一種無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種體外診斷類醫(yī)療器械，尤其涉及一種無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條。
【背景技術(shù)】
[0002]無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)亦稱為13組鏈球菌，為兼性厭氧革蘭氏陽(yáng)性的鏈狀球菌，在自然界廣泛存在，是人類的重要病原之一，也是魚(yú)類的重要病原菌。無(wú)乳鏈球菌所引起的水產(chǎn)動(dòng)物疾病通常在26°C以上水溫發(fā)生，對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物感染性很強(qiáng)，可引起羅非魚(yú)、虹鱒、海鯉和鯔魚(yú)等魚(yú)類敗血癥和腦膜炎，具有較高的致病率和致死率。近年來(lái)，由無(wú)乳鏈球菌引起的羅非魚(yú)爆發(fā)性疾病時(shí)有發(fā)生，且爆發(fā)范圍廣，死亡率極高，常造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，危害著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。
[0003]目前，無(wú)乳鏈球菌的檢測(cè)方法常見(jiàn)的是傳統(tǒng)微生物學(xué)方法，采用微生物學(xué)分離、培養(yǎng)和生化試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定，但這種方法操作繁瑣，微生物培養(yǎng)周期長(zhǎng)，檢測(cè)周期長(zhǎng)，且易發(fā)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了克服現(xiàn)有的無(wú)乳鏈球菌操作繁瑣，專業(yè)技術(shù)要求高，成本高、耗時(shí)長(zhǎng)的不足，本發(fā)明提供了一種新型無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，該試劑操作簡(jiǎn)單，普通人員閱讀說(shuō)明書(shū)后即可完成操作;不需要匹配專業(yè)的儀器設(shè)備;耗時(shí)短，20分鐘內(nèi)可完成檢測(cè);特異性強(qiáng)，僅特異性針對(duì)無(wú)乳鏈球菌，與海豚鏈球菌、嗜水氣單胞菌、大腸桿菌等無(wú)交叉反應(yīng)，可檢測(cè)的最低濃度為100 ng/ml。其檢測(cè)特異性和靈敏度均高于傳統(tǒng)微生物鑒別方法，結(jié)果準(zhǔn)確。
[0005]為解決上述缺陷本實(shí)用新型提供的技術(shù)方案是:
[0006]—種無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，包括塑料基板、吸收墊、硝酸纖維素膜、膠體金墊和樣本墊各層狀結(jié)構(gòu)，所述吸收墊固定在塑料基板的上端部，硝酸纖維素膜固定在吸收墊的下部、塑料基板的中間部分，其特征在于:所述樣本墊包括樣本墊M2、M3兩層結(jié)構(gòu);膠體金墊固定在塑料基板的下端部、硝酸纖維素膜下部，與硝酸纖維素膜緊靠但不重疊;樣本墊M2位于膠體金墊外層中下部，下端部長(zhǎng)于膠體金墊，樣本墊M3位于樣本墊M2的外層;箭頭指示膠下端黏附于樣本墊M3外層、并且一直到達(dá)塑料基板的最下端，上端黏附于硝酸纖維素膜的下端;在硝酸纖維素膜上設(shè)有質(zhì)控C線、檢測(cè)T線，所述硝酸纖維素膜包被抗特異性無(wú)乳鏈球菌抗體。
[0007]本實(shí)用新型提供的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條樣本墊為兩層，提高了試劑條的層析速度，縮短反應(yīng)時(shí)間。
[0008]進(jìn)一步的，本實(shí)用新型提供的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:樣本墊M2下端長(zhǎng)于膠體金墊但略短于塑料基板下端;樣本墊M3上端距離膠體金墊上端0.5-1 cm、下端與塑料基板下端平齊。
[0009]進(jìn)一步的，為了增強(qiáng)纖維素膜的性能，本實(shí)用新型提供的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，所述硝酸纖維素膜為高蛋白親和性的高分子纖維素膜。
[0010]進(jìn)一步的，為了增強(qiáng)膠體金墊的吸附能力，本實(shí)用新型提供的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，所述膠體金墊為無(wú)紡布。
[0011]進(jìn)一步的，為了增強(qiáng)樣本墊的吸水能力，本實(shí)用新型提供的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:所述樣本墊為無(wú)紡布或玻璃纖維。
[0012]進(jìn)一步的，為了增強(qiáng)吸收墊的吸收剩余樣本的能力，本實(shí)用新型提供的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:所述吸收墊為高吸水性吸水紙。
[0013]進(jìn)一步的，為了將本申請(qǐng)?jiān)噭l的各層狀結(jié)構(gòu)固定牢固，本實(shí)用新型提供的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，所述塑料基板、吸收墊、硝酸纖維素膜、膠體金墊和樣本墊M2、M3各層狀結(jié)構(gòu)之間通過(guò)雙面膠帶固定。
[0014]本申請(qǐng)無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條由以下結(jié)構(gòu)部分組成:
[0015]硝酸纖維素膜:高蛋白親和性的高分子纖維素膜，經(jīng)預(yù)處理后包被抗特異性無(wú)乳鏈球菌抗體，制備為反應(yīng)膜用來(lái)作為系統(tǒng)反應(yīng)的載體和顯示反應(yīng)結(jié)果。
[0016]M2，M3:樣本墊，選用有較強(qiáng)吸水能力的玻璃纖維、無(wú)紡布，經(jīng)特殊處理后，為反應(yīng)系統(tǒng)提供適合的反應(yīng)條件，并幫助吸取樣本。
[0017]膠體金墊:吸附力較強(qiáng)的無(wú)紡布，為膠體金標(biāo)記抗特異性無(wú)乳鏈球菌抗體的固相載體。
[0018]吸收墊:吸收檢測(cè)后的樣本。
[0019]塑料基板:作為反應(yīng)體系的支撐物。
[0020]雙面膠帶:用于固定各反應(yīng)膜和吸水材料于塑料基板上。
[0021 ]箭頭指示膠:固定和保護(hù)樣本墊和膠體金墊，指示試劑條浸入液面的最高位置，防止試劑條因浸入液面過(guò)高引起失效。
[0022]本實(shí)用新型通過(guò)將抗體噴于膠體金墊6上，包被于硝酸纖維素膜8上，通過(guò)增加樣本墊層數(shù)，由傳統(tǒng)的I層加厚為樣本墊M2、M3兩層，提高了樣本的爬行速度和反應(yīng)時(shí)間。
[0023]本實(shí)用新型的有益效果是，可將無(wú)乳鏈球菌檢測(cè)反應(yīng)時(shí)間控制在20min內(nèi)結(jié)束，該試劑操作簡(jiǎn)單，普通人員閱讀說(shuō)明書(shū)后即可完成操作；不需要匹配專業(yè)的儀器設(shè)備;耗時(shí)短，20分鐘內(nèi)可完成檢測(cè);特異性強(qiáng)，僅特異性針對(duì)無(wú)乳鏈球菌，與海豚鏈球菌、嗜水氣單胞菌、大腸桿菌等無(wú)交叉反應(yīng)，可檢測(cè)的最低濃度為100 ng/ml。其檢測(cè)特異性和靈敏度均高于傳統(tǒng)微生物鑒別方法，結(jié)果準(zhǔn)確。
【附圖說(shuō)明】
[0024]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)一步說(shuō)明:
[0025]圖1是本實(shí)用新型無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條示意圖
[0026]圖中標(biāo)記為:1.質(zhì)控C線，2.檢測(cè)T線，3.塑料基板，4.樣本墊M2，5.樣本墊M3，6.膠體金墊，7.箭頭指示膠，8.硝酸纖維素膜，9.吸收墊。
【具體實(shí)施方式】
[0027]如圖1所示，本實(shí)用新型包括塑料基板3、吸收墊9、硝酸纖維素膜8、膠體金墊6和樣本墊4、5的層狀結(jié)構(gòu)，各結(jié)構(gòu)由上到下，由左到右的具體裝配如下所述:
[0028]所述吸收墊9通過(guò)雙面膠帶固定在塑料基板3的上端部，硝酸纖維素膜8通過(guò)雙面膠帶固定在吸收墊9的下部、塑料基板3的中間部分。
[0029]樣本墊包括樣本墊M2 4、樣本墊M3 5兩層結(jié)構(gòu)，可以提高樣本的爬行速度和反應(yīng)時(shí)間。
[0030]膠體金墊6通過(guò)雙面膠帶固定在塑料基板3的下端部、硝酸纖維素膜8下部，膠體金墊6緊靠硝酸纖維素膜的下部但不重疊。
[0031]樣本墊M2 4位于膠體金墊6外層中下部。樣本墊M2 4下端長(zhǎng)于膠體金墊但略短于塑料基板下端；
[0032]樣本墊M3 5位于樣本墊M2 4的外層，樣本墊M3 5下端與塑料基板下端平齊、上端距離膠體金墊上端0.5-lcm。
[0033]箭頭指示膠7的下部黏附于樣本墊M35的外層、一直到塑料基板的下端，上部黏附于硝酸纖維素膜8的下端部，箭頭指示膠7用于將硝酸纖維素膜8與樣本墊M3 5、膠體金墊6固定住。
[0034]在硝酸纖維素膜8上設(shè)有質(zhì)控C線1、檢測(cè)T線2，便于觀察判定檢測(cè)結(jié)果。
[0035]使用時(shí)，將試劑條放入相應(yīng)的塑料卡的固定卡槽中固定，試劑條的樣本墊區(qū)域?qū)?yīng)加樣孔位置，試劑條質(zhì)控C線1、檢測(cè)T線2區(qū)域?qū)?yīng)觀察窗口位置，將樣本滴入加樣孔中，在毛細(xì)管作用下，向上層析，經(jīng)過(guò)樣本墊M2 4、樣本墊M3 5兩層樣本墊。
[0036]優(yōu)選的，樣本墊采用無(wú)紡布或玻璃纖維材料，層析速度提升，靈敏度高。
[0037]樣本中的特異性檢測(cè)目標(biāo)物與膠體金墊6中的金顆粒-特異性抗體復(fù)合物結(jié)合，形成金顆粒-抗體-特異性檢測(cè)目標(biāo)物復(fù)合物。
[0038]為了增強(qiáng)膠體金墊6的吸附能力，膠體金墊6材料優(yōu)選采用吸附力較強(qiáng)的無(wú)紡布。
[0039]樣本繼續(xù)向上層析，通過(guò)箭頭指示膠7，與預(yù)先包被在硝酸纖維素膜8上的抗無(wú)乳鏈球菌特異性抗體結(jié)合，形成金顆粒-抗體-無(wú)乳鏈球菌抗原-抗體復(fù)合物，金顆粒聚集在硝酸纖維素膜8膜檢測(cè)區(qū)，形成檢測(cè)T線2，繼續(xù)向上層析，與預(yù)先包被在硝酸纖維素膜8上的多抗體結(jié)合，形成質(zhì)控C線1，在配合使用的塑料卡的觀察窗口中通過(guò)觀察質(zhì)控C線1、檢測(cè)T線2顯色，來(lái)判定檢測(cè)結(jié)果。
[0040]剩余樣本繼續(xù)向上層析，被吸收墊9吸收。
[0041]為了增強(qiáng)纖維素膜的性能，硝酸纖維素膜為高蛋白親和性的高分子纖維素膜，經(jīng)預(yù)處理后包被抗特異性無(wú)乳鏈球菌抗體，制備為反應(yīng)膜用來(lái)作為系統(tǒng)反應(yīng)的載體和顯示反應(yīng)結(jié)果。
[0042]為了增強(qiáng)吸收墊的吸收剩余樣本的能力，吸收墊9材料優(yōu)選采用高吸水性吸水紙材料。
[0043]以上所述實(shí)施例，對(duì)本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案和有益效果進(jìn)行了進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，所應(yīng)理解的是，以上所述僅為本實(shí)用新型的具體實(shí)施例，并不用于限制本實(shí)用新型，凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)，對(duì)本實(shí)用新型的修改或替換，均應(yīng)在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，包括塑料基板(3)、吸收墊(9)、硝酸纖維素膜(8)、膠體金墊(6)和樣本墊各層狀結(jié)構(gòu)，所述吸收墊(9)固定在塑料基板(3)的上端部，硝酸纖維素膜(8)固定在吸收墊(9)的下部、塑料基板(3)的中間部分，其特征在于:所述樣本墊包括樣本墊M2 (4 )、樣本墊M3 (5 )兩層結(jié)構(gòu);膠體金墊(6 )固定在塑料基板(3 )的下端部、硝酸纖維素膜(8)下部，與硝酸纖維素膜(8)緊靠但不重疊;樣本墊M2(4)位于膠體金墊(6)外層中下部，下端部長(zhǎng)于膠體金墊(6);樣本墊M3(5)位于樣本墊M2(4)的外層;箭頭指示膠(7)下端黏附于樣本墊M3(5)外層、并且一直到達(dá)塑料基板的最下端，上端黏附于硝酸纖維素膜(8)的下端;在硝酸纖維素膜(8)上設(shè)有質(zhì)控C線(1)、檢測(cè)T線(2)，所述硝酸纖維素膜(8)包被抗特異性無(wú)乳鏈球菌抗體。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:樣本墊M2(4)下端長(zhǎng)于膠體金墊(6)但略短于塑料基板下端；樣本墊M3(5)上端距離膠體金墊(6)上端0.5-1 cm、下端與塑料基板下端平齊。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:所述硝酸纖維素膜(8)為尚蛋白未和性的尚分子纖維素月旲。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:所述膠體金墊(6)為無(wú)紡布。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:所述樣本墊為無(wú)紡布或玻璃纖維。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:所述吸收墊(9)為高吸水性吸水紙。7.根據(jù)權(quán)利要求1-6其中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，其特征在于:所述塑料基板(3)、吸收墊(9)、硝酸纖維素膜(8)、膠體金墊(6)和樣本墊M2(4)、樣本墊M3(5)各層狀結(jié)構(gòu)之間通過(guò)雙面膠帶固定。
【專利摘要】一種無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條，包括塑料基板、吸收墊、硝酸纖維素膜、膠體金墊和樣本墊各層狀結(jié)構(gòu)，其特征在于：所述樣本墊包括樣本墊M2、M3兩層結(jié)構(gòu)；膠體金墊固定在塑料基板的下端部、硝酸纖維素膜下部，與硝酸纖維素膜緊靠但不重疊；樣本墊M2位于膠體金墊外層中下部，下端部長(zhǎng)于膠體金墊至塑料基板下端，樣本墊M3位于樣本墊M2的外層；箭頭指示膠位于樣本墊M3外層上端部，并黏附于硝酸纖維素膜的下端；在硝酸纖維素膜上設(shè)有質(zhì)控C線、檢測(cè)T線，硝酸纖維素膜包被抗特異性無(wú)乳鏈球菌抗體，本實(shí)用新型提供的無(wú)乳鏈球菌快速檢測(cè)試劑條樣本墊為兩層，提高了試劑條的層析速度，縮短反應(yīng)時(shí)間。
【IPC分類】G01N33/569
【公開(kāi)號(hào)】CN205246670
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201520963423
【發(fā)明人】鄭建, 張君, 劉奇, 黃藝丹
【申請(qǐng)人】濟(jì)南康博生物技術(shù)有限公司
【公開(kāi)日】2016年5月18日
【申請(qǐng)日】2015年11月26日