專(zhuān)利名稱(chēng)：：一類(lèi)咪唑的衍生物、其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，更確切地說(shuō)，是涉及一類(lèi)具有抗真菌活性的化合物、其制備方法、組合物及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：真菌感染根據(jù)其侵入部位不同可分為淺部和深部?jī)深?lèi)。淺部真菌感染是一種常見(jiàn)病、多發(fā)病，多見(jiàn)于皮膚和甲部；深部真菌較常見(jiàn)的為白色念珠菌和新型隱球菌，發(fā)病率雖低但危害較大，感染嚴(yán)重時(shí)可危及生命。特別是近幾十年來(lái)，隨著廣譜抗菌素、皮質(zhì)激素、抗腫瘤藥物和免疫抑制劑的廣泛使用，放射治療和器官移植的廣泛進(jìn)行，導(dǎo)管和插管的普遍開(kāi)展，以及免疫缺陷患者尤其是艾滋病患者的急速增加，破壞了正常菌叢的共生關(guān)系，使肌體對(duì)真菌的抵抗力降低，從而致使真菌感染特別是深部真菌感染大幅度上升，并已成為艾滋病和腫瘤等重大疾病死亡的主要原因之一?，F(xiàn)有的抗真菌藥物中，唑類(lèi)藥物是具有較好前景的一類(lèi)，在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用。氮唑類(lèi)藥物尤其對(duì)深部真菌感染的療效較為理想，所以一直是抗真菌藥物中研究的熱點(diǎn)。它們能抑制真菌細(xì)胞色素P4503A依賴(lài)C14-a-脫甲基酶(ERG11)，而這個(gè)酶是把羊毛固醇轉(zhuǎn)化成麥角固醇的關(guān)鍵酶。其作用機(jī)制是阻斷底物羥化反應(yīng)，使真菌體內(nèi)羊毛甾醇14-甲基化的甾醇大量蓄積，麥角甾醇合成缺乏，導(dǎo)致膜通透性和膜上許多酶活性改變，從而抑制真菌的生長(zhǎng)。歐美制藥企業(yè)努力尋找唑類(lèi)抗真菌藥物，探索出具有咪唑環(huán)的化合物，相繼開(kāi)發(fā)了克霉唑(Clotrimazole)、酮康唑(Ketoconazole)、咪康唑(Miconazole)、益康唑(Econazole)、聯(lián)苯節(jié)唑(Bifonazole)、噻康唑(Tioconazole)、奧昔康唑(0xiconazole)等藥物。此類(lèi)化合物具有突出的特點(diǎn)(l)抗菌譜廣，抗真菌作用強(qiáng)，其中對(duì)酵母菌的作用相對(duì)較強(qiáng)。(2)低濃度時(shí)主要起抑菌作用，高濃度時(shí)對(duì)真菌細(xì)胞膜有直接損害作用。但是隨著長(zhǎng)期廣泛應(yīng)用，逐漸出現(xiàn)對(duì)現(xiàn)有咪唑類(lèi)藥物的耐藥菌株，且有明顯增多的趨勢(shì)。同時(shí)在多年臨床大規(guī)模試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)現(xiàn)有藥物，都具有一定程度的毒副作用如皮疹、胃腸道損害、肝功能異常等，尤其是酮康唑具有較強(qiáng)的肝毒性，致使其臨床應(yīng)用受到限制。耐藥性問(wèn)題使真菌病防治面臨更為嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)，現(xiàn)有研究表明白念珠菌B41628已顯現(xiàn)對(duì)多種藥物的耐藥性。針對(duì)現(xiàn)有的這些藥物均存在一定的局限性，如抗菌譜窄、耐藥性嚴(yán)重、生物利用度低、有較強(qiáng)的毒副作用等問(wèn)題。除了優(yōu)化改良現(xiàn)有藥物的制劑外，使得新型抗真菌藥物研究成為全球新藥研發(fā)的熱點(diǎn)領(lǐng)域之一。此外，藥物間的相互作用使深部真菌感染治療變得更加復(fù)雜，因此，臨床迫切需要高效低毒、抗菌譜廣、高選擇性的新型深部抗真菌藥物?，F(xiàn)有臨床數(shù)據(jù)表明，今后有望繼續(xù)在唑類(lèi)中尋找更安全、有效的新化合物。異噁唑啉類(lèi)化合物具有廣譜的抗菌作用，抗菌譜包括革蘭陽(yáng)性菌和厭氧菌，尤其對(duì)多重耐藥革蘭陽(yáng)性細(xì)菌具有很強(qiáng)的抑制作用。文獻(xiàn)W09941244，US70815838，DE19909785A1，US3769295,W09514680,W003/008395中都有報(bào)道。其異噁唑啉環(huán)已被證明為抗菌活性的關(guān)鍵藥效基團(tuán)。同時(shí)近期還有文獻(xiàn)CN101361741A研究發(fā)現(xiàn)這類(lèi)化合物具有一定的抗腫瘤作用。發(fā)明人在研究異噁唑啉類(lèi)抗菌化合物的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明中的化合物具有良好的抗真菌活性，它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同于任何已有的抗真菌藥物，有望成為新型的抗真菌藥物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個(gè)目的在于，為了克服現(xiàn)有咪唑類(lèi)化合物的不足，研制新型抗真菌藥物，公開(kāi)了一類(lèi)同時(shí)具有咪唑環(huán)和異噁唑啉環(huán)的化合物及其藥用鹽。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于，公開(kāi)了通式I化合物及其藥用鹽的制備方法。本發(fā)明的再一個(gè)目的在于，公開(kāi)了通式I化合物及其藥用鹽為主要活性成分的藥物組合物。本發(fā)明還有一個(gè)目的在于，公開(kāi)了通式I化合物及其藥用鹽，在制備抗真菌藥物中的應(yīng)用?，F(xiàn)結(jié)合發(fā)明目的對(duì)本
發(fā)明內(nèi)容進(jìn)行具體描述。本發(fā)明所涉及的通式I結(jié)構(gòu)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽如下R7本發(fā)明中的具有式I結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中部分化合物為I-A-l)N-H3-[4-(lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}_2_(2，CI)其中R1為氫或氟；-I其中R4，R5為氫，Q-Q直鏈或支鏈烷基4..、、、N—其中R4，R5為氧，C「C3直鏈或支鏈烷基N々R5,H(b)卜/"V^、卜w飛/^NN一N.R，.為-RR，為54_二甲基-1H-咪唑-I-基)乙酰胺；I-A-2)N-{{3_[3-氟_4_(4-甲基_1H_咪唑-1-基)苯基]-4，5_二氫異噁唑_5-基}甲基}-2-(2-異丙基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-A-3)N-{{3-[4_(2-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5_基}甲基}-2-(2-丙基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-A-4)N-{{3-[4_(2-乙基_1H_咪唑_1_基)_3_氟苯基]_4，5_二氫異噁唑_5-基}甲基}-2-(2-乙基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-A-5)N-H3-[4-(2-異丙基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5_二氫異噁唑_5_基}甲基}-2-(2-甲基-lH-咪唑-l-基)乙酰胺；I-A-6)N-H3-[3-氟-4-(2-正丙基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑_5-基}甲基}-2-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-A-7)N-{{3-[4_(2，4_二甲基_1H_咪唑_1_基)苯基]_4，5_二氫異噁唑_5_基}甲基卜2-(lH-咪唑-l-基)乙酰胺；I-B-l)N-{{3-[4_(lH-咪唑_1_基)苯基]_4，5_二氫異噁唑_5_基}甲基卜2-[4-(lH-咪唑-2-基)哌嗪-l-基]乙酰胺；I-B-2)N-{{3-[4_(4-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5_基}甲基)-2-[4-(咪唑[l，2-b]噠嗪-6-基)哌嗪-l-基]乙酰胺；I-C-l)N-H3-[3-氟-4-(2-正丙基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基卜2-[l-(2，4-二氟苯基)-2-(lH-咪唑-l-基)乙氧基]乙酰胺；I-C-2)N-{{3-[4-(2-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}-2-[1_(2，4-二氯苯基)-2-(lH-咪唑-l-基)乙氧基]乙酰胺。本發(fā)明的具有式I結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽系指本發(fā)明化合物與無(wú)機(jī)酸、有機(jī)酸成鹽。其中特別優(yōu)選的鹽是鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、乳酸鹽、甲磺酸鹽，對(duì)甲苯磺酸鹽、馬來(lái)酸鹽，苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、牛磺酸鹽等等。本領(lǐng)域一般技術(shù)人員參考專(zhuān)利BarbachynMR，MorrisJ，WishkaDG，etal.Substituted咖inophenylisoazolinederivativesusefulasantimicrobials[P].WO:9941244，1999-08-19和文獻(xiàn)《5-乙酰胺甲基_3_[3-氟-4_(1_哌嗪基苯基)]異噁唑啉的合成》，張智強(qiáng)，劉冰妮，劉默，等?！毒?xì)化工中間體》，2009，39(3):31-33，都能成功合成出中間體(丄)("。合成路線(xiàn)圖簡(jiǎn)明表示如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>但)(Z)其中R1、R4、R5、R6、R7同前所述，X代表氯或溴。而后將中間體溶于二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、丙酮、甲醇或乙醇其中一種溶劑中，并于三乙胺、吡啶、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鉀或氫氧化鈉其中一種或兩種縛酸劑存在的情況下加入R4、R5取代的咪唑類(lèi)化合物反應(yīng)可制得I-A系列目標(biāo)化合物；與R8取代的哌嗪類(lèi)化合物反應(yīng)可制得I-B系列目標(biāo)化合物；與中間體(Z)反應(yīng)可制得i-c系列目標(biāo)化合物。反應(yīng)路線(xiàn)簡(jiǎn)明表示如下其中R1、R4、R5定義同前所述。將反應(yīng)制得各種中間體或所得產(chǎn)物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或匿S0中的一種，滴加無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸的溶液，制成藥學(xué)上可接受的鹽。具體是將各種化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或匿SO中的一種，于冰水浴下滴加鹽酸乙醚溶液至pH=2，制成鹽酸鹽；或?qū)⒏鞣N化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或匿SO中的一種，加入等摩爾乳酸，加熱攪拌得其乳酸鹽；抑或?qū)⒏鞣N化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或匿SO中的一種，于冰水浴下滴加濃硫酸溶液至PH=3，制成硫酸鹽，等等。此類(lèi)化合物對(duì)于治療人類(lèi)真菌感染性疾病是有效的。盡管本發(fā)明的化合物可以不經(jīng)任何配制直接給藥，但所述的各種化合物優(yōu)選以藥物制劑的形式使用，給藥途徑可以是非腸道途徑(如靜脈、肌肉給藥)及口服給藥。本發(fā)明化合物的藥物組合物制備方法如下使用標(biāo)準(zhǔn)和常規(guī)的技術(shù)，使本發(fā)明化合物與制劑學(xué)上可接受的固體或液體載體結(jié)合，以及使之任意地與制劑學(xué)上可接受的輔助劑和賦形劑結(jié)合制備成微粒或微球。固體劑型包括片劑、分散顆粒、膠囊、緩釋片、緩釋微丸等等。固體載體可以是至少一種物質(zhì)，其可以充當(dāng)稀釋劑、香味劑、增溶劑、潤(rùn)滑劑、懸浮劑、粘合劑、崩解劑以及包裹劑。惰性固體載體包括磷酸鎂、硬脂酸鎂、滑粉糖、乳糖、果膠、丙二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明膠、纖維素類(lèi)物質(zhì)例如甲基纖維素、微晶纖維素、低熔點(diǎn)石蠟、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液體劑型包括溶劑、懸浮液例如注射劑、粉劑等等。藥物組合物以及單元?jiǎng)┬椭泻械幕钚猿煞?本發(fā)明化合物)的量可以根據(jù)患者的病情、醫(yī)生診斷的情況特定地加以應(yīng)用，所用的化合物的量或濃度在一個(gè)較寬的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。通常，活性化合物量的范圍為組合物的0.05%90%(重量)，另一優(yōu)選的范圍為0.05%-70%。本發(fā)明的具有式I結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，對(duì)真菌有明顯的抑制作用。下面采用標(biāo)準(zhǔn)微量稀釋法(NCCLSM-27A)測(cè)定其最低抑菌濃度，進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明化合物對(duì)臨床幾種常見(jiàn)真菌的體外抑菌活性。以目標(biāo)化合物抑制所選真菌90%生長(zhǎng)的濃度(MIC9。)作為判斷終點(diǎn)。試驗(yàn)菌株5種深部真菌白色念珠菌(Candidaalbicans,C.alb.)ATCC76615、新型隱球菌(Cryptococcusneoformans，C.neo.)ATCC32609、熱帶念珠菌(Candidatropicalis,C.tro.)ATCC12034、近平滑念珠菌(Candidaparopsilosis，C.par.)ATCC22019、薰煙曲霉菌(Aspergillusfumigatus，A.fum.)。3種淺表真菌紅色毛癬菌(Trichophytonrubrum，T.rub.)、申克氏抱子絲菌(Sporothrixschenckii，S.sch.)禾口裴氏著色真菌(Fonsecae即edrosoi，F(xiàn).ped.)。以上菌株均由本單位藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。試驗(yàn)藥品本發(fā)明化合物(I-A-lI-C-2)，選用兩性霉素B(AmB)(華藥集團(tuán))和咪康唑(MCZ)(揚(yáng)州騰達(dá)化工廠)作為陽(yáng)性對(duì)照藥，二甲基亞砜(DMS0)，AR級(jí)(天津市凱信化學(xué)工業(yè)有限公司)。酶標(biāo)儀，BI0-RAD680。試驗(yàn)方法以RPMI-1640(Sigma)為培養(yǎng)液，將實(shí)驗(yàn)菌種配成濃度為1X1041X105/ml的混懸液。將化合物以滅菌蒸餾水和匿S0溶解，制成藥物儲(chǔ)存液(6400yg/ml)，-20°〇保存待用。使用時(shí)用RPMI-1640稀釋至640iig/ml，同時(shí)設(shè)溶劑對(duì)照和空白對(duì)照。取無(wú)菌96孔平底微量培養(yǎng)板，1號(hào)孔加RPMI-1640100yL作空白對(duì)照，2號(hào)孔加菌懸液180iiL和藥液20iiL，3-12號(hào)孔各加菌懸液100iiL，2_ll號(hào)孔IO級(jí)倍比稀釋?zhuān)詈髲膌l號(hào)孔中吸出的100iiL丟棄。各孔藥物濃度分別為64,32，16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125gmL—、12號(hào)孔不加藥液，作藥物陰性對(duì)照。念珠菌屬于35。C恒溫培養(yǎng)24h，觀察3d的生長(zhǎng)情況。新型隱球菌培養(yǎng)72h后測(cè)定結(jié)果，淺部真菌26t:恒溫培養(yǎng)，觀察1周的生長(zhǎng)情況。用酶標(biāo)儀進(jìn)行分析，與藥物陰性對(duì)照孔進(jìn)行比較，以90%抑制所對(duì)應(yīng)的最低藥物濃度為其最小抑菌濃度值(MIC9。)。Invitroantifungalactivitiesofcompounds(MIC9。，ligm!70<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>通過(guò)體外抑菌測(cè)試實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，所有目標(biāo)化合物對(duì)8種致病真菌均有一定程度的抗真菌活性，其中幾個(gè)甚至超過(guò)臨床治療真菌的首選但毒性較大的藥物兩性霉素B，并且對(duì)深部真菌的抑制活性?xún)?yōu)于淺部真菌，同時(shí)均不同程度地明顯高于對(duì)照藥咪康唑。尤其對(duì)臨床上最為常見(jiàn)的和已大范圍產(chǎn)生耐藥的念珠菌感染具有較強(qiáng)的體外活性。其中化合物I-C-l對(duì)臨床上難以有效治療的感染性雜菌煙曲霉菌具有較強(qiáng)的特異性抑制作用?？傮w評(píng)價(jià)這類(lèi)新化合物具有廣譜、高活性的優(yōu)點(diǎn)，具有進(jìn)一步深入研究?jī)r(jià)值。下面進(jìn)一步通過(guò)最小抑菌濃度(MIC)測(cè)定試驗(yàn)說(shuō)明本發(fā)明化合物對(duì)細(xì)菌的抑制作用。培養(yǎng)基微生物鑒定培養(yǎng)基pH7.9士0.l，北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司產(chǎn)品；菌種標(biāo)準(zhǔn)金黃色葡萄球菌CMCC26003，標(biāo)準(zhǔn)白色葡萄球菌CMCC26101，標(biāo)準(zhǔn)腸球菌CMCC32220，標(biāo)準(zhǔn)表皮葡萄球菌CMCC26069，以上菌種均購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品鑒定所。試驗(yàn)方法以利奈唑胺為陽(yáng)性對(duì)照藥，采用二倍稀釋法。先在已經(jīng)消毒的96孔板的1L、12孔中分別加入菌液和肉湯培養(yǎng)基對(duì)照，而后在2-11孔中，用微量可調(diào)移液器從低濃度到高濃度依次加入用培養(yǎng)基倍比稀釋的上述樣品溶液O.25128iigmL—、每孔lOOiiL，使得各孔中樣品濃度分別為64，32，16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125ygmL—、置于振蕩器上震蕩lmin，使孔內(nèi)溶液充分混勻后，微孔板加蓋并用膠紙密封以減少孵育過(guò)程中的蒸發(fā)，于37t:溫箱中孵育18h，肉眼觀測(cè)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)孔所含最低藥物濃度即為最小抑菌濃度。Invitroantibacterialactivitiesofcompounds(MIC，ligm!70金黃色葡萄球菌白色葡萄球菌腸球菌表皮葡萄球菌利奈唑胺4424I-A-1484'4I-A-28448I-A-34448I-A-48488I+58884I-A-64444I-A-7164416I-B-l81644I-B-248164I-C-l1684.4I-C-28444通過(guò)體外抑菌測(cè)試實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，目標(biāo)化合物對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、腸球菌和表皮葡萄球菌有一定的抑制作用。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步地說(shuō)明，實(shí)施例僅為解釋性的，決不意味著它以任何方式限制本發(fā)明的范圍。所述的化合物經(jīng)高效液相色譜(HPLC)，薄層色譜(TLC)進(jìn)行檢測(cè)。隨后可以采用諸如紅外光譜(IR)，核磁共振譜CHNMR，13CNMR)，質(zhì)譜(MS)等更進(jìn)一步確證其結(jié)構(gòu)。參考實(shí)施例1:中間體(丄)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入28g(0.49mol)烯丙基胺、200mL無(wú)水乙醚，lOOmL三乙胺，攪拌下冷卻至-5°C。緩慢滴加46.3g(0.41mol)氯乙酰氯，并于_5"下繼續(xù)反應(yīng)2h(板層顯示反應(yīng)完全)。過(guò)濾，濾液減壓蒸盡溶劑，即得淺黃色油狀產(chǎn)物(HPLC:97.1%)。參考實(shí)施例2:中間體(》-2的制備在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3，4-二氟苯甲醛14.2g(0.lmol)，再加入300mL干燥的乙腈，攪拌。滴加N，N-二異丙基乙胺32.3g(0.25mol)，然后加入20.5g(0.25mol)4-甲基_1H_咪唑，加熱至回流反應(yīng)約16h(板層顯示反應(yīng)完全)。停止反應(yīng)，反應(yīng)液冷卻，減壓蒸盡溶劑，硅膠柱分離，即得產(chǎn)物(HPLC:99.8%)，Rf=0.58[單點(diǎn)，展開(kāi)劑v(石油醚)v(乙酸乙酯)=5:1]。參照參考實(shí)施例2的方法，本領(lǐng)域一般技術(shù)人員即可方便制得中間體(》-111<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>參考實(shí)施例4:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入22.9g(0.lmol)中間體Q)_2，再加入150mL二氯甲烷，攪拌下分批加入氯代丁二酰亞胺(NCS)13.4g，室溫反應(yīng)約5h，然后繼續(xù)回流反應(yīng)lh(板層顯示反應(yīng)完全)。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液傾入80mL冰水中，分取二氯甲烷層，水洗3次，干燥。減壓蒸除溶劑，即得淡黃色針狀結(jié)晶產(chǎn)物(HPLC:98.9%)。參照參考實(shí)施例4的方法，本領(lǐng)域一般技術(shù)人員即可方便制得中間體(D-l<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>參考實(shí)施例5:中間體(旦)-2的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入13.4g(0.lmol)中間體(丄)，再加入100mL二氯甲烷，攪拌下分批加入25.4g(0.lmol)中間體④-2，并緩慢滴加20mL三乙胺，于(TC下反應(yīng)約3h(板層顯示反應(yīng)完全)。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液用飽和食鹽水洗漆3次，干燥。減壓蒸除溶劑，得黃色固體產(chǎn)物，無(wú)水乙醇重結(jié)晶(HPLC:99.3%)。參照參考實(shí)施例5的方法，本領(lǐng)域一般技術(shù)人員即可方便制得中間體-1-9。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>參考實(shí)施例6:中間體但)-l的制備在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入2-氯-l-(2，4-二氟苯基)乙酮19.lg(O.lmol)，再加入80mL無(wú)水乙醇，攪拌溶清。將12g(0.3mo1)硼氫化鈉溶于50mL蒸餾水中，冰水浴下緩慢入反應(yīng)體系，加畢于室溫下反應(yīng)約1.5h(板層顯示反應(yīng)完全)。停止反應(yīng)，加入稀鹽酸溶液，減壓蒸除乙醇，用氯仿萃取3次，飽和碳酸鈉水溶液洗滌，有機(jī)層干燥。減壓蒸除溶劑，得白色固體產(chǎn)物。參照參考實(shí)施例6的制備的方法，可制得中間體(g)-2。參考實(shí)施例7:中間體("-l的制備在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入19.3g(0.lmol)中間體_1和lOOmL氯仿。攪拌下加入6.8g(0.lmol)咪唑，隨后緩慢入20.2g三乙胺，加畢回流反應(yīng)約9h(板層顯示反應(yīng)完全)。停止反應(yīng)，用水洗滌反應(yīng)液3次，干燥。減壓蒸除溶劑，得白色固體產(chǎn)物(HPLC:97.2%)。參照參考實(shí)施例7的制備的方法，可制得中間體(Z)-2。實(shí)施例1:N-H3-[4-(lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}-2-(2，4_二甲基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺(化合物I-A-l)16在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.2g中間體-1和10mL二氯甲烷，攪拌下加入無(wú)水碳酸鉀2.76g。將2，4-二甲基-lH-咪唑0.96g分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)5h(板層顯示反應(yīng)完全)。過(guò)濾，用3X15mL水洗滌濾液，分取二氯甲烷層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡二氯甲烷，即得淡黃色固體產(chǎn)物(HPLC:99.0%)。'HNMR(DMS0-d6，400MHz)S:2.24(s，3H)，2.49(s，3H)，3.053.40(m，2H)，3.213.25(m，2H)，3.913.96(m，1H)，4.61(s，2H)，4.664.70(m，1H)，6.61(s，1H)，7.017.38(m，3H)，7.517.54(d，2H)，7.827.86(d，2H)。MS，m/Z:379.19[M+H]+。實(shí)施例2:N-H3-[3-氟-4-(4-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}-2-(2-異丙基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺(化合物I-A-2)HN.在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.5g中間體(5)-2和15mL三氯甲烷，攪拌下加入三乙胺2.0g。將2-異丙基-lH-咪唑1.lg分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)4h(板層顯示反應(yīng)完全)。用3X15mL水洗滌濾液，分取三氯甲烷層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡三氯甲烷，即得黃色固體產(chǎn)物(HPLC:98.4%)。^NMR(DMS0-d6，400MHz)S:1.344.37(d，6H)，2.37(s，3H)，3.043.07(m，1H)，3.233.26(m，1H)，3.363.40(m，2H)，3.693.71(m，1H)，4.644.66(m，1H)，5.23(s，2H)，6.816.83(d，1H)，6.936.95(d，1H)，7.11(s，1H)，7.567.60(m，2H)，7.667.69(m，1H)，7.847.86(d，1H)，11.5(s，1H)。MS，m/Z:425.21[M+H]+。實(shí)施例3:N-{{3-[4_(2-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5_基}甲基}-2-(2-丙基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺(化合物I-A-3)在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.3g中間體(互)-3和20mL甲苯，攪拌下加入氫氧化鉀1.5g。將2-正丙基-lH-咪唑1.lg分批加入反應(yīng)體系。加完，于17回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)5h(板層顯示反應(yīng)完全)。過(guò)濾，用3X15mL水洗滌濾液，分取甲苯層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡甲苯，即得黃色固體產(chǎn)物(HPLC:99.3%)。^NMR(DMS0-d6，400MHz)S:1.011.04(t，3H)，1.771.81(m，2H)，2.56(s，3H)，3.063.09(m，1H)，3.133.16(t，2H)，3.243.27(m，1H)，3.363.38(m，1H)，3.423.44(m，1H)，3.703.72(m，1H)，5.27(s，2H)，6.846.86(d，1H)，6.956.97(d，1H)，7.037.05(d，1H)，7.277.29(d，1H)，7.567.59(d，2H)，7.9093(d，2H)，12.1(s，1H)。MS，m/Z:407.21[M+H]+。實(shí)施例4:N-{{3-[4-(2-乙基-lH-咪唑-l-基)-3-氟苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基l甲基}-2-(2-乙基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺(化合物I-A-4)在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.6g中間體(互)-4和15mL丙酮，攪拌下加入無(wú)水碳酸鈉1.3g。將2-乙基-1H-咪唑1.0g分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)3h(板層顯示反應(yīng)完全)。過(guò)濾，濾液蒸干溶劑，加入20mL二氯甲烷，用3X15mL水洗滌，分取有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡二氯甲烷，即得棕黃色固體產(chǎn)物(HPLC:98.6%)。實(shí)施例5:N-H3-[4-(2-異丙基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}-2-(2-甲基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺(化合物I-A-5)HN在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.6g中間體(5)-5和15mL甲醇，攪拌下加入碳酸氫鈉2.5g。將2-甲基-1H-咪唑0.8g分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)6h(板層顯示反應(yīng)完全)。過(guò)濾，濾液蒸干溶劑，加入20mL三氯甲烷，用3X15mL水洗滌，分取有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡三氯甲烷，即得橙黃色固體產(chǎn)物(HPLC:97.5%)。實(shí)施例6:N-H3-[3-氟-4-(2-正丙基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5_二氫異噁唑_5_基}-2-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺(化合物I-A-6)18在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.8g中間體(5)_6和20mL乙醇，攪拌下加入碳酸氫鉀3.2g。將4-甲基-lH-咪唑0.8g分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)8h(板層顯示反應(yīng)完全)。過(guò)濾，濾液蒸干溶劑，加入20mL二氯甲烷，用3X15mL水洗滌，分取有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡二氯甲烷，即得黃色固體產(chǎn)物(HPLC:99.0%)。丄HNMR(DMS0-d6，400MHz)S:1.041.07(t，3H)，1.791.83(m，2H)，2.59(s，3H)，2.922.95(m，1H)，3.083.11(t，2H)，3.173.20(m，1H)，3.303.33(m，1H)，3.463.48(m，1H)，3.723.74(m，1H)，5.08(s，2H)，6.856.87(d，1H)，7.087.10(d，1H)，7.297.31(d，1H)，7.517.54(d，1H)，7.627.65(m，1H)，7.847.86(m，2H)，8.06(s，1H)。MS，m/Z:424.21[M+H]+。實(shí)施例7:N-H3-[4-(2，4-二甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5_基}甲基}-2-(1H-咪唑-1-基)乙酰胺(化合物I-A-7)在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.8g中間體(互)-7和15mL二氯甲烷，攪拌下加入氫氧化鈉O.8g。將咪唑O.68g分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)5h(板層顯示反應(yīng)完全)。過(guò)濾，用3X15mL水洗滌濾液，分取有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡二氯甲烷，即得黃色固體產(chǎn)物(HPLC:97.7%)。實(shí)施例8:N-H3-[4-(lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5_基}甲基卜2-[4-(lH-咪唑-2-基)哌嗪-1-基]乙酰胺(化合物I-B-l)在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.2g中間體-1和15mL三氯甲烷，攪拌下加入吡啶2.4g。將l-(lH-咪唑-2-基)哌嗪1.52g分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)6h(板層顯示反應(yīng)完全)。用3X15mL水洗滌，分取有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡三氯甲烷，即得黃色固體產(chǎn)物(HPLC:98.9%)。^NMR(DMS0-d6，19400MHz)S:2.502.53(m，2H)，2.552.58(m，2H)，2.732.76(m，1H)，2.912.94(m，1H)，3.173.20(m，2H)，3.223.24(m，2H)，3.333.35(s，2H)，3.413.43(m，1H)，3.583.60(m，1H)，4.88(m，1H)，7.097.11(d，2H)，7.227.25(m，2H)，7.547.58(m，3H)，7.867.88(d，2H)，8.21(s，1H)，11.42(s，1H)。MS，m/Z:435.23[M+H]+。實(shí)施例9:N-{{3-[4_(4-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5_基}甲基}-2-[4-(咪唑[l，2-b]噠嗪-6-基)哌嗪-l-基]乙酰胺(化合物I-B-2)在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.3g中間體但)-9和20mL二氯甲烷，攪拌下加入無(wú)水碳酸鉀2.76g。將6-(哌嗪-l-基)咪唑并[1，2-b]噠嗪2.0g分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)5h(板層顯示反應(yīng)完全)。過(guò)濾，用3X15mL水洗滌濾液，分取有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡二氯甲烷，即得黃色固體產(chǎn)物(HPLC:99眉)。實(shí)施例10:N-H3-[3-氟-4-(2-正丙基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5_二氫異噁唑_5_基}甲基卜2-[l-(2，4-二氟苯基)-2-(lH-咪唑-l-基)乙氧基]乙酰胺(化合物I-C-1)在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.8g中間體(5)-6和15mL三氯甲烷，攪拌下加入三乙胺2.Og。將2.2g中間體(Z)-l分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)5h(板層顯示反應(yīng)完全)。用3X15mL水洗滌反應(yīng)液，分取有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡三氯甲烷，即得黃色固體產(chǎn)物(HPLC:98.2%)。^NMR(匿SO-de，400MHz)S:1.021.05(t，3H)，1.721.75(m，2H)，2.912.93(m，1H)，3.003.03(t，2H)，3.133.16(m，1H)，3.513.53(m，1H)，3.603.64(m，3H)，4.084.ll(m，lH)，4.234.26(m，2H)，4.564.58(m，1H)，6.736.75(d，1H)，6.816.83(d，1H)，7.047.09(m，2H)，7.257.28(m，2H)，7.487.50(d，1H)，7.547.56(d，1H)，7.627.65(m，1H)，7.797.81(d，1H)，8.08(s，1H)，8.16(s，1H)。MS，m/Z:567.23[M+H]+。實(shí)施例11:N-{{3-[4-(2-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基卜2-[l-(2，4-二氯苯基)-2-(lH-咪唑-l-基)乙氧基]乙酰胺(化合物I-C-2)在裝有攪拌、冷凝器、溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中加入3.3g中間體(5)-3和20mL二氯甲烷，攪拌下加入吡啶2.4g。將2.6g中間體(Z)-2分批加入反應(yīng)體系。加完，于回流溫度下繼續(xù)反應(yīng)6h(板層顯示反應(yīng)完全)。用3X15mL水洗滌反應(yīng)液，分取有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉充分干燥，過(guò)濾，減壓蒸盡二氯甲烷，即得黃色固體產(chǎn)物(HPLC:98.5%)。實(shí)施例12:化合物I-A-3成鹽酸鹽取I-A-3固體產(chǎn)物2.0g，溶于10mL無(wú)水乙醚。冰水浴冷卻至0°C，滴加11.1%鹽酸乙醚溶液至pH為2，繼續(xù)于冰水浴下攪拌約lh。過(guò)濾，得淺黃色固體。實(shí)施例13:化合物I-B-l成乳酸鹽取I-B-l固體產(chǎn)物2.3g，溶于15mL無(wú)水乙醇。加熱至回流后加入等摩爾乳酸，繼續(xù)于回流下攪拌反應(yīng)約3h。反應(yīng)完畢，于室溫下靜置24h。過(guò)濾，得淺黃色固體。實(shí)施例14:化合物I-C-2成硫酸鹽取I-C-2固體產(chǎn)物1.71g，溶于20mL無(wú)水甲醇。冰水浴冷卻至5°C，滴加濃硫酸溶液pH為3，繼續(xù)于冰水浴下攪拌約2h。過(guò)濾，得黃色固體。為了更充分地說(shuō)明本發(fā)明的咪唑類(lèi)衍生物的藥物組合物，下面提供下列制劑實(shí)施例，所述實(shí)施例僅用于說(shuō)明，而不是用于限制本發(fā)明的范圍。所述制劑可以使用本發(fā)明化合物中的任何活性化合物及其鹽，優(yōu)選使用實(shí)施例1-14中所描述的化合物。實(shí)施例15:用下述成分制備硬明膠膠囊化合物I-A-5預(yù)膠化淀粉泊洛沙姆羧甲基淀粉鈉硬脂酸鎂用量/45mg100mg4mg10mg20mg10%聚維酮乙醇溶液適量制備工藝將原輔料預(yù)先干燥，過(guò)IOO目篩備用。按處方量將上述成分混勻，過(guò)60目篩三次，加適量10%聚維酮乙醇(95%)溶液制軟材，過(guò)18目篩制粒，4(TC干燥，過(guò)16目篩整粒，填充入硬明膠膠囊中。實(shí)施例16:用下述成分制備片劑化合物I-B-2淀粉45m;用量/60mgg片:0166]微晶纖維素:0167]羧甲基淀粉鈉鹽40mg4.5mg:0168]硬脂酸鎂:0169]滑石粉:0170]泊洛沙姆lmglmg3mg制備工藝將原輔料預(yù)先干燥，過(guò)100篩備用。先將處方量的輔料充分混勻。將原料藥以遞增稀釋法加到輔料中，每次加時(shí)充分混勻2-3次，保證藥與輔料充分混勻，過(guò)20目篩，在55t:通風(fēng)烘箱中干燥2h，干顆粒過(guò)16目篩整理，測(cè)定中間體含量，混合均勻，在壓片機(jī)上壓片。實(shí)施例17:注射液的制備化合物I-B-l的乳酸鹽65mg丙二醇lOOmg聚山梨酯80適量蒸餾水300mL制備方法取活性成分加入到已溶解山梨醇和丙二醇的注射用水中，加入藥用堿調(diào)節(jié)pH值至48使其溶解。加入活性炭，攪拌吸附30min，除炭、精濾、灌封、滅菌。實(shí)施例18;注射用凍干粉的制備化合物I-C-2的硫酸鹽60mg藥用堿0.1-7.0%甘露醇55-80%制備方法取活性成分加入注射用水，用藥用堿調(diào)節(jié)pH值至48使其溶解。再加入甘露醇，按注射劑的要求進(jìn)行高壓滅菌，加入活性炭，采用微孔濾膜過(guò)濾，濾液進(jìn)行分裝，采用冷凍干燥法，制得疏松塊狀物，封口，即得。2權(quán)利要求具有式I結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1為氫或氟；R2為其中R4，R5為氫，C1-C3直鏈或支鏈烷基；R3為其中R4，R5為氫，C1-C3直鏈或支鏈烷基；其中R6，R7為氟或氯。FSA00000050901500011.tif,FSA00000050901500012.tif,FSA00000050901500013.tif,FSA00000050901500014.tif,FSA00000050901500015.tif2.如權(quán)利要求1中所述的通式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，代表化合物如下I-A-l)N-H3-[4-(lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}_2_(2，4-二甲基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-A-2)N-{{3-[3-氟-4-(4-甲基_1H_咪唑-1-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑_5_基}甲基卜2-(2-異丙基-lH-咪唑-l-基)乙酰胺；I-A-3)N-{{3-[4-(2-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}-2-(2-丙基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-A-4)N-{{3-[4-(2-乙基-1H-咪唑-1-基)-3-氟苯基]-4，5-二氫異噁唑_5_基}甲基}-2-(2-乙基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-A-5)N-H3-[4-(2-異丙基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}-2-(2-甲基-lH-咪唑-l-基)乙酰胺；I-A-6)N-{{3-[3-氟-4-(2-正丙基_1H_咪唑-1-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑_5_基}甲基}-2-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-A-7)N-H3-[4-(2，4-二甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}-2-(1H-咪唑-1-基)乙酰胺；I-B-l)N-{{3-[4-(lH-咪唑-1-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲其，42NR、為為RR基}-2-[4_(lH-咪唑-2-基)哌嗪-1-基]乙酰胺；I-B-2)N-{{3-[4-(4-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}-2-[4-(咪唑[l，2-b]噠嗪-6-基)哌嗪-l-基]乙酰胺；I-C-l)N-{{3-[3-氟-4-(2-正丙基-1H-咪唑-1-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑_5_基}甲基卜2-[l-(2，4-二氟苯基)-2-(lH-咪唑-l-基)乙氧基]乙酰胺；I-C-2)N-{{3-[4-(2-甲基-lH-咪唑-l-基)苯基]-4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基卜2-[l-(2，4-二氯苯基)-2-(lH-咪唑-l-基)乙氧基]乙酰胺。3.如權(quán)利要求1所述的化合物，藥學(xué)上可接受的鹽指本發(fā)明化合物與無(wú)機(jī)酸、有機(jī)酸所成的鹽。4.如權(quán)利要求3中所述的藥學(xué)上可接受的鹽，其中特別優(yōu)選的鹽是鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、乳酸鹽、甲磺酸鹽，對(duì)甲苯磺酸鹽、馬來(lái)酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、?；撬猁}。5.權(quán)利要求l中式(I)化合物的制備方法，其特征在于將如下圖中化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>N-H3-[4-(取代咪唑-l-基)取代苯基]_4，5-二氫異噁唑-5-基}甲基}_2-鹵乙酰胺(互)溶于二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、丙酮、甲醇或乙醇中的一種，并加入三乙胺、妣啶、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鉀或氫氧化鈉中的一種或兩種。分批加入R4、R5取代的咪唑類(lèi)化合物反應(yīng)，制得I-A系列目標(biāo)化合物；與哌嗪衍生物反應(yīng)制得I-B系列目標(biāo)化合物；與2-(lH-咪唑-l-基)-l-取代苯基乙醇("反應(yīng)制得I-C系列目標(biāo)化合物。反應(yīng)路線(xiàn)如下6.—種具有抗真菌活性的藥物組合物，它包含治療有效量的式I化合物或其鹽及一種或多種藥用賦形劑。7.如權(quán)利要求14中式I化合物在制備抗真菌藥物方面的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明屬于抗真菌作用藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，提供具有通式(I)結(jié)構(gòu)的一類(lèi)咪唑衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽。其中R1～R3的定義同說(shuō)明書(shū)中所述。本發(fā)明還涉及上述化合物的制備方法，并同時(shí)公開(kāi)了以該化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性有效成分的藥物組合物，以及它們?cè)谧鳛榭拐婢幬锓矫娴膽?yīng)用。文檔編號(hào)A61K31/501GK101781294SQ20101012090公開(kāi)日2010年7月21日申請(qǐng)日期2010年3月10日優(yōu)先權(quán)日2010年3月10日發(fā)明者劉冰妮,劉登科,劉穎,劉默,張智強(qiáng),楊妙,鄒美香,黃長(zhǎng)江申請(qǐng)人:天津藥物研究院