專利名稱：尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法。
背景技術(shù)：
尿液單羥酚類代謝物水平的顯著提高，可以提示惡性疾病的發(fā)生。通過檢測尿液中的單羥酚類代謝物含量，可以用于提前判斷惡性腫瘤發(fā)生的可能性，發(fā)現(xiàn)臨床前的惡性腫瘤對于腫瘤細胞的逆轉(zhuǎn)和治愈具有重要的意義，目前尚沒有發(fā)現(xiàn)此領(lǐng)域的研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種生產(chǎn)成本低的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法。本發(fā)明的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法，包括以下步驟
A溶液制備用1份重量的金屬汞與2 2. 2份重量的比重為1. 42g/ml的硝酸反應(yīng)所得的混合溶液，量出混合溶液的體積，加2倍體積于混合溶液的蒸餾水稀釋； B溶液濃度為0. 05g/ml 0. 15 g/ml的硝酸鎳溶液；
C溶液制備按濃度計算要求，稱取分析純硫酸汞試劑的量，溶解于3mol/L的硫酸溶液中，再加3mol/L的硫酸溶液定容至硫酸汞溶液的濃度為0. 05g/ml 0. 15 g/ml ；
將A溶液、B溶液和C溶液按體積比1 1. 5 2 0. 5 1. 5混合均勻，再在混合溶液中加入與A、B兩溶液體積之和等體積的蒸餾水，攪拌均勻，即得。本發(fā)明的制備方法所得的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑，使用方法取被檢者晨尿3ml，滴入0. 5ml的本試劑中，搖勻，靜置1_3分鐘，檢測標準是，出現(xiàn)白色/黃色沉淀或無沉淀者為陰性，出現(xiàn)紅色/深紅沉淀者為陽性。本發(fā)明的制備方法所得的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑用于療效監(jiān)測時，可在治療實施前后進行檢測，如治療后仍為陽性，則說明治療療效不明顯；如治療前為陽性反應(yīng)， 治療后為轉(zhuǎn)陰性反應(yīng)，則說明治療有效。在用于病情監(jiān)測時，可用上述方法定期檢測，在此過程中，如出現(xiàn)沉淀的顏色逐漸加深，或由陰性反應(yīng)轉(zhuǎn)為陽性反應(yīng)，則提示腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。本發(fā)明的制備方法所得的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑，應(yīng)用效果表現(xiàn)在以下幾個方面
1、大白兔腫瘤模型試驗，接種肝癌細胞IO5個，本試劑可以在接種癌細胞24小時后檢測出陽性；而利用B超則在5天以后才能檢測到腫瘤。該試驗結(jié)果表明，本試劑能夠發(fā)現(xiàn)臨床前即亞臨床時期的腫瘤。應(yīng)用到人群篩查上，本試劑可以發(fā)現(xiàn)潛伏期的癌癥。2、應(yīng)用本試劑對已確診的965例惡性腫瘤患者和非惡性腫瘤病人進行測試，其中惡性腫瘤337例，非惡性腫瘤6 例，結(jié)果是陽性反應(yīng)者341例，陰性反應(yīng)者6M例。與病理診斷結(jié)果對照后，假陽性6例，假陰性12例，陽性325例，陰性622例。各項檢測指標為 敏感度96%，特異性99%，準確率98%，假陽性率1%，假陰性率3. 6%，陽性結(jié)果預(yù)測值98. 2%，陰性結(jié)果預(yù)測值98. 1%。3、本試劑應(yīng)用于療效監(jiān)測，對57例已確診惡性腫瘤的65個化療療程進行療效評價，采用的指標為完全緩解、部分緩解、穩(wěn)定和進展。本試劑檢測結(jié)果為19個化療療程為完全緩解和部分緩解，與同期臨床評價相比(臨床評價，完全緩解和部分緩解的化療療程為21 個)，本試劑評價的符合率為90%。4、應(yīng)用本試劑對93例已治療出院的惡性腫瘤患者進行一年半的病情跟蹤觀察， 16例逐漸顯示陽性反應(yīng)，提示腫瘤的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。與同期的臨床資料相比，確診者為14 例，準確率為87. 5%。本發(fā)明的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法，具有生產(chǎn)成本低的特點，通過對尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法進行對比研究，確定了經(jīng)濟、簡便的制備方法和試劑各組分的最佳配比，所得的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑穩(wěn)定性和靈敏度高、假陽性率和假陰性率低，適合于人群篩查和臨床檢驗的要求。
具體實施例方式實施例1 配制1750ml的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑
本試劑由三種溶液組成，按體積比例，即A溶液B溶液C溶液=1:2:1，分別配制為 250ml, 500ml 和 250ml，其中
1、A溶液稱取64g汞，溶解于比重1.42g/ml的硝酸96ml中，待汞完全溶解，加入 166. 7ml的蒸餾水，即配制成250ml的A溶液；
2、B溶液硝酸鎳溶液的濃度為0.lg/ml，稱取6水硝酸鎳80g，溶解于適量的5mol/L 的硝酸溶液中，再加入5mol/L的硝酸溶液定容至500ml，即配制成濃度為0. lg/ml的硝酸鎳溶液；
3、C溶液硫酸汞溶液的濃度為0.lg/ml，稱取硫酸汞25g，溶解于適量的3mol/L的硫酸溶液中，再加3mol/L的硫酸溶液定容至250ml，即配制成濃度為0. lg/ml的硫酸汞溶液；
然后，將以上三種溶液混合均勻，最后，再加入A、B兩溶液體積之和等體積的蒸餾水 750ml,攪拌均勻，即配制成1750ml本試劑。實施例2 配制1750ml的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑
本試劑由三種溶液組成，按體積比例，即A溶液B溶液C溶液=1:2:1，分別配制為 250ml, 500ml 和 250ml，其中
1、A溶液同實施例1；
2、B溶液硝酸鎳溶液濃度為0.15g/ml，稱取6水硝酸鎳119. 3g，溶解于適量的5mol/ L的硝酸溶液中，再加入5mol/L的硝酸溶液定容至500ml，即配制成濃度為0. 15g/ml的硝酸鎳溶液。3、C溶液同實施例1。然后，將以上三種溶液混合均勻，最后，再加入A、B兩溶液體積之和等體積的蒸餾水750ml，攪拌均勻，即配制成1750ml本試劑。實施例3 配制1500ml的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑
本試劑由三種溶液組成，按體積比例，即A溶液B溶液C溶液=1 1. 5:1，分別配制為 250ml, 375ml 和 250ml，其中1、A溶液同實施例1；
2、B溶液硝酸鎳溶液濃度為0.lg/ml，稱取6水硝酸鎳59. 7g，溶解于適量的5mol/L 的硝酸溶液中，再加入5mol/L的硝酸溶液定容至375ml，即配制成濃度為0. lg/ml的硝酸鎳溶液；
3、C溶液同實施例1；
然后，將以上三種溶液混合均勻，最后，再加入A、B兩溶液體積之和等體積的蒸餾水 625ml,攪拌均勻，即配制成1500ml本試劑。
權(quán)利要求
1. 一種尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法，其特征在于它包括以下步驟 A溶液制備用1份重量的金屬汞與2 2. 2份重量的比重為1. 42g/ml的硝酸反應(yīng)所得的混合溶液，量出混合溶液的體積，加2倍體積于混合溶液的蒸餾水稀釋； B溶液濃度為0. 05g/ml 0. 15 g/ml的硝酸鎳溶液；C溶液制備按濃度計算要求，稱取分析純硫酸汞試劑的量，溶解于3mol/L的硫酸溶液中，再加3mol/L的硫酸溶液定容至硫酸汞溶液的濃度為0. 05g/ml 0. 15 g/ml ；將A溶液、B溶液和C溶液按體積比1 1. 5 2 0. 5 1. 5混合均勻，再在混合溶液中加入與A、B兩溶液體積之和等體積的蒸餾水，攪拌均勻，即得。
全文摘要
一種尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法，包括以下步驟A溶液制備用1份重量的金屬汞與2～2.2份重量的硝酸反應(yīng)所得的混合溶液，加蒸餾水稀釋；B溶液濃度為0.05g/ml～0.15g/ml的硝酸鎳溶液；C溶液制備硫酸汞溶液的濃度為0.05g/ml～0.15g/ml；將A溶液、B溶液和C溶液按體積比1:1.5～2:0.5～1.5混合均勻，再在混合溶液中加入蒸餾水，攪拌均勻，即得。本發(fā)明的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法，具有生產(chǎn)成本低的特點，所得的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑穩(wěn)定性和靈敏度高、假陽性率和假陰性率低，適合于人群篩查和臨床檢驗的要求。
文檔編號G01N21/82GK102565055SQ201210011749
公開日2012年7月11日 申請日期2012年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月16日
發(fā)明者王奇, 陶海南 申請人:萬可, 宜春市中奇金域生物科技有限公司