專利名稱：：異丙景糖酐在制備治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及異丙景糖酐在制藥領(lǐng)域中的應(yīng)用，尤其涉及在制備治療慢性乙型肝炎藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：專利號(hào)為96115901.4，申請(qǐng)日為1996年7月26日的中國(guó)專利"一種抗病毒化合物八寶素的制法"公開了一種抗乙型肝炎病毒活性化合物八寶素，該化合物的化學(xué)名稱為異丙景糖酐(Sedoisoprosan)，其結(jié)構(gòu)式為異丙景糖酐，即八寶素(Hylotelephin)，是自景天科植物長(zhǎng)藥八寶提取、分離、純化得到的景酮糖酐與丙酮進(jìn)一步縮合而獲得的一種活性化合物。在鴨乙型肝炎病毒感染鴨體內(nèi)進(jìn)行的治療效果試驗(yàn)表明該藥200mg/kg及100mg/kg兩個(gè)劑量組，經(jīng)腹腔注射每天2次，連續(xù)14天，均無毒副反應(yīng)，在給藥第7天和第14天均能顯著降低DHBV感染鴨血清DHBV-DNA水平，表明該藥對(duì)鴨血清DHBV-DNA有抑制作用。此外，動(dòng)物試驗(yàn)亦顯示了異丙景糖酐的免疫調(diào)節(jié)活性在小鼠體內(nèi)有增強(qiáng)腹腔巨噬細(xì)胞溶酶體酶(酸性磷酸酶，ACP)活性的作用，對(duì)腫瘤壞死因子(TNF)活性亦有明顯的增強(qiáng)作用。體外實(shí)驗(yàn)表明，該藥與ConA及LPS合用，可加強(qiáng)ConA及LPS的絲裂原作用，促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，具有協(xié)調(diào)作用。因此該藥是生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，具有雙向免疫調(diào)節(jié)功能。中國(guó)專利96115901.4已經(jīng)公開了異丙景糖酐在制備抗鴨乙型肝炎病毒及雙向免疫新藥中的應(yīng)用，但是，異丙景糖酐在制備治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎藥物中的應(yīng)用尚未明確。在體外及動(dòng)物體內(nèi)藥理試驗(yàn)中已證明有效的藥物對(duì)人體是否安全、有效，還需要進(jìn)行臨床試驗(yàn)來確定。本發(fā)明是在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，在健康人和乙型肝炎病人人體上進(jìn)行臨床研究，以進(jìn)一步確定異丙景糖酐在制備治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎藥物中的應(yīng)用，明確其臨床療效、治療劑量效以及安全性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供異丙景糖酐在制備治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎藥物中的應(yīng)用。根據(jù)隨機(jī)、雙盲、平行對(duì)照的原則設(shè)計(jì)臨床試驗(yàn)方案，篩選合格的受試者，通過檢査受試者在用藥前后其體內(nèi)HBV-DNA水平、ALT水平、生命體征指標(biāo)、血常規(guī)指標(biāo)、血生化指標(biāo)和甲狀腺功能指標(biāo)的變化，以及發(fā)生不良事件的情況，確定異丙景糖酐治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎的臨床療效和安全性。臨床試驗(yàn)結(jié)果表明異丙景糖酐能有效地抑制乙型肝炎病毒，并且具有劑量效應(yīng)關(guān)系，即隨著治療劑量的增大，其抗病毒效應(yīng)增強(qiáng)；不良事件發(fā)生率較低，除了個(gè)別有輕微脫發(fā)外，未觀察到對(duì)其它系統(tǒng)的不良影響。因此，異丙景糖酐治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎是安全有效的。具體實(shí)施例方式為了更好地說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用異丙景糖酐的臨床試驗(yàn)及其結(jié)果來說明其在制備治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎藥物中的應(yīng)用。1.目標(biāo)人群成年慢性乙型肝炎患者，HBsAg陽性，HBeAg陽性，HBsAb陰性，篩選時(shí)HBV-DNA210S拷貝/inl，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)升高。1.1入選標(biāo)準(zhǔn)必須滿足以下所有標(biāo)準(zhǔn)才能入組(1)簽署知情同意書；(2)年齡^18歲，并S65歲;(3)HBsAg陽性，HBeAg陽性6個(gè)月以上，同時(shí)HBsAb陰性；(4)在篩選期內(nèi)(隨機(jī)入組前28天)HBV-DNA2105拷貝/ml;(5)藥物首劑前6個(gè)月期間兩次升高的血清ALT>ULN但510xULN，其中必須有一次ALT^2倍以上，ALTS2ULN的例數(shù)不超過總例數(shù)的20%;(6)育齡婦女在藥物首劑前24小時(shí)內(nèi)尿或血妊娠實(shí)驗(yàn)陰性，所有生育年齡的男女都必須在試驗(yàn)期間和治療完成后3個(gè)月內(nèi)使用有效的避孕措施。1.2排除標(biāo)準(zhǔn)如果患者符合以下任一標(biāo)準(zhǔn)，將不能入組(1)孕婦或哺乳期女性；4(2)在前6個(gè)月內(nèi)接受過針對(duì)慢性乙型肝炎的抗病毒治療，或干擾素治療、免疫調(diào)節(jié)治療、細(xì)胞毒治療，或在試驗(yàn)期間預(yù)期可能需要進(jìn)行這些治療；(3)篩選時(shí)HAVIgM，HCV-RNA或HCV抗體，HDV抗體，HEV抗體或HTV抗體陽性；(4)篩選時(shí)肌酐值>正常上限的1.5倍；(5)疑有肝癌或甲胎蛋白值>100ng/ml;(6)有食管靜脈曲張出血史、腹水或其它肝臟失代償證據(jù)(ChildsB-C);(7)有脂肪肝或早期肝硬化的證據(jù)；(8)進(jìn)入試驗(yàn)前的一年內(nèi)酗酒或吸毒；(9)有肝炎以外其他任何嚴(yán)重疾病，可能影響患者的治療、隨訪或評(píng)估，包括任何未被控制的有臨床意義的心臟、肺、腎臟、消化、神經(jīng)、精神、免疫調(diào)節(jié)性疾病或惡性腫瘤；(抑篩選前3個(gè)月接受過其他試驗(yàn)藥物；(11)對(duì)糖酐類化合物或甘露醇過敏；d》不能或不愿意提供知情同意或不能遵守試驗(yàn)要求者。1.3樣本量的確定試驗(yàn)病例數(shù)為64例。2.給藥方案異丙景糖酑降低鴨乙型肝炎病毒感染的鴨血清DHBV-DNA水平的有效治療劑量為100mg/kg和200mg/kg，腹腔注射，每日2次，因沒有公認(rèn)的鴨和人類的劑量轉(zhuǎn)換公式，結(jié)合鴨的平均體重，初步制定用于人的劑量為200800mg/日，靜脈滴注。從I期耐受性試驗(yàn)表明，每日l次200mg、400mg、600mg、800mg溶于5X葡萄糖液中靜脈滴注的耐受性好。為本發(fā)明的目的，本試驗(yàn)采用200mg、400mg和800mg三個(gè)劑量，統(tǒng)一溶于250ml的5X葡萄糖液中，并且考慮到對(duì)血容量的影響，要求60分鐘滴注完畢。本試驗(yàn)中，采用性狀相同、水溶性好、安全、副作用很小的甘露醇粉針劑作對(duì)照品，其劑量為400800mg，遠(yuǎn)小于甘露醇用作滲透性利尿藥的治療劑量(濃度20%，250500ml，相當(dāng)于50100g)，故可作為安慰劑對(duì)照。而且在I期臨床試驗(yàn)中，使用該劑量的甘露醇也沒有發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。異丙景糖酐的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明其有降低DHBV-DNA水平，抑制HBsAg和HBeAg的分泌，并有免疫調(diào)節(jié)和/或增強(qiáng)作用，與干擾素有類似作用。異丙景糖酐在人體的半衰期為455.6404.5分鐘。參照傳統(tǒng)干擾素治療慢性乙型肝炎的治療方法，本試驗(yàn)中采用的異丙景糖酐的治療方法為每日l次，連續(xù)4周的強(qiáng)化治療，以后每周3次，連續(xù)8周，總療程共12周。5此外，在整個(gè)試驗(yàn)期間不允許使用全身抗病毒、抗腫瘤、全身皮質(zhì)醇激素或免疫調(diào)節(jié)治療，也不允許使用可能或明顯有抗HBV療效或降酶作用的其它藥物。受試者接受的所有伴隨用藥及其用藥原因應(yīng)完整記錄在病例報(bào)告表(CRF)中。3.試驗(yàn)分組3.1設(shè)計(jì)原則本試驗(yàn)是隨機(jī)、雙盲、四種治療劑量平行對(duì)照設(shè)計(jì)。四種治療劑量組分別為異丙景糖酐零劑量組(甘露醇組)、低劑量組(200mg組)、中劑量組(400mg組)和高劑量組(800mg組)。在試驗(yàn)開始前，由計(jì)算機(jī)產(chǎn)生總隨機(jī)表，對(duì)應(yīng)于同一個(gè)受試者的隨機(jī)號(hào)、CRF號(hào)和藥物號(hào)均為同一個(gè)號(hào)碼。3.2試驗(yàn)用藥3.2.1注射用異丙景糖酑劑型白色結(jié)晶粉末來源廣東省大日生物化學(xué)藥業(yè)有限公司批號(hào)0404071規(guī)格200mg/支有效期三年保存條件室溫3.2.2注射用甘露醇劑型白色結(jié)晶粉末來源廣東省大日生物化學(xué)藥業(yè)有限公司批號(hào)0404082規(guī)格200mg/支有效期三年保存條件室溫3.3編盲過程每一小藥盒零劑量組由4支甘露醇組成，200mg組由3支甘露醇和l支異丙景糖酐組成，400mg組由2支甘露醇和2支異丙景糖酐組成，800mg組由4支異丙景糖酐組成。對(duì)應(yīng)于一個(gè)受試者12周的治療藥物共54個(gè)小藥盒，包裝在一個(gè)大藥盒中，每個(gè)治療組或?qū)φ战M18個(gè)大藥盒。編盲人員根據(jù)隨機(jī)表將藥物號(hào)標(biāo)簽貼于相應(yīng)組別的大藥盒上，然后將四組藥物按照藥物號(hào)從小到大混合，標(biāo)有同一號(hào)碼的藥物對(duì)應(yīng)一個(gè)受試者的試驗(yàn)全部用藥。此過程僅由編盲人員及質(zhì)控人員在獨(dú)立封閉環(huán)境中完成。63.4分組方法經(jīng)篩選合格的受試者按l:1:1:1的比例隨機(jī)分配至異丙景糖酐零劑量組、異丙景糖酐200mg、400mg或800mg治療組。每一個(gè)受試者分別隨機(jī)獲得一個(gè)CRF號(hào)，即藥物號(hào)，受試者在整個(gè)試驗(yàn)過程中都服用這一號(hào)碼的藥物，不能更改。參見表l。表l試驗(yàn)分組方法以及給藥方案<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>4.評(píng)估方法基線評(píng)估應(yīng)當(dāng)在首次用藥的當(dāng)天，在用藥前獲取，評(píng)估項(xiàng)目包括體格檢査、血液學(xué)檢査、血生化檢査、甲狀腺功能檢查、ALT單項(xiàng)檢查和HBV-DNA定量檢測(cè)。其中，體格檢査包括身高、體重、血壓、脈率的檢査以及各系統(tǒng)的檢査；血液學(xué)檢査包括血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)和凝血酶原時(shí)間；血生化檢查包括-血清K、Na、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、堿性磷酸酶、總蛋白、白蛋白、總膽固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐及葡萄糖。在用藥后第l、2、4、8、12周進(jìn)行隨訪。在第2、4、8、12周進(jìn)行安全性血生化檢查和乙肝病毒標(biāo)記物，并記錄不良事件以及提前退出試驗(yàn)的情況，同時(shí)保存2管lml血清以備用于定量檢測(cè)HBV-DNA。在第12周還要進(jìn)行甲狀腺功能檢査。用藥前后的HBV-DNA定量檢查采用PCR方法。5.療效分析5.1主要療效指標(biāo)主要療效指標(biāo)為治療12周時(shí)的病毒應(yīng)答率，即與基線相比HBV-DNA水平^2x104拷貝/m域者是HBV-DNA水平下降21ogI()拷貝/ml的受試者比例。5.2次要療效指標(biāo)次要療效指標(biāo)包括(1)治療結(jié)束時(shí)lg(HBV-DNA)水平的下降值；(2)治療結(jié)束時(shí)生化應(yīng)答率，即血清ALT復(fù)常率，是指基線時(shí)ALT>正常值高限的受試者其ALT降至S正常值高限的受試者比例；(3)治療結(jié)束時(shí)HBeAg陰轉(zhuǎn)和血清轉(zhuǎn)換的受試者比例；血清轉(zhuǎn)換定義為血清HBeAg陰轉(zhuǎn)及HBeAb出現(xiàn)(4)治療結(jié)束時(shí)的聯(lián)合應(yīng)答率，即HBV-DNA水平S2xio4拷貝/ml或者是HBV-DNA水平下降2k)gK)拷貝/ml，同時(shí)ALT復(fù)常和出現(xiàn)血清轉(zhuǎn)換的受試者比例。5.3分析方法病毒應(yīng)答率、生化應(yīng)答率、病毒轉(zhuǎn)陰率、聯(lián)合應(yīng)答率的組間比較采用精確概率法，ALT的組間比較采用重復(fù)測(cè)量的協(xié)方差分析。各組基礎(chǔ)值指標(biāo)的比較主要采用f檢驗(yàn)或確切概率法、t檢驗(yàn)和非參數(shù)檢驗(yàn)。6.安全性分析6.1安全性指標(biāo)安全性指標(biāo)包括生命體征、臨床實(shí)驗(yàn)室參數(shù)、不良事件、重要不良事件、嚴(yán)重不良事件以及提前退出試驗(yàn)的情況。6.2分析方法生命體征、實(shí)驗(yàn)室參數(shù)的檢測(cè)和不良事件的收集在基線、第l、2、4、8、12周進(jìn)行。對(duì)生命體征和實(shí)驗(yàn)室參數(shù)，將比較各生命體征和實(shí)驗(yàn)室參數(shù)在用藥后12周和用藥前的變化。用治療期間發(fā)生不良事件的受試者數(shù)與可進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)的受試者數(shù)的比值來表示不良事件的發(fā)生率。根據(jù)治療組、人體系統(tǒng)和每一系統(tǒng)內(nèi)的事件，對(duì)不良事件進(jìn)行總結(jié)。不良事件的評(píng)估包括名稱、等級(jí)、與藥物的關(guān)系，并以很可能有關(guān)和可能有關(guān)作為不良反應(yīng)，總結(jié)不良反應(yīng)的發(fā)生率。不良事件采用統(tǒng)計(jì)描述法，對(duì)各組不良反應(yīng)發(fā)生率的比較用Fisher確切概率法。實(shí)驗(yàn)室參數(shù)主要統(tǒng)計(jì)描述分析療前療后之變化情況，必要時(shí)比較療前療后各實(shí)驗(yàn)室參數(shù)之均值。安全性分析人群為至少接受一個(gè)劑量試驗(yàn)藥物治療并且進(jìn)行至少一次治療后安全性評(píng)價(jià)的人群。7.臨床療效及安全性7.1入組病例本試驗(yàn)共隨機(jī)入組64例，意向治療(ITT)人群為64例，每組16例，其中脫落病例8例，因此本試驗(yàn)的符合方案(PP)人群為56例。7.2受試者的基礎(chǔ)情況比較ITT人群治療前各組的人口學(xué)特征，各組在性別組成、年齡、體重等方面均無顯著差別，參見表2。8表2ITT人群治療前各組的人口學(xué)特征指標(biāo)高劑量組中劑量組低劑量組零劑量組統(tǒng)計(jì)量P性別'女12(75.00%)4(25.00%)13(81.25%)3(18.75%)12(75.00%)4(25.00%)12(75.00%)4(25.00%)l細(xì)0年齡(歲)31.25±8.2027.88±5.4330.81±10.1227.44±6.381.03030.3857體重男63.13±10.8763.85±12.3161.00±10.6661.50±10.230.18140，5(kg)女55.88±2.7252.00±7.9463.63±11.5153.75±5.871.66900.2307年齡、體重的四組比較用方差分析檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)量為F比較基線時(shí)各組的生命體征，收縮壓、舒張壓、脈率均未見顯著性差異，參見表3。表3基線時(shí)各組受試者的生命體征指標(biāo)高劑量組中劑量組低劑量組零劑量組統(tǒng)計(jì)量P呼吸(次/分)18.13±1,5019.25±4.1418.31±1.0818.94±1.240.80410.4965收縮壓(mmHg)115.06±12.70116.19±9.33115.19±6.51114.63±8.070.07840.9714舒張壓(mmHg)75.63±7.4873.94±5.5373.31士6.3274.81±7.980.34390.7937脈率(次/分)74.25士5.7175.19±4.7875.00±6.6874.44±5.860.09480.9626呼吸、血壓、脈率的四組比較用方差分析檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)量為F比較治療前各組的血液學(xué)檢查，各組的血常規(guī)，包括血紅蛋白、白細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)等指標(biāo)，各組均未見顯著性差異，參見表4。表4基線時(shí)各組受試者的血液學(xué)檢查指標(biāo)指標(biāo)高劑量組中劑量組低劑量組零劑量組統(tǒng)計(jì)量P血紅蛋白(g/L)142.69±17.62148.06±19.51141,50±13.64148,19±13.640.86260.5300白細(xì)胞總數(shù)(109/L)5.29±1.125.22±1.445.42±1.525.08±0.940.43970細(xì)6血小板計(jì)數(shù)(109/L)149.25±38.70155.00±61.34157.56±67.53143.50±51.860.44850.8952紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(1012/L)4.65±0.604.78±0.534.61±0.514.93±0.63l細(xì)l0.3637中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(1012/L)3.00±1,072.87±0.963.09±0.952.96±0.790.39160.9271淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(1012/L)1.76±0.341.84±0.771.69±0.401.65士0.380.65350.7343比較治療前各組受試者的甲狀腺功能狀況，均無顯著性差異，參見表5。9表5基線時(shí)各組受試者的甲狀腺功能指標(biāo)指標(biāo)高劑量組中劑量組低劑量組零劑量組統(tǒng)計(jì)量PTSH(mlU/L)1.53±0.542.i7±i.l01.卯±1.192.04±1.131.08630.3251游離T4(ng/L)15.67±5.0732.26±42.2713.26±3.2513.48±1,341.03730.3807總T4(ng/L)95.01±70,9281.16±40.0890.61±50.92105.20±54.99(U"70.8985游離T3(ng/L)4.63±0.654.42±U04.96±0.485.11±0.481.07150.3528總T3(ng/L)1.89±0.602.06±0.681.86±0.952.28±0.650.80440.柳2治療前組間比較用配對(duì)t檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)量均為t比較治療前篩選期各組的血生化指標(biāo)，包括谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、堿性磷酸酶、總蛋白、白蛋白、尿素氮、肌酐、血脂、電解質(zhì)等，參見表6。表6治療期篩選期各組受試者的血生化指標(biāo)指標(biāo)高劑量組中劑量組低劑量組零劑量組谷草轉(zhuǎn)氮酶83.06±46.2385.31±52.7084.06±36.9290.69±46.16總膽紅素16.36±6.0419.69±9.7818.67±8.8115.72±4,74堿性磷酸酶100.00±42.19102.75±33.89105.00±53.33101.44±42.62總蛋白76.61±6.0875.57±5.9975.27±4.8177.12±6.06白蛋白44.30±4.0044.26±4.5244.57±3.7645.13±3.30總膽固醇4.36±1.244.24±0.984.49±0.683.96±0.48甘油三酯1.11±0.410.93±0.311.14±0.431.03±0.51尿素氮4.52±1.284.10±1.214.57±1.334.46±1.20肌酐71.89±16.3974.06±10.6069.10±12.0675.34±16.01葡萄糖4.89±0.854.65±0.744.75±0.704.66±0.55鉀3.87±0.303.86±0.444.05±0.394.02±0.50鈉141.16±3.38141.25±3.12142.26±3.03140.75±2.80入組時(shí)ALT均值高劑量組、中劑量組、低劑量組和零劑量組分別為122.43±53.74IU/L、163.27±102.19IU/L、161.85±89.79IU/L和267.13士273.26IU/L，各組均無顯著性差異。基線時(shí)ALT均值高劑量組、中劑量組、低劑量組和零劑量組分別為132.06士74.45IU/L、141.31±101.94IU/L、154.81±103.19IU/L和224.94土120.74IU/L，高劑量組和零劑量組有顯著性差異，P值為0.046。零劑量組入組的16例受試者肝功能較其他三組受試者異常程度高。所有64例受試者均無肝硬化。比較用藥前的lg(HBV-DNA)，高劑量組、中劑量組、低劑量組和零劑量組分別為8.95土0.68、8.69±0.89、8.80±1.38和8.35±1.35，各組均無顯著性差異?？梢娫诨€期，除了基線時(shí)受試者的轉(zhuǎn)氨酶水平有顯著性差異，其他肝病基礎(chǔ)情況，如HBV-DNA、是否伴有肝硬化、凝血酶原或者是入組前的肝炎治療情況均無顯著性差異。參見表表7基線時(shí)各組受試者的肝病情況指標(biāo)高劑量組中劑量組低劑量組零劑量組統(tǒng)計(jì)量P肝硬化無16(100.00%)16(1,0%)16(100.00%)16(100.00%)有0(0.00%)0(0.00%)0(0.00%)0(0.00%)過去6個(gè)月內(nèi)是否用過與慢無8(50.00%)8(50.00%)10(62.50%)10(62.50%)0.8400乙肝無關(guān)的藥有8(50.00%)8(50.00%)6(37.50%)6(37.50%)過去6個(gè)月內(nèi)是否用過與慢無16(100.00%)15(93.75%)15(93.75%)16(100.00%)l細(xì)0乙肝有關(guān)的藥有0(0.00%)1(6,25%)1(6.25%)0(0.00%)既往ALT(U/L)122.43±53.74163.27±102.19161.85±89.79267.13±273.265.30840.1506基線ALT(U/L)132.06±74.45141.31±101.94154.81±103.19224.94±120.747.98630.0463HBV-DNA定量8.95士0.688.69±0.898.80±1.388.35士1.353.43030.3299凝血酶原時(shí)間13,04±1.0313.40±1.1113.91±1.2613.40±1.223.64880.3020既往ALT、肝硬化和基線ALT的四組比較用K-W秩和檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)量為x2由上可見，ITT人群在治療前，各組在人口學(xué)特征、生命體征、血液學(xué)檢查、血生化檢査和肝病基礎(chǔ)情況等各方面除基線時(shí)谷丙轉(zhuǎn)氨酶有顯著性差異外，其它方面各組均無顯著差別，可比性好。7.3臨床療效7.3.1主要療效指標(biāo)在PP分析集中，治療12周時(shí)的病毒應(yīng)答率，高劑量組、中劑量組和低劑量組分別為18.75%(3/16)、14.29%(2/14)和15.38%(2/13)，零劑量組為0，P值為0.4716，無顯著性差異，參見表8。表8治療后四組病毒應(yīng)答率的比較(PP分析集)時(shí)間點(diǎn)組別總例數(shù)病毒應(yīng)答例數(shù)病毒應(yīng)答率(％)確切概率值高劑量組1600.00中劑量組1400.00第4周0.1013低劑量組13215.38_零劑量組13_p_^_第8周高劑量組16212.500.5994中劑量組1400.00低劑量組13215.3811零劑量組1317.69高劑量組16318.75中劑量組142!4.29第12周0.4716低劑量組13215.38零劑量組1300.00病毒應(yīng)答率的比較采用確切概率法7.3.2次要療效指標(biāo)7.3.2.1治療前后lg(HBV-DNA)水平的變化在PP分析集中，高劑量組在治療12周后lg(HBV-DNA)水平下降均數(shù)為0.96土1.41，組內(nèi)治療前后相比P值為0.0006，有顯著性差異。中劑量組lg(HBV-DNA)水平下降均數(shù)為0.40±0.90，低劑量組lg(HBV-DNA)水平下降均數(shù)為0.52士1.28，零劑量組lg(HBV-DNA)水平下降均數(shù)為0.44土0.70，三組組內(nèi)治療前后相比均無顯著性差異。四組差值的組間比較無顯著性差異(P-0.4016),但是隨著治療劑量的增大，lg(HBV-DNA)下降水平越大，有劑量效應(yīng)關(guān)系。參見表9。表9治療前后lg(HBV-DNA)水平的比較(PP分析集)第12周下降值的組內(nèi)比較下降值的組間比較lg(HBV-DNA)水平下降值例數(shù)均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差統(tǒng)計(jì)量P值統(tǒng)計(jì)量P值高劑量組160.96±1.4161.00.0006中劑量組140.40±0.9017.50.24392.93590.4016低劑量組130.52±1.2814.50.3396零劑量組130.44±0.7025.50.0803組內(nèi)比較采用符號(hào)秩和檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)量為S:組間比較采用K-W秩和檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)量為x27.3.2.2生化應(yīng)答率、血清HBeAg陰轉(zhuǎn)及聯(lián)合應(yīng)答率在全分析集中，高劑量組、中劑量組、低劑量組和零劑量組的生化應(yīng)答率分別為18.75%、12.50%、6.25%和12.50%,無顯著性差異。治療12周時(shí)，只有高劑量組和零劑量組分別各有l(wèi)例HBeAg陰轉(zhuǎn)。參見表IO。表IO治療12周后ALT復(fù)常率、HBeAg陰轉(zhuǎn)和聯(lián)合應(yīng)答率(全分析集)高劑量組(16例)中劑量組(16例)低劑量組U6例)零劑量組(16例)P值A(chǔ)LT復(fù)常(％)18.75(3例)12.50(2例)6.25(l例)12.50(2例)0.9532HBeAg陰轉(zhuǎn)(％)6.25(l例)006.25(l例)112聯(lián)合應(yīng)答率(％)6.25(l例)0001聯(lián)合應(yīng)答率的比較采用確切概率法由上述臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)可見四個(gè)劑量組在治療前后的病毒應(yīng)答率、lg(HBV-DNA)下降水平、ALT復(fù)常率和HBeAg陰轉(zhuǎn)率這些指標(biāo)，組間均無顯著性差異，這可能由于樣本量太少的關(guān)系。但是隨著治療劑量的增大，產(chǎn)生病毒應(yīng)答率的受試者增多，有著劑量效應(yīng)趨勢(shì)。7.4安全性7.4.1不良事件和不良反應(yīng)試驗(yàn)中共有64例可用于安全性分析，其中高劑量組有2例，中劑量組有4例，低劑量組有4例，零劑量組有2例發(fā)生不良事件，參見表ll。不良反應(yīng)為與藥物很有可能有關(guān)或者可能有關(guān)的不良事件。高劑量組有l(wèi)例發(fā)生全身酸痛和乏力。中劑量組有l(wèi)例發(fā)生脫發(fā)；還有l(wèi)例發(fā)生泛酸、乏力、消化道癥狀加重、黃疸和尿色變黃。低劑量組也有2例發(fā)生脫發(fā)。零劑量組有l(wèi)例發(fā)生脫發(fā)、牙齦出血和活動(dòng)后乏力，雖然判斷與試驗(yàn)藥物有關(guān)，但是很有可能是因?yàn)樘幱诎参縿┙M與肝功能異常有關(guān)。參見表ll。所有不良事件中，未觀察到中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常的表現(xiàn)。表ll不良事件CRF號(hào)組別不良事件嚴(yán)重程度處理是否調(diào)整用藥劑量與試驗(yàn)藥物關(guān)系轉(zhuǎn)歸高劑量肝功能異常輕加用保肝降酶藥否無關(guān)緩解無后遺癥了低劑量尿路感染輕加用抗生素否無關(guān)緩解無后遺癥10低劑量轉(zhuǎn)氨酶進(jìn)行性升高中停藥觀察可能無關(guān)l周后復(fù)査肝功能脫發(fā)輕未處理否可能有關(guān)無變化14低劑量牙齦出血咽干輕輕未處理板藍(lán)根沖劑否否可能無關(guān)無關(guān)緩解無后遺癥緩解無后遺癥肝功異常輕保肝治療否可能無關(guān)緩解無后遺癥脫發(fā)輕未處理否可能有關(guān)無變化15中劑量牙齦出血嘔吐輕輕未處理未處理否否可能無關(guān)可能無關(guān)緩解無后遺癥緩解無后遺癥ALT升高輕復(fù)方益肝靈否可能無關(guān)緩解無后遺癥腰酸輕未處理否可能無關(guān)緩解無后遺癥16零劑量脫發(fā)牙齦出血輕輕未處理甲硝唑溶液漱口否否可能有關(guān)可能有關(guān)無變化緩解無后遺癥活動(dòng)后乏力輕給予保肝藥物否可能有關(guān)緩解無后遺癥1317低劑量脫發(fā)輕未處理否可能有關(guān)無變化全身酸痛輕未處理是可能有關(guān)緩解無后遺癥全身酸痛乏力加重兩肋及背部酸痛中甘利欣靜點(diǎn)是可能有關(guān)緩解無后遺癥19高劑量中甘利欣靜點(diǎn)是可能有關(guān)緩解無后遺癥ALT74U/LTBil133.1中甘利欣靜點(diǎn)是可能有關(guān)緩解無后遺癥返酸輕倍法丁20mgQd否可能有關(guān)緩解無后遺癥乏力中強(qiáng)力寧100ml是有關(guān)緩解無后遺癥20中劑量上腹不適消化道癥狀加重中中茵梔黃31ml是是有關(guān)有關(guān)緩解無后遺癥緩解無后遺癥黃疸中是有關(guān)緩解無后遺癥尿色深黃中是有關(guān)緩解無后遺癥牙痛、牙周炎中藥物治療否無關(guān)緩解無后遺癥32中劑量牙周炎中藥物治療否無關(guān)緩解無后遺癥牙痛、牙周炎中藥物治療否無關(guān)緩解無后遺癥60中劑量上呼吸道感染上呼吸道感染中中口服藥物未特殊處理否否無關(guān)無關(guān)緩解無后遺癥緩解無后遺癥64零劑量轉(zhuǎn)氨酶異常升高消化道癥狀輕中l(wèi)周后隨訪停藥觀察無關(guān)無關(guān)7.4.2嚴(yán)重不良事件和重要不良事件本試驗(yàn)中發(fā)生l例嚴(yán)重不良事件。CRF2號(hào)在治療第4周時(shí)出現(xiàn)肝功能明顯損害，轉(zhuǎn)氨酶進(jìn)行性上升，出現(xiàn)皮膚、粘膜和鞏膜感染，診斷為重度慢性乙型肝炎，判斷與試驗(yàn)藥物異丙景糖酐無關(guān)。緊急揭盲后顯示該受試者在零劑量組，受試者中止試驗(yàn)并對(duì)其積極對(duì)癥治療后緩解。顯而易見是由于受試者處于安慰劑組，本身的慢性乙型肝炎未得到治療而發(fā)生的病情進(jìn)展。CRF16、19和20號(hào)均發(fā)生了需要臨床處理的并且與試驗(yàn)藥物有關(guān)的重要不良事件，參見表ll。7.4.3與安全性有關(guān)的檢查及化驗(yàn)指標(biāo)7.4.3.1生命體征各組在治療前后受試者的體重、收縮壓、舒張壓和脈率都沒有顯著性變化，參見表12。14表12治療前后生命體征的變化<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>7.4.3.2血液學(xué)檢査血液學(xué)的檢查指標(biāo)如血紅蛋白、白細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)等在用藥前后均無顯著性差異，組間亦無顯著性差異，參見表13。表13四組治療前后血常規(guī)檢査指標(biāo)的情況和比較<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>表13續(xù)四組治療前后血常規(guī)檢査指標(biāo)的情況和比較<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>零劑量組-0.13840.8919-1.93420.0770高劑量組0.01960.9846-1.56950.1374白細(xì)胞總數(shù)(109/L)中劑量組低劑量組零劑量組-!.63401.1506-0.00000.J2450.2692l細(xì)O1.22460.2244-1.8270.2369-0.17050.08910.81680.86741.04490.3607高劑量組0.78850.44271.07540.2992血小板計(jì)數(shù)(109/L)中劑量組低劑量組零劑量組-1.2165-0.3043-0.19750.24390.76540.84630.830S0.56181.22220.1947-0.00890.24180.84890.99310.50380.8582高劑量組0.10870.9149-1.09350.2914紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(1012/L)中劑量組低劑量組零劑量組-0.7805-0.U940.0161O.權(quán)0.90670.98740.34340.9492-1.7333-U913-0.63270.10500.25660.53880.54540.8270高劑量組0.03050.9760-1.6167O.認(rèn)中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(1012/L)中劑量組低劑量組零劑量組-1.06291.85820.33530.30580.08430.74240.99830.4011-1.23741.6596-0.68990.23630.12290.50341.18320.2530高劑量組0.10090.9210-0.32390.7505淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(1012/L)中劑量組低劑量組零劑量組-0.6352-0.0632-0.60500.53550.95050.55490.46080,8874-0.9273-1.10721.17360.36950.2卿0.26330.5104表13續(xù)四組治療前后血常規(guī)檢査指標(biāo)的情況和比較第12周項(xiàng)目組別前后組內(nèi)比較差值組間比較統(tǒng)計(jì)量P值統(tǒng)計(jì)量P值高劑量組-3.72820.0022血紅蛋白(g/L)中劑量組低劑量組零劑量組-2.2162-2.4105-1.87490.04680.03290.08530.63000.7558高劑量組-1.45060.1689白細(xì)胞總數(shù)(109/L)中劑量組低劑量組零劑量組-2.8038-0.3790-0.14420.01590.7113O.簡(jiǎn)1.20580.2384血小板計(jì)數(shù)高劑量組中劑量組0.72780.5386O.德0.60000.60720.775917低劑量組零劑量組-0.1719-0.83500.86640.4200高劑量組-2.20160,0450紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(I0'2/L)中劑量組低劑量組零劑量組-1.8858-0.8777-0.97510.08380.39730.3柳0.66760.7214高劑量組-0.93040.3679中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(1012/L)中劑量組低劑量組零劑量組-3.17410.1928-0.05860.00800.85030.95421.2828O.麗高劑量組-2.22570.0430淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(1012/L)中劑量組低劑量組零劑量組-1.7756-0.70850.02850.10110.49220.97771.00600.39527.4.3.3血生化檢査治療前后四組的生化指標(biāo)總膽紅素在治療12周后組間統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異，實(shí)際上總膽紅素的變化沒有超過實(shí)驗(yàn)室正常值范圍，其他的指標(biāo)如肌酐、尿素氮、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、總蛋白、白蛋白、血糖、電解質(zhì)用藥前后均無顯著性變化，參見表14。表14四組治療前后血生化檢查的比較第12周項(xiàng)目組別前后組內(nèi)比較差值組間比較統(tǒng)計(jì)量P值統(tǒng)計(jì)量P值高劑量組0.25960.7987谷草轉(zhuǎn)氨酶中劑量組低劑量組零劑量組0.19880-78560.76890.84550.44870.45680.5003O.畫高劑量組-1,27750.2208總膽紅素中劑量組低劑量組零劑量組2.04191.7549-0.64500.0620O.,0.53101.79560細(xì)1高劑量組2.27510.0380堿性磷酸酶中劑量組低劑量組零劑量組0.32450.41340.03200.柳80.68810.97500.81030.582718高劑量組-0.64530.5285總蛋白中劑量組低劑量組零劑量組-0.53430駕1-0.08740.60220.S6880.93180.28590.9697高劑量組-1.05960.3061白蛋白中劑量組低劑量組零劑量組-0.8190-1.7329O,簡(jiǎn)0.42760.11100.40281細(xì)80.3998高劑量組-0.84360.4122總膽固醇中劑量組低劑量組零劑量組-0.11280.0496-1.41090.87700.27290.26970.56170.8141高劑量組0.78130.4468甘油三酯中劑量組低劑量組零劑量組-0.93491.21330.05520.36690.25290.95691.03130.3729高劑量組-0.96620,3492尿素氮中劑量組低劑量組零劑量組-0.0518-1.柳6-0.32210.95950.08750.75291.01200.3895高劑量組-0.64080.5313肌酐中劑量組低劑量組零劑量組0.20030.16260.26020.84430.87360.79910.34870.9470高劑量組0.17490.8637葡萄糖中劑量組低劑量組零劑量組-0.20250.3565-1.10500.84320.72890.29270.57780細(xì)9高劑量組-2.35740.0324鉀中劑量組低劑量組零劑量組-3.3717-2.1908-1.61130.00500.04890.13310.67690.7127高劑量組2.17330.0462鈉中劑量組低劑量組零劑量組1.28591.41130.97370.2209O.腦0.34940.64040.7464197.4.4由于不良事件或?qū)嶒?yàn)室異常值提前退出的病例中劑量組CRF20號(hào)因化驗(yàn)檢査明顯異常(ALT:343U/L，AST:517U/L，TBih68.1umol/L)，在完成8周治療后脫落；低劑量組CRF10號(hào)因轉(zhuǎn)氨酶進(jìn)行性升高在完成6周治療后退出；零劑量組CRF2號(hào)因發(fā)生嚴(yán)重不良事件在完成治療8周后退出；高劑量組沒有因不良事件而退出的受試者。由上述臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)可見異丙景糖酐最高治療劑量高達(dá)800mg時(shí)對(duì)生命體征、血常規(guī)和血生化等沒有不良影響，是安全的。7.5依從性各組受試者在試驗(yàn)期間，除上述提前退出的受試者，服藥率都在80%120%之間，依從性好，參見表15。表15依從性分析組別例數(shù)均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差最小值Qi中位數(shù)Q3最大值高劑量組16208.000.00208.0020譜208.0020譜208.00中劑量組16204.2512.17160.00208.00208.00208.0020譜低劑量組16191.0041.6156.0020謹(jǐn)208.00208.00208.00零劑量組16175.2561.5228.00160.00208.00208.00208.00綜上所述，異丙景糖酐能有效地抑制乙型肝炎病毒，并且其病毒應(yīng)答率顯示出劑量效應(yīng)關(guān)系，隨著治療劑量的增大，抗病毒效應(yīng)增強(qiáng)，此外，不良事件發(fā)生率較低，除了個(gè)別有輕微脫發(fā)外，未觀察到對(duì)其它系統(tǒng)的不良影響。因此，異丙景糖酐治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎是安全有效的。為了減少主觀因素和偏差，本試驗(yàn)采用了雙盲設(shè)計(jì)，使評(píng)價(jià)更客觀，結(jié)果更可靠。20權(quán)利要求1、異丙景糖酐在制備治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了異丙景糖酐在制備治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎藥物中的應(yīng)用。異丙景糖酐的結(jié)構(gòu)式如下，臨床試驗(yàn)結(jié)果表明異丙景糖酐能有效地抑制乙型肝炎病毒，并且具有劑量效應(yīng)關(guān)系，即隨著治療劑量的增大，其抗病毒效應(yīng)增強(qiáng)；不良事件發(fā)生率較低，僅個(gè)別有輕微脫發(fā)。因此，異丙景糖酐治療人HBeAg陽性慢性乙型肝炎是安全有效的。文檔編號(hào)A61K31/7048GK101485672SQ200810219700公開日2009年7月22日申請(qǐng)日期2008年12月5日優(yōu)先權(quán)日2008年12月5日發(fā)明者左春旭,張喬龍,張明芳,鄭國(guó)愛,黃漫翔申請(qǐng)人:廣東粵龍藥業(yè)有限公司