一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法，適用于蛋白質(zhì)粉中蛋白質(zhì)的快速檢測。蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒包括如下成分：溶劑、濾紙、緩沖劑、顯色劑、展開劑、標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)甲醇溶液、定量1g蛋白質(zhì)粉勺子、毛細(xì)管、25x15的硅膠板以及有蓋玻璃瓶。本發(fā)明通過丁二酮單肟/氯化鎳的反應(yīng)過濾液與蛋白質(zhì)的顯色反應(yīng)簡單快速的檢測樣品中是否含有蛋白質(zhì)，本發(fā)明提供的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，簡單易操作，速度快，檢測效果明顯、檢出率高，為蛋白質(zhì)檢測提供新的標(biāo)準(zhǔn)。
【專利說明】一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于快速檢測領(lǐng)域，具體涉及一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方 法。

【背景技術(shù)】
[0002] 蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是有機(jī)大分子，是構(gòu)成細(xì)胞的基本有機(jī)物，是生命活 動的主要承擔(dān)者。沒有蛋白質(zhì)就沒有生命。氨基酸是蛋白質(zhì)的基本組成單位。它是與生命 及與各種形式的生命活動緊密聯(lián)系在一起的物質(zhì)。機(jī)體中的每一個細(xì)胞和所有重要組成部 分都有蛋白質(zhì)參與。蛋白質(zhì)占人體重量的16%~20%，即一個60kg重的成年人其體內(nèi)約有蛋 白質(zhì)9. 6~12kg。人體內(nèi)蛋白質(zhì)的種類很多，性質(zhì)、功能各異，但都是由20多種氨基酸（Amino acid)按不同比例組合而成的，并在體內(nèi)不斷進(jìn)行代謝與更新。蛋白質(zhì)是一種復(fù)雜的有機(jī)化 合物，舊稱朊。氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位，氨基酸通過脫水縮合連成肽鏈。蛋白質(zhì)是 由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子，每一條多肽鏈有二十至數(shù)百個氨基酸殘基（-R)不 等；各種氨基酸殘基按一定的順序排列。蛋白質(zhì)的氨基酸序列是由對應(yīng)基因所編碼。除了遺 傳密碼所編碼的20種基本氨基酸，在蛋白質(zhì)中，某些氨基酸殘基還可以被翻譯后修飾而發(fā) 生化學(xué)結(jié)構(gòu)的變化，從而對蛋白質(zhì)進(jìn)行激活或調(diào)控。多個蛋白質(zhì)可以一起，往往是通過結(jié)合 在一起形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)復(fù)合物，折疊或螺旋構(gòu)成一定的空間結(jié)構(gòu)，從而發(fā)揮某一特定功 能。合成多肽的細(xì)胞器是細(xì)胞質(zhì)中糙面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體。蛋白質(zhì)的不同在于其氨基酸 的種類、數(shù)目、排列順序和肽鏈空間結(jié)構(gòu)的不同。蛋白質(zhì)缺乏在成人和兒童中都有發(fā)生，但 處于生長階段的兒童更為敏感。蛋白質(zhì)的缺乏常見癥狀是代謝率下降，對疾病抵抗力減退， 易患病，遠(yuǎn)期效果是器官的損害，常見的是兒童的生長發(fā)育遲緩、營養(yǎng)不良、體質(zhì)量下降、淡 漠、易激怒、貧血以及干瘦病或水腫，并因為易感染而繼發(fā)疾病。蛋白質(zhì)的缺乏，往往又與能 量的缺乏共同存在即蛋白質(zhì)一熱能營養(yǎng)不良，分為兩種，一種指熱能攝入基本滿足而蛋白 質(zhì)嚴(yán)重不足的營養(yǎng)性疾病，稱加西卡病。另一種即為"消瘦"，指蛋白質(zhì)和熱能攝入均嚴(yán)重不 足的營養(yǎng)性疾病。蛋白質(zhì)是人體不可缺少的物質(zhì)，然而今年來許多不法商販制造假蛋白來 蒙混消費者已獲取高額利潤。
[0003]目前，傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)檢測法主要有凱氏定氮法、考馬斯亮蘭法（Bradford法)、 Folin-酚試劑法、雙縮脲法等好幾種，然而已知的蛋白質(zhì)檢測方法又各有其缺陷。凱氏定 氮法用于標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)含量的準(zhǔn)確測定費時太長；雙縮脲法用于快速測定但不太靈敏；不同 蛋白質(zhì)顯色相似；Folin-酚試劑法耗費時間長，操作要嚴(yán)格計時，顏色深淺隨不同蛋白質(zhì) 變化，標(biāo)準(zhǔn)曲線不是嚴(yán)格的直線形式，且專一性差；考馬斯亮蘭法混合蛋白定量困難。因此， 尋找一種能快速簡單且經(jīng)濟(jì)實用的蛋白質(zhì)檢測試劑已經(jīng)刻不容緩了。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于為了克服以上現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種經(jīng)濟(jì)實用，檢測效果 準(zhǔn)確的測定蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法。
[0005] 技術(shù)方案：本發(fā)明公開了一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，包括如下成分：溶劑、濾 紙、緩沖劑、顯色劑、展開劑、標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)甲醇溶液、定量lg蛋白質(zhì)粉勺子、毛細(xì)管、25x15的 娃膠板以及有蓋玻璃瓶。
[0006] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，溶劑為乙醇。
[0007] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，緩沖劑為50~200mmol/L的磷酸鹽溶液。
[0008] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，顯色劑為丁二酮單肟/氯化鎳的反應(yīng)過濾 液。
[0009] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，顯色劑為l.Og丁二酮單肟溶于 30mL50~80°C水中，加0. 8g氯化鎳，冷卻后加2mL濃氨水，攪拌5分鐘后加200mL0. 5g/mL的 鹽酸羥胺溶液，攪拌12~24小時過濾的濾液。
[0010] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，展開劑為體積比為1 :1〇 :50的甲醇、乙酸 乙酯和苯的混合液。
[0011] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)甲醇溶液濃度為0. 2~1. 5mol/ L〇
[0012] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lg待測蛋白質(zhì)粉樣品，加入5-10mL溶劑溶解，加熱攪拌2-3分鐘后通過濾 紙過濾； 步驟二，向步驟一中所述的濾液加入1-2滴緩沖劑后滴加3-5滴顯色劑，攪拌3-5分鐘 后通過薄層層析法檢測； 步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細(xì)管取步驟二中所述的反應(yīng)液，點樣于硅 膠板上，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸 至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現(xiàn)象； 步驟四，步驟三中所述的觀察現(xiàn)象為若硅膠板上反應(yīng)液的點與對比樣的點處于相同高 度且反應(yīng)液的點顯紅褐色則樣品中含有大量蛋白質(zhì)；相反則不含有蛋白質(zhì)或少量蛋白質(zhì)。
[0013] 有益效果：本發(fā)明通過丁二酮單肟/氯化鎳的反應(yīng)過濾液與蛋白質(zhì)的顯色反應(yīng)簡 單快速的檢測樣品中是否含有蛋白質(zhì)，本發(fā)明提供的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，簡單易操 作，速度快，檢測效果明顯、檢出率高，為蛋白質(zhì)檢測提供新的標(biāo)準(zhǔn)。

【具體實施方式】
[0014] 實施例1 一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，包括如下成分：乙醇、濾紙、50mmol/L的磷酸鹽溶液、 顯色劑、展開劑(體積比為1 :1〇 :50的甲醇、乙酸乙酯和苯的混合液)、定量lg蛋白質(zhì)粉勺 子、1. 5mol/L的蛋白質(zhì)甲醇溶液、毛細(xì)管、25x15的硅膠板以及有蓋玻璃瓶。
[0015] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lg待測蛋白質(zhì)粉樣品，加入5mL乙醇溶解，加熱攪拌3分鐘后通過濾紙過 濾； 步驟二，向步驟一中所述的濾液加入2滴磷酸鹽溶液后滴加5滴顯色劑，攪拌3分鐘后 通過薄層層析法檢測； 步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細(xì)管取步驟二中所述的反應(yīng)液，點樣于硅 膠板上，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸 至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現(xiàn)象； 步驟四，步驟三中所述的現(xiàn)象為硅膠板上反應(yīng)液的點與對比樣的點處于相同高度且反 應(yīng)液的點顯紫紅色則樣品中含有大量蛋白質(zhì)。
[0016] 實施例2 一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及，包括如下成分：乙醇、濾紙、200mmol/L的磷酸鹽溶 液、顯色劑、展開劑(體積比為1 :1〇 :50的甲醇、乙酸乙酯和苯的混合液)、定量lg蛋白質(zhì)粉 勺子、0. 2mol/L的蛋白質(zhì)甲醇溶液、毛細(xì)管、25x15的硅膠板以及有蓋玻璃瓶。
[0017] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lg待測蛋白質(zhì)粉樣品，加入10mL乙醇溶解，加熱攪拌3分鐘后通過濾紙過 濾； 步驟二，向步驟一中所述的濾液加入1滴磷酸鹽溶液后滴加5滴顯色劑，攪拌5分鐘后 通過薄層層析法檢測； 步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細(xì)管取步驟二中所述的反應(yīng)液，點樣于硅 膠板上，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸 至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現(xiàn)象； 步驟四，步驟三中所述的現(xiàn)象為硅膠板上反應(yīng)液的點與對比樣的點不處于相同高度則 不含有或含有少量蛋白質(zhì)。
[0018] 實施例3 一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，包括如下成分：甲醇、濾紙、150mmol/L的磷酸鹽溶液、 顯色劑、展開劑(體積比為1 :1〇 :50的甲醇、乙酸乙酯和苯的混合液)、定量lg蛋白質(zhì)粉勺 子、1.Omol/L的蛋白質(zhì)甲醇溶液、毛細(xì)管、25x15的硅膠板以及有蓋玻璃瓶。
[0019] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lg待測蛋白質(zhì)粉樣品，加入8mL乙醇溶解，加熱攪拌3分鐘后通過濾紙過 濾； 步驟二，向步驟一中所述的濾液加入2滴磷酸鹽溶液后滴加4滴顯色劑，攪拌4分鐘后 通過薄層層析法檢測； 步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細(xì)管取步驟二中所述的反應(yīng)液，點樣于硅 膠板上，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸 至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現(xiàn)象； 步驟四，步驟三中所述的現(xiàn)象為硅膠板上反應(yīng)液的點與對比樣的點處于相同高度且反 應(yīng)液的點顯淡紅色則樣品中含有少量蛋白質(zhì)。
[0020] 實施例4 一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，包括如下成分：甲醇、濾紙、160mmol/L的磷酸鹽溶液、 顯色劑、展開劑(體積比為1 :1〇 :50的甲醇、乙酸乙酯和苯的混合液)、定量lg蛋白質(zhì)粉勺 子、0. 6mol/L的蛋白質(zhì)甲醇溶液、毛細(xì)管、25x15的硅膠板以及有蓋玻璃瓶。
[0021] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lg待測蛋白質(zhì)粉樣品，加入9mL乙醇溶解，加熱攪3分鐘后通過濾紙過濾； 步驟二，向步驟一中所述的濾液加入1滴磷酸鹽溶液后滴加5滴顯色劑，攪拌5分鐘后 通過薄層層析法檢測； 步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細(xì)管取步驟二中所述的反應(yīng)液，點樣于硅 膠板上，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸 至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現(xiàn)象； 步驟四，步驟三中所述的現(xiàn)象為硅膠板上反應(yīng)液的點與對比樣的點處于相同高度且反 應(yīng)液的點顯深紅色則樣品中含有大量蛋白質(zhì)。
[0022] 實施例5 一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，包括如下成分：甲醇、濾紙、200mmol/L的磷酸鹽溶液、 顯色劑、展開劑(體積比為1 :1〇 :50的甲醇、乙酸乙酯和苯的混合液)、定量lg蛋白質(zhì)粉勺 子、1. 3mol/L的蛋白質(zhì)甲醇溶液、毛細(xì)管、25x15的硅膠板以及有蓋玻璃瓶。
[0023] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lg待測蛋白質(zhì)粉樣品，加入6mL乙醇溶解，加熱攪拌2分鐘后通過濾紙過 濾； 步驟二，向步驟一中所述的濾液加入1滴磷酸鹽溶液后滴加4滴顯色劑，攪拌3分鐘后 通過薄層層析法檢測； 步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細(xì)管取步驟二中所述的反應(yīng)液，點樣于硅 膠板上，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸 至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現(xiàn)象； 步驟四，步驟三中所述的現(xiàn)象為硅膠板上反應(yīng)液的點與對比樣的點處于相同高度且反 應(yīng)液的點顯紅黑色則樣品中含有大量蛋白質(zhì)。
[0024] 實施例6 一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，包括如下成分：乙醇、濾紙、75mmol/L的磷酸鹽溶液、 顯色劑、展開劑(體積比為1 :1〇 :50的甲醇、乙酸乙酯和苯的混合液)、定量lg蛋白質(zhì)粉勺 子、0. 3mol/L的蛋白質(zhì)甲醇溶液、毛細(xì)管、25x15的硅膠板以及有蓋玻璃瓶。
[0025] 以上所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒及其使用方法的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lg待測蛋白質(zhì)粉樣品，加入5mL乙醇溶解，加熱攪拌3分鐘后通過濾紙過 濾； 步驟二，向步驟一中所述的濾液加入2滴磷酸鹽溶液后滴加3滴顯色劑，攪拌5分鐘后 通過薄層層析法檢測； 步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細(xì)管取步驟二中所述的反應(yīng)液，點樣于硅 膠板上，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸 至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現(xiàn)象； 步驟四，步驟三中所述的現(xiàn)象為硅膠板上反應(yīng)液的點與對比樣的點不處于相同高度且 反應(yīng)液的點顯淡紅色則樣品中不含有或少量蛋白質(zhì)。
[0026] 以上實施例1-6所檢測的為隨機(jī)于蘇州各大中小超市、商店購買的不同品牌的 蛋白質(zhì)粉，將檢測的蛋白質(zhì)粉送交正規(guī)檢測機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測，對比結(jié)果見表1 : 表1實施例1-6的檢測結(jié)果與正規(guī)檢測機(jī)構(gòu)檢測結(jié)果比較

【權(quán)利要求】
1. 一種蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，其特征在于，包括如下成分：溶齊IJ、濾紙、緩沖齊IJ、顯 色劑、展開劑、標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)甲醇溶液、定量lg蛋白質(zhì)粉勺子、毛細(xì)管、25x15的硅膠板以及有 蓋玻璃瓶。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，其特征在于，溶劑為乙醇。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，其特征在于，緩沖劑為 50~200mmol/L的磷酸鹽溶液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，其特征在于，顯色劑為丁二酮單 肟/氯化鎳的反應(yīng)過濾液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，其特征在于，顯色劑為l.Og 丁 二酮單肟溶于30mL50~80°C水中，加 0. 8g氯化鎳，冷卻后加 2mL濃氨水，攪拌5分鐘后加 200mL0. 5g/mL的鹽酸羥胺溶液，攪拌12~24小時過濾的濾液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，其特征在于，展開劑為體積比為 1 :10 :50的甲醇、乙酸乙酯和苯的混合液。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒，其特征在于，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)甲醇溶 液濃度為 〇? 2~1. 5mol/L。
8. -種權(quán)利要求1-7任一項所述的蛋白質(zhì)的快速檢測試劑盒的使用方法，包括如下步 驟： 步驟一，取lg待測蛋白質(zhì)粉樣品，加入5-10mL溶劑溶解，加熱攪拌2-3分鐘后通過濾 紙過濾； 步驟二，向步驟一中所述的濾液加入1-2滴緩沖劑后滴加3-5滴顯色劑，攪拌3-5分鐘 后通過薄層層析法檢測； 步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細(xì)管取步驟二中所述的反應(yīng)液，點樣于硅 膠板上，標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸 至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現(xiàn)象； 步驟四，步驟三中所述的觀察現(xiàn)象為若硅膠板上反應(yīng)液的點與對比樣的點處于相同高 度且反應(yīng)液的點顯紅褐色則樣品中含有大量蛋白質(zhì)；相反則不含有蛋白質(zhì)或少量蛋白質(zhì)。
【文檔編號】G01N30/90GK104459008SQ201410742078
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月9日
【發(fā)明者】熊開勝, 張海防, 謝建庭 申請人:蘇州東辰林達(dá)檢測技術(shù)有限公司