專利名稱：作為神經(jīng)激肽拮抗劑的哌嗪子基衍生物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及一類用作神經(jīng)激肽拮抗劑的化合物。特別是，它們可以是神經(jīng)激肽-1受體(NK1)拮抗劑。有些化合物可以是神經(jīng)激肽-1受體(NK1)拮抗劑和神經(jīng)激肽-2受體(NK2)拮抗劑，即NK1/NK2雙重受體拮抗劑。還有些化合物可以是神經(jīng)激肽-2受體(NK2)拮抗劑。有些化合物可以是神經(jīng)激肽-3受體(NK3)拮抗劑。
神經(jīng)激肽受體存在于哺乳動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)及外周組織中，因而與各種生物過程有關(guān)。因此，神經(jīng)激肽受體拮抗劑可用于治療或預(yù)防各種哺乳動(dòng)物疾病，例如肺部疾病如哮喘、咳嗽、支氣管痙攣、慢性阻塞性肺病和氣道反應(yīng)過度；皮膚病和搔癢，例如特應(yīng)性皮炎及皮膚風(fēng)團(tuán)和發(fā)紅；神經(jīng)原性炎癥疾病如關(guān)節(jié)炎、偏頭痛、感受傷害；中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病例如焦慮癥、帕金森病、運(yùn)動(dòng)障礙和神經(jīng)病；驚厥性疾病、腎病、尿失禁、眼炎、炎性疼痛；以及飲食紊亂例如進(jìn)食抑制、過敏性鼻炎、牛皮癬、舞蹈病、抑郁癥及各種腸胃疾病例如節(jié)段性回腸炎。
特別是，有報(bào)道稱NK1受體與微脈管漏和粘液分泌有關(guān)，而NK2受體與平滑肌收縮有關(guān)，因而，NK1和NK2受體拮抗劑特別適用于治療和預(yù)防哮喘。
另外，NK3受體拮抗劑特別適用于治療和預(yù)防哮喘，炎癥疾病如眼炎、過敏性鼻炎、皮膚風(fēng)團(tuán)和發(fā)紅、牛皮癬、特應(yīng)性皮炎，CNS疾病如焦慮癥和帕金森病。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及下式化合物或其對(duì)映異構(gòu)體或其藥物上可接受的鹽
各X獨(dú)立地是O、(H，H)、NRd或S；n是0-2；u是0-2；l是0-2；m是1，和y是1-3；或者m是2，和y是0；并且條件是在下式中不多于一個(gè)Rc不是H，
基團(tuán)各Rc獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、-(CH2)n1-R4(其中n1是1-6)；Rd獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、CN、ORa、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基或烯丙基；R4是-ORa、SRa、
Rc＇是H、C1-C6烷基或(CH2)nORa，條件是不多于一個(gè)Rc＇不是H；各Ra和Rb獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基或烯丙基；條件是，當(dāng)R4是
時(shí)，Ra不是H；或者當(dāng)Ra和Rb與同一個(gè)氮原子相連時(shí)，則Ra和Rb與它們所連接的氮原子一起形成4-7元環(huán)；其中各R1和R2獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、CF3、C2F5，Cl，Br，I，F(xiàn)，NO2，ORa，CN，NRaRb，
-SRa，和
并且在
或
中Ra不是H；或者當(dāng)R1和R2在環(huán)上相鄰碳原子上時(shí)，它們可以形成
其中n＇是1或2；并且各R3獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、CF3，C2F5，
Cl，Br，I，F(xiàn)，ORa，OCF3，或苯基；Ar1是雜芳基或取代的雜芳基，
或者Q是N或CH；Ar2是雜芳基或取代的雜芳基；
或
Z是
或
m1＝0-1；m2＝1-2；n3是0-4；Rg是-ORa，條件是Ra不是H；芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、-NRaRb、-O-(CRa，Rb)n7-芳基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的芳基、-O-(CRa，Rb)n7-雜芳基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的雜芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-雜芳基、-NRa＝(CRa，Rb)n7-取代的雜芳基、-O-(CRa，Rb)n7-雜環(huán)烷基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的雜環(huán)烷基、-NRa-(CRa，Rb)n7-芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-雜環(huán)烷基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的雜環(huán)烷基；n7是0-4；各Re和Rf獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、烯丙基；或者Re和Rf還可以與它們所連接的碳原子一起形成羰基，條件是，不多于一個(gè)羰基在下式中；
n5是1-2；各R5獨(dú)立地選自H、OH、
、C1-C6烷基、(CH2)n1-R4(其中n1是1-6)，條件是，當(dāng)n1是1時(shí)，R4不是OH或NRaRb；條件還有，當(dāng)n5是2時(shí)，R5是C1-C6烷基，并且兩個(gè)R5可以與它們所連接的氮原子一起形成四價(jià)鹽；R6是H、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基，
或
其中X3是(H，H)、O、NRd或S；或者當(dāng)n3是0-4時(shí)，R6是雜芳基、取代的雜芳基、雜環(huán)烷基、取代的雜環(huán)烷基；當(dāng)Re、Rf與它們所連接的碳原子一起形成羰基并且n3是1時(shí)，R6還可以是-ORa，其中Ra不是H，或者R6是-NRaRb、-O-(CRa，Rb)n7-雜芳基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的雜芳基、-O-(CRa，Rb)n7-雜環(huán)烷基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的雜環(huán)烷基、-O-(CRa，Rb)n7-芳基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-雜芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的雜芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-雜環(huán)烷基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的雜環(huán)烷基，其中Ra和Rb各自獨(dú)立地選自H和C1-C6烷基。
除非另有說明，上式中所有可變基團(tuán)例如Z、R1、R2和R3均具有相同含義。
本發(fā)明優(yōu)選化合物是其中各X是O或(H，H)并且至少一個(gè)X是O的式I化合物。
本發(fā)明優(yōu)選化合物還有其中兩個(gè)X均是O的式I化合物。
本發(fā)明優(yōu)選化合物還有其中l(wèi)是0，m是1和y是1-3的式I化合物。
本發(fā)明優(yōu)選化合物還有其中n是1和u是0的式I化合物。
本發(fā)明優(yōu)選化合物還有式I化合物，其中Ar1是
其中Q是N或CH；各X1獨(dú)立地是O、S或NRa；各X2獨(dú)立地是CH或N；和n4是0或1。優(yōu)選的化合物還有式I化合物，其中Ar2是
或者優(yōu)選的化合物還有式I化合物，其中Z是
優(yōu)選的化合物還有式I化合物，其中Z是
優(yōu)選的化合物還有式I化合物，其中Z是
優(yōu)選的化合物還有式I化合物，其中Z是
其中Rg是-ORa、-NRaRb和-O-(CRa，Rb)n7-雜芳基，條件是，當(dāng)Rg是-O-(CRa，Rb)n7-雜芳基時(shí)，Ra和Rb各自獨(dú)立地選自H和C1-C6烷基；n7是0-4。
優(yōu)選的化合物還有式I化合物，其中兩個(gè)X均是O；l是0；m是1；y是1-3；n是1；u是0；Ar1是
Ar2是
其中n4是0或1，Z如式I中定義，當(dāng)Re、Rf是H、C1-C6烷基、烯丙基時(shí)，n3是0-4和R6是
或者Re和Rf與它們所連接的碳原子一起形成羰基，n3是1和R6是-O-(CRa，Rb)n7-L，其中L是
還優(yōu)選的化合物是式II化合物
其中Rc是H；m是0或1；y是1-3；Ar1和Ar2兩者均是
R6是
或者Re和Rf與它們所連接的碳原子一起形成羰基，n3是1和R6是-O-(CRa，Rb)n7-L，其中L是
還優(yōu)選的化合物是式II化合物
其中Ar1和Ar2兩者均是
優(yōu)選的化合物還有式III化合物
其中Ar1和Ar2兩者均是
本發(fā)明實(shí)施例化合物為下式化合物或其對(duì)映異構(gòu)體或其藥物上可接受的鹽
本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，所述組合物含有與藥物上可接受的載體結(jié)合的治療有效量的式I化合物。
本發(fā)明還涉及一種誘導(dǎo)神經(jīng)激肽拮抗作用的方法，該方法包括給需要該作用的哺乳動(dòng)物施用神經(jīng)激肽拮抗有效量的式I化合物。
本發(fā)明還涉及一種治療下述疾病的方法，所述疾病有慢性氣道疾病如哮喘和過敏；炎癥疾病例如腸炎、牛皮癬、纖維織炎、骨關(guān)節(jié)炎和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；偏頭痛；中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病例如抑郁癥、精神病、癡呆和早老性癡呆；唐氏綜合征；神經(jīng)??；多發(fā)性硬化；眼?。唤Y(jié)膜炎；自身免疫性疾??；移植物排異反應(yīng)；全身性紅斑狼瘡；腺體疾病例如節(jié)段性回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎；膀胱功能性疾病；循環(huán)疾病如心絞痛；雷諾??；咳嗽和疼痛。特別是，本發(fā)明還涉及一種治療哮喘的方法，該方法包括給需要此種治療的哺乳動(dòng)物施用抗-哮喘有效量的式I化合物。
發(fā)明詳述本文所用術(shù)語(yǔ)烷基是指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴。碳原子數(shù)可以被指定，例如“C1-C6烷基”表示含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴。
術(shù)語(yǔ)C3-C6環(huán)烷基是指含有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，即環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。
術(shù)語(yǔ)鏈烯基是指含有2-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和鏈烯基。碳原子數(shù)可以被指定，例如“C2-C6鏈烯基”表示含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈鏈烯基。
術(shù)語(yǔ)鏈炔基是指含有2-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈鏈炔基。碳原子數(shù)可以被指定，例如“C2-C6鏈炔基”表示含有2-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈鏈炔基。
本文所用術(shù)語(yǔ)，深實(shí)線
表示在紙面上方的化學(xué)鍵，虛線
表示在紙面下方的化學(xué)鍵。
本文所用術(shù)語(yǔ)，例如
表示R1、R2和R3可在上述萘基中的任何一個(gè)環(huán)上。
在本發(fā)明式I化合物中存在不對(duì)稱中心，因此，式I化合物包括立體異構(gòu)體。
所有這些異構(gòu)體及其混合物均包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。除非另有說明，本發(fā)明所述制備方法可制得包括所有可能異構(gòu)體結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物，盡管可以理解的是根據(jù)立體化學(xué)結(jié)構(gòu)其生理反應(yīng)各不相同。所述異構(gòu)體可經(jīng)常規(guī)方法分離，例如分級(jí)結(jié)晶法、制備薄層法和硅膠、氧化鋁或反相載體柱色譜法或者HPLC(高效液相色譜法)。
如果適宜，通過衍生法或與光學(xué)純?cè)噭┬纬甥}，隨后用上述其中一種方法進(jìn)行分離，可分離得到非對(duì)映體。另外，通過在手性載體上進(jìn)行色譜分離可分離得到非對(duì)映體。
所述式I化合物可以非溶劑化物以及溶劑化物形式存在，包括水合物，如半水合物。通常，與藥物上可接受的溶劑例如水、乙醇等形成的溶劑化物相當(dāng)于與本發(fā)明目的相適宜的非溶劑化物。
其中含有堿性基團(tuán)例如-CH2NH2的式I化合物可形成藥物上可接受的鹽。所述優(yōu)選的藥物上可接受的鹽是通過向本發(fā)明適宜化合物中分別加入化學(xué)計(jì)算量的無機(jī)酸或有機(jī)酸形成的無毒酸加成鹽，所述無機(jī)酸例如HCl、HBr、H2SO4或H3PO4，所述有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、戊酸、油酸、棕櫚酸、硬脂酸、月桂酸、苯甲酸、乳酸、對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、檸檬酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸等。
常規(guī)制備方法本發(fā)明所述化合物可通過下述其中一種常規(guī)方法制備。本文所用RT表示室溫。除非另有說明，所述結(jié)構(gòu)式中各可變基團(tuán)如上定義。下文所述方法和實(shí)施例中所用原料和試劑是公知的或者可經(jīng)公知方法制備。
本文所用術(shù)語(yǔ)“取代的苯基”是指
其中R1、R2和R3如上定義。
“取代的”是指如上所述被R1、R2和/或R3取代。
“芳基”是指苯基、萘基、茚基、四氫萘基、2，3-二氫化茚基、蒽基或芴基。
“鹵素”是指氟、氯、溴或碘原子。
“雜環(huán)烷基”是指含有1-3個(gè)獨(dú)立地選自-O-、-S-和-N(R6)-的雜原子、而其他環(huán)原子為碳原子的4-至6-元環(huán)。雜環(huán)烷基的實(shí)例有四氫呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基和哌嗪基。
“雜芳基”是指含有1-3個(gè)獨(dú)立地選自-O-、-S-和-N＝的雜原子的5-至10元單芳環(huán)或苯環(huán)稠合的芳環(huán)。單環(huán)雜芳基的實(shí)例有吡啶基、異噁唑基、噁二唑基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、四唑基、噻唑基、噻二唑基、吡嗪基、嘧啶基、哌嗪基和三唑基。苯環(huán)稠合的雜芳基的實(shí)例有喹啉基、硫雜萘基和苯并呋咱基。還包括含氮雜芳基的N-氧化物。包括所有的位置異構(gòu)體，例如1-吡啶基、2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。
當(dāng)R2和R3取代基形成環(huán)并且存在其他雜原子時(shí)，所述環(huán)不包括相鄰的氧和/或硫原子或者三個(gè)相鄰的雜原子。所形成的典型的環(huán)有嗎啉基、哌嗪基和哌啶基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“BOC”是指叔丁氧羰基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“Ph”是指苯基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“RT”是指室溫。
本文所用術(shù)語(yǔ)“平行合成”是指作為一批反應(yīng)之一的單個(gè)化合物的合成，例如，在每一容器中除了使用不同試劑外，通常僅用一種物質(zhì)進(jìn)行的20、30或者甚至100個(gè)相同的反應(yīng)。在任何一系列平行反應(yīng)中，此類試劑通常是在這種情況下相同的一類試劑，可以是羧酸或者有機(jī)胺。除了所用的簡(jiǎn)化的處理方法以外，通常如果適宜，可簡(jiǎn)單地用酸或堿洗滌，然后用水洗滌，每一個(gè)反應(yīng)中所用條件與實(shí)施例中所述相同。所述產(chǎn)物是否存在可通過用公知的產(chǎn)物作參照標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)薄層色譜法(TLC)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。通常，可進(jìn)一步用HPLC/MS結(jié)合進(jìn)行定性。在進(jìn)行生理試驗(yàn)之前，對(duì)這些產(chǎn)物無需進(jìn)行進(jìn)一步純化。
本文所用術(shù)語(yǔ)Rc和Rc＇各自獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6鏈炔基、未被取代的或取代的苯基和未被取代的或取代的芐基。
下述方法中所述原料或者是公知的或者可以按照公知方法制得。特別是，下列化合物是公知的或者可以按照公知方法制得二胺A、式A、VI、VIII、X、XI、XIV、XVIII、XIX、XXa、A＇、XXV和Z-H化合物以及式XI酯和下式化合物
烷基。
方法1 若基團(tuán)Ar2是不帶I或Br取代基的芳基，則，下述方法可用于制備有用的中間體(IV)
于無水醚溶劑例如THF中，將2-氯吡嗪與芳族格氏試劑進(jìn)行過渡金屬催化偶合反應(yīng)，得到式II＇芳基取代的吡嗪。所示催化劑[1，2-二-(二苯基膦基)乙烷]氯化鎳II是本轉(zhuǎn)化反應(yīng)的優(yōu)選試劑。當(dāng)Ar2不帶有鹵素取代基時(shí)，優(yōu)選是在乙酸溶劑中，利用例如乙酸鈀，經(jīng)催化氫化將式II＇化合物還原，使得優(yōu)選還原所述吡嗪環(huán)，使芳環(huán)未被還原，即得到式II化合物。同樣，于醇溶劑例如甲醇中，在加入或者沒有加入少量乙酸(1-5當(dāng)量)的情況下，也可用10％Pd-碳(Pd-C)進(jìn)行。對(duì)于此反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間約為1-24小時(shí)足矣，優(yōu)選的是反應(yīng)于室溫或略高(最高至約50℃)的溫度下并在1至約6個(gè)氫氣壓下進(jìn)行。
即使基團(tuán)Ar2含有鹵原子，在醚溶劑例如乙醚、THF或二甲氧基乙烷(DME)中，通過用強(qiáng)氫化物離子供體優(yōu)選氫化鋰鋁(LAH)或二異丙基氫化鋁(DIBAL-H)進(jìn)行還原，也可由式II＇化合物制得式II中間體。
在低溫條件下，將式II化合物選擇性烷基化是可能的。因此，將式II化合物與式III取代的芳基-烷基鹵化物(其中l(wèi)是0-2)反應(yīng)，可形成式IV4-取代的衍生物。適宜的反應(yīng)條件包括于低溫下利用例如CH2Cl2的鹵代試劑。適宜的溫度為由-78℃開始，如幾小時(shí)后反應(yīng)還未完成，可令反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂潦覝?。所述反?yīng)可通過加入等當(dāng)量的有機(jī)堿例如三乙胺和二異丙基乙基胺(Hünig堿)催化進(jìn)行。
方法2 若基團(tuán)Ar2在芳環(huán)上含有1個(gè)或多個(gè)鹵原子并且其它基團(tuán)如方法1所述，則優(yōu)選另一種制備式IV化合物的方法。而且，此方法可用于制備其中l(wèi)是0-2的式IV化合物。于醇溶劑例如甲醇中，優(yōu)選在約-10℃下，優(yōu)選用BOC酸酐或其他可引入叔丁氧羰基保護(hù)基的公知試劑將式(A)二胺進(jìn)行單保護(hù)，生成式V化合物。
用式VI醛可將這些化合物進(jìn)行還原性胺化反應(yīng)，生成式VII胺。(在本文結(jié)構(gòu)式(A)、(V)、(VII)和(IX)中，Rc可以鍵合到兩個(gè)氮原子之間的任何位置。在下述如(IVA)的環(huán)狀結(jié)構(gòu)中，Rc可以鍵合到被碳原子占據(jù)并且于兩個(gè)氮原子之間的任何可利用的環(huán)位置。)此類反應(yīng)適宜的反應(yīng)條件包括利用醇溶劑，優(yōu)選甲醇或2，2，2-三氟乙醇，用弱有機(jī)酸例如乙酸調(diào)至弱酸性，并用公知的有利于還原性胺化反應(yīng)的還原劑，優(yōu)選氰基硼氫化鈉，NaBH3CN。
于醚溶劑例如THF中，在有機(jī)堿例如二異丙基乙基胺(也稱為Hünig堿)存在下，將式VII化合物與式VIIIα-鹵代酮(其中優(yōu)選地是，除了可能是任何要求保護(hù)的芳環(huán)以外，Ar2任選表示鹵代芳環(huán))反應(yīng)，生成式IX中間體。
利用適宜的酸催化劑例如三氟乙酸脫除BOC保護(hù)基，隨后在例如上述制備式VII化合物所述的反應(yīng)條件下，進(jìn)行分子內(nèi)還原胺化，得到式IVA化合物。
方法3 另一種制備其中l(wèi)是0-2的本發(fā)明化合物的方法如下文所述。將式X的N-被保護(hù)的氨基酸(其中Ar2如上定義)與氨基酸酯衍生物
(R＇是C2-C4烷基，優(yōu)選的是式XI的乙基酯，在本文分子式中Et是指乙基)進(jìn)行常規(guī)偶合反應(yīng)，得到式XII二肽。盡管也可以使用其他保護(hù)基，但適宜的保護(hù)基是BOC。也可以使用其他氨基酸酯。可以適用的常規(guī)偶合反應(yīng)方法例如在非羥基溶劑例如CH2Cl2、DMF或者上述兩種溶劑的混合物中，用N-羥基苯并三唑(HOBT)和水溶性碳化二亞胺例如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(DEC)。根據(jù)所述產(chǎn)物不同，所述反應(yīng)優(yōu)選在室溫或低于室溫下，進(jìn)行1-40小時(shí)完成。
在常規(guī)條件下脫除保護(hù)基，隨后用堿處理所述產(chǎn)物，環(huán)合形成式XIII二酮哌嗪。脫除例如BOC基團(tuán)的適宜條件是公知的并且包括用三氟乙酸(TFA)進(jìn)行催化。環(huán)合反應(yīng)適宜的堿為于作為溶劑的醇中的所述醇?jí)A金屬鹽，例如可以使用乙醇鈉的乙醇溶液。所述溫度優(yōu)選的室溫附近，可以略高或略低，范圍在0℃至約40℃。所述反應(yīng)通常在幾小時(shí)內(nèi)完成，適宜的反應(yīng)時(shí)間為1-24小時(shí)。
優(yōu)選地用強(qiáng)氫化物試劑例如LAH或二(2-甲氧基乙氧基)氫化鋁的甲苯溶液(也稱作Red-Al)或者BH3.S(CH3)2復(fù)合物，可將式XIII二酮哌嗪還原成式II化合物。由于所述反應(yīng)在升高的溫度，約50℃至約110℃，優(yōu)選約90℃下進(jìn)行，因此此反應(yīng)適宜的溶劑為DME和高沸點(diǎn)醚。
另外，由下述反應(yīng)路線也可制備式II化合物(J.Med.Chem.，9，191(1966))。本文中，L是任何容易得到的酯殘基例如C1-C7烷基，更優(yōu)選人甲基或乙基。
用上述方法1或下述方法6可將式II化合物轉(zhuǎn)變成式IV化合物。
方法4 經(jīng)上述任一方法制得的式IV或IVA中間體還可進(jìn)一步進(jìn)行如下處理。式IVA化合物可用于下述反應(yīng)路線中。將式IVA化合物與活化鹵代-酸，通常為式XIV酰鹵(其中Hal表示Cl、Br或I)反應(yīng)，得到式XV酰化衍生物，即m是1的式I化合物。用于處理所生成的氯化氫的有機(jī)堿，適宜的是三乙胺(TEA)和Hünig堿。適宜的反應(yīng)介質(zhì)為鹵代溶劑例如二氯甲烷和氯仿。所述反應(yīng)優(yōu)選在低溫下，至少在開始時(shí)是在低溫下進(jìn)行。適宜的溫度在-50℃至-80℃范圍內(nèi)。反應(yīng)后，如果需要，可將混合物溫?zé)嶂良s室溫，以確保反應(yīng)完成。
將式XV鹵代酰胺與式Z-H胺反應(yīng)，生成式XVI產(chǎn)物，其為其中X是O和m是1的本發(fā)明化合物。式XVI化合物被修飾后，可由式IVA及IV化合物制得這些產(chǎn)物。此反應(yīng)適宜的溶劑有鹵代烴例如二氯甲烷，而所存在的有機(jī)堿可吸收所生成的H-Hal。適宜的堿包括Hünig堿。所述反應(yīng)于室溫或室溫附近溫度下進(jìn)行，適宜的溫度通常在0℃-40℃范圍內(nèi)。反應(yīng)在1-48小時(shí)內(nèi)完成。
方法5 在控制反應(yīng)條件的情況下，通過還原可將其中y≠0的式XVI化合物轉(zhuǎn)變成其他本發(fā)明式XVII化合物。
進(jìn)行此轉(zhuǎn)變反應(yīng)的適宜還原劑包括硼烷-甲硫醚復(fù)合物以及其他低選擇性試劑例如乙醚中的LAH(假定不存在與LAH反應(yīng)的其他基團(tuán))，Red-Al和二硼烷/醚。硼烷-甲硫醚復(fù)合物還原式XVI化合物的有效溫度在室溫至所述試劑的THF溶液的回流溫度(約80℃)范圍內(nèi)。
方法6 通過與式XIX酸偶合，可將式XVIII中間體選擇性?；?。可使用常規(guī)偶合方法，例如在非羥基溶劑如CH2Cl2中，于起始溫度約為-20℃下，用HOBT、水溶性碳化二亞胺如DEC和有機(jī)堿如三乙胺進(jìn)行?？闪罨旌衔餃?zé)嶂潦覝?，使反?yīng)完成，所述反應(yīng)產(chǎn)物為式XX酰胺。
用式XIV酰鹵可進(jìn)一步將式XX化合物?；?。所述反應(yīng)可在鹵代溶劑例如二氯甲烷或相似溶劑中，優(yōu)選約-78℃下進(jìn)行1-12小時(shí)。在所述反應(yīng)中可用有機(jī)叔胺吸收所生成的H-Hal。適宜的胺包括三乙胺和Hünig堿。本文所述Hal是指Cl、Br或I。
無需分離，可用式XXI化合物(即m是1，y＝1-3，l＝0-2的式I化合物)進(jìn)一步進(jìn)行反應(yīng)。于-78℃或約-78℃下，向混合物中再加入有機(jī)堿如Hünig堿，隨后加入Z-H。通過將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝剡^夜，使反應(yīng)完成，經(jīng)后處理和常規(guī)方法純化后，得到式XXII化合物。
在控制反應(yīng)條件下，經(jīng)還原，可將其中y＝1-3的式XXII化合物轉(zhuǎn)變成其他的式XXIII產(chǎn)物。
進(jìn)行此轉(zhuǎn)變反應(yīng)的適宜還原劑包括硼烷-甲硫醚復(fù)合物以及其他低選擇性試劑例如于乙醚或其他非反應(yīng)溶劑中的LAH、Red-Al和二硼烷。于所述溶液的回流溫度下，即80℃下，用THF中的硼烷-甲硫醚復(fù)合物，根據(jù)確切的反應(yīng)物所述反應(yīng)可在約2-48小時(shí)內(nèi)完成。
所述烷基化反應(yīng)中的某些反應(yīng)物Z-H是通過起初將二氨基化合物(A)轉(zhuǎn)變成t-BOC保護(hù)的衍生物(B)，隨后用適宜的催化劑如Pd(OH)2進(jìn)行氫化除去芐基，生成t-BOC保護(hù)的衍生物(C)合成得到的。根據(jù)此反應(yīng)中的試劑，隨后對(duì)(C)的處理可通過烷基化或者還原烷基化來完成。
例如在甲醇中并且在NaBH3CN存在下，在還原胺化條件下，將中間體(C)與醛或酮(D)反應(yīng)，足量AcOH(乙酸)的存在可令反應(yīng)以適宜的速度進(jìn)行，生成胺(E)，于二噁烷中用4N-HCl可由其上脫除t-BOC基團(tuán)，隨后堿化例如用NaOH水溶液，得到式(F)化合物。
經(jīng)過用鹵化物衍生物(G)(其中“Hal”是Cl、Br或I)進(jìn)行烷基化，可由(C)制得同樣的產(chǎn)物(Ea)。對(duì)于例如甲磺酸酯或甲苯磺酸酯試劑也可能是其他活性離去基團(tuán)。優(yōu)選試劑是伯衍生物，但是通常仲衍生物對(duì)于所述反應(yīng)的進(jìn)行也是可以接受的。
烷基化產(chǎn)物(Ea)可如上所述進(jìn)行處理，生成試劑(Fa)，其是可用于將式XXI化合物轉(zhuǎn)變成式XXII化合物的Z的一種優(yōu)選形式。
所述中間體(C)(下文所述)也可經(jīng)?；M(jìn)行修飾，例如用式(H)酰鹵處理，生成中間體(I)，其中n3≠0。如上所述，脫除BOC保護(hù)基，得到胺(J)，其是Z的一種優(yōu)選形式。如上所述，其可用于將式(XXI)化合物轉(zhuǎn)變成本發(fā)明化合物。
方法6a 對(duì)于基團(tuán)Z中某些可變基團(tuán)的有用中間體是所述化合物(K)。其可以由(XXI)和被保護(hù)的胺(L)制得。此方法中的原料是N-BOC保護(hù)的胺(M)，所述胺(M)可經(jīng)常規(guī)方法轉(zhuǎn)變成(L)，上述常規(guī)方法包括于吡啶中用羥胺鹽酸鹽形成肟，隨后于乙醇溶液中用阮內(nèi)鎳進(jìn)行氫化還原。在上述條件下，由(K)上脫除保護(hù)基，得到胺(N)。
于?；瘲l件下利用此中間體，在控制反應(yīng)條件下，在所述環(huán)氮原子上進(jìn)行反應(yīng)，生成例如(O)產(chǎn)物。例如在與上述用水溶性碳化二亞胺試劑進(jìn)行反應(yīng)所述基本相同的反應(yīng)條件下，既可以用酰鹵，也可以用羧酸進(jìn)行偶合反應(yīng)。
有時(shí)，所述原料(N)以鹽的形式獲得，例如鹽酸鹽。此時(shí)，需要加入有機(jī)叔胺堿例如Hünig堿，以生成游離胺。
例如，(N)的烷基化反應(yīng)可用適宜的含鹵素試劑來完成，生成(Q)。例如試劑(G)可用于此轉(zhuǎn)變反應(yīng)。
在某些情況下，-C(Re)(Rf)-基團(tuán)中其中之一可以是羰基，除了羰基中的碳不能直接與所述氮原子相連以外，這時(shí)因?yàn)檫@類產(chǎn)物是如上所述的酰胺類化合物。
在某些情況下，特別是當(dāng)直接與環(huán)氮原子相連的碳原子上的基團(tuán)Re和Rf中至少一個(gè)是H時(shí)，還原烷基化反應(yīng)可如上所述進(jìn)行，生成本發(fā)明所述化合物(R)。此轉(zhuǎn)變反應(yīng)中所用試劑為(D)，醛(當(dāng)Re＝H時(shí))或酮。
方法7 由方法6獲得的式XX?；苌锟杀贿€原成式IVA飽和烷基鏈衍生物。
此轉(zhuǎn)變反應(yīng)與方法6中將式XXII化合物轉(zhuǎn)變成式XXIII化合物所述方法相同。所述試劑優(yōu)選的是硼烷-甲硫醚復(fù)合物。
如上所述，式IVA化合物可被轉(zhuǎn)變成式XVI目的化合物。
生成式(XXII)的另一種方法是用化合物(XVIII)作原料。首先，與胺保護(hù)基試劑，優(yōu)選BOC酸酐進(jìn)行反應(yīng)，生成式XXVIII的N-叔丁氧羰基衍生物。
如上所述，優(yōu)選地是反應(yīng)是在除了Ar2基團(tuán)之外的氮原子上進(jìn)行。將此中間體與式(XIV)試劑如上所述進(jìn)行反應(yīng)，得到鹵代-衍生物(XXIX)。同樣如上所述，將(XXIX)與Z-H反應(yīng)，生成中間體(XXX)，其可被脫保護(hù)，生成產(chǎn)物(XXXI)。適宜的試劑包括三氟乙酸和HCl。
在如上所述偶合反應(yīng)條件下，將(XXXI)與羧酸(XIX)反應(yīng)，得到式(XXII)產(chǎn)物。
方法7a 其中側(cè)芳基Ar2、或側(cè)芳基Ar2及其側(cè)鏈位于式XXII化合物的其他環(huán)位上的本發(fā)明化合物(即下文所述式C化合物)，可用方法7中所得式XXVIII化合物作原料制備。于常規(guī)偶合反應(yīng)條件下，例如于CH2Cl2中利用HOBT、Et3N和DEC，將式XXVIII化合物與酸
偶合，生成中間體(A)。于常規(guī)條件下，脫除t-BOC或其他保護(hù)基，得到游離胺(B)。如方法7中所述，將(B)?；⑦M(jìn)一步與Z-H反應(yīng)，可將(XX)經(jīng)(XXI)轉(zhuǎn)變成(XXII)，生成本發(fā)明化合物(C)。
方法8 一種用如上制備的式(XX)化合物向本發(fā)明化合物側(cè)鏈上引入基團(tuán)Rc的方法?？蓪⑵渑c式(XXXII)適宜保護(hù)的氨基酸衍生物(其中用t-BOC基團(tuán)作為代表性保護(hù)基)偶合。優(yōu)選使用相對(duì)活性的偶合劑例如式(XXXIII)BOP-Cl并于本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)偶合反應(yīng)條件下進(jìn)行反應(yīng)。適宜的反應(yīng)條件包括用CH2Cl2和/或DMF作溶劑，用三乙胺或Hünig堿，溫度為0℃至室溫之間。常規(guī)處理后，得到式(XXXIV)被保護(hù)的中間體。
對(duì)于(XXXIV)，其中N-保護(hù)基為t-BOC，可用常規(guī)條件脫除此保護(hù)基，得到游離胺功能基。通常利用各種濃度的CF3CO2H的CH2Cl2溶液。在對(duì)于某些反應(yīng)物，更好地是使用稀溶液(例如2N)，而在其他一些情況下，可能有必要使用更濃的溶液，甚至純TFA。另外，也可以使用其他N-保護(hù)基并可用本領(lǐng)域公知方法脫除。例如，當(dāng)用N-Cbz時(shí)，其既可以在酸性條件下脫除，也可以在氫解條件下脫除。結(jié)果脫保護(hù)后，得到式(XXXV)胺中間體。
然后經(jīng)還原烷基化，可將式(XXXV)中間體轉(zhuǎn)變成本發(fā)明化合物。
用醛或酮向所述分子中引入基團(tuán)Z，其中上述基團(tuán)存在于于式(XXXV)氨基鍵合的碳原子上。此類中間體的一個(gè)實(shí)例為式(XXXVI)化合物。
反應(yīng)后，此基團(tuán)變成本發(fā)明化合物中的Z基團(tuán)，即，如下文所述式(XXXVII)化合物中所示的“Y-NH”基團(tuán)等同于本發(fā)明概述中所述“Z”基團(tuán)
此還原胺化反應(yīng)條件是本領(lǐng)域公知的并且例如在加入幾當(dāng)量乙酸的情況下，于MeOH中用NaBH3CN進(jìn)行。通常，所述反應(yīng)是在室溫下進(jìn)行并令其反應(yīng)過夜。
用常規(guī)方法，例如用H2O分解過量試劑并用有機(jī)溶劑例如CH2Cl2或Et2O和CH2Cl2的混合物萃取產(chǎn)物，進(jìn)行產(chǎn)物的分離。
利用上述相似的方法或者本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，可制得所有本發(fā)明式I化合物。例如，可獲得其中Rc基團(tuán)在所述哌嗪環(huán)上各不同位置上的本發(fā)明式I化合物。
式I化合物的體外和體內(nèi)活性可用下述方法測(cè)定。
體外鑒定NK1活性的方法評(píng)價(jià)試驗(yàn)化合物抑制NK1激動(dòng)劑P物質(zhì)對(duì)分離的豚鼠輸精管的活性的能力。由雄性Hartley豚鼠(230-350g)身上分離出新切除的輸精管并懸浮于溫?zé)嶂?7℃的含有Kreb’s Henseleit溶液的25ml組織浴中，不斷充入95％O2和5％CO2氣。將組織調(diào)至0.5g并令其平衡30分鐘。以可以引起組織樣品收縮至最大容量的80％的強(qiáng)度每60秒鐘用電場(chǎng)刺激器(GrassS48)刺激輸精管。用Grass力位移換能器(Grass force displacementtransducer)(FTO3)和Harward電記錄儀等量記錄所有反應(yīng)。P物質(zhì)可抑制電場(chǎng)刺激-誘導(dǎo)的豚鼠輸精管的收縮。在未配對(duì)試驗(yàn)中，將所有組織樣品(對(duì)照或藥物處理的)與累計(jì)濃度(1×10-10M-7×10-7M)的P物質(zhì)相接觸。對(duì)分離的組織樣品僅給出試驗(yàn)化合物濃度的單一對(duì)數(shù)值并在作P物質(zhì)濃度-應(yīng)答曲線之前，先平衡30分鐘。對(duì)于每一藥物試驗(yàn)，每一對(duì)照和每一藥物濃度使用至少5個(gè)分離的組織樣品。
P物質(zhì)的抑制作用通過其濃度-應(yīng)答曲線的右向位移來說明。這些位移可用于測(cè)定pA2值，pA2值的含義是指用于引起一個(gè)選定應(yīng)答的激動(dòng)劑兩倍大所需抑制劑摩爾濃度的負(fù)對(duì)數(shù)。此值用于測(cè)定拮抗劑的相對(duì)效力。分離的倉(cāng)鼠氣管NK2試驗(yàn)C.A.Maggi等人在Eur.J.Pharmacol.166(1989)435和J.L.Ellis等在J.Pharm.Exp.Ther.267(1993)95中公開了對(duì)于NK2單受體試驗(yàn)條件下，倉(cāng)鼠氣管對(duì)神經(jīng)激肽激動(dòng)劑應(yīng)答的一般方法和特點(diǎn)。
用建立在Graphtec Linearcorder Model WR 3310之上的與Buxco電子前置放大器相連的Grass FT-03力位移換能器制成連續(xù)等強(qiáng)度監(jiān)測(cè)儀。
猛擊喂養(yǎng)至體重120-200g的雄性Charles River LAKLVG(SYR)倉(cāng)鼠頭部，使其暈倒，在證實(shí)其角膜反射喪失后，經(jīng)胸廓切開術(shù)處死倉(cāng)鼠并切開心臟。取頸部氣管切片至室溫下的Krebs緩沖液(pH7.4)中，充入95％O2-5％CO2氣并清除粘連組織。將所述切片切成兩個(gè)長(zhǎng)3-4mm的環(huán)形切片。將氣管環(huán)懸掛于換能器上并用不銹鋼鉤和6-0絲線固定于15ml帶水套的器官浴中，器官浴中裝有Krebs緩沖液(pH7.4)，保持溫度在37℃并不斷充入95％O2-5％CO2氣。開始時(shí)，將氣管環(huán)加1.0g張力并與1μM NKA激發(fā)劑一起平衡90分鐘，進(jìn)行清洗和復(fù)原循環(huán)共4次。用賦形劑預(yù)處理30分鐘后，累積加入不斷增加的NKA劑量(最終濃度為3nM-1μM，每次加入間隔為5分鐘)。獲得最后NKA應(yīng)答后，清洗并復(fù)原15分鐘。在用試驗(yàn)化合物或其賦形劑預(yù)處理30分鐘后，累積加入不斷增加的NKA劑量(如果需要，最終濃度達(dá)到3nM-10μM。每次加入間隔為5分鐘)。最終NKA應(yīng)答后，施用1mM氯化銨甲酰膽堿激發(fā)劑，得到每一個(gè)組織樣品的最大張力應(yīng)答。
相對(duì)基線記錄筆的正向位移記作組織樣品對(duì)NKA的應(yīng)答并與標(biāo)準(zhǔn)重量相比，轉(zhuǎn)變成克張力。應(yīng)答用最大組織樣品張力的百分比為標(biāo)準(zhǔn)，由對(duì)照和NKA處理劑量的應(yīng)答，計(jì)算得到NKA的ED50值并進(jìn)行比較。當(dāng)篩選濃度為1μM(即pA2≥＝6.0)時(shí)，試驗(yàn)化合物的激動(dòng)劑量比≥2，則認(rèn)為有顯著活性。進(jìn)而，由所得活性物的劑量應(yīng)答數(shù)據(jù)可計(jì)算得到更為明顯的pA2評(píng)價(jià)結(jié)果。如果數(shù)據(jù)夠用的話，pA2既可用Furchgott(其中pA2＝-log Ki，R.F.Furchgott，Pharm.Rev.7183)所述Ki評(píng)價(jià)進(jìn)行計(jì)算得到，也可用Shild Polt Analysis(O.Arunlakshana & H.O.Shild，Br.J.Pharmacol.1448)進(jìn)行計(jì)算得到。
NK1拮抗劑對(duì)P物質(zhì)誘導(dǎo)的豚鼠氣道微脈管漏的影響所述試驗(yàn)在體重為400-650g的雄性Hartley豚鼠身上進(jìn)行。給所述動(dòng)物隨意喂食或喂水，經(jīng)腹膜內(nèi)注射dialurethane(含0.1g/ml二丙烯巴比土酸、0.4g/ml乙脲和0.4g/ml烏拉坦)，使動(dòng)物麻醉。在緊挨喉的下端，在氣管內(nèi)插入插管并用Harvard嚼式呼吸器給動(dòng)物供氣(VT＝4ml，f＝45次呼吸/分鐘)。在頸靜脈插入插管，供注射藥物使用。
用Evans藍(lán)染色法(Danko，G.等人，Pharmacol.Commun.，1，203-209，1992)測(cè)定氣道微脈管漏(AML)的情況。靜脈內(nèi)注射Evans藍(lán)(30mg/kg)，1分鐘后，靜脈內(nèi)注射P物質(zhì)(10μg/kg)。5分鐘后，打開胸廓并將鈍頭的13-號(hào)(13-guage)針通過主動(dòng)脈。在右心房作一個(gè)切口，經(jīng)主動(dòng)脈導(dǎo)管用100ml生理鹽水沖洗，將血液清除。整個(gè)取出肺和氣管，然后將氣管和支氣管用濾紙吸干并稱重。在帶有塞子的試管中，通過將組織樣品在37℃下于2ml甲酰胺中孵育18小時(shí)，萃取Evans藍(lán)。在620nm下測(cè)定甲酰胺萃取液的染料吸收率。用內(nèi)插法，由甲酰胺的范圍為0.5-10μg/ml的Evans藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算染料量。染料濃度用濕重組織樣品中含ng染料表示。將試驗(yàn)化合物懸浮于環(huán)葡聚糖載體中并在施用P物質(zhì)之前5分鐘靜脈內(nèi)施用。
NK2體內(nèi)活性測(cè)定將隨意喂食喂水的雄性Hartley豚鼠(400-500g)經(jīng)腹膜內(nèi)注射0.9ml/kg dialurethane(含0.1g/m二丙烯巴比土酸、0.4g/ml乙基脲和0.4g/ml烏拉坦)進(jìn)行麻醉。在施行了外科手術(shù)水平麻醉后，為了便于呼吸，植入氣管、食管和頸靜脈插管，分別測(cè)定食管壓力并施用藥物。
將豚鼠放入全身體積描記器中并在描記器壁上將導(dǎo)管與出口相連接。用壓力變化傳導(dǎo)器(Validyne，Northridge CA，MP45-1型，范圍±2cmH2O)測(cè)定氣流，所述傳導(dǎo)器測(cè)定的是通過蓋在所述描記器壁上1英寸孔上的網(wǎng)目篩的壓力。所述氣流信號(hào)經(jīng)電整合成體積比信號(hào)。用壓力變化傳導(dǎo)器(Validyne，Northridge CA，MP45-1型，范圍±2cmH2O)以氣管和食管之間的壓力變化測(cè)得肺的壓力。用肺分析計(jì)算機(jī)(BuxcoElectronics，Sharon，CT，6-型)監(jiān)測(cè)體積、氣流和經(jīng)過肺的壓力信號(hào)并用來推導(dǎo)出肺阻力(RL)和動(dòng)態(tài)下肺的順應(yīng)性(CDyn)。
NKA引起的支氣管狹窄以半對(duì)數(shù)(0.01-3μg/kg)間隔逐漸增大靜脈內(nèi)施用NKA的劑量，使每一劑量之間均恢復(fù)至肺力學(xué)基線。在施用每一劑量激動(dòng)劑后30秒內(nèi)形成支氣管狹窄峰。當(dāng)CDyn由基線減至80-90％時(shí)，停止劑量應(yīng)答反應(yīng)，對(duì)每一動(dòng)物施行NKA劑量-應(yīng)答反應(yīng)。在NKA劑量應(yīng)答反應(yīng)開始之前5分鐘，靜脈內(nèi)施用懸浮于環(huán)葡聚糖載體中的試驗(yàn)化合物。
對(duì)于每一動(dòng)物，用RL增長(zhǎng)百分比或CDyn降低百分比對(duì)激動(dòng)劑對(duì)數(shù)劑量作圖，得到NKA劑量應(yīng)答曲線。由劑量應(yīng)答曲線中l(wèi)og-線插入法可得到由基線RL增長(zhǎng)100％(RL100)或CDyn降低40％(CDyn40)時(shí)的NKA劑量。
神經(jīng)激肽受體結(jié)合試驗(yàn)于37℃含有5％CO2的潮濕氣氛下，令用人神經(jīng)激肽2(NK2)受體的人神經(jīng)激肽1(NK1)編碼區(qū)轉(zhuǎn)染的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞在補(bǔ)充有10％胎牛血清、0.1mM-非基本氨基酸、2mM谷氨酸、100單位/ml青霉素和鏈霉素以及0.8mg G418/ml的Pulbecco最低基礎(chǔ)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。
由裝有含有5mM EDTA磷酸鹽緩沖生理鹽水的無菌溶液的T-175燒瓶中分離出細(xì)胞，離心分離收集細(xì)胞并于40℃下用RPM1介質(zhì)清洗5分鐘，將片狀物再懸浮于含有1uM phosphoramidon和4ug/ml抑糜朊霉素的Tris-HCl(pH7.4)中，細(xì)胞密度達(dá)到30×106個(gè)細(xì)胞/ml。然后將懸浮液于Brinkman Polytron(設(shè)于5)中勻化30-45秒，勻漿于4℃ 800×g下離心5分鐘，收集未破裂的細(xì)胞和細(xì)胞核。懸浮液于4℃ 19,000rpm(44,00×g)下于Sorvall RC5C中離心分離30分鐘，將片狀物再懸浮，取部分試樣進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定(BCA)并再次洗滌。所得片狀物于-80℃下貯存。
為了測(cè)定受體結(jié)合作用，向含有緩沖液(含1mM MnCl2和0.2％牛血清白蛋白的50mM Tris-HCl(pH7.4))以及DMSO或者試驗(yàn)化合物的試管中加入50μl[3H]-P物質(zhì)(9-Sar，11-Met
)(比活性41Ci/mmol)(Dupont-NEN)(NK-1試驗(yàn)為0.8nM)或者[3H]-神經(jīng)激肽A(比活性114Ci/mmol)(Zenca)(NK-2試驗(yàn)為1.0nM)。通過加入100μl含有人NK-1或NK-2受體的膜(10-20μg)，使最終體積達(dá)到200μl，激活結(jié)合作用。于室溫下40分鐘后，通過在用0.3％聚乙烯亞胺預(yù)浸漬的Whatman GF/C過濾器上快速過濾，使反應(yīng)終止，過濾器用3ml 50mM Tris-HCl(pH7.4)洗滌2次。將過濾器加入到6ml Ready-Safe液體閃爍液中并在LKB1219RackBeta計(jì)算器上經(jīng)液體閃爍光譜測(cè)定法進(jìn)行定量測(cè)定。通過加入1μM CP-99994(NK1)或1μM SR-48968(NK2)(兩者均由Schering-PloughResearch Institute化學(xué)部合成)，測(cè)定非特異性結(jié)合。由競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合曲線測(cè)定IC50值并用NK1受體0.8nM和NK2受體2.4nM實(shí)驗(yàn)測(cè)定值，根據(jù)Cheng和Prusoff法測(cè)定Ki值。
對(duì)于本發(fā)明化合物，在1μM濃度下，NK1結(jié)合作用在約0-100％抑制范圍內(nèi)，對(duì)于本發(fā)明所有化合物來講，在1μM濃度下，NK2結(jié)合作用在約0-100％抑制范圍內(nèi)?？梢岳斫獾氖?，當(dāng)某一本發(fā)明化合物在1μM濃度下NK結(jié)合作用低至0％時(shí)，更高濃度的這些化合物被認(rèn)為均具有NK結(jié)合抑制活性。
化合物的Ki值是指所述化合物引起NK1或NK250％抑制作用時(shí)的濃度。對(duì)NK1的抑制作用高于50％的本發(fā)明化合物，測(cè)定NK1的Ki值。此類化合物的NK1的Ki值約在0.1nM至約1μM范圍內(nèi)。
對(duì)NK2的抑制作用高于50％的本發(fā)明化合物，測(cè)定NK2的Ki值。此類化合物對(duì)NK2的Ki值約在0.1nM至約1μM范圍內(nèi)。
在不同程度上講，本發(fā)明式I化合物具有NK1和NK2拮抗劑活性，即，某些化合物具有強(qiáng)的NK1拮抗劑活性，但具有較弱的NK2拮抗劑活性。其他一些化合物NK2拮抗劑活性強(qiáng)，而NK1拮抗劑活性較弱。某些化合物同時(shí)具有強(qiáng)的NK1和NK2拮抗劑活性，某些化合物還可能是NK3拮抗劑。
許多式I化合物具有不對(duì)稱中心，因而可以以一對(duì)對(duì)映體形式存在。此時(shí)，一個(gè)對(duì)映體與另一個(gè)對(duì)映體相比可以具有不同的生物活性。例如，一個(gè)對(duì)映體NK1活性較強(qiáng)，而NK2活性較弱，而另一個(gè)對(duì)映體NK1活性較弱，NK2活性較強(qiáng)。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，某些式I化合物是NK1和NK2兩者的受體拮抗劑，并因此可用于因NK1和NK2受體活性引起或加重的疾病的治療。
本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，所述組合物含有式I化合物和藥物上可接受的載體。本發(fā)明化合物可以以常規(guī)口服劑型施用，例如膠囊劑、片劑、粉劑、扁囊劑、懸浮液或溶液劑，或者以注射劑形式施用，例如溶液、懸浮液或粉針。所述藥物組合物可用常規(guī)賦形劑和添加劑經(jīng)公知的制劑方法制備。藥物上可接受的賦形劑和添加劑包括無毒并且化學(xué)上相容的填充劑、粘合劑、崩解劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑、增稠劑、著色劑、乳化劑等等。
用于治療哮喘、咳嗽、支氣管病(bronchospasm)、炎癥疾病、偏頭痛、感受傷害及腸胃疾病的式I化合物日劑量約為每日0.1mg-20mg/kg體重，優(yōu)選約0.5-15mg/kg，更優(yōu)選0.5-5mg/kg。在平均體重70kg情況下，劑量范圍約為每日1-1500mg藥物，優(yōu)選約為50-100mg，可以以單劑量給藥或者2-4個(gè)分劑量給藥。確切的劑量應(yīng)由醫(yī)生根據(jù)所施用化合物的藥效、患者的年齡、體重、狀況和過敏情況來確定。
本發(fā)明將通過下列實(shí)施例舉例說明，這些實(shí)施例對(duì)本發(fā)明公開的范圍不起限定作用。其他方法以及本發(fā)明范圍內(nèi)的類似結(jié)構(gòu)化合物均是本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的。
實(shí)施例12-(3，4-二氯苯基)哌嗪的制備A.外消旋化合物的合成按照J(rèn).Med.Chem.9，191，1966所公開的方法合成2-(3，4-二氯苯基)哌嗪。
A.合成2-芳基-哌嗪衍生物的一般方法。
R1＝Cl、H或其他取代基即OCH3、CF3、Br、I、F等。
R2＝Cl、H或其他取代基即OCH3、CF3、Br、I、F等。
B.2-(3，4-二氯苯基)哌嗪的拆分步驟1將2-(3，4-二氯苯基)哌嗪(36.05g，0.156mol)的甲醇(200ml)溶液用含有2當(dāng)量N-乙酰基-L-亮氨酸(54.02g，0.312mol)的溶液處理并加熱，直至產(chǎn)物全部溶解。向此溶液中加入EtOAc(2.2L)并于環(huán)境溫度下靜置過夜。由沉淀的鹽中潷析出溶劑相并真空濃縮。用37.88g 2-(3，4-二氯苯基)哌嗪(0.164mol)和56.68g N-乙?；?L-亮氨酸重復(fù)此過程。
步驟2將步驟1兩個(gè)溶劑相獲得的濃縮鹽合并并于甲醇(550ml)中加熱，直至產(chǎn)物溶解。向此溶液中加入EtOAc(2.75L)并于環(huán)境溫度下靜置過夜。由沉淀出的鹽中潷析出溶劑相并真空濃縮，得到～95g哌嗪鹽(對(duì)映體A72％對(duì)映體過量)。
步驟3將步驟2溶劑相所得鹽溶于H2O(800ml)和氨水(400ml)溶液中并用CH2Cl2(4×400ml)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥并濃縮，得到37g哌嗪游離堿。將所述游離堿于己烷(890,600和450ml)中重結(jié)晶三次，得到16g哌嗪(對(duì)映體A＞99.9％對(duì)映體過量)。
步驟4將步驟1沉淀出的鹽合并并于甲醇(220ml)中加熱，直至產(chǎn)物溶解。向此溶液中加入EtOAc(2.2L)并于環(huán)境溫度下靜置過夜。由沉淀出的鹽中潷析出溶劑相并真空干燥，得到～43g哌嗪鹽(對(duì)映體B 93％對(duì)映體過量)。
步驟5將按照步驟4所述相似方法制備的12.3g鹽(對(duì)映體B 75％對(duì)映體過量)溶于0.5M NaOH(400ml)并用CH2Cl2(4×155ml)萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥并濃縮，得到3.72g哌嗪游離堿。將所述游離堿于己烷(90和70ml)中重結(jié)晶二次，得到2.1g哌嗪(對(duì)映體B＞98％對(duì)映體過量)。
C.測(cè)定哌嗪對(duì)映體純度的分析方法通過手性HPLC分析二-叔丁氧羰基哌嗪衍生物測(cè)定所述哌嗪的對(duì)映體純度。通過向少量哌嗪樣品(游離堿或鹽)(～.2mg)中加入二碳酸二叔丁基酯(～1mg)和甲醇(0.5ml)并于80℃下加熱1小時(shí)，制得所述二-叔丁氧羰基哌嗪衍生物。若所述哌嗪樣品是鹽，還需加入三乙胺(20μl)。用Chiralpak AD柱經(jīng)95∶5己烷-異丙醇洗脫對(duì)所述衍生物進(jìn)行分析。
實(shí)施例2(+，-)-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪的制備
于-20℃氮?dú)夥障?，向冷卻的含有2-(3，4-二氯苯基)哌嗪(6.934g，30mmol)、3，5-二甲基苯甲酸(4.55g，30mmol)和N-羥基苯并三唑一水合物(4.05g，30mmol)的CH2Cl2(600ml)溶液中加入Et3N(4.2ml，30mmol)和N，N-二甲氨基丙基乙基碳化二亞胺(DEC)(5.86g，30mmol)。將反應(yīng)于-20℃下保持1小時(shí)并逐漸溫?zé)嶂潦覝剡^夜。攪拌22小時(shí)后，反應(yīng)完成，并加入CH2Cl2(200ml)，有機(jī)溶液用鹽水(150ml，3×)洗滌，MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，得到8.2g粗產(chǎn)物。將所述于CH2Cl2/己烷中析晶，得到淺黃色固體(6.3g，17.34mmol，57.8％)，m.p.139-141℃；FAB MS [M+1]+35Cl363.1。
實(shí)施例3(+，-)-溴代乙酰基-2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?哌嗪的制備
于0℃下，向冷卻的(+，-)-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(11.5g，31.65mmol)的CH2Cl2(200ml)溶液中加入Hünig堿(4.5g，35mmol)和溴代乙酰溴(6.4g，31.65mmol)。于0℃氮?dú)夥障拢瑢⑺鋈芤簲嚢柽^夜，反應(yīng)完成后，用CH2Cl2(4000ml)稀釋并用鹽水(300ml，2×)洗滌，MgSO4干燥，過濾并濃縮。粗產(chǎn)物甲氧乙氧基閃式梯度硅膠色譜法純化，用2％[NH4OH/MeOH(1∶9)]/98％CH2Cl2洗脫，得到淺黃色固體狀所述標(biāo)題化合物(7.1g，47.3％)，m.p.77-79 ℃，F(xiàn)AB MS[M+1]+35Cl，79Br482.9，484.9。
實(shí)施例4(+)-[3，5-二甲基苯甲?；鵠3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(對(duì)映體B)的制備
按照實(shí)施例2所述相似方法，用(-)2-(3，4-二氯苯基)哌嗪代替(+，-)-2-(3，4-二氯苯基)哌嗪，可制得所述標(biāo)題化合物。
m.p.97-100℃；FAB MS[M+1]+35Cl363.1；
實(shí)施例5
(-)-溴代乙?；?2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?哌嗪(對(duì)映體B)的制備
按照實(shí)施例3所述相似方法，用(+)-[3，5-二甲基苯甲酰基]-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(對(duì)映體B)(實(shí)施例4)代替(+，-)-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪，可制得所述標(biāo)題化合物。m.p.68-71℃，F(xiàn)ABMS[M+1]+35Cl79Br482.9，484.8；
實(shí)施例6(+，-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-[[[1-[1-氧代-2-苯基)乙基]-4-哌啶基]氨基]乙?；鵠哌嗪的制備步驟1 于-10℃下，向4-氨基-1-芐基哌啶(9.5g，50mmol)的甲醇(150ml)溶液中加入二碳酸二叔丁基酯(10.9g，50mmol)的甲醇(60ml)溶液，將混合物逐漸溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)完成后，除去溶劑，得到白色固體2，F(xiàn)AB MS[M+1]+35Cl291.3。
步驟2 向化合物2(11.6g，40mmol)的甲醇(140ml)溶液中加入Pd(OH)2(20％/碳)(2.4g)并于47psi下進(jìn)行氫解。反應(yīng)完成后，濾除催化劑，將濾液蒸發(fā)，得到白色固體狀化合物3(8g，40mmol)。
步驟3 于-5℃下，將化合物3(0.69g，3mmol)與苯基乙酰氯(0.46g，3mmol)和Hünig堿(0.43g，3.3mmol)于CH2Cl2(10ml)中進(jìn)行混合并將溶液逐漸溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)完成后，反應(yīng)用CH2Cl2(50ml)稀釋并用鹽水(30ml，3×)洗滌。CH2Cl2層用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到白色固體狀化合物4(0.81g)。
步驟4 將此粗產(chǎn)物溶于無水CH2Cl2(3ml)并用4N HCl-二噁烷(6ml)處理。于室溫下攪拌2小時(shí)后，蒸除溶劑，得到白色固體HCl鹽形式的4-氨基-1-(1-氧代-2-苯乙基)哌啶5(0.8g)。FAB MS[M+1]+219。
步驟5 向化合物5(0.31g，1.2mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液中加入Hünig堿(0.62g，4.8mmol)，隨后加入化合物6(0.3g，0.6mmol)(實(shí)施例3制備)。于氮?dú)夥障拢瑢⒒旌衔锸覝叵聰嚢?天。反應(yīng)完成后，反應(yīng)用CH2Cl2(50ml)稀釋并用鹽水(30ml，×2)洗滌，MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到褐色膠狀粗產(chǎn)物(0.56g)。將此粗產(chǎn)物于閃式梯度硅膠(60g)上經(jīng)硅膠色譜法純化，用5％[NH4OH/MeOH(1∶9)]/95％CH2Cl2洗脫，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為75％。FAB MS[M+1]+35Cl621.1；m.p.87-89℃。
實(shí)施例7(+，-)-1，1-二甲基乙基-4-[[2-[2-(3，4-二氯苯基)-1-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]氨基]-1-哌啶羧酸酯的制備
向N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮1(15g，75.3mmol)的吡啶(50ml)溶液中加入羥胺鹽酸鹽(5.23g，75.3mmol)，將混合物于65℃下油浴中加熱1小時(shí)。冷卻后，減壓除去吡啶，殘余物于高真空下干燥過夜，得到一固體。向此固體中加入水(100ml)并將混合物用超聲波處理。濾出沉淀并用水洗滌，然后高真空下干燥，得到化合物1肟衍生物(10.5g，65％)。FABMS[M+1]+215.3。將所述肟化合物(10g，46.67mmol)溶于無水EtOH(100ml)，隨后加入阮內(nèi)鎳(29g，用無水EtOH洗滌)，于Parr振搖器中50psi下將混合物氫化過夜。反應(yīng)完成后，濾除阮內(nèi)鎳(注意有失火的危險(xiǎn))并將濾液濃縮，得到油狀化合物2(9.2g，46mmol，產(chǎn)率為98％)，將其于高真空干燥下固化。FAB MS[M+1]+201.3。
于-10℃下，向溴代乙?；苌?(3.0g，6.2mmol)(實(shí)施例3中制備)的CH2Cl2(62ml)溶液中加入Hünig堿(1.2ml，6.82mmol)和化合物2(2.48g，12.39mmol)，將溶液逐漸溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)完成后，加入CH2Cl2(300ml)并用鹽水(100ml，3×)洗滌，MgSO4干燥并過濾。將濾液蒸發(fā)至干，得到一淺黃色固體，將其在閃式梯度硅膠(200g)上經(jīng)閃式色譜法純化，用5％[MH4OH/MeOH(1∶9)]/CH2Cl2洗脫，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物4(2.66g，4.4mmol)，產(chǎn)率為71％，m.p.78-81℃；FAB MS[M+1]+35Cl603.1；計(jì)算值 C31H40N4O4Cl2，C，61.69；H，6.68；N，9.28；Cl，11.74實(shí)測(cè)值C，61.33；H，6，94；N，9.17；Cl，11.27.
實(shí)施例8(-)-1，1-二甲基乙基4-[[2-[2-(3，4-二氯苯基)-1-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]氨基]-1-哌啶羧酸酯(對(duì)映體B)的制備按照實(shí)施例7所述相似方法，用手性溴代乙?；衔?實(shí)施例5制備)可得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物，m.p.72-75℃；FAB MS[M+1]+35Cl603.2；
實(shí)施例9(+，-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-[(4-哌啶基氨基)乙?；鵠哌嗪二鹽酸鹽的制備
于0℃下，向(+，-)-1，1-二甲基乙基-4-[[2-[2-(3，4-二氯苯基)-1-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]氨基]-1-哌啶羧酸酯(實(shí)施例7)(2.5g，4.14mmol)的CH2Cl2(20ml)溶液中加入4N HCl-二噁烷(10.35ml，41.4mmol)。將混合物于0℃下攪拌1小時(shí)，于3小時(shí)內(nèi)令其逐漸溫?zé)嶂潦覝亍７磻?yīng)完成后，蒸除過量的HCl和溶劑，得到淺黃色固體，無需進(jìn)一步純化，將其用于下一步驟。FAB MS[M+1]+35Cl503.1。
實(shí)施例10(-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-[(4-哌啶基氨基)乙?；鵠哌嗪二鹽酸鹽(對(duì)映體B)的制備按照實(shí)施例9所述相似方法，用實(shí)施例8所得手性原料制得淺黃色固體狀所述標(biāo)題化合物，F(xiàn)AB MS[M+1]+35Cl503.2；
實(shí)施例11
用平行合成法可制得一系列(-)2-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲酰基]-1-[(4-哌啶基氨基)乙?；鵠哌嗪二鹽酸鹽(對(duì)映體B)的Y衍生物。
向?qū)嵤├?0所得化合物1(1.05g，1.822mmol)的CH2Cl2(40ml)懸浮液中加入Hünig堿(1.0ml，5.74mmol)。經(jīng)超聲波處理將所述混合物溶解，將此溶液分成20份并轉(zhuǎn)移到20只試管中。每只試管中含有2-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-[(4-哌啶基氨基)乙酰基]哌嗪二鹽酸鹽(對(duì)映體B)(0.091mmol)、Hünig堿(0.287mmol)和CH2Cl2(2ml)。向每只試管中分別加入0.1mmol芳族或取代的芳族甲基氯化物或溴化物或者雜環(huán)鹵化物試劑。反應(yīng)完成后，將其用CH2Cl2(5ml)稀釋，用鹽水(2ml，3×)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)至干。
用上述方法制備有代表性的化合物2如下文所示。
實(shí)施例12(+，-)-1-苯甲酰基-4-[[2-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲酰基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]氨基]哌啶的制備
向?qū)嵤├?所得化合物(0.23g，0.4mmol)的CH2Cl2(5ml)溶液中加入Hünig堿(0.13g，1.0mmol)，隨后于0℃下，加入苯甲酸(49mg，0.4mmol)、HOBT(54mg，0.4mmol)、Et3N(40mg，0.4mmol)和DEC(77mg，0.4mmol)，將所述溶液逐漸溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。反應(yīng)完成后，溶液用CH2Cl2(50ml)稀釋并用飽和NaHCO3溶液(30ml，2×)和鹽水(20ml，3×)洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到油狀粗產(chǎn)物。將所述產(chǎn)物于閃式梯度硅膠(50g)上經(jīng)色譜法純化，用5％[MH4OH/MeOH(1∶9)]/CH2Cl2洗脫，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物(0.18g)，m.p.94-96℃；FAB MS[M+1]+35Cl607.3。
實(shí)施例13(+，-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-[[[1-(2-氧代-2-苯基乙基)-4-哌啶基]氨基]乙酰基]哌嗪的制備
于室溫下，向?qū)嵤├?所得化合物1(0.23g，0.4mmol)的CH2Cl2(5ml)溶液中加入Hünig堿(0.21g，1.6mmol)和苯甲酰溴(80mg，0.4mmol)，將混合物于氮?dú)夥帐覝叵聰嚢柽^夜。反應(yīng)完成后，按照實(shí)施例7所述方法進(jìn)行處理并純化，得到固體狀所述標(biāo)題化合物2，m.p.69-719℃；FAB MS[M+1]+35Cl621.3。
實(shí)施例14(+，-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-[[[1-(3-苯基丙基)-4-哌啶基]氨基]乙酰基]哌嗪的制備
于0℃下，向?qū)嵤├?所得化合物1(0.4g，0.7mmol)的CF3CH2OH(5ml)溶液中加入Hünig堿(0.21g，1.6mmol)。于0℃下攪拌10分鐘后，加入氫化肉桂醛(94mg，0.7mmol)，反應(yīng)于0℃下再攪拌2.5小時(shí)，并加入NaBH3CN(100mg，1.6mmol)。將混合物于0℃下進(jìn)行攪拌并逐漸溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)完成后，將其按照實(shí)施例7所述方法進(jìn)行處理和純化，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物，m.p.52-54℃；FAB MS[M+1]+35Cl621.3。
實(shí)施例15(-)-N-[4-[[4-[[2-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]氨基]-1-哌啶基]甲基]-2-噻唑基]乙酰胺(對(duì)映體B)的制備
按照實(shí)施例13所述相似方法，在Hünig堿存在下，于CH2Cl2中，利用實(shí)施例10所得手性中間體1和2-乙酰氨基-4-(氯甲基)噻唑，經(jīng)閃式梯度硅膠色譜法純化后，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物2，m.p.104-107℃，HRMS計(jì)算值[M+H+](2×35)ClC32H39N6SO3Cl2657.2181實(shí)測(cè)值657.2172；
實(shí)施例16(+，-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-[[[3-甲基-1-(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]乙?；鵠哌嗪(非對(duì)映體A和B)的制備
步驟1向BOC甘氨酸(0.979g，5.59mmol)和Et3N(0.85ml，6.1mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液中加入BOP(苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)磷鎓六氟磷酸鹽)試劑(2.46g，5.57mmol)。攪拌15分鐘后，加入(+，-)-(3，5-二甲基苯甲?；?-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(1.83g，5.03mmol)(實(shí)施例2制備)。5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物加入到0.2N HCl(100ml)中并用CH2Cl2(3×60ml)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。粗產(chǎn)物于硅膠上經(jīng)閃式色譜法純化，用50∶1-30∶1 CH2Cl2-MeOH洗脫，得到2.15g白色泡沫狀化合物2(如上所示)(4.1mmol，82％)。
步驟2將化合物2(1.32g，2.5mmol)用MeOH飽和的HCl(15ml)處理2.5小時(shí)并濃縮。將所得粉末狀物溶于CH2Cl2，用飽和NaHCO3洗滌，MgSO4干燥并濃縮，得到游離堿狀化合物3。
步驟3向-78℃下的LDA(10.79mmol)的THF(30ml)溶液中加入1-芐基-4-哌啶酮(2.0ml，10.8mmol)，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃保持20分鐘，然后再冷卻至-78℃。向烯醇化的溶液中加入碘甲烷(0.67ml，10.8mmol)，將其于0℃下攪拌2小時(shí)，然后溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)混合物用飽和NH4Cl處理并濃縮，殘余物懸浮于H2O中并用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并濃縮，產(chǎn)物于硅膠上經(jīng)閃式色譜法純化，用1∶1己烷-EtOAc洗脫，得到黃色油狀1-芐基-3-甲基-4-哌啶酮(0.65g，30％)。
步驟4將步驟3所得酮4(70mg，0.13mmol)和化合物3(34mg，0.17mmol)的混合物于異丙醇鈦(45mg，0.16mmol)中攪拌1.5小時(shí)，向混合物中加入乙醇(1.0ml)和NaCNBH3(5.4mg，8.6mmol)并將混合物攪拌過夜。將反應(yīng)混合物過濾并用EtOAc洗滌，濾液用H2O和鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘余物于硅膠上經(jīng)色譜法純化，用5％NH3飽和的MeOH的CH2Cl2溶液洗脫，得到兩個(gè)純非對(duì)映體。
非對(duì)映體A(15mg)HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C34H41N4Cl2O2]+607.2607；實(shí)測(cè)值607.2603.
非對(duì)映體B(17mg)HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C34H41N4Cl2O2]+607.2607；實(shí)測(cè)值607.2597.
實(shí)施例172-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲酰基]-1-[[[1-(苯甲基)-3-哌啶基]氨基]乙酰基]哌嗪非對(duì)映體的制備
按照實(shí)施例16所述相似方法，用3-芐基哌啶代替1-芐基-3-甲基-4-哌啶酮，制得白色泡沫狀所述標(biāo)題化合物。HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C33H39N4Cl2O2]+593.2450；實(shí)測(cè)值593.2458.
實(shí)施例182-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-[[[8-(苯甲基)-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基]氨基]乙?；鵠哌嗪的制備
按照實(shí)施例16所述相似方法，將實(shí)施例16所得產(chǎn)物、化合物3(185mg，0.44mmol)與8-芐基-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-酮(97mg，0.45mmol)和Ti(O-iPr)4(105ml，0.50mmol)混合并攪拌1小時(shí)。向粘稠的反應(yīng)混合物中加入NaBH3CN(59.5mg，0.95mmol)并將混合物攪拌過夜。向反應(yīng)混合物中加入H2O(1ml)并過濾，濾液用EtOH洗滌，濃縮并經(jīng)硅膠色譜法純化，用30∶1∶0.1-15∶1∶0.1 CH2Cl2-MeOH-NH3飽和溶液洗脫，得到白色泡沫狀所述標(biāo)題產(chǎn)物。HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C35H41Cl2N4O2]+619.2607；實(shí)測(cè)值619.2594.
實(shí)施例192-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-[[[8-甲基-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基]氨基]乙酰基]哌嗪(對(duì)映體B)的制備
除了在步驟1中用(+)-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(對(duì)映體B)并用托品酮代替1-芐基-3-甲基-4-哌啶酮以外，按照實(shí)施例16所述相似方法制得所述化合物。HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C29H37Cl2N4O2]+543.2294，實(shí)測(cè)值543.2282.
實(shí)施例20
2-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-[[[1，3-二(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]乙?；鵠哌嗪，由對(duì)映體B制備非對(duì)映體
步驟1.將1-芐基-3-甲酯基-4-哌啶酮(1.0g，4.0mmol)的THF(10ml)溶液用0.5M二(三甲基甲硅烷基)氨化鉀的甲苯溶液(9.6ml，4.8mmol)處理15分鐘。2小時(shí)后，反應(yīng)混合物用飽和NH4Cl處理并用乙醚萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法純化，用4∶1己烷-EtOAc洗脫，得到淺黃色油狀3-甲酯基-1，3-二芐基-4-哌啶酮((0.61g)。
步驟2.將3-甲酯基-1，3-二芐基-4-哌啶酮(0.61g，1.78mmol)、MeOH(10ml)和5M HCl水溶液(25ml，125mmol)回流過夜。將反應(yīng)混合物濃縮并色譜純化(硅膠，用4∶1己烷-EtOAc洗脫)，得到1，3-二芐基-4-哌啶酮(0.31g)。
步驟3.將1，3-二芐基-4-哌啶酮(0.033g，0.12mmo)和[[2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲酰基)-1-氨基]乙?；鵠哌嗪(對(duì)映體B)(0.05g，0.12mmol)[除了在步驟1中用(+)-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(對(duì)映體B)(實(shí)施例4)以外，按實(shí)施例16所述方法制備]CH2Cl2(1.0ml)溶液用NaBH(OAc)3(0.035g，0.16mmol)和乙酸(0.07ml，0.12mmol)處理，將混合物攪拌過夜。反應(yīng)完成后，反應(yīng)混合物用1N NaOH處理并用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，MgSO4干燥，濃縮并經(jīng)硅膠色譜法純化，用5％NH3飽和的MeOH/CHCl洗脫，得到32mg白色固體狀所述標(biāo)題化合物。HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C40H45Cl2N4O2]+683.2920；實(shí)測(cè)值683.2932.
實(shí)施例212-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-[[[3-甲基-1-(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]乙酰基]哌嗪(由對(duì)映體B制得的非對(duì)映體A)的制備除了在實(shí)施例16步驟1中用(+)-[3，5二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(對(duì)映體B)以外，按照實(shí)施例16所述相似方法制得所述化合物。HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C34H41Cl2N4O2]+607.2607；實(shí)測(cè)值607.2594.
實(shí)施例222-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-[[[1-(苯甲基)-3-(2-丙烯基)-4-哌啶基]氨基]乙?；鵠哌嗪(由對(duì)映體B制得的非對(duì)映體)的制備
除了在步驟1中用烯丙基溴代替芐基溴以外，按照實(shí)施例20所述相似方法制得所述化合物。HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C36H43Cl2N4O2]+633.27；實(shí)測(cè)值633.2763.
實(shí)施例23三氯乙基-4-[[2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]氨基]2-苯基-1-哌啶羧酸酯(由對(duì)映體B制備的非對(duì)映體)的制備
步驟1.于-15℃下，向含有4-甲氧基吡啶(3.5g，32.5mmol)(按照Synthesis 1989，645所述制備)的冷卻的THF(100ml)溶液中加入氯甲酸2，2，2-三氯乙基酯(4.5ml，32.7mmol)。30分鐘后，于-15℃下加入2MPhMgCl的THF溶液(19.5ml，39mmol)并將混合物于-15℃下攪拌30分鐘，隨后在室溫下攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物用10％HCl水溶液(100ml)驟冷，加入鹽水(200ml)并配分。水層用Et2O(50ml)萃取，合并的有機(jī)層用MgSO4干燥并濃縮，得到11.4g淺棕色固體狀如上所述的化合物3。
步驟2.于-23℃下，向步驟1所得化合物3的冷卻的THF(100ml)溶液中加入27.8ml 1M L-selectride(27.8mmol)，將混合物于-23℃下攪拌2小時(shí)。溫?zé)嶂潦覝睾螅瑢⒎磻?yīng)混合物加入到飽和NaHCO3中并配分。水層用Et2O(2×50ml)萃取，合并的有機(jī)層用鹽水(50ml)洗滌，MgSO4干燥并濃縮。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法純化，用6∶1-3∶1己烷-EtOAc洗脫，得到2.47g化合物4和2.75g回收的原料。
步驟3.向含有步驟2所得化合物4(284mg，0.81mmol)的1，2-二氯乙烷(3ml)溶液和化合物5(324mg，0.81mmol)[除了在步驟1中用(+)-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(對(duì)映體B)以外，按實(shí)施例16步驟3所述制備]中加入NaBH(OAc)3(179mg，0.84mmol)和乙酸(50ml，0.87mmol)。攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物加入到1N NaOH(40ml)中并用Et2O(3×15ml)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水(15ml)洗滌，濃縮并經(jīng)硅膠色譜法純化，用25∶1∶0.1 CH2Cl2-MeOH-NH3水溶液洗脫，得到423mg白色泡沫狀所述標(biāo)題化合物。HRMS(FAB，M+H+)m/e計(jì)算值[C35H38Cl4N4O4]+753.1336；實(shí)測(cè)值753.1338.
實(shí)施例242-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲酰基)-1-[3-[5-(苯甲基)-(1S，4S)-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-基]-1-氧代丙基]哌嗪(由對(duì)映體B制得的非對(duì)映體A)的制備
向含有二異丙基乙基胺(0.275ml，2.0mmol)和[3，5-二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(對(duì)映體B)(實(shí)施例4)(305mg，0.84mmol)的冷卻的CH2Cl2(10ml)溶液中加入氯丙酰氯(0.075ml，0.8mmol)，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝亍?0分鐘后，加入(1S，4S)-2-芐基-2，5-二氮雜雙環(huán)(2.2.1)庚烷·2HBr(297mg，0.85mmol)和二異丙基乙基胺(0.275ml，2.0mmol)并將混合物靜置過夜，然后將反應(yīng)混合物濃縮后。產(chǎn)物于閃式梯度硅膠上經(jīng)閃式色譜法純化，用30∶1∶0.1 CH2Cl2/MeOH/NH3洗脫，得到泡沫狀固體(140mg，0.23mmol，29％)，High Res.MS[M+1]+計(jì)算值C34H39Cl2N4O2605.2450；實(shí)測(cè)值605.2465.
實(shí)施例25制備
按照平行合成法，制得一系列如上所述的(-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲酰基]-1-[(4-哌啶基-氨基)乙?；鵠哌嗪二鹽酸鹽(對(duì)映體B)(實(shí)施例10)的脲類似物。將實(shí)施例10所得產(chǎn)物(0.75g，1.3mmol)溶于無水吡啶(13ml)，將1ml上述溶液轉(zhuǎn)移至一試管(2英錢)中，向每只試管中加入0.1mmol芳族或取代的芳族異氰酸酯試劑。反應(yīng)完成后，用CH2Cl2(5ml)稀釋并用水(3×5ml)洗滌，MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)至干。由大部分反應(yīng)試劑得到(2∶1)加成化合物，主要的產(chǎn)物。由較少的幾種反應(yīng)試劑得到產(chǎn)物A。粗產(chǎn)物經(jīng)FAB MS測(cè)定。
實(shí)施例26
按照平行合成法，制得一系列如上所述的(-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-[3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-[(4-哌啶基-氨基)乙?；鵠哌嗪二鹽酸鹽(對(duì)映體B)(實(shí)施例10)的酰氨基類似物。將實(shí)施例10所得手性產(chǎn)物(1.15g，2mmol)溶于無水CH2Cl2(20ml)和Hünig堿(0.9g，7mmol)混合物中，隨后加入HOBT(0.3g，2.2mmol)。于室溫下攪拌1小時(shí)后，將1ml上述溶液轉(zhuǎn)移至褐色試管(4英錢)中，向每只試管中加入適宜的芳族或雜環(huán)羧酸(0.1mmol)。將DEC(0.38g，2mmol)溶于CH2Cl2(5ml)并向每只試管中加入Et3N(0.2ml)和0.4ml(0.2mmol)DEC溶液，反應(yīng)于室溫下攪拌過夜。反應(yīng)完成后，每一反應(yīng)混合物用CH2Cl2(4ml)稀釋并用水(2×4ml)洗滌，Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)至于。粗產(chǎn)物經(jīng)FAB MS測(cè)定。
實(shí)施例27(-)-苯基4-[[2-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-哌嗪基-2-氧代乙基]氨基]-1-哌啶羧酸酯半水合物(對(duì)映體B)的制備
于-78℃下，向?qū)嵤├?0所得化合物1(0.2g，0.347mmol)的CH2Cl2(8ml)冷卻的溶液中加入Hünig堿(0.193ml，1.11mmol)和氯甲酸苯酯(0.046ml，0.364mmol)。于-78℃下攪拌24小時(shí)后，反應(yīng)用CH2Cl2(200ml)稀釋，用鹽水(80ml，3×)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物用閃式梯度硅膠(50g)經(jīng)閃式色譜法純化，用5％[(1∶9)(NH4OH/MeOH)]/95％CH2Cl2洗脫，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物2(0.108g，0.173mmol)，m.p.71-75℃；FAB MS[M+1]+35Cl623.0；計(jì)算值 C33H36N4O4Cl2·0.5H2O，C，62.66；H，5.90；N，8.86；Cl11.38.實(shí)測(cè)值C，62.52；H，5.95；N，8.87；Cl，11.01；
實(shí)施例282-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-[[[1-[(1H-吡咯-2-基)甲基]-4-哌啶基]氨基]乙?；鵠哌嗪半水合物(對(duì)映體B)的制備
于室溫氮?dú)夥障?，向?qū)嵤├?0所得化合物1(0.2g，0.347mmol)的CF3CH2OH(3.47ml)溶液中加入Hünig堿(0.12ml，0.694mmol)和吡咯-2-甲醛(40mg，0.42mmol)。于室溫下攪拌1小時(shí)后，加入NaBH3CN(67mg，0.694mmol)并將混合物攪拌過夜。反應(yīng)完成后，蒸除溶劑，殘余物與5％NaHCO3溶液(50ml)和鹽水(100ml)混合，然后用CH2Cl2(80ml，3×)萃取。將有機(jī)層合并，干燥(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物于閃式梯度硅膠(50g)上經(jīng)閃式色譜法純化，用7.5％[(1∶9)(NH4OH/MeOH)]/92.5％CH2Cl2洗脫，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物2，產(chǎn)率為43％，m.p.73-76℃；HRMS，計(jì)算值[M+H+]35Cl C31H38N5O2Cl2582.2403實(shí)測(cè)值582.2403.
實(shí)施例292-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲酰基)-1-[[[1-[(1H-吡咯-2-基)羰基]-4-哌啶基]氨基]乙?；鵠哌嗪半水合物(對(duì)映體B)的制備
用實(shí)施例10所得手性化合物1(100mg，0.173mmol)和吡咯-2-羧酸(20mg，0.178mmol)，按照實(shí)施例26所述相似方法，經(jīng)閃式梯度硅膠色譜純化后，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物2，m.p.95-100℃；HRMS，計(jì)算值[M+H+]35Cl，C31H36N5O3Cl2596.2159實(shí)測(cè)值596.2204.
實(shí)施例30(-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲酰基)-1-[[[1-[(1H-咪唑-2-基)甲基]-4-哌啶基]氨基]乙?；鵠哌嗪二水合物(對(duì)映體B)的制備
用實(shí)施例10所得手性化合物1(200mg，0.347mmol)和2-咪唑甲醛(34mg，0.347mmol)，按照實(shí)施例28所述相似方法，經(jīng)閃式梯度硅膠色譜純化后，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物2，m.p.73-76℃；HRMS，計(jì)算值[M+H+]35Cl，C30H37N6O2Cl2583.2355實(shí)測(cè)值583.2369；
實(shí)施例312-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-[1-氧代-3-[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]丙基]哌嗪(對(duì)映體B)的制備
步驟1.于-78℃下，向[3，5-二甲基苯甲?；鵠-3-(3，4-二氯苯基)哌嗪(對(duì)映體B)1(3.0g，8.26mmol)(實(shí)施例4)的CH2Cl2(82.6ml)冷卻的溶液中加入Hünig堿(1.582ml，9.08mmol)和溴代丙酰氯(0.874ml，8.67mmol)。于-78℃下攪拌5小時(shí)后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2(300ml)稀釋，鹽水(150ml，2×)洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干，得到溴代丙?；种虚g體2(3.2g)。
步驟2.于0℃下，向化合物2(300mg，0.6mmol)的CH2Cl2(6ml)溶液中加入4-氨基-1-芐基哌啶(0.245ml，1.2mmol)和Hünig堿(0.1ml，0.6mmol)。反應(yīng)逐漸溫?zé)嶂潦覝夭嚢?天。反應(yīng)完成后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2(200ml)稀釋并用鹽水(50ml，2×)洗滌，MgSO4干燥，過濾并濃縮至干，得到亮黃色固體。粗產(chǎn)物于閃式梯度硅膠(80g)上經(jīng)閃式色譜法純化，用6.5％[(1∶9)(NH4OH/MeOH)]/93.5％CH2Cl2洗脫，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物(0.18g，0.3mmol，50％)，m.p.51-54℃；HRMS，計(jì)算值[M+H+]35Cl，C34H41N4O2Cl2607.2607實(shí)測(cè)值607.2600.
實(shí)施例322-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-[1-氧代-3-N-甲基-[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]丙基]哌嗪(對(duì)映體B)的制備
用4-氨基-1-芐基哌啶和甲胺鹽酸鹽作原料，按照實(shí)施例28所述還原胺化相似方法制得4-甲氨基-1-芐基哌啶3。
除了在步驟2中用4-甲氨基-1-芐基哌啶3代替4-氨基-1-芐基哌啶以外，用實(shí)施例31所述相似方法，制得白色固體狀所述標(biāo)題化合物4。
m.p.47-49℃；FAB MS[M+1]+35Cl621.2；計(jì)算值C35H42N4O2Cl2·0.5H2OC，66.66；H，6，87；N，8.88；Cl，11.24.實(shí)測(cè)值C，67.02；H，7.07；N，8.81；Cl，10.75.
實(shí)施例33(-)-1，2-二甲基乙基5-[3-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?-1-哌嗪基]-3-氧代丙基]-(1S，4S)-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-羧酸酯(由對(duì)映體B制得的非對(duì)映體A)的制備
除了在步驟2中用(1s，4s)-N-t-BOC-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷代替4-氨基-1-芐基哌啶以外，用實(shí)施例31所述相似方法，制得所述標(biāo)題化合物4。
m.p.78-82℃；FAB MS[M+1]+35Cl615.1；
實(shí)施例34(-)-1-[3-(1S，4S)-(2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-基)-1-氧代丙基]-2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；?哌嗪基二鹽酸鹽(由對(duì)映體B制得的非對(duì)映體A)的制備
室溫下，向?qū)嵤├?3所得化合物1(0.74g，1.2mmol)的CH2Cl2(6ml)溶液中加入4N HCl(3ml，12mmol)。于室溫下攪拌4小時(shí)后，蒸除過量的酸和溶劑，得到淺黃色固體2，m.p.60-64℃；FAB MS[M+1]+35Cl515.1；
實(shí)施例35(-)-N-[4-[[5-[3-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲酰基]-1-哌嗪基]-3-氧代丙基]-(1S，4S)-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-基]甲基-2-噻唑基]乙酰胺(由對(duì)映體B制得的非對(duì)映體A)的制備
在Hünig堿存在下，于CH2Cl2中，用實(shí)施例34所得手性中間體1和2-乙酰氨基-4-氯甲基噻唑，按照實(shí)施例13所述相似方法，經(jīng)閃式梯度硅膠色譜純化后，得到所述標(biāo)題化合物2，m.p.105-110℃；FAB MS [M+1]+35Cl669.0；
實(shí)施例36(-)-N-[4-[[5-[3-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲?；鵠-1-哌嗪基]-3-氧代丙基]-(1S，4S)-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-基]甲基]苯基]乙酰胺(由對(duì)映體B制得的非對(duì)映體A)的制備
在Hünig堿存在下，于CH2Cl2中，用實(shí)施例34所得手性中間體和4-乙酰氨基芐基溴，按照實(shí)施例13所述相似方法，經(jīng)閃式梯度硅膠色譜純化后，得到所述標(biāo)題化合物2，m.p.101-106℃；FAB MS[M+1]+35Cl662.1；
實(shí)施例372-(3，4-二氯苯基)-4-(3，5-二甲基苯甲酰基]-1-[3-[5-(1H-吡咯-2-基)甲基]-(1S，4S)-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-基]-1-氧代丙基]哌嗪(由對(duì)映體B制得的非對(duì)映體A)的制備
用實(shí)施例34所得手性中間體，按照實(shí)施例28所述相似方法，經(jīng)閃式梯度硅膠色譜純化后，得到固體狀所述標(biāo)題化合物2，m.p.81-83℃；FABMS[M+1]+35Cl594.1。
實(shí)施例38(+，-)-2-(3，4-二氯苯基)-4-[(4-氟-1-萘基)羰基]-1-[[[1-(苯甲基)-4-哌啶基]氨基]乙?；鵠哌嗪的制備
一般方法于-78℃氮?dú)夥障?，?小時(shí)內(nèi)，向(+，-)-2-(3，4-二氯苯基)哌嗪(1；Ar2＝3，4-二氯苯基)(20g，86.53mmol)的MeOH(900ml)冷卻的溶液中滴加t-BOC酸酐(19.47g，86.53mmol)的MeOH(263ml)溶液，將溶液逐漸溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)完成后，蒸除溶劑并將殘余物于高真空下干燥，得到白色固體狀化合物2。(Ar2＝3，4-二氯苯基)FAB MS[M+1]+35Cl331.2。
于-78℃氮?dú)夥障?，?0分鐘內(nèi)，向化合物2(23.8g，71.85mmol)的CH2Cl2(500ml)冷卻的溶液中經(jīng)滴液漏斗加入溴代乙酰溴(6.88ml，79.04mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液。于-78℃下攪拌3小時(shí)后，TLC顯示反應(yīng)已完成。向此冷卻的溶液中加入Hünig堿(13.76ml，79mmol)和4-氨基-1-芐基哌啶(29.30ml，143.7mmol)，將其于-78℃下保持1小時(shí)，然后逐漸溫?zé)嶂潦覝剡^夜。反應(yīng)完成后，加入CH2Cl2(200ml)并用鹽水(200ml，3×)洗滌，MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到淺褐色化合物3殘余物(46g)(Ar2＝3，4-二氯苯基)。化合物3在400g閃式梯度硅膠上經(jīng)閃式色譜法純化，用3.5％NH3-MeOH/CH2Cl2洗脫，得到24.8g(44.2mmol，61.5％)純化合物3(Ar2＝3，4-二氯苯基)。FAB MS[M+1]+35Cl561.3。
于0℃下，經(jīng)滴液漏斗向化合物3(Ar2＝3，4-二氯苯基)(16g，28.49mmol)的CH2Cl2(142.5ml)溶液中加入4N HCl-二噁烷溶液(71.24ml，284.9mmol)，將反應(yīng)逐漸溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時(shí)。反應(yīng)完成后，蒸除溶劑，得到淺黃色固體，將其溶于H2O(400ml)并用1N NaOH調(diào)至pH10。用CH2Cl2(200ml，4×)由堿性水溶液中萃取所述產(chǎn)物，用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到淺黃色固體狀化合物4(Ar2＝3，4-二氯苯基)(12.5g，27.09mmol，95％)。FAB MS[M+1]+35Cl461.1。化合物4是用于與各種芳族羧酸偶合合成許多化合物的關(guān)鍵性中間體。
室溫下，向化合物4(Ar2＝3，4-二氯苯基)(200mg，0.433mmol)的CH2Cl2(5ml)溶液中依次加入4-氟-1-萘甲酸(84.8mg，0.433mmol)、HOBT(58.5mg，0.434mmol)、Et3N(0.634ml，0.455mmol)和DEC(85mg，0.434mmol)，反應(yīng)于室溫氮?dú)夥障聰嚢柽^夜。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)用EtOAc(150ml)稀釋并用鹽水(50ml，3×)洗滌，MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物5(Ar2＝3，4-二氯苯基，Ar1＝4-氟-1-萘基)，將其經(jīng)閃式色譜法(50g閃式梯度硅膠)純化，用4％飽和NH3-MeOH的CH2Cl2溶液洗脫，得到純化合物5，F(xiàn)ab MS[M+1]+35Cl633.2，m.p.78-81℃。
實(shí)施例39按照實(shí)施例38所述方法制備下列化合物。將關(guān)鍵性中間體化合物4(Ar2＝3，4-二氯苯基)與適宜的芳族羧酸偶合，得到目標(biāo)化合物。經(jīng)平行合成法，制得不帶熔點(diǎn)的這些化合物。
權(quán)利要求
1.下式化合物或其對(duì)映異構(gòu)體或其藥物上可接受的鹽
各X獨(dú)立地是O、(H，H)、NRd或S；n是0-2；u是0-2；I是0-2；m是1，和y是1-3；或者m是2，和y是0；并且條件是在下式中不多于一個(gè)Rc不是H，
基團(tuán)，各Rc獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、
，其中n1是1-6；Rd獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、CN、ORa、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基或烯丙基；R4是-ORa、SRa、
Rc＇是H、C1-C6烷基或(CH2)nORa，條件是不多于一個(gè)Rc＇不是H；各Ra和Rb獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、烯丙基；條件是，當(dāng)R4是
時(shí)，Ra不是H；或者當(dāng)Ra和Rb與同一個(gè)氮原子相連時(shí)，Ra和Rb與它們所連接的氮原子一起形成4-7元環(huán)；其中各R1和R2獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、CF3、C2F5，Cl，Br，I，F(xiàn)，NO2，ORa，CN，NRaRb，
-SRa，和
并且在
或
中Ra不是H；或者當(dāng)R1和R2在環(huán)上相鄰碳原子上時(shí)，它們可以形成
，其中n＇是1或2；并且各R3獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、CF3，C2F5，
Cl，Br，I，F(xiàn)，ORa，OCF3，或苯基Ar1是雜芳基或取代的雜芳基，
或者Q是N或CH；Ar2是雜芳基或取代的雜芳基；
Z是
或
m1＝0-1；m2＝1-2；n3是0-4；Rg是-ORa，條件是Ra不是H；芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、-NRaRb、-O-(CRa，Rb)n7-芳基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的芳基、-O-(CRa，Rb)n7-雜芳基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的雜芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-雜芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的雜芳基、-O-(CRa，Rb)n7-雜環(huán)烷基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的雜環(huán)烷基、-NRa-(CRa，Rb)n7-芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-雜環(huán)烷基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的雜環(huán)烷基；n7是0-4；各Re和Rf獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、烯丙基；或者Re和Rf還可以與它們所連接的碳原子一起形成羰基，條件是不多于一個(gè)羰基在下式中；
n5是1-2；各R5獨(dú)立地選自H、OH、
、C1-C6烷基、(CH2)n1-R4，其中n1是1-6，條件是，當(dāng)n1是1時(shí)，R4不是OH或NRaRb；條件還有，當(dāng)n5是2時(shí)，R5是C1-C6烷基，并且兩個(gè)R5可以與它們所連接的氮原子一起形成四價(jià)鹽；R6是H、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基，
或
其中X3是(H，H)、O、NRd或S；或者當(dāng)n3是0-4時(shí)，R6是雜芳基、取代的雜芳基、雜環(huán)烷基、取代的雜環(huán)烷基；當(dāng)Re、Rf與它們所連接的碳原子一起形成羰基并且n3是1時(shí)，R6還可以是-ORa，其中Ra不是H，或者R6是-NRaRb、-O-(CRa，Rb)n7-雜芳基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的雜芳基、-O-(CRa，Rb)n7-雜環(huán)烷基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的雜環(huán)烷基、-O-(CRa，Rb)n7-芳基、-O-(CRa，Rb)n7-取代的芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-雜芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的雜芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的芳基、-NRa-(CRa，Rb)n7-雜環(huán)烷基、-NRa-(CRa，Rb)n7-取代的雜環(huán)烷基，其中Ra和Rb獨(dú)立地選自H和C1-C6烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中m是1；兩個(gè)X均是O；l是0；n是1；u是0和y是1-3并且Ar1是
或
其中Q是N或CH；各X1獨(dú)立地是O、S或NRa；各X2獨(dú)立地是CH或N；和n4是0或1；并且其中Ar2是
3.權(quán)利要求2的化合物，其中Z是
4.權(quán)利要求2的化合物，其中Z是
5.權(quán)利要求2的化合物，其中Z是
6.權(quán)利要求2的化合物，其中Re或Rf是H、C1-C6烷基或烯丙基，n3是0-4，n7是0-4和R6是
或者其中Re和Rf與它們所連接的碳原子一起形成羰基，n3是1和R6是-O-(CRa，Rb)n7-L，其中L是
或者其中Re、Rf與它們所連接的碳原子一起形成羰基，n3是1和R6是-O-(CRa，Rb)n7-L，其中L是
或者其中Re、Rf與它們所連接的碳原子一起形成羰基，n3是1和R6是-O-(CRa，Rb)n7-L，其中L是
7.權(quán)利要求1的下列式II化合物
其中Rc是H；m1是0或1；y是1-3；Ar1和Ar2兩者均是
8.權(quán)利要求4的下式化合物
其中Ar1和Ar2兩者均是
9.權(quán)利要求1的下式化合物
其中Ar1和Ar2兩者均是
10.權(quán)利要求1的化合物，選自下列化合物或其對(duì)映異構(gòu)體或其藥物上可接受的鹽
11.選自下列的化合物或其對(duì)映異構(gòu)體或其藥物上可接受的鹽
12.一種組合物，所述組合物含有神經(jīng)激肽拮抗有效量的權(quán)利要求1的化合物和藥物上可接受的載體。
13.一種誘導(dǎo)神經(jīng)激肽拮抗作用的方法，該方法包括給需要該作用的哺乳動(dòng)物施用神經(jīng)激肽拮抗有效量的權(quán)利要求1的化合物。
14.一種治療下述疾病的方法，所述疾病有慢性氣道疾病如哮喘和過敏；炎癥疾病例如腸炎、牛皮癬、纖維織炎、骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；偏頭痛；中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病例如抑郁癥、精神病、癡呆和早老性癡呆；唐氏綜合征；神經(jīng)??；多發(fā)性硬化；眼疾；結(jié)膜炎；自身免疫性疾病；移植物排異反應(yīng)；全身性紅斑狼瘡；腺體疾病例如節(jié)段性回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎；膀胱功能性疾??；循環(huán)疾病如心絞痛、雷諾??；咳嗽和疼痛，所述方法包括施用治療有效量的權(quán)利要求1化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)化合物,其中Z、R
文檔編號(hào)C07D405/12GK1200120SQ96197720
公開日1998年11月25日 申請(qǐng)日期1996年8月29日 優(yōu)先權(quán)日1995年8月31日
發(fā)明者徐和健, 施能揚(yáng), D·J·布萊辛, 陳驍, J·J·皮文斯基, K·D·麥科爾米克 申請(qǐng)人:先靈公司