1.一種通過(guò)酶促水解新橙皮苷或橙皮苷制備橙皮素的方法,其特征在于按照以下步驟進(jìn)行:
1)采用Penicillium decumbens即斜臥青霉發(fā)酵產(chǎn)生的高α-鼠李糖苷酶和β-葡萄糖苷酶活性的粗酶液,在緩沖液中選擇性的水解新橙皮苷或橙皮苷,使其轉(zhuǎn)化為橙皮素,具體方法為:取20-50mg的新橙皮苷或橙皮苷置于反應(yīng)釜中,按照10:1:0.1的體積比依次加入緩沖液、粗酶液和激活劑后共同孵育;
2)橙皮素的制備:待反應(yīng)結(jié)束后,將上述轉(zhuǎn)化液與等倍體積的甲醇混合,離心后取上清,于50℃減壓濃縮后溶于0.5倍體積的甲醇,過(guò)制備型色譜柱即得到橙皮素。
2.如權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)酶促水解新橙皮苷或橙皮苷制備橙皮素的方法,其特征在于:所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液、乙酸鹽緩沖液、或檸檬酸緩沖液;所述的激活劑為CaCl2溶液。
3.如權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)酶促水解新橙皮苷或橙皮苷制備橙皮素的方法,其特征在于步驟1)中:反應(yīng)體系中激活劑濃度為5-20mM,緩沖液的pH值為5.5-7.0,水解反應(yīng)溫度為20-40℃,反應(yīng)時(shí)間為0.5-4h,離心條件為4℃下20000g離心20min。
4.如權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)酶促水解新橙皮苷或橙皮苷制備橙皮素的方法,其特征在于:所述步驟2)中處理沉淀的有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇或丙酮。
5.如權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)酶促水解新橙皮苷或橙皮苷制備橙皮素的方法,其特征在于:上述混粗酶液處理新橙皮苷或橙皮苷后,使得二糖苷一步轉(zhuǎn)化為苷元,轉(zhuǎn)化率達(dá)到98%以上。