuō)明】鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及一種精細(xì)化工產(chǎn)品檢測(cè)分析方法，特別是鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法。
【背景技術(shù)】
[0003]鹽酸法舒地爾是一種具有廣泛藥理作用的新型藥物，它的分子結(jié)構(gòu)為5-異喹啉磺酰胺衍生物，為RHO激酶抑制物，通過(guò)增加肌球蛋白輕鏈磷酸酶的活性擴(kuò)張血管，降低內(nèi)皮細(xì)胞的張力，改善腦組織微循環(huán)，不產(chǎn)生和加重腦的盜血，同時(shí)可拮抗炎性因子，保護(hù)神經(jīng)抗凋亡，促進(jìn)神經(jīng)再生。本結(jié)果表明鹽酸法舒地爾對(duì)促進(jìn)神經(jīng)功能的恢復(fù)，減輕臨床癥狀，減少病殘率有一定療效。因此對(duì)于在基層由于受經(jīng)濟(jì)條件的制約以及對(duì)疾病認(rèn)識(shí)程度，超早期溶栓治療不能實(shí)現(xiàn)，但為減少疾病的進(jìn)一步進(jìn)展，在治療時(shí)間窗內(nèi)重建局部血循環(huán)顯得至關(guān)重要，而鹽酸法舒地爾具有對(duì)缺血性腦血管病的顯著神經(jīng)保護(hù)和治療作用，值得在臨床尤其是基層的使用，減少致殘率，提高生活質(zhì)量。法舒地爾是目前唯一臨床可用的Rho激酶抑制劑暨新型細(xì)胞內(nèi)Ca2+拮抗劑，能強(qiáng)效擴(kuò)血管、保護(hù)缺血腦組織，臨床主要用于蛛網(wǎng)膜下腔出血手術(shù)后腦血管痙攣、腦缺血等的防治。
[0004]高哌嗪作為鹽酸法舒地爾合成的起始物料，產(chǎn)品質(zhì)量控制考慮其會(huì)有殘留，結(jié)合生產(chǎn)工藝分析，高哌嗪在反應(yīng)過(guò)程中會(huì)生成高哌嗪的鹽酸鹽，又因高哌嗪沒(méi)有紫外吸收，且成鹽后也不適合用氣相檢測(cè)，不易在生產(chǎn)中控制產(chǎn)品的質(zhì)量。
[0005]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明公開(kāi)了鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，操作簡(jiǎn)單，精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好。
[0007]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，包括如下步驟，將鹽酸法舒地爾用溶劑溶解稀釋成每1ml中含鹽酸法舒地爾0.1mg~IOmg的溶液以及將高哌嗪用溶劑溶解稀釋成每1ml中含高哌嗪0.01 μ g~10 μ g的溶液作為供試品溶液，注入離子色譜儀，進(jìn)樣體積為5~100μ 1，利用電導(dǎo)檢測(cè)器，乙腈-酸溶液作為流動(dòng)相，流動(dòng)相流速為0.3^2.0ml/min，采用陽(yáng)離子交換色譜柱，對(duì)鹽酸法舒地爾、高哌嗪以及鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪分別進(jìn)行定量測(cè)定，其中所述的流動(dòng)相中含乙腈的體積比例范圍為5%~25%，酸溶液的體積比例范圍為75%~95%，所述的酸溶液濃度范圍為2~lOmmol/L。
[0008]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法的一種改進(jìn)，所述的酸溶液為甲烷磺酸溶液、鹽酸溶液、硫酸溶液中的一種或其中幾種的組合溶液。
[0009]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法的又一種改進(jìn)，所述的酸溶液為甲烷磺酸溶液。[0010]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法的又一種改進(jìn)，所述供試品溶液的濃度為3mg/ml。
[0011]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法的又一種改進(jìn)，所述的流動(dòng)相流速為lml/min。
[0012]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法的又一種改進(jìn)，所述的流動(dòng)相中含乙腈的體積比例為10%。
[0013]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法的又一種改進(jìn)，所述的酸溶液的體積為90%。
[0014]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法的又一種改進(jìn)，所述的酸溶液濃度為5 mmol/L。[0015]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法的又一種改進(jìn)，所述的進(jìn)樣體積為20 μ l。
[0016]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好、操作簡(jiǎn)單、精密度高，方便可行，準(zhǔn)確度高，對(duì)人體和環(huán)境造成的危害小，對(duì)鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪進(jìn)行檢測(cè)，填補(bǔ)了高哌嗪成鹽后在鹽酸法舒地爾中殘留無(wú)法檢測(cè)的空白，提高了鹽酸法舒地爾產(chǎn)品質(zhì)量控制的檢測(cè)手段。
[0017]
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0018]圖1、本發(fā)明各實(shí)施例的數(shù)據(jù)列表。
[0019]【具體實(shí)施方式】
[0020]下面結(jié)合附圖和【具體實(shí)施方式】，進(jìn)一步闡明本發(fā)明，應(yīng)理解下述【具體實(shí)施方式】?jī)H用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。
[0021]本發(fā)明中以配置得到不同濃度的鹽酸法舒地爾溶液和高哌嗪溶液來(lái)作為對(duì)照樣，并以兩者的混合溶液來(lái)模擬含雜質(zhì)的鹽酸法舒地爾樣品溶液來(lái)進(jìn)行測(cè)試。
[0022]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法包括如下步驟，將鹽酸法舒地爾用溶劑溶解稀釋成每1ml中含鹽酸法舒地爾0.1mg~IOmg的溶液以及將高哌嗪用溶劑溶解稀釋成每1ml中含高哌嗪0.01 μ g~10 μ g的溶液作為供試品溶液，注入離子色譜儀，進(jìn)樣體積為5~100 μ l，利用電導(dǎo)檢測(cè)器，乙腈-酸溶液作為流動(dòng)相，流動(dòng)相流速為
0.3^2.0ml/min，采用陽(yáng)離子交換色譜柱，對(duì)鹽酸法舒地爾、高哌嗪以及鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪分別進(jìn)行定量測(cè)定，其中所述的流動(dòng)相中含乙腈的體積比例范圍為5%~25%，酸溶液的體積比例范圍為75%~95%，所述的酸溶液濃度范圍為2~lOmmol/L。
[0023]作為一種優(yōu)選，所述的酸溶液為甲烷磺酸溶液、鹽酸溶液、硫酸溶液中的一種或其中幾種的組合溶液。
[0024]作為一種優(yōu)選，所述的酸溶液為甲烷磺酸溶液。
[0025]作為一種優(yōu)選，所述供試品溶液的濃度為3mg/ml。
[0026]作為一種優(yōu)選，所述的流動(dòng)相流速為lml/min。[0027]作為一種優(yōu)選，所述的流動(dòng)相中含乙腈的體積比例為10%。
[0028]作為一種優(yōu)選，所述的酸溶液的體積為90%。
[0029]作為一種優(yōu)選，所述的酸溶液濃度為5 mmol/L。
[0030]作為一種優(yōu)選，所述的進(jìn)樣體積為20 μ I。
實(shí)施例
[0031]儀器:離子色譜儀，包括液相泵、電導(dǎo)檢測(cè)器、進(jìn)樣器 試劑:甲烷磺酸(分析純)、乙腈(色譜純)
色譜柱:陽(yáng)離子交換色譜柱(羧酸基鍵合硅膠為填充劑)
如圖1所示，以下各實(shí)施例的基本實(shí)驗(yàn)條件相同。
[0032]實(shí)施例1:
照離子色譜法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄V J)測(cè)定。
[0033]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用羧酸基鍵合硅膠為填充劑；以5mmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(90: 10)為流動(dòng)相；流速為每分鐘1.0ml ;電導(dǎo)檢測(cè)。稱取鹽酸法舒地爾和高哌嗪對(duì)照品各適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含鹽酸法舒地爾3mg和高哌嗪3ug的混合溶液作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液，精密量取20μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖，高哌嗪峰與相鄰峰的分離度應(yīng)符合要求。
[0034]測(cè)定法取本品約0.3g，精密稱定，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取高哌嗪對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每Irnl中約含高哌嗪3μ g的溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)0.1%。
[0035]實(shí)施例2:
照離子色譜法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄V J)測(cè)定。
[0036]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用羧酸基鍵合硅膠為填充劑；以5mmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(75: 25)為流動(dòng)相；流速為每分鐘0.3ml ;電導(dǎo)檢測(cè)。稱取鹽酸法舒地爾和高哌嗪對(duì)照品各適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含鹽酸法舒地爾3mg和高哌嗪3ug的混合溶液作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液，精密量取20μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖，高哌嗪峰與相鄰峰的分離度應(yīng)符合要求。
[0037]測(cè)定法取本品約0.3g，精密稱定，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取高哌嗪對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每Irnl中約含高哌嗪3μ g的溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)0.1%。
[0038]實(shí)施例3:
照離子色譜法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄V J)測(cè)定。
[0039]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用羧酸基鍵合硅膠為填充劑；以5mmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(95: 5)為流動(dòng)相；流速為每分鐘2ml ;電導(dǎo)檢測(cè)。稱取鹽酸法舒地爾和高哌嗪對(duì)照品各適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含鹽酸法舒地爾3mg和高哌嗪3 μ g的混合溶液作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液，精密量取20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖，高哌嗪峰與相鄰峰的分離度應(yīng)符合要求。[0040]測(cè)定法取本品約0.3g，精密稱定，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取高哌嗪對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每Irnl中約含高哌嗪3μ g的溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)0.1%。
[0041]實(shí)施例4:
照離子色譜法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄V J)測(cè)定。
[0042]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用羧酸基鍵合硅膠為填充劑；以2mmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(90: 10)為流動(dòng)相；流速為每分鐘1.0ml ;電導(dǎo)檢測(cè)。稱取鹽酸法舒地爾和高哌嗪對(duì)照品各適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含鹽酸法舒地爾IOmg和高哌嗪IOyg的混合溶液作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液，精密量取5 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖，高哌嗪峰與相鄰峰的分離度應(yīng)符合要求。
[0043]測(cè)定法取本品約3g，精密稱定，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取5μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取高哌嗪對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含高哌嗪10 μ g的溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)0.1%。
[0044]實(shí)施例5:
照離子色譜法(中 國(guó)藥典2010年版二部附錄V J)測(cè)定。
[0045]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用羧酸基鍵合硅膠為填充劑；以lOmmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(90: 10)為流動(dòng)相；流速為每分鐘1.0ml ;電導(dǎo)檢測(cè)。稱取鹽酸法舒地爾和高哌嗪對(duì)照品各適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含鹽酸法舒地爾0.1mg和高哌嗪0.01 μ g的混合溶液作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液，精密量取100 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖，高哌嗪峰與相鄰峰的分離度應(yīng)符合要求。
[0046]測(cè)定法取本品約0.01g，精密稱定，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取100 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取高哌嗪對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含高哌嗪0.01yg的溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)0.1%。
[0047]本發(fā)明公開(kāi)的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好、操作簡(jiǎn)單、精密度高，方便可行，準(zhǔn)確度高，對(duì)人體和環(huán)境造成的危害小，對(duì)鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪進(jìn)行檢測(cè)，填補(bǔ)了高哌嗪成鹽后在鹽酸法舒地爾中殘留無(wú)法檢測(cè)的空白，提高了鹽酸法舒地爾產(chǎn)品質(zhì)量控制的檢測(cè)手段。
[0048]本發(fā)明方案所公開(kāi)的技術(shù)手段不僅限于上述技術(shù)手段所公開(kāi)的技術(shù)手段，還包括由以上技術(shù)特征任意組合所組成的技術(shù)方案。以上所述是本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:包括如下步驟，將鹽酸法舒地爾用溶劑溶解稀釋成每1ml中含鹽酸法舒地爾0.1mg~IOmg的溶液以及將高哌嗪用溶劑溶解稀釋成每1ml中含高哌嗪0.01 μ g~10 μ g的溶液作為供試品溶液，注入離子色譜儀，進(jìn)樣體積為5~100 μ I，利用電導(dǎo)檢測(cè)器，乙腈-酸溶液作為流動(dòng)相，流動(dòng)相流速為0.3^2.0ml/min，采用陽(yáng)離子交換色譜柱，對(duì)鹽酸法舒地爾、高哌嗪以及鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪分別進(jìn)行定量測(cè)定，其中所述的流動(dòng)相中含乙腈的體積比例范圍為5%~25%，酸溶液的體積比例范圍為75%~95%，所述的酸溶液濃度范圍為2~lOmmol/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:所述的酸溶液為甲烷磺酸溶液、鹽酸溶液、硫酸溶液中的一種或其中幾種的組合溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:所述的酸溶液為甲烷磺酸溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:所述供試品溶液的濃度為3mg/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:所述的流動(dòng)相流速為lml/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:所述的流動(dòng)相中含乙腈的體積比例為10%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:所述的酸溶液的體積為90%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或者7所述的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:所述的酸溶液濃度為5 mmol/Lo
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸法舒地爾中雜質(zhì)高哌嗪的檢測(cè)分析方法，其特征在于:所述的進(jìn)樣體積為20 μ I。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK103901116SQ201210571001
【公開(kāi)日】2014年7月2日 申請(qǐng)日期:2012年12月26日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月26日
【發(fā)明者】王成, 劉躍躍, 張山, 喬德水, 高雪芹 申請(qǐng)人:江蘇萬(wàn)邦生化醫(yī)藥股份有限公司, 上海復(fù)星醫(yī)藥（集團(tuán)）股份有限公司