專利名稱：一種飽和胺類化合物在制備治療缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化合物的新用途，特別是涉及一種飽和胺類化合物三二甲氨基) 乙基)胺(代號TA01)在制備治療缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
缺血性疾病是臨床上一種嚴重危害健康，降低生活質(zhì)量，致死、致殘率高的疾病， 分為慢性和急性缺血性疾病。隨著人民生活水平提高及人口老年化，慢性缺血性疾病如心腦血管梗塞，視網(wǎng)膜缺血性病變發(fā)病率呈上升趨勢，如周圍動脈疾病的發(fā)病率在3% -7%, 超過70歲的人群發(fā)病率高達15% -20%。急性缺血性疾病如下肢缺血損傷是臨床常見的疾病之一，如不及時診斷和正確處理，可迅速引起肢體壞死，導(dǎo)致截肢甚至危及生命。其最常見的病因是下肢動脈栓塞和動脈狹窄伴急性血栓形成。目前下肢缺血的主要治療手段有內(nèi)科藥物治療、手術(shù)治療和微創(chuàng)的血管腔內(nèi)治療。常規(guī)內(nèi)科藥物治療對早期的病人藥物治療有一定效果，但見效較慢，且恢復(fù)較差；還有一些其他的手段，比如說傳統(tǒng)的開刀手術(shù)， 可以把病變段通過人工搭橋的方法跨過去，這種簡單的血管搭橋也可以使病人缺血的癥狀得到緩解，挽救肢體。現(xiàn)在更多的是微創(chuàng)治療，也就是老百姓經(jīng)常提到的介入治療，這種辦法就是用一個導(dǎo)磁導(dǎo)管擴張，用微穿針進行穿刺，用球囊擴張，必要時候用支架做一個內(nèi)支撐，保證血管短期不再狹窄，或者閉塞的血管不再堵塞。目前臨床上采用的內(nèi)科藥物、血管搭橋、介人手術(shù)等方式治療，但具有一定的局限性。對于動脈流出道差，無法進行動脈搭橋或介入者，或體質(zhì)差無法耐受搭橋手術(shù)者的治療方法有限，而內(nèi)科保守治療效果較差。因此，無創(chuàng)性細胞治療藥物通過動員自體骨髓中內(nèi)皮祖細胞到缺血部位修復(fù)血管新生成為治療缺血性疾病的從基礎(chǔ)到臨床已成為新的熱點。干細胞技術(shù)是近年來治療下肢缺血性疾病的新方法。內(nèi)皮祖細胞治療下肢血管病是根據(jù)干細胞可以分化為血管內(nèi)皮細胞，形成新生血管的原理，將患者骨髓中干細胞動員到外周血，趨化到其缺血的下肢肌肉內(nèi)，使其逐漸分化并形成新的毛細血管，促其血管再生，改善和恢復(fù)下肢血流，達到治療下肢缺血的目的。動員自體內(nèi)皮祖細胞治療下肢缺血性病變?yōu)橐恍律委熓侄危康氖茄茉偕?，與以往主要是血管再通的治療理念不同，可使部分患者避免截肢或降低截肢風(fēng)險，改善生活質(zhì)量，技術(shù)更安全，患者耐受度更好。成人骨髓是血細胞再生場所，也是血管內(nèi)皮祖細胞和間充質(zhì)干細胞等干/祖細胞的棲息地。干細胞所在的特定的微環(huán)境稱為干細胞“龕”。組成“龕”的細胞、細胞外基質(zhì)及各種分子調(diào)節(jié)了干細胞的豐度和命運。內(nèi)皮祖細胞是血管內(nèi)皮細胞的前體細胞。內(nèi)皮祖細胞分化成血管的機制主要是四個不同又有互相聯(lián)系的機制，如血管發(fā)生、血管生成、動脈形成和旁分泌機制。四種機制具有協(xié)同作用，旁分泌機制可促進其他三種機制的形成發(fā)展，共同恢復(fù)缺血后的組織的供血和供氧。目前已被證實內(nèi)皮祖細胞不僅參與人胚胎血管發(fā)生， 同時也參與出生后的血管新生。近年來，人們對內(nèi)皮祖細胞的特點有相當(dāng)?shù)牧私庑难艿奈ｋU因子、糖尿病、高血壓、吸煙等可減少循環(huán)系統(tǒng)的內(nèi)皮祖細胞的數(shù)量；心肌缺血、下肢動脈缺血、QRL09/還原酶抑制劑、雌激素、血管內(nèi)皮生長因子、成血血管蛋白等因子、燒傷等血管損傷等等均可增加循環(huán)系統(tǒng)的內(nèi)皮祖細胞的數(shù)量。正常情況下內(nèi)皮的損傷與周圍成熟內(nèi)皮細胞和內(nèi)皮祖細胞對血管內(nèi)皮的修復(fù)處于一種動態(tài)平衡狀態(tài)；病理狀態(tài)下，內(nèi)皮祖細胞增殖并向外周血定向遷移、黏附功能減弱，導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷不可修復(fù)甚至加重，從而成為許多血管相關(guān)疾病重要的致病因素之一。內(nèi)皮祖細胞的定義1997年Asahara等用免疫磁珠法第一次從外周血分離得到內(nèi)皮祖細胞，并觀測到這種細胞可以參與損傷后的血管新生。從形態(tài)上觀察內(nèi)皮祖細胞呈圓形、梭形，無法與其它細胞相區(qū)分，目前鑒定內(nèi)皮祖細胞主要依靠其表面標志物和生物學(xué)功能①目前比較公認的表面標志物鑒定標準為kal-r/Flk-l+/⑶133+。②其誘導(dǎo)后具有內(nèi)吞Dil-ac-LDL并與BS-Iectin結(jié)合。③在Matrivgel膜基質(zhì)上形成管腔樣結(jié)構(gòu)。內(nèi)皮祖細胞與缺血性心臟病2005年Werner等(Werner N, Kosiol S, Schiegl Τ, et al. Circulating endothelial progenitor cells and cardiovascular outcomes. N Engl J Med. 2005 ；353 (10) :999-1007.)指出內(nèi)皮祖細胞是否“健康”是預(yù)測缺血性心臟病諸多危險因素中的一個重要指標。2004年T0PCARE-AMI等(Schachinger V，Assmus B, Britten MB, et al.Transplantation of progenitor cells and regeneration enhancement in acute myocardial infarction :final one-year results of the T0PCARE-AMI Trial. J Am Coll Cardiol. 2004 ；44 (8) : 1690-1699.)在研究中將 59 例急性心肌梗死患者冠狀動脈內(nèi)注射骨髓源或外周血來源的內(nèi)皮祖細胞，術(shù)后4個月隨訪左室造影發(fā)現(xiàn)左室射血分數(shù)升高，左室收縮末期容積減少。同時采用增強對比的核磁共振技術(shù)， 后期增強(late enhancement, LE)容積衡量梗死范圍，術(shù)后4個月和12個月LE顯著減小。內(nèi)皮祖細胞與缺血性腦血管病Taguchi 等(Taguchi A, Matsuyama T, Moriwaki H, et al. Circulating CD34-positive cells provide an index of cerebrovascular function. Circulation. 2004 ； 109 (24) :2972-2975.)發(fā)現(xiàn)循環(huán)血中內(nèi)皮祖細胞與腦血管系統(tǒng)的維持和修復(fù)密切相關(guān)，靜脈注射從人臍靜脈血分離的內(nèi)皮祖細胞給予卒中后48h的大鼠，發(fā)現(xiàn)其在缺血區(qū)能誘導(dǎo)血管新生，并提供神經(jīng)生成的適宜環(huán)境，首次證實了在缺血性腦損害的修復(fù)中血管生成與神經(jīng)生成的直接關(guān)系。楊瑞瑞(楊瑞瑞.血管內(nèi)皮祖細胞的動員及其對腦梗死治療的實驗研究[D].天津醫(yī)科大學(xué)碩士論文，2007.)研究了血管內(nèi)皮生長因子動員自體骨髓內(nèi)皮祖細胞，對腦缺血/再灌注損傷小鼠的影響。發(fā)現(xiàn)實驗組血管內(nèi)皮生長因子持續(xù)增加，在第四天達到高峰，同時梗死灶體積明顯縮小。內(nèi)皮祖細胞與缺血性周圍血管病在動物實驗中，移植體外培養(yǎng)擴增的內(nèi)皮祖細胞可以有效增強缺血組織的血管生成和側(cè)支循環(huán)。Chade等(Chade AR，Zhu X, Lavi R, et al. Endothelial progenitor cells restore renal function in chronic experimental renovascular disease. Circulation. 2009 ；119 (4) :547-557.)給腎動脈狹窄的豬輸注自體內(nèi)皮祖細胞，4周后用CT、組織化學(xué)、Western blotting等方法進行評價，發(fā)現(xiàn)實驗組血管內(nèi)皮生長因子表達增加，并且促進了新血管生成及成熟、減緩了腎微血管重構(gòu)及腎動脈纖維化。內(nèi)皮祖細胞與角膜疾病用自體內(nèi)皮祖細胞作為種子細胞種植于人工血管或者瓣膜及支架表面使其內(nèi)皮化，可防止人造血管表面形成血栓、被細菌污染、形成假性內(nèi)膜等問題，同時避免異源性內(nèi)皮細胞種植帶來的免疫排斥反應(yīng)。邵春益等運用豬角膜脫細胞基質(zhì) (CACM)為載體培養(yǎng)豬骨髓內(nèi)皮祖細胞體外構(gòu)建組角膜后板層，結(jié)果發(fā)現(xiàn)豬CACM排列整齊，內(nèi)皮祖細胞與CACM層貼合良好，構(gòu)建的組織工程角膜后板層與正常角膜相似。在正常狀態(tài)下，個體外周血中內(nèi)皮祖細胞(EPCs)含量極低，不能分離獲取足夠的數(shù)量用以移植治療。在組織發(fā)炎、受傷時，或在臨床上給予化學(xué)治療或細胞因子，均可以讓EPCs離開骨髓的“龕”，這一過程稱之為動員(mobilization)，與EPCs回歸骨髓的過程 (homing)恰好相反。EPCs的動員起始于化學(xué)治療或細胞因子的重復(fù)刺激，導(dǎo)致嗜中性粒細胞或破骨細胞活化，進而影響到骨髓的“龕”保留EPCs的能力，整個過程必須依賴細胞因子(SDF-1 α、VEGF, SCF 等)、趨化因子 CXCR4、粘附蛋白 VLA-4、VCAM-U fibronectin, N-cadherin等分子參與。在EPCs的歸巢和動員過程中SDF-I α /CXCR4通路扮演了非常重要的角色。而且外周循環(huán)血中的SDF-I增加也會促使HSCs/HPCs離開骨髓。在歸巢的過程中，SDF-I是由骨髓內(nèi)基質(zhì)細胞如內(nèi)皮細胞，成骨細胞所產(chǎn)生，EPCs表面表達趨化因子受體 CXCR40目前，關(guān)于通過動員干/祖細胞治療缺血性疾病的藥物研究還較少，常規(guī)的內(nèi)科藥物治療效果不佳，外科手術(shù)由于患者耐受力低無法承受血管搭橋等，臨床上發(fā)現(xiàn)粒細胞集落刺激因子(G-CSF)和AMD3100(商品名為Plerixafor，正進入臨床III期試驗)具有一定的動員造血干細胞和內(nèi)皮祖細胞的功能，但G-CSF動員前給藥時間一般為一周且需要重復(fù)給藥，且同時帶來骨質(zhì)疏松、免疫反應(yīng)等副作用，AMD3100是CXCR4的特異拮抗劑，研究發(fā)現(xiàn)可快速動員骨髓造血干細胞，對動員內(nèi)皮祖細胞也有一定作用。已知的飽和胺類化合物(代號TA01，具有式I所示的分子式)，它是氫鍵的受體， 通過氫鍵和特殊空間位點與蛋白和碳水化合物作用，屬于一種新型醫(yī)藥中間體，發(fā)明人之前已發(fā)現(xiàn)其具有動員外周血造血干細胞的新作用并已提出200910241726. 3的中國專利申請。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種飽和胺類化合物TAOl的新用途，即在制備治療缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用。所述化合物TAOl具有式I所示的分子式
權(quán)利要求
1.一種飽和胺類化合物在制備治療缺血性疾病的藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述飽和胺類化合物分子式如式I所示
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于式中，R1= R2 = CH3，所述飽和胺類化合物為三二甲氨基)乙基)胺。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物的劑型為注射劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述注射劑的溶劑為pH7. 5-8. 5的TE緩沖液、生理鹽水、PBS或滅菌蒸餾水。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的應(yīng)用，其特征在于所述缺血性疾病包括急性下肢缺血、缺血性心腦血管疾病、糖尿病下肢并發(fā)癥、視網(wǎng)膜缺血性病變和外周血管疾病。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于所述缺血性疾病為急性下肢缺血疾病。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種飽和胺類化合物的新用途，即其在制備治療缺血性疾病藥物中的應(yīng)用。實驗證明，該化合物三(2-(二甲氨基)乙基)胺(代號TA01)能夠通過動員骨髓中的內(nèi)皮祖細胞，有效的參與修復(fù)下肢缺血性疾病。本發(fā)明將在治療缺血性疾病藥物的研究和開發(fā)中發(fā)揮重要作用，應(yīng)用前景廣闊。
文檔編號A61K31/132GK102389408SQ20111032190
公開日2012年3月28日 申請日期2011年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月20日
發(fā)明者任祥亮, 師偉, 張銳, 張靜, 李艷華, 裴雪濤, 陳海旭 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所