一種提高養(yǎng)殖水體透明度的復(fù)合微生態(tài)制劑及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于微生態(tài)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種復(fù)合微生態(tài)制劑，具體涉及一種提高養(yǎng)殖水體透明度的復(fù)合微生態(tài)制劑及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]“養(yǎng)魚先養(yǎng)水”，水色和透明度是池塘養(yǎng)殖的重要指標(biāo)。透明度能夠影響整個水體的穩(wěn)定性以及水的肥力，對于整個水體的穩(wěn)定、魚蝦健康成長、病害的防治有著積極的作用。隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖密度增加，投餌量的增加，代謝產(chǎn)物，糞便、殘餌等有機物會大量堆積，水體會出現(xiàn)渾濁水、黃泥巴水、黑水等透明度較低的惡化水質(zhì)。
[0003]微生物作為一種生態(tài)調(diào)節(jié)劑能夠增加溶氧、降低氨氮與亞硝酸鹽氮、抑制有害微生物的繁殖并迅速降解有機物、維持水生生態(tài)平衡。目前應(yīng)用的凈水微生物主要種類有光合細(xì)菌、芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、酵母菌等。在高密度的水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中，適時加入芽孢桿菌等微生物制劑等，能加快水體的物質(zhì)循環(huán)，降低養(yǎng)殖水體中氨氮、亞硝酸鹽等，經(jīng)常使用有助于水體保持穩(wěn)定，水既不太“肥”也不易變“清”，水環(huán)境長時間處于良好水平。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對降解有機物、降低氨氮，改善養(yǎng)殖水體環(huán)境，本發(fā)明提供了一種提高養(yǎng)殖水體透明度的復(fù)合微生態(tài)制劑及其應(yīng)用，本發(fā)明將兩種芽孢桿菌與乳酸菌復(fù)配使用，可顯著提高水體透明度，凈化水質(zhì)。
[0005]為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明通過下述技術(shù)方案予以實現(xiàn):
一種提高養(yǎng)殖水體透明度的復(fù)合微生態(tài)制劑，所述復(fù)合微生態(tài)制劑包括菌含量不低于5 X 19 CFU/g的解淀粉芽孢桿菌、菌含量不低于IX 101° CFU/g的簡單芽孢桿菌和菌含量不低于2 X 19 CFU/g的植物乳桿菌和載體。
[0006]所述簡單芽孢桿菌選用保藏編號為=CGMCC N0.10051的簡單芽孢桿菌K。
[0007]所述解淀粉芽孢桿菌選用保藏編號為:CGMCC N0.10011的解淀粉芽孢桿菌HFJ-7。
[0008]所述的載體為滑石粉，60目篩上物為O。
[0009]本發(fā)明提供了所述的復(fù)合微生態(tài)制劑在提高養(yǎng)殖水體透明度中的應(yīng)用。
[0010]所述復(fù)合微生態(tài)制劑兌水全池潑灑，用量為200?250g/畝，10?15天潑灑一次。
[0011]所述養(yǎng)殖水體包括對蝦、草魚、鰱魚、鯉魚和泥鰍的養(yǎng)殖水體。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點和技術(shù)效果:本發(fā)明選用的簡單芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、植物乳桿菌對養(yǎng)殖后期的有機物、氨氮、亞硝酸等具有顯著的降解效果，降低有機耗氧量，間接增氧，維持藻相、菌相平衡，降低水體pH，凈化改善水質(zhì)，促進養(yǎng)殖動物良好生長。將本發(fā)明所述復(fù)合微生物制劑施加于水體，可以提高養(yǎng)殖水體的透明度，具有廣泛的市場應(yīng)用前景。
【附圖說明】
[0013]圖1為所述復(fù)合微生態(tài)制劑對水體透明度的影響；
圖2為所述復(fù)合微生態(tài)制劑對水體氨氮的影響。
【具體實施方式】
[0014]本發(fā)明結(jié)合以下具體實例對本發(fā)明作進一步詳細(xì)的說明。
[0015]實施例1、菌株的篩選
一、簡單芽孢桿菌f5的分離篩選
2014年7月，從膠南沿海多處采集對蝦養(yǎng)殖區(qū)域的水樣、底泥為樣品篩選芽孢菌。底泥通過常規(guī)倍比稀釋取上清為樣品；水樣可直接作為樣品；樣品液保溫于75V 20min后，涂布于營養(yǎng)瓊脂平板進行菌株的分離、純化，得到4株芽孢桿菌。
[0016]已純化的單菌株進行氨氮降解測定。將單菌株接種于LB種子培養(yǎng)基中，37°C 180rpm培養(yǎng)約20h至菌體濃度為10s CFU/mL。按1%接種量(體積比)轉(zhuǎn)接至氨氮培養(yǎng)基中(葡萄糖 5g, MgSO4.7Η20 0.25g, K2HPO4 0.5g，(NH4)2SO4 0.lg，水 lL，pH 7.2 ?7.4，20。。150rpm培養(yǎng))，定時取樣測定氨氮濃度，該菌(編號f5)對氨氮降解效果最好，36h時降解率為99%。
[0017]經(jīng)生理生化方法初步鑒定，菌株f5為芽孢桿菌屬，其生物學(xué)特性:革蘭氏陽性、好氧桿狀菌，生長溫度15 °C?40 °C。菌落圓形，邊緣整齊，乳白色，菌落光滑平整，較濕潤。
[0018]以菌株f5的DNA為模板，16S rRNA通用引物為引物進行擴增，擴增片段進行序列測定。測序結(jié)果用Blast軟件與GenBank中相關(guān)屬種的16S rRNA序列進行比對，顯示該菌株16S rRNA序列與GenBank基因庫中芽抱桿菌屬中的的16s rRNA序列同源度最高，同源率達(dá)到99%。通過DNAMAN6.0對Genbank中已有的芽孢桿菌屬的16S rRNA序列進行遺傳進化分析，結(jié)果顯示，菌株f5 16S rWA與Bacillus si尊同源性最高，判定該菌株為芽孢桿菌屬的簡單芽孢桿菌。
[0019]將篩選到的菌株f5進行菌種保藏，保藏單位:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC);地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所；保藏日期:2014年11月25日；簡單芽孢桿菌也CiWys si尊的保藏編號為CGMCCN0.10051。
[0020]二、解淀粉芽孢桿菌HFJ-7的分離篩選
2012年I月至2012年3月，從山東省濰坊市壽光市上口鎮(zhèn)10家辣椒蔬菜大棚取30個辣椒根際土樣本。土樣分別充分研磨，于75°C水浴內(nèi)加熱處理20min，然后用無菌生理鹽水中1000倍稀釋，于營養(yǎng)瓊脂NA平板上稀釋涂布，挑取單菌落劃線純化，共篩選出68株純菌，經(jīng)鏡檢均為芽孢桿菌，其中包括菌株HFJ-7。
[0021]經(jīng)細(xì)菌生理生化方法初步鑒定，菌株HFJ-7為芽孢桿菌屬，其生物學(xué)特性:革蘭氏染色陽性，在營養(yǎng)瓊脂平板上形成的菌落直徑約3-3.5_，邊緣不整齊，中間褶皺，淡黃色。菌體形態(tài)呈桿狀，芽孢橢圓形，端生，尺寸為0.84 X 0.52 μ m。
[0022]采用分子遺傳學(xué)方法對菌株芽孢桿菌HFJ-7進一步分類鑒定。首先提取菌株HFJ-7的DNA，以該DNA為模板，16S rRNA通用引物為引物，對16S rRNA片段進行擴增，擴增片段進行序列測定。測序結(jié)果用Blast軟件與GenBank中相關(guān)屬種的16S rRNA序列進行比對，結(jié)果顯示該菌株16S rRNA序列與GenBank基因庫中芽孢桿菌屬