本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種具有鄰苯二甲酰亞胺結(jié)構(gòu)的IDO1抑制劑及制備方法。

背景技術(shù)：

吲哚胺-2,3-雙加氧酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是細(xì)胞內(nèi)的一種含有亞鐵血紅素的代謝酶，它是介導(dǎo)色氨酸代謝的關(guān)鍵限速酶，是犬尿氨酸途徑的重要組成部分。IDO自2003年被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，其作為藥物研發(fā)的重要靶點(diǎn)被學(xué)術(shù)界和制藥界廣泛研究。

色氨酸降解的第一步是將色氨酸氧化為N-甲?；?L-犬尿氨酸，它是由IDO和色氨酸-2,3-雙加氧酶(tryptophan 2,3-dioxygenase,TDO)這兩種亞鐵血紅素依賴(lài)型雙加氧酶其中的一種介導(dǎo)產(chǎn)生的。在這兩種雙加氧酶中，IDO被認(rèn)為是調(diào)節(jié)該氧化反應(yīng)發(fā)生的檢查點(diǎn)，其存在與作用的發(fā)揮是人體產(chǎn)生免疫抑制力的主要原因。IDO進(jìn)一步分為IDO1和IDO2。正常情況下IDO1在體內(nèi)呈低水平表達(dá)，當(dāng)干擾素(IFN-α,、IFN-β和IFN-γ)、白介素(IL-1和IL-2)、腫瘤壞死因子(TNF)等多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)IDO1水平升高時(shí)，色氨酸將被大量代謝，從而抑制人體對(duì)寄生性、病毒性、細(xì)菌性、真菌性等病原體的免疫應(yīng)答，人體將處于病態(tài)的免疫抑制狀態(tài)。

在大多數(shù)腫瘤細(xì)胞中IDO1的高表達(dá)降低了細(xì)胞微環(huán)境中色氨酸的濃度，使得色氨酸依賴(lài)的T細(xì)胞合成停滯于G1期，T細(xì)胞增殖受到抑制，從而抑制了人體的免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤組織的殺傷作用。同時(shí)，具有細(xì)胞毒性的色氨酸代謝產(chǎn)物可以對(duì)T細(xì)胞產(chǎn)生直接的溶解作用。因此，IDO1在腫瘤免疫豁免和腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。

在一些慢性疾病如獲得性免疫缺陷綜合證(AIDS)、多種類(lèi)型抑郁癥、阿爾茲海默癥等中，IDO1也被認(rèn)為是促進(jìn)病情發(fā)展的原因之一。高水平的干擾素誘導(dǎo)IDO1高表達(dá)。在干擾素的持續(xù)活化下，IDO1降低了游離血清色氨酸的利用度，從而降低了5-羥色胺的產(chǎn)生。加之具有神經(jīng)活性的犬尿氨酸代謝物的蓄積，多種神經(jīng)病學(xué)病癥和心理障礙的產(chǎn)生一觸即發(fā)。

由于IDO1已被證明與多種疾病發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)，因此IDO1抑制劑可用于治療IDO1介導(dǎo)的色氨酸代謝途徑的病理學(xué)特征的疾病，這些疾病包括且不僅限于惡性腫瘤、自身免疫性疾病、阿爾茲海默癥和精神分裂癥。IDO1抑制劑作為藥物具有廣闊的開(kāi)發(fā)前景，然而迄今為止未有合適的IDO1抑制劑作為藥物上市，因此尋找新型高效的IDO1抑制劑具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明公開(kāi)了一種含有鄰苯二甲酰亞胺類(lèi)結(jié)構(gòu)的化合物，結(jié)構(gòu)式如下：

X代表氫、鹵素或甲基；

R代表-NH₂、

n代表0～3；

m代表0或1。

其中X優(yōu)選代表甲基。

R優(yōu)選代表

本發(fā)明優(yōu)選的部分化合物如下：

本發(fā)明還公開(kāi)了化合物(I)的制備方法，包括：

其中X、R的定義同前。

式II所示化合物與NaNO₂發(fā)生反應(yīng)生成式III所示化合物，反應(yīng)溫度優(yōu)選0～5℃，反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選12～24h，反應(yīng)溶劑為濃鹽酸和醋酸組成的混合溶劑。反應(yīng)中加入NaCl。

式III所示化合物與含有R基團(tuán)的胺反應(yīng)生成式IV所示化合物，反應(yīng)溫度優(yōu)選25～30℃，反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選1～3h，反應(yīng)溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷等。反應(yīng)中還加入無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿，如碳酸鈉、碳酸氫鈉、三乙胺等。

式IV所示化合物回流變構(gòu)成式V所示化合物，反應(yīng)溫度優(yōu)選80～100℃，反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選12～20h，反應(yīng)溶劑為水、乙醇等。反應(yīng)中還加入無(wú)機(jī)堿，如氫氧化鈉、氫氧化鉀等。

式I所示通式可由式V所示化合物與X取代的鄰苯二甲酸酐回流生成，反應(yīng)溫度優(yōu)選110～120℃，反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選12～20h，反應(yīng)溶劑為乙酸、濃鹽酸、三氟乙酸等。

通式I化合物可以采用常見(jiàn)的分離方法進(jìn)行純化，如重結(jié)晶、柱層析等。

本發(fā)明也包括通式I化合物藥學(xué)上可接受的鹽等。

本發(fā)明所述的化合物可以添加藥學(xué)上可接受的載體制成常見(jiàn)的藥用制劑，如片劑、膠囊、粉劑、糖漿、液劑、懸浮劑、針劑，可以加入香料、甜味劑、液體或固體填料或稀釋劑等常用藥用輔料。

本發(fā)明所述的化合物在臨床上的給藥方式可以采用口服、注射等方式。

一般地，本發(fā)明的化合物用于治療時(shí)，人用劑量范圍為1mg～1000mg/天。也可根據(jù)劑型的不同和疾病嚴(yán)重程度，使用劑量超出該范圍。

以下是本發(fā)明部分化合物的藥理學(xué)試驗(yàn)及結(jié)果：

(1)IDO1抑制活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)

在大腸桿菌中表達(dá)具有N-末端His標(biāo)簽的人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)，提取并純化IDO1。IDO1催化色氨酸吲哚環(huán)的吡咯環(huán)的氧化斷裂得到N’-甲?；虬彼?。在96孔板上將50mM磷酸鉀緩沖液(pH 6.5)，40mM維生素C，400μg/mL過(guò)氧化氫酶，20μM亞甲藍(lán)和IDO1酶混合。向上述混合液內(nèi)加入底物L(fēng)-色氨酸和待測(cè)樣品。反應(yīng)在37℃下進(jìn)行60min，加入30％(w/v)三氯乙酸使反應(yīng)終止。96孔板在65℃下加熱15min，使之完成從甲酰犬尿氨酸到犬尿氨酸的轉(zhuǎn)化，然后6000rpm旋轉(zhuǎn)10min。每孔取出100μL上清液轉(zhuǎn)移到新的96孔板內(nèi)，加入2％(w/v)對(duì)-(二甲基氨基)苯甲醛的乙酸溶液100μL，犬尿氨酸與之反應(yīng)產(chǎn)生黃顏色可使用酶標(biāo)儀在480nm觀測(cè)，所得結(jié)果利用IC₅₀(nM)計(jì)算軟件計(jì)算。利用上述方法，對(duì)化合物的IDO1抑制活性進(jìn)行測(cè)定，其IC₅₀(nM)如下，并用目前處于I期臨床試驗(yàn)的IDO抑制劑NLG-919作為對(duì)照。結(jié)果見(jiàn)表1.

表1本發(fā)明部分化合物對(duì)IDO1的抑制活性IC₅₀(nM)

由表1可見(jiàn)，本發(fā)明部分化合物對(duì)IDO1有良好的抑制活性。

(2)基于Hela細(xì)胞的IDO1抑制活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)

在37℃，將細(xì)胞保存在提供5％CO₂的控濕培養(yǎng)箱中。如下進(jìn)行測(cè)定：按5000/孔的密度，將Hela細(xì)胞接種在96孔培養(yǎng)板中，并培養(yǎng)過(guò)夜。第二天，將IFN-γ(終濃度50ng/mL)和化合物的系列稀釋液(總體積200μL培養(yǎng)基)加給細(xì)胞。溫育48h后，將140μL上清液/孔移至新的96孔板中。將10μL6.1N三氯乙酸混入各孔，在50℃溫育30min使產(chǎn)生的N-甲?；虬彼崴鉃槿虬彼?。然后以6000rpm將反應(yīng)混合物離心10min以去除沉淀物。將100μL上清液/孔移至另一96孔板中，與乙酸中的100μL2％(w/v)對(duì)二甲氨基苯甲醛混合，在480nm測(cè)量犬尿氨酸產(chǎn)生的黃色。用L-犬尿氨酸作標(biāo)準(zhǔn)。用100μL培養(yǎng)基制備標(biāo)準(zhǔn)液(240、120、60、30、15、7.5、3.75、1.87μM)，并將它們與等體積的2％(w/v)對(duì)二甲氨基苯甲醛混合。測(cè)定各個(gè)濃度下的抑制百分率，使用非線(xiàn)性回歸分析數(shù)據(jù)，得到IC₅₀(μM)值,并用目前處于I期臨床試驗(yàn)的IDO抑制劑NLG-919作為對(duì)照。結(jié)果見(jiàn)表2.

表2本發(fā)明部分化合物基于Hela細(xì)胞的IDO1抑制活性IC₅₀(μM)

由表2可見(jiàn)，本發(fā)明部分化合物對(duì)IDO1有良好的抑制活性。

(3)IDO1抑制劑的抗腫瘤活性的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)

收集生長(zhǎng)旺盛期鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F10，在無(wú)菌條件下制備成細(xì)胞懸液，接種于C57BL6小鼠腋下。C57BL6小鼠移植瘤用游標(biāo)卡尺測(cè)量移植瘤直徑，待腫瘤生長(zhǎng)至一定大小后將動(dòng)物分組，每組5只。使用測(cè)量瘤徑的方法，動(dòng)態(tài)觀察被試物抗腫瘤的效應(yīng)。空白對(duì)照給予等劑量0.5％CMC(羧甲基纖維素鈉)，灌胃給藥；化合物組進(jìn)行腹腔注射，隔天一次，持續(xù)15天。從給藥當(dāng)天開(kāi)始測(cè)量腫瘤長(zhǎng)徑(a)和短徑(b)，每隔一天測(cè)量一次，腫瘤體積＝ab²/2。15天后處死荷瘤C57BL6小鼠，并分離瘤塊稱(chēng)重。所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)算抑瘤率,并用目前處于I期臨床試驗(yàn)的IDO抑制劑NLG-919作為對(duì)照。結(jié)果見(jiàn)表3、圖1和圖2.

表3本發(fā)明代表性化合物CPUL-I021的B16F10移植瘤的生長(zhǎng)抑制率

由圖1、圖2和表3可見(jiàn)，本發(fā)明化合物對(duì)惡性腫瘤的生長(zhǎng)具有良好的抑制活性。

(4)IDO1抑制劑在大鼠中的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)

選取SD大鼠10只，雄性，體重180～200g，灌胃或靜脈給予化合物CPUL-I021，見(jiàn)表4：

表4化合物CPUL-I021在大鼠中的給藥情況

灌胃給藥以1％MC配制為懸浮液，靜脈注射以DMSO:30％PEG400(5:95)配制。試驗(yàn)前禁食12h，自由飲水。給藥后2h統(tǒng)一進(jìn)食。給藥后按照以下時(shí)間點(diǎn)采血：灌胃給藥組采血時(shí)間點(diǎn)為給藥后0.25，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0和24h；靜脈給藥組采血時(shí)間點(diǎn)為給藥后0.25，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0和24h。在上述時(shí)間點(diǎn)經(jīng)大鼠眼球后靜脈叢取靜脈血0.3mL，置于EDTA-2K試管中，11000rpm離心5min，分離血漿，置于-20℃冰箱中冷凍。采用LC/MS/MS法測(cè)定大鼠血漿中化合物CPUL-I021的濃度。采用非房室模型計(jì)算給藥后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。達(dá)峰濃度C_max和達(dá)峰時(shí)間T_max為實(shí)測(cè)值；藥時(shí)曲線(xiàn)下面積AUC_0-t值采用梯形法計(jì)算；AUC_0-∞＝AUC_0-t+C_t/k_e，Ct為最后一個(gè)可測(cè)得時(shí)間點(diǎn)的血藥濃度，k_e為消除速率常數(shù)；消除半衰期t_1/2＝0.693/k_e；平均滯留時(shí)間MRT＝AUMC/AUC。清除率CL＝D/AUC_0-∞；穩(wěn)態(tài)分布容積V_ss＝CL×MRT；絕對(duì)生物利用度F＝(AUC_灌胃×D_靜脈)/(AUC_靜脈×D_灌胃)×100％。結(jié)果見(jiàn)表5和表6.

表5大鼠灌胃給藥10mg/kg CPUL-I021后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

表6大鼠靜脈給藥1mg/kg CPUL-I021后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

附圖說(shuō)明

圖1是處死荷瘤C57BL6小鼠后分離瘤塊稱(chēng)重

圖2是腫瘤體積與給藥天數(shù)關(guān)系

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

4-氨基-3-(N’-羥基脒基)-1,2,5-噁二唑(II)的制備

將亞硝酸鈉(20.7g,300mmol)和40mL水加入到500mL反應(yīng)瓶中，攪拌溶解，室溫下緩慢滴加丙二腈(9.9g,150mmol)的鹽酸(2N)溶液，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，冷卻至0℃，滴加鹽酸羥胺(23g,340mmol)的水溶液，攪拌30min，20℃以下用10N氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至10，升至35℃反應(yīng)2h，再加熱回流2h。冷卻至室溫，反應(yīng)液用20mL乙酸乙酯萃取，減壓蒸除溶劑得白色固體，將水層放置過(guò)夜，析出固體，抽濾，水洗，濾餅與減壓蒸餾得白色固體合并干燥得白色粉末狀固體(14.9g,69.5％)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:10.46(s,1H,-OH),6.24(s,2H,-NH₂),6.02(s,2H,-NH₂)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₃H₅N₅O₂:143.0516,found:143.0518。

4-氨基-3-氯代甲肟基-1,2,5-噁二唑(III)的制備

將II(4.18g,29.2mmol)，58.4mL水，29.7mL醋酸和14.6mL的6N鹽酸加入到250mL反應(yīng)瓶中，升至45℃攪拌溶解，加入氯化鈉固體(5.12g,87.5mmol)，攪拌溶解，冷卻至0℃，析出白色固體，緩慢滴加亞硝酸鈉(2.00g,29mmol)的水溶液，0℃以下攪拌3h，升至室溫，抽濾，濾餅水洗，甲苯重結(jié)晶得白色粉末狀固體(2.52g,53.2％)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.39(s,1H,-OH),6.29(s,2H,-NH₂)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₃H₃ClN₄O₂:161.9872,found:161.9872。

實(shí)施例2

化合物CPUL-I001的制備

4-氨基-3-(N-甲基-N’-羥基脒基)-1,2,5-噁二唑(IV-1)的制備

將III(1.0g,6.2mmol)和40mL乙醇加入到100mL反應(yīng)瓶中，攪拌，室溫下依次緩慢滴加40％的甲胺乙醇溶液(0.48g,6.2mmol)和三乙胺(1.25g,12.4mmol)，室溫?cái)嚢?h，減壓蒸除溶劑，加入乙酸乙酯攪拌，抽濾，濾液用水與飽和氯化鈉水溶液各洗滌1次，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)層，減壓蒸除溶劑得黃色油狀物(0.68g,70.1％)。HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₄H₇N₅O₂:157.0602,found:157.0600。

4-甲胺基-3-(N’-羥基脒基)-1,2,5-噁二唑(V-1)的制備

將IV-1(0.68g,4.3mmol)和9mL水加入到50mL反應(yīng)瓶中，攪拌下緩慢滴加氫氧化鉀(0.73g,13mmol)的3mL水溶液，加熱回流14h，經(jīng)TLC檢測(cè)反應(yīng)完畢后，冷卻至室溫，用乙酸乙酯萃取(5×4mL)，合并有機(jī)相，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑得淡黃色油狀物(0.46g,67.5％)。HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₄H₇N₅O₂:157.0608,found:157.0600。

2-[(4-甲胺基-1,2,5-噁二唑-3-基)甲肟基]異吲哚-1,3-二酮(CPUL-I001)的制備

將V-1(0.46g,3mmol)，20mL醋酸和鄰苯二甲酸酐(0.88g,6mmol)加入到100mL反應(yīng)瓶中，回流攪拌約8h，經(jīng)TLC檢測(cè)反應(yīng)完畢后，冷卻至室溫，減壓蒸除溶劑，柱層析純化得淡黃色固體(0.25g,29％)。m.p.203-204℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:12.61(s,1H,-OH),7.87-7.95(m,2H,-ArH),7.64-7.67(m,2H,-ArH),5.41(m,1H,-NH-),2.33(d,J＝4.5Hz,3H,-CH₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₂H₉N₅O₄:287.0650,found:287.0655。

實(shí)施例3

化合物CPUL-I002的制備

用乙胺(6.2mmol)代替甲胺外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I002(0.28g,15％)。m.p.199-200℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.01(s,1H,-OH),7.91-8.02(m,2H,-ArH),7.73-7.77(m,2H,-ArH),6.21(m,1H,-NH-),2.43(m,2H,-CH₂-),2.29(t,J＝4.7Hz,3H,-CH₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₂H₉N₅O₄:301.0806,found:301.0811。

實(shí)施例4

化合物CPUL-I003的制備

用環(huán)丙胺(6.2mmol)代替甲胺外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I003(0.28g,14.5％)。m.p.169-171℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.71(s,1H,-OH),7.81-8.03(m,4H,-ArH),6.63(bs,1H,-NH-),2.67-2.74(m,1H,-CH-),0.67-0.78(m,4H,-CH₂-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₄H₁₁N₅O₄:313.0884,found:313.0867。

實(shí)施例5

化合物CPUL-I004的制備

用正丙胺(6.2mmol)代替甲胺外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I004(0.31g,16％)。m.p.197-198℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.61(s,1H,-OH),7.97-8.05(m,2H,-ArH),7.84-7.87(m,2H,-ArH),6.41(bs,1H,-NH-),3.28(q,J＝6.5Hz,2H,-CH₂-),1.63-1.70(m,2H,-CH₂-),0.92(t,J＝7.3Hz,3H,-CH₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₄H₁₃N₅O₄:315.0873,found:315.0869。

實(shí)施例6

化合物CPUL-I005的制備

用叔丁胺(6.2mmol)代替甲胺外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I005(0.32g,15.5％)。m.p.136-138℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.67(s,1H,-OH),7.85-7.97(m,4H,-ArH),5.80(s,1H,-NH-),1.40(s,9H,-C(CH₃)₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₅H₁₅N₅O₄:329.1197,found:329.1196。

實(shí)施例7

化合物CPUL-I006的制備

用環(huán)己胺(6.2mmol)代替甲胺外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I006(0.32g,14.5％)。m.p.202-203℃,¹H NMR(300MHz,(CD₃)₂CO-d₆)δ:8.14-8.17(m,1H,-ArH),7.98-8.01(m,1H,-ArH),7.88-7.90(m,2H,-ArH),5.71(d,J＝6.9Hz,1H,-NH-),3.55(bs,1H,-CH-),2.11-2.17(m,2H,-CH₂-),1.77-1.80(m,2H,-CH₂-),1.31-1.68(m,6H,-CH₂-CH₂-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₇H₁₇N₅O₄:355.1353,found:355.1353。

實(shí)施例8

化合物CPUL-I007的制備

用4-氧氮環(huán)己烷(6.2mmol)代替甲胺外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I007(0.28g,13％)。m.p.190-192℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.72(s,1H,-OH),7.81-8.06(m,4H,-ArH),3.64-3.74(m,4H,-CH₂-O-CH₂-),3.31(t,J＝4.2Hz,4H,-CH₂-N-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₅H₁₃N₅O₅:343.0989,found:343.0992。

實(shí)施例9

化合物CPUL-I008的制備

用苯胺(6.2mmol)代替甲胺外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I008(0.32g,15％)。m.p.182-184℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:8.69(s,1H,-NH-),7.98-8.06(m,2H,-ArH),7.84-7.89(m,2H,-ArH),7.66(d,J＝7.9Hz,2H,-ArH),7.41(t,J＝7.6Hz,2H,-ArH),7.08(t,J＝7.3Hz,1H,-ArH)ppm.¹H RMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₇H₁₁N₅O₄:349.0884,found:349.0916。

實(shí)施例10

化合物CPUL-I009的制備

用芐胺(6.2mmol)代替甲胺外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I009(0.35g,15.5％)。m.p.195-197℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:7.97-8.06(m,2H,-ArH),7.82-7.89(m,2H,-ArH),7.24-7.43(m,5H,-ArH),7.10(t,J＝6.2Hz,1H,-NH-),4.53(d,J＝6.1Hz,2H,-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₈H₁₃N₅O₄:363.1040,found:363.1045。

實(shí)施例11

化合物CPUL-I010的制備

用丙胺(6.2mmol)代替甲胺、4-氯苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I010(0.31g,14.5％)。m.p.120-122℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:14.00(s,1H,-OH),7.90-8.09(m,3H,-ArH),6.42(bs,1H,-NH-),3.26(bs,2H,-CH₂-),1.63-1.67(m,2H,-CH₂-),0.91(bs,3H,-CH₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₄H₁₂ClN₅O₄:349.0651,found:349.0686。

實(shí)施例12

化合物CPUL-I011的制備

用環(huán)己胺(6.2mmol)代替甲胺、4-氯苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I011(0.41g,17％)。m.p.200-202℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:14.00(s,1H,-OH),8.03-8.06(m,2H,-ArH),7.93-7.96(m,1H,-ArH),5.96(d,J＝7.6Hz,1H,-NH-),3.31-3.43(m,1H,-CH-),2.00-2.04(m,2H,-CH₂-),1.71-1.75(m,2H,-CH₂-),1.31-1.63(m,6H,-CH₂-CH₂-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₇H₁₆ClN₅O₄:389.0964,found:389.0978。

實(shí)施例13

化合物CPUL-I012的制備

用4-氧氮環(huán)己烷(6.2mmol)代替甲胺、4-氯苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I012(0.39g,16.5％)。m.p.176-178℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.90(s,1H,-OH),7.93-8.08(m,3H,-ArH),3.73(bs,4H,-CH₂-O-CH₂-),3.31(bs,4H,-CH₂-N-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₅H₁₂ClN₅O₅:377.0600,found:377.0600。

實(shí)施例14

化合物CPUL-I013的制備

用苯胺(6.2mmol)代替甲胺、4-氯苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I013(0.34g,14.5％)。m.p.207-209℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:8.77(s,1H,-NH-),8.06(s,1H,-ArH),7.95(d,J＝7.5Hz,1H,-ArH),7.88(d,J＝6.8Hz,1H,-ArH),7.67(d,J＝7.8Hz,2H,-ArH),7.39(t,J＝7.6Hz,2H,-ArH),7.06(t,J＝7.1Hz,1H,-ArH)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₇H₁₀ClN₅O₄:383.0494,found:383.0512。

實(shí)施例15

化合物CPUL-I014的制備

用丙胺(6.2mmol)代替甲胺、4-溴苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I014(0.38g,15.5％)。m.p.130-132℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:14.00(s,1H,-OH),7.93-8.21(m,3H,-ArH),6.43(t,J＝5.3Hz,1H,-NH-),3.24-3.31(m,2H,-CH₂-),1.63-1.70(m,2H,-CH₂-),0.92(t,J＝7.4Hz,3H,-CH₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₄H₁₂BrN₅O₄:393.0145,found:393.0148。

實(shí)施例16

化合物CPUL-I015的制備

用環(huán)己胺(6.2mmol)代替甲胺、4-溴苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I015(0.46g,17％)。m.p.188-190℃,¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:7.77-8.23(m,3H,-ArH),5.30(bs,1H,-NH-),3.58(bs,1H,-CH-),2.15-2.21(m,2H,-CH₂-),1.70-1.78(m,2H,-CH₂-),1.25-1.66(m,6H,-CH₂-CH₂-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₇H₁₆BrN₅O₄:433.0458,found:433.0462。

實(shí)施例17

化合物CPUL-I016的制備

用4-氧氮環(huán)己烷(6.2mmol)代替甲胺、4-溴苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I016(0.39g,15％)。m.p.189-191℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.95(s,1H,-OH),7.91-8.21(m,3H,-ArH),3.73(t,J＝4.2Hz,4H,-CH₂-O-CH₂-),3.31(t,J＝4.1Hz,4H,-CH₂-N-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₅H₁₂BrN₅O₅:421.0095,found:421.0098。

實(shí)施例18

化合物CPUL-I017的制備

用苯胺(6.2mmol)代替甲胺、4-溴苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I017(0.40g,15％)。m.p.237-239℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:8.69(s,1H,-NH-),7.95-8.06(m,3H,-ArH),7.68(d,J＝7.9Hz,2H,-ArH),7.40(t,J＝7.8Hz,2H,-ArH),7.07(t,J＝7.3Hz,1H,-ArH)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₇H₁₀BrN₅O₄:426.9989,found:427.0004。

實(shí)施例19

化合物CPUL-I018的制備

用丙胺(6.2mmol)代替甲胺、4-甲基苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I018(0.29g,14％)。m.p.123-125℃,¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:7.68-8.08(m,2H,-ArH),7.57(d,J＝7.8Hz,1H,-ArH),5.46(bs,1H,-NH-),3.40-3.43(m,2H,-CH₂-),2.54(s,3H,-CH₃),1.74-1.81(m,2H,-CH₂-),1.03(t,J＝7.4Hz,3H,-CH₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₅H₁₅N₅O₄:329.1197,found:329.1205。

實(shí)施例20

化合物CPUL-I019的制備

用環(huán)己胺(6.2mmol)代替甲胺、4-甲基苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I019(0.33g,14.5％)。m.p.201-203℃,¹H NMR(300MHz,CDCl₃),δ:7.89-8.05(m,1H,-ArH),7.66-7.81(m,1H,-ArH),7.55(d,J＝7.9Hz,1H,-ArH),5.36(d,J＝5.6Hz,1H,-NH-),3.57(bs,1H,-CH-),2.53(s,3H,-CH₃),2.15-2.18(m,2H,-CH₂-),1.69-1.77(m,2H,-CH₂-),1.24-1.65(m,6H,-CH₂-CH₂-CH₂-)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₈H₁₉N₅O₄:369.1510,found:369.1507。

實(shí)施例21

化合物CPUL-I020的制備

用4-氧氮環(huán)己烷(6.2mmol)代替甲胺、4-甲基苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I020(0.33g,15.5％)。m.p.176-178℃,¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:13.58(s,1H,-OH),7.74-7.96(m,3H,-ArH),3.73(t,J＝4.8Hz,4H,-CH₂-O-CH₂-),3.31(t,J＝4.4Hz,4H,-CH₂-N-CH₂-),2.49(s,3H,-CH₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₆H₁₅N₅O₅:357.1146,found:357.1150。

實(shí)施例22

化合物CPUL-I021的制備

用苯胺(6.2mmol)代替甲胺、4-甲基苯酐代替鄰苯二甲酸酐外，以與化合物CPUL-I001相同的方法合成化合物CPUL-I021(0.36g,16％)。m.p.206-208℃,¹H NMR(300MHz,(CD₃)₂CO-d₆)δ:12.58(s,1H,-OH),8.38(s,1H,-NH-),8.03(dd,J＝8.0Hz,5.4Hz,1H,-ArH),7.88(d,J＝8.4Hz,1H,-ArH),7.71-7.75(m,3H,-ArH),7.44(t,J＝8.1Hz,2H,-ArH),7.11(t,J＝7.3Hz,1H,-ArH),2.57(s,3H,-CH₃)ppm.HRMS m/z[M+H]⁺calculated for C₁₈H₁₃N₅O₄:363.1040,found:363.1041。