本發(fā)明涉及有毒有害物質(zhì)檢測(cè)
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種快速檢測(cè)食品中甲醛的方法。
背景技術(shù)：
：甲醛為較高毒性的物質(zhì)，在我國(guó)有毒化學(xué)品優(yōu)先控制名單上甲醛高居第二位，甲醛已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織確定為致癌和致畸形物質(zhì)，是一種破壞生物細(xì)胞蛋白質(zhì)的原生質(zhì)毒物，會(huì)對(duì)人的皮膚，呼吸道及內(nèi)臟造成損害，麻醉人的中樞神經(jīng)，可引起肺水腫，肝昏迷，腎衰竭等。世界衛(wèi)生組織確認(rèn)甲醛為致畸，致癌物質(zhì)，是變態(tài)反應(yīng)源，長(zhǎng)期接觸將導(dǎo)致基因突變。食品中甲醛，若經(jīng)口腔進(jìn)入人體，會(huì)對(duì)消化、神經(jīng)、循環(huán)和泌尿系統(tǒng)產(chǎn)生影響，嚴(yán)重者將危及生命。誤服甲醛溶液，可致口腔、食管、胃腸損傷，致消化道穿孔，或致休克、昏迷及肝，腎損害。消化系統(tǒng)將會(huì)出現(xiàn)惡心、嘔吐等表現(xiàn)。如果不幸口服中毒，將會(huì)引起口、咽、食管及胃部灼燒感，伴有口腔黏膜糜爛，上腹疼痛，嘔出帶血性嘔吐物；嚴(yán)重時(shí)發(fā)生胃穿孔及肝臟損害。但是，一些不法商販因經(jīng)濟(jì)利益驅(qū)使，在食品中添加甲醛。甲醛可使食品保質(zhì)期延長(zhǎng)，防止食品變質(zhì)，起到消毒和殺菌的作用。如水發(fā)食品中添加甲醛可以凝固蛋白防腐，改善外觀，增加口感，酒類飲料中加入甲醛防止渾濁，增加了透明度。殘留在食品中的甲醛嚴(yán)重的危害了人體健康，故世界各國(guó)規(guī)定食品中禁止加入甲醛，在食品中的甲醛含量不應(yīng)超出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。目前食品企業(yè)檢測(cè)甲醛的方法較多，主要為乙酰丙酮法、鹽酸苯肼法、滴定法等，這幾種方法試驗(yàn)線性關(guān)系差，精度低，不能滿足要求，而食品中甲醛的存在不僅存在毒性，降低的食品的質(zhì)量，如果檢測(cè)不準(zhǔn)，甲醛的限量不能保證就不僅僅是劣質(zhì)的食品，甚至?xí)蔀槎臼称?，食用者使用之后甚至?xí)＜吧斐刹豢赏旎氐木置?，因而為?yán)格控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證產(chǎn)品安全，食品中甲醛的殘留量的檢測(cè)及其合適有效的檢測(cè)方法就尤為重要。在諸多的檢測(cè)甲醛的方法中，AHMT法具有抗干擾性、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，但由于其在實(shí)際樣品檢測(cè)中，顯色過(guò)程中會(huì)有沉淀出現(xiàn)，造成檢測(cè)吸光度值偏高，從而造成假陽(yáng)性或檢測(cè)結(jié)果偏高的問(wèn)題，限制了該方法的使用。CN201310621465.9公開一種食品中甲醛的快速檢測(cè)試劑檢測(cè)食品中甲醛的方法包括以下步驟：(1)稱取樣品，對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，制得待測(cè)樣品溶液；(2)取3支比色管，在第1支比色管中加入待測(cè)樣品溶液，第22比色管中加入甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液(陽(yáng)性對(duì)照組)，第3比色管中不加待測(cè)樣品溶液和甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液(空白對(duì)照組)，最后在這3支比色管中均先加入氫氧化鈉溶液，再加入間苯三酚溶液；(3)在檢測(cè)試紙上滴加步驟(2)中反應(yīng)后的3組溶液，觀察檢測(cè)試紙上3組溶液顏色的改變，并將待測(cè)樣品溶液顏色改變與比色卡進(jìn)行對(duì)比，對(duì)待測(cè)樣品中甲醛進(jìn)行定性和定量分析。該方法通過(guò)人肉眼觀察溶液的顏色來(lái)確定甲醛的定性定量分析，抗干擾性弱，存在一定的局限性。CN201310011216.3公開了一種食品中甲醛含量的檢測(cè)方法，該方法在有亞硫酸鈉存在的條件下，加入甲醛溶液，則溶液的pH值將會(huì)上升，pH值上升的趨勢(shì)跟甲醛溶液中甲醛的濃度成正比，根據(jù)溶液中的pH值變化，可以找出甲醛的濃度隨pH值的變化關(guān)系，最終可以根據(jù)最后測(cè)出的pH值來(lái)得出原甲醛溶液中甲醛的濃度，進(jìn)一步可以得出初始溶液中甲醛的含量。該方法操作比較復(fù)雜，步驟較多，抗干擾性弱，不夠簡(jiǎn)便。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種快速檢測(cè)食品中甲醛的方法，該方法簡(jiǎn)便，步驟少，測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確，能快速的檢測(cè)出甲醛的含量，抗干擾性強(qiáng)，解決了AHMT法實(shí)際樣品檢測(cè)由于沉淀造成的假陽(yáng)性和檢測(cè)結(jié)果偏高的問(wèn)題。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種快速檢測(cè)食品中甲醛的方法，具體檢測(cè)步驟為：i)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：用甲醛濃度為0的基準(zhǔn)液，在波長(zhǎng)550nm處將分光光度計(jì)進(jìn)行調(diào)零后，檢測(cè)甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液的吸光度，并繪制濃度—吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；ii)樣品的檢測(cè)：用甲醛濃度為0的基準(zhǔn)液調(diào)零后，采用雙波長(zhǎng)檢測(cè)樣品工作液的吸光度，具體如下：先在550nm處檢測(cè)樣品工作液的吸光度Y1；再將分光光度計(jì)的檢測(cè)波長(zhǎng)調(diào)至660nm處檢測(cè)樣品工作液的吸光度Y2；iii)甲醛濃度的計(jì)算：將步驟ii)檢測(cè)的吸光度按照方程Y＝Y(jié)1-k×Y2進(jìn)行計(jì)算得到樣品工作液中甲醛的吸光度；其中，Y為樣品工作液中甲醛的吸光度；k為樣品工作液在在660nm與550nm光源下產(chǎn)生的吸光度的轉(zhuǎn)換系數(shù)；將經(jīng)過(guò)計(jì)算得到的Y值比對(duì)步驟i)繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，找出對(duì)應(yīng)的樣品工作液中甲醛的濃度X1，按照方程X＝β×X1得出樣品中甲醛的含量；其中，β為配制過(guò)程中樣品液濃度與樣品工作液濃度的比例系數(shù)；X1為樣品工作液中甲醛的濃度；X為樣品液中甲醛的含量。進(jìn)一步地，本發(fā)明所述方法中k＝1.629；β＝10。進(jìn)一步地，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為X2＝24.348×Y3，其中，Y3為橫軸濃度，X2為縱軸吸光度。進(jìn)一步地，所述步驟i)中甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液配制如下：以《BW3450水中甲醛溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)》為母液，分別配制濃度為0.0～30.0mg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液；移取甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液至比色皿中，加入檢測(cè)液A和檢測(cè)液B，混勻，靜置后向比色皿中滴加檢測(cè)液C，靜置后待用；其中，所述檢測(cè)液A為氫氧化鉀水溶液；所述檢測(cè)液B為AHMT的鹽酸溶液；所述檢測(cè)液C為高碘酸鉀水溶液；其中所述《BW3450水中甲醛溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)》為10mg/mL的甲醛水溶液。進(jìn)一步地，所述靜置的時(shí)間為1～5分鐘。更進(jìn)一步地，所述靜置的靜置時(shí)間為3分鐘。進(jìn)一步地，所述步驟i)中所述標(biāo)準(zhǔn)品工作液的濃度為0.0、1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、30.0mg/L。進(jìn)一步地，所述步驟ii)樣品工作液的制備過(guò)程如下：將待測(cè)樣品進(jìn)行剪碎或攪碎混勻后，稱取樣品于燒杯中，加入溶劑，用超聲波萃取后，取超聲溶液于樣品杯中，加入樣品處理液1號(hào)和樣品處理液2號(hào)后混勻，靜置1分鐘后過(guò)濾，濾液作為樣品液，待用；取兩份1.5mL所述樣品液于1cm比色皿中，加入檢測(cè)液A和檢測(cè)液B，混勻，靜置3分鐘后向比色皿中滴加檢測(cè)液C，靜置3分鐘后制得樣品工作液，待用；所述檢測(cè)液A為氫氧化鉀水溶液；所述檢測(cè)液B為AHMT的鹽酸溶液；所述檢測(cè)液C為高碘酸鉀水溶液；所述樣品處理液1號(hào)為乙酸鋅的乙酸溶液；所述樣品處理液2號(hào)為亞鐵氰化鉀水溶液。進(jìn)一步地，所述檢測(cè)液A的配制：稱取28gKOH溶于100mL純凈水中，待用；所述檢測(cè)液B的配制：稱取0.25gAHMT，溶于0.5mol/L鹽酸中，并加水稀釋至50mL，待用；所述檢測(cè)液C的配制：稱取1.5gKIO4溶于100mL純凈水中，混勻后裝入LDPE塑料瓶?jī)?nèi)，待用。進(jìn)一步地，所述檢測(cè)液A的體積為0.4mL；所述檢測(cè)液B的體積為0.2mL；所述檢測(cè)液C的量為6滴。進(jìn)一步地，所述樣品處理液1號(hào)的配制：稱取22.00gZn(CH3COO)2·2H2O溶于少量水中，加入3mL冰乙酸，加水稀釋至100mL，待用；所述樣品處理液2號(hào)的配制：稱取10.60gK4Fe(CN)6·3H2O，加水溶解并稀釋至100mL，待用。進(jìn)一步地，所述溶劑為蒸餾水或純凈水，所述溶劑的量為18.0mL；所述樣品的量為2.0g；所述超聲溶液為10.0mL；所述樣品處理液1號(hào)和樣品處理液2號(hào)的量均為0.5mL。進(jìn)一步地，所述超聲波萃取的時(shí)間為15分鐘。進(jìn)一步地，所述一種快速檢測(cè)食品中甲醛的方法，具體檢測(cè)步驟為：1)甲醛標(biāo)準(zhǔn)液配制：以10mg/mL的甲醛水溶液為母液，分別配制濃度為0.0、1.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、15.0mg/L、20.0mg/L、30.0mg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液；2)甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液配制：移取步驟1)不同濃度的甲醛標(biāo)準(zhǔn)液1.5mL至1cm的比色皿中，加入0.4mL檢測(cè)液A和0.2mL檢測(cè)液B，混勻，靜置3分鐘后向比色皿中滴加6滴檢測(cè)液C，靜置3分鐘后待用；3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：將步驟2)配制的濃度為0.0的甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液在波長(zhǎng)550nm處將分光光度計(jì)進(jìn)行調(diào)零后，檢測(cè)甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液的吸光度，并繪制濃度—吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；4)樣品液的制備：將待測(cè)樣品進(jìn)行剪碎或攪碎混勻后，稱取2.0g樣品于燒杯中，加入18.0mL溶劑，用超聲波萃取15分鐘后，取10.0mL溶液于樣品杯中，加入0.5mL樣品處理液1號(hào)和0.5mL樣品處理液2號(hào)后混勻，靜置1分鐘后過(guò)濾，濾液作為樣品液，待用；5)樣品工作液的制備：取兩份1.5mL所述步驟4)制備的樣品液于1cm比色皿中，按步驟2)所述方法配制樣品工作液，待用；6)樣品工作液的檢測(cè)：將步驟3)所述的方法，檢測(cè)步驟5)制備的樣品工作液在波長(zhǎng)550nm處的吸光度Y1；將分光光度計(jì)的檢測(cè)波長(zhǎng)調(diào)至660nm后，檢測(cè)步驟5)制備的樣品工作液在波長(zhǎng)660nm處的吸光度Y2；7)樣品中甲醛含量的計(jì)算：將步驟6)檢測(cè)的吸光度按照方程Y＝Y(jié)1-k×Y2進(jìn)行計(jì)算得到樣品工作液中甲醛的吸光度；其中，Y為樣品工作液中甲醛的吸光度；k為樣品工作液在在660nm與550nm光源下產(chǎn)生的吸光度的轉(zhuǎn)換系數(shù)，k＝1.629；將經(jīng)過(guò)計(jì)算得到的Y值比對(duì)步驟3)繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，找出對(duì)應(yīng)的樣品工作液中甲醛的濃度，按照方程X＝β×X1得出樣品中甲醛的含量；其中，β為配制過(guò)程中樣品液濃度與樣品工作液濃度的比例系數(shù)，β＝10；X1為樣品工作液中甲醛的濃度；X為樣品中甲醛的含量；所述樣品處理液1號(hào)：稱取22.00g乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O]溶于少量水中，加入3mL冰乙酸，加水稀釋至100mL，待用；所述樣品處理液2號(hào)：稱取10.60g亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)6·3H2O]，加水溶解并稀釋至100mL，待用；所述檢測(cè)液A：稱取28g氫氧化鉀溶于100mL純凈水中，待用；所述檢測(cè)液B：稱取0.25gAHMT，溶于0.5mol/L鹽酸中，并稀釋至50mL，待用；所述檢測(cè)液C：稱取1.5g高碘酸鉀溶于100mL純凈水中，混勻后裝入LDPE塑料瓶?jī)?nèi)，待用。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明提供一種快速檢測(cè)食品中甲醛的方法，該方法采用雙波長(zhǎng)檢測(cè)，利用AHMT法顯色產(chǎn)物在光源660nm下沒(méi)有吸收光譜信號(hào)，而沉淀物在該波長(zhǎng)下有吸收，獲得沉淀產(chǎn)生的吸光度Y2，通過(guò)轉(zhuǎn)換系數(shù)k得到沉淀在550nm下產(chǎn)生的吸光度k×Y2，將該吸光度值扣除即可得到甲醛顯色產(chǎn)物的真實(shí)吸光度Y，從而解決AHMT法假陽(yáng)性和檢測(cè)結(jié)果偏高的問(wèn)題。本發(fā)明提供的操作方法簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)，精密度高，重現(xiàn)性好，有效保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，檢測(cè)限低于10ppm，成本低，適合工業(yè)應(yīng)用。附圖說(shuō)明圖1是本發(fā)明甲醛溶液濃度-吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。具體實(shí)施方式簡(jiǎn)要說(shuō)明：AHMT：4-氨基-3-聯(lián)氨-5-疏基-1,2,4-三氮雜茂；酚試劑：3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽水合物。樣品處理液1號(hào)：稱取22.00g乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O]溶于少量水中，加入3mL冰乙酸，加水稀釋至100mL，待用；樣品處理液2號(hào)：稱取10.60g亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)6·3H2O]，加水溶解并稀釋至100mL，待用；檢測(cè)液A：稱取28g氫氧化鉀溶于100mL純凈水中，待用；檢測(cè)液B：稱取0.25gAHMT，溶于0.5mol/L鹽酸中，并稀釋至50mL，待用；檢測(cè)液C：稱取1.5g高碘酸鉀溶于100mL純凈水中，混勻后裝入LDPE塑料瓶?jī)?nèi)，待用；甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：BW3450水中甲醛溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其濃度為10mg/mL的甲醛水溶液。耐酸堿的LDPE塑料瓶：體積10mL、瓶蓋具有小滴孔(滴孔的規(guī)格為每滴50μL)。AHMT法指甲醛與AHMT(4一氨基一3一聯(lián)氨一5一巰基一1，2，4一三氮雜茂)在堿性條件下縮合，經(jīng)高碘酸鉀氧化成紫紅色化合物，然后550nm下比色定量檢測(cè)甲醛含量的方法。該方法特異性和選擇性均較好，在大量乙醛、丙醛、丁醛、苯乙醛等醛類物質(zhì)共存時(shí)不干擾測(cè)定。超聲儀：65W可調(diào)移液器：100～1000μL分析天平：感量0.0001g電子天平：感量0.01g為使本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實(shí)施例1快速檢測(cè)魷魚中甲醛的方法，具體檢測(cè)步驟為：1)甲醛標(biāo)準(zhǔn)液配制：以《BW3450水中甲醛溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)》為母液，分別配制濃度為0.0、1.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、15.0mg/L、20.0mg/L、30.0mg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液；2)甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液配制：移取步驟1)不同濃度的甲醛標(biāo)準(zhǔn)液1.5mL至1cm的比色皿中，加入0.4mL的檢測(cè)液A、0.2mL的檢測(cè)液B，混勻，靜置3分鐘后向比色皿中滴加6滴檢測(cè)液C，靜置3分鐘后待用；3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：將步驟2)配制的濃度為0.0的甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液在波長(zhǎng)550nm處將分光光度計(jì)進(jìn)行調(diào)零后，檢測(cè)1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、30.0mg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液的吸光度，并繪制濃度—吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線；4)樣品液的制備：將待測(cè)魷魚樣品進(jìn)行剪碎或攪碎混勻后，稱取2.0樣品于燒杯中，加入18.0mL的蒸餾水或純凈水，用超聲波萃取15分鐘后，取10.0mL溶液于樣品杯中，加入0.5mL樣品處理液1號(hào)和0.5mL樣品處理液2號(hào)后混勻，靜置1分鐘后過(guò)濾，濾液作為樣品液，待用；5)樣品工作液的制備：取兩份1.5mL所述步驟4)制備的魷魚樣品液于1cm比色皿中，加入0.4mL的檢測(cè)液A、0.2mL的檢測(cè)液B，混勻，靜置3分鐘后向比色皿中滴加6滴檢測(cè)液C，靜置3分鐘后待用；6)樣品工作液的檢測(cè)：將步驟2)配制的濃度為0.0的甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作液在波長(zhǎng)550nm處將分光光度計(jì)進(jìn)行調(diào)零后，檢測(cè)步驟5)制備的魷魚樣品工作液在波長(zhǎng)550nm處的吸光度Y1＝0.050；將分光光度計(jì)的檢測(cè)波長(zhǎng)調(diào)至660nm后，檢測(cè)步驟5)制備的魷魚樣品工作液在波長(zhǎng)660nm處的吸光度Y2＝0.023；7)魷魚樣品中甲醛含量的計(jì)算：β為配制過(guò)程中樣品液濃度與樣品工作液濃度的比例系數(shù)，β＝10；X1為樣品工作液中甲醛的濃度；X為樣品液中甲醛的含量；Y為樣品工作液中甲醛的吸光度；k為樣品工作液在在660nm與550nm光源下產(chǎn)生的吸光度的轉(zhuǎn)換系數(shù)，k＝1.629；Y＝Y(jié)1-k×Y2；X＝β×X1；將Y1和Y2的數(shù)值代入方程，可知Y＝0.0125，比對(duì)附圖1，得知其中X1＝0.305；由此計(jì)算，得知，樣品魷魚中甲醛的具體含量為3.05mg/kg。綜上可知，檢測(cè)得出樣品魷魚中甲醛的含量為<10mg/kg，干擾少。實(shí)施例2將鯽魚、豆腐和腐竹等按照實(shí)施例1的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)將檢測(cè)的結(jié)果與單波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行比對(duì)如下表2：表2單波長(zhǎng)與雙波長(zhǎng)方法比對(duì)樣品單波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)魷魚12.53mg/kg<10mg/kg鯽魚25.47mg/kg<10mg/kg豆腐10.58mg/kg<10mg/kg腐竹11.45mg/kg<10mg/kg從表2可知，本發(fā)明采用雙波長(zhǎng)檢測(cè)食品中的甲醛含量相對(duì)于單波長(zhǎng)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果更加靈敏，檢測(cè)限降低，干擾也相應(yīng)減小，具有明顯的優(yōu)勢(shì)?？梢岳斫獾氖?，以上實(shí)施方式僅僅是為了說(shuō)明本發(fā)明的原理而采用的示例性實(shí)施方式，然而本發(fā)明并不局限于此。對(duì)于本領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員而言，在不脫離本發(fā)明的精神和實(shí)質(zhì)的情況下，可以做出各種變型和改進(jìn)，這些變型和改進(jìn)也視為被包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3