專利名稱：一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒及其制備方法和使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒及其制備方法和使用方法，具體涉及一種具有富集作用、可特異性、快速定量檢測導(dǎo)致感染性疾病的微生物的磁性熒光試劑盒組成、制備及使用方法。
背景技術(shù)：
微生物的快速檢測方法是應(yīng)用微生物學(xué)中一個迅速發(fā)展的領(lǐng)域，無論是對感染性疾病的控制和治療，還是食品安全的監(jiān)測和管理，都迫切需要快速的致病菌檢測方法。目前對致病菌決速檢測主要采用微生物學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)的方法對致病菌進(jìn)行分離、檢測、鑒定和計數(shù)。目前這些致病菌檢測方法仍存在局限性，到目前為止，還沒有一種方法能簡便地從多種生物樣本中分離富集致病菌；進(jìn)而，適時的回答出以下兩個問題1、有沒有特定的致病菌，如威脅食品安全的沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等，及嚴(yán)重威脅人類生命質(zhì)量的結(jié)核分枝桿菌、肺炎鏈球菌(定性的檢查)；2、如果有，有多少？(定量的檢測)這對于確定致病菌及采用相應(yīng)治療方法至關(guān)重要。免疫磁性分離方法，是將特異性抗體偶聯(lián)在磁性顆粒表面，與樣品中被檢致病微生物發(fā)生特異性結(jié)合，載有致病微生物的磁性顆粒在外加磁場的作用下，向磁極方向聚集， 并聚集在容器的內(nèi)壁，稍后將標(biāo)本液體移出，撒去磁場，收集磁性微球，可以將微生物從磁性微球上解離下來，這種方法可使致病微生物不但得以從多種樣品，如土壤樣品、食物樣品、臨床樣本中得到分離，而且也得到濃縮富集。免疫磁性分離技術(shù)從乳及乳制品、肉類和蔬菜中分離出沙門氏菌，其檢測限為每克IX IO2個細(xì)菌。Seo等將熒光免疫分析(FIA)與免疫磁性分離結(jié)合，測定接種于牛肉、蘋果汁和生牛奶中的低濃度大腸桿菌，每克牛肉中僅有4個大腸桿菌即可被檢出?？梢妼⒚庖叽判苑蛛x技術(shù)和其它檢驗方法，如酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)，多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)， 熒光免疫分析(FIA)，電子化學(xué)發(fā)光(ECL)相結(jié)合，可以數(shù)倍地提高分離效率和檢測極限。 而目前在微生物檢測中，所有與免疫磁性分離相結(jié)合的鑒定和檢測方法均包括后續(xù)生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)的檢查方法，操作繁瑣，設(shè)備條件要求高，應(yīng)用前景不容樂觀。熒光微球是一種載有熒光分子的功能性微球，由于其在單個微球中富集了能夠發(fā)射熒光的分子，在許多領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。目前結(jié)合特異性抗體的熒光微球已用于標(biāo)記和識別各種抗原，包括多糖、蛋白質(zhì)、細(xì)胞等。所檢測的熒光強度則與待測物濃度線性相關(guān)，從而實現(xiàn)待測抗原的定性及定量檢測。該方法最突出的優(yōu)點是可以在同一體系中同時進(jìn)行多標(biāo)靶分析，特異性強，可實現(xiàn)快速診斷。因此利用磁性納米微球的富集作用和熒光微球的定性定量等現(xiàn)代納米技術(shù)，結(jié)合現(xiàn)代生物檢測方法尋找一種簡單有效的方法快速富集各種微生物，并特異性、快速定性、定量檢測微生物是本發(fā)明需要解決的主要內(nèi)容。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒，以解決現(xiàn)有微生物檢測試劑盒所存在的諸多不足之處。該發(fā)明適用于醫(yī)院診斷，食品衛(wèi)生部門檢驗，或者科研機構(gòu)研究使用。本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之一是公開一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒。本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之二是提供該磁性熒光試劑盒的制備方法。本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之三是提供該磁性熒光試劑盒的使用方法。本發(fā)明的原理，參見

圖1:熒光微球由于微球的表面標(biāo)有熒光物質(zhì)或微球體內(nèi)結(jié)構(gòu)含有熒光物質(zhì)的微球，受到外界能量刺激能激發(fā)出熒光。近年來，人們已經(jīng)能夠制備各種各樣的粒徑從納米級到亞微米級的熒光微球。免疫熒光微球有比較穩(wěn)定的形態(tài)結(jié)構(gòu)及發(fā)光行為，受溶劑、熱、電、磁等外界條件的影響比純熒光化合物小很多。將熒光分子或發(fā)光材料通過高分子層或二氧化硅殼材料包裹或連接，表面再偶聯(lián)靶向生物分子，則可形成具有靶向性的熒光納米粒子；制備了熒光染料染色的納米微球，通過特定的化學(xué)修飾，形成免疫磁性微球，可以使數(shù)千個熒光納米粒子與一個微生物的表面抗原結(jié)合，這種放大效應(yīng)的檢測可實現(xiàn)對微生物的超高靈敏檢測。免疫磁性微球在磁場中具有順磁性和高分子粒子的特性。免疫磁性微球的順磁性使固液分離更加簡便，可省去過濾等繁雜的傳統(tǒng)操作；而且免疫磁性微球顆粒小，比表面積大，與其它物質(zhì)偶聯(lián)容量大，懸浮穩(wěn)定性好，有利于抗原抗體偶聯(lián)反應(yīng)順利地進(jìn)行。將待測樣品和免疫磁性微球和免疫熒光微球混合時，待測樣品中微生物可同時與包被有微生物特異性抗體的免疫磁性微球和免疫熒光微球結(jié)合形成新的復(fù)合物。通過磁場時，進(jìn)行磁性分選，該復(fù)合物可被滯留，與其它組分相分離，對經(jīng)過富集后復(fù)合物可通過熒光檢測進(jìn)行微生物形態(tài)觀測或熒光強度測定，其熒光點數(shù)量及熒光強度與樣品中微生物的數(shù)量相關(guān)。免疫磁性分離簡便易行，免疫磁珠分離技術(shù)用在微生物檢測方面能準(zhǔn)確快速分離出出樣品中的微生物。本發(fā)明通過免疫磁性微球?qū)颖镜母患饔?，結(jié)合免疫熒光微球靈敏的定量的檢測效果，可同時高效的分離出樣品中的微生物及與微生物特異性結(jié)合的免疫熒光微球，通過檢測熒光強度，快速對微生物進(jìn)行定性、定量分析。這對于食品衛(wèi)生、疾病預(yù)防和治療的具有重要的意義。本發(fā)明所需要解決的技術(shù)問題，可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)作為本發(fā)明的第一方面，一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒，包括以下組成成分1)與待測微生物特異性結(jié)合的免疫磁性微球；2)與待測微生物特異性結(jié)合的免疫熒光微球。進(jìn)一步，所述免疫磁性微球為具有磁響應(yīng)性的納米微球，其粒徑為20-150nm，磁響應(yīng)時間小于30min。所述免疫磁性微球的優(yōu)選磁響應(yīng)性時間小于lOmin。所述免疫磁性微球的優(yōu)選磁響應(yīng)性時間小于3min。進(jìn)一步，所述免疫磁性微球為超順磁性納米微球，磁性材料為鐵、鈷、鎳及其合金納米粒子，包括 Fe3O4, Fe2O4, FexPty, CoxPty, MnFexOy，CoFexOy，NiFexOy，CuFexOy，ZnFexOy，and CdFexOy，其中 χ 和 y 為 1-6。所述免疫磁性微球具有核殼結(jié)構(gòu)的磁性聚合物復(fù)合微球，聚合物材料包括聚苯乙
烯、二氧化硅等。所述免疫磁性微球優(yōu)選為具有表面功能化核殼結(jié)構(gòu)的磁性二氧化硅復(fù)合微球。所述免疫磁性微球優(yōu)選為功能化親水性磁性微球，表面結(jié)合與微生物特異性結(jié)合的單克隆抗體或多克隆抗體。進(jìn)一步，所述免疫熒光微球為能發(fā)射熒光的納米微球，其粒徑為10-150nm。進(jìn)一步，所述的免疫熒光微球的優(yōu)選微球粒徑為5-50nm。所述免疫熒光微球包括無機熒光材料、有機熒光材料及量子點發(fā)光材料。所述熒光材料包括熒光素類、羅丹明類、鄰苯二甲醛類等化合物，如異硫氰酸熒光素(FlTC)、羅丹明等。所述免疫熒光微球采用熒光材料與納米微球共價結(jié)合。所述免疫熒光微球采用熒光材料包埋于納米微球內(nèi)部。所述免疫熒光微球為含熒光物質(zhì)的聚合物復(fù)合微球，聚合物材料包括聚苯乙烯、
二氧化硅。所述免疫熒光微球優(yōu)選為具有表面功能化二氧化硅復(fù)合微球。作為本發(fā)明的第二方面，一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟(1)免疫磁性微球的制備通過雙功能偶聯(lián)試劑將磁性納米微球與微生物抗原特異性抗體偶聯(lián)，磁分離，充分洗滌后，加入含保護(hù)劑及分散劑的緩沖溶液，冷凍干燥后制得偶聯(lián)抗體的磁性納米微球；(2)免疫熒光微球的制備通過雙功能偶聯(lián)試劑將熒光納米微球與微生物抗原特異性抗體偶聯(lián)，離心或超濾透析分離未結(jié)合的抗體，加入含保護(hù)劑及分散劑的緩沖溶液，冷凍干燥后制得偶聯(lián)抗體的熒光納米微球。作為本發(fā)明的第三方面，一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒的使用方法，該試劑盒將對微生物信號的檢測轉(zhuǎn)化為對熒光強度的檢測，其操作步驟為(1)將待測樣品、免疫磁性微球凍干粉及免疫熒光微球加入緩沖溶液中；(2)所鑒定微生物表面具有同時與免疫磁性微球及免疫熒光微球相結(jié)合表面抗原決定簇；故微生物表面均勻分布免疫磁性微球和免疫熒光微球；(3)通過磁性分離免疫磁性微球富集與之結(jié)合的微生物；(4)通過測定與所分離、富集的微生物相結(jié)合的免疫熒光微球的熒光強度對微生物作出定性及定量的判斷。進(jìn)一步，免疫磁性微球和免疫熒光微球比例為1 2 1 2。本發(fā)明的有益效果與目前常規(guī)的致病菌檢測方法相比，如細(xì)菌培養(yǎng)、免疫ELISA法及PCR擴增方法， 相比較，該方法具有快速富集微生物、使用方便、準(zhǔn)確度高、敏感度高、假陽性低、設(shè)備要求低等特點，可廣泛應(yīng)用于傳染病檢測、疾病預(yù)防及治療、食品安全等領(lǐng)域。
以下結(jié)合附圖和具體實施方式
來進(jìn)一步說明本發(fā)明。圖1為本發(fā)明的原理示意圖。
具體實施例方式為了使本發(fā)明的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體圖示，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。實施例1含氨基基團(tuán)的納米磁性微球的制備免疫磁性微球具有核殼結(jié)構(gòu)的磁性聚合物復(fù)合微球，聚合物材料包括聚苯乙烯、 二氧化硅，優(yōu)選為具有表面功能化核殼結(jié)構(gòu)的磁性二氧化硅復(fù)合微球。在500ml三頸瓶中，加入5. Og經(jīng)過去離子水洗滌過的四氧化三鐵粉末，加入200ml 的去離子水，在600rpm轉(zhuǎn)速下攪拌分散后，加入IOOml硝酸溶液(3. 0M)，室溫下攪拌10分鐘。然后用磁鐵分離并用去離子水洗滌3-5次。將洗滌后的四氧化三鐵泥漿攪拌分散在 400ml的檸檬酸鈉溶液中(0. 2M)，接著用磁鐵分離并用去離子水洗滌3-5次，最后所得到的四氧化三鐵分散在200ml去離子水中，制備固含量約為2. 的磁流體。在一個500ml的三頸瓶中，加入5. Og事先制備好的磁流體，并用40mL去離子水和 200ml無水乙醇稀釋，然后在高速攪拌下加入5ml的濃氨水，加入4ml的正硅酸乙酯，維持?jǐn)嚢?h后，再向此體系中加入0.5ml的三乙氧基氨丙基硅烷(APS)，繼續(xù)反應(yīng)12h。反應(yīng)結(jié)束后離心洗滌，所制備的免疫磁性微球的粒徑為80-90nm，磁飽和強度為8. Oemu/g，免疫磁性微球的磁響應(yīng)性時間小于3min。實施例2含氨基基團(tuán)的納米熒光微球的制備免疫熒光微球采用熒光材料與納米微球共價結(jié)合。通常免疫熒光微球采用熒光材料包埋于納米微球內(nèi)部。免疫熒光微球為含熒光材料的聚合物復(fù)合微球，聚合物材料包括聚苯乙烯、二氧化硅，優(yōu)選為具有表面功能化二氧化硅復(fù)合微球。在一個25ml的單頸圓底燒瓶中，用IOml的無水乙醇溶解0. 0356g的熒光素FITC， 然后加入0. 0183g的三乙氧基氨丙基硅烷(APS)，避光攪拌反應(yīng)48h，制得鍵合熒光分子 FITC的硅烷偶聯(lián)劑。在一個500ml的三頸瓶中，加入5ml去離子水和250ml無水乙醇，然后在高速攪拌下加入8. 5ml的濃氨水，加入7. 5ml的正硅酸乙酯，維持?jǐn)嚢?h后，加入2ml上述制備的鍵合熒光分子異硫氰酸熒光素(FlTC)的硅烷偶聯(lián)劑，同時再向此體系中加入5ml的正硅酸乙酯，反應(yīng)12h后再向此體系中加入0. 5ml的三乙氧基氨丙基硅烷(APS)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12h。 反應(yīng)結(jié)束后離心洗滌，所制備的熒光微球的粒徑為60-70nm。實施例3抗沙門氏菌表面脂多糖的免疫磁性微球的制備1、取大約25mg的上述制備的氨基磁性微球于5ml含5%戊二醛的磷酸鹽緩沖液 (ρΗ7· 4)中，混合振蕩，室溫反應(yīng)3h。2、磁分離微球，用磷酸鹽緩沖液溶液充分洗滌，磁分離后，棄上清液，除去未反應(yīng)的戊二醛。
3、將活化后氨基磁性微球置于4ml磷酸鹽緩沖液中，加入2ml含抗沙門氏菌表面脂多糖抗體(10mg/ml)的磷酸鹽緩沖液溶液，振蕩，37°C反應(yīng)6h。4、磁分離微球，用磷酸鹽緩沖液溶液充分洗滌，磁分離后，棄上清液，除去未反應(yīng)的偶聯(lián)的抗體，制得抗體偶聯(lián)的抗沙門氏菌_免疫磁性微球。實施例4抗沙門氏菌表面脂多糖免疫熒光微球的制備1、取大約25mg的上述制備的氨基熒光微球于5ml含5%戊二醛的磷酸鹽緩沖液 (ρΗ7· 4)中，混合振蕩，室溫反應(yīng)3h。2、離心分離微球，用磷酸鹽緩沖液溶液充分洗滌，離心后，棄上清液。3、將活化后氨基熒光微球置于4ml磷酸鹽緩沖液中，加入2ml含抗沙門氏菌表面脂多糖抗體(10mg/ml)的磷酸鹽緩沖液溶液，振蕩，37°C反應(yīng)6h。4、離心分離免疫熒光微球，用磷酸鹽緩沖液溶液充分洗滌，離心，棄上清液，制得抗體偶聯(lián)的抗沙門氏菌_免疫熒光微球。實施例5熒光顯微鏡檢測沙門氏菌1、將沙門氏菌接種于培養(yǎng)基中，37°C振蕩過夜，細(xì)菌計數(shù)。2、取IO3個沙門氏菌、IOmg免疫磁性微球凍干粉及IOmg免疫熒光微球凍干粉加入 IOml孵育緩沖液(IOmM的磷酸鹽緩沖液，pH值7. 4,0. 05%吐溫20)，室溫溫和搖蕩5min。3、磁性分離磁性微球，棄上清液。4、用5ml孵育緩沖液洗滌三次，磁分離，去除所有未結(jié)合的抗沙門氏菌_免疫熒光微球。5、撤去磁場，將所得樣品懸于少量孵育緩沖液中。6、通過熒光顯微鏡觀察沙門氏菌表面吸附的熒光微球所形成的熒光點，并進(jìn)行細(xì)菌計數(shù)。實施例6熒光強度定量檢測沙門氏菌1、將沙門氏菌接種于培養(yǎng)基中，37°C振蕩過夜，細(xì)菌計數(shù)。2、取不同細(xì)菌數(shù)的沙門氏菌、加入IOml含抗沙門氏菌表面脂多糖的免疫磁性微球和免疫熒光微球的孵育緩沖液(IOmM的磷酸鹽緩沖液，pH值7. 4,0. 05%吐溫20)，室溫溫和搖蕩5min。3、磁性分離磁性微球，棄上清液。 4、用5ml孵育緩沖液洗滌三次，磁分離，去除所有未結(jié)合的抗沙門氏菌_免疫熒光微球。5、撤去磁場，加入Iml 8M脲溶液變性蛋白，使免疫熒光微球和免疫磁性微球分離。6、磁性分離免疫磁性微球，收集上清液。7、通過熒光計數(shù)儀測定上清液熒光強度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。8、將待測樣品所產(chǎn)生的熒光強度與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，即得待測樣品沙門氏菌含量。以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下本發(fā)明還會有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等同物界定。
權(quán)利要求
1.一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒，包括以下組成成分1)與待測微生物特異性結(jié)合的免疫磁性微球；2)與待測微生物特異性結(jié)合的免疫熒光微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫磁性微球為具有磁響應(yīng)性的納米微球，其粒徑為20-150nm，磁響應(yīng)時間小于30min。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫磁性微球的磁響應(yīng)性時間小于 IOmin0
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫磁性微球的磁響應(yīng)性時間小于 3min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫磁性微球為超順磁性納米微球，磁性材料為鐵、鈷、鎳及其合金納米粒子，包括Fe3O4，F(xiàn)e2O4，F(xiàn)exPty, CoxPty, MnFexOy, CoFexOy，NiFexOy，CuFexOy，ZnFexOy，and CdFexOy，其中 χ 禾口 y 為 1-6。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫磁性微球具有核殼結(jié)構(gòu)的磁性聚合物復(fù)合微球，聚合物材料包括聚苯乙烯、二氧化硅。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫磁性微球為具有表面功能化核殼結(jié)構(gòu)的磁性二氧化硅復(fù)合微球。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫磁性微球為功能化親水性磁性微球，表面結(jié)合與微生物特異性結(jié)合的單克隆抗體或多克隆抗體。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫熒光微球為能發(fā)射熒光的納米微球，其粒徑為5-150nm。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫熒光微球粒徑為5-50nm。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫熒光微球包括無機熒光材料、有機熒光材料及量子點發(fā)光材料。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光材料包括熒光素類、羅丹明類、鄰苯二甲醛類化合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫熒光微球采用熒光材料與納米微球共價結(jié)合。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫熒光微球采用熒光材料包埋于納米微球內(nèi)部。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫熒光微球含熒光材料的聚合物復(fù)合微球，聚合物材料包括聚苯乙烯、二氧化硅。
16.據(jù)權(quán)利要求15所述的試劑盒，其特征在于，所述免疫熒光微球為具有表面功能化二氧化硅復(fù)合微球。
17.—種如權(quán)利要求1所述的一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟(1)免疫磁性微球的制備通過雙功能偶聯(lián)試劑將磁性納米微球與微生物抗原特異性抗體偶聯(lián)，磁分離，充分洗滌后，冷凍干燥后制得偶聯(lián)抗體的磁性納米微球；(2)免疫熒光微球的制備通過雙功能偶聯(lián)試劑將熒光納米微球與微生物抗原特異性抗體偶聯(lián)，離心或超濾透析分離未結(jié)合的抗體，冷凍干燥后制得偶聯(lián)抗體的熒光納米微球。
18.—種如權(quán)利要求1所述的一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒的使用方法，該試劑盒將對微生物信號的檢測轉(zhuǎn)化為對熒光強度的檢測，其操作步驟為(1)將待測樣品、免疫磁性微球及免疫熒光微球加入緩沖溶液中；(2)所鑒定微生物表面具有同時與免疫磁性微球及免疫熒光微球相結(jié)合表面抗原決定簇；(3)通過磁性分離免疫磁性微球富集與之結(jié)合的微生物及結(jié)合于微生物上的免疫熒光微球；(4)通過測定與所分離、富集的微生物相結(jié)合的免疫熒光微球的熒光強度對微生物作出定性及定量的判斷。
19.根據(jù)權(quán)利要求17所述的使用方法，其特征在于，免疫磁性微球和免疫熒光微球的比例為1 2 1 2。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種快速檢測微生物的磁性熒光試劑盒及其制備方法和使用方法。該試劑盒包括兩個組成成分1)與待測微生物特異性結(jié)合的免疫磁性微球；2)與待測微生物特異性結(jié)合的免疫熒光微球。制備方法包括如下步驟(1)免疫磁性微球的制備，(2)免疫熒光微球的制備。使用方法(1)將待測樣品、免疫磁性微球凍干粉及免疫熒光微球加入緩沖溶液中；(2)所鑒定微生物表面具有同時與免疫磁性微球及免疫熒光微球相結(jié)合表面抗原決定簇；(3)通過磁性分離免疫磁性微球富集與之結(jié)合的微生物；(4)通過測定與所分離、富集的微生物相結(jié)合的免疫熒光微球的熒光強度對微生物作出定性及定量的判斷。本發(fā)明具有快速、定量、適用范圍廣的優(yōu)點。
文檔編號G01N33/53GK102253193SQ20101017865
公開日2011年11月23日 申請日期2010年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月20日
發(fā)明者府宇雷, 府壽寬, 李莉, 楊武利 申請人:上海醫(yī)脈賽科技有限公司