快速檢測mtrr基因多態(tài)性試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及基因測序分析領(lǐng)域，具體為一種快速檢測葉酸代謝能力MTRR基因rsl801394位點多態(tài)性的試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]葉酸(folic acid)也叫維生素B9，是一種水溶性維生素，是合成核酸所必須的元素，是細胞生長和組織修復(fù)所必需的物質(zhì)，更是胚胎發(fā)育過程中不可缺少的營養(yǎng)素。研究證實并且機理研究清楚的與葉酸代謝密切相關(guān)的基因是MTRR和MTRR。這兩個基因變異引起的相應(yīng)的酶活性降低可阻抑同型半胱氨酸轉(zhuǎn)化為甲硫氨酸，導(dǎo)致低葉酸血癥和高同型半胱氨酸血癥，從而增加新生兒出生缺陷風(fēng)險或自發(fā)性流產(chǎn)等風(fēng)險。MTRR基因編碼甲硫氨酸合成酶還原酶，MTRR基因第2個外顯子處的一個A/G多態(tài)，引起MTRR基因編碼的蛋白第22個氨基酸由lie變?yōu)镸et，引起甲基維生素缺乏癥，并經(jīng)常用來研究與脊柱裂、Down綜合癥、神經(jīng)管缺陷、白血病等疾病的關(guān)系。
[0003]我國的葉酸代謝檢測起步較晚，繼一代基因測序技術(shù)之后發(fā)展起來的檢測技術(shù)，但測序技術(shù)需要昂貴的測序儀器，從而限制了推廣使用，無法有效廣泛地用于臨床診斷和科研工作。相對于測序技術(shù)，熒光定量PCR技術(shù)具有高靈敏度、高特異性，操作簡便、快速等特點，因此近年來在臨床檢測分析中被廣泛推廣使用。
【實用新型內(nèi)容】
[0004]本實用新型所解決的技術(shù)問題在于提供一種快速檢測葉酸代謝相關(guān)的MTRR基因兩個位點多態(tài)性的試劑盒，以解決上述【背景技術(shù)】中提出的問題。
[0005]本實用新型所解決的技術(shù)問題采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn)
[0006]快速檢測MTRR基因多態(tài)性試劑盒，包括盒體以及與盒體相連的翻蓋式盒蓋，盒體內(nèi)放置有與盒體尺寸大小相同的海綿托，海綿托上設(shè)有八個凹槽，所述凹槽內(nèi)分別放入反應(yīng)液I，反應(yīng)液II，探針I(yè)，探針I(yè)I，野生標準品，雜合標準品，突變標準品，純化水。
[0007]進一步的，反應(yīng)液瓶I，反應(yīng)液瓶II內(nèi)含有不同的特異擴增引物，PCR酶，dNTPo
[0008]進一步的，探針瓶I，探針瓶II內(nèi)含有不同的熒光探針。
[0009]進一步的野生標準品內(nèi)含位點為野生型的基因；所述雜合標準品內(nèi)含有位點只有一個突變的基因，所述突變標準品內(nèi)含有位點同時突變的基因。
[0010]本實用新型的優(yōu)點是:本實用新型特異性強、靈敏度高、穩(wěn)定、方便，反應(yīng)更充分、迅速，降低了生產(chǎn)成本。
【附圖說明】
[0011]圖1為本實用新型一實施方式的試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0012]圖2為本實用新型一實施方式的試劑盒的主視圖。
[0013]圖3為本實用新型一實施方式的側(cè)視圖。
[0014]其中:1-盒體；2-翻蓋式盒蓋；3-海綿托；4-凹槽；5-反應(yīng)液I ;6_反應(yīng)液II ;7-探針I(yè) ;8-探針I(yè)I ;9_野生標準品；10_雜合標準品；11-突變標準品；12_純化水。
【具體實施方式】
[0015]下面結(jié)合附圖對本實用新型作進一步詳細的說明。
[0016]圖1至圖3示意性地顯示了如圖1快速檢測MTRR基因多態(tài)性試劑盒，包括盒體1以及與盒體1相連的翻蓋式盒蓋2，盒體1內(nèi)放置有與盒體1尺寸大小相同的海綿托3，海綿托3上設(shè)有八個凹槽4，凹槽內(nèi)分別放置有反應(yīng)液15，反應(yīng)液116，探針17，探針118，野生標準品9，雜合標準品10，突變標準品11，純化水12。
[0017]本實用新型使用方法如下:在檢測Rsl80139位點的標本、校準品中加入反應(yīng)液15，反應(yīng)液116以及探針17，探針118，探針17中有特意修飾，使得探針只能與Rsl80139位點為A的堿基結(jié)合，探針118中的特異修飾使得探針只能與Rsl80139位點為G的堿基結(jié)合，只有探針結(jié)合后，才能在熒光定量PCR中收集到擴增熒光，根據(jù)熒光信號確定改為點的堿基變化，實現(xiàn)SNP的檢測。
[0018]通過對探針進行特異修飾，使得不同的探針識別不同的堿基，從而達到很好分離基因型的效果，比普通測序的時間段，靈敏性高，易于推廣檢測
[0019]以上所述的僅是本實用新型的一些實施方式。對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本實用新型創(chuàng)造構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于發(fā)明(本實用新型)的保護范圍。
【主權(quán)項】
1.快速檢測MTRR基因多態(tài)性試劑盒，其特征在于:包括盒體以及與盒體相連的翻蓋式盒蓋，盒體內(nèi)放置有與盒體尺寸大小相同的海綿托，所述海綿托上設(shè)有八個凹槽，所述凹槽內(nèi)分別放入反應(yīng)液I，反應(yīng)液II，探針I(yè)，探針I(yè)I，野生標準品，雜合標準品，突變標準品，純化水。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測MTRR基因多態(tài)性試劑盒，其特征在于:所述反應(yīng)液瓶I，反應(yīng)液瓶II內(nèi)含有不同的特異擴增引物，PCR酶，dNTPo3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測MTRR基因多態(tài)性試劑盒，其特征在于:所述探針瓶I，探針瓶II內(nèi)含有不同的熒光探針。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測MTRR基因多態(tài)性試劑盒，其特征在于:所述野生標準品內(nèi)含位點為野生型的基因；所述雜合標準品內(nèi)含有位點只有一個突變的基因，所述突變標準品內(nèi)含有位點同時突變的基因。
【專利摘要】本實用新型公開了快速檢測MTRR基因多態(tài)性試劑盒，包括盒體以及與盒體相連的翻蓋式盒蓋，盒體內(nèi)放置有與盒體尺寸大小相同的海綿托，海綿托上設(shè)有八個凹槽，所述凹槽內(nèi)分別放入反應(yīng)液I，反應(yīng)液II，探針I(yè)，探針I(yè)I，野生標準品，雜合標準品，突變標準品，純化水。本實用新型的優(yōu)點是：本實用新型特異性強、靈敏度高、穩(wěn)定、方便，反應(yīng)更充分、迅速，降低了生產(chǎn)成本。
【IPC分類】C12M1/34, C12Q1/68
【公開號】CN204958923
【申請?zhí)枴緾N201520502662
【發(fā)明人】吳璇
【申請人】江蘇蘇博生物醫(yī)學(xué)科技有限公司
【公開日】2016年1月13日
【申請日】2015年7月10日