專(zhuān)利名稱(chēng)：哌嗪化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及口服對(duì)?；鵆oA膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)具有強(qiáng)抑制作用、對(duì)高脂血 癥、各種動(dòng)脈硬化癥等有預(yù)防及治療作用的2，4-二(三氟乙氧基)吡啶化合物以及含有該 化合物的藥物及其制造中間體。
背景技術(shù)：
?；鵆oA膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)是促進(jìn)由膽固醇合成膽固醇酯的酶，是對(duì)膽固 醇的代謝和在消化道內(nèi)的吸收具有重要作用的酶。雖然目前作為抗高血脂癥藥物、抗動(dòng)脈 硬化藥物的大多數(shù)ACAT抑制劑是作用于小腸和肝臟的ACAT酶來(lái)促進(jìn)血中膽固醇的降低 的，但是它有引發(fā)腸道出血、腸管障礙、腹瀉和肝損傷的副作用的問(wèn)題。最近的研究表明，通過(guò)抑制在形成動(dòng)脈硬化病灶中起重要作用的巨噬細(xì)胞的泡沫 化，可期待動(dòng)脈硬化病灶自身的萎縮。即在粥樣動(dòng)脈硬化的病灶中觀察到泡沫化的巨噬細(xì) 胞(膽固醇酯作為脂肪滴在細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存)，該巨噬細(xì)胞的泡沫化與病變的進(jìn)展密切相關(guān)。另 外，在動(dòng)脈硬化的病變部位，血管壁中存在的ACAT活性亢進(jìn)，由于膽固醇酯儲(chǔ)存在血管壁 中，因此血管壁的ACAT活性和動(dòng)脈硬化癥密切相關(guān)(非專(zhuān)利文獻(xiàn)1)。因此，由血管壁中的ACAT抑制劑引起的對(duì)膽固醇酯化的抑制，與游離膽固醇向血 管壁的細(xì)胞內(nèi)的儲(chǔ)存相關(guān)，由于被儲(chǔ)存的游離膽固醇通過(guò)高密度脂蛋白(HDL)從細(xì)胞內(nèi)游 離出來(lái)轉(zhuǎn)送至肝臟(由HDL形成的逆轉(zhuǎn)運(yùn))被代謝，因此可期待動(dòng)脈硬化病變部位的膽固 醇酯的儲(chǔ)存被抑制(非專(zhuān)利文獻(xiàn)2)。這樣抑制血管壁中存在的ACAT的ACAT抑制劑被認(rèn)為 具有直接的抗動(dòng)脈硬化作用。首先，本發(fā)明者認(rèn)為選擇性地抑制血管壁中存在的ACAT，就可以成為比抑制巨噬 細(xì)胞泡沫化的藥物副作用更小的動(dòng)脈硬化癥的預(yù)防 治療劑，經(jīng)過(guò)認(rèn)真的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，下 面的通式(A) (式中，Ar是可具有取代基的芳香基，

硫原子，Y表示硫原子，Z表示單鍵等，1表示0 15的整數(shù)，m表示2或3的整數(shù)，n表示 1 3的整數(shù))表示的化合物、其鹽或者它們的溶劑化物作為高脂血癥以及動(dòng)脈硬化癥的預(yù) 防 治療劑有用，是可選擇性抑制血管中存在的ACAT的化合物(專(zhuān)利文獻(xiàn)1)。非專(zhuān)利文獻(xiàn)1 :Exp. Mol. Pathol.，44，329-339 (1986)非專(zhuān)利文獻(xiàn)1 :Biochim.Biophys. Acta. 200115,1530(1) :111_122專(zhuān)利文獻(xiàn)1 國(guó)際公開(kāi)第98/54153號(hào)小冊(cè)子發(fā)明的揭示發(fā)明要解決的課題專(zhuān)利文獻(xiàn)1記載的化合物中，確認(rèn)了下式(B)所示的化合物及其鹽具有高水溶性 和強(qiáng)ACAT抑制作用，對(duì)各種動(dòng)物模型均具有顯著的藥效。但是，以化合物(B)為代表的專(zhuān) 利文獻(xiàn)1中記載的化合物，雖然以在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的ACAT抑制作用為根據(jù)的藥效均優(yōu)良，然 而在使用人肝臟微粒體的體外試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)代謝迅速，原型的殘存率低。這些事實(shí)表明人體 中這些化合物的血濃度還是未知的。今年，從藥物相互作用的觀點(diǎn)來(lái)看，由于抗代謝性越高 的化合物可成為安全性更高的藥物，因此希望出現(xiàn)在人肝臟微粒體中具有更高抗代謝性的 化合物。但是，化合物(B)具有多個(gè)一般在有機(jī)體內(nèi)易受代謝的官能基，由于這些官能基 被認(rèn)為對(duì)藥理活性的表現(xiàn)具有重要作用，因此維持ACAT抑制作用且提高代謝穩(wěn)定性的難 度是非常大的。 解決課題的方法因此，本發(fā)明者為發(fā)現(xiàn)能改善對(duì)人肝臟微粒體的抗代謝性、口服吸收良好、且可得 到高血濃度的化合物而進(jìn)行了各種研究，結(jié)果意外發(fā)現(xiàn)下式(1)所示的2，4-二(三氟乙氧 基)吡啶化合物與化合物⑶相比雖然水溶性較低，但是卻顯示了較高的血濃度(Cmax)和 較大的血濃度時(shí)間曲線(xiàn)下面積(AUC)，以及良好的口服吸收性。另外，由于其還顯示了優(yōu)良 的ACAT抑制活性，因此是作為高脂血癥以及動(dòng)脈硬化癥的預(yù)防 治療劑有用的化合物，從 而完成了本發(fā)明。S卩，本發(fā)明提供了下述通式(1) (式中，X1表示氟原子或氫原子)所示的2，4_ 二(三氟乙氧基)吡啶化合物或其鹽及其制造方法。另外，本發(fā)明提供了下述通式(2) (式中，X1表示氟原子或氫原子)所示的哌嗪化合物或其鹽。另外，本發(fā)明提供了下述通式(4) (式中，R1表示氫原子、氯乙?；?、溴乙?；虻庖阴；?所示的吡啶化合物或其鹽。另外，本發(fā)明提供了 2，4_ 二(2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基_3_硝基吡啶。另外，本發(fā)明提供了 N-[2，4- 二(2，2，2_三氟乙氧基)_6_甲基吡 啶-3-基]-2-[4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基]乙酰胺。另外，本發(fā)明提供了由上述通式(1)所示化合物或其鹽為有效成分的藥物。另外，本發(fā)明提供了上述通式(1)所示化合物或其鹽在藥物制備中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了動(dòng)脈硬化癥的處置方法，該方法的特征在于，將有效量的上述通 式(1)所示的化合物或鹽給藥。發(fā)明的效果本發(fā)明化合物(1)選擇性地抑制血管壁中存在的ACAT，具有優(yōu)良的人肝臟微粒體 代謝穩(wěn)定性，顯示良好的口服吸收性，作為高脂血癥以及動(dòng)脈硬化癥的預(yù)防或者治療藥有用。附圖的簡(jiǎn)單說(shuō)明[

圖1]是顯示化合物(la)、(lb)以及化合物⑶鹽酸鹽對(duì)人肝臟微粒體代謝的 穩(wěn)定性的圖。實(shí)施發(fā)明的最佳方式
5
本發(fā)明化合物(1)在結(jié)構(gòu)上的特征是，在苯并咪唑環(huán)上具有1個(gè)或2個(gè)氟原子，并 且在吡啶環(huán)上具有2個(gè)2，2，2-三氟乙氧基。這種特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)在專(zhuān)利文獻(xiàn)1中完全沒(méi) 有記載。本發(fā)明包含以下兩種化合物以及它們的鹽。
(Ib)作為本發(fā)明化合物(1)的鹽，可例舉鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽等無(wú)機(jī)酸鹽， 以及甲磺酸鹽、馬來(lái)酸鹽、富馬酸鹽、枸櫞酸鹽、丁酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、抗壞血酸鹽、蘋(píng) 果酸鹽、扁桃酸鹽、水楊酸鹽、泛酸鹽、鞣酸鹽、乙二磺酸鹽、苯磺酸鹽、P"甲苯磺酸鹽、谷氨 酸鹽、天冬氨酸鹽、三氟醋酸鹽、雙羥萘酸鹽、葡糖酸鹽等有機(jī)酸鹽。另外，本發(fā)明化合物(1)或其鹽也可以是溶劑化物的狀態(tài)。溶劑化物是加成了在 制造、精制等時(shí)用到的溶劑、例如水、醇等的化合物，只要是對(duì)ACAT抑制作用等沒(méi)有不良影 響的物質(zhì)，就沒(méi)有特別的限制。作為溶劑化物較好為水合物。本發(fā)明化合物(1)例如可通過(guò)以下制造方法制得。 (式中，R表示保護(hù)基團(tuán)，Y表示烷基或芳磺酰基，X1表示氫原子或氟原子，X2表示 氯原子、溴原子或碘原子)即，使2，4_ 二氯-6-甲基-3-硝基吡啶(5)與2，2，2_三氟乙醇反應(yīng)得到化合物 (6)，還原該硝基得到化合物(7)，再通過(guò)使其與鹵代乙酸或其反應(yīng)性衍生物反應(yīng)得到化合 物(3)。另一方面，使保護(hù)氨基的哌嗪乙醇類(lèi)(8)磺?；玫交衔?9)，使該化合物(9) 與硫醇衍生物(IOa)反應(yīng)得到化合物(11)。再于磷化物存在下，使化合物(8)與硫醇衍生 物(IOa)或(IOb)反應(yīng)也可得到化合物(11)。通過(guò)使該化合物(11)的保護(hù)基(R)脫離可 得到化合物(2)。使以上得到的化合物(2)與化合物⑶反應(yīng)可得到本發(fā)明化合物⑴。因此，上述化合物(2)、下述化合物(4)以及上述化合物(2，4-二(2，2，2-三氟乙 氧基)-6_甲基-3-硝基吡啶(6))作為本發(fā)明化合物⑴的制造中間體有用。 (式中、R1表示氫原子、氯乙?；?、溴乙?；虻庖阴；?
以下將逐個(gè)說(shuō)明上述各反應(yīng)工序。2，4_ 二氯-6-甲基-3-硝基吡啶(5)與2，2，2_三氟乙醇的反應(yīng)是在作為溶劑 的2，2，2_三氟乙醇中或2，2，2_三氟乙醇和二甲基甲酰胺(DMF)、四氫呋喃(THF)、二甲亞 砜(DMSO)等的混合溶劑中，在碳酸鉀、碳酸鈉等碳酸堿金屬，氫氧化鉀、氫氧化鈉等氫氧化 堿金屬或氫化鈉、氫化鉀、氫化鋰等氫化堿金屬等堿存在下，在室溫到回流溫度下維持5小 時(shí) 24小時(shí)，較好的是在回流溫度下維持15 20小時(shí)而進(jìn)行?；衔?6)的還原較好為，1)由連二亞硫酸鈉、硫化鈉、硫化氫鈉、硫化氫等含硫 還原劑引起的反應(yīng)，2)由鋅、鐵、氯化亞錫等金屬還原劑引起的還原反應(yīng)，或3)氫氣氛下的 催化還原反應(yīng)。由含硫還原劑引起的反應(yīng)，例如可通過(guò)在異丙醇、乙醇、THF等溶劑中溶解 化合物(6)，在80°C添加含硫還原劑的水溶液反應(yīng)10分鐘 2小時(shí)來(lái)進(jìn)行。由金屬還原劑 引起的反應(yīng)，例如可通過(guò)在乙醇、異丙醇等醇溶劑、醋酸以及它們的含水溶劑中溶解化合物 (6)，在0 100°C反應(yīng)30分鐘至24小時(shí)來(lái)進(jìn)行。反應(yīng)可根據(jù)必要添加鹽酸、硫酸等酸。另 外，催化還原反應(yīng)通過(guò)在二噁烷、醋酸、甲醇、乙醇、異丙醇等單一或混合溶劑中溶解化合物 (6)，在拉奈鎳、鈀碳、氫氧化鈀、鈀黑等催化劑存在下，于氫氣氛下，在0 50°C反應(yīng)30分 鐘 12小時(shí)，較好為在室溫下反應(yīng)30分鐘 3小時(shí)來(lái)進(jìn)行。作為與化合物(7)反應(yīng)的鹵代乙酸，可例舉氯乙酸、溴乙酸、碘乙酸。作為鹵代乙 酸的反應(yīng)性衍生物，可例舉鹵代乙酰鹵、鹵代乙酸酐等。較好為使化合物(7)和鹵代乙酰鹵 反應(yīng)?；衔?7)和鹵代乙酰鹵的反應(yīng)，可通過(guò)例如在二氯甲烷、氯仿、醋酸乙酯、乙腈、甲 苯等溶劑中，在N，N- 二甲替苯胺、三乙胺、吡啶、4- 二甲基氨基吡啶、4-吡咯烷吡啶等堿的 存在下，于0 50°C反應(yīng)10分鐘 5小時(shí)，較好為在0°C反應(yīng)10 60分鐘而進(jìn)行。由哌嗪乙醇類(lèi)(8)到化合物(11)的合成可采用利用烷基或芳磺?；磻?yīng)的路線(xiàn) a和利用磷化物引起反應(yīng)的路線(xiàn)b。路線(xiàn)a中，哌嗪乙醇類(lèi)(8)的烷基或芳磺?；磻?yīng)是通過(guò)在DMF、THF、醋酸乙酯、 乙腈等溶劑中，于三乙胺、吡啶、N，N-二異丙基乙胺、N，N-二甲替苯胺、4-二甲基氨基吡啶 等堿的存在下，使用甲磺酰氯、苯磺酰氯、P"甲苯磺酰氯等磺酰氯作為烷基或芳磺酰化劑， 在0 50°C反應(yīng)30分鐘 3小時(shí)反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。在此，作為哌嗪乙醇類(lèi)⑶的氨基的保護(hù)基(R)可使用在肽合成中所用的各種保 護(hù)基。作為較好的保護(hù)基可例舉芐氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、叔丁氧基羰基等烷氧 基羰基以及甲酰基等。化合物(9)和化合物(IOa)的反應(yīng)通過(guò)在DMF、DMS0、乙腈等溶劑中，于碳酸鉀、碳 酸鈉等堿以及18-冠醚-6等催化劑的存在下，在室溫 100°C反應(yīng)1 5小時(shí)，較好為在 50 80°C反應(yīng)1 2小時(shí)來(lái)進(jìn)行。路線(xiàn)b是通過(guò)在磷化物存在下，使哌嗪乙醇類(lèi)(8)和硫醇衍生物(IOa)或(IOb) 反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。作為磷化物，可例舉在光延反應(yīng)中所用的膦試劑，該膦試劑和偶氮系試劑或馬來(lái) 酸二甲酯、N，N, N’，N’ -四甲基富馬酰胺等丁二酸試劑形成的磷試劑，鱗內(nèi)鐺鹽試劑等。作為該路線(xiàn)b的較好方式，可例舉1)在膦試劑和偶氮系試劑或馬來(lái)酸二甲酯、N, N，N’，N’ -四甲基富馬酰胺等丁二酸試劑存在下，使硫醇衍生物(IOa)反應(yīng)的方法(A法)； 2)在鱗內(nèi)鐺鹽試劑存在下，使硫醇衍生物(IOa)反應(yīng)的方法(B法)；3)在膦試劑的存在下，
8使硫醇衍生物(IOb)反應(yīng)的方法(C法)。<A 法 >A法可通過(guò)在反應(yīng)溶劑中溶解化合物(8)、硫醇衍生物(IOa)以及膦試劑，在其中 添加偶氮系試劑或丁二酸試劑，在氬氣或氮?dú)夥障拢?°C 10(TC，較好為室溫 80°C反 應(yīng)2小時(shí) 24小時(shí)來(lái)進(jìn)行。作為本反應(yīng)中所用的膦試劑，可例舉三甲基膦、三乙基膦、三丙基膦、三異丙基膦、 三丁基膦、三異丁基膦、三環(huán)己基膦等三烷基膦以及三苯膦、二苯膦基聚苯乙烯等三芳基 膦，其中較好為三甲基膦、三丁基膦、三苯膦。作為偶氮系試劑，可例舉偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)、1，1’ -偶氮二(N，N-二甲基 甲酰胺)(TMAD)、1，1，_ (偶氮二羰基)二哌啶(ADDP)、1，1，-偶氮二(N，N-二異丙基甲酰 胺)(TIPA)、1，6-二甲基-1，5，7-六氫-1，4，6，7-四腫-2，5-二酮(1，6-dimethyl-l，5， 7-hexahydro-l，4，6，7-tetrazocin-2，5-dione，DHTD)等，特好為偶氮二羧酸二乙酯。作為反應(yīng)溶劑可使用DMF、THF、二噁烷、乙腈、硝基甲烷、丙酮、醋酸乙酯、苯、氯苯、 甲苯、氯仿、二氯甲烷等，其中較好為DMF、THF、二噁烷、乙腈。特好為DMF、THF。<B 法 >B法可通過(guò)在反應(yīng)溶劑中溶解化合物(8)、硫醇衍生物(IOa)以及鱗內(nèi)鐺鹽試劑， 在氬氣或氮?dú)夥障?，于室?120°C較好為80°C 100°C反應(yīng)2小時(shí) 12小時(shí)來(lái)進(jìn)行。作為本反應(yīng)中所用的鱗內(nèi)鐺鹽試劑，可例舉烷?；鶃喖谆榛?、烷?；鶃?甲基三芳基正膦、烷氧基羰基亞甲基三烷基正膦、烷氧基羰基亞甲基三芳基正膦、氰基亞甲 基三烷基正膦、氰基亞甲基三芳基正膦等。在此，作為三烷基可例舉三甲基、三乙基、三丙 基、三異丙基、三丁基、三異丁基、三環(huán)己基等，作為三芳基可例舉三苯基、二苯基聚乙烯等。另外，本反應(yīng)也可以使用通過(guò)在反應(yīng)溶劑中添加化合物(8)、硫醇衍生物(IOa)、 堿以及鹵化鱗試劑，在反應(yīng)系中生成鱗內(nèi)鐺鹽試劑的方法。作為在該情況下使用的鹵化鱗試劑，可例舉鹵化(氰基甲基)三烷基鱗、鹵化(氰 基甲基)三芳基鱗、商化(烷基羰基甲基)三烷基鱗、商化(烷基羰基甲基)三芳基鱗、鹵 化(烷氧基羰基甲基)三烷基鱗、商化(烷氧基羰基甲基)三芳基鱗等。上述鹵化鱗試劑中，鹵化(氰基甲基)三烷基鱗、鹵化(氰基甲基)三芳基鱗可通 過(guò)使相應(yīng)的鹵代乙腈和相應(yīng)的三烷基膦或三芳基膦反應(yīng)而調(diào)制(f卜， 卜π >、57卷、 5451-5454頁(yè)、2001年)，其它的商化鱗試劑可通過(guò)使相應(yīng)的烷酰基商代甲基、烷氧基羰基 鹵代甲基與相應(yīng)的三烷基膦或三芳基膦同樣進(jìn)行反應(yīng)而調(diào)制。作為在此所用的三烷基膦以及三芳基膦，可例舉與A法所示相同的物質(zhì)，其中較 好為三甲基膦、三丁基膦、三苯基膦，特好為三甲基膦。作為上述烷?；u代甲基的烷酰基，較好為甲酰基、乙酰基、丙?；⒍□；龋?中較好為乙?；?、丙酰基，作為烷氧基羰基鹵代甲基的烷氧基，可例舉甲氧基、乙氧基、丙氧 基、丁氧基等，其中較好為甲氧基、乙氧基、丁氧基。另外，作為鹵原子較好為氯、溴、碘。作為堿可例舉三乙胺、N，N-二異丙基乙胺、1，4_ 二氮雜二環(huán)[2，2，2]辛烷 (DABCO)、1，8_ 二氮雜二環(huán)[5,4,0]十一碳 _7_ 烯(DBU)、1，5-二氮雜二環(huán)[4,3,0]九 碳-5-烯(DBU)等有機(jī)堿，碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸銫、碳酸鋰、二異丙基胺基鋰、六甲基硅氮化鉀(potassium hexamethyldisilazide)等無(wú)機(jī)堿，其中較好為N，N-二異丙基乙胺、碳酸 鉀、二異丙基胺基鋰、六甲基硅氮化鉀，特好為N，N-二異丙基乙胺、碳酸鉀。作為反應(yīng)溶劑，較好為二噁烷、THF、甲苯、苯、DMF、DMS0、乙腈、丙腈等，特好為丙腈。 C法通過(guò)在與A法相同的反應(yīng)溶劑中溶解化合物(8)、硫醇衍生物(IOb)以及膦試 劑，在氬氣或氮?dú)夥障拢谑覝?100°c較好為60V 100°C反應(yīng)2小時(shí) 48小時(shí)來(lái)進(jìn)行。本反應(yīng)中所用的膦試劑是與A法所示相同的三烷基膦以及三芳基膦，具體可例舉
三甲基膦、三乙基膦、三丙基膦、三異丙基膦、三丁基膦、三異丁基膦、三環(huán)己基膦、三苯基 膦、二苯膦基聚苯乙烯等，其中較好為三甲基膦、三丁基膦、三苯基膦，特好為三甲基膦、三 苯基膦。另外，硫醇衍生物(IOa)可通過(guò)上述專(zhuān)利文獻(xiàn)1中記載的方法或以此為基礎(chǔ)的方 法而制造。硫醇衍生物(IOb)可由該硫醇衍生物(IOa)容易地制得?；衔?11)的脫保護(hù)反應(yīng)可通過(guò)與保護(hù)基相對(duì)應(yīng)的已知方法，例如加水分解、還 原反應(yīng)等來(lái)進(jìn)行。以上所得的化合物(2)和化合物(3)的反應(yīng)通過(guò)于碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳 酸氫鈉等堿的存在下，在單一的DMF、THF、乙腈或它們的含水溶劑中，于室溫 50°C反應(yīng)5 小時(shí) 30小時(shí)，較好為在室溫下反應(yīng)10 20小時(shí)來(lái)進(jìn)行。另外，本發(fā)明化合物(1)也可通過(guò)下述反應(yīng)式所示的方法制得，即，使1-(2_羥乙 基)哌嗪(12)和鹵代乙酰胺化合物(3)反應(yīng)得到化合物(13)，再于磷化合物存在下使化合 物(13)與硫醇衍生物(IOa)或(IOb)反應(yīng)而得。
ho n」-6^ Η0 NJ ο O^cfs
(32)(13)
。CF3
(他)或(他[huYi^3 磷化合物
(1)(式中、X1與上述相同)化合物(12)和化合物(3)的反應(yīng)是以由化合物(2)合成化合物(1)的方法為基 準(zhǔn)進(jìn)行的?；衔?13)與硫醇衍生物(IOa)或(IOb)的反應(yīng)是以化合物(8)和硫醇衍生物 (IOa)或(IOb)的反應(yīng)為基準(zhǔn)進(jìn)行的。因此，上述化合物(N-[2，4- 二(2，2，2_三氟乙氧基)_6_甲基吡 啶-3-基]-2-[4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基]乙酰胺(13))作為本發(fā)明化合物(1)的制造 中間體有用。所得的本發(fā)明化合物(1)的分離精制方法可通過(guò)適宜組合洗滌、萃取、重結(jié)晶、各 種色譜法等來(lái)進(jìn)行。另外，轉(zhuǎn)化至前述酸加成鹽的變換可通過(guò)常用方法進(jìn)行。
10
探討在體外對(duì)人肝臟微粒體的代謝時(shí)，如圖1所示，30分中后原型的殘存率相對(duì) 于化合物(B)鹽酸鹽的16%，化合物(Ia)為27%，化合物(Ib)顯示62%的較高值。由此 可以理解本發(fā)明化合物(1)對(duì)人肝臟微粒體的抗代謝性被大幅改善。另外，研究對(duì)水的溶解度時(shí)，如表3所示，相對(duì)于化合物⑶鹽酸鹽，本發(fā)明化合物 (1)的溶解度大幅下降。由此可見(jiàn)本發(fā)明化合物(1)的口服吸收性成為問(wèn)題。但是，使用雌雄大鼠進(jìn)行口服實(shí)驗(yàn)時(shí)，相對(duì)于化合物(B)鹽酸鹽，本發(fā)明化合物 (1)卻意外地顯示了較高的值，血濃度(Cmax)為化合物⑶鹽酸鹽的2 3倍，藥時(shí)曲線(xiàn)下 總面積(AUC)為化合物(B)鹽酸鹽的2 4倍。由此確認(rèn)，與化合物(B)鹽酸鹽相比，本發(fā) 明化合物(1)顯示了較高的口服吸收性。此外，體外ACAT抑制活性如表1所示，本發(fā)明化合物(1)顯示與化合物⑶鹽酸 鹽相同強(qiáng)度的抑制活性。從以上的結(jié)果可知，由于本發(fā)明化合物(1)顯示與化合物⑶相同強(qiáng)度的ACAT抑 制活性，與化合物(B)相比顯示了較高的人肝臟微粒體抵抗性以及較高的口服吸收性，因 此，本發(fā)明化合物(1)作為高脂血癥以及動(dòng)脈硬化癥的預(yù)防·治療劑有用。本發(fā)明化合物(1)通過(guò)其優(yōu)良的ACAT抑制作用，可成為高脂血癥、動(dòng)脈硬化癥、頸 部以及腦動(dòng)脈硬化癥、腦血管障礙、局部缺血性心臟疾病、局部缺血性腸疾病、冠狀動(dòng)脈硬 化癥、腎硬化癥、動(dòng)脈硬化性腎硬化癥、惡性腎硬化癥、急性腸道膜血管閉塞癥、慢性腸管絞 痛、局部缺血性大腸炎、大動(dòng)脈瘤、閉塞性動(dòng)脈硬化癥(ASO)等的預(yù)防以及治療藥。使用本發(fā)明化合物(1)作為藥物時(shí)，可單獨(dú)使用本發(fā)明化合物(1)或其鹽，或者可 使用在藥學(xué)上允許的賦形劑、粘合劑、稀釋劑等載體，制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、粉末劑、注 射劑、栓劑等劑型。這些制劑可通過(guò)公知的方法制造。例如制成口服制劑時(shí)，可通過(guò)將本發(fā) 明化合物(1)與淀粉、甘露醇、乳糖等賦形劑，羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素等粘合劑，結(jié) 晶纖維素、羧甲基纖維素鈣等崩解劑，滑石粉、硬酯酸酸鎂等潤(rùn)滑劑，輕質(zhì)硅酸酐等流動(dòng)性 提高劑等適當(dāng)組合形成的處方來(lái)制造。本發(fā)明的藥物可以經(jīng)口服或非口服給藥，較好為口服給藥。本發(fā)明的藥物的給藥 量根據(jù)患者的體重、年齡、性別、癥狀等不同而不同，本發(fā)明化合物(1)的通常成人1日的給 藥量為1 500mg，較好為5 200mg，較好為分1 3次給藥。
實(shí)施例以下，將例舉實(shí)施例更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明技術(shù)的范圍并不限于實(shí)施例。制造例15，6-二氟-2-巰基苯并咪唑的制造在醋酸(IOOmL)以及濃鹽酸(2. 3mL)中溶解4，5_ 二氟_2_硝基苯胺(5. 75g， 33. 03mmol)，一邊在冰浴中劇烈攪拌一般在10分鐘之內(nèi)加入鋅粉(6. 91g，105. 6mmol)。在 相同溫度下攪拌20分鐘后、再于室溫?cái)嚢?30分鐘。在相同的溫度下再在5分鐘內(nèi)加入鋅 粉(1. 20g, 18. 35mmol)，于相同溫度下攪拌30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)液，在飽和碳酸氫鈉水中 中和所得殘?jiān)?，用硅藻土進(jìn)行過(guò)濾。用氯仿萃取濾液，再用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層。用無(wú)水 硫酸鈉干燥后減壓濃縮，得到褐色油狀物質(zhì)(4. 73g)。在乙醇(200mL)中溶解該褐色油狀物質(zhì)，添加0_乙基黃原酸鉀(15. 75g，
1198. 25mmol)，加熱回流14小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液，在醋酸乙酯-lmol/L鹽酸中萃取所得殘 渣，用飽和食鹽水清洗有機(jī)層。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，減壓濃縮，通過(guò)氯仿-己烷使所得殘 渣結(jié)晶化，得到呈淡褐色粉末的5，6-二氟-2-巰基苯并咪唑(5. 58g，計(jì)算収率為91% )。制造例21-叔丁氧基羰基-4-[2-(5，6_ 二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪的制造在1-叔丁氧基羰基-4-(2-羥乙基)哌嗪(7.40g，32. 13mmol)的 THF(IOOmL)溶 液中，于冰冷卻攪拌下依次加入三乙胺(4. 36g，43. 09mmol)、4_ 二甲基氨基吡啶(200mg， 1. 64mmol)以及甲磺酰氯(7. 40g，38. 76mmol)。升溫至室溫后攪拌50分鐘。過(guò)濾反應(yīng)液，減 壓濃縮濾液，在DMF (200mL)中溶解所得殘?jiān)?，在室溫下依次添?，6- 二氟-2-巰基苯并咪 唑(5. OOg, 26. 86mmol)、碳酸鉀(8. 64g, 62. 51mmol)以及 18-冠醚-6 (500mg, 1. 92mmol)，于 80°C攪拌90分鐘。減壓濃縮反應(yīng)液后，用硅膠柱色譜法(硅膠200g，己烷丙酮=8 1 1 1)精制所得殘?jiān)Ｓ帽?乙醚-己烷使其結(jié)晶化，得到1-叔丁氧基羰基-4-[2-(5， 6- 二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪(7. 26g，収率68% )的無(wú)色結(jié)晶。mp 192. 3-193. 0°CIR(KBr) :3061，2976，2836，1672，1475，1427 (cnT1) ·1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ 1. 50 (9Η, s), 2. 51-2. 68 (4H, m) ,2. 94 (2H, t, J = 5. 4Hz)，3. 28 (2H, t, J = 5. 4Hz)，3. 45-3. 65 (4H, m)，6. 85-7. 62 (2H, m) ·實(shí)施例11-[2-(5，6-二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪· 3三氟醋酸鹽的制造于冰冷卻攪拌下，用15分鐘在三氟醋酸(50mL)中添加、溶解1_叔丁氧基羰 基-4-[2-(5，6-二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪(7. 26g，18. 22mmol)。在冰冷卻下攪 拌10分鐘后，向反應(yīng)液中添加乙醚(IOOmL)以及己烷(IOOmL)，過(guò)濾分離所生成的結(jié)晶。用 乙醇-乙醚對(duì)所得結(jié)晶進(jìn)行重結(jié)晶，得到呈淡黃色粉末的1-[2-(5，6_ 二氟苯并咪唑-2-基 硫代)乙基]哌嗪· 3三氟醋酸鹽(9. 58g，収率82% )。mp 141. 2-142. 9°CIR(KBr) :3417，3026，2749，2483，1671，1484 (cm—1) ·1H-NMR(400MHz, DMS0_d6) δ 2. 78-3. 26 (10Η, m) , 3. 49 (2Η, t, J = 7. 2Ηζ), 7. 51 (2Η, t, J = 9. OHz)，8. 76 (2Η, m) ·制造例31-[2-(5，6-二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]_4_甲?；哙旱闹圃煸诒?50mL)中溶解1_甲酰基_4_(2_羥乙基)哌嗪(1. llg，7. Ommol)、5，6-二 氟-2-巰基苯并咪唑(1.30g，7. Ommol)、二異丙基乙胺(3. 62g，28. Ommol)，添加氰基甲基三 甲基碘化鱗(6. 80g，28. Ommol)，在氬氣氛下于92°C攪拌1小時(shí)。放冷后，注入水(IOOmL)， 用氯仿(IOOmLX3)萃取。用飽和食鹽水洗浄有機(jī)層，再用無(wú)水硫酸鈉干燥后，減壓下濃縮。 用丙酮-乙醚使所得粗生成物結(jié)晶化，得到呈黃色結(jié)晶性粉末的1-[2-(5，6_ 二氟苯并咪 唑-2-基硫代)乙基]-4-甲酰基哌嗪1. 78g(収率78% )。mp 197. 0-198. 0°CIR(KBr)CnT1 =3441,2825,1648,1476,1431,1363.1H-WR (DMS0-d6) δ 2. 38 (2Η, t，J = 5. 1Hz)，2. 44 (2Η，t，J = 5. OHz)，2. 69 (2H，t, J = 7. OHz)，3. 23-3. 38 (4H, m)，3. 41 (2H, t, J = 7. OHz)，7，38-7. 58 (2H, m)，7. 97 (1H, s)， 12. 8(1H s).MS (m/z) :326 (M+)，140 (100) ·實(shí)施例21-[2-(5，6-二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪的制造在甲醇(20mL)中溶解1-[2_(5，6_ 二氟苯并咪唑_2_基硫代)乙基]_4_甲?；?哌嗪(1. 70g，5. 2mmol)，添加12N鹽酸(2mL)，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，減壓濃縮反應(yīng)液，加入飽 和氨_甲醇溶液在室溫?cái)嚢?分鐘。將減壓濃縮溶劑所得的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(氯仿 飽和氨-甲醇=100 3)精制，得到呈褐色油狀物的1-[2-(5，6_ 二氟苯并咪唑-2-基硫 代)乙基]哌嗪1. 40g(収率90% )。IR(KBr)CnT1 :2925，2853，1664，1602，1478，1435，1364.1H-WR(CDCl3) δ 2. 61-2. 82 (4H，m)，3. 00 (2H，t, J = 4. 8Hz)，3. 10 (4H，t, J = 4. 8Hz)，3. 16 (2H, t, J = 4. 8Hz)，7. 16-7. 42 (2H, m) ·MS (m/z) :298 (M+)，70 (100) ·制造例42，4-二 (2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基-3-硝基吡啶的制造:在2，2，2-三氟乙醇(250mL)中溶解2，4_ 二氯_6_甲基_3_硝基吡啶(30g， 144.9mmol)，添加碳酸鉀(50g，361. Smmol)，加熱回流21小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)液，用氯仿萃 取。用飽和食鹽水洗浄有機(jī)層，在用無(wú)水硫酸鈉干燥后、經(jīng)減壓濃縮得到呈淡黃色固體的2， 4-二(2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基-3-硝基吡啶(45.40g，収率94% )。mp 72. 8-73. 2 °CIR(KBr) :3432，3111，2975，1610，1585，1535 (cnT1) ·1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ :2· 50 (3Η, s)，4· 49 (2Η, q, J = 7. 7Hz)，4· 85 (2H, q, J = 8. 3Hz)，6. 53 (1H, s).元素分析CltlH8F6N2O4計(jì)算值:C,35.94 ；H, 2. 41 ；Ν，8· 38，實(shí)測(cè)值:C,35. 94 ；H, 2. 45 ；N, 8. 49.實(shí)施例33-氨基-2，4-二 (2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶的制造:攪拌下，于801在2，4-二(2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基-3-硝基吡啶(45. OOg, 134. 7mmol)的異丙醇(300mL)溶液中添加連二亞硫酸鈉(78. 00g，448. Ommol)的水 (300mL)溶液，反應(yīng)開(kāi)始15分鐘后再添加連二亞硫酸鈉(16. 50g,94. 8mmol)的水(5ImL) 溶液，再于反應(yīng)開(kāi)始25分鐘后添加連二亞硫酸鈉(11. IOg, 63. Smmol)的水(51mL)溶液，再 攪拌10分鐘。反應(yīng)結(jié)束后向反應(yīng)液中添加4mol/L硫酸水溶液(201mL)，在90°C攪拌30分 鐘。放冷后在冰冷卻下加入28%氨水(360mL)，攪拌30分鐘。用水稀釋反應(yīng)液，用氯仿萃 取。用飽和食鹽水洗浄有機(jī)層，再用無(wú)水硫酸鈉干燥后減壓濃縮。用己烷對(duì)所得結(jié)晶進(jìn)行重 結(jié)晶，得到呈黃色針狀晶的3-氨基-2，4-二(2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶(32. 91g， 収率80% )。mp 53. 5-53. 8
13
IR(KBr) :3453，3314，2968，1603，1505，1456 (cnT1).1H-WrgoomHzJDCI3) δ 2. 34 (3Η, s), 3. 66 (2Η, br. s), 4. 39 (2Η, q, J = 8. OHz), 4. 79 (2Η, q, J = 8. 6Ηζ)，6. 35 (1Η, s) ·元素分析 CltlHltlF6N2O2 · 0. 55H20計(jì)算值:C,38.24 ；H, 3. 56 ；Ν，8· 92，實(shí)測(cè)值:C,37. 96 ；H, 3. 19 ；N, 8. 94.實(shí)施例42-溴-N_[2，4-二(2，2，2-三氟乙氧基)_6_甲基吡啶_3_基]乙酰胺的制造在3-氨基-2，4-二(2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶(42. 29g，139. Ommol)的 二氯甲烷(600mL)溶液中加入N，N-二甲替苯胺(20. 46g，168. 8mmol)，在冰冷卻攪拌下，加 入溴乙酰溴(28. 73g，142. 3mmol)的二氯甲烷(IOOmL)溶液，攪拌10分鐘。用水稀釋反應(yīng) 液，用氯仿萃取。用飽和食鹽水洗浄有機(jī)層，再用無(wú)水硫酸鈉干燥后，減壓濃縮。所得結(jié)晶 用氯仿_己烷重結(jié)晶，得到呈無(wú)色針狀晶的2-溴-N-[2，4- 二(2，2，2-三氟乙氧基)_6_甲 基吡啶-3-基]乙酰胺(50. 25g，収率85% )。mp 152. 8-154. 0°CIR(KBr) :3250，3053，1677，1597，1541，1456 (cnT1).1H-NMR(400MHz, CDCl3) δ 2. 43 (3Η, s) ,4. 02 (2H, s) ,4. 42 (2H, q, J = 7. 9Hz)， 4. 78 (2H, q, J = 8. 5Hz)，6. 47 (1H, s)，7. 49 (1H, br s) ·元素分析C12H11BrF6N2O3計(jì)算值:C,33.90 ；H, 2. 61 ；N, 6. 59，實(shí)測(cè)值:C,34. 13 ；H, 2. 66 ；N, 6. 65.實(shí)施例52-[4-[2-(5，6-二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪 基]-N_[2，4_ 二(2， 2，2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶-3-基]乙酰胺(化合物lb)的制造在冰冷卻以及攪拌下，在1-[2-(5，6_二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪·3三 氟醋酸鹽(4. OOg,6. 25mmol)以及碳酸鉀(31. 26mmol)的乙腈(IOOmL)以及水(30mL)的混 合溶液中，在15分鐘內(nèi)加入2-溴-N-[2，4-二 (2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶_3_基] 乙酰胺(2. 20g，5. 22mmol)。返回室溫?cái)嚢?5小時(shí)后用水稀釋反應(yīng)液，用氯仿萃取。用飽和 食鹽水洗浄有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥后，減壓濃縮。用硅膠柱色譜法精制所得殘?jiān)?硅膠 150g，己烷丙酮=4 1 2 1 1 1)。用氯仿-己烷重結(jié)晶所得結(jié)晶，得到呈無(wú)色 晶體的2-[4-[2-(5，6-二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪-1-基]-N-[2，4-二(2，2， 2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶-3-基]乙酰胺(3.04g，収率91% )。mp 191-192°CIR(KBr) :3275，1686，1604，1591，1509 (cnT1) ·1H-NMR (400MHz, DMS0_d6) δ 2. 38 (3Η, s)，2· 42—2. 62 (8Η，m) ,2. 67 (2H, t, J = 6. 7Hz)，3. 30 (2H, s)，3. 40 (2H, t, J = 6. 7Hz)，4. 82 (2H, q, J = 8. 8Hz)，4. 90 (2H, q, J = 8. 8Hz)，6. 91 (1H, s)，7. 47 (2H, m)，8. 77 (1H, s)，12. 82 (1H, br. s) ·元素分析C25H26F8N6O3S計(jì)算值:C,46. 73 ；H, 4. 08 ；N, 13. 08
14
實(shí)測(cè)值:C,46.55 ；H, 4. 12 ；N, 12. 94制造例55-氟-2-巰基苯并咪唑的制造在甲醇(IOOmL)中溶解4_氟_2_硝基苯胺(8. 00g，51. 22mmol)，添加10%鈀-碳 粉末(0.80g)，在氫氣氛下于室溫?cái)嚢?小時(shí)。過(guò)濾反應(yīng)溶液，減壓濃縮濾液用柱色譜法精 制所得殘?jiān)?硅膠150g，己烷醋酸乙酯=1 4)，得到褐色油狀物質(zhì)(5. 67g，収率88%)。在乙醇(150mL)中溶解該褐色油狀物質(zhì)(5. 64g，44. 72mmol)，加入0-乙基黃原酸 鉀(8. 60g，53. 65mmol)，加熱回流3小時(shí)。再加入0-乙基黃原酸鉀(1. 43g，8. 92mmol)，加 熱回流2小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液，用柱色譜法精制所得殘?jiān)?硅膠150g，己烷醋酸乙酯= 2 1)，得到呈褐色粉末的5-氟-2-巰基苯并咪唑(5. 93g，収率79% )。制造例61-叔丁氧基羰基-4-[2-(5_氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪的制造在THF(36mL)中溶解 1_ 叔丁氧基羰基 _4_ (2_ 羥乙基)哌嗪(6. 00g，26. 05mmol)， 加入三乙胺(3. 43g，33. 90mmol)、4-二甲基氨基吡啶(159mg, 1. 30mmol)后，在冰冷卻下滴 入甲磺酰氯(3. 58g，31. 25mmol)的THF(9mL)溶液。攪拌1小時(shí)后過(guò)濾反應(yīng)液，減壓濃縮濾 液，在DMF(90mL)中溶解所得殘?jiān)?。在室溫一邊攪拌，一邊依次加?-氟-2-巰基苯并咪 唑(4. 82g, 28. 66mmol)、碳酸鉀(5. 40g, 39. 07mmol)以及 18-冠醚-6 (688mg, 2. 60mmol)，在 80°C攪拌2小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液，在所得殘?jiān)屑尤胨?，再用醋酸乙酯萃取，用水、飽和?鹽水洗浄有機(jī)層。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，用硅膠柱色譜法(硅膠150g，己烷醋酸乙酯= 2 1 1 1 1 2)精制減壓濃縮所得殘?jiān)玫?-叔丁氧基羰基-4-[2-(5-氟苯并 咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪(7. 28g，収率73% )。1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ :1· 49 (9Η, s)，2· 63 (4Η, t, J = 4. 9Hz)，2· 94 (2Η, t, J = 5. 9Hz)，3. 29 (2H, t, J = 5. 9Hz)，3. 58 (4H, t, J = 4. 9Hz)，6. 93 (1H, td，J = 9. 2，2. 5Hz)， 7. 19 (1H, dd，J = 9. 2，2. 5Hz)，7. 40 (1H, dd, J = 9. 2,4. 9Hz) ·實(shí)施例61-[2-(5-氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪· 3三氟醋酸鹽的制造在冰冷卻并攪拌下，于30分鐘之內(nèi)，在三氟醋酸(17mL)中加入、溶解1_叔丁氧基 羰基-4-[2-(5-氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪(6. 50g，17. 08mmol)。返回至室溫?cái)?拌30分鐘后，加入乙醚以及己烷，過(guò)濾分離所生成的固形物。用乙醚將其洗浄，得到呈褐色 粉末1-[2-(5-氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪·3三氟醋酸鹽(10. 50g，収率99% )。mp 127. 7-129. 3°CIR(KBr) :3143，3032，2731，1789，1747，1660 (cnT1) ·1H-WR (400MHz，DMS0-d6) δ 3. 29-3. 47 (8Η，m)，3. 48 (2Η，t，J = 6. 6Hz)，3. 62 (2Η， t, J = 6. 6Hz)，7. 03 (1H, t, J = 9. OHz)，7. 32 (1H, d, J = 9. OHz)，7. 48 (1H, dd，J = 9. 0， 4. 4Hz)，9. 36 (2H, br)，13. 76 (3H, br) ·制造例71-[2-(5-氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]-4-甲?；哙旱闹圃煸诒?50mL)中溶解1_甲酰基_4-(2_羥乙基)哌嗪(1. 20g, 7. 6mmol)、 5-氟-2-巰基苯并咪唑(1. 28g，7. 6mmol)、二異丙基乙胺(3. 93g,30. 4mmol)，加入碘化氰基甲基三甲基鱗(7. 39g，30. 4mmol)，在氬氣氛下于92°C攪拌1小時(shí)。放冷后注入水(IOOmL)， 用氯仿(IOOmLX3)萃取。用飽和食鹽水洗浄有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥后，減壓下濃縮。由 丙酮-乙醚使所得粗生成物結(jié)晶化，得到呈褐色結(jié)晶性粉末的1-[2-(5_氟苯并咪唑-2-基 硫代)乙基]-4-甲?；哙?. 87g(収率80% )。mp 173. 0-175. 0°CIR(KBr)CnT1 :3435，3051，2953，2825，1648，1503，1446.1H-WR(DMSO-Cl6) δ 2. 38 (2Η, t, J = 5. 2Hz)，2. 44 (2H, t, J = 5. OHz)，2. 70 (2H, t, J = 7. OHz)，3. 22-3. 38 (4H, m)，3. 42 (2H, t, J = 7. OHz)，6. 87-6. 98 (1H, m)，7. 23 (1H, br s)，7. 39 (1H, br s)，7. 97 (1H, s)，12. 6 (1H s) · MS (m/z) 308 (M+)，140 (100) ·實(shí)施例71-[2-(5-氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪的制造在甲醇(20mL)中溶解1_[2_(5_氟苯并咪唑_2_基硫代)乙基]_4_甲酰基哌嗪 (1.80g，5.8mmOl)，添加12N鹽酸(2mL)，在室溫下攪拌18小時(shí)。減壓下濃縮反應(yīng)液，在室 溫下于5分鐘之內(nèi)，在攪拌下加入飽和氨-甲醇溶液。在減壓下除去溶劑，用硅膠柱色譜法 (氯仿飽和氨-甲醇=100 3)精制所得殘?jiān)玫匠屎稚蜖钗锏?-[2-(5_氟苯并咪 唑-2-基硫代)乙基]哌嗪1. 33g (収率81 % )。IR(KBr)CnT1 :3059，2947，2815，1626，1602，1482，1444，1408.1H-WR (DMSO-Cl6) δ 2. 30-2. 45 (4Η，m)，2. 62 (2Η，t，J = 6. 8Hz)，2. 67 (4Η，t，J =
4.8Hz) ,3. 39(2H，t，J = 6. 8Ηζ)，6· 90-6. 98(lH，m)，7· 23(lH，dd，J = 9. 5,2. 5Hz)，7. 39 (1Η, dd, J = 8. 8,4. 9Hz).MS (m/z) :280 (M+)，70 (100) ·實(shí)施例82-[4-[2-(5-氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪基]-N_[2，4_二(2，2，2_三 氟乙氧基)-6-甲基吡啶-3-基]乙酰胺(化合物la)的制造在1-[2-(5_氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪· 3三氟醋酸鹽(6. 92g， 11. 12mmol)以及2-溴_N_[2，4-二(2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶-3-基]乙酰胺 (4. 50g, 10. 59mmol)的乙腈(90mL)懸濁液中緩緩加入碳酸鉀(5. 85g，42. 33mmol)。室溫下 攪拌5小時(shí)后，在反應(yīng)液中加入水(IOOmL)再用醋酸乙酯萃取，用飽和食鹽水清洗有機(jī)層。 用無(wú)水硫酸鈉干燥后，用硅膠柱色譜法精制減壓濃縮所得殘?jiān)?氯仿甲醇=50 1)。用 丙酮-乙醚對(duì)所得結(jié)晶進(jìn)行重結(jié)晶，得到呈淡褐色棱晶的2-[4-[2-(5_氟苯并咪唑-2-基 硫代)乙基]哌嗪-1-基]-N-[2，4-二(2，2，2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶-3-基]乙酰 胺(4. 72g，収率 71% )。mp 182. 0-182. 7°CIR(KBr) :3282，2824，1509，1413，1272，1166 (cnT1).1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ 2. 41 (3Η, s), 2. 66-2. 91 (8H, m),2.97(2H, t, J =
5.1Hz)，3. 25 (2H, t, J = 5. 1Hz)，3. 29 (2H, s)，4. 41 (2H, q, J = 8. OHz)，4. 75 (2H, q, J =8. 5Hz)，6. 45 (1H, s)，6. 93 (1H, td, J = 9.0，2. 3Hz)，7. 10-7. 56 (2H, m)，8. 28 (1H, s)， 13. 14 (1H，br. s)元素分析C25H27F7N6O3S
計(jì)算值:C,48. 08 ；H, 4. 36 ；N, 13. 46實(shí)測(cè)值:C,47. 98 ；H, 4. 38 ；N, 13. 31實(shí)施例9N-[2, -二(2，2，2_三氟乙氧基)-6_甲基吡啶_3_基]_2-[4-(2_羥乙基)哌 嗪-1-基]乙酰胺的制造在1-(2_ 羥乙基)哌嗪(1. 95g，15. Ommol)和 2-溴-N-[2，4_ 二(2，2，2-三氟乙 氧基)-6_甲基-3-吡啶-3-基]乙酰胺(5. OOg, 12. 5mmol)的乙腈(30ml)溶液中添加碳 酸鉀(2.25g，16.3mmol)，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)液，用醋酸乙酯萃取。用水、飽 和食鹽水依次洗浄有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥后，減壓濃縮。用硅膠柱色譜法(展開(kāi)溶劑 氨飽和甲醇/氯仿=1/20)精制所得殘?jiān)?，得到呈無(wú)色晶體的N-[2，4-二(2，2，2_三氟乙 氧基)-6_甲基吡啶-3-基]-2-[4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基]乙酰胺5.40g(収率91% )。1H-NMR(CDCl3) δ 2. 42 (3Η, s)，2. 48—2. 82 (8Η，m)，2. 57 (2Η，t, J = 5. 3Hz)， 3. 17 (2H, s)，3. 63 (2H, t, J = 5. 3Hz)，4. 41 (2H, q, J = 8. OHz)，4. 75 (2H, q, J = 8. 5Hz)， 6. 47 (1H, s)，8. 38 (1H, br s).實(shí)施例102-[4-[2-(5，6-二氟苯并咪唑-2-基硫代)乙基]哌嗪 基]-N_[2，4_ 二(2， 2，2-三氟乙氧基)-6-甲基吡啶-3-基]乙酰胺(化合物lb)的制造于氬氣氛、冰冷卻下，在N-[2，4- 二(2，2，2_三氟乙氧基)_6_甲基吡 啶-3-基]-2-[4-[2-羥基乙基]哌嗪-1-基]乙酰胺(4. Og, 8. 43mmol)、5，6_ 二氟-2-巰基 苯并咪唑(5. 8g，31.2mmol)以及三苯基膦(7. 8g，29. 7mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(170mL) 溶液中，滴加偶氮二羧酸二乙酯(40%w/v甲苯溶液，11. OmL，25. 3mmol)，在相同溫度下攪 拌1. 5小時(shí)。在反應(yīng)液中，添加醋酸乙酯以及l(fā)mol/L鹽酸，分離水層，再用lmol/L鹽酸萃取 有機(jī)層。合并水層，用lmol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)至堿性，用醋酸乙酯萃取。用水以及飽和 食鹽水依次洗浄有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥后，減壓除去。用硅膠柱色譜法(展開(kāi)溶劑；氯 仿氨飽和甲醇=100 3)精制所得殘?jiān)?，得到呈無(wú)色晶體的2-[4-[2-(5，6_ 二氟苯并咪 唑-2-基硫代)乙基]哌嗪-1-基]-N-[2，4-二 (2，2，2_三氟乙氧基)-6_甲基吡啶-3-基] 乙酰胺(4. 9g、収率90. 1% )0試驗(yàn)例1J774A細(xì)胞中的ACAT抑制活性試驗(yàn)在24孔板中接種J774細(xì)胞(2 X IO5細(xì)胞/孔)，用500 μ L的DMEM (10% FBS)培 養(yǎng)24小時(shí)。換培養(yǎng)基后添加25-羥基膽固醇(10yg/mL)以及ACAT抑制劑(終濃度0， 10_9 10_5mol/L)培養(yǎng)18小時(shí)。用0. 9%氯化鈉洗浄后，用己烷-異丙醇(3 2) 250 μ L 萃取脂質(zhì)。用己烷-異丙醇(3 2) 250 μ L再次萃取脂質(zhì)，除去萃取溶劑后，用熒光酶法定 量膽固醇酯(CE)。另外，對(duì)脂質(zhì)萃取后的細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)定量(micro BCA法)，求出相當(dāng) 于Img蛋白質(zhì)的CE量。由相對(duì)于空白的被驗(yàn)物質(zhì)的CE生成比算出IC5tl(抑制50% CE生 成的藥物濃度)。試驗(yàn)中N = 4。結(jié)果如表1所示，確認(rèn)化合物(Ia)以及(Ib)具有強(qiáng)ACAT抑制活性。表1
試驗(yàn)例2人肝臟微粒體代謝穩(wěn)定性試驗(yàn)按照下表2，在0. lmol/L磷酸緩沖液(ρ Η7. 4)中添加NRS(NADPH生成系)試 液、16%人血清白蛋白，再在其中添加供試化合物(ΙΟΟμΜ)的乙腈(O.OlmL)溶液。在 37°C溫浴中預(yù)培養(yǎng)5分鐘后，添加人肝臟微粒體(POOLED HUMAN LIVER MICROSOMES、Lot. No. 20GENTEST公司)，37°C溫浴中進(jìn)行反應(yīng)30分鐘。在反應(yīng)開(kāi)始0以及30分后分取反應(yīng) 液0.25mL，進(jìn)行萃取操作*，用HPLC測(cè)定檢體量。30分后的檢體的殘存率按照(30分后的 峰面積/0分的峰面積)X 100算出。其結(jié)果如圖1所示，確認(rèn)與化合物⑶鹽酸鹽相比，化合物(Ia)以及化合物(Ib) 對(duì)人肝臟微粒體的代謝的穩(wěn)定性顯著提高。表2人肝臟微粒體反應(yīng)液的組成(ImL) *萃取操作在各樣品中添加甘氨酸緩沖液(pHIO) 1. OmL、內(nèi)標(biāo)物質(zhì)0. ImL以及叔丁基甲基醚 5. OmL，振蕩10分鐘，在2500轉(zhuǎn)下離心分離10分鐘，分取有機(jī)層。試驗(yàn)例3溶解性試驗(yàn)(日本藥典I液)將各供試化合物溶解于乙腈中調(diào)制100 μ M的溶液，將該溶液加入到日本藥典I液
18中制成lOOOng/mL的溶液。攪拌該溶液10分鐘后，用注射器吸取lmL，通過(guò)孔徑0. 2 μ m的 濾膜(HLC-DISK 13水系·溶劑系關(guān)東化學(xué)株式會(huì)社)。使用0. 5mL濾液，進(jìn)行萃取操作*， 用HPLC測(cè)定檢體量。結(jié)果如表3所示，化合物(Ia)以及化合物(Ib)的溶解度較化合物(B)鹽酸鹽的 低。從溶解度預(yù)想本發(fā)明化合物的口服吸收性較低。表3
*萃取操作與人肝臟微粒體代謝穩(wěn)定性試驗(yàn)相同。試驗(yàn)例4大鼠口服試驗(yàn)在0. OlN鹽酸溶液中溶解供試化合物，口服給予雄性或雌性SD大鼠10mg/5mL/kg。 分別在給藥后30、60、120、180、240、360分鐘采血0. 25mL。所采血液在4°C、9，OOOg的條件 下進(jìn)行離心分離5分鐘，得到血漿。所得血漿直至進(jìn)行測(cè)定時(shí)始終保存在-30°C，進(jìn)行萃取 操作*，用LC/MS/MS法測(cè)定化合物的血漿中濃度。其結(jié)果如表4所示，與化合物(B)鹽酸鹽 相比，化合物(Ia)以及化合物(Ib)顯示了較高的Cmax和較高的藥時(shí)曲線(xiàn)下AUC值，由此 確認(rèn)了具有比化合物(B)鹽酸鹽更好的口服吸收性。表4
(10mg/kg · ρ· ο·)*萃取操作與人肝臟微粒體代謝穩(wěn)定性試驗(yàn)相同。與專(zhuān)利文獻(xiàn)1記載的化合物(B)相比，本發(fā)明化合物(1)顯示了優(yōu)良的人肝臟微 粒體代謝穩(wěn)定性，保持了強(qiáng)大的ACAT抑制活性。雖然與化合物(B)鹽酸鹽相比，本發(fā)明化 合物(1)對(duì)水的溶解性較差，但是在雄雌大鼠的口服試驗(yàn)中顯示了良好的口服吸收性。由 此，可期待出現(xiàn)對(duì)人的良好的生物學(xué)利用率。
權(quán)利要求
通式(2)所示的哌嗪化合物或其鹽，式中，X1表示氟原子或氫原子。FSA00000192042300011.tif
全文摘要
本發(fā)明提供一種通式(2)所示的哌嗪化合物或其鹽，式中，X1表示氟原子或氫原子。其顯示了對(duì)人肝臟微粒體的抗代謝性，良好的口服吸收性，具有優(yōu)良的ACAT抑制活性。
文檔編號(hào)A61P9/10GK101899007SQ20101022675
公開(kāi)日2010年12月1日 申請(qǐng)日期2004年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月7日
發(fā)明者三浦徹, 扇谷忠明, 松田隆行, 澀谷公幸 申請(qǐng)人:興和株式會(huì)社