本發(fā)明屬于水體檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種養(yǎng)殖水體氨氮快速檢測(cè)試劑盒。

背景技術(shù)：

養(yǎng)殖水體中的氨氮含量是水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中水質(zhì)檢測(cè)的一個(gè)重要指標(biāo)，水體中的氨氮(nh3-n)主要以游離氨(nh3)或銨鹽(nh4⁺)的形式存在；水體中的氨氮主要是由水體中微生物分解的養(yǎng)殖動(dòng)物的排泄物、水體中的有機(jī)肥、殘餌等產(chǎn)生的氨氮；水體中的反硝化細(xì)菌在缺氧的情況下，也可通過反硝化作用把亞硝酸鹽等分解成氨氮。如果水體中的氨氮含量過高，會(huì)引起養(yǎng)殖動(dòng)物機(jī)體組織損傷，降低氧氣在組織間的輸送；會(huì)增加魚類鰓的通透性，不利于其對(duì)外界的正常物質(zhì)交換；會(huì)影響?zhàn)B殖生物的攝食效率，導(dǎo)致生產(chǎn)緩慢，免疫力下降容易患病，會(huì)導(dǎo)致水體中有毒物質(zhì)的不斷積累，直接危害到養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)和生存，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成其中毒死亡。

市面上現(xiàn)有的氨氮檢測(cè)試劑盒在檢測(cè)水樣的過程中，有時(shí)因水樣中含有過多的金屬離子如鈣離子、鎂離子、鐵離子、錳離子等與試劑發(fā)生反應(yīng)生成白色沉淀或渾濁，以致無法顯色；嚴(yán)重影響到水體中氨氮含量的檢測(cè)。常用的用來掩蔽這些金屬離子的表面活性劑如酒石酸鉀鈉因質(zhì)量等多種原因不能夠完全徹底的掩蔽水樣中的金屬離子；或者是由于氯化汞試劑不純引起的化學(xué)試劑質(zhì)量的改變，影響了氨氮檢測(cè)過程中的顯色觀察。

因此，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，減少養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)，急需有一種新的快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定的氨氮檢測(cè)試劑，方便養(yǎng)殖戶現(xiàn)場(chǎng)對(duì)養(yǎng)殖水體中的氨氮含量進(jìn)行一個(gè)快速精準(zhǔn)的判斷。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決上述問題，本發(fā)明提供一種養(yǎng)殖水體氨氮快速檢測(cè)試劑盒。

本發(fā)明提供的養(yǎng)殖水體氨氮快速檢測(cè)試劑盒，其含有氨氮測(cè)試劑ⅰ、氨氮測(cè)試劑ⅱ，比色瓶和比色卡，所述的氨氮測(cè)試劑i按重量份計(jì)由：酒石酸鉀鈉25-60份，表面活性劑10-45份，穩(wěn)定劑1-30份，蒸餾水75-120份制成；所述氨氮測(cè)試劑ii按重量份計(jì)由：氫氧化鈉5-35份，碘化汞鉀5～25份，穩(wěn)定劑5-35份，蒸餾水75～120份制成。

優(yōu)選地，所述的氨氮測(cè)試劑i按重量份計(jì)由：酒石酸鉀鈉28-55份，表面活性劑12-40份，穩(wěn)定劑3-25份，蒸餾水80～110份制成；所述氨氮測(cè)試劑ii按重量份計(jì)由：氫氧化鈉8-32份，碘化汞鉀8-24份，穩(wěn)定劑8-30份，蒸餾水80～110份制成。

更優(yōu)選地，所述的氨氮測(cè)試劑i按重量份計(jì)由：酒石酸鉀鈉30-50份，表面活性劑15-35份，穩(wěn)定劑5-24份，蒸餾水85-105份制成；所述氨氮測(cè)試劑ii按重量份計(jì)由：氫氧化鈉10-30份，碘化汞鉀10-20份，穩(wěn)定劑10-25份，蒸餾水85-105份制成。

最優(yōu)選地，所述的氨氮測(cè)試劑i按重量份計(jì)由：酒石酸鉀鈉35-45份，表面活性劑20-30份，穩(wěn)定劑10-20份，蒸餾水90～100份制成；所述氨氮測(cè)試劑ii按重量份計(jì)由：氫氧化鈉12～25份，碘化汞鉀12-18份，穩(wěn)定劑12-20份，蒸餾水90-100份制成。

其中，所述的氨氮測(cè)試劑i和氮測(cè)試劑ii體積比優(yōu)選為1:1。

其中，所述的穩(wěn)定劑為乙二胺四乙酸二鈉、單乙醇胺、三乙醇胺、聚乙烯醇、硫脲中的一種或多種。

其中，所述表面活性劑為六偏磷酸鈉、乙酸鈉、蘋果酸鈉、檸檬酸鈉中的一種或多種。

本發(fā)明中，比色卡是由配置的不同濃度梯度的氨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 (0.005、0.01、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mg/l)分別采用分光光度計(jì)測(cè)定(3個(gè)平行)標(biāo)定后，標(biāo)準(zhǔn)液在與測(cè)試劑顯色制作而成。

本發(fā)明還提供利用本發(fā)明的養(yǎng)殖水體氨氮快速檢測(cè)試劑盒進(jìn)行養(yǎng)殖水體氨氮檢測(cè)的方法，其包括如下步驟：

1)使用待測(cè)水樣潤(rùn)洗比色瓶2～3次；

2)用吸管吸取待測(cè)水樣至比色瓶中，定容至15ml。

3)加入氨氮測(cè)試劑ⅰ和氨氮測(cè)試劑ⅱ各6滴，蓋好比色瓶，搖勻靜止1～3min，與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)比，找出顏色相似的色塊即為待測(cè)水樣中的氨氮含量。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果在于：

本發(fā)明所提供的新型氨氮快速檢測(cè)試劑盒中，測(cè)試劑以液態(tài)形式提供，使用方便；測(cè)試劑ⅰ中加入的新的其它掩蔽劑能夠協(xié)同酒石酸鉀鈉掩蔽水樣中的金屬離子，使測(cè)試劑的性質(zhì)更加穩(wěn)定，易于保存。測(cè)試劑ⅱ中直接使用顯色基團(tuán)碘化汞鉀，有效防止碘化汞紅色沉淀的生成，同時(shí)加入了穩(wěn)定劑，解決了測(cè)試劑質(zhì)量不穩(wěn)定引起的試劑靈敏度降低問題，這種新型的測(cè)試劑解決了加入測(cè)試劑在檢測(cè)水樣過程中水質(zhì)變渾濁的問題。

本發(fā)明測(cè)試劑中添加的穩(wěn)定劑，可以維持測(cè)試劑理化性質(zhì)、產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性，增加測(cè)試劑的有效保質(zhì)期。加入新的測(cè)試劑后，水樣不再變渾濁，顯色迅速、明顯，養(yǎng)殖戶可以快速精準(zhǔn)的了解到水樣中的氨氮含量。同時(shí)本發(fā)明測(cè)試劑制備成本低，材料方便易得。有效解決了水產(chǎn)養(yǎng)殖水體中快速準(zhǔn)確檢測(cè)水中氨氮的需求，在水質(zhì)檢測(cè)領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

氨氮測(cè)試劑ⅰ按重量份包括：酒石酸鉀鈉60份、檸檬酸鈉30份，乙二胺四乙酸二鈉20份，溶于120份蒸餾水，并于90℃水浴鍋加熱15min，冷卻，即得。

氨氮測(cè)試劑ii按重量份包括：氫氧化鈉35份，碘化汞鉀25份，乙二胺四乙酸二鈉20份，溶于120份蒸餾水，即得。

試劑盒組裝：氨氮測(cè)試劑ⅰ1瓶、氨氮測(cè)試劑ⅱ1瓶，比色卡1張，比色瓶1個(gè)。

養(yǎng)殖水體氨氮檢測(cè)具體操作步驟如下：

(1)使用待測(cè)水樣潤(rùn)洗比色瓶2～3次；

(2)用吸管吸取待測(cè)水樣至比色瓶中，定容至15ml。

(3)加入氨氮測(cè)試劑ⅰ和氨氮測(cè)試劑ⅱ各6滴，蓋好比色瓶，搖勻靜止1～3min，與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)比，找出顏色相似的色塊即為待測(cè)水樣中的氨氮含量。

實(shí)施例2

氨氮測(cè)試劑ⅰ按重量份包括：酒石酸鉀鈉40份、六偏磷酸鈉30份，乙酸鈉15份，乙二胺四乙酸二鈉1份，溶于75份蒸餾水，并于90℃水浴鍋加熱25min，冷卻，即得。

氨氮測(cè)試劑ii按重量份包括：氫氧化鈉15份，碘化汞鉀25份，單乙醇胺5份、三乙醇胺10份，溶于95份蒸餾水，即得。

試劑盒組裝：氨氮測(cè)試劑ⅰ1瓶、氨氮測(cè)試劑ⅱ1瓶，比色卡1張，比色瓶1個(gè)。

養(yǎng)殖水體氨氮檢測(cè)具體操作步驟如下：

(1)使用待測(cè)水樣潤(rùn)洗比色瓶2～3次；

(2)用吸管吸取待測(cè)水樣至比色瓶中，定容至15ml。

(3)按體積比加入氨氮測(cè)試劑ⅰ和氨氮測(cè)試劑ⅱ各6滴，蓋好比色瓶，搖勻靜止1～3min，與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)比，找出顏色相似的色塊即為待測(cè)水樣中的氨氮含量。

實(shí)施例3

氨氮測(cè)試劑ⅰ按重量份包括：酒石酸鉀鈉25份、乙酸鈉30份，蘋果酸鈉5份，乙二胺四乙酸二鈉15份，硫脲15份，溶于95份蒸餾水，并于90℃水浴鍋加熱30min，冷卻，即得。

氨氮測(cè)試劑ii按重量份包括：氫氧化鈉5份，碘化汞鉀35份，聚乙烯醇15份，溶于100份蒸餾水，即得。

試劑盒組裝：氨氮測(cè)試劑ⅰ1瓶、氨氮測(cè)試劑ⅱ1瓶，比色卡1張，比色瓶1個(gè)。

養(yǎng)殖水體氨氮檢測(cè)具體操作步驟如下：

(1)使用待測(cè)水樣潤(rùn)洗比色瓶2～3次；

(2)用吸管吸取待測(cè)水樣至比色瓶中，定容至15ml。

(3)加入氨氮測(cè)試劑ⅰ和氨氮測(cè)試劑ⅱ各6滴，蓋好比色瓶，搖勻靜止1～3min，與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)比，找出顏色相似的色塊即為待測(cè)水樣中的氨氮含量。

實(shí)施例4

氨氮測(cè)試劑ⅰ按重量份包括：酒石酸鉀鈉50份、六偏磷酸鈉15份，乙二胺四乙酸二鈉15份，聚乙烯醇15份，溶于100份蒸餾水，并于90℃水浴鍋加熱30min，冷卻，即得。

氨氮測(cè)試劑ii按重量份包括：氫氧化鈉24份，碘化汞鉀5份，乙二胺四乙酸二鈉10份，聚乙烯醇10份，溶于100份蒸餾水，即得。

試劑盒組裝：氨氮測(cè)試劑ⅰ1瓶、氨氮測(cè)試劑ⅱ1瓶，比色卡1張，比色瓶1個(gè)。

具體操作步驟如下：

(1)使用待測(cè)水樣潤(rùn)洗比色瓶2～3次；

(2)用吸管吸取待測(cè)水樣至比色瓶中，定容至15ml。

(3)按體積比1:1加入氨氮測(cè)試劑ⅰ和氨氮測(cè)試劑ⅱ0.2ml，蓋 好比色瓶，搖勻靜止1～3min，與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)比，找出顏色相似的色塊即為待測(cè)水樣中的氨氮含量。

試驗(yàn)例1

采用本發(fā)明實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4制備的氨氮測(cè)試劑對(duì)同一濃度梯度的氨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)效果觀察。

按一定濃度梯度配制氨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液，用本發(fā)明中的檢測(cè)試劑分別對(duì)其進(jìn)行溶液中的氨氮含量測(cè)定，每個(gè)濃度都進(jìn)行三次檢測(cè)，用該試劑盒對(duì)應(yīng)的比色卡進(jìn)行目視比色，比色結(jié)果測(cè)出的濃度與所配標(biāo)準(zhǔn)液濃度一致，說明本發(fā)明中的氨氮檢測(cè)試劑的精確度達(dá)到要求。

表1本發(fā)明制備的氨氮檢測(cè)試劑效果對(duì)比

試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明4個(gè)實(shí)施例制備的氨氮檢測(cè)試劑的檢測(cè)效果與所配的標(biāo)準(zhǔn)液濃度保持一致，其中實(shí)施例2在4個(gè)實(shí)施例中反 應(yīng)速度方面效果最佳，表明實(shí)施例2的氨氮測(cè)試劑中的表面活性劑和穩(wěn)定劑在配比和功能方面具有協(xié)同作用，共同促進(jìn)加快了反應(yīng)的速度。

試驗(yàn)例2本發(fā)明氨氮測(cè)試劑穩(wěn)定性及保存期的試驗(yàn)

加速試驗(yàn)：

將本發(fā)明實(shí)施例1制備的氨氮測(cè)試劑分別放在三個(gè)恒溫恒濕培養(yǎng)箱中,箱內(nèi)溫度分別為4℃、25℃、40℃；濕度均為75℃，放置2周。4℃用于保持測(cè)試劑的化學(xué)特性，作為對(duì)照樣；25℃用于模擬常溫保存樣品；40℃用于加速試驗(yàn)，作為環(huán)境破壞性樣品。然后檢測(cè)同一批養(yǎng)殖水樣，檢測(cè)結(jié)果與4℃對(duì)照，25℃、40℃氨氮檢測(cè)結(jié)果一致，表明實(shí)施例1制備的氨氮測(cè)試劑測(cè)定值均在正常顯色范圍之內(nèi)，測(cè)試劑穩(wěn)定性好。

采用本發(fā)明實(shí)施例2制備的氨氮測(cè)試劑準(zhǔn)確度及保存期的試驗(yàn)：

長(zhǎng)期試驗(yàn)：

將同一時(shí)間配制好的一批檢測(cè)試劑盒置于室溫條件下避光保存。分別在2個(gè)月、4個(gè)月、6個(gè)月、8個(gè)月、10個(gè)月、12個(gè)月之后，隨機(jī)抽取中5組檢測(cè)試劑盒對(duì)多組水樣同時(shí)進(jìn)行氨氮含量測(cè)定，同時(shí)使用該時(shí)間點(diǎn)新配制的試劑對(duì)同一水樣進(jìn)行測(cè)定，保存一段時(shí)間的試劑盒與新配置的試劑對(duì)每一組水樣的檢測(cè)結(jié)果均表現(xiàn)出一致性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明中實(shí)施例3制備的氨氮測(cè)試劑在一年時(shí)間內(nèi)不會(huì)發(fā)生變質(zhì)，長(zhǎng)期保存的試劑檢測(cè)結(jié)果同樣可以達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。

表2本發(fā)明實(shí)施例2制備的氨氮檢測(cè)試劑檢測(cè)水樣的試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明中實(shí)施例2制備的氨氮測(cè)試劑在一年時(shí)間內(nèi)不會(huì)發(fā)生變質(zhì)，長(zhǎng)期保存的試劑檢測(cè)結(jié)果同樣可以達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。

試驗(yàn)例3

采用本發(fā)明實(shí)施例3制備的氨氮測(cè)試劑與其它氨氮檢測(cè)試劑的檢測(cè)速度效果對(duì)比觀察。

第一組為實(shí)施例3制備的氨氮測(cè)試劑，第二組根據(jù)中國(guó)專利cn102393329a制備的氨氮檢測(cè)試劑、第三組為根據(jù)中國(guó)專利cn102507553a制備的氨氮檢測(cè)試劑，第四組為對(duì)照組采用分光光度計(jì)測(cè)定氨氮含量，對(duì)詔安某養(yǎng)殖場(chǎng)同一水樣進(jìn)行氨氮含量檢測(cè)，記錄試劑反應(yīng)時(shí)間，結(jié)果見表3。

表3本發(fā)明實(shí)施例3制備的氨氮測(cè)試劑檢測(cè)水樣的反應(yīng)時(shí)間對(duì)比

本試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例3制備的氨氮檢測(cè)試劑，對(duì)檢測(cè) 的精確度與反應(yīng)速度明顯優(yōu)于第2組和第3組氨氮試劑的檢測(cè)效果。

試驗(yàn)例4

采用本發(fā)明實(shí)施例4制備的氨氮鹽測(cè)試劑與其它氨氮測(cè)試劑的穩(wěn)定性對(duì)比效果觀察。

新型氨氮檢測(cè)試劑盒穩(wěn)定性對(duì)比試驗(yàn)：使用放置同一時(shí)間段6個(gè)月、12個(gè)月的第一組為實(shí)施例4制備的氨氮測(cè)試劑，第二組根據(jù)中國(guó)專利cn102393329a制備的氨氮檢測(cè)試劑、第三組為根據(jù)中國(guó)專利cn102507553a制備的氨氮檢測(cè)試劑作對(duì)比，對(duì)東山某草魚養(yǎng)殖場(chǎng)同一水樣進(jìn)行氨氮含量檢測(cè)，記錄顯色顏色變化情況，結(jié)果見表4。本發(fā)明實(shí)施例4制備的氨氮測(cè)試劑顏色與標(biāo)準(zhǔn)比色卡顏色保持一致，第2組檢測(cè)水樣變渾濁，無法比色；第3組顯色結(jié)果與比色卡顏色對(duì)比發(fā)生了變化；檢測(cè)結(jié)果顯示，本發(fā)明的氨氮檢測(cè)試劑與比色卡顏色一致，試劑穩(wěn)定性明顯優(yōu)于第2組和第3組氨氮檢測(cè)試劑。

表4本發(fā)明實(shí)施例4制備的氨氮測(cè)試劑檢測(cè)顏色變化試驗(yàn)結(jié)果

本試驗(yàn)結(jié)果表明，通過對(duì)比本發(fā)明實(shí)施例4制備的氨氮測(cè)試劑質(zhì)量的穩(wěn)定性及保存時(shí)間明顯優(yōu)于第二組和第三組氨氮檢測(cè)試劑的檢測(cè)效果。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù) 領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。