專利名稱：一種紫杉醇衍生物及其藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及抗腫瘤藥物領域，尤其涉及一種紫杉醇衍生物及其藥物組合物，以及它們的應用。
背景技術：
紫杉醇(paclitaxel，Taxol)是從紅豆杉屬植物樹皮或樹葉中提取純化的一種具有獨特抗癌作用的二萜類化合物。紫杉醇能與微管蛋白結合，形成穩(wěn)定的微管束并使其不被解聚，將細胞停止在G2晚期和M期，阻止癌細胞增殖。這是迄今所發(fā)現(xiàn)的唯一具有這種作用的藥物。
近年來，大量臨床報道表明，紫杉醇對卵巢癌、乳腺癌、肺癌、黑色素瘤、卡泊氏肉瘤、腸癌和白血病等有明顯的療效。該藥1992年12月通過FDA批準，之后在十多個國家陸續(xù)上市。我國的紫杉醇原料藥和注射制劑于1995年通過我國衛(wèi)生部二類新藥審評，現(xiàn)已臨床應用。
目前，國內(nèi)外紫杉醇制劑只有一個品種，即美國施貴寶(BMS)公司配方的紫杉醇注射液。由于紫杉醇不溶于水，BMS公司采用聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)和無水乙醇(50/50)作為助溶載體。大量的臨床報道表明，前者在體內(nèi)降解時導致組織胺釋放，引起嚴重的過敏反應。另外，給藥時經(jīng)生理鹽水或5％葡萄糖注射液稀釋時會產(chǎn)生沉淀(結晶)，尚須用特制的0.22μm微孔濾器濾除結晶以保證安全，因而劑量難以準確。
為了克服現(xiàn)有紫杉醇制劑的缺陷，近年來各國科學家都在努力探索紫杉醇新型給藥系統(tǒng)(drug delivery system，DDS)。比較引人注目的有混合膠束(前體脂質(zhì)體)、脂質(zhì)體、乳劑、微球、毫微囊、β-環(huán)糊精包合、兩親性嵌段共聚物及兩親性殼聚糖衍生物載體等。
紫杉醇制成脂質(zhì)體或脂質(zhì)納米粒制劑，動物模型上不但降低了毒性，還提高了抗腫瘤效果。然而，由于紫杉醇在水相和脂相中的溶解度都比較低，長期放置紫杉醇容易從脂質(zhì)體或脂質(zhì)納米粒中析出，繼而形成沉淀，使得脂質(zhì)體或脂質(zhì)納米粒制劑缺乏長期穩(wěn)定性，給臨床應用帶來不便。
克服上述障礙的一種策略是合成一種能改變其溶解性的紫杉醇衍生物。雖然已經(jīng)有許多水溶性的紫杉醇衍生物的研究，仍不能滿足制備如乳劑、脂質(zhì)微球等與脂質(zhì)載體結合的紫杉醇制劑的需要。因此，本領域迫切需要開發(fā)親脂性的紫杉醇衍生物，作為紫杉醇的前藥，用于制備性質(zhì)更穩(wěn)定、毒性更低、抗腫瘤效果更好的紫杉醇制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種脂溶性的紫杉醇衍生物；本發(fā)明的另一目的是提供該紫杉醇衍生物在制備抗腫瘤藥物方面的應用；本發(fā)明的再一目的是提供一種含有該紫杉醇衍生物的藥物組合物。
本發(fā)明的上述目的是通過下述三方面的技術方案來實現(xiàn)。
本發(fā)明的第一方面，是提供一種紫杉醇前藥，即紫杉醇衍生物——紫杉醇-膽固醇(Tox-Chol)。該衍生物用紫杉醇與氯甲酸膽固醇脂脂(cholesterylchloroformate)反應制備。
氯甲酸膽固醇脂脂結構為
本發(fā)明的紫杉醇-膽固醇，具有如下特征薄層層析乙酸乙酯/己烷(體積比3∶1)作為流動相，當紫杉醇的Rf＝0.4，Tox-Chol Rf＝0.92。
質(zhì)譜分析Micromass Q-TOFTMII陽離子加鈉峰，產(chǎn)率為70％，按照C75H95NO16Na計算分子量為1288.6549，實際測量結果是1288.6581。
HPLC分析C18柱，檢測波長229nm，甲醇和水(體積比80∶20)作為流動相，流速0.8ml/min，當紫杉醇保留時間為7.5分鐘時，Tax-Chol保留時間為6分鐘。
本發(fā)明的第二方面，提供一種紫杉醇衍生物——紫杉醇-膽固醇在制備抗腫瘤的藥物方面的應用，將紫杉醇-膽固醇與脂溶性載體組合物，用于治療腫瘤患者。
給于患者紫杉醇-膽固醇的劑量是治療有效量，例如每天約1微克/千克體重～約10毫克/千克體重。本發(fā)明的化合物的治療有效劑量是能有效的抑制腫瘤生長的劑量，一般的，治療以小劑量開始，以便不斷增加劑量直到此條件下的最適。施用本發(fā)明的化合物的方法視具體情況而定。通?？赏ㄟ^以下途徑完成口腔內(nèi)、鼻腔內(nèi)、腹膜內(nèi)、腸胃外、靜脈內(nèi)、淋巴管內(nèi)、腫瘤內(nèi)、肌肉內(nèi)、間質(zhì)內(nèi)、動脈內(nèi)、皮下、眼內(nèi)、滑膜腔內(nèi)、經(jīng)上皮、經(jīng)皮施用。此外，本發(fā)明的紫杉醇-膽固醇還可與其他治療劑一起使用。
本發(fā)明的第三方面，還提供了一種藥物組合物，它通常含有安全有效量的紫杉醇-膽固醇以及藥學上可接受的載體或賦形劑。這類載體包括(但并不限于)脂質(zhì)體(liposome)、脂肪微乳(emulsion)、脂質(zhì)納米粒(lipidnanoparticles，LNs)等。
在優(yōu)選的方案中，適合的載體是脂質(zhì)納米粒，包含磷脂和脂肪，如甘油酯和/或膽固醇酯，磷脂形成的親水層位于顆粒表面，甘油酯和/或膽固醇酯形成的“油芯”包裹其中，紫杉醇-膽固醇溶于顆粒內(nèi)部“油芯”中。所述磷脂可以是DSPC(二硬脂酰磷脂酰膽堿(Distearoylphosphatidylcholine))、EPC(蛋黃卵磷脂(Egg phospholipids))、DPPC(二棕櫚酸酰磷脂酰膽堿(Dipalmitoylphosphatidylcholine))、DPPG(二棕櫚酸酰磷脂酰甘油(Dipalmitoylphosphosphatidylglycine))、HSPC(氫化大豆卵磷脂(HydrogenatedSoybean Phosphatidylcholine))、磷脂酰甘油(Phosphatidyl Glycerol)中的一種或其組合；所述的脂肪是三油酸甘油三酯、亞油酸甘油酯等不飽和脂肪，或者棕櫚酸甘油酯，硬脂酸甘油酯等飽和脂肪，優(yōu)選三油酸甘油酯；所述膽固醇酯可以是油酸、亞油酸、棕櫚酸、硬脂酸和膽固醇形成的酯，優(yōu)選膽固醇油酸酯。
在進一步優(yōu)選的方案中，脂質(zhì)納米粒載體還包括聚乙二醇(PEG)修飾的脂類分子，脂類分子鑲嵌于顆粒表面的親水層，PEG部分位于周圍的水相環(huán)境，形成一種長效的脂質(zhì)納米粒，在體內(nèi)避免網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的清除，延長藥物半衰期。所述的PEG修飾的脂類分子可以是PEG-Chol(聚乙二醇-膽固醇)、PEG-DSPE(聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(polyethyleneglycol-distearoylphosphatidylethanolamine))中的一種或其組合。
在更優(yōu)選的方案中，脂質(zhì)納米粒載體還包括“靶向分子錨點”，靶向分子通過交聯(lián)基團與脂類分子連接，脂類分子錨定在脂質(zhì)納米粒表面的親水層，交聯(lián)基團及其末端的靶向分子進入周圍水相環(huán)境，靶向分子可以將脂質(zhì)納米粒導向特定的靶組織或靶細胞。所說的靶向分子錨點可以是F-PEG-Chol(葉酸-聚乙二醇-膽固醇)，F(xiàn)-PEG-DSPE(葉酸-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)或其類似物。
在優(yōu)選的方案中，脂質(zhì)納米粒載體的組分和份數(shù)(摩爾份)為磷脂 20-50份甘油酯 20-50份膽固醇酯 10-30份PEG-Chol 0.5-5份F-PEG-Chol 0-1份其中，該PEG-Chol和葉酸-PEG-膽固醇根據(jù)文獻自行合成(Ishiwata，H；Sato，SB；Kobayashi，S；Chemical and pharmaceutical bulletin.vol.46，no.12(1998 Dec)1907-13)PEG-Chol采用mPEG與氯甲酸膽固醇脂合成，結構通式為
其中n＝20～250；mPEG的分子量為1000～10000，更佳的mPEG的分子量為2000～5000。
F-PEG-Chol合成方法為葉酸先用N-羥基琥珀酰亞胺活化，得葉酸衍生物N-羥基琥珀酰亞胺-葉酸(NHS-Folate)，再與二氨基聚乙二醇反應，分離得到葉酸-聚乙二醇單氨，與氯甲酸膽固醇脂反應，得到最終產(chǎn)物葉酸-聚乙二醇-膽固醇。其結構通式為 n＝20～250；二氨基聚乙二醇的分子量為1000～10000，更佳的分子量為2000～5000。
該脂質(zhì)納米粒通過如下方法制備輔料分子如DSPC、三油酸甘油酯、膽固醇油酸酯、PEG-膽固醇等溶解在有機溶劑中，混合，隨后蒸發(fā)去除溶劑形成的脂類混合物；以乙醇和叔丁醇的混合溶劑溶解脂類混合物；加入紫杉醇-膽固醇的叔丁醇溶液，該紫杉醇衍生物與脂質(zhì)納米粒的質(zhì)量比為1∶15-25；藥物輔料混合溶液注入生理鹽水，形成混懸液；透濾濃縮，得到脂質(zhì)納米粒。
本發(fā)明的主要優(yōu)點在于本發(fā)明的紫杉醇衍生物——紫杉醇-膽固醇與紫杉醇相比，更容易以親脂狀態(tài)分散到脂質(zhì)載體組分中，形成穩(wěn)定的納米粒，可以有更高的藥物包封率。Tax-Chol在脂質(zhì)納米粒中的包封率＞90％，顯著高于紫杉醇在脂質(zhì)納米粒的包封率(＜70％)。
含有紫杉醇-膽固醇的脂質(zhì)納米粒(Tax-Chol LNs)的滲漏率低于紫杉醇脂質(zhì)納米粒、泰素，因而具有更好的穩(wěn)定性。
紫杉醇-膽固醇的脂質(zhì)納米粒具有良好的水分散性，可直接配制于5％葡萄糖溶液中靜脈滴注，注射前不需要過濾，使用更方便。且毒性更小，抗腫瘤效果更好。


圖1幾種紫杉醇制劑的滲漏率曲線圖。
圖2幾種紫杉醇制劑的體內(nèi)抗腫瘤活性曲線圖。
圖3不同處理后荷瘤小鼠的生存率曲線圖。
具體實施例方式
下面以實施例更具體、詳細地來說明本發(fā)明。其中，紫杉醇購自美國漢德技術公司(HandeTech)，DSPC、PEG-DSPE、卵磷脂購買于麗寶宜(Lipoid)公司，三油酸甘油酯、膽固醇油酸酯、氯甲酸膽固醇脂購買于Sigma，PEG-Chol和葉酸-PEG-膽固醇根據(jù)上述文獻自行合成。
試驗用的紫杉醇常規(guī)制劑是市售美國施貴寶(BMS)公司生產(chǎn)的泰素(Taxol)，紫杉醇溶于聚氧乙基代蓖麻油(Cremophor EL)和乙醇(1∶1)的混合溶劑。
實施例1紫杉醇-膽固醇(Tax-Chol)的合成配制5毫升含1.5摩爾/升氯甲酸膽固醇脂酯的氯仿溶液，與10毫升N，N-二異丙基乙胺，5毫升乙腈混合均勻。將100毫克紫杉醇在室溫下溶解在裝有上述20毫升混合溶液的圓底燒瓶中，并密封。此混合溶液室溫下以磁力攪拌100RPM攪拌過夜。次日將該反應液轉(zhuǎn)移入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，40℃水浴減壓蒸發(fā)去除溶劑，共1小時，得107毫克類白色干燥固體物。該類白色混合固體物以20毫升乙酸乙酯/己烷(3∶1，體積比)溶解，然后轉(zhuǎn)移入分液漏斗，以100毫升去離子水洗滌兩次。有機相以旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓干燥2小時，獲得95毫克類白色固體物。該類白色固體物再次溶解在9.5毫升氯仿中，上樣于40cm×1.5cm硅膠柱，利用乙酸乙酯/己烷(3∶1，體積比)作為流動相進行洗脫純化，收集Rf值為0.92的組分。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得白色終產(chǎn)物47毫克。該白色化合物進行置于真空干燥器內(nèi)以油泵抽干24小時，終產(chǎn)物置密閉干燥容器內(nèi)保存于-20℃。
鑒定薄層層析乙酸乙酯/己烷(體積比3∶1)作為流動相，當紫杉醇的Rf＝0.4，Tox-Chol Rf＝0.92。
質(zhì)譜分析Micromass Q-TOFTMII陽離子加鈉峰，產(chǎn)率為70％，按照C75H95NO16Na計算分子量為1288.6549，實際測量結果是1288.6581。
HPLC分析C18柱，檢測波長229nm，甲醇和水(體積比80∶20)作為流動相，流速0.8ml/min，當紫杉醇保留時間為7.5分鐘時，Tax-Chol保留時間為為6分鐘。
實施例2F-PEG-Chol的合成A.NHS-F的合成將500mg葉酸與1.1mol過量N-羥基丁二酰亞胺(NHS)一同溶于10ml二甲亞砜(DMSO)然后加入1.1mol過量二環(huán)己基碳二亞胺。然后將反應混合物在室溫、暗處攪拌過夜。用羊毛脂過濾除去不溶性副產(chǎn)物二環(huán)己脲。
將含有的NHS-葉酸DMSO濾液9.8ml保存于-20℃?zhèn)溆谩?br> B.葉酸-聚乙二醇-胺的合成將500mg重均分子量3350的二氨基聚乙二醇溶于2ml DMSO中。加至1.4ml前面合成的葉酸-NHS中。反應混合物在室溫下、暗處保溫過夜。
用去離子水平衡好的Sephadex G-25凝膠柱將DMSO和小分子副產(chǎn)物從混合物中去除。將含有少量葉酸-聚乙二醇-葉酸和二氨基聚乙二醇的二氨基聚乙二醇上樣至DEAE-trisacryl陰離子交換樹脂，用NH4HCO3進行梯度洗脫。葉酸-聚乙二醇-胺在大約20mM的NH4HCO3被洗脫。產(chǎn)品冷凍干燥，獲得420mg，保存于-20℃。
C.F-PEG-Chol的合成將0.17mmol的過量氯甲酸膽固醇脂加入F-PEG-胺氯仿溶液，室溫下反應過夜，用茚三酮分析跟蹤游離氨基消失，監(jiān)測反應真空干燥F-PEG-Chol產(chǎn)物，用醚洗滌兩次去除殘留氯甲酸膽固醇脂，得到430mg產(chǎn)物。合成的工藝路線如下 D.含量、純度檢測1.用硅膠薄層層析分析葉酸-聚乙二醇-膽固醇純度，溶劑系統(tǒng)為加有痕量乙酸的二氯乙烷/甲醇((7/3，v/v)。
2.用363nm的紫外消光測定葉酸含量測定F-PEG-Chol濃度(摩爾消光系數(shù)6500)。
3.用茚三酮分析法檢測伯胺本次制備的F-PEG-Chol純度為83％。
實施例3Tax-Chol非靶向脂質(zhì)納米粒的制備將實施例1所得紫杉醇-膽固醇溶解在叔丁醇中(1mg/ml)，DSPC，三油酸甘油酯，膽固醇油酸酯和PEG-膽固醇分別溶解在氯仿中(100mg/mL)，保存于-20℃。取出后等待溶液升至室溫，取3.76毫升(376毫克，40摩爾份)DSPC溶液，4.27毫升(427毫克，40摩爾份)三油酸甘油酯溶液，1.41毫升(141毫克，18摩爾份)膽固醇油酸酯溶液，0.58毫升(58毫克，2.5摩爾份)PEG-膽固醇溶液，在圓底燒瓶中混勻，然后此混合液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓蒸發(fā)去除溶劑氯仿。形成的脂類混合物以100毫升(50/50毫升)乙醇和叔丁醇的混合溶劑溶解，成含脂類輔料10mg/ml的溶液。此后，該100毫升中加入50毫升1mg/ml紫杉醇-膽固醇的叔丁醇溶液中，攪拌均勻。1.5升0.9％生理鹽水以水浴加熱到40℃，然后以19號針頭將上述150毫升的藥物輔料混合溶液注射到此生理鹽水中，注射稀釋同時1200rpm攪拌，使其形成均一的混懸液。保溫攪拌30分鐘。待冷卻后，以截留分子量為400kD的Spectropor MiniKros中空PES纖維管透濾濃縮此藥液，最終收集輔料總濃度60mg/ml，紫杉醇-膽固醇濃度為3毫克/毫升的納米粒。其粒徑以NICOMPSubmicron粒徑檢測儀檢測為為130nm。藥物包封以Sepharose CL-4B凝膠柱法檢測為93％。
實施例4Tax-Chol葉酸靶向脂質(zhì)納米粒的制備將實施例2制得的F-PEG-Chol溶于氯仿溶液(濃度為10mg/ml)。從中取1.2毫升(12毫克，0.5摩爾份)，與3.76毫升(376毫克，40摩爾份)DSPC溶液，4.27毫升(427毫克，40摩爾份)三油酸甘油酯溶液，1.41毫升(141毫克，18摩爾份)膽固醇油酸酯溶液，0.46毫升(46毫克，2.0％摩爾份)PEG-膽固醇溶液，在圓底燒瓶中混勻。然后此混合液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓蒸發(fā)去除溶劑氯仿。按實施例4的方法制備紫杉醇-膽固醇葉酸靶向納米粒，最終收集輔料總濃度60mg/ml，紫杉醇-膽固醇濃度為3毫克/毫升的納米粒。其粒徑以NICOMP Submicron粒徑檢測儀檢測為130nm。藥物包封以Sepharose CL-4B凝膠柱法檢測為93％。
實施例5紫杉醇非靶向脂質(zhì)納米粒的制備紫杉醇溶解在叔丁醇中(1mg/ml)，按實施例4方法制備紫杉醇非靶向納米粒，最終收集輔料總濃度60mg/ml，紫杉醇-膽固醇濃度為2.2毫克/毫升的納米粒。其粒徑以NICOMP Submicron粒徑檢測儀檢測為130nm，藥物包封以Sepharose CL-4B凝膠柱法檢測為68％。
實施例6三種紫杉醇制劑體外釋放比較實施例3、5制備的2種紫杉醇制劑以及泰素，在含4.5％的BSA磷酸鹽緩沖溶液，pH7.4，37℃，Spectra/Por微孔膜，截留分子量為12-14千道爾頓，對生理鹽水透析。上述藥物定溶1毫升體積，藥物濃度3mg/mL。孵育前和藥物釋放的不同時間點做藥物含量定量分析(HPLC)，結果如圖1所示，紫杉醇-膽固醇脂質(zhì)納米粒比紫杉醇脂質(zhì)納米粒和泰素均滲漏少。
實施例7三種紫杉醇制劑的細胞毒作用方法四甲偶氮唑藍(MTT)法細胞株人口腔癌細胞(KB)、鼠肺癌細胞(M109)(前二者取自普度大學化學系)和中國倉鼠細胞卵巢癌(CHO)細胞(取自俄亥俄醫(yī)學院)。其中KB和M109為葉酸受體表達陽性細胞，CHO細胞為葉酸受體表達陰性細胞。
具體操作過程用無葉酸的RPMI 1640培養(yǎng)基，含有青霉素，鏈霉素和10％小牛血清，37□，5％二氧化碳的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。用藥前24小時將細胞接種到96孔板，細胞密度為2×104/每孔，去除培養(yǎng)基后，加入200μl含有不同稀釋濃度的四種不同的紫杉醇制劑，37□，5％二氧化碳的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)約72小時，每孔加20μl MTT溶液，37□培養(yǎng)4小時，去上清，加入200μl含0.1M鹽酸的異丙醇溶液，酶標儀-550(Bio-Rad)，570波長測吸收值。結果見表3。
表1、幾種制劑的細胞毒試驗結果

結果表明Tax-Chol葉酸靶向脂質(zhì)納米粒對葉酸受體表達陽性的KB和M109細胞的細胞毒作用大于葉酸受體表達陰性的CHO細胞；Tax-Chol葉酸靶向脂質(zhì)納米粒與1mM葉酸同時培養(yǎng)時，由于游離葉酸與KB和M109細胞表面的葉酸受體結果，使葉酸靶向納米粒與細胞表面葉酸受體的結合減少，細胞毒作用降低約2倍；Tax-Chol葉酸靶向脂質(zhì)納米粒與非靶向脂質(zhì)納米粒對葉酸受體表達陽性的細胞而言，細胞毒作用要強4.6～5.3倍；
對于葉酸受體表達陰性的CHO細胞，葉酸靶向制劑與非葉酸靶向制劑的細胞毒作用沒有區(qū)別。
實施例8 幾種紫杉醇制劑的體內(nèi)抗腫瘤活性雌性BALB/C小鼠以無葉酸食物喂養(yǎng)2周。M109細胞根據(jù)上述描述的方法培養(yǎng)。皮下接種含2×106個M109細胞的0.2ml細胞懸浮液到BALB/C小鼠左腹腔，待腫瘤長到32mg時，隨機分組，每組5只。分別腹腔注射生理鹽水、泰素(25mg/kg)、無紫杉醇的脂質(zhì)納米粒(賦形劑組)和有靶向或沒有靶向的紫杉醇脂質(zhì)納米粒(劑量為37mg/kg，使紫杉醇的用量保持一致)，每天注射1次，連續(xù)注射4次，檢測腫瘤的體積(長×寬2)/2，當腫瘤長到約1mm3時，用CO2處死小鼠。結果如表2。
表2、泰素、Tax-Chol脂質(zhì)納米粒制劑在M109細胞小鼠模型上的抗腫瘤效果試驗物質(zhì) 劑量腫瘤的平均重量變化細胞mg/kg 時間 T-C 對數(shù)n＝5 天數(shù)08 17 263538 天數(shù) 殺滅生理鹽水 對照 qd×4 033 170 1069 - -- -賦形劑 對照 qd×4 032 155 1154 - -- -泰素 25 qd×4 030 56 1741108 -8 0.7非靶向 37 qd×4 037 31 103811 1558 100.9靶向 37 qd×4 031 24 41 284 576 141.3qd為每天一次；T-C＝腫瘤生長延緩值(治療組(T)和對照組(C)達到預定大小(1000mg)的平均時間)；細胞對數(shù)殺滅值(Log-cell kill)＝(T-C)/(3.32×腫瘤倍增時間)。
結果表明靶向Tax-Chol脂質(zhì)納米粒比非靶向Tax-Chol脂質(zhì)納米粒和泰素能更有效的抑制小鼠腫瘤的生長。在紫杉醇25mg/Kg(泰素)和Tax-Chol37mg/Kg(非靶向、靶向脂質(zhì)納米粒)等價劑量下，三者的細胞對數(shù)殺滅值分別為0.7，0.9和1.3，瘤重達到預定值的時間分別延長到8、10、14天，如圖2所示。荷瘤小鼠的存活時間見圖3。
權利要求
1.一種紫杉醇衍生物，其特征在于，其結構式為在紫杉醇結構的羥基上連接有膽固醇。
2.如權利要求1所述的紫杉醇衍生物，其特征在于，該衍生物用紫杉醇與氯甲酸膽固醇脂為原料直接反應制備而成。
3.如權利要求2所述的紫杉醇衍生物，其特征在于，該衍生物具有下述理化特性薄層層析體積比為3∶1的乙酸乙酯/己烷作為流動相，當紫杉醇的Rf＝0.4，該紫杉醇衍生物Rf＝0.92；質(zhì)譜分析Micromass Q-TOFTMII陽離子加鈉峰，產(chǎn)率為70％，該紫杉醇衍生物測量結果是1288.6581；HPLC分析C18柱，檢測波長229nm，體積比為80∶20的甲醇和水作為流動相，流速0.8ml/min，當紫杉醇保留時間為7.5分鐘時，該紫杉醇衍生物保留時間為6分鐘。
4.如權利要求1所述的紫杉醇衍生物在制備治療和預防腫瘤藥物中的用途。
5.根據(jù)權利要求4所述的用途，其特征在于，該腫瘤包括卵巢癌、乳腺癌、非小細胞肺癌、卡泊氏肉瘤、黑色素瘤、腸癌和白血病。
6.一種藥物組合物，其特征在于，包括如權利要求1所述的紫杉醇衍生物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
7.根據(jù)權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，該藥學上可接受的載體或賦形劑為脂溶性載體或賦形劑。
8.根據(jù)權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于，該脂溶性載體為脂質(zhì)納米粒，其組成為磷脂 20-50份甘油酯 20-50份膽固醇脂 10-30份聚乙二醇-膽固醇 0.5-5份葉酸-聚乙二醇-膽固醇 0-1份以上均為摩爾份數(shù)。
9.根據(jù)權利要求8所述的藥物組合物，其特征在于，該脂質(zhì)納米粒的組成為二硬脂酰磷脂酰膽堿 40份油酸甘油酯 40份膽固醇油酸脂 18份聚乙二醇-膽固醇 2份葉酸-聚乙二醇-膽固醇 0.5份以上均為摩爾份數(shù)。
10.根據(jù)權利要求8或9中所述的藥物組合物，其特征在于，該紫杉醇衍生物與脂質(zhì)納米粒的質(zhì)量比為1∶15-25。
全文摘要
本發(fā)明公開一種紫杉醇衍生物，其結構式為在紫杉醇結構的羥基上連接有膽固醇；其由紫杉醇與氯甲酸膽固醇脂為原料直接反應制備而成。本發(fā)明還公開了以該紫杉醇衍生物為活性成分的藥物組合物，特別是一種脂質(zhì)納米粒制劑；以及本發(fā)明的紫杉醇衍生物及其藥物組合物在制備預防和治療腫瘤藥物中的應用。
文檔編號A61K47/34GK1743337SQ200410054288
公開日2006年3月8日 申請日期2004年9月3日 優(yōu)先權日2004年9月3日
發(fā)明者馬紅, 毛文學 申請人:上海靶點藥物有限公司