一種用于快速檢測cyp2j2多態(tài)性的試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，包括盒體和蓋設(shè)在盒體上的第一盒蓋，所述的盒體內(nèi)設(shè)有第二盒腔，在第二盒腔的中心位置還設(shè)置第一盒腔，其中，第一盒腔內(nèi)安裝有內(nèi)置冷卻水的儲水腔，在儲水腔內(nèi)固定設(shè)有至少一個伸入儲水腔冷卻水內(nèi)的低溫筒，所述的低溫筒內(nèi)用于放置低溫保存的試劑管，第二盒腔內(nèi)水平間隔安裝有至少兩塊平行的襯墊，所述的襯墊設(shè)有并排設(shè)置的多個用于放置常溫保存的試劑管的孔槽。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用新型具有結(jié)構(gòu)簡單輕巧，方便攜帶，針對快速檢測CYP2J2多態(tài)性所需試劑設(shè)有兩個不同溫度的儲存盒腔，使得試劑能在各自適宜的溫度下長時間保存。
【專利說明】
一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本實用新型涉及一種試劑盒，尤其是涉及一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑合
ΙΤΓΤ.0
【背景技術(shù)】
[0002]CYP2J2編碼細胞色素氧化酶p450，該酶為具有多態(tài)性的藥物代謝酶，它們是一類主要存在于肝臟、腸道中的單加氧酶，多位于細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，催化多種內(nèi)、外源物質(zhì)的(包括大多數(shù)臨床藥物)代謝。P450酶能通過非共價鍵結(jié)合的血紅素中的鐵離子傳遞電子氧化異源物，增強異源物質(zhì)的水溶性，使它們更易排出體外。CYP有多個亞家族，其中CYP2J2(Cytochrome P450 2J2)是第二亞家族中的一個重要成員，人的CYP2J2首次發(fā)現(xiàn)于1996年，也是目前人體中發(fā)現(xiàn)的惟一一種CYP2JXYP2J2參與花生四烯酸和亞油酸的代謝，花生四烯酸代謝產(chǎn)物是14，15-EET，特別是14(R)，15(S)_EET有優(yōu)先選擇性(約70% )，而亞油酸代謝產(chǎn)物是環(huán)氧化十八烯酸(EpOME)。同時CYP2J2能羥化代謝許多不同性質(zhì)的藥物:人腸道微粒體中的CYP2J2是代謝依巴斯汀的主要羥化酶，CYP2J2代謝的藥物還有阿司咪唑和特非那定等抗組胺藥，及可卡因、維生素D2、馬索羅酚、雙氯芬酸和丁呋洛爾。研究表明，CYP2J2單核普酸多態(tài)性在個體用藥差異中的作用明顯，不同患者之間的用藥劑量可以相差20倍。
[0003]CYP2J2基因多態(tài)性對個體間的差別用藥具有指導意義，但是基因測序技術(shù)尚有其局限性，測序技術(shù)需要昂貴的測序儀器，繁雜的操作流程，從而限制了推廣使用，無法有效廣泛地用于臨床診斷和科研工作。相對于測序技術(shù)，酶切PCR技術(shù)具有高靈敏度、高特異性，操作簡便、快速等特點，因此近年來在臨床檢測分析中被廣泛推廣使用。
[0004]為了能夠準確的檢測白色海綿痣病，通常需要準備多種試劑，包括PCR酶、dNTP、引物、標準品和雙蒸水等約共計10種試劑左右，其中，dNTP、引物等對保存溫度的要求比較低，可以直接置于在室溫下保存，而另外諸如PCR酶和樣品等試劑則為了保證其足夠的生物活性，需要在較低的溫度下保存。但是，目前的試劑盒基本都只能提供一種溫度環(huán)境，對于這種需要不同儲存條件的試劑，不能夠集中保存，給試劑的使用帶來不便，從而不利于CYP2J2基因多態(tài)性的快速準確檢測。
【實用新型內(nèi)容】
[0005]本實用新型的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒。
[0006]本實用新型的目的可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn):
[0007]—種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，包括盒體和蓋設(shè)在盒體上的第一盒蓋，所述的盒體內(nèi)設(shè)有第二盒腔，在第二盒腔的中心位置還設(shè)置第一盒腔，其中，
[0008]第一盒腔內(nèi)安裝有內(nèi)置冷卻水的儲水腔，在儲水腔內(nèi)固定設(shè)有至少一個伸入儲水腔冷卻水內(nèi)的低溫筒，所述的低溫筒內(nèi)用于放置低溫保存的試劑管，
[0009]第二盒腔內(nèi)水平間隔安裝有至少兩塊平行的襯墊，所述的襯墊設(shè)有并排設(shè)置的多個用于放置常溫保存的試劑管的孔槽。
[0010]所述的第一盒腔和第二盒腔的底部和四周側(cè)壁均設(shè)有隔熱板。
[0011]在第一盒腔的頂部還蓋設(shè)有由隔熱材料制成的第二盒蓋。
[0012]所述的儲水腔內(nèi)還設(shè)有水溫傳感器，在盒體內(nèi)還安裝有控制系統(tǒng)和報警器，所述的水溫傳感器和報警器均與控制系統(tǒng)連接。水溫傳感器檢測儲水腔內(nèi)的低溫冷卻水的溫度并反饋信號給控制系統(tǒng)，當其低于設(shè)定值時，控制系統(tǒng)控制報警器報警，然后操作人員可以及時更換儲水腔內(nèi)的冷卻水。
[0013]所述的低溫筒的內(nèi)表面安裝有帶有均勻分布網(wǎng)孔的導熱橡膠層，所述的導熱橡膠層圍繞形成的腔體的內(nèi)徑與試劑管的外徑匹配。導熱橡膠層可以及時傳導熱量，使得低溫筒的外側(cè)與內(nèi)側(cè)的溫度保持一致，從而保證放置低溫保存的試劑管的低溫儲存環(huán)境。
[0014]所述的低溫筒為銅合金筒。
[0015]所述的低溫筒設(shè)有10個，所述的第二盒腔內(nèi)的孔槽設(shè)有10個。
[0016]本實用新型的試劑盒在使用時，通常會包括分別有裝有PCR酶、dNTP的反應(yīng)液A和反應(yīng)液B，四種不同引物，野生標準品，兩種突變標準品，以及雙蒸水總共十種試劑。其中，PCR酶適宜在低溫下保存，置于第一盒腔內(nèi)，另外幾種均可以在常溫下保存，置于第二盒腔內(nèi)。
[0017]野生標準品內(nèi)含位點為野生型的基因；兩個突變標準品分別內(nèi)含有位點只有一個突變的基因:CYP2J2G-50T基因擴增片段長度為373bp，野生型純合子GG基因型無AluI酶切位點，因此只有一條373bp條帶，突變后突變子GT基因型PCR產(chǎn)物部分被酶切形成373bp、274bp、99bp三條帶。G-76T突變形成了一個AluI酶切位點(AGCT)，故酶切產(chǎn)物電泳呈242、143和99bp 3條條帶時，相應(yīng)的基因型是突變子，呈143和99bp 2條條帶時則為突變純合子，而野生型僅見242bp I條條帶。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用新型具有以下優(yōu)點:
[0019](I)試劑盒內(nèi)設(shè)有不同的儲存條件區(qū)域，對于不同試劑采用獨立的試劑管存放，并根據(jù)其保存的溫度條件分開保存，試劑不易受到污染，且保存時間也比較長。
[0020](2)整個試劑盒結(jié)構(gòu)簡單，體積較小，攜帶方便，在進行快速檢測CYP2J2多態(tài)性時，臨床標本取材方便，檢測流程簡單快捷，檢測敏感性高，可直接、快速地判斷檢測結(jié)果。
【附圖說明】
[0021 ]圖1為本實用新型的盒體的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0022]圖2為本實用新型的儲水腔的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0023]圖3為本實用新型的第二盒腔的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0024]圖中，1-盒體，2-第一盒腔，3-第二盒腔，4-隔熱板，5-儲水腔，6_低溫筒，7_襯墊。
【具體實施方式】
[0025]下面結(jié)合附圖和具體實施例對本實用新型進行詳細說明。
[0026]實施例
[0027]—種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其結(jié)構(gòu)參見圖1?圖3，包括盒體I和蓋設(shè)在盒體I上的第一盒蓋，盒體I內(nèi)設(shè)有第二盒腔3，在第二盒腔3的中心位置設(shè)有第一盒腔2，其中，第一盒腔2內(nèi)安裝有內(nèi)置冷卻水的儲水腔5，在儲水腔5內(nèi)固定設(shè)有伸入儲水腔5冷卻水內(nèi)的10個低溫筒6，低溫筒6內(nèi)用于放置適于低溫保存的試劑管，儲水腔5內(nèi)還設(shè)有水溫傳感器，在盒體I內(nèi)還安裝有控制系統(tǒng)和報警器，水溫傳感器和報警器均與報警器連接，低溫筒6的內(nèi)表面安裝有帶有均勻分布網(wǎng)孔的導熱橡膠層，導熱橡膠層圍繞形成的腔體的內(nèi)徑與試劑管的外徑匹配，低溫筒6為銅合金筒。
[0028]第二盒腔3內(nèi)水平間隔安裝有兩塊平行的襯墊7，襯墊7均勻設(shè)置的10個用于放置常溫保存的試劑管的孔槽，第一盒腔2和第二盒腔3的底部和四周側(cè)壁均設(shè)有隔熱板4，在第一盒腔2的頂部還蓋設(shè)有由隔熱材料制成的第二盒蓋。
[0029]上述的對實施例的描述是為便于該技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能理解和使用實用新型。熟悉本領(lǐng)域技術(shù)的人員顯然可以容易地對這些實施例做出各種修改，并把在此說明的一般原理應(yīng)用到其他實施例中而不必經(jīng)過創(chuàng)造性的勞動。因此，本實用新型不限于上述實施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本實用新型的揭示，不脫離本實用新型范疇所做出的改進和修改都應(yīng)該在本實用新型的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，包括盒體和蓋設(shè)在盒體上的第一盒蓋，所述的盒體內(nèi)設(shè)有第二盒腔，在第二盒腔的中心位置還設(shè)置第一盒腔，其中， 第一盒腔內(nèi)安裝有內(nèi)置冷卻水的儲水腔，在儲水腔內(nèi)固定設(shè)有至少一個伸入儲水腔冷卻水內(nèi)的低溫筒，所述的低溫筒內(nèi)用于放置低溫保存的試劑管， 第二盒腔內(nèi)水平間隔安裝有至少兩塊平行的襯墊，所述的襯墊設(shè)有并排設(shè)置的多個用于放置常溫保存的試劑管的孔槽。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，所述的第一盒腔和第二盒腔的底部和四周側(cè)壁均設(shè)有隔熱板。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，在第一盒腔的頂部還蓋設(shè)有由隔熱材料制成的第二盒蓋。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，所述的儲水腔內(nèi)還設(shè)有水溫傳感器，在盒體內(nèi)還安裝有控制系統(tǒng)和報警器，所述的水溫傳感器和報警器均與控制系統(tǒng)連接。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，所述的低溫筒的內(nèi)表面安裝有帶有均勻分布網(wǎng)孔的導熱橡膠層，所述的導熱橡膠層圍繞形成的腔體的內(nèi)徑與試劑管的外徑匹配。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，所述的低溫筒為銅合金筒。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于快速檢測CYP2J2多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，所述的低溫筒在儲水腔內(nèi)均勻分布有10個，所述的第二盒腔內(nèi)的孔槽設(shè)有10個。
【文檔編號】C12M1/00GK205687940SQ201620520276
【公開日】2016年11月16日
【申請日】2016年6月1日 公開號201620520276.7, CN 201620520276, CN 205687940 U, CN 205687940U, CN-U-205687940, CN201620520276, CN201620520276.7, CN205687940 U, CN205687940U
【發(fā)明人】萬睿, 晏乃強
【申請人】上海交通大學