一種弱堿性大豆多肽的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品科學(xué)領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及一種弱堿性大豆多肽的制備方法。技術(shù)背景
[0002]多肽是數(shù)量不等的氨基酸通過肽鍵縮合而成，氨基酸數(shù)量一般在20個(gè)以內(nèi)，多肽的一個(gè)重要來源就是蛋白質(zhì)生物法或化學(xué)法進(jìn)行降解。許多研究表明蛋白質(zhì)經(jīng)消化道酶促水解后主要是以肽的形式吸收，且比完全游離氨基酸更易、更快被機(jī)體吸收和利用。許多多肽不僅能提供人體生長(zhǎng)、發(fā)育所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而且具有獨(dú)特的生物學(xué)功能可防治血栓、高血脂和高血壓，延緩衰老、抵抗疲勞、提高機(jī)體免疫力。多肽具有極強(qiáng)的活性和多樣性，有些多肽具有原食品蛋白質(zhì)或其組成氨基酸所沒有的重要的生理機(jī)能。生物活性多肽在當(dāng)今科技界、醫(yī)學(xué)界、營(yíng)養(yǎng)學(xué)界和食品科學(xué)領(lǐng)域已經(jīng)引起了廣泛的重視。隨著研究的不斷深入，多肽領(lǐng)域在世界范圍內(nèi)日益受到關(guān)注。許多蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換成多肽后其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值將大幅度提升。
[0003]大豆中蛋白質(zhì)含量約占35-40%，是谷類作物蛋白含量的2倍以上，而且大豆蛋白氨基酸比例也較平衡，接近人體所需的理想比例，尤其是賴氨酸含量較高，因此，大豆蛋白的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值可與動(dòng)物蛋白媲美，是人類食物中理想的蛋白資源。理論上，將大豆蛋白降解成為多肽后其功能性和營(yíng)養(yǎng)功效高于大豆蛋白。制備出的大豆多肽可以作為那些通常飲食不能充分滿足蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)需求的特殊條件人員的食品，用于食品的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化和功能性食品的基料，多肽吸收率高，所以可作為腸吸收營(yíng)養(yǎng)物。一些疾病或衰老的原因食欲不振的老年人和做過外科手術(shù)的患者直接從口、胃攝入這種營(yíng)養(yǎng)物比經(jīng)靜脈注射的氨基酸更能迅速地恢復(fù)到正常營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，此外，大豆多肽還可以應(yīng)用于健美減肥食品、保健食品等。
[0004]從人體消化結(jié)構(gòu)組成及其功能角度分析，蛋白質(zhì)和多肽在胃部酸性環(huán)境下被胃蛋白酶分別降解成多肽和分子量更低的多肽，該過程降解的特征性不強(qiáng)。多肽進(jìn)入腸道后在胰臟分泌的糜蛋白酶和胰蛋白酶作用下形成寡肽和氨基酸，該過程在堿性條件下完成。氨基酸序列中含有精氨酸和賴氨酸的多肽才能被胰蛋白酶降解，而多肽序列中含有精氨酸和賴氨酸則該多肽呈弱堿性，因此，弱堿性多肽應(yīng)具有較高的吸收率和利用率，因此其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和功能性高于普通的不含精氨酸和賴氨酸等堿性氨基酸的多肽。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明旨在提供一種弱堿性大豆多肽的制備方法，根據(jù)人體蛋白質(zhì)和多肽吸收利用的特點(diǎn)，以大豆分離蛋白為原料，利用基于層析的多肽分離方法，制備出富含賴氨酸和精氨酸的弱堿性大豆多肽并制備成固體飲料。
[0006]本發(fā)明的一種弱堿性大豆多肽的制備方法，其特征在于，該制備方法包括以下步驟:
[0007](I)酶解:將大豆分離蛋白溶解，蛋白濃度控制在I?12重量％，加入蛋白酶，在35?65°C、pH 5.5?8.0條件下酶解處理I?6小時(shí)，制備出大豆多肽溶液；
[0008](2)層析分離:將步驟(I)得到的大豆多肽溶液導(dǎo)入陽離子交換層析柱，大豆多肽溶液的導(dǎo)入量為陽離子交換樹脂體積的2?12倍，采用清水淋洗層析柱后采用1-6倍陽離子交換樹脂體積的氯化鈉溶液為洗脫液，洗脫層析柱，收集全部洗脫液，該洗脫液中含有弱堿性大豆多肽；
[0009](3)脫鹽:將步驟(2)獲得的洗脫液導(dǎo)入大孔吸附樹脂層析柱，采用1-3倍大孔吸附樹脂，體積的濃度為10?90 %有機(jī)溶劑水溶液為洗脫液，洗脫大孔吸附樹脂層析柱，收集全部洗脫液；
[0010](4)濃縮:將步驟(3)獲得的全部洗脫液在減壓條件下濃縮，濃縮后多肽的濃度控制在20?30重量％ ；
[0011](5)干燥:將步驟(4)得到的洗脫液進(jìn)行噴霧干燥，粒徑控制在20-160目，含水量控制在I?6重量％，獲得弱堿性大豆多肽，每一個(gè)多肽中至少含有一個(gè)賴氨酸或組氨酸。
[0012]優(yōu)選地，所述步驟(I)的酶解過程中，加入的蛋白酶與大豆分離蛋白的比例為5:1?200:1?50:1 ο
[0013]優(yōu)選地，所述步驟(2)的層析分離過程中，氯化鈉溶液的濃度可以控制在0.1?1.5mol/L0
[0014]優(yōu)選地，所述步驟(3)脫鹽過程中，有機(jī)溶劑可以是乙醇，也可以是甲醇或丙酮。
[0015]本發(fā)明提供的一種弱堿性大豆多肽的制備方法，制備出的多肽可以作為飲料、食品添加劑或乳化劑等，其優(yōu)點(diǎn)在于制備過程簡(jiǎn)單，制備的多肽其氨基酸序列中賴氨酸或精氨酸含量高，多肽的吸收利用率高。
[0016]說明書附圖
[0017]圖1是本發(fā)明的一種弱堿性大豆多肽的制備方法流程圖具體實(shí)施例
[0018]下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體的描述，值得提出的是，實(shí)施例只是對(duì)本發(fā)明一種弱堿性大豆多肽的制備方法的說明，并不能代表本發(fā)明專利的全部，更不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，在不脫離本發(fā)明實(shí)質(zhì)的構(gòu)思的前提條件下，還可以做出若干調(diào)整或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0019]實(shí)施例1
[0020](I)酶解:將Ikg大豆分離蛋白溶解到19kg水中，大豆分離蛋白濃度為5重量％，加入枯草桿菌蛋白酶10g，在50°C和pH6.5條件下酶解處理2小時(shí)，獲得大豆多肽溶液20kg。
[0021](2)層析分離:將步驟(I)得到的大豆多肽溶液導(dǎo)入樹脂體積為2L的陽離子交換層析柱，采用6L去離子水淋洗層析柱，采用51^農(nóng)度為1.5mol/L的氯化鈉溶液進(jìn)行洗脫，收集全部洗脫液5L，該洗脫液中含有弱堿性大豆多肽。
[0022](3)脫鹽:將步驟(2)獲得的5L洗脫液導(dǎo)入樹脂體積為IL的大孔吸附樹脂層析柱，采用3L體積濃度為60%的乙醇水溶液洗脫大孔吸附樹脂層析柱，收集全部洗脫液3L。
[0023](4)濃縮:將步驟(3)獲得的全部洗脫液在減壓條件下濃縮，濃縮后多肽的濃度為
26重量％。
[0024](5)干燥:將步驟(4)得到的洗脫液進(jìn)行噴霧干燥，粒徑控制在60目，含水量為4重量％，獲得弱堿性大豆多肽，質(zhì)譜分析結(jié)果表面每一個(gè)多肽中至少含有一個(gè)賴氨酸或組氨酸。
[0025]實(shí)施例2
[0026](I)酶解:將2kg大豆分離蛋白溶解到9kg水中，大豆分離蛋白濃度為10重量％，加入枯草桿菌蛋白酶20g，在55°C和pH7.0條件下酶解處理I小時(shí)，獲得大豆多肽溶液10kg。
[0027](2)層析分離:將步驟(I)得到的大豆多肽溶液導(dǎo)入樹脂體積為IL的陽離子交換層析柱，采用2L去離子水淋洗層析柱，采用21^農(nóng)度為1.0mol/L的氯化鈉溶液進(jìn)行洗脫，收集全部洗脫液2L，該洗脫液中含有弱堿性大豆多肽。
[0028](3)脫鹽:將步驟(2)獲得的2L洗脫液導(dǎo)入樹脂體積為500ml的大孔吸附樹脂層析柱，采用IL體積濃度為90%的乙醇水溶液洗脫大孔吸附樹脂層析柱，收集全部洗脫液1L。
[0029](4)濃縮:將步驟(3)獲得的全部洗脫液在減壓條件下濃縮，濃縮后多肽的濃度為
20重量％。
[0030](5)干燥:將步驟(4)得到的洗脫液進(jìn)行噴霧干燥，粒徑控制在80目，含水量為3重量％，獲得弱堿性大豆多肽，質(zhì)譜分析結(jié)果表面每一個(gè)多肽中至少含有一個(gè)賴氨酸或組氨酸。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種弱堿性大豆多肽的制備方法，其特征在于，該制備方法包括以下步驟: (1)酶解:將大豆分離蛋白溶解，蛋白濃度控制在I?12重量％，加入蛋白酶，在35?65°C、pH 5.5?8.0條件下酶解處理I?6小時(shí)，制備出大豆多肽溶液； (2)層析分離:將步驟(I)得到的大豆多肽溶液導(dǎo)入陽離子交換層析柱，大豆多肽溶液的導(dǎo)入量為陽離子交換樹脂體積的2?12倍，采用清水淋洗層析柱后采用1-6倍陽離子交換樹脂體積的氯化鈉溶液為洗脫液，洗脫層析柱，收集全部洗脫液，該洗脫液中含有弱堿性大豆多肽； (3)脫鹽:將步驟(2)獲得的洗脫液導(dǎo)入大孔吸附樹脂層析柱，采用1-3倍大孔吸附樹月旨，體積的濃度為10?90 %有機(jī)溶劑水溶液為洗脫液，洗脫大孔吸附樹脂層析柱，收集全部洗脫液； (4)濃縮:將步驟(3)獲得的全部洗脫液在減壓條件下濃縮，濃縮后多肽的濃度控制在20?30重量％ ； (5)干燥:將步驟(4)得到的洗脫液進(jìn)行噴霧干燥，粒徑控制在20-160目，含水量控制在I?6重量％，獲得弱堿性大豆多肽，每一個(gè)多肽中至少含有一個(gè)賴氨酸或組氨酸。2.如權(quán)利要求1所述的一種弱堿性大豆多肽的制備方法，其特征在于該弱堿性多肽中每一個(gè)多肽中至少含有一個(gè)賴氨酸或組氨酸。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種弱堿性大豆多肽的制備方法，其包括：(1)酶解：將大豆分離蛋白溶解，蛋白濃度控制在1～12重量％，加入蛋白酶，在35～65℃、pH5.5～8.0條件下酶解處理1～6小時(shí)，制備出大豆多肽溶液；(2)層析分離：將步驟(1)得到的大豆多肽溶液導(dǎo)入陽離子交換層析柱，大豆多肽溶液的導(dǎo)入量為陽離子交換樹脂體積的2～12倍，采用清水淋洗層析柱后采用1-6倍陽離子交換樹脂體積的氯化鈉溶液為洗脫液；(3)脫鹽：將步驟(2)獲得的洗脫液導(dǎo)入大孔吸附樹脂層析柱，采用1-3倍大孔吸附樹脂，體積的濃度為10～90％有機(jī)溶劑水溶液為洗脫液，洗脫大孔吸附樹脂層析柱；(4)濃縮：將步驟(3)獲得的全部洗脫液在減壓條件下濃縮，濃縮后多肽的濃度控制在20～30重量％；(5)干燥。
【IPC分類】C07K1/18, C12P21/06
【公開號(hào)】CN105420321
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510861343
【發(fā)明人】蔡龍麟
【申請(qǐng)人】遼寧三合酒業(yè)有限公司
【公開日】2016年3月23日
【申請(qǐng)日】2015年12月1日