作 為制備式（2)化合物的通用指南，所述過程可與以下類似：
[0126] -向溶于溶劑（0.57M)的被保護的乙二醇衍生物（1當量）溶液加入胺堿 (1. 05-1. 14當量）。所述溶液隨后冷卻至0°C并逐滴加入三氟甲基磺酸酐（0. 97-1. 0當 量），溫度維持在（_2°C至2°C)。反應能升溫至環(huán)境溫度，再攪拌1小時。GC-MS分析表明 三氟甲磺酸酯的形成在此時完成。
[0127] 制備式（2)化合物的工藝在以下組合情況下運行最佳：保護基團是叔丁基二甲基 娃基，溶劑是甲苯且喊是N, N-二異丙基乙胺；或保護基團是叔丁基二苯基娃基，溶劑是甲 苯且喊是N, N-二異丙基戊_3_胺。
[0128] 第二步中，親核雷帕霉素在堿存在下用式（2)化合物烷化，其中所述堿具有式 NR1R2R3 ：
[0129] · R1和R2獨立地是2-甲基丙基或異丙基；和
[0130] · R3是-CH (R4) (R5)，其中R4和R5是相同或不同的烷基，其任選連接形成環(huán)。
[0131]
[0132] 特別優(yōu)選的堿是N，N-二異丙基戊-3-胺、N，N-二異丙基壬-5-胺或N，N-二異丁 基-2, 4-二甲基戊-3-胺。雷帕霉素與式（2)化合物反應的過程如上所述在有機非質子溶 劑中于25°C至70°C溫度下完成最佳，優(yōu)選40°C至50°C，尤其是40°C。所述工藝在甲苯、三 氟甲基甲苯、二甲苯、二氯甲烷、庚烷、戊烷、或其混合物中完成得特別好。反應最優(yōu)選的溶 劑是甲苯。適合所述工藝的保護基團包括但不限于三異丙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔己 基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、三苯甲基、二甲氧基三苯甲基和二苯基甲基。例如，所述 反應可與以下過程類似：
[0133] -向如上第一步制備的三氟甲磺酸酯（1. 5-5當量）溶液中加入堿（1. 73-5. 75當 量），然后是雷帕霉素（1當量）。采用更多溶劑洗滌以獲得雷帕霉素0.11M的終濃度。反 應加熱至合適溫度并通過HPLC監(jiān)控。
[0134] 此步驟的最佳反應條件組合是N，N-二異丙基戊-3-胺堿、叔丁基二苯基硅基保護 基團和甲苯溶劑的組合。用上述第二步特定條件選擇的最佳溫度是約40°C至50°C。
[0135] 反應混合物中被保護的中間體能通過硅膠色譜純化。特別地，所述技術適于純化 硅基保護的依維莫司的粗反應混合物。用于純化的溶劑可以是酯和非極性脂肪族溶劑的混 合物，所述酯例如乙酸乙酯或乙酸異丙酯，所述非極性脂肪族溶劑例如正庚烷、正己烷、庚 烷異構體、己烷異構體、或混合物。這些溶劑系統(tǒng)確保粗產物的充分溶解、其分離和洗脫?；?于甲苯和甲基異丁基酮、甲基乙基酮、異丙醇和乙醇的系統(tǒng)無法使用，因為這些溶劑中的溶 劑強度、共溶劑溶解度、或粗產物溶解度欠佳。加入極性和質子共溶劑如水或甲醇多至5體 積％ (例如1-5體積％ )，可通過減弱硅醇基團酸性來增加靶分子在固定相上的穩(wěn)定性。另 外，反應混合物能通過鹽化合物沉淀或結晶為副產物進行預處理。副產物隨后可吸附于硅 膠并過濾移除，接著是基于正相硅膠色譜的后續(xù)純化。選擇性沉淀（結晶）和吸附過程能 提高固定相的長期穩(wěn)定性并避免運轉之間冗長的就地清洗或用一次性濾芯預處理反應混 合物以移出鹽化合物的需求。通過選擇顯示出可接受選擇性的固定相來實現(xiàn)純度的提高。 總體上，反應步驟間的純化能有效移除源自起始原料雜質化學轉化的特定副產物。最終化 合物的純度還取決于此階段移除所述副產物的效率。
[0136] 此純化步驟能控制關鍵雜質乙基-依維莫司的前體到約0. 2%水平。同時，它確保 整個純化過程中靶產物的穩(wěn)定性。另外，這是一個穩(wěn)健工藝且能放大到工業(yè)背景下的全部 商業(yè)批次。
[0137] 制備依維莫司的下一步是脫除保護基團。因此，制備依維莫司的工藝能包括以下 步驟：
[0138] (a)雷帕霉素在堿存在下與式（2)化合物反應，
[0139] (b)移除保護基團以獲得依維莫司。
[0140] 制備依維莫司的工藝能進一步延伸到配制含所得依維莫司的藥物組合物。
[0141] 除非另有說明，移除保護基團能在本領域已知的標準反應條件下完成，優(yōu)選在沒 有或通常存在酸或堿的情況下特定提及的那些，優(yōu)選引起保護基團移除但同時不導致依維 莫司化學降解的酸或堿。所述保護基團優(yōu)選用酸移除。特別適合從依維莫司移除保護基 團的酸是氟化氫吡啶、氟化氫三乙胺、氟化銨、六氟異丙醇、乙酸、三氟乙酸、鹽酸、硫酸、或 其組合，所述酸優(yōu)選是氟化氫吡啶或六氟異丙醇。移除保護基團能在與先前反應步驟所用 相同的溶劑中發(fā)生。然而，所述溶劑可用有利于保護基團移除的溶劑替代。例如，所述保 護基團能在選自四氫呋喃、甲基四氫呋喃、丙酮、庚烷、甲醇、乙腈和六氟異丙醇的溶劑中移 除，優(yōu)選四氫呋喃或六氟異丙醇。所述保護基團在_78°C到70°C的溫度下移除，優(yōu)選0°C至 70°C。脫保護反應在溶于四氫呋喃的氟化氫吡啶中進行得最好，任選采用環(huán)境溫度。
[0143] 意外發(fā)現(xiàn)特定保護基團與本文所述特定堿聯(lián)用時，能放大總體反應產率。所述保 護基團能選自三異丙基硅基、叔丁基二甲基硅基、二甲基叔己基硅基、叔丁基二苯基硅基、 三苯甲基、二苯甲基、二甲氧基三苯甲基或二苯基甲基，優(yōu)選選自叔丁基二甲基硅基、叔丁 基二苯基硅基、三苯甲基和二苯基甲基，更優(yōu)選叔丁基二甲基硅基和叔丁基二苯基硅基，特 別是叔丁基二苯基硅基。用于制備依維莫司而選擇的本發(fā)明所述堿與三異丙基硅基、叔丁 基二甲基硅基、二甲基叔己基硅基、叔丁基二苯基硅基、三苯甲基、二苯甲基、或二苯基甲基 保護基團的特定組合，優(yōu)選叔丁基二甲基硅基或叔丁基二苯基硅基，特別是叔丁基二苯基 硅基保護基團，能使制備依維莫司的工藝有利地以高產率進行，特別是與N，N-二異丙基 戊-3-胺、N，N-二異丙基壬-5-胺或N，N-二異丁基-2, 4-二甲基戊-3-胺組合時，尤其是 N, N-二異丙基戊_3_胺。
[0144] 在特定實施方式中，N，N-二異丙基戊-3-胺和保護基團叔丁基二苯基硅基被選擇 用于如本公開所述的制備依維莫司的工藝。
[0145] 在另一特定實施方式中，N，N-二異丙基戊-3-胺和保護基團叔丁基二甲基硅基被 選擇用于制備依維莫司的工藝。
[0146] 在另一實施方式中，N，N-二異丙基戊-3-胺和保護基團三苯甲基被選擇用于制備 依維莫司的工藝。
[0147] 在另一個實施方式中，堿N，N-二異丙基壬-5-胺與叔丁基二苯基硅基保護基團聯(lián) 用于本公開的工藝。N，N-二異丙基壬-5-胺還能與三苯甲基保護基團聯(lián)用。
[0148] 另外，N，N-二異丁基-2, 4-二甲基戊-3-胺還能與叔丁基二苯基硅基保護基團聯(lián) 用于本公開的工藝。本公開還特別設想了 N，N-二異丁基-2, 4-二甲基戊-3-胺與三苯甲 基保護基團的組合。N，N-二異丁基-2, 4-二甲基戊-3-胺和N，N-二異丙基壬-5-胺還能 與叔丁基二甲基硅基保護基團一起使用。
[0149] 脫保護反應完成后，根據所得化合物的物理化學性質選擇合適的處理過程和純 化。在化合物是例如依維莫司的情況下，中和反應混合物且產物（如依維莫司）通過不溶 于水的有機溶劑提取并從有機相分離。分離后，產物（如依維莫司）能通過技術人員已知 的方法進一步洗滌、干燥和純化。通過在本公開的工藝中使用權利要求1定義的堿，任選與 優(yōu)選保護基團組合，合成產物的純度更高。這使得純化更簡單，所需的純化步驟更少。所得 產物能用于進一步合成或作為終產物?？杉尤胭x形劑例如著色劑或抗氧化劑。如果產物為 API，例如在依維莫司情況中，所述化合物能用抗氧化劑（例如2, 6-二叔丁基-4-甲基苯 酚，也稱為丁基羥基甲苯或BHT)進一步穩(wěn)定并成批包裝和/或配制于藥物組合物中。以一 般方式配制藥物制劑，混合所得API如依維莫司與至少一種藥學上可接受賦形劑，例如合 適載體和/或稀釋劑。賦形劑包括但不限于填充劑、粘合劑、崩解劑、流動調節(jié)劑、潤滑劑、 糖或甜味劑、香料、防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑和/或乳化劑、增溶劑、用于調節(jié)滲透壓的鹽和/ 或緩沖劑。根據藥物組合物形式和施用途徑，技術人員會選擇適當賦形劑。例如，藥物制劑 形式可以是包衣或未包衣片劑、膠囊、（注射）溶液、輸液劑、固體溶液、懸液、分散液、固體 分散液、乳膏、凝膠、油膏、糊劑、吸入劑粉末、泡沫、酊劑、栓劑或支架（或支架層）。同樣，技 術人員了解如何選擇合適的施用途徑：例如腸內或胃腸外施用API或藥物制劑，或經醫(yī)療 設備施用，例如在類似支架的情況中用于局部遞送。
[0150] 下列實施例用于闡明本發(fā)明而不限制其范圍，另一方面，實施例代表產品制造的 反應步驟、中間體和/或工藝的優(yōu)選實施方式，所述產物采用游離堿形式或作為其藥學上 可接受鹽。
[0151] 實施例1 (TBS或叔丁基二甲基硅基保護基團）
[0152]
[0153] 向溶于甲苯（55g)的2-((叔丁基二甲基硅基）氧基）乙醇（8.04g，43.8mmol)溶 液加入N，N-二異丙基乙胺（5. 94g，45. 9mmol)。然后，澄清溶液冷卻至0°C并逐滴加入三氟 甲基磺酸酐（11.97g，42.4mm〇l)，溫度維持在（_2°C至2°C)。加入后，用另一部分甲苯（5g) 洗滌。
[0154] 30分鐘后，加入N，N-二異丙基戊-3-胺（7.871g，45.9mm〇l)，然后是甲苯（3g)和 雷帕霉素（10. 0g，10. 9mmol)，用甲苯（18. 4g)洗。反應隨后加熱至40°C并在此溫度攪拌42 小時，根據HPLC分析在此時剩余小于5面積％的雷帕霉素。反應冷卻至環(huán)境溫度，之后加入 吡啶（2. 6g)淬滅反應，所述反應再攪拌30分鐘。反應用乙酸異丙酯過濾并稀釋。有機溶 液用1M檸檬酸、10%碳酸氫鈉溶液、水洗滌，（MgS04)干燥，真空濃縮。剩余物分成2部分。
[0155] 向一半的該粗剩余物（9. 66g)加入THF(lOOmL)，然后在0°C向氟化氫吡啶溶液 (1:1，17. 7g)逐滴加入此溶液。用另一部分THF(20mL)洗滌。反應加熱至45°C，持續(xù)1. 5 小時，隨后能冷卻至環(huán)境溫度并用乙酸異丙酯（150g)稀釋。反應隨后緩慢加入8%碳酸氫 鈉水溶液，用乙酸異丙酯（250g)進一步洗滌。接著分離有機相并用飽和氯化鈉水溶液洗， (MgS04)干燥，真空濃縮。
[0156] 用乙酸異丙酯稀釋剩余物，加入丁基羥基甲苯（BHT ;0. 2%m/m)，通過HPLC分析根 據外標測定依維莫司產率（2. 96g，57% )。
[0157] 實施例2 (TBDPS或叔丁基二苯基硅基保護基團）
[0158]
[0159] 向溶于甲苯（51g)的2-((叔丁基二苯基娃基）氧基）乙醇（13. lg, 43. 8mmol)溶 液加入N，N-二異丙基戊-3-胺（8. 7g，50. 3mmol)。然后，澄清溶液冷卻至0°C并逐滴加入 三氟甲基磺酸酐（12.3g，43.8mm〇l)，溫度維持在（_2°C至2°