專利名稱：咪唑化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一組新的咪唑化合物。它們的制備方法，它們?cè)谥委熂?xì)胞因子介導(dǎo)的疾病中的應(yīng)用，以及用于這種治療的藥物組合物。
背景技術(shù)：
白細(xì)胞介素-1(IL-1)和腫瘤壞死因子(TNF)是由許多種細(xì)胞(例如單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞)產(chǎn)生的生物物質(zhì)。業(yè)已證實(shí)，IL-1介導(dǎo)許多被認(rèn)為在免疫調(diào)節(jié)和其它生理狀況(如炎癥)中起重要作用的生物活性〔例如見(jiàn)，Dinarello等，傳染病評(píng)論(Rev.Infect.Disease)，6，51(1984)〕。IL-1的大量已知的生物活性包括T輔助細(xì)胞的活化，誘導(dǎo)發(fā)熱，激發(fā)前列腺素或膠原酶產(chǎn)生，嗜中性白細(xì)胞趨化性，誘發(fā)急性期蛋白和抑制血漿鐵含量。
在很多疾病中IL-1的產(chǎn)生的過(guò)量或失控與疾病的發(fā)生和/或加重有關(guān)。這包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)類，骨關(guān)節(jié)類，內(nèi)毒素血癥和/或毒性休克綜合癥，其它的急性或慢性炎癥，如被內(nèi)毒素引發(fā)的炎癥反應(yīng)或炎癥性腸??；肝病，動(dòng)脈粥樣硬化，肌肉變性，惡病質(zhì)，牛皮癬性關(guān)節(jié)炎，賴特爾綜合癥，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)，創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎，風(fēng)疹性關(guān)節(jié)炎和急性滑膜炎。近來(lái)的證據(jù)還表明IL-1活性與糖尿病和胰β細(xì)胞有關(guān)。
Dinarello在臨床免疫學(xué)雜志(J.Clinical Immunology)5(5)，287-297(1 985)中評(píng)述了起因于IL-1的生物活性。應(yīng)當(dāng)指出，這些作用中有一些曾被其它人認(rèn)為是IL-1的間接作用。
過(guò)量的或失控的TNF產(chǎn)生與介導(dǎo)或加重許多疾病有關(guān)，包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕性脊椎炎，骨關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎及其它關(guān)節(jié)病；膿毒病，膿毒性休克，內(nèi)毒素性休克，革蘭氏陰性膿毒癥，中毒性休克綜合癥，成人呼吸窘迫綜合癥，腦型瘧，慢性肺部炎癥，硅肺，肺部肉樣瘤病(sarcoisosis)，骨吸收病，再灌注損傷，移植物抗宿主反應(yīng)，同種移植排異，由于感染(如流感)引起的發(fā)燒和肌痛，感染或惡性腫瘤繼發(fā)的惡病質(zhì)，獲得性免疫缺陷綜合癥(艾滋病)繼發(fā)的惡病質(zhì)，艾滋病，ARC(艾滋病相關(guān)復(fù)癥)，瘢痕瘤形成，疤痕組織形成，節(jié)段性回腸炎，潰瘍性結(jié)腸炎或發(fā)熱(pyresis)。
艾滋病起因于T淋巴細(xì)胞受人類免疫缺陷病毒(HIV)感染。已鑒定出至少三類或三個(gè)品系的HIV，即HIV-1、HIV-2和HIV-3。由于HIV感染的結(jié)果，T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫力受到損害，被感染的個(gè)體則顯示出嚴(yán)重的機(jī)會(huì)感染和/或異常的腫瘤。HIV進(jìn)入T淋巴細(xì)胞需要T淋巴細(xì)胞活化。其它病毒如HIV-1、HIV-2，在T細(xì)胞活化后感染T淋巴細(xì)胞，而且這些病毒蛋白的表達(dá)和/或復(fù)制由這些T細(xì)胞活化介導(dǎo)或維持。一旦某個(gè)活化的T淋巴細(xì)胞受到HIV感染，該T淋巴細(xì)胞必須繼續(xù)保持活化狀態(tài)以使HIV基因表達(dá)和/或HIV復(fù)制能夠進(jìn)行。單核因子，特別是TNF，通過(guò)在維持T淋巴細(xì)胞活化中起作用而參與由活化的T細(xì)胞介導(dǎo)的HIV蛋白質(zhì)表達(dá)和/或病毒復(fù)制。因此，干擾HIV感染的個(gè)體內(nèi)的單核因子活性，例如利用抑制單核因子(尤其是TNF)的產(chǎn)生的方法，有助于限制T細(xì)胞活化作用的保持，從而減小HIV對(duì)先前未感染的細(xì)胞的傳染性的發(fā)展，這就會(huì)減慢或者消除由于HIV感染造成的免疫機(jī)能障礙的發(fā)展。單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及有關(guān)的細(xì)胞(如枯氏細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞)也與HIV感染的維持有關(guān)。這些細(xì)胞象T細(xì)胞一樣，是病毒復(fù)制的對(duì)象，而且病毒復(fù)制的水平取決于這些細(xì)胞的活化狀態(tài)〔見(jiàn)Rosenberg等，HIV感染的免疫病理學(xué)，免疫學(xué)進(jìn)展(Advances in Immunology第57卷，1989〕。單核因子(如TNF)己顯示出能活化單核細(xì)胞和/或巨噬細(xì)胞內(nèi)的HIV復(fù)制〔見(jiàn)Poli等，美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院報(bào)(Proc.Natl.Acad.Sci)87782-784(1990)〕，因此，抑制單核因子的產(chǎn)生或活性會(huì)象上面對(duì)T細(xì)胞所述的那樣有助于限制HIV的發(fā)展。
由于類似的原因，TNF還在其它病毒如巨噬細(xì)胞病毒(CMV)、流感病毒和皰疹病毒的感染中起著各式各樣的作用。
白細(xì)胞介素-8(IL-8)是最早在1987年鑒定和表征的一種趨化因子。IL-8是由幾類細(xì)胞產(chǎn)生的，包括單核細(xì)胞、成纖維因子、內(nèi)皮細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞。由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生IL-8是受IL-1、TNF或脂多糖(LPS)誘發(fā)的。人的IL-8已顯示出對(duì)鼠、豚鼠、大鼠和兔的嗜中性細(xì)胞起作用。IL-8有很多不同的名稱，例如嗜中性白細(xì)胞引誘劑/活化蛋白質(zhì)-1(NAP-1)、單核細(xì)胞衍生的嗜中性趨化因子(MDNCF)、嗜中性白細(xì)胞活化因子(NAF)和T細(xì)胞淋巴細(xì)胞趨化因子。
IL-8在體外試驗(yàn)中激發(fā)許多功能。它已顯示對(duì)嗜中性白細(xì)胞、T-淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞有化學(xué)引誘物的性質(zhì)。此外，它對(duì)于正常個(gè)體和特應(yīng)性個(gè)體都會(huì)誘發(fā)組胺自嗜堿性粒細(xì)胞中的釋放，以及自嗜中性白細(xì)胞中的溶酶體酶的釋放和呼吸爆發(fā)作用。IL-8還顯示出增大Mac-1(CD11b/CD18)在嗜中性白細(xì)胞上的表面表達(dá)，而沒(méi)有從頭合成蛋白質(zhì)，這可能對(duì)于提高嗜中性白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附有作用。很多疾病是以嗜中性白細(xì)胞的大量滲入為特征。與IL-8的形成增多(這是造成嗜中性白細(xì)胞進(jìn)入發(fā)炎部位的趨化性的原因)有關(guān)的病癥會(huì)得益于能抑制IL-8產(chǎn)生的化合物。
IL-1和TNF影響許多種細(xì)胞和組織，這些細(xì)胞因子以及其它的白細(xì)胞衍生細(xì)胞因子是許多疾病和病癥的重要和關(guān)鍵的炎癥介質(zhì)。抑制這些細(xì)胞因子對(duì)于控制、減輕和緩解很多種上述疾病都有好處。
在這一領(lǐng)域，為用于治療仍然需要作為抑制細(xì)胞因子的消炎藥物的化合物，即，能夠抑制諸如IL-1、IL-6、IL-8和TNF等細(xì)胞因子的化合物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及新的式(1)化合物及含有式(1)化合物和可藥用稀釋劑或載體的藥物組合物。
本發(fā)明還涉及在哺乳動(dòng)物中抑制細(xì)胞因子和治療由細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(1)化合物。
具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及在需要治療的哺乳動(dòng)物中治療由CSBP/RK/p38激酶介導(dǎo)的疾病的方法。
本發(fā)明更具體地涉及在哺乳動(dòng)物中抑制IL-1產(chǎn)生的方法，該方法包括給需要這種抑制的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(1)化合物。
本發(fā)明更具體地涉及在哺乳動(dòng)物中抑制IL-8產(chǎn)生的方法，該方法包括給需要這種抑制的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(1)化合物。
本發(fā)明更具體地涉及在哺乳動(dòng)物中抑制TNF產(chǎn)生的方法，該方法包括給需要這種抑制的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(1)化合物。
因此，本發(fā)明提供了式(1)化合物或其可藥用鹽
其中R1是4-吡啶基，嘧啶基，喹啉基，異喹啉基，喹唑啉-4-基，1-咪唑基或1-苯并咪唑基，其雜芳環(huán)被NHRa取代并可任選地被另外獨(dú)立的下述取代基取代C1-4烷基、鹵素、羥基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷基亞磺?；H2OR12、氨基、單或雙C1-6烷基取代的氨基、N(R10)C(O)Rb或NHRa；Ra是苯基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-6烷基，雜芳基，雜芳基C1-6烷基，這些基團(tuán)均可被任選取代；Rb是氫，C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-4烷基；R4是苯基、萘-1-基或萘-2-基，或是雜芳基，它們可任選地被一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選擇的取代基取代，對(duì)于4-苯基、4-萘-1-基、5-萘-2-基或6-萘-2-基，其取代基選自鹵素、氰基、硝基、-C(Z)NR7R17、-C(Z)OR16、-(CR10R20)vCOR12、-SR5、-SOR5、-OR12、鹵素取代的C1-4烷基，C1-4烷基、-ZC(Z)R12、-NR10C(Z)R16或-(CR10R20)vNR10R20，對(duì)于其它取代位，所述取代基選自鹵素、氰基、-C(Z)NR13R14、-C(Z)OR3、-(CR10R20)m″COR3、-S(O)mR3、-OR3、鹵素取代的C1-4烷基、-C1-4烷基、-(CR10R20)m″NR10C(Z)R3、-NR10S(O)m′R8、-NR10S(O)m′NR7R17、-ZC(Z)R3或-(CR10R20)m″NR13R14；v是0或整數(shù)1或2；m是0或整數(shù)1或2；m′是整數(shù)1或2；m″是0或整數(shù)1-5；R2是-(CR10R20)n′OR9，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基-C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基-C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14，(CR10R20)nNO2，(CR10R20)nCN，(CR10R20)n′SO2R18，(CR10R20)nS(O)m′NR13R14，(CR10R20)nC(Z)R11，(CR10R20)nOC(Z)R11，(CR10R20)nC(Z)OR11，(CR10R20)nC(Z)NR13R14，(CR10R20)nC(Z)NR11OR9，(CR10R20)nNR10C(Z)R11，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)R11，(CR10R20)nC(＝NOR6)R11，(CR10R20)nNR10C(＝NR19)NR13R14，(CR10R20)nOC(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)OR10，5-(R18)-1，2，4-噁二唑-3-基或4-(R12)-5-(R18R19)-4，5-二氫-1，2，4-噁二唑-3-基，其中芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)烷基可以被任選取代；n是1-10的整數(shù)；n′是0，或是1-10的整數(shù)；Z是氧或硫；R3是雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基或R8；R5是氫、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基或NR7R17，但-SR5部分是-SNR7R17以及-SOR5是-SOH不包括在內(nèi)；R6是氫，可藥用的陽(yáng)離子，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基。芳酰基或C1-10烷?；?；R7和R17各自獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基，或者R7和R17與它們所連接的氮一起形成一個(gè)5-7元的雜環(huán)，該雜環(huán)可任選地含有另外選自氧、硫或NR15的雜原子；R8是C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C5-7環(huán)烯基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14；其中芳基，芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基可被任選取代；R9是氫，-C(Z)R11或任選取代的C1-10烷基，S(O)2R18，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20各自獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；R11是氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基；
R12是氫或R16；R13和R14各自獨(dú)立地選自氫或任選取代的C1-4烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者與它們所連接的氮一起形成一個(gè)5-7元雜環(huán)，該雜環(huán)可任選地含有另外選自氧、硫或NR9的雜原子；R1 5是R10或C(Z)-C1-4烷基；R16是C1-4烷基，鹵素取代的C1-4烷基或C3-7環(huán)烷基；R18是C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，芳基，芳基-C1-10烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基-C1-10烷基，雜芳基或雜芳基-C1-10烷基；R19是氫，氰基，C1-4烷基，C3-7環(huán)烷基或芳基。發(fā)明詳述在式(1)中，合適的R1部分包括4-吡啶基、4-嘧啶基、4-喹啉基、6-異喹啉基、4-喹唑啉基、1-咪唑基和1-苯并咪唑基，其中優(yōu)選4-吡啶基、4-嘧啶基和4-喹啉基。更優(yōu)選的是4-嘧啶基或4-吡啶基，最優(yōu)選的是4-嘧啶基環(huán)。R1部分被NHRa取代，其中Ra是芳基、芳基C1-6烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-6烷基、雜芳基或雜芳基C1-6烷基；這些基團(tuán)均可被任選取代。
當(dāng)Ra是芳基時(shí)，優(yōu)選苯基或萘基。當(dāng)Ra是芳基烷基時(shí)，優(yōu)選芐基或萘甲基。當(dāng)Ra是雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基時(shí)，其中的雜環(huán)優(yōu)選是吡咯烷基(pyrrolindinyl)、哌啶基、嗎啉基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、四氫噻喃亞磺?；?、四氫噻喃磺酰基吡咯烷基或胡椒基，更優(yōu)選哌啶基。
當(dāng)Ra是雜芳基或雜芳基烷基時(shí)，雜芳基優(yōu)選為咪唑、吲哚、吡咯、吡唑、呋喃、噻吩、喹啉、異喹啉、喹唑啉基、吡啶、嘧啶、噁唑、噻唑、噻二唑、三唑或苯并咪唑，更優(yōu)選咪唑或吲哚。
如上所述，芳基，雜環(huán)基和雜芳基環(huán)可以任選地被以下基團(tuán)獨(dú)立地取代一次或多次，優(yōu)選1-3次鹵素；C1-4烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基或叔丁基；鹵素取代的烷基，如CF3；羥基；羥基取代的C1-4烷基；C1-4烷氧基，如甲氧基或乙氧基；S(O)m烷基和S(O)m芳基(其中m是0、1或2)；C(O)OR11，如C(O)C1-4烷基或C(O)OH部分；C(O)R11；OC(O)R18，其中R18部分可以如下所述地被任選取代；O-(CH2)s-O-，例如在縮酮或二氧代亞烷基橋基的情形；s為1-3的整數(shù)；氨基；單和雙C1-6烷基取代的氨基；N(R10)C(O)Rb；N-雜環(huán)基環(huán)，該環(huán)為5-7元環(huán)并可任選含有選自氧、硫或NR15的另外雜原子；任選取代的芳基，如苯基；或是任選取代的芳基C1-4烷基，如芐基或苯乙基。
式(1)化合物中的Rb宜為氫，C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-4烷基。
合適的Ra基團(tuán)包括芐基、鹵代芐基、萘甲基、苯基、鹵代苯基、嗎啉代丙基、咪唑丙基、乙基-1-哌啶羧酸酯、胡椒基、哌啶-4-基、烷基取代的哌啶基如1-甲基哌啶基或2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基、氯代色胺基、四氫噻喃基、乙基-N-C(O)O-叔丁基、丙基乙氧基、2-氨乙基、丙基咪唑基。
應(yīng)當(dāng)理解，R1基團(tuán)可以另外被以下基團(tuán)取代C1-4烷基，鹵素，OH，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，C1-4烷基亞磺?；?，CH2OR12，氨基，單或雙C1-6烷基取代的氨基，N(R10)C(O)Rb，NHRa或N-雜環(huán)基，該雜環(huán)是一個(gè)5-7元環(huán)，并可任選地含有另外選自氧、硫或NR15的雜原子。這同樣適合于另外的取代基不是二烷基取代的氨基的情形。
當(dāng)另外的R1任選取代基是N(R10)C(O)Rb時(shí)，Rb優(yōu)選是C1-6烷基，優(yōu)選R10是氫。還應(yīng)認(rèn)識(shí)到，該Rb部分，特別是C1-6烷基部分可被任選取代，優(yōu)選被取代1-3次，最好是被鹵素(如氟)取代，例如在三氟甲基或三氟乙基的情形。
NHRa，在R1取代基上的優(yōu)選環(huán)部位，在4-吡啶基衍生物時(shí)是2-位，如2-(4-哌啶基氨基)-4-吡啶基。在4-嘧啶基環(huán)上的優(yōu)選環(huán)部位也是在2-位，如2-芐基-4-哌啶基氨基)嘧啶-4-基，2-〔3-(嗎啉代)丙基〕氨基嘧啶-4-基或2-(3-溴苯基)氨基嘧啶-4-基。
R4宜為苯基，萘-1-基或萘-2-基，或?yàn)殡s環(huán)基，它可任選地被一或二個(gè)取代基取代。更優(yōu)選的是R4為苯基或萘基環(huán)。當(dāng)R4是4-苯基、4-萘-1-基、5-萘-2-基或6-萘-2-基時(shí)，其合適的取代基是彼此獨(dú)立地選自鹵素、-SR5、-SOR5、-OR12、CF3或(CR10R20)vNR10R20的一個(gè)或二個(gè)取代基，而對(duì)于這些環(huán)上的其它取代位的情形，優(yōu)選的取代基是鹵素、-S(O)mR3、-OR3、CF3、-(CR10R20)m″NR13R14、NR10C(Z)R3和NR10S(O)m′R8。對(duì)于苯基和萘-1-基中的4位和萘-2-基中的5-位，優(yōu)選的取代基包括鹵素(尤其是氟和氯)和-SR5及-SOR5，其中R5優(yōu)選為C1-2烷基，更優(yōu)選為甲基；其中更優(yōu)選的是氟和氯，最優(yōu)選的是氟。對(duì)于苯基和萘-1-基環(huán)的3位，優(yōu)選的取代基包括鹵素，尤其是氟和氯；-OR3，尤其是C1-4烷氧基；CF3，NR10R20，例如氨基；NR10C(Z)R3，尤其是-NHCO(C1-10烷基)；NR10S(O)m′R8，尤其是NHSO2(C1-10烷基)；以及-SR3和-SOR3，其中R3優(yōu)選為C1-2烷基，更優(yōu)選甲基。當(dāng)苯基環(huán)被雙取代時(shí)，優(yōu)選是兩個(gè)獨(dú)立的鹵素，例如氟和氯，優(yōu)選為二-氯，更優(yōu)選位于3，4-位。對(duì)于3-位的OR3和-ZC(Z)R3部分，還優(yōu)選R3也可以包括氫。
R4部分優(yōu)選是未取代的或取代的苯基部分。更優(yōu)選R4為苯基或在4-位上被氟和/或在3位上被氟、氯、C1-4烷氧基、甲磺酰氨基或乙酰氨基取代的苯基，或者R4是在3，4-位上獨(dú)立地被氯或氟(更優(yōu)選氯)雙取代的苯基。最優(yōu)選R4為4-氟苯基。
在式(1)中，Z為氧或硫，優(yōu)選氧。
R2宜為-(CR10R20)n′OR9，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基， C3-7環(huán)烷基-C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14，(CR10R20)nNO2，(CR10R20)nCN，(CR10R20)n′SO2R18，(CR10R20)nS(O)m′NR13R14，(CR10R20)nC(Z)R11，(CR10R20)nOC(Z)R11，(CR10R20)nC(Z)OR11，(CR10R20)nC(Z)NR13R14，(CR10R20)nC(Z)NR11OR9，(CR10R20)nNR10C(Z)R11，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)R11，(CR10R20)nC(＝NOR6)R11，(CR10R20)nNR10C(＝NR19)NR13R14，(CR10R20)nOC(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)OR10，5-(R18)-1，2，4-噁二唑-3-基或4-(R12)-5-(R18R19)-4，5-二氫-1，2，4-噁二唑-3-基；其中環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基部分可以被任選取代；其中n是1-10的整數(shù)，m是0或整數(shù)1或2；n′是0，或是1-10的整數(shù)；m′是整數(shù)1或2。優(yōu)選n是1-4。
當(dāng)R2是任選取代的雜環(huán)基時(shí)，該環(huán)優(yōu)選為嗎啉代、吡咯烷基或哌啶基。當(dāng)該環(huán)被任選取代時(shí)，取代基可以與游離氮原子直接相連，例如哌啶基或吡咯環(huán)中的氮原子，或者就直接連在環(huán)本身上。優(yōu)選環(huán)為哌啶或吡咯，更優(yōu)選哌啶。雜環(huán)可以任選地被下述基團(tuán)獨(dú)立地取代1到4次鹵素；C1-4烷基；芳基，如苯基；芳基烷基，如芐基，其中芳基或芳烷基部分本身可被任選取代(如下面的定義部分)；C(O)OR11，例如C(O)C1-4烷基或C(O)OH部分；C(O)H；C(O)C1-4烷基，羥基取代的C1-4烷基，C1-4烷氧基，S(O)mC1-4烷基(其中m是0、1或2)，NR10R20(其中R10和R20獨(dú)立地是氫或C1-4烷基)。
如果環(huán)是哌啶，則該環(huán)最好是在4位上與咪唑連接，而取代基則直接連接到可利用的氮上，即1-甲酰基-4-哌啶、1-芐基-4-哌啶、1-甲基-4-哌啶、1-乙氧羰基-4-哌啶。如果環(huán)是被烷基取代且環(huán)在4位上連接，則最好是在2-或6-位上取代或兩個(gè)位置上都取代，例如2，2，6，6-四甲基-4-哌啶。類似地，如果環(huán)是吡咯，則環(huán)在3-位上連接咪唑，而且取代基全部直接與可利用的氮原子連接。
當(dāng)R2是任選取代的雜環(huán)基C1-10烷基時(shí)，該環(huán)優(yōu)選是嗎啉代，吡咯烷基或哌啶基。烷基部分優(yōu)選含1-4個(gè)碳原子，更優(yōu)選C3或C4，最好是C3，例如丙基。優(yōu)選的雜環(huán)基烷基包括但不限于嗎啉代乙基、嗎啉代丙基、吡咯烷基丙基和哌啶基丙基。這里的雜環(huán)基也可按著上面對(duì)于直接與雜環(huán)基連接時(shí)所述的類似方式被任選取代。
當(dāng)R2是任選取代的C3-7環(huán)烷基或任選取代的C3-7環(huán)烷基C1-10烷基時(shí)，環(huán)烷基優(yōu)選是C4或C6環(huán)，最好是可任選取代的C6環(huán)。該環(huán)烷基環(huán)可任選地被以下基團(tuán)獨(dú)立地取代1-3次鹵素，如氟、氯、溴或碘；羥基；C1-10烷氧基，如甲氧基或乙氧基；S(O)m烷基，其中m是0、1或2，如甲硫基，甲基亞磺?；蚣谆酋；?；S(O)m芳基；氰基，硝基，氨基，單或雙取代的氨基，如NR7R17基團(tuán)，其中R7和R17的定義同式(I)；N(R10)C(O)R18，優(yōu)選N(R10)C(O)X1(其中R10的定義同式(I)，X1是C1-4烷基，芳基或芳基C1-4烷基)；N(R10)C(O)芳基，C1-10烷基，如甲基、乙基、丙基。異丙基或叔丁基；任選取代的烷基，其中取代基是鹵素(如CF3)、羥基、硝基、氰基、氨基、單或雙C1-4烷基取代的氨基；S(O)m烷基和S(O)m芳基，其中m是0、1或2；任選取代的亞烷基，如亞乙基或亞丙基；任選取代的炔烴，如乙炔；C(O)OR11(其中R11的定義同式(I)；例如游離酸或甲酯衍生物；基團(tuán)Rc；-C(O)H；＝O；＝N-OR11；-N(H)-OH(或其在氮上或肟部分上的取代烷基或芳基衍生物)；-N(ORd)-C(O)-R6′；任選取代的芳基，如苯基；任選取代的芳基C1-4烷基，如芐基或苯乙基；任選取代的雜環(huán)或雜環(huán)基C1-4烷基，而且這些芳基、芳烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基部分可以任選地被以下基團(tuán)獨(dú)立地取代一或二次鹵素，羥基，C1-10烷氧基，S(O)m烷基，氰基，硝基，氨基，單或雙C1-4烷基取代的氨基，烷基或鹵代烷基。
基團(tuán)Rc宜為具式-O-(CH2)s-O-的1，3-二氧基亞烷基，其中s是1-3，優(yōu)選s是2，形成一個(gè)1，3-二氧基亞乙基部分，或是縮酮官能團(tuán)。
Rd宜為氫，可藥用的陽(yáng)離子，芳?；駽1-10烷?；?。
R6′宜為NR19′R20′，C1-6烷基；鹵代C1-6烷基；羥基取代的C1-6烷基；C2-6鏈烯基；任選被鹵素、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、羥基或C1-6烷氧基取代的芳基或雜芳基。
R19′宜為H或C1-6烷基。
R20′宜為H，C1-6烷基，芳基，芐基，雜芳基，被鹵素或羥基取代的烷基；或是被下述一些基團(tuán)取代的苯基鹵素，氰基，C1-12烷基，C1-6烷氧基，鹵代C1-6烷基，烷硫基，烷磺?；蛲榛鶃喕酋；?；或者R19′和R20′可以與它們所連接的氮原子一起形成一個(gè)5-7元環(huán)，環(huán)中的原子可以任選地被選自氧、硫或氮的雜原子置換。該環(huán)可以是飽和的或含有一個(gè)以上的不飽和鍵。優(yōu)選R6′是NR19′R20′，而R19′和R20′優(yōu)選是氫。
當(dāng)R2環(huán)烷基部分被NR7R17基團(tuán)或NR7R17C1-10烷基取代，且R7和R17的定義與式(I)中相同時(shí)，取代基優(yōu)選為氨基、氨基烷基或任選取代的吡咯烷基。
環(huán)烷基部分上的一個(gè)優(yōu)選的環(huán)鍵接部位是4位，例如在C6環(huán)的情形。當(dāng)環(huán)烷基環(huán)是被雙取代時(shí)，它優(yōu)選在4位上被雙取代，例如下式所示
其中R1′和R2′各自獨(dú)立地是上面對(duì)于作為可任選取代的環(huán)烷基的R2所指出的任選取代基。最好是，R1′和R2′是氫，羥基，烷基，取代的烷基，任選取代的炔烴、芳基、芳烷基、NR7R17和N(R10)C(O)R18。烷基宜為C1-4烷基，例如甲基、乙基或異丙基；NR7R17和NR7R17烷基，例如氨基、甲氨基、氨基甲基、氨基乙基；取代的烷基，如氰基甲基、氰基乙基、硝基乙基、吡咯烷基；芳基，如苯基；芳烷基，如芐基；任選取代的炔烴，如乙炔或丙炔基；或者R1′與R2′一起表示酮官能基。
當(dāng)R2是(CR10R20)nNR13R14時(shí)，其中的R13和R14各自獨(dú)立地選自氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基，或者R13和R14與它們所連接的氮一起形成5-7元的雜環(huán)，該環(huán)可任選地含有另外選自氧、硫或NR9的雜原子。應(yīng)能理解在某些情形這可以形成與上述的雜環(huán)C1-10烷基部分一樣的基團(tuán)，它也是合適的R2可變基團(tuán)。最好是R13和R14各自獨(dú)立地選自氫、C1-4烷基(優(yōu)選甲基)，或芐基。術(shù)語(yǔ)n優(yōu)選為1-4，更優(yōu)選3或4，最好是3，例如在丙基的情形。優(yōu)選的基團(tuán)包括但不限于氨丙基，(N-甲基-N-芐基)氨丙基，(N-苯基甲基)氨基-1-丙基，或二乙氨基丙基。
當(dāng)R2是(CR10R20)nC(Z)OR11基團(tuán)時(shí)，R11宜為氫、C1-4烷基，尤其是甲基。n優(yōu)選1-4，更優(yōu)選2或3，例如在乙基或丙基的情形。優(yōu)選的基團(tuán)包括但不限于羧甲基-1-丁基，羧基-1-丙基，或2-乙酰氧基乙基。
當(dāng)R2是(CR10R20)nS(O)mR18基團(tuán)時(shí)，m是0、1或2，R18優(yōu)選為芳基，尤其是苯基，或?yàn)镃1-10烷基，尤其是甲基。n優(yōu)選為1-4，更優(yōu)選2或3，例如在乙基或丙基中的n。
當(dāng)R2是(CR10R20)nOR11基團(tuán)時(shí)，R11宜為氫，芳基(尤其是苯基)或C1-10烷基(尤其是甲基或乙基)。n優(yōu)選為1-4，更優(yōu)選2或3，例如在乙基或丙基的情形。
當(dāng)R2是(CR10R20)nNHS(O)2R18基團(tuán)時(shí)，R18宜為烷基，尤其是甲基。n優(yōu)選1-4，更優(yōu)選2或3，例如在乙基或丙基的情形。
當(dāng)R2是可任選取代的芳基時(shí)，該芳基優(yōu)選是苯基。該芳基環(huán)可以任選地被取代一次或多次，最好是有一或二個(gè)取代基，這些取代基獨(dú)立地選自C1-4烷基，鹵素，尤其是氟或氯；(CR10R20)tOR11，-(CR10R20)tNR10R20，尤其是氨基-或者單一或二烷基氨基-(CR10R20)tS(O)mR18，其中m是0、1或2；SH-，(CR10R20)nNR13R14，NR10C(Z)R3(例如-NHCO(C1-10烷基))；-NR10S(O)mR8(例如-NHSO2C1-10烷基)；t為0，或是1-4的整數(shù)。苯基最好是在3或4位上被-(CR10R20)tS(O)mR18取代，R18優(yōu)選為C1-10烷基，尤其是甲基。
當(dāng)R2是任選取代的雜芳基或雜芳基烷基時(shí)，環(huán)可以任選地有一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選一或二個(gè)取代基，這些取代基獨(dú)立地選自一次或多次以下基團(tuán)C1-4烷基；鹵素，尤其是氟或氯；(CR10R20)tOR11，-(CR10R20)tNR10R20，尤其是氨基-或者單或二烷氨基，-(CR10R20)tS(O)mR18，其中m是0、1或2；-SH-，-(CR10R20)nNR13R14，-NR10C(Z)R3(如-NHCO(C1-10烷基))；-NR10S(O)mR8(如NHSO2(C1-10烷基))；t是0或1-4的整數(shù)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員容易認(rèn)識(shí)到，當(dāng)R2是(CR10R20)nOC(Z)R11或(CR10R20)nOC(Z)NR13R14部分，或是任何類似的取代基時(shí)，n優(yōu)選至少為2，這有利于穩(wěn)定化合物的合成。
優(yōu)選R2是一個(gè)任選取代的雜環(huán)基，任選取代的雜環(huán)基C1-10烷基，任選取代的C1-10烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，(CR10R20)nC(Z)OR11基團(tuán)，(CR10R20)nNR13R14，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nS(O)mR18，任選取代的芳基；任選取代的芳基C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nC(Z)R11或(CR10R20)nC(＝NOR6)R11基團(tuán)。
更優(yōu)選R2是任選取代的雜環(huán)基，任選取代的雜環(huán)基C1-10烷基，任選取代的芳基，任選取代的C3-7環(huán)烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，(CR10R20)nNR13R14或(CR10R20)nC(Z)OR11基團(tuán)。
最優(yōu)選R2是任選取代的雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-4烷基，環(huán)烷基或環(huán)烷基烷基。
更為優(yōu)選的是，當(dāng)R2是任選取代的環(huán)烷基或環(huán)烷基烷基時(shí)，它是C4或C6環(huán)烷基，環(huán)丙基甲基，或是被甲基、苯基、芐基、氨基、乙酰氨基、氨基甲基、氨基乙基、氰甲基、氰乙基、羥基、硝基乙基、吡咯烷基、乙炔基、1-丙炔基、＝O、O-(CH2)2O-、＝NOR11(其中R11是氫、烷基或芳基)、NHOH或N(OH)-C(O)-NH2取代的環(huán)己基；或者當(dāng)R2是雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基時(shí)，它是嗎啉基丁基，嗎啉基丙基，嗎啉基乙基，哌啶基，N-芐基-4-哌啶基，N-甲基-4-哌啶基，2，2，6，6-四甲基哌啶基，取代的哌啶，如1-甲酰基-4-哌啶或1-乙氧基羰基-4-哌啶。
在本文中有鏈烯基或炔基部分作為取代基的所有情形下，不飽和鍵(即1，2-亞乙烯鍵或乙炔鍵)最好不與氮、氧或硫原子直接相連，例如在OR3或某些R2中的情形。
這里所用的“任選取代的”一詞，除非專門說(shuō)明，應(yīng)指下述基團(tuán)，如鹵素，例如氟、氯、溴或碘；羥基；羥基取代的C1-10烷基；C1-10烷氧基，如甲氧基或乙氧基；S(O)m-烷基，其中m是0、1或2，如甲硫基，甲基亞磺?；蚣谆酋；?；氨基，單和雙取代的氨基，如NR7R17基團(tuán)，或者R7R17可以與它們所連接的氮一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選地含有另外選自O(shè)、N、S的雜原子；C1-10烷基，環(huán)烷基或環(huán)烷基烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基等，或環(huán)丙基甲基；鹵代C1-C10烷基，如CF3；任選取代的芳基，例如苯基，或任選取代的芳基烷基，例如芐基或苯乙基，其中這些芳基部分還可以被下述取代基取代一或兩次鹵素，羥基，羥基取代的烷基，C1-10烷氧基，S(O)m烷基，氨基，單和雙取代的氨基(例如NR7R17基團(tuán))，烷基或CF3。
合適的可藥用鹽是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，包括無(wú)機(jī)和有機(jī)酸的堿性鹽，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、乙酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、乳酸、草酸、丁二酸、富馬酸、馬來(lái)酸、苯甲酸、水楊酸、苯乙酸和扁桃酸的堿性鹽。此外，式(I)化合物的可藥用鹽也可以用可藥用的陽(yáng)離子形成，例如在取代基中含有羧基部分的情形。合適的可藥用的陽(yáng)離子是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，包括堿、堿土、銨及季銨陽(yáng)離子。
本文中所用的以下術(shù)語(yǔ)是指“鹵”或“鹵素”包括以下鹵素氯、氟、溴和碘。
“C1-10烷基”或“烷基”，除非對(duì)鏈長(zhǎng)度另加限制，是指1-10個(gè)碳原子的直鏈和支鏈基團(tuán)，包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、正戊基等。
本文所用的“環(huán)烷基”一詞，是指環(huán)狀的基團(tuán)，優(yōu)選有3-8個(gè)碳原子，包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。
本文所用的“環(huán)烯基”一詞，是指至少有一個(gè)不飽和雙鍵的環(huán)狀基團(tuán)，優(yōu)選有5-8個(gè)碳原子，包括但不限于環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基等。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”，除非對(duì)鏈長(zhǎng)度加以限制，均指2-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈基團(tuán)，包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等。
“芳基”是指苯基和萘基；“雜芳基”(本身或在任何組合形式中，如“雜芳氧基”或“雜芳基烷基”)是指5-10元的芳香環(huán)體系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O或S的雜原子，例如(但不限于)吡咯、吡唑、呋喃、噻吩、喹啉、異喹啉、喹唑啉、吡啶、嘧啶、噁唑、噻唑、噻二唑、三唑、咪唑或苯并咪唑。
“雜環(huán)”(本身或在任何組合形式中，例如“雜環(huán)基烷基”)，是指飽和或部分不飽和的4-10元環(huán)系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)中含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O或S的雜原子；例如(但不限于)吡咯烷、哌啶、哌嗪、嗎啉、四氫呋喃或咪唑烷。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“芳烷基”或“雜芳烷基”或“雜環(huán)烷基”，除非另外說(shuō)明，是指連接到也是本文定義(除非另有說(shuō)明)的芳基、雜芳基或雜環(huán)部分上的如上所定義的C1-4烷基。
“亞磺?；?相應(yīng)的硫化物的氧化物S(O)，術(shù)語(yǔ)“硫代”指硫化物，術(shù)語(yǔ)“磺?；敝竿耆趸腟(O)2部分。
“芳?；?C(O)Ar，其中Ar是苯基，萘基，或芳基烷基衍生物，例如上面定義的基團(tuán)，這些基團(tuán)包括但不限于芐基和苯乙基。
“烷?；?C(O)C1-10烷基，其中烷基的定義同上。
就本發(fā)明而言，R1或R2為“核心”4-嘧啶基部分是指化學(xué)式如下的基團(tuán)。
本發(fā)明化合物可以含一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子并可以外消旋和旋光形式存在。所有這些化合物均屬于本發(fā)明的范圍。
式(I)的示例化合物包括5-〔(2-芐氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-〔2-(4-四氫噻喃基)氨基嘧啶-4-基〕咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔(2-羥基)乙氨基〕嘧啶-4-基-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(3-氯芐基氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(1-萘基甲氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(1-芐基-4-哌啶基氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-〔2-〔3-(嗎啉代)丙基]氨基嘧啶-4-基〕咪唑5-〔2-[(3-溴苯基)氨基〕嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-胡椒基氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(4-哌啶基氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(5-氯色胺基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)氨基嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-〔(1-乙氧羰基)哌啶-4-基〕氨基嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔2-(苯氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(4-氧代環(huán)己基)咪唑，5-{4-(2-苯氨基)嘧啶-4-基}-4-(4-氟苯基)-1-(4-羥基環(huán)己基)咪唑，4-{氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕咪唑，4-(氟苯基)-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔2-〔3-〔咪唑-1-基〕丙基〕氨基嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔2-〔3-〔咪唑-1-基)丙基〕氨基嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑，1-(4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(2-苯胺基-4-吡啶基)咪唑。
本發(fā)明的另-方面是新的式(A)化合物和含有式(A)化合物及可藥用烯釋劑或載體的藥物組合物。
本發(fā)明還涉及一種在哺乳動(dòng)物中抑制細(xì)胞因子及治療細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病、特別是治療CSBP/RK/p38激酶介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的式A化合物。
本發(fā)明更具體地涉及一種在哺乳動(dòng)物中抑制IL-1、IL-6、IL-8、或TNF產(chǎn)生的方法，該方法包括給需要這種抑制的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(A)化合物。
用以下結(jié)構(gòu)式表示的式(II)化合物或其可藥用的鹽
其中R1是4-吡啶基，嘧啶基，喹啉基，異喹啉基，喹唑啉-4-基，1-咪唑基或1-苯并咪唑基，該雜芳環(huán)被NHRa取代，并可任選地被另外獨(dú)立的取代基取代，這些取代基選自C1-4烷基，鹵素，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，C1-4烷基亞磺?；?，CH2OR12，氨基，單和雙C1-6烷基取代的氨基，N(R10)C(O)Rb或NHRa；Ra是被以下基團(tuán)獨(dú)立地取代一或多次的C1-6烷基、鹵素；羥基；C1-10；S(O)m烷基，其中m是0、1或2；氨基，單或雙-C1-4烷基取代的氨基；C3-7環(huán)烷基；C3-7環(huán)烷基氧基；或是化學(xué)式為A1-B1-D1的基團(tuán)，其中A1是CR10R20、氧、硫或NR10R20，B1是C(O)或S(O)2，D1是E1或E2，其中E1是C1-10烷基、芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基、雜芳基C2-6鏈烯基、雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-6烷基，E2是O-E1或N-E1；Rb是氫，C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-4烷基；R4是苯基，萘-1-基或萘-2-基，或是雜芳基，它可以任選地被一或二個(gè)取代基取代，這些基團(tuán)各自獨(dú)立地選擇，而且對(duì)于4-苯基、4-萘-1-基、5-萘-2-基或6-萘-2-基取代基，它們是鹵素、氰基、硝基、-C(Z)NR7R17、-C(Z)OR16、-(CR10R20)vCOR12、-SR5、-SOR5、-OR12、鹵素取代的C1-4烷基，C1-4烷基、-ZC(Z)R12、-NR10C(Z)R16或-(CR10R20)vNR10R20，對(duì)于其它的取代位置，它們是鹵素、氰基、-C(Z)NR13R14、-C(Z)-OR3、-(CR10R20)m″COR3、-S(O)mR3、-OR3、鹵素取代的C1-4烷基、-C1-4烷基、-(CR10R20)m″NR10C(Z)R3、-NR10S(O)m′R8、-NR10S(O)m′NR7R17、-ZC(Z)R3或-(CR10R20)m″NR13R14；v是0，或是整數(shù)1或2；m是0，或是整數(shù)1或2；m′是整數(shù)1或2；m″是0，或整數(shù)1-5；R2是-(CR10R20)n′OR9，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基，C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14，(CR10R20)nNO2，(CR10R20)nCN，(CR10R20)n′SO2R18，(CR10R20)nS(O)m′NR13R14，(CR10R20)nC(Z)R11，(CR10R20)nOC(Z)R11，(CR10R20)nC(Z)OR11，(CR10R20)nC(Z)NR13R14，(CR10R20)nC(Z)NR11OR9，(CR10R20)nNR10C(Z)R11，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)R11，(CR10R20)nC(＝NOR6)R11，(CR10R20)nNR10C(＝NR19)NR13R14，(CR10R20)nOC(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)OR10，5-(R18)-1，2，4-噁二唑-3-基或4-(R12)-5-(R18R19)-4，5-二氫-1，2，4-噁二唑-3-基；其中芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基可被任選取代；n是1-10的整數(shù)；n′是0，或是整數(shù)1-10；Z是氧或硫；R3是雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基或R8；R5是氫、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基或NR7R17，但不包括-SR5是SNR7R17和-SOR5是-SOH；R6是氫，一種可藥用的陽(yáng)離子，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基，芳酰基或C1-10烷?；籖7和R17各自獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基，或者R7與R17和它們所連接的氮一起形成一個(gè)5-7元雜環(huán)，該環(huán)任選地含有選自另外氧、硫或NR15的雜原子；R8是C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C5-7環(huán)烯基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)mNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14；其中芳基，芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基可被任選取代；R9是氫，-C(Z)R11或任選取代的C1-10烷基，S(O)2R18，任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基；R10和R20各自獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；R11是氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基；R12是氫或R16；R13和R14各自獨(dú)立地選自氫或任選取代的C1-4烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者R13和R4與它們所連接的氮一起形成一個(gè)5-7元雜環(huán)，該雜環(huán)任選地含有另外選自氧、硫或NR9的雜原子；R15是R10或C(Z)-C1-4烷基；R16是C1-4烷基，鹵素取代的C1-4烷基，或C3-7環(huán)烷基；R18是C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，芳基，芳基-C1-10烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基-C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基；R19是氫，氰基，C1-4烷基，C3-7環(huán)烷基或芳基。
對(duì)于式(A)化合物，R1至R20、Rb、v、m、m′、m″、n、n′、Z和除Ra之外的所有其它可變基團(tuán)均與上面式(1)中的定義相同。
在式(A)化合物中，Ra部分最好是一個(gè)取代的烷基，該烷基被以下基團(tuán)獨(dú)立地取代一或多次，優(yōu)選1-3次鹵素，如氟、氯、溴或碘或多個(gè)鹵素，如CF3；羥基；C1-10烷氧基，如甲氧基或乙氧基；S(O)m烷基，其中m是0、1或2，例如甲硫基，甲基亞磺?；蚣谆酋；?；氨基，單和雙C1-4烷基取代的氨基；C3-7環(huán)烷基，或C3-7環(huán)烷基氧基，例如環(huán)丙基或環(huán)戊基，或環(huán)己氧基；A1-B1-D1基團(tuán)，其中A1是CR10R20、氧、硫或NR10R20，而R10和R20的定義與式(1)中相同，各自獨(dú)立地是氫或C1-4烷基，最好是。A1是NR10R20，B1是C(O)或S(O)2，優(yōu)選C(O)。D1是E1或E2，其中E1是C1-10烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基鏈烯基、雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基；E2是O-E1或E-D1。優(yōu)選D1為OE1，E1為C1-10烷基。最好是A1-B1-D1是N-C(O)O-叔丁基。
合適的Ra基團(tuán)包括2-羥乙基，乙基-N-C(O)O-叔丁基，丙基乙氧基或2-氨基乙基。
對(duì)于NHRa R1取代基上的優(yōu)選的環(huán)取代位，在4-吡啶基衍生物上是2-位，在4-嘧啶基環(huán)上的優(yōu)選的環(huán)取代位也是2-位，與式(1)化合物中所述相似。
式(A)的示例化合物包括4-(4-氟苯基)-5-〔(2-羥基)乙氨基〕嘧啶-4-基-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，4-(-氟苯基)-5-〔2-(2-羥基)乙氨基嘧啶-4-基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基)-5-〔(2-(3-乙氧基丙氨基)〕嘧啶-4-基)-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔(2-〔叔丁氧羰基氨基)乙氨基〕嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑4-(4-氟苯基)-5-〔(2-氨乙基)氨基〕嘧啶-4-基-1-(哌啶-4-基)咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔(2-乙氧丙基)氨基〕嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑。
式(1)和式(A)化合物可以用合成步驟得到，這些步驟中的一些說(shuō)明在流程I至XII中。在這些流程中提供的合成步驟可用于制造具有各式各樣不同的R1、R2和R4基團(tuán)的式(1)及式(A)化合物，利用適當(dāng)保護(hù)的任選取代基使它們反應(yīng)，以實(shí)現(xiàn)與本文概述的反應(yīng)相適應(yīng)。在這些情形下隨后去保護(hù)，于是得到具有一般公開(kāi)的性質(zhì)的化合物。一旦形成了咪唑核，進(jìn)一步的式(1)或式(A)化合物可以利用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的官能基相互轉(zhuǎn)化的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)來(lái)制備。在下面討論的合成步驟部分里，一般來(lái)說(shuō)除非特地指明，使用的式(1)化合物一詞也意味著式(A)化合物，它們?cè)诒疚闹袘?yīng)當(dāng)可互換地使用，因?yàn)樗龅闹苽涫?1)化合物的步驟也制備式(A)化合物。
例如，由-CO2CH3和HNR13R14在CH3OH中于有或無(wú)催化劑金屬氰化物(如NaCN)存在下加熱，得到-C(O)NR13R14；由-OH與例如ClC(O)R3在吡啶中得到-OC(O)R3；由-NHR10與異硫氰酸烷基酯或硫氰酸得到-NR10-C(S)NR13R14；由-NHR6與氯甲酸烷基酯得到NR6C(O)OR6；由-NHR10通過(guò)用異氰酸酯(例如HN＝C＝O或R10N＝C＝O)處理，得到-NR10C(O)NR13R14；由-NHR10用ClC(O)R3在吡啶中處理得到-NR10-C(O)R8；由-C(NR13R14)SR3用H3NR3+OAC-在醇中加熱得到-C(＝NR10)NR13R14；由-C(S)NR13R14和R6-I在惰性溶劑(如丙酮)中得到-C(NR13R14)SR3；由C(S)NH2和HNR13R14-C(＝NCN)-NR13R14以及由-C(＝NR13R14)-SR3和NH2CN在無(wú)水的醇中加熱，或者由-C(＝NH)-NR13R14用BrCN和NaOEt在乙醇中處理，得到-C(S)NR13R14(其中R13或R14不是氫)；由-NHR10用(R8S)2S＝NCN處理得到-NR10-C(＝NCN)SR8；由-NHR10和ClSO2R3在吡啶中加熱處理得到-NR10SO2R3；由-NR10C(O)R8用Lawesson試劑〔2，4-二(4-甲氧苯基)-1，3，2，4-二硫二磷雜四環(huán)-2，4-二硫化物〕處理得到-NR10C(S)R3；由-NHR6用三氟甲磺酸酐和堿得到NR10SO2CF3；其中R3、R6、R10、R13和R14的定義同式(1)。
基團(tuán)R1、R2和R4的前體可以是利用官能基轉(zhuǎn)化標(biāo)準(zhǔn)方法能夠相互轉(zhuǎn)化的其它的R1、R2和R4基團(tuán)。例如其中的R2是鹵代C1-10烷基的式(1)化合物可以通過(guò)與合適的疊氮化物鹽反應(yīng)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的C1-10烷基N3衍生物，隨后如果需要，可以還原成相應(yīng)的C1-10烷基NH2化合物，它又可以與其中的X是鹵素(如氯)的R18S(O)2X反應(yīng)，生成相應(yīng)的C1-10烷基NHS(O)2R18化合物。
或者是，基中的R2是鹵代C1-10烷基的式(1)化合物可以與胺R13R14NH反應(yīng)，生成相應(yīng)的C1-10烷基NR13R14化合物，或者可以與R18SH的堿金屬鹽反應(yīng)，生成相應(yīng)的C1-10烷基SR18化合物。
流程I
參看流程I，式(I)化合物適合通過(guò)式(II)化合物與式(III)化合物反應(yīng)制備，其中P是0或2，R1、R2和R4同式(1)中的定義，或者是基團(tuán)R1、R2和R4的前體，Ar是任選取代的苯基，隨后如果需要，將R1，R2和R4的前體轉(zhuǎn)化成基團(tuán)R1、R2和R4。
最好是，反應(yīng)在環(huán)境溫度下或在冷卻(如50℃至10℃)或加熱下于惰性溶劑(如二氯甲烷，DMF，四氫呋喃，甲苯，乙腈或二甲氧基乙烷)中進(jìn)行，反應(yīng)中有合適的堿存在，例如1，8-二氮雜雙環(huán)〔5.4.0〕十一碳-7-烯(DBU)或胍堿如1，5，7-三氮雜雙環(huán)〔4，4，0〕十一碳碘-5-烯(TBD)。已發(fā)現(xiàn)式(II)中間體很穩(wěn)定，且能長(zhǎng)期貯存。p最好是2。
式(II)化合物具有以下結(jié)構(gòu)
其中p是0或2；R4的定義與式(1)相同，Ar是本文中定義的任選取代的芳基。Ar宜為被C1-4烷基、C1-4烷氧基或鹵素任選取代的苯基。最好是Ar為苯基或4-甲基苯基，即甲苯磺?；苌铩?br> 其中p＝2的式(II)化合物與式(III)化合物反應(yīng)(流程I)得到式(I)化合物的產(chǎn)率總是比p＝0時(shí)得到的高。此外，其中p＝2的式(II)化合物的反應(yīng)在環(huán)境和經(jīng)濟(jì)方面更具吸引力。當(dāng)p＝0時(shí)，所用的優(yōu)選溶劑是二氯甲烷，對(duì)于大規(guī)模生產(chǎn)它在環(huán)境方面令人討厭，而優(yōu)選的堿TBD也是昂貴的，與本文將進(jìn)一步說(shuō)明的更具商業(yè)吸引力的合成(p＝2)相比，還會(huì)產(chǎn)生一些副產(chǎn)物和雜質(zhì)。
正如所指出的，流程I利用了取代的芳基硫代甲胩的陰離子(當(dāng)p＝0時(shí))與亞胺的1，3-二偶極環(huán)加成反應(yīng)。更具體地說(shuō)，此反應(yīng)的去質(zhì)子化步驟需要用強(qiáng)堿，例如胺堿。市場(chǎng)上能購(gòu)得的TBD最為可取，但是叔丁醇鹽，六甲基二硅雜疊氮化鋰或鈉或鉀也可以用。雖然二氯甲烷是優(yōu)選的溶劑，但是也可以使用其它的鹵化溶劑(例如氯仿或四氯化碳)、醚類(如四氫呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙醚、叔丁基甲基醚)、乙腈、甲苯或它們的混合物。對(duì)于涉及R1是嘧啶基的反應(yīng)，該反應(yīng)可以在約-20℃至約40℃下，優(yōu)選約0-約23℃、更優(yōu)選約0-約10℃、最優(yōu)選約4℃下反應(yīng)。對(duì)于其中的R1是吡啶的化合物，可能需要改變溫度和溶劑這兩種反應(yīng)條件，例如將溫度降低至約-50℃，或?qū)⑷軇Q成四氫呋喃(THF)。
在另一種方法里，式(I)化合物可以通過(guò)式(IX)化合物的合適衍生物的偶合反應(yīng)制備
其中T1是氫、T4是R4，或者T1是R1、T4是H，其中R1、R2和R4的定義如上；偶合反應(yīng)的條件為(i)當(dāng)T1是氫時(shí)，與雜芳基環(huán)R1H的合適衍生物在合適的環(huán)偶合條件下反應(yīng)，使雜芳基環(huán)R1偶合到咪唑核的5位上；(ii)當(dāng)T4是氫時(shí)，與芳基環(huán)R4H的合適衍生物在環(huán)偶合條件下反應(yīng)，使芳基環(huán)R4偶合到咪唑核的4位上。
這種芳基/雜芳基偶合反應(yīng)是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。一般來(lái)說(shuō)，一種組分的陰離子的有機(jī)金屬合成等效物與第二組分的活性衍生物在合適催化劑的存在下偶合。該陰離子等效物可以由式(IX)的咪唑形成，此時(shí)芳基/雜芳基化合物提供活性衍生物，也可以由芳基/雜芳基化合物形成，此時(shí)咪唑提供活性衍生物。因此，式(IX)化合物的合適衍生物或芳基/雜芳基環(huán)包括有機(jī)金屬衍生物，例如有機(jī)鎂、有機(jī)鋅、有機(jī)錫烷及烴基硼酸衍生物和合適的活性衍生物，包括溴、碘、氟磺酸酯及三氟甲磺酸酯衍生物。合適的步驟在WO 91/19497中說(shuō)明，該專利的公開(kāi)內(nèi)容在本文中引用作為參考。
式(IX)化合物的合適的有機(jī)鎂和有機(jī)鋅衍生物可以與雜芳基或芳基環(huán)的鹵素、氟磺酸酯或三氟甲磺酸酯衍生物在環(huán)偶合催化劑(例如鈀(O)或鈀(II)催化劑)存在下按著Kumada等的步驟〔四面體快報(bào)(Tetrahedron letters)22，5319(1981)〕反應(yīng)。合適的催化劑包括四(三苯膦)鈀和PdCl2〔1，4-二(二苯膦基)丁烷〕，可以任選地有氯化鋰及一種堿(如三乙胺)存在。另外，一種鎳(II)催化劑如Ni(II)Cl2(1，2-二苯膦基)乙烷，也可以按照Pridgen等人的方法〔有機(jī)化學(xué)雜志(J.Org.Chem)1982，47，4319〕用于芳香環(huán)的偶合。合適的反應(yīng)溶劑包括六甲基磷酰胺。在雜芳基環(huán)是4-吡啶基時(shí)，合適的衍生物包括4-溴和4-碘吡啶，以及4-羥基吡啶的氟磺酸酯和三氟甲磺酸酯。類似地，在芳基環(huán)是苯基時(shí)，合適的衍生物包括溴、氟磺酸酯，三氟甲磺酸酯，優(yōu)選碘衍生物。合適的有機(jī)鎂和有機(jī)鋅衍生物可以制備如下用烷基鋰化合物處理式(IX)化合物或其溴衍生物，通過(guò)去質(zhì)子化或金屬轉(zhuǎn)移作用分別得到相應(yīng)的鋰試劑。這一鋰中間體隨后可以用過(guò)量的鹵化鎂或鹵化鋅處理，得到相應(yīng)的有機(jī)金屬化合物。
式(IX)化合物的三烷基錫衍生物可以用芳基或雜芳基環(huán)系化合物的溴化物、氟磺酸酯、三氟甲磺酸酯或者最好是碘化衍生物，在惰性溶劑(如四氫呋喃，優(yōu)選含10％六甲基磷酰胺)中于合適的偶合催化劑(如鈀(0)催化劑，例如四(三苯膦)鈀)存在下，按照在Stille，美國(guó)化學(xué)會(huì)志(J.Amer.Chem.Soc.)1987，109,5478和美國(guó)專利4,719,218及5,002,942中所述的方法處理，或者是用鈀(II)催化劑在氯化鋰及任選加入的堿(如三乙胺)存在下，于惰性溶劑如二甲基甲酰胺中處理。三烷基錫衍生物可以方便地得到如下將相應(yīng)的式(IX)化合物用鋰化試劑(如仲丁基鋰或正丁基鋰)在醚類溶劑(如四氫呋喃)中處理，或者用烷基鋰處理相應(yīng)的式(IX)化合物的溴衍生物，在每一種情形隨后都用三烷基錫鹵化物處理。或者是，式(IX)化合物的溴衍生物可以在與上述類似的條件下用合適的雜芳基或芳基三烷基錫化合物在催化劑(如四-(三苯膦)鈀)存在下處理。
也可以使用烴基硼酸衍生物。因此，式(IX)的合適的衍生物，例如溴、碘、三氟甲磺酸酯或三氟磺酸酯衍生物，可以在鈀催化劑(如四-(三苯膦)鈀或PdCl2〔1，4-二(二苯膦基)丁烷〕)存在下和堿(如碳酸氫鈉)存在下，和雜芳基或芳基硼酸在溶劑(如二甲氧基乙烷)中于回法條件下反應(yīng)(見(jiàn)Fischer和Haviniga，荷蘭與比利時(shí)化學(xué)研究匯編(Rec.Trav.Chim.pays Bas)，84，439，1965；Snieckus，V，四面體快報(bào)(Tetrahedron Lett.)，29，2135，1988和Terashimia，M.，藥物化學(xué)通報(bào)(Chem.pharm.Bull.)，11，4755，1985)。也可以采用非水條件，例如在溶劑如二甲基甲酰胺中，在約100℃的溫度和Pa(II)催化劑存在下(見(jiàn)Thompson W.J.等)有機(jī)化學(xué)雜志(J.Org.Chem)，49，5237，1984。合適的烴基硼酸衍生物可以按照標(biāo)準(zhǔn)程序用三烷基硼酸酯(如三乙基、三異丙基或三丁基硼酸酯)處理鎂或鋰衍生物來(lái)制備。
不難理解，在這類偶合反應(yīng)中，必須適當(dāng)?shù)仃P(guān)注式(IX)化合物中存在的官能基。因此一般來(lái)說(shuō)，氨基和硫取代基應(yīng)該不被氧化或是被保護(hù)的。
如下面的流程II所示，式(I)化合物可以通過(guò)對(duì)式(X)化合物熱處理或藉助環(huán)化劑(如磷酰氯或五氯化磷)處理來(lái)制備(見(jiàn)Engel和Steglich，李必希化學(xué)記事(Liebihs Ann Chem)，1978，1916和strzybny等，有機(jī)化學(xué)雜志(J.Org.Chem)1963，28，3381)。式(X)化合物的制備方法可以是例如用活化的甲酸衍生物(如相應(yīng)的酸酐)在標(biāo)準(zhǔn)的?；瘲l件下將相應(yīng)的a-酮?；S后與R2NH2形成亞胺。氨基酮可以由母體酮通過(guò)肟化作用(oxamination)和還原衍生得到，而必需的酮本身又可以通過(guò)將得自芳基(雜芳基)乙酸酯與R1COX組分縮合作用的β-酮酯脫羧基化來(lái)制備
流程II在下面圖示說(shuō)明的流程III中，列出了使用酮(式XI)制備式(I)化合物的兩個(gè)不同的途徑。雜環(huán)酮(XI)通過(guò)將烷基雜環(huán)化合物，例如4-甲基喹啉(用烷基鋰如正丁基鋰處理喹啉制備)，的陰離子加到N-烷基-O-烷氧基苯甲酰胺、酯或同一氧化態(tài)的其它合適的活化衍生物來(lái)制備。或者是，該陰離子可以與苯甲醛縮合得到醇，該醇然后被氧化成酮(XI)。
流程III在另一方法中，N-取代的式(1)化合物可以用下述(a)和(b)中的化合物處理式(XII)酰胺的陰離子來(lái)制備R1CH2NR2COH(XII)其中R1和R2定義如上(a)式(XII)的腈R4CN (XIII)其中R4的定義如上，或(b)過(guò)量的式(XIY)?；u，例如酰基氯R4COHal(XIV)其中R4定義同上，Hal是鹵素，或者用相應(yīng)的酸酐處理，得到雙?；闹虚g體，隨后用氨源處理，例如乙酸銨。
流程IV此方法的一種變型說(shuō)明于上面的流程IV中。用化學(xué)式為R1CH2X的鹵甲基雜環(huán)化合物處理伯胺(R2NH2)，得到仲胺，隨后用標(biāo)準(zhǔn)方法將其轉(zhuǎn)化成酰胺。或者是，該酰胺可以按流程V中的說(shuō)明用R1CH2X將甲酰胺烷基化來(lái)制備。此酰胺用強(qiáng)的氨化物堿(例如二異丙基氨基化鋰或二(三甲基甲硅烷基)氨基鈉)去質(zhì)子化，隨后加入過(guò)量的芳酰氯得到雙?；幕衔?，再將其在含乙酸銨的乙酸中加熱關(guān)環(huán)，得到式(I)的咪唑化合物?；蛘呤牵０钡年庪x子可以與取代的芳基腈反應(yīng)，直接得到式(1)的咪唑。
以下的說(shuō)明和流程對(duì)先前在流程I中敘述的方法作了進(jìn)一步的示例說(shuō)明。亞胺與甲苯磺?；谆痰姆磻?yīng)最早是Van Leusen報(bào)道的(Van Leusen等，有機(jī)化學(xué)雜志(J.Org.Chem)，1977，42，1153)所報(bào)道的條件如下叔丁胺(tBuNH2)在二甲氧基乙烷(DME)中，K2CO3在甲醇中，和NaH在DME中。在重新評(píng)估這些條件時(shí)發(fā)現(xiàn)產(chǎn)率均很低。第二條途徑涉及用胺交換法制得叔丁基亞胺，隨后與胩反應(yīng)生成1-叔丁基咪唑，此方法也是行得通的。這大概可以用任何伯胺作為堿來(lái)進(jìn)行。仲胺雖非優(yōu)選，但也可以使用，不過(guò)也可能使胩緩慢分解。反應(yīng)要進(jìn)行完全大概需要約3當(dāng)量胺，結(jié)果分離產(chǎn)率約為50％。受阻仲胺(二異丙胺)雖然可用，但是很慢且一般不太有效。使用叔胺和芳香胺，例如吡啶和三乙胺，在某些試驗(yàn)條件下不發(fā)生反應(yīng)，但是堿性更強(qiáng)的類型如DBU和4-二甲氨基吡啶(DMAP)，雖然慢但有一定的產(chǎn)率，因此可能適合用于本發(fā)明。
如下面流程V和VI所示，流程VII的嘧啶醛可以與伯胺縮合，形成亞胺，它能很方便地被分離或在各種合適的堿和本文所述的溶劑存在下與所需要的胩就地反應(yīng)，得到5-(4-嘧啶基)-取代的咪唑，其中R2和R4與對(duì)式(I)化合物所定義的相同。
一種優(yōu)選的制備式(1)化合物的方法示于下面的流程VI中。在一個(gè)分離的步驟中制備和分離出的亞胺常常是難以處理的焦油。它的黑顏色也常被帶到最終的產(chǎn)物中。制取亞胺的產(chǎn)率多變，而且在其制備中常常使用環(huán)境上不太受歡迎的溶劑如CH2Cl2。
其中p＝2的這類反應(yīng)需要有合適的堿使反應(yīng)進(jìn)行。該反應(yīng)要求堿強(qiáng)得足以使胩去質(zhì)子化。合適的堿包括胺、碳酸鹽、氫化物或者芳基或烷基鋰試劑，或它們的混合物。這些堿包括但不限于碳酸鉀，碳酸鈉，伯胺和仲胺，例如嗎啉、哌啶、吡咯烷及其它非親核堿。
適合用于此反應(yīng)的溶劑包括但不限于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，MeCN，鹵化溶劑(如二氯甲烷或氯仿)，四氫呋喃(THF)，二甲基亞砜(DMSO)，醇類(如甲醇或乙醇)，苯或甲苯，或DME。優(yōu)選的溶劑是DMF，DME，THF或MeCN，更優(yōu)選DMF。產(chǎn)物分離通常可以通過(guò)加水并將產(chǎn)物過(guò)濾成純凈化合物來(lái)完成。
流程V雖然對(duì)于大規(guī)模生產(chǎn)不方便，但是很可能需要向胩中加入NaH，或許溫度要低于25℃(在THF中)。另外，還曾報(bào)道Buli對(duì)于甲苯磺酰芐基胩在-50℃下去質(zhì)子化是一種有效的堿(DiSanto，R.；Costi.R.；Massa，S.；Artico，M.合成通迅(Synth Commun)1995，25，795)。
依照所優(yōu)選的堿，可以采用各種不同的溫度條件。例如，tBuNH2/DME、K2CO3/MeOH、K2CO3/DMF在高于40℃的溫度產(chǎn)率可能降至約20％，但在0℃和25℃之間預(yù)期差別很小。因此，低于0℃和高于80℃的溫度范圍也被考慮屬于本發(fā)明的范圍。溫度范圍最好是從約0℃至約25℃。
如下面的流程VI所示，亞胺最好是在溶劑中原地形成。這一優(yōu)選的合成方法是一種以單釜合成方式進(jìn)行的方法。最好是，當(dāng)伯胺以鹽形式使用時(shí)，例如實(shí)施例中的二鹽酸鹽，則反應(yīng)物中在加入胩之前還可以包含一種堿，例如碳酸鉀?；蛘呤?，哌啶上的氮可能需要保護(hù)，例如用氨基甲酸叔丁酯或乙酯或者某些其它的氮保護(hù)基團(tuán)。反應(yīng)條件，例如溶劑、堿、溫度等，與上面對(duì)流程V中所示的分離的亞胺所作的討論和說(shuō)明相似。本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易認(rèn)識(shí)到，在某些情況下，亞胺的原地形成可能需要脫水條件，或者可能需要酸催化。
流程VI流程VII描述了制備含2-氨基嘧啶的式(1)化合物的另一種方法。在這一特殊情形，甲硫基部分被氧化成甲基亞磺酰部分，后者與合適的NH2Ra基團(tuán)反應(yīng)。在其中的NH2Ra是一個(gè)脂族胺的情形(例如在式(A)化合物中)，甲基亞磺酰基可以在高溫下被NH2Ra直接置換。當(dāng)Ra是一個(gè)芳香環(huán)時(shí)(例如在式(1)化合物中)，要發(fā)生置換可能需要用三甲基鋁催化。
流程VII2-甲硫基嘧啶-4-甲醛和各種2-氨基嘧啶-4-甲醛的二烷氧基縮醛可以用改良的Bredereck等的方法〔化學(xué)報(bào)告(Chem，Ber)，1964，97，3407〕制備，該文內(nèi)容在本文中引用作為參考并復(fù)述在下面的流程VIII中，用各種已知的反應(yīng)條件(如甲酸)將縮醛水解時(shí)，醛的產(chǎn)率不能令人滿意。因此需要發(fā)展新的水解方法，這構(gòu)成了本發(fā)明的另一實(shí)施方案。這些水解步驟圖示說(shuō)明在流程VIII中并在實(shí)施例1中詳述。上述縮醛的優(yōu)選的水解方法包括在3N HCl中于40-50℃下加熱18-24小時(shí)后用固體NaHCO3中和，并用乙酸乙酯萃取。將溶劑蒸發(fā)通常得到適合直接合成亞胺的醛。在硅膠上柱層析在某些情形提高總產(chǎn)率。用乙酸(新鮮的)作為溶劑，使用濃硫酸在加熱條件下將2-甲硫基嘧啶4-甲醛縮二甲醇水解，最好有催化數(shù)量的硫酸存在，也以高產(chǎn)率得到所需要的醛?；蛘呤牵?-甲硫基嘧啶4-甲醛縮二甲醇和各種2-氨基嘧啶4-甲醛縮二甲醇可以用一個(gè)兩步乙酸水解方法水解。二烷氧基·縮醛用含有催化數(shù)量硫酸的乙酸酐處理，得到混合的酰氧基-烷氧基·縮醛，它可以在甲醇中用催化數(shù)量的甲醇鈉或是用弱酸處理，轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的醛。
流程VIII含嘧啶的式(1)化合物也可以通過(guò)將嘧啶環(huán)裝配在已經(jīng)完整的咪唑骨架上來(lái)制備。這一合成方法的一個(gè)具體實(shí)例圖示于流程IX中。雖然該流程描述和例舉的是其中R2為4-哌啶和R4為4-氟苯基的情形，但該方法一般可用于式(1)中提到的任何R2和R4取代基。同樣，該方法可以適合于任何取代的胍，因此可用于制備式(1)中對(duì)R1所述的任何取代的嘧啶部分。
流程IX最終的式(1)的2-烷基或芳基氨基嘧啶-4-基咪唑化合物可以用以下四種方法之一制備1)2-氨基嘧啶亞胺與胩直接反應(yīng)；2)2-乙酰氨基嘧啶亞胺與胩縮合，隨后除掉乙酰氨基；3)將2-甲硫基嘧啶衍生物氧化成相應(yīng)的亞砜，隨后用所需要的胺置換，和4)利用相應(yīng)的取代的胍和所要的5-取代N，N-二甲氨基-反-1-丙烯酮咪唑反應(yīng)，將所需要的烷基或芳基嘧啶部分組裝在完整的咪唑上。
雖然這里以例如最終的R2位有一個(gè)任選取代的哌啶部分或R4位有一個(gè)4-氟苯基的情形列出這些方案，但是用這種方式可以加上任何合適的R2部分或R4部分，只要它們能在伯胺上制備。類似地，通過(guò)胩途徑可以加上任何合適的R4基。
例如，式(1)的2-氨基嘧啶-4-基咪唑化合物在R2是4-取代的環(huán)己基部分時(shí)的制備圖示于流程X中。適當(dāng)?shù)膩啺泛碗痰目s合按典型的方式進(jìn)行。一旦在嘧啶環(huán)的2-位引入了有關(guān)的部分，則環(huán)己基環(huán)中的酮可以不加掩蔽，通過(guò)相應(yīng)的環(huán)氧化物轉(zhuǎn)化成醇或任何其它合適的官能基。
流程X如流程XI所示，含2-氨基吡啶的式1化合物可以通過(guò)用所需要的胺或其相應(yīng)的陰離子置換相應(yīng)的2-氯吡啶前體來(lái)制備。2-氯吡啶-4-甲醛的制備也示于流程XI中。亞胺的形成和與異胩的環(huán)加成按照與嘧啶衍生物相同的方式進(jìn)行。
流程XI在下面的流程XII中圖示說(shuō)明了制備式(II)的胩的一種最佳方法。
流程XII取代的醛向甲苯磺酰芐基甲酰胺的轉(zhuǎn)化可以通過(guò)將醛(流程XII中的1)與酸(如對(duì)甲苯磺酸、甲酸或樟腦磺酸)一起加熱，或者與甲酰胺和對(duì)甲苯亞磺酸一起加熱得到[反應(yīng)條件為約60℃約24小時(shí)]。最好是不使用溶劑。在使用諸如DMF、DMSO、甲苯、乙腈或過(guò)量的甲酰胺等溶劑時(shí)，反應(yīng)的產(chǎn)率可能很低(＜30％)。溫度低于60℃時(shí)通常不易產(chǎn)生所要的產(chǎn)物，而溫度超過(guò)60℃時(shí)可能形成會(huì)分解的產(chǎn)物，或者得到芐型的雙酰胺(流程XI中的2)。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是通過(guò)雙甲酰胺中間體(方案XI中的2)與對(duì)甲苯亞磺酸反應(yīng)實(shí)現(xiàn)甲苯磺酰芐基甲酰胺化合物的合成。在這一優(yōu)選途徑中，由醛制備雙甲酰胺是通過(guò)在合適的溶劑中于酸催化下將醛與甲酰胺一起加熱完成的。合適的溶劑是甲苯、乙腈、DMF和DMSO或其混合物。酸催化劑是本領(lǐng)域中眾所周知的，包括但不限于氯化氫、對(duì)甲苯磺酸、樟腦磺酸及其它無(wú)水酸。反應(yīng)可以在約25-110℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行，優(yōu)選約50℃，以約4-約5小時(shí)為宜，更長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間也是可以接受的。在較高反應(yīng)溫度(＞70℃)下延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間可能會(huì)使產(chǎn)物分解和產(chǎn)率降低。產(chǎn)物的完全轉(zhuǎn)化通常需要除掉反應(yīng)混合物中的水。
雙甲酰衍生物轉(zhuǎn)化成甲苯磺酰芐基甲酰胺的優(yōu)選條件是將雙甲酰胺在合適的溶劑中與酸催化劑和對(duì)甲苯亞磺酸一起加熱而實(shí)現(xiàn)的。用于此反應(yīng)的溶劑包括但不限于甲苯、乙腈或其混合物。這些溶劑與DMF的其它混合物或DMSO也可使用，但可能降低產(chǎn)率。溫度可以從約30℃到約100℃。低于40℃和高于60℃的溫度不可取，因?yàn)楫a(chǎn)率和速度降低。優(yōu)選的溫度范圍是約40-60℃，最好是約50℃。最佳時(shí)間是約4-5小時(shí)，但也可以更長(zhǎng)。最好是，所用的酸包括但不限于甲苯磺酸、樟腦磺酸和氯化氫以及其它無(wú)水酸。最好是雙甲酰胺在比例為1∶1的甲苯∶乙腈中與對(duì)甲苯亞磺酸和氯化氫一同加熱。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是用單釜法合成對(duì)甲苯磺?；S基甲酰胺化合物的優(yōu)選合成途徑。這一方法先將醛轉(zhuǎn)化成雙甲酰胺衍生物，隨即使雙甲酰胺衍生物與對(duì)甲苯亞磺酸反應(yīng)。此步驟將最優(yōu)化的條件合并成單一而有效的過(guò)程。按這種方式可以以大于90％的高產(chǎn)率得到芳基芐基甲酰胺。
優(yōu)選的反應(yīng)條件是在優(yōu)選的溶劑甲苯/乙腈中(最好比例為1∶1)使用催化劑，如三甲基氯硅烷(TMSCl)。優(yōu)選能與反應(yīng)中產(chǎn)生的水反應(yīng)并同時(shí)產(chǎn)生氯化氫以催化反應(yīng)的試劑，如TMSCl。使用氯化氫和對(duì)甲苯磺酸也是可取的。因此，供采用的三種合適的反應(yīng)條件包括1)使用一種同時(shí)產(chǎn)生氯化氫的脫水劑，如TMSCl；或2)使用合適的脫水劑和合適的酸源，例如但不限于樟腦磺酸、氯化氫或甲苯磺酸；和3)其它的脫水條件，例如共沸法去除水，并使用酸催化劑和對(duì)甲苯亞磺酸。
其中p是2的式(II)化合物也可以通過(guò)式(VI)化合物(流程I，R4CH2NC)與式(VII)化合物(流程I，ArSO2L1)在強(qiáng)堿存在下反應(yīng)制備，其中R4和Ar與這里的定義相同，L1是一個(gè)例如鹵素的離去基團(tuán)，如氟，合適的強(qiáng)堿包括但不限于烷基鋰，例如丁基鋰或二異丙基氨基化鋰(Van Leusen等，四面體快報(bào)(Tetrahedron Letters).No.23，2367-2368，1972)。
流程I中的式(II)化合物可以用上述的Leusen等的方法制備。例如式(II)化合物可以通過(guò)式(IV)化合物脫水制備(流程I)，其中Ar、R4和p的定義與這里相同。
合適的脫水劑包括磷酰氯、草酰氯、亞硫酰二氯、碳酰氯或甲苯磺酰氯，使用時(shí)有合適的堿存在，例如三乙胺或二異丙基乙胺，或類似的堿如吡啶。合適的溶劑是二甲氧基乙醚、四氫呋喃或鹵化溶劑，優(yōu)選THF。反應(yīng)溫度保持在-10℃至0℃之間時(shí)反應(yīng)最有效。溫度較低時(shí)反應(yīng)進(jìn)行不完全，而在更高的溫度下溶液顏色變深，產(chǎn)率下降。
式(IV)化合物(流程I)可以通過(guò)式(V)化合物(流程I，R4CHO，其中R4同本文定義)與ArS(O)pH和甲酰胺反應(yīng)制備，可以去除或不去除水，優(yōu)選在脫水條件下在環(huán)境溫度或更高的溫度下進(jìn)行，例如30-150℃，可以方便地在回流下，任選地有酸催化劑存在進(jìn)行。或者是，可以用三甲基氯硅烷代替酸催化劑。酸催化劑的實(shí)例包括樟腦-10-磺酸、甲酸、對(duì)甲苯磺酸、氯化氫或硫酸。
式(VI)化合物(流程I)的制備可以通過(guò)式(VIII)化合物(流程I，R4CH2NH2)與甲酸烷基酯(如甲酸乙酯)反應(yīng)形成中間體酰胺，它可以與公知的脫水劑(例如但不限于草酰氯、磷酰氯或甲苯磺酰氯)在合適的堿(如三乙胺)存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成所要的胩。
或者是，式(VIII)化合物(流程I)可以通過(guò)與氯仿和氫氧化鈉在含水二氯甲烷中于相轉(zhuǎn)移催化作用下轉(zhuǎn)化成式(VI)化合物(流程I)。
式(III)化合物(流程I)可以通過(guò)化學(xué)式為R1CHO的化合物與伯胺R2NH2反應(yīng)制備。
式(VIII)的氨基化物(流程I)是已知的化合物，或是可以由相應(yīng)的醇，肟或酰胺用標(biāo)準(zhǔn)的官能基互相轉(zhuǎn)化法制備。
適合用于羥基和咪唑氮的保護(hù)基是本領(lǐng)域所公知的，在很多參考文獻(xiàn)中有說(shuō)明，例如，“有機(jī)合成中的保護(hù)基”(Protecting Groups inOrganic Synthesis)，Greene T W，Wiley-Interscience，New York，1981合適的羥基保護(hù)基實(shí)例包括甲硅烷基醚，例如叔丁基二甲基或叔丁基二苯基硅醚，以及烷基醚，例如通過(guò)可變鍵長(zhǎng)的烷基鏈(CR10R20)n連接的甲基。咪唑氮保護(hù)基的合適實(shí)例包括四氫吡喃基。
式(I)化合物的可藥用酸加成鹽可以用已知方式得到，例如在合適的溶劑中用適量的酸處理。治療方法式(I)或式(A)化合物或其可藥用的鹽可用于制備預(yù)防或治療人或其它哺乳動(dòng)物中疾病狀態(tài)的藥物，只要這些疾病是由于例如但不限于單核細(xì)胞和/或巨噬細(xì)胞等哺乳動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子過(guò)量或失控而造成或加重的。
對(duì)于本發(fā)明而言，在治療方法部分，式(I)化合物與式(A)化合物可互換使用。配制方法、劑型、疾病處理等對(duì)兩種化學(xué)式的物質(zhì)相同。例如，“式(I)化合物能……”也意味著“式(I)或式(A)化合物能……”。
式(I)化合物能抑制促炎細(xì)胞因子，例如IL-1、IL-6、IL-8和TNF，因此可用于治療。IL-1、IL-6、IL-8和TNF影響很多種類的細(xì)胞和組織，這些細(xì)胞因子及其它白細(xì)胞衍生的細(xì)胞因子是許多種疾病狀態(tài)和癥狀的重要和關(guān)鍵的炎癥介質(zhì)。這些促炎細(xì)胞因子的抑制對(duì)于控制、降低和減輕很多這類疾病狀態(tài)有利。
因此，本發(fā)明提供了一種治療細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括施用能有效干擾細(xì)胞因子數(shù)量的式(I)化合物或其可藥用的鹽。
式(I)化合物能抑制誘導(dǎo)型促炎蛋白，例如COX-2，該蛋白質(zhì)還有很多其它名稱，如前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合成酶-2(PGHS-2)，因此式(I)化合物可用于治療。環(huán)加氧酶(CO)通道的這些促炎性脂質(zhì)介質(zhì)是由誘導(dǎo)型COX-2酶產(chǎn)生的。COX-2花生四烯酸衍生形成這些產(chǎn)物(如前列腺素)，這些產(chǎn)物是很多種疾病狀態(tài)和癥狀的重要和關(guān)鍵的炎癥介質(zhì)，對(duì)COX-2的調(diào)節(jié)影響各式各樣的細(xì)胞和組織。COX-1的表達(dá)不受式(I)化合物的影響。對(duì)COX-2的這種選擇性抑制可以減輕或免除與抑制COX-1相聯(lián)系的致潰瘍傾向，從而抑制對(duì)細(xì)胞保護(hù)作用必不可少的前列腺素。因此，抑制這些促炎介質(zhì)對(duì)于控制、降低和減輕很多這類疾病狀態(tài)有利。最值得注意的是，這些炎癥介質(zhì)，特別是前列腺素，與疼痛(如在疼痛受體的敏化方面)及浮腫有關(guān)。關(guān)于疼痛處理的這一方面因此包括了治療神經(jīng)肌肉疼痛、頭痛、癌癥疼痛和關(guān)節(jié)炎痛。式(I)化合物或其可藥用鹽通過(guò)抑制COX-2酶的合成可用于人或其它哺乳動(dòng)物的預(yù)防或治療。
因此，本發(fā)明提供了一種抑制COX-2合成的方法，該方法包括施用有效量的式(I)化合物或其可藥用的鹽。本發(fā)明還提供了一種通過(guò)抑制COX-2酶的合成對(duì)人或其它哺乳動(dòng)物進(jìn)行預(yù)防或治療的方法。
近來(lái)幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室已獨(dú)立地鑒定出一個(gè)MAP激酶族的新成員，它被稱之為CSBP、p38或RK。在不同的細(xì)胞系中用各式各樣的刺激進(jìn)行激發(fā)時(shí)，例如用物理化學(xué)應(yīng)力和用脂多糖或促炎細(xì)胞因子(如白細(xì)胞介素1和腫瘤壞死因子)處理，都觀察到這種新的蛋白激酶通過(guò)雙磷酸化而被活化。本發(fā)明的細(xì)胞因子生物合成抑制劑——式(I)化合物已被確定是CSBP/p38/RK激酶活性的有效和選擇性的抑制劑。這些抑制劑有助于確定炎癥響應(yīng)中信號(hào)通道的內(nèi)卷。特別是，第一次可以將一個(gè)明確的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通道指定為脂多糖在巨噬細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子產(chǎn)生中的作用。
細(xì)胞因子抑制劑隨后在一些動(dòng)物模型中試驗(yàn)其消炎活性。選擇對(duì)于環(huán)加氧酶抑制劑較不敏感的模型體系，以便揭示細(xì)胞因子抑制劑的獨(dú)特活性。這些抑制劑在很多這類體內(nèi)研究中顯示出顯著的活性。最值得注意的是在膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型中的效力和在內(nèi)毒素型休克模型中對(duì)TNF產(chǎn)生的抑制。在后一研究中，血漿中TNF含量的降低與存活和免遭與內(nèi)毒素休克有關(guān)的死亡相關(guān)。同樣很重要的是化合物在胎鼠長(zhǎng)骨器官培養(yǎng)體系中抑制骨吸收方面的效力。Griswold等(1988)，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Arthritis Rheum.)，311406-1412；Badger等(1989)，循環(huán)性休克(Circ.Shock)，27，51-61；Votta等(1994)，離體骨骼(in vitro.Bone)15，533-538；Lee等(1993)，紐約科學(xué)院記事(Ann.N.Y.Acad.Sci.)696，149-170。
因此，本發(fā)明的另一方面是治療哺乳動(dòng)物中由CSBP/RK/p38激酶介導(dǎo)的疾病，這包括對(duì)需要治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(I)化合物。合適的疾病包括本文對(duì)IL-1、IL-6、IL-8和TNF提到的那些疾病，特別是那些由CSBP/RK/p38激酶介導(dǎo)的疾病。這些疾病包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕性脊椎炎，骨關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎及其它關(guān)節(jié)炎病癥，膿毒病，膿毒性休克，內(nèi)毒素型休克，革蘭氏陰性膿毒病，毒性休克綜合癥，哮喘，成人呼吸窘迫綜合癥，中風(fēng)，再灌注損傷，中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷(如神經(jīng)外傷和局部缺血，包括暴露的和封閉的頭部損傷)，牛皮癬，再狹窄(例如在冠狀血管成形術(shù)后發(fā)生的)，腦型瘧，慢性肺部炎癥，硅肺，肺部肉樣瘤病，骨吸收病，骨質(zhì)疏松，移植物抗宿主反應(yīng)，同種移植排異反應(yīng)，節(jié)段性回腸炎，潰瘍性結(jié)腸炎或任何其它的炎癥性腸病(IBD)，或發(fā)熱(pyresis)。
這里定義的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)損傷包括暴露的或穿透性頭部創(chuàng)傷(如外科手術(shù)損傷)，或封閉性頭部創(chuàng)傷(如對(duì)頭部區(qū)域的損傷)。此定義還包括局部缺血性中風(fēng)，特別是腦部區(qū)域。
局部缺血性中風(fēng)可以定義為由于對(duì)特定腦部位供血不足引起的病灶性神經(jīng)紊亂，它經(jīng)常是血管內(nèi)栓子、血栓或局部動(dòng)脈粥樣化閉合造成的。炎性細(xì)胞因子在其中的作用已經(jīng)暴露，本發(fā)明提供了一種有效治療這些傷害的方法。對(duì)于此類急性損傷，現(xiàn)有的治療方法較少。
TNF-α是一種具有促炎作用(包括內(nèi)皮-白細(xì)胞粘著因子表達(dá))的細(xì)胞因子。白細(xì)胞滲入到局部缺血的腦損傷中，因此，能抑制或減小TNF含量的化合物將有助于治療局部缺血性腦損傷。參見(jiàn)Liu等，中風(fēng)(stoke)，25，No 7，pp 1481-1488(1994)，該文內(nèi)容在本文中引用作為參考。
Shohami等在血管及臨床生理學(xué)和藥理學(xué)雜志(J.of Vaisc&Clinical Physiology and Pharmacology)，3(2)，99-107(1992)中討論了封閉型頭損傷模型和用混合的5-LO/CO試劑進(jìn)行治療，該文內(nèi)容引用作為參考。已發(fā)現(xiàn)減少浮腫形成的治療能改進(jìn)所治療的動(dòng)物的功能后果。
特別是，式(I)化合物或其可藥用鹽可用于預(yù)防或治療人或其它哺乳動(dòng)物的任何疾病，只要這些疾病是由于例如但不限于單核細(xì)胞和/或巨噬細(xì)胞等哺乳動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1、IL-8或TNF過(guò)量或失控而造成或加重的。
因此，本發(fā)明的另一方面涉及一種抑制哺乳動(dòng)物中IL-1產(chǎn)生的方法，該方法包括給需要這種抑制的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(I)化合物或其可藥用的鹽。
在很多疾病狀態(tài)中，IL-1的過(guò)量或無(wú)控制的產(chǎn)生與疾病的加重和/或發(fā)生有關(guān)。這包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，中風(fēng)，內(nèi)毒素血癥和/或毒性休克綜合癥，其它的急性或慢性炎癥如內(nèi)毒素誘發(fā)的炎癥反應(yīng)或炎癥性腸病，動(dòng)脈粥樣硬化，肌肉退化，多發(fā)性硬化癥，惡病質(zhì)，骨吸收，牛皮癬性關(guān)節(jié)炎，賴特爾綜合癥，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)，創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎，風(fēng)疹性關(guān)節(jié)炎和急性滑膜炎。近來(lái)的證據(jù)表明IL-1活性與糖尿病。胰腺β細(xì)胞和早老性癡呆癥有關(guān)。
在又一方面，本發(fā)明涉及一種抑制哺乳動(dòng)物中TNF產(chǎn)生的方法，該方法包括給需要抑制的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(I)化合物或其可藥用的鹽。
TNF的過(guò)量或無(wú)控制產(chǎn)生已表明與介導(dǎo)或加重許多疾病有關(guān)，這包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕性脊椎炎，骨關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎及其它關(guān)節(jié)炎癥狀，膿毒病，膿毒性休克，內(nèi)毒素休克，革蘭氏陰性膿毒癥，毒性休克綜合癥，成人呼吸窘迫綜合癥，中風(fēng)，腦型瘧，慢性肺部炎癥，硅肺，肺部肉樣腫瘤病，骨吸收病(例如骨質(zhì)疏松)，再灌注損傷，移植物抗宿主反應(yīng)，同種移植排異反應(yīng)，由于感染(如流感)造成的發(fā)燒和肌痛，傳染病或惡性腫瘤繼發(fā)的惡病質(zhì)，獲得性免疫缺陷綜合癥(艾滋病)繼發(fā)的惡病質(zhì)，艾滋病，ARC(艾滋病相關(guān)復(fù)癥)，瘢痕瘤形成，疤痕組織形成，節(jié)段性回腸炎，潰瘍性結(jié)腸炎和發(fā)熱(pyresis)。
式(I)化合物也可用于治療由對(duì)TNF增量調(diào)節(jié)敏感或誘發(fā)體內(nèi)TNF生成的病毒造成的感染。對(duì)于本發(fā)明的治療，所考慮的病毒是由于感染而產(chǎn)生TNF的病毒，或是對(duì)于TNF的抑制(例如利用抑制TNF的式(I)化合物直接或間接地減少?gòu)?fù)制)敏感的病毒。這些病毒包括但不限于HIV-1、HIV-2和HIV-3，巨細(xì)胞病毒(CMV)，流感病毒，腺病毒和皰疹族病毒，例如但不限于帶狀皰疹和單純性皰疹病毒。因此，在另一方面，本發(fā)明涉及一種治療感染了人類免疫缺陷病毒(HIV)的哺乳動(dòng)物的方法，該方法包括給這些哺乳動(dòng)物施用有效量的抑制TNF的式(I)化合物或其可藥用的鹽。
式(I)化合物也可以用來(lái)與需要抑制TNF產(chǎn)生的非人類哺乳動(dòng)物的獸醫(yī)治療相結(jié)合。對(duì)于在動(dòng)物中預(yù)防或治療的TNF介導(dǎo)的疾病，包括上面提到的那些疾病，但特別是病毒感染。這些病毒的實(shí)例包括但不限于慢性病毒感染，例如馬傳染性貧血病毒，羊關(guān)節(jié)炎病毒，綿羊脫髓鞘性腦白質(zhì)炎病毒，或梅迪病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染，例如但不限于貓免疫缺陷病毒(FIV)、牛免疫缺陷病毒，犬免疫缺陷病毒或其它逆轉(zhuǎn)錄病毒感染。
式(I)化合物也可以局部使用，用于治療或預(yù)防由于細(xì)胞因子(如IL-1或TNF)的過(guò)量產(chǎn)生而介導(dǎo)或加重的表面疾病，如關(guān)節(jié)紅腫、濕診、牛皮癬及其它皮膚炎癥，例如曬傷；眼部炎癥，包括結(jié)膜炎；發(fā)熱，疼痛及與發(fā)炎有關(guān)的其它病癥。
式(I)化合物還顯示了抑制IL-8(白細(xì)胞介素-8，NAP)的產(chǎn)生。因此，在另一方面，本發(fā)明涉及一種在哺乳動(dòng)物中抑制IL-8產(chǎn)生的方法，該方法包括給需要抑制的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(I)化合物或其可藥用的鹽。
在很多疾病狀態(tài)中IL-8的過(guò)量或無(wú)控制產(chǎn)生與疾病的加重和/或發(fā)生有關(guān)。這些疾病的特征是大量嗜中性白細(xì)胞滲入，例如牛皮癬、炎癥性腸病、哮喘、心臟和腎的再灌注損傷、成人呼吸窘迫綜合癥。血栓形成和腎小球性腎炎。所有這些疾病都與IL-8的產(chǎn)生增多有關(guān)，IL-8的產(chǎn)生是嗜中性白細(xì)胞進(jìn)入發(fā)炎部位的趨化性的原因。與其它的炎性細(xì)胞因子(IL-1，TNF和IL-6)不同，IL-8具有促進(jìn)嗜中性白細(xì)胞趨化性和活化的獨(dú)特性能。因此，抑制IL-8的產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致嗜中性白細(xì)胞滲入的直接減少。
式(I)化合物以足以抑制細(xì)胞因子(特別是IL-1、IL-6、IL-8或TNF)的產(chǎn)生的數(shù)量給藥，以便將其下調(diào)到正常水平，或者在某些情形調(diào)節(jié)到正常水平之下，從而改善防止疾病狀態(tài)。IL-1、IL-6、IL-8或TNF的異常含量，例如在本發(fā)明的情況下，包括(i)游離(未與細(xì)胞結(jié)合的)IL-1、IL-6、IL-8或TNF的含量大于或等于每ml 10-12克；(ii)任何與細(xì)胞結(jié)合的IL-1、IL-6、IL-8或TNF；或(iii)在分別產(chǎn)生IL-1、IL-6、IL-8或TNF的細(xì)胞或組織中存在的IL-1、IL-6、IL-8或TNF超過(guò)基態(tài)水平。
關(guān)于式(I)化合物是細(xì)胞因子(特別是IL-1、IL-6、IL-8和TNF)的抑制劑的發(fā)現(xiàn)，是以式(I)化合物在下述的體外試驗(yàn)中對(duì)IL-1、IL-8和TNF產(chǎn)生的影響為根據(jù)的。
這里所用的術(shù)語(yǔ)“抑制IL-1(IL-6、IL-8或TNF)的產(chǎn)生”是指a)通過(guò)對(duì)所有細(xì)胞(包括但不限于單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞)體內(nèi)釋放細(xì)胞因子的抑制作用，將人體內(nèi)的細(xì)胞因子(IL-1、IL-6、IL-8或TNF)的過(guò)高含量減小到正常含量或正常含量以下；b)在基因水平上，將人體內(nèi)過(guò)高的細(xì)胞因子(IL-1、IL-6、IL-8或TNF)含量下調(diào)到正常水平或正常水平以下；c)作為翻譯后的行動(dòng)，通過(guò)對(duì)細(xì)胞因子(IL-1、IL-6、IL-8或TNF)直接合成的抑制進(jìn)行減量調(diào)節(jié)；或d)在翻譯水平上將人體內(nèi)細(xì)胞因子(IL-1、IL-6、IL-8或TNF)的過(guò)高含量下調(diào)到正常水平或正常水平以下。
這里所用的術(shù)語(yǔ)“TNF介導(dǎo)的疾病或疾病狀態(tài)”是指TNF在其中起作用的任何和所有疾病狀態(tài)，TNF或是通過(guò)它本身的產(chǎn)生物起作用，或是通過(guò)它引起另一種單核因子釋放(例如但不限于IL-1、IL-6或IL-8)而起作用。若某一疾病狀態(tài)中例如IL-1是主要組分，且其產(chǎn)生或作用隨TNF而加重或減少，則被認(rèn)為是由TNF介導(dǎo)的疾病狀態(tài)。
這里所用的術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞因子”是指任何一種分泌的多肽，它影響細(xì)胞的功能，并且是一種對(duì)免疫、炎癥或造血響應(yīng)中細(xì)胞間相互作用進(jìn)行調(diào)制的分子。細(xì)胞因子包括但不限于單核因子和淋巴因子，不管它們產(chǎn)生于何種細(xì)胞。例如，單核因子一般是指由單核細(xì)胞(例如巨噬細(xì)胞和/或單核細(xì)胞)分泌和產(chǎn)生的。但是，很多其它的細(xì)胞也產(chǎn)生單核因子，例如天然殺傷細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜中性白細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、腦星形細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、表皮角質(zhì)形成細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。淋巴因子一般是指由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的。細(xì)胞因子的實(shí)例包括但不限于白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腫瘤壞死因子-β(TNF-β)。
這里所用的術(shù)語(yǔ)“干擾細(xì)胞因子”或“抑制細(xì)胞因子數(shù)量”是指有效數(shù)量的式(I)化合物，當(dāng)施加于患者以便預(yù)防或治療由于細(xì)胞因子的產(chǎn)生過(guò)量或失控而加重或發(fā)生的疾病狀態(tài)時(shí)，能使體內(nèi)細(xì)胞因子的含量減小到正常水平或正常水平以下。
在術(shù)語(yǔ)“抑制細(xì)胞因子，用來(lái)治療受HIV感染的人”中提到的細(xì)胞因子是這樣一種細(xì)胞因子，它影響(a)T細(xì)胞活化的引發(fā)和/或維持以及/或活化的T細(xì)胞介導(dǎo)的HIV基因表達(dá)和/或復(fù)制，和/或(b)任何與細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病有關(guān)的問(wèn)題，例如惡病質(zhì)或肌肉退化。
因?yàn)門NF-β(也稱作淋巴毒素)與TNF-α(也稱作惡液質(zhì)素)有緊密的結(jié)構(gòu)同源性，而且它們都誘發(fā)類似的生物響應(yīng)且結(jié)合在相同的細(xì)胞受體上，所以TNF-α和TNF-β都受本發(fā)明化合物的抑制，故除非特地說(shuō)明，在這里均統(tǒng)稱為“TNF”。
為了將式(I)化合物或其可藥用鹽用于治療，應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)操作將其配制成藥物組合物。因此，本發(fā)明還涉及含有有效、無(wú)毒數(shù)量的式(I)化合物和可藥用載體或稀釋劑的藥物組合物。
式(I)化合物，它的可藥用鹽以及含有它們的藥物組合物可以方便地按照任何一種常規(guī)用藥途徑用藥，例如口服、局部用藥、腸道外用藥或吸入用藥。式(I)化合物可以按照常規(guī)步驟與標(biāo)準(zhǔn)的藥物載體混合，制成常規(guī)的劑型用藥。式(I)化合物也可以與已知的第二種治療活性化合物組合，以常規(guī)劑量給藥。這些步驟可能涉及適當(dāng)時(shí)將各組分混合、研磨、壓制或溶解成所要的制劑。應(yīng)該理解，可藥用載體或稀釋劑的形式或特點(diǎn)是由它要與之組合的活性成分的數(shù)量、給藥途徑及其它公知的變量決定的。載體必須是在能與配方中的其它成分相容且對(duì)接受者無(wú)害的意義上“可藥用的”。
使用的藥物載體可以是例如固體或液體。固體載體的實(shí)例有乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸等。液體載體的實(shí)例有糖漿、花生油、橄欖油、水等。類似地，載體或稀釋劑可以包括技術(shù)上公知的緩釋物質(zhì)，例如甘油單硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯本身或與蠟的混合物。
許多種藥物形式可以采用。例如，如果使用固體載體，制劑可以被壓片，以粉末或小粒形式裝在硬明膠膠囊中，或制成錠劑或軟錠劑。固體載體的數(shù)量可以有很大變化，但優(yōu)選為約25mg至約1g。若使用液體載體，則制劑的形式為糖漿、乳液、軟明膠膠囊、滅菌的可注射液體如安瓿劑或非水液體懸浮液。
式(I)化合物可以局部用藥，即非全身性給藥。這包括將式(I)化合物外部施用于表皮或口腔前庭以及將這樣一種化合物滴注到耳、眼和鼻中，因此化合物不會(huì)大量進(jìn)入血流內(nèi)。相反，全身性給藥是指口服、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)和肌內(nèi)給藥。
適合局部給藥的制劑包括適合透過(guò)皮膚到達(dá)發(fā)炎部位的液體或半液體制劑，例如擦劑、洗劑、乳油、軟膏或糊劑，以及適合對(duì)眼、耳或鼻用藥的滴劑。對(duì)于局部用藥，活性組分可以占制劑重量的0.001-10％，例如1-2％。占到多達(dá)10％重量也是可以的，但優(yōu)選少于5％，最好是少于制劑重量的0.1-1％。
本發(fā)明的洗劑包括適合用于皮膚或眼的那些洗劑。眼用洗劑可以含有滅菌水溶液，其中任選地含有殺菌劑，它可以用類似于制備滴劑的方法制備。用于皮膚的洗劑或擦劑還可以含有一種用以加速干燥和冷卻皮膚的物質(zhì)，例如醇或丙酮，和/或一種濕潤(rùn)劑如甘油或一種油，例如蓖麻油或花生油。
本發(fā)明的乳油、軟膏或糊劑是外用的活性組分半固體制劑。它們的制備方法可以是，將細(xì)粉或粉末形式的活性組分本身或在水或非水流體中的溶液或懸浮液，藉助適當(dāng)?shù)臋C(jī)械，與一種油質(zhì)或非油質(zhì)的基料混合。此基料可以含有烴(例如硬石蠟、軟石蠟或液體石蠟)，甘油，蜂蠟，金屬皂；膠漿；天然來(lái)源的油，如杏仁油、玉米油、花生油、蓖麻油或橄欖油；羊毛脂或其衍生物或脂肪酸(例如硬脂酸或油酸)與一種醇如丙二醇或大粒凝膠。制劑中可以摻入任何合適的表面活性劑，例如陰離子型、陽(yáng)離子型或非離子型表面活性劑，如脫水山梨醇酯或其聚氧乙烯衍生物。還可以含有懸浮劑，例如天然樹(shù)膠，纖維素衍生物或無(wú)機(jī)材料，如二氧化硅，以及其它成分如羊毛脂。
本發(fā)明的滴劑可以含有滅菌的水基或油基溶液或懸浮液，它們可以通過(guò)將活性組分溶在合適的水溶液中制備，溶液中溶有殺菌劑和/或殺真菌劑和/或任何其它合適的防腐劑，且優(yōu)選含有表面活性劑。隨后可以將形成的溶液過(guò)濾澄清，轉(zhuǎn)移到合適的容器中封口，并用壓熱法或保持在98-100℃下半小時(shí)滅菌。或者是，可以將溶液過(guò)濾滅菌并用無(wú)菌技術(shù)轉(zhuǎn)移到容器中。適合加到滴劑中的殺菌劑和殺真菌劑的實(shí)例是硝酸苯汞或乙酸苯汞(0.002％)，氯化苯甲烴銨(0.1％)和洗必太乙酸鹽。油質(zhì)溶液制劑的合適溶劑包括甘油、稀釋的醇及丙二醇。
式(I)化合物可以腸道外用藥，即，以靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)、直腸內(nèi)、陰道內(nèi)或腹膜內(nèi)方式給藥。腸道外用藥中一般優(yōu)選皮下和肌內(nèi)給藥。對(duì)于這種給藥的合適劑型可以用常規(guī)技術(shù)制備。式(I)化合物可以用吸入法給藥，即，通過(guò)鼻內(nèi)或口腔吸入給藥。這種給藥的合適制劑，如氣溶膠制劑或計(jì)量好的劑量吸入器，可以用常規(guī)技術(shù)制備。
對(duì)于這里公開(kāi)的式(I)化合物的所有用法，口服用藥的日劑量以每kg總體重約0.01-約80mg為宜，優(yōu)選約0.1-30mg/kg，更優(yōu)選約0.2-15mg/kg。腸道外用藥的日劑量為每kg總體重約0.01-約80mg，優(yōu)選約0.1-約30mg/kg，更優(yōu)選約0.2-15mg/kg。局部用藥的日劑量?jī)?yōu)選為0.1-150mg，每天1-4次，優(yōu)選每天2或3次。吸入用藥的日劑量?jī)?yōu)選為每天每kg體重約0.01-約1mg。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到，式(I)化合物或其可藥用鹽的各個(gè)劑量的最佳量及時(shí)間間隔應(yīng)根據(jù)所治療的病癥的本質(zhì)和程度，用藥的劑型、途徑和部位，以及所治療的具體患者的情況決定，此最佳值可以用常規(guī)技術(shù)確定。本領(lǐng)域技術(shù)人員還應(yīng)理解，最佳治療過(guò)程，即，式(I)化合物或其可藥用鹽在一定的天數(shù)內(nèi)每天給藥的次數(shù)，可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)常規(guī)的確定治療過(guò)程的試驗(yàn)來(lái)確定。
式(I)新化合物也可以與需要抑制細(xì)胞因子產(chǎn)生的非人哺乳動(dòng)物的獸醫(yī)藥治療結(jié)合使用。特別是，用于治療或預(yù)防動(dòng)物中細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病，包括在治療方法部分提到的各種疾病狀態(tài)，但特別是病毒感染。這類病毒感染的實(shí)例包括但不限于慢病毒感染，例如馬傳染性貧血病毒、羊關(guān)節(jié)炎病毒，綿羊脫髓鞘性腦白質(zhì)炎病毒，或梅迪病毒，或者逆轉(zhuǎn)錄病毒感染，例如但不限于貓免疫缺陷病毒(FIV)，牛免疫缺陷病毒，或犬免疫缺陷病毒或其它逆轉(zhuǎn)錄病毒感染。
現(xiàn)在將參照以下生物實(shí)施例描述本發(fā)明，它們只是示例說(shuō)明而不是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。生物實(shí)施例本發(fā)明化合物抑制細(xì)胞因子的作用由以下體外試驗(yàn)確定白細(xì)胞介素-1(IL-1)根據(jù)Colotta等的方法〔免疫學(xué)雜志(J.Immunol.)，132，936(1984)〕，由志愿供血者的新鮮血制品或由血庫(kù)的血沉棕黃層分離和純化人外周血單核細(xì)胞。將這些單核細(xì)胞(1×106)按1-2×106/ml孔的濃度放入24孔板中。令細(xì)胞粘附2小時(shí)，隨后溫和地洗掉未粘附的細(xì)胞。接著向細(xì)胞中加入試驗(yàn)化合物，1小時(shí)后加入脂多糖(50ng/ml)，培養(yǎng)物在37℃下再培養(yǎng)24小時(shí)。這段時(shí)間結(jié)束時(shí)取出培養(yǎng)物上清液，除掉細(xì)胞及所有碎片。隨后立即測(cè)定培養(yǎng)物上清液的IL-1生物活性，采用Simon等的方法(免疫方法雜志(J.Immunol.Methods)，84，85(1985)，根據(jù)IL-1與A23187離子載體協(xié)同一致地激發(fā)白細(xì)胞介素2生成細(xì)胞系(EL-4)分泌IL-2的能力)或Lee等人的方法(免疫治療學(xué)雜志(J.Immuno Therapy)，6(1)1-12(1990)，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)。腫瘤壞死因子(TNF)按照Colotta.R.等的方法(免疫學(xué)雜志(J.Immunol，132(2)，936(1984))，由血庫(kù)的血沉棕黃層或血小板電泳殘余物分離和純化人外周血單核細(xì)胞。將此單核細(xì)胞按1×106細(xì)胞/ml培養(yǎng)基/孔放入24孔的多孔盤(pán)中。令細(xì)胞粘著1小時(shí)后，抽吸出上層清液并加入新鮮的培養(yǎng)基(1ml，RPMI-1640，Whitaker Biomedical Products，Whitaker，CA)，培養(yǎng)基中含有1％胎牛血清和青霉素及鏈霉素(10單位/ml)。在有或無(wú)劑量范圍為1nm-10mM的試驗(yàn)化合物存在下將細(xì)胞溫育45分鐘(化合物加溶在二甲基亞砜/乙醇中，使得培養(yǎng)基中最終的溶劑濃度為0.5％二甲基亞砜/0.5％乙醇)。然后加入細(xì)菌脂多糖(大腸埃希桿菌055B5〔LPS〕Sigma化學(xué)公司，100ng/ml，在10ml磷酸鹽緩沖液中)，培養(yǎng)物在5％CO2培養(yǎng)箱中于37℃下培養(yǎng)16-18小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束后將上清液與細(xì)胞分離，在3000rpm下離心以去掉細(xì)胞碎片。隨后如WO 92/10190和Becker等在免疫學(xué)雜志(J.Immunol.)，1991，147，4307中所述，用放射性免疫測(cè)定法或酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)定上清液中TNF活性。
IL-1和TNF抑制活性似乎與式(I)化合物在介導(dǎo)花生四烯酸代謝抑制中的性質(zhì)相關(guān)。而且具有有效的環(huán)加氧酶和/或脂氧合酶抑制活性的非甾族消炎藥在抑制前列腺素產(chǎn)生和/或白三烯合成方面的能力，并不意味著該化合物在無(wú)毒性的劑量下一定也抑制TNF或IL-1產(chǎn)生。白細(xì)胞介素-8(IL-8)將原始的人臍帶表皮細(xì)胞(HUVEC)(Cell Systems，Kirland，Wa)保持在培養(yǎng)基中，培養(yǎng)內(nèi)補(bǔ)加有15％胎牛血清和含有aFGF和肝素的1％CS-HBGF。隨后將細(xì)胞稀釋20倍，再取250μl置于涂覆了凝膠的96孔板中。使用前，用新鮮的培養(yǎng)基(200μl)替換該培養(yǎng)基。按四份重復(fù)樣向每孔中加入緩沖液或試驗(yàn)化合物(25μl，濃度為1-10μM)，在37℃和5％CO2的氣氛下于加濕的培養(yǎng)箱中將板培養(yǎng)6小時(shí)。培養(yǎng)期結(jié)束時(shí)，取出上清液，用得自R&D Systems公司(Minneapolis，MN)的IL-8 ELISA試劑盒測(cè)定IL-8濃度。所有的數(shù)據(jù)均是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線列出多個(gè)樣品的平均值(ng/ml)。如果需要的話，利用非線性回歸分析得到IC50值。細(xì)胞因子特異性結(jié)合蛋白測(cè)定發(fā)展了一種放射性競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合測(cè)定法以便為結(jié)構(gòu)-活性研究提供一種高度可重復(fù)的初步篩選。此測(cè)定法比使用剛分離的人單核細(xì)胞作為細(xì)胞因子源和用ELISA定量的常規(guī)生物測(cè)定法有很多優(yōu)點(diǎn)。除了測(cè)定要容易得多以外，這種結(jié)合測(cè)定已被廣泛證實(shí)與生物測(cè)定的結(jié)果高度相關(guān)。一種特定的且可重復(fù)的細(xì)胞因子抑制劑結(jié)合測(cè)定是用得自THP.1細(xì)胞的可溶性胞質(zhì)級(jí)分和一種放射性標(biāo)記化合物進(jìn)行的。1993年9月提交的美國(guó)專利申請(qǐng)USSN 08/123175(Lee等)；1994年9月16日提交的PCT 94/10529(Lee等)；以及Lee等，自然(Nature)，300(72)，739-746(1994年12月)，這些文獻(xiàn)的內(nèi)容在本文中全文引用作為參考，它們描述了上面提到的方法，這種方法用來(lái)篩選藥物，以便鑒定與細(xì)胞因子特異結(jié)合蛋白(以后稱作CSBP)相互作用并結(jié)合的那些化合物。但是，就本發(fā)明而言，這種結(jié)合蛋白可以是在溶液中的分離形式，或是固定化的形式，或者可以通過(guò)基因工程表達(dá)在重組宿主細(xì)胞的表面上，例如在噬菌體展示體系中或作為融合蛋白標(biāo)記物?；蛘呤?，在篩選方案中可以使用整個(gè)細(xì)胞或含有CSBP的胞質(zhì)級(jí)分。不管結(jié)合蛋白的形式如何，許多化合物都在足以形成化合物/結(jié)合蛋白復(fù)合物的條件下與結(jié)合蛋白質(zhì)接觸，并檢測(cè)能形成、增強(qiáng)或干擾該復(fù)合物的化合物。
在這一結(jié)合性試驗(yàn)中，代表性的式(I)化合物實(shí)施例2-28，全都顯示出正的抑制活性。前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合成酶-2(PGHS-2)測(cè)定以下試驗(yàn)描敘了測(cè)定式(I)化合物對(duì)于在LPS激發(fā)的人單核細(xì)胞中人的PGHS-2蛋白質(zhì)表達(dá)的抑制作用的方法方法利用經(jīng)過(guò)Ficoll和Percoll密度梯度的離心作用，從血沉棕黃層中分離出人外周血單核細(xì)胞。將細(xì)胞接種在24孔板上，每孔2×106個(gè)，令其在補(bǔ)加有1％人AB血清、20mM L-谷氨酰胺、青霉素-鏈霉素和10mM HEPES的RPMI中粘著1小時(shí)。加入各種濃度的化合物并在37℃下培養(yǎng)10分鐘。按每孔50ng加入脂多糖(誘發(fā)酶表達(dá))并在37℃下培養(yǎng)過(guò)夜。除去上清液，細(xì)胞在冷的PBS中洗一次。將細(xì)胞在100μl冰冷的裂解緩沖液(50mM Tris/HCl，pH 7.5，150mMNaCl，1％NP40，0.5％脫氧膽酸鈉，0.1％SDS，300μg/ml DNA酶，0.1％Triton X-100，1mM PMSF，1mM亮抑酶肽，1mM抑胃酶肽)中裂解。將裂解物離心(10.000xg下10分鐘，4℃)以除去碎片，可溶性級(jí)分進(jìn)行SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析(12％凝膠)將在凝膠上分離出的蛋白質(zhì)利用電泳方法(60伏，2小時(shí))轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。將該膜在含有5％脫脂奶粉的PBS/0.1％吐溫20中預(yù)處理1小時(shí)。在PBS/吐溫緩沖液中洗三次后，將膜用稀釋度為1∶2000的對(duì)PGHS-2的單特異性抗血清或稀釋度為1∶1000的對(duì)PGHS-1的抗血清在含1％BSA的PBS/吐溫中的溶液培養(yǎng)1小時(shí)并連續(xù)搖蕩。將膜用PBS/吐溫洗三次，然后在連續(xù)搖動(dòng)下用與辣根過(guò)氧化物酶綴合的對(duì)兔免疫球蛋白的驢抗血清(Amersham)在含1％BSA的PBS/吐溫中稀釋度為1∶3000的溶液培養(yǎng)1小時(shí)。隨后用PBS/吐溫洗膜三次，使用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)系統(tǒng)(Amersham)檢測(cè)前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合成酶-2的表達(dá)水平。結(jié)果試驗(yàn)了以下化合物并發(fā)現(xiàn)在此試驗(yàn)中具有活性(即，對(duì)LPS誘發(fā)的PGHS-2蛋白質(zhì)表達(dá)的抑制效力在量級(jí)上與所述試驗(yàn)中提到的對(duì)細(xì)胞因子產(chǎn)生的抑制作用相似)6-(4-氟苯基)-2，3-二氫-5-(4-吡啶基)咪唑并〔2，1-b〕噻唑；以及地塞米松。
幾種化合物在試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)無(wú)活性(直至10μM)2-(4-甲基亞磺酰苯基)-3-(4-吡啶基)-6，7-二氫(5H)吡咯并〔1，2-a〕咪唑；環(huán)戊苯吡酮；1-苯基-3-吡唑烷酮和NDGA。所試驗(yàn)的這些化合物在類似的實(shí)驗(yàn)中均不能抑制PGHS-1或cPLA2蛋白質(zhì)含量。創(chuàng)傷性腦損傷中的TNF-α測(cè)定本試驗(yàn)提供了在實(shí)驗(yàn)誘發(fā)大鼠側(cè)向流體撞擊創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)之后跟蹤進(jìn)行的對(duì)腫瘤壞死因子mRNA在特定腦區(qū)域內(nèi)表達(dá)的檢測(cè)。成年的Sprague-Dawley大鼠(n＝42)用戊巴比妥鈉麻醉(60mg/kg，腹膜內(nèi))并受到中等強(qiáng)度(2.4大氣壓)的側(cè)向流體撞擊腦傷害，傷害集中在左顳頂皮層(n＝18)，或受到“假”處理(麻醉和手術(shù)，但無(wú)傷害，n＝18)。在傷害后1、6和24小時(shí)將動(dòng)物斷頭殺死，取出腦子，制備以下組織樣品左(傷害的)頂骨皮層(LC)，在對(duì)側(cè)右皮層中的相應(yīng)部位(RC)，與受損頂骨皮層相鄰的皮層(LA)，右皮層中相應(yīng)的相鄰部位(RA)、左海馬(LH)和右海馬(RH)。分離出全RNA并進(jìn)行Northern印跡雜交，相對(duì)于TNF-α陽(yáng)性對(duì)照樣RNA(巨噬細(xì)胞＝100％)定量。在傷害1小時(shí)后在受創(chuàng)的半球內(nèi)觀察到以下組織中TNF-αmRNA表達(dá)顯著增加LH(陽(yáng)性對(duì)照的104±17％，P＜0.05，與假處理組相比)，LC(105±21％，P＜0.05)和LA(69±8％，P＜0.01)。在LH(46±8％，P＜0.05)、LC(30±3％，P＜0.01)和LA(32±3％，P＜0.01)中于傷害后6小時(shí)也觀察到TNF-αmRNA表達(dá)增加，24小時(shí)后消退。在對(duì)側(cè)腦半球，傷害后1小時(shí)在RH(46±2％，P＜0.01)，RC(4±3％)和RA(22±8％)中，以及傷害后6小時(shí)在RH(28±11％)，RC(7±5％)和RA(26±6％，P＜0.05)中TNF-αmRNA的表達(dá)增加，但24小時(shí)后無(wú)增加。假處理(動(dòng)手術(shù)但無(wú)傷害)組或首次用于實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物中，在任何時(shí)間任一半球中六個(gè)腦區(qū)里的任何一個(gè)都未觀察到TNF-αmRNA表達(dá)的一致的變化。這些結(jié)果表明，在與矢狀面平行的流體撞擊腦傷害之后，特定腦區(qū)域內(nèi)的TNF-αmRNA的時(shí)間表達(dá)改變，這包括未受創(chuàng)傷的腦半球的區(qū)域。因?yàn)門NF-α能誘發(fā)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)并激發(fā)其它細(xì)胞因子自活化的星形細(xì)胞中釋放，所以TNF-α基因表達(dá)的這種創(chuàng)傷后變化在對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷的急性和再生性響應(yīng)中都起重量作用。IL-βmRNA的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)傷害模型此試驗(yàn)鑒定了在大鼠經(jīng)受實(shí)驗(yàn)性側(cè)向流體撞擊創(chuàng)傷性腦傷害(TBI)之后特定腦區(qū)域內(nèi)白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)mRNA的區(qū)域表達(dá)。用戊巴比妥鈉(60mg/kg，腹膜內(nèi))將成年Sprague-Dawley鼠(n＝42)麻醉，集中在左顳頂皮層(n＝18)進(jìn)行中等強(qiáng)度(2.4大氣壓)的側(cè)向流體撞擊腦傷害，或進(jìn)行“假”處理(麻醉和手術(shù)，無(wú)傷害)。在傷害后1、6和24小時(shí)處死動(dòng)物，取腦，制備在(受傷的)頂骨皮層(LC)，對(duì)側(cè)右皮層的相應(yīng)部位(RC)、與受傷頂骨皮層相鄰的部位(LA)，右方皮層中的相應(yīng)部位(RA)、左海馬(LH)和右海馬(RH)的組織樣品。分離出全RNA并進(jìn)行Northern印跡雜交，腦組織IL-1βmRNA的量用裝在同一凝膠上的IL-1β正巨噬細(xì)胞RNA的相對(duì)放射性百分?jǐn)?shù)表示。在腦傷害1小時(shí)后，在受傷的半球內(nèi)的LC(20.0±0.7％陽(yáng)性對(duì)照，n＝6，P＜0.05，與假處理的動(dòng)物相比)，LH(24.5±0.9％，P＜0.05)和LA(21.5±3.1％，P＜0.05)中觀察到IL-1β mRNA表達(dá)的顯著而重大的增加，在LC(4.0±0.4％，n＝6，P＜0.05)和LH(5.0±1.3％，P＜0.05)中保持增高到傷害后6小時(shí)。在假處理或首次用于實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物中，各個(gè)腦部位中均未觀察到IL-1βmRNA的表達(dá)。這些結(jié)果表明，在創(chuàng)傷性腦傷害后，IL-1βmRNA的時(shí)間表達(dá)區(qū)域性地在特定腦區(qū)內(nèi)被激發(fā)。細(xì)胞因子(如IL-1β)中的這些區(qū)域性變化在腦損傷的創(chuàng)傷后病理性或再生性后遺癥中起作用。合成實(shí)施例現(xiàn)在將參照以下實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明，這些實(shí)施例只供示例說(shuō)明，并非是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。除非另外指明所有的溫度均為攝氏度，溶劑均為可得到的最高純度，所有的反應(yīng)均在氬氣氛中于無(wú)水條件下進(jìn)行。
在實(shí)施例中，所有的溫度均為攝氏度(℃)除非另外說(shuō)明，質(zhì)譜是用快原子轟擊法在一臺(tái)VG Zab質(zhì)譜儀上進(jìn)行的。1H-NMR(此后稱為“NMR”)譜是在250MHz下用一臺(tái)Bruker AM250或AM400核磁共振譜儀記錄的。多重性的表示是s＝單峰，d＝雙峰，t＝三峰，q＝四重峰，m＝多峰，br表示寬信號(hào)。Sat代表飽和溶液，eq表示試劑的摩爾當(dāng)量相對(duì)于基本反應(yīng)物的比例?？焖偕V是在Merck硅膠60(230-400目)上進(jìn)行的。
實(shí)施例12-甲硫基嘧啶-4-甲醛a)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛縮二甲醇將丙酮醛縮二甲醇(19.2ml，159.1mmol)和N，N-二甲基甲酰胺縮二甲醇(21.12ml，159.1mmol)在500ml燒瓶中混合。在100℃下加熱4.5小時(shí)后，加入硫脲(11.0g，144.5mmol)，甲醇鈉(25％重量濃度的甲醇溶液，39.7ml，173mmol)和30ml甲醇，繼續(xù)在65℃下加熱。18小時(shí)后將溶液冷卻到25℃，于5分鐘內(nèi)加入甲基碘(10.8ml，173mmol)(放熱)。3小時(shí)后將溶液用250ml水稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×100ml)。將有機(jī)相合并，用Na2SO4干燥，濃縮，得到褐色油狀標(biāo)題化合物(26.8g，93％)。b)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛將2-甲硫基嘧啶-4-甲醛縮二甲醇(25g，125mmol)和3NHCl在40℃加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，加入固體NaHCO3中和，用乙酸乙酯萃取(5×500ml)。將合并的萃取液用Na2SO4干燥并濃縮。殘余物用快速層析法純化，用二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體狀標(biāo)題化合物；產(chǎn)量12g(62％)。
1H NMR(CDCl3)δ9.95(s，1H)，8.77(d，1H)，7.43(d，1H)，2.63(s，3H)；或c)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛將2-甲硫基嘧啶-4-甲醛縮二甲醇(30.0g，150mmol)溶于300ml冰乙酸和3ml濃硫酸中，在80℃下加熱。10小時(shí)后，將溶液冷卻到25℃，減壓除去乙酸。殘余物稀釋在200ml CH2Cl2中，用飽和NaHCO3(3×50ml)、水(50ml)和鹽水(50ml)洗。有機(jī)物用MgSO4干燥，濃縮，得到褐色油狀標(biāo)題化合物；產(chǎn)量22.1g(96％)；或d)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛縮-甲醇-乙酸向2-甲硫基嘧啶-4-甲醛縮二甲醇(78g，0.39mol)在乙酸酐(105ml)中的溶液里加入濃硫酸(2ml)，將反應(yīng)混合物加熱回流3小時(shí)。冷卻至環(huán)境溫度后，減壓蒸發(fā)溶劑。殘余物用乙酸乙酯漿化并過(guò)濾；將濾液蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，為褐色油狀物；產(chǎn)量78g(88％)1H NMR(CDCl3)δ8.60(d，1H)，7.15(d，1H)，6.50(s，1H)，3.60(s，3H)，2.60(s，3H)，2.20(s，3H)。e)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛向2-甲硫基嘧啶-4-甲醛縮-甲醇-乙酸(53g，0.23mol)的溶液中加入甲醇鈉(5.5g，0.098mol)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌3小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑，殘余物分配在乙酸乙酯和水之中。水相用乙酸乙酯萃取4次，合并的有機(jī)萃取液用Na2SO4干燥，過(guò)濾，濃縮。殘余物進(jìn)行快速層析，用50％的乙酸乙酯/己烷洗脫，得到灰白色固體的標(biāo)題化合物；產(chǎn)量33g(91％)。f)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛將2-甲硫基嘧啶-4-甲醛縮-甲醇-乙酸(46g，0.20mol)在濃鹽酸(6ml)中的溶液于環(huán)境溫度下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物小心地用碳酸氫鈉飽和水溶液中和并用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用鹽水洗，用MgSO4干燥，減壓蒸發(fā)。殘余物流過(guò)硅膠填料，用20％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到白色固體狀標(biāo)題化合物，產(chǎn)率90％。
實(shí)施例25-〔(2-芐氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑a)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(1-甲基哌啶-4-基)亞胺將2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(5.6g，36mmol)和4-氨基-1-甲基哌啶二氫氯化物(6.73g，36mmol)溶在200ml CH2Cl2中，加入NaHCO3(10.6g，126mmol)。20小時(shí)后過(guò)濾溶液并濃縮，得到8.9g(98％)褐色油狀標(biāo)題化合物。b)4-氟苯基甲苯磺酰甲基甲酰胺向?qū)妆絹喕撬徕c鹽(30g)的水(100ml)懸浮液中加入甲基叔丁基醚(50ml)，隨后逐滴加入濃鹽酸(15ml)。攪拌5分鐘后分出有機(jī)相，水相用甲基叔丁基醚萃取。將有機(jī)相用Na2SO4干燥，濃縮近干。加入己烷，收集形成的沉淀，得到對(duì)甲苯亞磺酸；產(chǎn)量22g。
將對(duì)甲苯亞磺酸(22g，140.6mmol)、對(duì)氟苯甲醛(22ml，206mmol)、甲酰胺(20ml，503mmol)和樟腦磺酸(4g，17.3mmol)混合并在60℃下攪拌18小時(shí)，將所形成的固體破碎，與甲醇(35ml)和己烷(82ml)的混合物一起攪拌，然后過(guò)濾。將固體再懸浮于甲醇/己烷(1∶3，200ml)中并激烈攪拌以破碎剩下的大塊。過(guò)濾得到標(biāo)題化合物(27g，62％產(chǎn)率)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.13(s，1H)，7.71(d，2H)，7.43(dd，2H)，7.32(d，2H)，7.08(t，2H)，6.34(d，1H)，2.45(s，3H)。c)4-氟苯基甲苯磺酰甲基胩將4-氟苯基甲苯磺酰甲酰胺(2.01g，6.25mmol)在DMF(32ml)中冷卻到-10℃。加入POCl3(1.52ml，16.3mmol)，隨后逐滴加入三乙胺(4.6ml，32.6mmol)的DMF(3ml)溶液，保持內(nèi)部溫度低于-5℃。將混合物于1小時(shí)內(nèi)逐漸溫?zé)岬江h(huán)境溫度，倒入水中用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用NaHCO3飽和水溶液洗，用Na2SO4干燥，濃縮。所形成的殘余物用石油醚研制并過(guò)濾，得到標(biāo)題化合物(1.7g，產(chǎn)率90％)1H NMR(CDCl3)δ7.63(d，2H)，7.33(m，4H)，7.10(t，2H)，5.60(s，1H)，2.50(s，3H)。d)4-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲硫基-4-嘧啶基)咪唑在25℃下將叔丁胺(3.90ml，37.08mmol)迅速加到2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(1-甲基哌啶-4-基)亞胺(3.71g，14.83mmol)和4-氟苯基甲苯磺酰甲基胩(5.15g，17.8mmol)在50ml二甲氧基乙烷中的溶液里。14小時(shí)后將溶液用50ml乙酸乙酯稀釋，用50ml碳酸氫鈉飽和水溶液和鹽水(25ml)洗。將有機(jī)相用Na2SO4干燥并濃縮。粗殘?jiān)砸宜嵋阴?己烷中重結(jié)晶，得到淺褐色晶體的標(biāo)題化合物；產(chǎn)量2.85g(50％)1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.31(1H，d.J＝5.1Hz)，7.78(1H，s)，7.40(2H，m)，6.99(2H，t，J＝8.7Hz)，6.76(1H，d，J＝5.2Hz)，4.67(1H，m)，2.97(2H，m)，2.58(3H，s)，2.31(3H，s)，2.06(6H，m)。e)4-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基亞磺酰-4-嘧啶基)咪唑向4-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲硫基-4-嘧啶基)咪唑(2.7g，7.0mmol)在冰乙酸(150ml)中的溶液里加入過(guò)硫酸鉀(3.2g，7.0mmol)的水(75ml)溶液。在環(huán)境溫度下攪拌72小時(shí)后，反應(yīng)混合物用分批加入的濃氨水中和，用CH2Cl2萃取。有機(jī)萃取液用鹽水洗，用MgSO4干燥并濃縮。殘余物用乙醚研制，得到灰白色固體狀標(biāo)題化合物；產(chǎn)量2.3g(83％)。f)5-〔(2-芐氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑?qū)?-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基亞磺?；?4-嘧啶基)咪唑(0.25g，0.63mmol)和芐胺(1.0ml)在120℃下加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到環(huán)境溫度用乙醚研制，得到灰白色固體狀標(biāo)題化合物；產(chǎn)量0.23g(82％)ESMS m/z＝443(M++H)實(shí)施例34-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-〔2-(4-四氫噻喃基)氨基嘧啶-4-基〕咪唑按照實(shí)施例2(f)的步驟，只是用4-氨基四氫噻喃代替芐胺，得到棕色固體狀標(biāo)題化合物產(chǎn)率19％ESMS m/z＝453(M++H)。
實(shí)施例44-(4-氟苯基)-5-〔(2-羥基)乙氨基〕嘧啶-4-基-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑?qū)⒁掖及?2ml)和4-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基亞磺?；?4-嘧啶基)咪唑的混合物在120℃下加熱8小時(shí)。冷卻至環(huán)境溫度后，將反應(yīng)混合物倒入水中，收集形成的沉淀，用水洗，真空干燥，得到灰白色固體標(biāo)題化合物；產(chǎn)量0.19g(64％)ESMS m/z＝397(M++H)。
實(shí)施例55-〔(2-(3-氯芐氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑?qū)?-氯芐胺(2ml)和4-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基亞磺?；?4-嘧啶基)咪唑(0.20g，0.50mmol)的混合物在120℃下加熱18小時(shí)。冷卻至環(huán)境溫度后，將反應(yīng)混合物濃縮，殘余物在硅膠上進(jìn)行柱層析。依次用乙酸乙酯和20％甲醇/CH2Cl2洗脫，得到白色固體標(biāo)題化合物(0.160g，67％)，熔點(diǎn)＝199-201℃。
實(shí)施例65-〔(2-(1-萘基甲氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例5的步驟，但是用1-萘基甲胺代替3-氯芐胺，得到灰白色固體的標(biāo)題化合物，產(chǎn)率49％熔點(diǎn)＝215-216℃。
實(shí)施例75-〔(2-(1-芐基-4-哌啶氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例5的步驟，但是用4-氨基-1-芐基哌啶代替3-氯芐胺，得到灰白色固體的標(biāo)題化合物，產(chǎn)率59％ESMS m/z＝526(M++H)。
實(shí)施例84-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-〔2-〔3-(嗎啉代)丙基〕氨基嘧啶-4-基〕咪唑按照實(shí)施例2(f)的步驟，但是用4-(3-氨基丙基)嗎啉代替芐胺，得到褐色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)率55％ESMS m/z＝480(M++H)。
實(shí)施例95-〔(2-胡椒基氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例5的步驟，但是用胡椒基胺代替3-氯芐胺，得到灰白色固體的標(biāo)題化合物，產(chǎn)率55％ESMS m/z＝526(M++H)。
實(shí)施例105-〔(2-(5-氯色胺基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑?qū)?-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基亞磺酰基-4-嘧啶基)咪唑(0.20g，0.50mmol)和5-氯色胺(0.17g，0.60mol)在二甲基甲酰胺(15ml)中的溶液在110℃加熱18小時(shí)。冷卻到環(huán)境溫度后，減壓蒸發(fā)溶劑。殘余物進(jìn)行快速層析，用10％甲醇/CH2Cl2洗脫，隨后自乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物；產(chǎn)量0.061g(23％)ESMS m/z＝530(M++H)。
實(shí)施例115-〔(2-〔(1-乙氧羰基)哌啶-4-基〕氨基嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例5的步驟，但是用4-氨基-1-(乙氧羰基)哌啶代替，得到灰白色固體的標(biāo)題化合物，產(chǎn)率70％熔點(diǎn)＝130-132℃。
實(shí)施例125-〔(2-(4-哌啶氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑?qū)?-〔(2-(1-芐基-4-哌啶氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑(0.50g，0.95mmol)和10％鈀/碳(10％)的混合物在H2氣氛下攪拌18小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑，濾液減壓蒸發(fā)。將殘余物自乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體，產(chǎn)量0.98g(24％)熔點(diǎn)201-203℃。
實(shí)施例135-〔(2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)氨基嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例5的步驟，但是用4-氨基-2，2，6，6-四甲基哌啶代替3-氯芐胺，得到白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)率74％熔點(diǎn)101-102℃。
實(shí)施例144-(氟苯基)-5-〔2-(2-羥基)乙氨基嘧啶-4-基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑a)4-(4-氟苯基)-5-〔4-(2-甲基亞磺?；?嘧啶基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例19(c)的步驟，但是用4-(4-氟苯基)-5-〔4-(2-甲硫基)嘧啶基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑(實(shí)施例17b中制得)代替5-(2-甲硫基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-〔(1-叔丁氧羰基)-4-哌啶基)咪唑，得到黃色泡沫狀標(biāo)題化合物，產(chǎn)率53％。b)4-(氟苯基)-5-〔2-(2-羥基)乙氨基嘧啶-4-基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑?qū)?-(4-氟苯基)-5-〔4-(2-甲基亞磺酰基)嘧啶基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑(0.25g，0.57mmol)和乙醇胺在120℃下加熱18小時(shí)。減壓蒸發(fā)除掉多余的乙醇胺，殘余物倒入NaHCO3飽和水溶液中。收集所形成的沉淀，用水洗，空氣干燥，用乙醚研制，得到白色固體狀標(biāo)題化合物，產(chǎn)率60％。ESMS m/z＝439(M++H)。
實(shí)施例155-〔2-〔(3-溴苯基)氨基〕嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑在環(huán)境溫度和攪拌下，向3-溴苯胺(1.0g，5.8mmol)的甲苯(25ml)溶液中加入三甲基鋁(2M甲苯溶液，2.9ml，5.8mmol)。繼續(xù)攪拌至氣體不再放出(約半小時(shí))。加入4-(4-氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基亞磺酰基-4-嘧啶基)咪唑(0.58g，1.9mmol)。將形成的溶液加熱回流半小時(shí)，冷卻到環(huán)境溫度并倒入硅膠/CH2Cl3漿體中。過(guò)濾去除固體，用10％的甲醇/CH2Cl2洗。將合并的濾液濃縮，殘余物用快速層析法純化，用10％甲醇/CH2Cl2洗脫，得到白色固體標(biāo)題化合物；產(chǎn)量0.50g(52％)ESMS m/z＝507(M++H)。
實(shí)施例164-(氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕咪唑使用實(shí)施例15的步驟，但是用苯胺代替3-溴苯胺，得到白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)率37％。ESMS m/z＝429(M++H)。
實(shí)施例174-(氟苯基)-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕咪唑a)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(4-氨基-2，2，6，6-四甲基哌啶)亞胺將4-氨基-2，2，6，6-四甲基哌啶和2-甲硫基嘧啶-4-甲醛在二甲基甲酰胺中的混合物攪拌，得到的標(biāo)題化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。b)4-(4-氟苯基)-5-〔4-(2-甲硫基)嘧啶基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例18(d)的步驟，但是用2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(4-氨基-2，2，6，6-四甲基哌啶)亞胺代替2-N-甲氨基-4-甲醛(4-乙二醇縮酮環(huán)己基)亞胺，得到淺黃色固體的標(biāo)題化合物，產(chǎn)率64％。c)4-(4-氟苯基)-5-〔4-(2-甲基磺?；?嘧啶基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑?qū)?-(4-氟苯基)-5-〔4-(2-甲硫基)嘧啶基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑(1.2g，2.8mmol)溶在甲醇(11ml)中冷卻到4℃。加入過(guò)硫酸氫鉀制劑Oxone(5.2g，8.5mmol)的水(11ml)溶液，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?3℃。在此溫度下攪拌反應(yīng)1.75小時(shí)，倒入10％氫氧化鈉水溶液(50ml)中，用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。合并的有機(jī)萃取液用10％NaOH水溶液洗，用K2CO3干燥，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)快速層析(0-8％MeOH/CH2Cl2)得到標(biāo)題化合物，產(chǎn)率72％。d)4-(氟苯基)-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)-5-[[(2-苯基)氨基]嘧啶-4-基]咪唑按照實(shí)施例15的步驟，但是用4-(4-氟苯基)-5-〔4-(2-甲磺?；?嘧啶基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑代替4-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基亞磺?；?4-嘧啶基)咪唑，并且在80℃下將反應(yīng)物加熱4小時(shí)而不是在環(huán)境溫度下攪拌3小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，產(chǎn)率72％。ESMSm/z＝471(M++H)。
實(shí)施例185-〔2-(苯氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(4-氧代環(huán)己基)咪唑a)4-(1，3-二氧環(huán)戊基)環(huán)己酮肟向1，4-環(huán)已二酮多縮單乙二醇( 27.6g，177mmol)和羥胺鹽酸鹽(49.2g，708mmol)在水(250ml)中的混合物里分批加入Na2CO3(49.2g，547mmol)。攪拌1小時(shí)后，混合物用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用Na2SO4干燥，濃縮，得到標(biāo)題化合物，產(chǎn)量27.5g。b)1-氨基-4-(1，3-二氧環(huán)戊基)環(huán)己烷將4-(1，3-二氧環(huán)戊基)環(huán)己酮肟(27.5g，161mmol)、阮內(nèi)鎳(約13.5ml，乙醇懸浮液)和乙醇(200ml)混合并在50psi的H2下?lián)u蕩4小時(shí)。濾除催化劑，將濾液濃縮，得到無(wú)色油狀標(biāo)題化合物(23.6g，93％)1H NMR(CDCl3)δ2.64(m，1H)，1.75-1.25(m，12H)。c)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(4-乙二醇縮酮環(huán)己基)亞胺按照實(shí)施例19(a)的步驟，但是用1-氨基-4-(1，3-二氧環(huán)戊基)代替1-叔丁氧羰基-4-氨基哌啶，得到標(biāo)題化合物1H NMR(CDCl3)δ8.51(d，1H)，8.21(s，1H)，7.53(d，1H)，3.93(s，4H)，3.40(m，1H)，2.55(s，3H)，1.94-1.70(m，6H)，1.61(m，2H)。d)5-〔4-(2-甲硫基)嘧啶基〕-4-(4-氟苯基)-1-(4-乙二醇縮酮環(huán)己基)咪唑在0℃下向2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(4-乙二醇縮酮環(huán)己基)亞胺(2.0g，6.8mmol)在二甲基甲酰胺(10ml)中的混合物里加入4-氟苯基甲苯磺酰基甲基胩(1.96g，6.8mmol)和K2CO3(1.18g，8.57mmol)。混合物在0℃下攪拌3小時(shí)，隨后在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。加入乙酸乙酯，將反應(yīng)混合物過(guò)濾。濾液用鹽水洗，干燥、濃縮至近干。收集形成的晶體，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體(1.77g，61％)1H NMR(CDCl3)δ8.33(d，1H)，7.81(s，1H)，7.43(q，2H)，7.12(t，2H)，6.78(d，1H)，4.74(m，1H)，4.00(s，4H)，2.59(s，3H)，2.18(dd，2H)，2.04(dq，2H)，1.89(dd，2H)，1.70(dt，2H)。e)5-〔4-(2-甲基磺酰基)嘧啶基〕-4-(4-氟苯基)-1-乙二醇縮酮環(huán)己基)咪唑在0℃下向前面步驟中的化合物(0.20g，0.48mmol)在四氫呋喃(2ml)和甲醇(1ml)中的溶液里加入溶在水(2ml)中的過(guò)硫酸氫鉀制劑Oxone(0.36g，0.56mmol)。將混合物攪拌0.5小時(shí)，然后倒入10％NaOH中用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用Na2SO4干燥并濃縮。將殘余物用乙醚研制，過(guò)濾，得到白色固體標(biāo)題化合物(0.089g，45％產(chǎn)率)1H NMR(CDCl3)δ8.36(d，1H)，7.82(s，1H)，7.42(q，2H)，7.02(t，2H)，6.79(d，1H)，4.80(m，1H)，4.00(s，3H)，2.20(m，2H)，2.06(m，3H)，1.89(m，2H)，1.70(m，5H)。f)5-〔2-(苯氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(4-乙二醇縮酮環(huán)己基)咪唑按照實(shí)施例16的步驟，但是用5-〔4-(2-甲基亞磺?；?嘧啶基〕-4-(4-氟苯基)-1-乙二醇縮酮環(huán)己基)咪唑代替4-(氟苯基)-1-(甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基亞磺酰基-4-嘧啶基)咪唑，得到黃色固體狀標(biāo)題化合物(0.358g，45％產(chǎn)率)1H NMR(CDCl3)δ8.30(d，1H)，7.80(s，1H)，7.62(d，2H)，7.50(q，2H)，7.36(t，2H)，7.09(t，1H)，7.03(t，2H)，6.61(d，1H)，4.70(m，1H)，3.98(m，4H)，2.05(m，4H)，1.75(m，2H)，1.45(m，2H)。h)5-〔2-(苯氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(4-氧代環(huán)己基)咪唑?qū)?-〔2-(苯氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(4-乙二醇縮酮環(huán)己基)咪唑(0.35g，0.76mmol)在3N HCl(4.5ml)中的懸浮液攪拌3小時(shí)，冷卻到0℃并用NaHCO3飽和水溶液中和。將混合物用乙酸乙酯萃取并干燥。將溶劑蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物熔點(diǎn)205-207℃。
實(shí)施例194-(4-氟苯基-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑a)2-甲硫基嘧啶-4-甲醛〔1-叔丁氧羰基-4-氨基哌啶〕亞胺將2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(1.51g，9.8mmol)、1-叔丁氧羰基-4-乙氧基哌啶(Mach，R.H等，醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志(J.Med.Chem.)，1993，36，3707)(2.1g，10.5mmol)、MgSO4(約2g)和CH2Cl2(75ml)混合并在23℃下攪拌16小時(shí)。過(guò)濾并濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物，為黃色油狀物1H NMR(CDCl3)δ8.57(d，1)，8.27(s，1)，7，58(d，1)，4.05(m，2)，3.55(m，1)，3.00(m，2)，2.60(s，3)，1.75(m，4)，1.48(s，9)。b)5-(2-甲硫基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-〔(1-叔丁氧羰基)-4-哌啶基〕咪唑按照實(shí)施例18(d)的步驟，但是用2-甲硫基嘧啶-4-甲醛〔1-叔丁氧羰基-4-氨基哌啶〕亞胺代替2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(4-乙二醇縮酮環(huán)己基)亞胺，得到標(biāo)題化合物，為棕色固體，產(chǎn)率50％ESMS m/z＝470(M++H)。c)5-(2-甲基亞磺?；?4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-〔(1-叔丁氧羰基)-4-哌啶基〕咪唑?qū)?-(2-甲硫基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-〔(1-叔丁氧羰基)-4-哌啶基〕咪唑(4.69g，10mmol)溶在四氫呋喃中，冷卻到-10℃，逐滴加入在50ml水中的6.14g過(guò)硫酸氫鉀制劑Oxone(T＜5℃)。在約50分鐘內(nèi)將所形成的混合物溫?zé)嶂?0℃，在激烈攪拌下倒入10％NaOH水溶液(300ml.)、水(100ml)和乙酸乙酯(300ml)的混合物中。分離出各相，將有機(jī)相干燥(Na2SO4)，濃縮，得到黃色油狀物?？焖賹游?0-2％MeOH/CH2Cl2)，得到標(biāo)題化合物。產(chǎn)量3.58g(74％)ESMS m/z＝486(M++H)。d)4-(4-氟苯基-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑按照實(shí)施例16的步驟，但是用5-(2-甲基亞磺?；?4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-〔(1-叔丁氧羰基)-4-哌啶基〕咪唑代替4-(4-氟苯基)-1-〔(1-甲基)哌啶-4-基〕-5-〔(2-甲基亞磺酰基)嘧啶-4-基〕咪唑，得到白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)率40％。e)4-(4-氟苯基-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑在環(huán)境溫度下向4-(4-氟苯基-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑(1.0g，19mmol)中加入HCl(4M二噁烷溶液，10ml)。在環(huán)境溫度下攪拌15分鐘后，反應(yīng)混合物依次用10％NaOH水溶液和NaHCO3飽和水溶液部分中和。中和過(guò)的混合物用乙酸乙酯萃取二次。合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗，用MgSO4干燥，蒸發(fā)。用乙醚研制，得到白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)率74％。ESMS m/z＝415(M++H)。
實(shí)施例204-(4-氟苯基-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑a)1-(1-乙氧羰基-4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-乙?；溥蛟诃h(huán)境溫度下向丙酮醛(40％重量的水溶液，6.6ml，7.8g，0.058mol)在二甲基亞砜(100ml)中的溶液里加入4-氨基哌啶羧酸乙酯(10g，0.058mol)。10分鐘后加入α-(對(duì)甲苯磺?；?-4-氟芐胩(8.4g，0.029mol)和K2CO3(8.0g，0.058mol)。攪拌18小時(shí)后，將溶液分配在乙酸乙酯和3N HCl之間，有機(jī)相用3N HCl洗。合并的水層用固體K2CO3中和，用乙酸乙酯萃取二次。合并的有機(jī)層用鹽水洗，用MgSO4干燥，真空濃縮得到褐色油狀物，它在放置時(shí)固化。依次用33％、50％和67％乙酸乙酯/己烷洗脫進(jìn)行快速層析，隨后用乙醚研制，得到白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)量3.5g(23％)。b)1-(1-乙氧羰基-4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(3-N，N-二甲氨基-反-1-丙烯酮)咪唑?qū)?-(1-乙氧羰基-4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-乙?；溥?16g，0.044mol)和DMFDMA(30ml)的混合物在100℃加熱18小時(shí)。真空除去過(guò)量的DMFDMA，殘余物經(jīng)硅膠填料過(guò)濾，用4％MeOH/CH2Cl2洗脫，得到黃色泡沫狀標(biāo)題化合物，產(chǎn)量18g(99％)。1H NMR(CDCl3)δ7.65(1H，s)，7.55(2H，m)，7.48(1H，m)，7.02(2H，t，J＝8.7Hz)，5.02(1H，d，J＝12.6Hz)，4.91(1H，m)，4.30(2H，m)，4.13(2H，q，J＝7.1Hz)，2.99(3H，brs)，2.89(2H，m)，2.51(3H，brs)，2.18(2H，d，J＝12.1Hz)，1.78(2H，dq，J＝4.3，12.3Hz)，1.26(3H，t，J＝7.1Hz)。c)4-(4-氟苯基-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-〔(1-乙氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑向1-(1-乙氧羰基-4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(3-N，N-二甲氨基-反-1-丙烯酮)咪唑(15g，0.36mol)在DMSO中的溶液里加入苯基胍(13g，0.094mol)將反應(yīng)混合物在150℃加熱24小時(shí)，冷卻到室溫并倒入水中。收集形成的沉淀，用水洗并且空氣干燥。經(jīng)過(guò)硅膠填料真空過(guò)濾，用2％MeOH/CH2Cl2洗脫，隨后用乙醚研制，得到灰白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)量14g(80％)。4-(4-氟苯基-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑?qū)?-(4-氟苯基-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-〔(1-乙氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑(12g)在濃鹽酸中的溶液加熱回流18小時(shí)。冷卻至環(huán)境溫度后，將反應(yīng)混合物用固體Na2CO3中和，收集形成的沉淀并且空氣干燥。依次用90/10/1和82/2/2的CH2Cl2洗脫進(jìn)行快速層析，隨后自CH2Cl2/乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到5.2g標(biāo)題化合物。
實(shí)施例214-(4-氟苯基)-5-〔(2-〔叔丁氧羰基氨基)乙氨基〕嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑?qū)?-(2-甲基亞磺酰基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-〔(1-叔丁氧羰基)-4-哌啶基〕咪唑(0.30g，0.62mmol)和N-叔丁氧羰基-1，2-乙二胺〔Krapcho，P.A；Kuell，C.S.合成通訊(Syn.Commun.)1990，20(16)，2559，(0.18g，0.67mmol)〕在二甲基甲酰胺(20ml)中的溶液在88℃下加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到環(huán)境溫度，倒入水中用乙酸乙酯萃取。有機(jī)萃取液真空濃縮，殘余物自乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶，得到淺黃色固體標(biāo)題化合物；產(chǎn)量0.28g(77％)熔點(diǎn)161-163℃。
實(shí)施例224-(4-氟苯基)-5-〔(2-氨乙基)氨基〕嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑在環(huán)境溫度下向4-(4-氟苯基)-5-〔(2-〔叔丁氧羰基氨基)乙氨基〕嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑(0.20g，0.34mmol)的CH2Cl2(15ml)溶液中加入TFA(99％，20ml)。在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)后，減壓除去揮發(fā)物，殘余物溶在水中，用10％NaOH水溶液中和并用乙酸乙酯萃取。減壓除去溶劑，得到白色固體標(biāo)題化合物；產(chǎn)量0.060g(46％)熔點(diǎn)＝125-126℃。
實(shí)施例234-(4-氟苯基)-5-〔(2-(3-乙氧基丙氨基)〕嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑按照實(shí)施例21的步驟，但是用3-乙氧基丙胺代替N-叔丁氧羰基-1，2-乙二胺，得到白色固體標(biāo)題化合物。產(chǎn)率79％，熔點(diǎn)102-103℃。
實(shí)施例244-(4-氟苯基)-5-〔(2-乙氧丙基)氨基〕嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例22的步驟，但是用4-(4-氟苯基)-5-〔(2-(3-乙氧丙氨基)嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑代替4-(4-氟苯基)-5-〔(2-〔叔丁氧羰氨基)乙氨基〕嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑，得到白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)率68％，熔點(diǎn)160-163℃。
實(shí)施例254-(4-氟苯基)-5-〔2-〔3-〔咪唑-1-基)丙基〕氨基嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑按照實(shí)施例21的步驟，但是用1-(3-氨丙基)咪唑代替N-叔丁氧羰基-1，2-乙二胺，得到白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)率69％，熔點(diǎn)＝180-183℃。
實(shí)施例264-(4-氟苯基)-5-〔2-〔3-〔咪唑-1-基)丙基〕氨基嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑按照實(shí)施例22的步驟，但是用4-(4-氟苯基)-5-〔2-〔3-(咪唑-1-基)丙基〕氨基嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑代替4-(4-氟苯基)-5-〔(2-〔叔丁氧羰基氨基)乙氨基〕嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑，得到白色固體標(biāo)題化合物，產(chǎn)率54％。熔點(diǎn)90-92℃。
實(shí)施例271-(4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(2-苯胺基-4-吡啶基)咪唑a)2-氯-4-吡啶甲醇在0℃下向NaBH4(4.66g，123mmol)在四氫呋喃(400ml)中的懸浮液里分批加入2-氯-4-吡啶羧酸(12.9g，82.1mmol)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度，攪拌1.5小時(shí)。在3小時(shí)內(nèi)加入BF3O(Et)2(19.2ml，156mmol)的THF(125ml)溶液，在環(huán)境溫度下攪拌20小時(shí)，冷卻至0℃，逐滴加入1.5N HCl(100ml)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度，減壓除去溶劑，加入4N NaOH并將pH調(diào)節(jié)到10-11。溶液用乙酸乙酯萃取3次，合并的有機(jī)層用鹽水洗，用MgSO4干燥，過(guò)濾，將濾液減壓濃縮，得到白色固體標(biāo)題化合物產(chǎn)量10.8g(92％)1H NMR(CDCl3)δ8.30(d，1H，J＝4.9Hz)，7.37(s，1H)，7.22(d，1H，J＝4.9Hz)，4.76(s，2H)，2.50(br-s，1H)。b)2-氯-4-吡啶甲醛將2-氯-4-吡啶甲醇(8.0g，55.9mmol)、NBS(14.9g，83.9mmol)和K2CO3(11.75g，97.1mmol)在乙酸乙酯中的懸浮液回流3小時(shí)。加入第二份NBS(14.9g，83.9mmol)和Na2CO3(12.0g，114mmol)，將反應(yīng)物混合再加熱回流3.5小時(shí)，冷卻后經(jīng)硅藻土填料過(guò)濾。濾液在濃縮成小體積后進(jìn)行快速層析，用0.5-4％的CH3OH/CH2Cl2洗脫。將含產(chǎn)物的級(jí)分合并，依次用NaHCO3飽和水溶液、10％Na2S2O3和鹽水洗，用MgSO4干燥，減壓濃縮，得到淺黃色固體標(biāo)題化合物；產(chǎn)量5.3g(67％)。1H NMR(CDCl3)δ10.06(s，1H)，8.66(d，1H，J＝5.0Hz)，7.76(s，1H)，7.66(d，1H，J＝5.0Hz)。c)2-氯-4-吡啶甲醛(1-叔丁氧羰基-4-氨基哌啶)亞胺按照實(shí)施例19b的步驟，但是用2-氯-4-吡啶甲醛代替2-甲硫基嘧啶-4-甲醛，得到標(biāo)題化合物。1H NMR(CDCl3)δ8.45(d，1H，J＝5.1Hz)，8.29(s，1H)，7.65(s，1H)，7.52(d，1H，J＝5.1Hz)，4.05(br-s，2H)，3.48(m，1H)，3.03(m，2H)，1.73(m，4H)，1.48(s，9H)。d)1-(1-叔丁氧羰基-4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(2-氯-4-吡啶基)咪唑按照實(shí)施例18d的步驟，但是用2-氯-4-吡啶甲醛(1-叔丁氧羰基-4-氨基哌啶)亞胺代替2-甲硫基嘧啶-4-甲醛(4-乙二醇縮酮環(huán)己基)亞胺，得到標(biāo)題化合物，在用0-5％的CH3OH/CH2Cl2洗脫的快速層析純化后，自乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶，得到淺黃色固體；10.2g(60％)；ESMS m/z＝457(M++H)。e)1-(1-叔丁氧羰基-4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(2-苯胺基-4-吡啶基)咪唑向NaH(130mg，3.3mmol)在DMA(2ml)中的懸浮液里加入苯胺(0.58ml，6.1mmol)并攪拌直至停止起泡。向此溶液中加入1-(1-叔丁氧羰基-4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(2-氯-4-吡啶基)咪唑(0.30g，0.66mmol)，所形成的溶液在120℃下加熱，直到用質(zhì)譜儀觀察不到起始物存在(1-3天)。向冷卻的混合物中加入1M NaOH，所形成的混合物用乙酸乙酯萃取3次。合并的有機(jī)層用鹽水洗，用MgSO4干燥，過(guò)濾，濾液經(jīng)減壓濃縮，得到黃色殘余物，將其用50-80％的乙酸乙酯/己烷層析。所形成的固體與乙醚一起研磨，得到淺黃色固體的標(biāo)題化合物；產(chǎn)量180mg(53％)ESMS m/z＝514(M++H)。f)1-(4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(2-苯胺基-4-吡啶基)咪唑向1-(1-叔丁氧羰基-4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(2-苯胺基-4-吡啶基)咪唑(175mg，0.34mmol)中加入在-10℃下冷卻的TFA溶液(12ml)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度并在此溫度下攪拌0.5小時(shí)。減壓蒸走溶劑，殘余物溶解在水(10ml)中，向其中加入3N HCl(0.5ml)。此酸性溶液用乙酸乙酯 萃取二次，用50％NaOH調(diào)成堿性，再用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗，用MgSO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸發(fā)，得到白色固體標(biāo)題化合物；產(chǎn)量0.70g(50％)ESMS m/z＝414(M++H)。
實(shí)施例28反-5-〔2-(苯氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(4-羥基環(huán)己基)咪唑向根據(jù)上述實(shí)施例17制得的縮酮(0.325mg，0.76mmol)在四氫呋喃/甲醇(4ml)中的溶液里加入NaBH4(0.1g)的甲醇(2.5ml)溶液，將該混合物攪拌1小時(shí)。此反應(yīng)混合物用Na2CO3飽和液驟冷終止反應(yīng)，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取。將萃取液蒸發(fā)并自CH2Cl2/Me2CO中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)204-206℃。
利用上述實(shí)施例2-28相似的方法，可以合成以下的其它化合物4-(4-氟苯基-5-〔(2-(3-氯苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(3-氟苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(3-三氟甲基苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(3-芐氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(3-羥苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(4-氯苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(4-氟苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(4-三氟甲基苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(4-芐氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(4-羥苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑
4-(4-氟苯基-5-〔(2-(3，4-二氯苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基-5-〔(2-(3，4-二氟苯基)氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑以上說(shuō)明充分公開(kāi)了本發(fā)明，包括其優(yōu)選實(shí)施方案。對(duì)本文具體公開(kāi)的實(shí)施方案的修改和改進(jìn)是在下述權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。不必作詳細(xì)的描述，可以相信本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)上述說(shuō)明可以在最大可能的范圍內(nèi)使用本發(fā)明。因此這里的實(shí)施例只是示例說(shuō)明用，并非是對(duì)本發(fā)明范圍的任何形式的限制。本發(fā)明的其中聲稱了專有權(quán)和特權(quán)的實(shí)施方案規(guī)定如下。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物或其可藥用的鹽
其中R1是4-吡啶基，嘧啶基，喹啉基，異喹啉基，喹唑啉-4-基，1-咪唑基或1-苯并咪唑基，其雜芳環(huán)被NHRa取代并可任選地被另外獨(dú)立的下述取代基取代C1-4烷基、鹵素、羥基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷基亞磺?；H2OR12、氨基、單或雙C1-6烷基取代的氨基、N(R10)C(O)Rb或NHRa；Ra是苯基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-6烷基，雜芳基，雜芳基C1-6烷基，這些基團(tuán)均可被任選取代；Rb是氫，C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-4烷基；R4是苯基、萘-1-基或萘-2-基，或是雜芳基，它們可任選地被一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選擇的取代基取代，對(duì)于4-苯基、4-萘-1-基、5-萘-2-基或6-萘-2-基，其取代基選自鹵素、氰基、硝基、-C(Z)NR7R17、-C(Z)OR16、-(CR10R20)vCOR12、-SR5、-SOR5、-OR12、鹵素取代的C1-4烷基，C1-4烷基、-ZC(Z)R12、-NR10C(Z)R16或-(CR10R20)vNR10R20，對(duì)于其它取代位，所述取代基選自鹵素、氰基、-C(Z)NR13R14、-C(Z)OR3、-(CR10R20)m″COR3、-S(O)mR3、-OR3、鹵素取代的C1-4烷基、-C1-4烷基、-(CR10R20)m″NR10C(Z)R3、-NR10S(O)m′R8、-NR10S(O)m′NR7R17、-ZC(Z)R3或-(CR10R20)m″NR13R14；v是0或整數(shù)1或2；m是0或整數(shù)1或2；m′是整數(shù)1或2；m″是0或整數(shù)1-5；R2是C1-10烷基N3，-(CR10R20)n′OR9，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基-C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基-C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14，(CR10R20)nNO2，(CR10R20)nCN，(CR10R20)n′SO2R18，(CR10R20)nS(O)m′NR13R14，(CR10R20)nC(Z)R11，(CR10R20)nOC(Z)R11，(CR10R20)nC(Z)OR11，(CR10R20)nC(Z)NR13R14，(CR10R20)nC(Z)NR11OR9，(CR10R20)nNR10C(Z)R11，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)R11，(CR10R20)nC(＝NOR6)R11，CR10R20)nNR10C(＝NR19)NR13R14，(CR10R20)nOC(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)OR10，5-(R18)-1，2，4-噁二唑-3-基或4-(R12)-5-(R18R19)-4，5-二氫-1，2，4-噁二唑-3-基，其中芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基可以被任選取代；n是1-10的整數(shù)；n′是0，或是1-10的整數(shù)；z是氧或硫；R3是雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基或R8；R5是氫、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基或NR7R17，但-SR5部分是-SNR7R17以及-SOR5是-SOH不包括在內(nèi)；R6是氫，可藥用的陽(yáng)離子，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基。芳酰基或C1-10烷?；籖7和R17各自獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基，或者R7和R17與它們所連接的氮一起形成一個(gè)5-7元的雜環(huán)，該雜環(huán)可任選地含有另外選自氧、硫或NR15的雜原子；R8是C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C5-7環(huán)烯基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14；其中芳基，芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基可被任選取代；R9是氫，-C(Z)R11或任選取代的C1-10烷基，S(O)2R18，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20各自獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；R11是氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基；R12是氫或R16；R13和R14各自獨(dú)立地選自氫或任選取代的C1-4烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者與它們所連接的氮一起形成5-7元雜環(huán)，該雜環(huán)可任選地含有另外選自氧、硫或NR9的雜原子；R15是R10或C(Z)-C1-4烷基；R16是C1-4烷基，鹵素取代的C1-4烷基或C3-7環(huán)烷基；R18是C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，芳基，芳基烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基-C1-10烷基，雜芳基或雜芳基烷基；R19是氫，氰基，C1-4烷基，C3-7環(huán)烷基或芳基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是取代的4-吡啶基或4-嘧啶基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中Ra被以下基團(tuán)獨(dú)立地取代一次或多次鹵素；C1-4烷基；鹵代烷基；羥基；羥基取代的C1-4烷基；C1-4烷氧基；S(O)m烷基和S(O)m芳基(其中m是0、1或2)；C(O)OR11；C(O)R11；OC(O)R18；O-(CH2)s-O，s是1至3的整數(shù)；氨基；單和雙C1-6烷基取代的氨基；N(R10)C(O)Rb；5-7元的N-雜環(huán)基，該環(huán)可任選地含有另外選自氧、硫或NR15的雜原子；任選取代的芳基；或任選取代的芳基C1-4烷基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中Ra是芳基、芳烷基、鹵代芳烷基、鹵代芳基、雜環(huán)基烷基、羥烷基、烷基-1-哌啶羧酸酯、雜環(huán)基、烷基取代的雜環(huán)基、鹵代雜環(huán)基或芳基取代的雜環(huán)基。
5.權(quán)利要求3的化合物，其中Ra是芐基、鹵代芐基、萘甲基、苯基、鹵代苯基、嗎啉代丙基、乙基-1-哌啶羧酸酯、胡椒基、哌啶-4-基、烷基取代的哌啶、氯色胺和四氫噻喃基。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物，其中R4是任選取代的苯基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中的苯基被鹵素、-SR5、-S(O)R5、-OR12、鹵代C1-4烷基或C1-4烷基獨(dú)立地取代一或多次。
8.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中R2選自任選取代的雜環(huán)基、任選取代的雜環(huán)基C1-10烷基、(CR10R20)nNS(O)2R18、(CR10R20)nS(O)mR18、芳基C1-10烷基、(CR10R20)nNR13R14、任選取代的C3-7環(huán)烷基或任選取代的C3-7環(huán)烷基C1-10烷基。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R2是嗎啉代丙基、哌啶、N-甲基哌啶、N-芐基哌啶、2，2，6，6-四甲基哌啶、4-氨基哌啶、4-氨基-2，2，6，6-四甲基哌啶、4-羥基環(huán)己基、4-甲基-4-羥基環(huán)己基、4-吡咯烷基環(huán)己基、4-甲基-4-氨基環(huán)己基、4-甲基-4-乙酰氨基環(huán)己基、4-酮環(huán)已基、4-環(huán)氧乙烷基或4-羥基-4-(1-丙炔基)環(huán)己基。
10.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物是5-〔(2-芐氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-〔2-(4-四氫噻喃基)氨基嘧啶-4-基〕咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔(2-羥基)乙氨基〕嘧啶-4-基-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(3-氯芐氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(1-萘基甲氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(1-芐基-4-哌啶基氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-〔2-〔3-(嗎啉代)丙基]氨基嘧啶-4-基〕咪唑5-〔2-[(3-溴苯基)氨基〕嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-胡椒基氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(4-哌啶基氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(5-氯色胺基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)氨基嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔(2-〔(1-乙氧羰基)哌啶-4-基〕氨基嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，5-〔2-(苯氨基)嘧啶-4-基〕-4-(4-氟苯基)-1-(4-氧代環(huán)己基)咪唑，5-{4-(2-苯氨基)嘧啶-4-基}-4-(4-氟苯基)-1-(4-羥基環(huán)己基)咪唑，4-(氟苯基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-5-(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕咪唑，4-(氟苯基)-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔(2-苯氨基)嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔2-〔3-〔咪唑-1-基〕丙基〕氨基嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔2-〔3-〔咪唑-1-基)丙基〕氨基嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑，1-(4-哌啶基)-4-(4-氟苯基)-5-(2-苯胺基-4-吡啶基)咪唑?；蛩鼈兊目伤幱玫柠}。
11.一種藥物組合物，其中包括權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)的化合物和可藥用的載體或稀釋劑。
12.一種治療在需要治療的哺乳動(dòng)物中由CSBP/RK/p38激酶介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求1的式(I)化合物。
13.權(quán)利要求12的方法，其中的哺乳動(dòng)物患有由CSBP/RK/p38激酶介導(dǎo)的疾病，這些疾病選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎及其它關(guān)節(jié)炎病癥；膿毒癥，膿毒性休克，內(nèi)毒素性休克，革蘭姆陰性膿毒癥，中毒性休克綜合癥，哮喘，成人呼吸窘迫癥，中風(fēng)，腦型瘧，慢性肺部炎癥，硅肺，肺部肉樣瘤病，骨吸收病，骨質(zhì)疏松，再灌注損傷，移植物抗宿主反應(yīng)，同種移植排異反應(yīng)，節(jié)段性回腸炎，潰瘍性結(jié)腸炎，炎癥性腸病，神經(jīng)外傷，中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷，視網(wǎng)膜變性，再灌注損傷，牛皮癬或發(fā)熱。
14.一種治療在需要治療的哺乳動(dòng)物中的炎癥的方法，該方法包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用有效量權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的式(I)化合物。
15.一種治療在需要治療的哺乳動(dòng)物中的骨質(zhì)疏松癥的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的式(I)化合物。
16.式(A)化合物或其可藥用的鹽
其中R1是4-吡啶基，嘧啶基，喹啉基，異喹啉基，喹唑啉-4-基，1-咪唑基或1-苯并咪唑基，該雜芳環(huán)被NHRa取代，并可任選地被另外獨(dú)立的取代基取代，這些取代基選自C1-4烷基，鹵素，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，C1-4烷基亞磺?；珻H2OR12，氨基，單和雙C1-6烷基取代的氨基，N(R10)C(O)Rb或NHRa；Ra是被以下基團(tuán)獨(dú)立地取代一或多次的C1-6烷基鹵素；羥基；C1-10烷基；S(O)m烷基，其中m是0、1或2；氨基，單或雙-C1-4烷基取代的氨基；C3-7環(huán)烷基；C3-7環(huán)烷基氧基；或是化學(xué)式為A1-B1-D1的基團(tuán)，其中A1是CR10R20、氧、硫或NR10R20，B1是C(O)或S(O)2，D1是E1或E2，其中E1是C1-10烷基、芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基、雜芳基C2-6鏈烯基、雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-6烷基，E2是O-E1或N-E1；Rb是氫，C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-4烷基；R4是苯基，萘-1-基或萘-2-基，或是雜芳基，它們可以任選地被一或二個(gè)取代基取代，這些基團(tuán)各自獨(dú)立地選擇，對(duì)于4-苯基、4-萘-1-基、5-萘-2-基或6-萘-2-基取代基，它們是鹵素、氰基、硝基、-C(Z)NR7R17、-C(Z)OR16、-(CR10R20)vCOR12、-SR5、-SOR5、-OR12、鹵素取代的C1-4烷基，C1-4烷基、-ZC(Z)R12、-NR10C(Z)R16或-(CR10R20)vNR10R20，對(duì)于其它的取代位置，它們是鹵素、氰基、-C(Z)NR13R14、-C(Z)-OR3、-(CR10R20)m″COR3、-S(O)mR3、-OR3、鹵素取代的C1-4烷基、-C1-4烷基、-(CR10R20)m″NR10C(Z)R3、-NR10S(O)m′R8、-NR10S(O)m′NR7R17、-ZC(Z)R3或-(CR10R20)m″NR13R14；v是0，或是整數(shù)1或2；m是0，或是整數(shù)1或2；m′是整數(shù)1或2；m″是0，或整數(shù)1-5；R2是-(CR10R20)n′OR9，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基，C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14，(CR10R20)nNO2，(CR10R20)nCN，(CR10R20)n′SO2R18，(CR10R20)nS(O)m′NR13R14，(CR10R20)nC(Z)R11，(CR10R20)nOC(Z)R11，(CR10R20)nC(Z)OR11，(CR10R20)nC(Z)NR13R14，(CR10R20)nC(Z)NR11OR9，(CR10R20)nNR10C(Z)R11，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)NR13R14，(CR10R20)nN(OR6)C(Z)R11，(CR10R20)nC(＝NOR6)R11，(CR10R20)nNR10C(＝NR19)NR13R14，(CR10R20)nOC(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR13R14，(CR10R20)nNR10C(Z)OR10，5-(R18)-1，2，4-噁二唑-3-基或4-(R12)-5-(R18R19)-4，5-二氫-1，2，4-噁二唑-3-基；其中芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基可被任選取代；n是1-10的整數(shù)；n′是0，或是整數(shù)1-10；Z是氧或硫；R3是雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基或R8；R5是氫、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基或NR7R17，但不包括-SR5是SNR7R17和-SOR5是-SOH；R6是氫，一種可藥用的陽(yáng)離子，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基，芳酰基或C1-10烷?；籖7和R17各自獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基，或者R7與R17和它們所連接的氮一起形成5-7元雜環(huán)，該環(huán)任選地含有另外選自氧、硫或NR15的雜原子；R8是C1-10烷基，鹵素取代的C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C5-7環(huán)烯基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，(CR10R20)nOR11，(CR10R20)nS(O)mR18，(CR10R20)nNHS(O)2R18，(CR10R20)nNR13R14；其中芳基，芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基可被任選取代；R9是氫，-C(Z)R11或任選取代的C1-10烷基，S(O)2R18，任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基；R10和R20各自獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；R11是氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基；R12是氫或R16；R13和R14各自獨(dú)立地選自氫或任選取代的C1-4烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者R13和R14與它們所連接的氮一起形成5-7元雜環(huán)，該雜環(huán)任選地含有另外選自氧、硫或NR9的雜原子；R15是R10或C(Z)-C1-4烷基；R16是C1-4烷基，鹵素取代的C1-4烷基，或C3-7環(huán)烷基；R18是C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，芳基，芳基-C1-10烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基-C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基；R19是氫，氰基，C1-4烷基，C3-7環(huán)烷基或芳基。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中R1是4-吡啶基或4-嘧啶環(huán)，R4是任選取代的苯基。
18.權(quán)利要求16或17的化合物，其中R2選自任選取代的雜環(huán)基，任選取代的雜環(huán)基C1-10烷基，(CR10R20)nNS(O)2R18，(CR10R20)nS(O)mR18，芳基C1-10烷基，(CR10R20)nNR13R14，任選取代的C3-7環(huán)烷基或任選取代的C3-7環(huán)烷基C1-10烷基。
19.權(quán)利要求16的化合物，所述化合物是4-(4-氟苯基)-5-〔(2-羥基)乙氨基〕嘧啶-4-基-1-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑，4-(-氟苯基)-5-〔2-(2-羥基)乙氨基嘧啶-4-基〕-1-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基)咪唑4-(4-氟苯基)-5-〔(2-(3-乙氧丙基氨基)〕嘧啶-4-基)-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔(2-〔叔丁氧羰基氨基)乙氨基〕嘧啶-4-基〕-1-〔(1-叔丁氧羰基)哌啶-4-基〕咪唑4-(4-氟苯基)-5-〔(2-氨乙基)氨基〕嘧啶-4-基-1-(哌啶-4-基)咪唑，4-(4-氟苯基)-5-〔(2-乙氧丙基)氨基〕嘧啶-4-基〕-1-(哌啶-4-基)咪唑；或是它們的可藥用鹽。
20.一種藥物組合物，其中含有權(quán)利要求16的化合物和可藥用的載體或稀釋劑。
21.一種治療在需要治療的哺乳動(dòng)物中由CSBP/RK/p38激酶介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求16的式(A)化合物。
22.權(quán)利要求21的方法，其中哺乳動(dòng)物患有由CSBP/RK/p38激酶介導(dǎo)的疾病，這些疾病選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎及其它關(guān)節(jié)炎病癥；膿毒癥，膿毒性休克，內(nèi)毒素性休克，革蘭姆陰性膿毒癥，中毒性休克綜合癥，哮喘，成人呼吸窘迫癥，中風(fēng)，腦型瘧，慢性肺部炎癥，硅肺，肺部肉樣瘤病，骨吸收病，骨質(zhì)疏松，再灌注損傷，移植物抗宿主反應(yīng)，同種移植排異作用，節(jié)段性回腸炎，潰瘍性結(jié)腸炎，炎癥性腸病，神經(jīng)外傷，中樞神經(jīng)損傷，視網(wǎng)膜變性，再灌注損傷，牛皮癬或發(fā)熱。
23.一種制備權(quán)利要求1或16中定義的式(I)或式(A)化合物的方法，該方法包括使式(II)化合物
與式(III)化合物
以及一種強(qiáng)度足以使式(II)的胩部分去質(zhì)子化的堿反應(yīng)，其中p是0或2，R1、R2和R4的定義同權(quán)利要求1或是基團(tuán)R1、R2和R4的前體，Ar是任選取代的苯基，隨后如果需要，將R1、R2和R4的前體轉(zhuǎn)化成基團(tuán)R1、R2和R4。
24.權(quán)利要求23的方法，其中當(dāng)p＝0時(shí)，反應(yīng)采用TBD作為堿。
25.權(quán)利要求23的方法，其中當(dāng)p＝2時(shí)，反應(yīng)中所用的堿是一種胺、碳酸鹽、氫化物或是烷基或芳基鋰試劑。
26.權(quán)利要求23的方法，其中式(III)的亞胺在與式(II)化合物反應(yīng)之前先被分離。
27.權(quán)利要求23的方法，其中式(III)的亞胺在與式(II)化合物反應(yīng)之前原地形成。
28.權(quán)利要求27的方法，其中的亞胺通過(guò)化學(xué)式為R4CHO的醛與化學(xué)式為R2NH2的伯胺反應(yīng)原地形成，其中R4和R2的定義同式(I)。
29.權(quán)利要求27的方法，其中亞胺的原地形成采用了脫水條件。
30.權(quán)利要求28的方法，其中的溶劑是N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、鹵代溶劑、四氫呋喃(THF)、二甲基亞砜(DMSO)、醇類、苯、甲苯或DME。
31.權(quán)利要求28的方法，其中用于形成式(I)或(A)化合物或其可藥用的鹽的醛R4CHO是化學(xué)式如下的嘧啶醛
其中X是NHRa，X1的定義同在權(quán)利要求1或16的式(I)或式(A)中R1部分上的任選取代基。
32.權(quán)利要求28的方法，其中伯胺R2NH2是雜環(huán)基胺、雜環(huán)基C1-10烷基胺、C3-7環(huán)烷基胺、C3-7環(huán)烷基C1-10烷基胺，它們均可被任選取代。
33.權(quán)利要求32的方法，其中R2NH2基團(tuán)的R2部分是嗎啉代丙基、哌啶、N-甲基哌啶、N-芐基哌啶、2，2，6，6-四甲基哌啶、4-氨基哌啶、4-氨基-2，2，6，6-四甲基哌啶、4-羥基環(huán)己基、4-甲基-4-羥基環(huán)己基、4-吡咯烷基環(huán)己基、4-甲基-4-氨基環(huán)己基、4-甲基-4-乙酰氨基環(huán)己基、4-酮環(huán)己基、4-環(huán)氧乙烷基或4-羥基-4-(1-丙炔基)環(huán)己基。
34.下式化合物
其中X是NHRa，X1的定義同權(quán)利要求1或16的式(I)或式(A)中R1部分上的任選取代基。
35.一種制備權(quán)利要求1或16中定義的式(I)或式(A)化合物的方法，該方法包括使下式化合物
其中X1的定義同式(I)或式(A)中R1部分上的任選取代基，與下式化合物反應(yīng)
形成化學(xué)式如下的中間體
該中間體與式(II)化合物反應(yīng)
其中R4的定義同式(I)，p為0或2，Ar環(huán)是任選取代的苯基，或者R1、R2和R4是式(I)中定義的基團(tuán)R1、R2和R4的前體，隨后如果需要，將R1、R2和R4的前體轉(zhuǎn)化成基團(tuán)R1、R2和R4，并將縮酮轉(zhuǎn)化成所要求的取代的環(huán)烷基部分。
36.一種制備權(quán)利要求1或16中定義的式(I)或式(A)化合物的方法，該方法包括使下式化合物在合適的條件下反應(yīng)除去保護(hù)基，得到式(I)或式(A)化合物或其可藥用鹽
其中X1是與式(I)或(A)中定義相同的任選的R1取代基，X是與式(I)或(A)中對(duì)R4定義的任選取代基。
全文摘要
作為細(xì)胞因子抑制劑用于治療的新的1,4,5－取代的咪唑化合物和組合物。
文檔編號(hào)A61P43/00GK1192147SQ96195882
公開(kāi)日1998年9月2日 申請(qǐng)日期1996年6月7日 優(yōu)先權(quán)日1995年6月7日
發(fā)明者J·L·阿達(dá)姆斯, T·E·加爾拉赫爾, J·思斯科, I·K·奧斯弗, J·C·波姆 申請(qǐng)人:史密絲克萊恩比徹姆公司