專利名稱：2-苯羧酸酯青霉烯類化合物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及具有抗菌作用的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物(包括其鹽及其酯的形式)和該化合物的制備方法。此外，本發(fā)明還涉及該類化合物在制備抗菌劑中的應用，以及含有該類化合物作為有效成分的抗菌藥物。
背景技術：
近年來，各類抗生素不斷被開發(fā)和問世，同時針對抗菌劑的耐藥菌也迅速發(fā)展，例如，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、對甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(MSSA)等，這些細菌接觸抗菌藥物后，通過質(zhì)粒或染色體介導發(fā)生變異，獲得耐藥性，給臨床治療造成了新的困擾。從1961年發(fā)現(xiàn)MRSA以來，其已成為世界范圍內(nèi)最常見的院內(nèi)感染病原菌，已有報道的抗菌藥物尚難有效控制此等耐藥菌感染，尤其是MRSA感染，由于該菌株不僅對各類β-內(nèi)酰胺類抗生素有內(nèi)在的耐藥性，而且可通過獲得其它耐藥基因而呈現(xiàn)出對其它類抗生素的多重耐藥性，給臨床治療帶來了嚴重問題。目前，萬古霉素(Vancomycin)成為臨床上治療MRSA感染的一線用藥，但因具有副作用，限制了其在臨床上的應用，而且，隨著萬古霉素在臨床的廣泛應用，對其耐藥的MRSA和腸球菌隨之出現(xiàn)且愈發(fā)頑固。對抗MRSA已成為臨床上更為棘手的問題。因而，迫切需要探尋新的強抗MRSA活性的抗生素，也促使業(yè)界工作者努力研制新型抗耐藥性細菌藥物，設計并篩選具有新化學結(jié)構(gòu)、新作用機制或新作用靶位的新抗菌藥。
在尋求能解決上述問題的有效藥物中，廣譜、高效、低毒的新型β-內(nèi)酰胺抗生素是焦點和熱點所在，其中的碳青霉烯及青霉烯藥物的研發(fā)格外引人矚目。在化學結(jié)構(gòu)上，青霉烯類抗生素與碳青霉烯抗生素不同之處在于5元環(huán)上由硫代替了碳，與碳青霉烯相比，青霉烯化合物具有更廣泛的抗菌活性，對厭氧革蘭氏陽性菌及多數(shù)革蘭氏陰性菌的抗菌活性均等同于或優(yōu)于頭孢菌素及青霉素類抗生素。青霉烯類其固體化合物和酯型前藥可口服吸收，不易被β-內(nèi)酰胺酶水解，同時對脫氫肽水解酶-I(DHP-I)較碳青霉烯穩(wěn)定，其抗綠膿桿菌活性低于碳青霉烯。
青霉烯類抗生素(式1)首次由哈佛大學著名化學家Woodward基于青霉素與頭孢菌素融合的概念，向青霉素骨架中引入雙鍵，以增大β-內(nèi)酰胺反應性，從而提高抗菌活性的設想而設計合成的。
已開發(fā)上市的法羅培南(faropenem，結(jié)構(gòu)如下式)為青霉烯類化合物鈉鹽，是日本Suntory公司生物醫(yī)藥研究所合成，并與山之內(nèi)制藥公司共同開發(fā)的新口服青霉烯類抗生素，是具有很強抗菌活性的廣譜青霉烯類抗生素藥物，特別對金葡菌、耐青霉素的肺炎球菌、糞鏈球菌等革蘭氏陽性菌與脆弱類桿菌等厭氧菌的抗菌活性明顯高于現(xiàn)有頭孢菌素，抗革蘭氏陰性菌活性與口服頭孢菌素相似，對除綠膿桿菌外的需氧及厭氧革蘭氏陽性菌、陰性菌顯示出廣譜抗菌活性。結(jié)構(gòu)上法羅培南屬β-內(nèi)酰胺類，環(huán)上有四氫呋喃基取代，為非酯原型吸收型藥物，對各種β-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定，耐藥菌株少。法羅培南對金葡菌的青霉素結(jié)合蛋白(PBP-1、2、3)、大腸桿菌PBP-2顯示強親和力，表明其抗菌作用強，與現(xiàn)有臨床使用的碳青霉烯類抗生素泰能(tinenam)相比，其顯著特點是對DHP-I穩(wěn)定，因此可單獨給藥，并且安全性高，對厭氧菌及革蘭氏陽性菌的清除率尤其高。因此，法羅培南的強效廣譜抗菌作用已經(jīng)被公認，但其對MRSA缺乏有效的抑菌活性。

Men-10700(Menarini Spa)，化學名為(5R，6S-[(R)-1-羥乙基]-2-(N-甲基甘氨酰胺-N-甲基)青霉烯-3-羧酸，也是現(xiàn)在研究最多的青霉烯類抗生素，其廣譜抗菌活性使之有可能成為治療厭氧菌引起感染的有效抗生素。其C2位為氨基酸衍生物側(cè)鏈，對MRSA和表皮葡萄球菌以外的革蘭氏陽、陰性菌均顯示出高抗菌活性。該化合物對MSSA和表皮葡萄球菌的活性最為顯著，抗菌活性優(yōu)于第三代頭孢菌素；對于革蘭氏陰性菌株MIC90≤2mg/L，但對MRSA療效甚微。因Men-10700在對抗第三代頭孢菌素的革蘭氏陰性菌方面有很好的抗菌效果，業(yè)內(nèi)正在發(fā)展其口服前藥類型。
目前廣譜抗菌的青霉烯類藥物中，如法羅培南等，均表現(xiàn)出對除抗MRSA以外的廣譜抗菌作用，即對MRSA缺乏有效的抑菌活性。因此，尋求新的抗MRSA療效高、副作用小的抗生素成為亟待解決的問題，人們希望能夠開發(fā)出一種無耐藥性、效果更優(yōu)秀、抗菌活性更高的抗生素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人經(jīng)過對青霉烯類構(gòu)效關系的研究和篩選，提出一類具有抗菌作用的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，大量實驗證明該化合物尤其對MRSA有顯著的抑菌活性，解決了上述問題。
本發(fā)明提供了2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，包括其鹽和酯的形式。
本發(fā)明提供了該2-苯羧酸酯青霉烯類化合物的制備方法及合成路線。
本發(fā)明還提供了2-苯羧酸酯青霉烯化合物的抗菌用途，具體的說，是該類化合物在制備抗生素類藥物，尤其是抗MRSA的藥物中的抗菌用途。
本發(fā)明還提供了一種含有有效量的式I化合物的抗生素類藥物組合物，尤其是抗MRSA的藥物組合物。
本發(fā)明提供的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，在青霉烯雙環(huán)母核的C-2位置上連接有2-苯羧酸酯，該化合物結(jié)構(gòu)由通式(I)表示
式中，n為0、1或2；R代表連接在苯環(huán)上的一個或一個以上取代基，選自H、鹵原子、烷氧基、NO2、CN或烷基；R1為H、堿金屬或在生物體內(nèi)水解的酯殘基。
本發(fā)明提供的上述式I結(jié)構(gòu)的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物具有廣譜抗菌作用，尤其對MRSA的抗菌活性優(yōu)于目前市售的青霉烯類抗菌素藥物。
根據(jù)本發(fā)明的目的，通過對2-苯羧酸酯青霉烯類化合物的構(gòu)效關系和抗菌作用的研究，篩選出抗菌作用最強的式I結(jié)構(gòu)的青霉烯類化合物，優(yōu)選化合物結(jié)構(gòu)中n為0、1或2，R為H、F、Cl、Br、1-3個碳的烷氧基(例如OCH3、OC2H5)、NO2、CN或1-3個碳的烷基(例如CH3、C2H5)。
本發(fā)明化合物中，優(yōu)選n＝0，即2-苯甲酸甲酯青霉烯類化合物。
本發(fā)明化合物中，取代基R的位置優(yōu)選為間位或?qū)ξ?，尤其為間位，更優(yōu)選R為H、間位或?qū)ξ蝗〈南趸?、CN或鹵原子。
本發(fā)明的部分具體化合物如下表所示 本發(fā)明提供的上述化合物在其廣譜抗菌的同時，尤其對MRSA有顯著的抑菌活性，對腸球菌、敏感金葡菌也有良好的藥用效果。
本發(fā)明還提供了含有2-苯羧酸酯青霉烯類化合物作為有效成分的抗菌藥物組合物，其含有藥學有效量的式I結(jié)構(gòu)的化合物及可藥用的輔料，包括賦形劑、稀釋劑穩(wěn)定劑和矯味劑等，按照藥劑學常規(guī)方法混合，制成片劑、膠囊、顆粒劑、散劑或糖漿劑的形式口服給藥或以注射劑的形式非口服給藥。
上述制劑可通過常規(guī)制藥方法制備。可用的添加劑包括賦形劑(可以是糖類衍生物如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和山梨糖醇；淀粉衍生物如玉米淀粉、土豆淀粉、糊精和羧甲基淀粉；纖維素衍生物如結(jié)晶纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉；阿拉伯膠；右旋糖酐；硅酸鹽衍生物如偏硅酸鎂鋁；磷酸鹽衍生物如磷酸鈣；碳酸鹽衍生物如碳酸鈣；硫酸鹽衍生物如硫酸鈣等)、粘合劑(例如明膠、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇)、崩解劑(例如纖維素衍生物如羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮)、潤滑劑(例如滑石、硬脂酸鎂、鯨蠟或硼酸等)、穩(wěn)定劑(對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯等)、矯味劑(例如常用的甜味劑和香料等)、稀釋劑和注射液用溶劑(例如水、乙醇和甘油等)。
化合物(I)的給藥量隨患者年齡、性別、病情等差異而不同。一般成人的給藥量可約為0.01-5000mg/日，優(yōu)選1-1000mg/日，更優(yōu)選5-500mg/日。
本發(fā)明提供的化合物作為青霉烯化合物中的一種，可通過適當方法被合成出來，例如可以是包括使具有通式II的化合物與選定的苯羧酸化合物發(fā)生酯化反應，以及脫除保護基的過程，式中T1和T2分別為羥基保護基和羧基保護基。
根據(jù)本發(fā)明的合成方法，通過使2位具有羥甲基并且在母核上的羥基和羧基均帶有保護基的青霉烯雙環(huán)母核(通式II)，在2位羥甲基脫水實現(xiàn)酯化，然后脫去保護基。該通式化合物II可以是市售產(chǎn)品，也可以是按照文獻記載合成得到的中間產(chǎn)物，具體方法可以參見Journal of MedicanalChemistry，1992，Vol.35，No.10 1836-37。
在通式化合物II中，3位羧基和6位羥甲基在酯化前被保護，確保苯羧酸與2位羥甲基脫水酯化，保護基T1和T2的選擇在滿足酯化反應的前提下沒有特別限制，基于被保護基團特性很容易確定，而脫保護基的方法對于本領域普通技術人員來說是很容易實現(xiàn)的。根據(jù)本發(fā)明具體合成方法，T1可為三烷基硅類保護基，例如特丁基二甲基硅烷(TBS)或三甲基硅烷，T2通常為烯丙基保護基或?qū)ο趸S基(PNB)保護基，且使酯化產(chǎn)物順序脫除T1和T2。
在本發(fā)明優(yōu)選實施例中，具體合成過程可以為上述反應物苯環(huán)上有取代基的苯甲酸、苯乙酸或苯丙酸溶于溶劑中(例如四氫呋喃)，加入偶氮二乙酸二乙酯，然后加入式II化合物和三苯磷的四氫呋喃溶液，反應完全后得到酯化產(chǎn)物(過程a)；將該酯化產(chǎn)物溶于有機溶劑，經(jīng)適當反應脫除羥基保護基(過程b)，得到中間產(chǎn)物，該過程可以采用乙腈做溶劑，加入稀鹽酸溶液反應實現(xiàn)，也可以采用四氫呋喃做溶劑，在室溫下加入乙酸，四丁基氟化銨，50℃左右反應6小時而完成；得到中間產(chǎn)物再次用有機溶劑溶解后，連續(xù)加入四(三苯磷)鈀、三苯磷和2-乙基己酸鈉的乙酸基質(zhì)溶液反應，溶劑可以是鹵代烷，例如二氯甲烷，酯類溶劑，例如乙酸乙酯等，反應體系經(jīng)檢測無原料點后(脫除羧基保護基)，加水提取，經(jīng)對水層產(chǎn)物的進一步洗滌，可以先使用二氯甲烷、乙酸己酯洗，然后用乙醚洗，再經(jīng)干燥，純化處理(過程c)，即得本發(fā)明的目的產(chǎn)物，按照該實施例方法制得的產(chǎn)品為一種鈉鹽。
本發(fā)明合成方法的一個實施例可以按照以下過程實現(xiàn)(R、n定義同前述)
C2H5OCON＝NCOOC2H5，PPh3b0.1M HCl，CH3CNcPPh3，Pb(PPh3)4，CH3CHC2H5(CH2)3COONa此外，本發(fā)明還提供了2-苯羧酸酯青霉烯類化合物在制備抗菌劑中的應用，以及含有2-苯羧酸酯青霉烯類化合物作為有效成分的抗菌藥物組合物。抑菌實驗結(jié)果1.樣品1)63-78號產(chǎn)品 (合成樣品)2)法羅培南(Faropenem) (合成樣品)3)Sultacillin (浙江黃巖新華藥物化工有限公司)4)亞胺培南(Imipenem) (默沙東)5)美羅培南(Meropenem) (浙江海正藥業(yè))6)萬古霉素(Vancomycin)(sigma)2.制備抗菌素平皿
將藥物樣品編號，如表1，據(jù)所需藥量用少量甲醇助溶，用蒸餾水補足到所要求量，充分稀釋混勻后，取出前管半量加等量蒸餾水對倍稀釋成15個濃度，每個藥濃度取1mL藥液，加19mL Mueller-Hinton Agar培基混勻后，倒入平皿待冷卻即可。金葡球菌和糞鏈腸球菌實驗用上述培基，其中內(nèi)含5％羊血，其它菌實驗用Mueller-Hinton Agar藥敏培基。
3.種菌方法實驗菌接種在普通營養(yǎng)肉湯中(10mL/管)，將上述接種菌置37℃孵育18h，次日稀釋成106作為實驗用菌濃度，將菌加入微孔板中，用多點接種法在不同濃度的藥物平皿上接種，待干，置攝氏37℃孵育18h后觀察結(jié)果。
表1 青霉烯類化合物的MIC結(jié)果


根據(jù)本發(fā)明提供的上述式(I)化合物及其藥理學實驗結(jié)果，顯示其構(gòu)效關系如下a.由于2位上苯羧酸酯側(cè)鏈的引入，本發(fā)明化合物抗菌活性明顯提高；b.抗菌活性活性隨著延長側(cè)鏈的加長，活性有所降低，因此式(I)化合物中n為0、1或2；c.活性與取代基的性質(zhì)無太大的關系，R可以選自H、F、Cl、Br、NO2、CN或CH3中任一或多個基團，優(yōu)選R為一個上述基團；d.苯環(huán)上不同取代位置的青霉烯類抗生素之間，間位取代的活性明顯高于鄰位和對位，而鄰位和對位活性相當；e.苯環(huán)上取代越多，抗菌活性越差，因此，本發(fā)明化合物的苯環(huán)上取代基團優(yōu)選H、F、Cl、Br、NO2、CN或CH3中任一并且間位取代。
結(jié)論1)對敏感金葡菌，63-78抗菌作用等于或優(yōu)于faropenem，Sultacillin，meropenem，vacomycin。
2)所有青霉烯類化合物均顯示良好的抗MRSA的抗菌活性，與臨床用藥萬古霉素相比，抗菌活性至少相當或優(yōu)于萬古霉素。
3)對腸球菌，63，65，67，68，71，72，73，74，76，77抗菌活性與五種參照藥物相當或優(yōu)于他們。
實驗結(jié)果揭示，在現(xiàn)有的抗菌類的抗生素中，最廣泛應用于臨床并被公眾所熟知的優(yōu)選法羅培南，但其抗MRSA的MIC90為256μg/ml，本發(fā)明的化合物抗MRSA的MIC90最大為4μg/ml，最小(間位取代)為0.25μg/ml，與法羅培南相比藥效提高了64-1000倍，抗菌效果明顯優(yōu)于其他同類藥。
綜上所述，設計并合成的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，尤其是2-苯羧酸甲酯青霉烯類化合物(除64外)，對革蘭氏陽性菌MSSA和腸球菌都具有較高的抗菌活性，特別對于MRSA均顯示出良好的抗菌效果。
具體實施例方式
實施例1(5R，6S)-2-(對氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯31稱取對氯苯甲酸(0.596g，3.811mmol)溶于6mL四氫呋喃中，加入偶氮二乙酸二乙酯(0.664g，3.811mmol)，然后緩慢加入29(1.264g，3.176mmol)和三苯磷(281.00，3.811mmol)的四氫呋喃溶液，顏色逐漸由橙色變?yōu)闇\黃色或無色。反應8h后，TLC檢測，已反應完全。常溫下減壓蒸除四氫呋喃后，加入乙酸己酯提取。分別用飽和碳酸氫鈉和水洗，無水硫酸鈉干燥，濃縮。乙酸己酯∶二氯甲烷(1∶4)洗脫，收集組分。得白色固體31(1.36g，80％)。
m.p.101-102℃.1H NMR(CDCl3)δ8.05(dd，J＝6.9Hz，2H，Ph)，7.47(dd，2H，J＝8.7Hz，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.62(m，1H，H5 and CH2CH＝OH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.79-4.68(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.47-4.20(m，1H，CHOSi)，2.72(d，J＝3.9Hz，H6)，1.28(d，J＝6.9Hz，CH3-CH)，0.87(s，9H)，0.08(s，6H).MS(FAB)m/z 538(M+H+)，537(M)。
實施例2(5R，6S)-2-(間甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯32以間甲氧基苯甲酸和29為原料，操作同31。得淡黃色固體，收率87％。
m.p.78-79℃.1H NMR(CDCl3)δ7.85(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.50(m，1H，Ph)，6.99(m，2H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.60(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.43-5.23(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，2.85(s，3H，-OCH3)，1.25(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-CH)，0.87(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 534(M+H+)。
實施例3(5R，6S)-2-(間氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯33以間氟苯甲酸和29為原料，操作同31。得淡黃色液體，收率79％。
1H NMR(CDCl3)δ7.86(m，1H，Ph)，7.73(d，J＝8.7Hz，1H，Ph)，7.44(m，1H，Ph)，7.31(m，1H，Ph)，5.94(m，1H，CH＝CH2)，5.76-5.63(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.71(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，3.73(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，1.27(m，3H，CH3-CH)，0.87(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 520(M-H+)。
實施例4(5R，6S)-2-(間硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯34以間硝基苯甲酸和29為原料，操作同31。得無色液體，收率91％。
1H NMR(CDCl3)δ8.87(m，1H，Ph)，8.46(m，2H，Ph)，7.69(m，1H，Ph)，5.95(m，1H，CH＝CH2)，5.83-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.76(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.74(m，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 547(M-H+)。
實施例5(5R，6S)-2-(苯丙酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯35以苯丙酸和29為原料，操作同31。得無色液體，收率87％。
1H NMR(CDCl3)δ7.29-7.19(m，5H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.56(d，J＝1.2Hz，1H，H5)，5.51-5.36(m，2H，CH2CH＝CH2)，5.26-5.08(m，2H，CH2OCO)，4.70(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，3.69(m，1H，H6)，2.97(m，2H，OCCH2CH2)，2.69(m，2H，OCCH2CH2)，1.23(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-CH)，0.88(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 530(M-H+)。
實施例6(5R，6S)-2-(苯乙酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯36以苯乙酸和29為原料，操作同31。得白色固體，收率93％。
m.p.67-69℃.1H NMR(CDCl3)δ7.30(m，5H，Ph)，5.90(m，1H，CH＝CH2)，5.56-5.48(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.41-5.08(m，3H，CH2CH＝CH and CH2OCO)，4.68(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.22(m，1H，CHOSi)，3.67(m，3H，H6 and OCCH2Ph)，1.24(d，J＝8.7Hz，3H，CH3-CH)，0.88(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 516(M-H+)。
實施例7(5R，6S)-2-(對甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯37以對甲氧基苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色晶體，收率89％。
m.p.73-75℃.1H NMR(CDCl3)δ8.00(d，J＝9.9Hz，2H，Ph)，6.93(d，J＝9.0Hz，2H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.60(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.43-5.30(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，3.86(s，3H，OCH3)，3.71(d，J＝4.8Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.06(s，6H).FAB-MSm/z534(M+H+))，532(M-H+)。
實施例8(5R，6S)-2-(對氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯38以對氟苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色晶體，收率86％。
m.p.100-101.5℃.1H NMR(CDCl3)δ8.07(m，2H，Ph)，7.12(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.62(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.74(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.73(dd，J＝1.5，4.5Hz，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.88(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 522(M+H+)。
實施例9(5R，6S)-2-(五氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯39以五氟苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色晶體，收率80％。
m.p.110-111℃。1H NMR(CDCl3)δ5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.80(d，J＝14.7Hz，1H，CH2-CH＝CH)，5.64(s，1H，H5)，5.44-5.24(m，3H，CH2CH＝CHand，CH2OCO)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.75(m，1H，H6)，1.23(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-H)，0.88(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z592(M-H+)。
實施例10(5R，6S)-2-(對溴苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯40以對溴苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色晶體，收率86％。
m.p.125-127℃.1H NMR(CDCl3)δ7.90(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，7.59(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.62(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.72(dd，J＝1.5，4.5Hz，1H，H6)，1.22(d，J＝6.6Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 582(M+H+)。
實施例11(5R，6S)-2-(鄰氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯41以鄰氟苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色固體。收率94％。
m.p.81.5～82.5℃.1H NMR(CDCl3)δ8.00(m，1H，Ph)，7.58(m，1H，Ph)，7.22(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.78-5.62(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.23(m，1H，CHOSi)，3.73(dd，J＝2.1，4.5Hz，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.88(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 522(M+H+)。
實施例12(5R，6S)-2-(鄰甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯42以鄰甲氧基苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色晶體，收率87％。
m.p.62-64℃.1H NMR(CDCl3)δ7.94(m，1H，Ph)，7.41(m，1H，Ph)，7.26(m，2H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.74-5.61(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.72(dd，J＝1.5，4.5Hz，1H，H6)，2.62(s，3H，CH3)，1.22(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-CH)，0.86(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/Z 516(M-H+)。
實施例13(5R，6S)-2-(對氰基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯43以對氰基苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色晶體，收率76％。
m.p.100～102℃.1H NMR(CDCl3)δ8.14(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，7.76(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，5.91(m，1H，CH＝CH2)，5.79-5.63(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.73(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，1.22(d，J＝6.0Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.07(s，6H).FAB-MSm/z 528(M)。
實施例14(5R，6S)-2-(對硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯44以對硝基苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色固體，收率95％。
m.p.152-154℃.1H NMR(CDCl3)δ8.30(m，4H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.81-5.64(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.25(m，3H，CH2OCOand CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.74(dd，J＝1.8，4.5Hz，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.87(s，9H)，0.08(s，6H).
FAB-MSm/z 549(M+H+)，547(M-H+)。
實施例15(5R，6S)-2-(鄰硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯45以鄰硝基苯甲酸和29為原料，操作同31。得無色液體，收率79％。
1H NMR(CDCl3)δ7.95(m，1H，Ph)，7.77(m，1H，Ph)，7.68(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.77-5.63(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.44-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，3.73(dd，J＝2.1，4.2Hz，1H，H6)，1.22(d，J＝6.3Hz，3H，CH3CH)，0.87(s，9H)，0.06(s，6H).FAB-MSm/z 547(M-H+)。
實施例16(5R，6S)-2-(鄰氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-叔丁基-2-二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯46以鄰氯苯甲酸和29為原料，操作同31。得白色固體，收率81％。
m.p.130-131℃.1H NMR(CDCl3)δ8.07(m，2H，Ph)，7.12(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.62(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.24(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.74(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.73(dd，J＝1.5，4.5Hz，1H，H6)，1.23(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)，0.88(s，9H)，0.08(s，6H).FAB-MSm/z 399(M+H+)。
實施例17(5R，6S)-2-(對氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯47在31(1.5mmol)的乙腈溶液中加入0.1N的稀鹽酸水溶液45mL，攪拌反應12h后，TLC檢測已反應完全。在反應混合物中加入8％的的氫氧化鈉水溶液4.5mL。濃縮至很少體積。加入乙酸己酯，用飽和食鹽水洗三次后，無水硫酸鈉干燥。真空蒸去乙酸己酯，乙酸己酯二氯甲烷(4∶1，1∶1)洗脫，收集產(chǎn)物組分，得到白色固體，收率67％。
m.p.131-132℃.1H NMR(CDCl3)δ7.98(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，7.46(d，H＝10.8，2H，Ph)，6.00-5.88(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.65(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73-4.66(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.29-4.21(m，1H，CHOSi)，3.77(d，J＝6.6Hz，1H，H6)，1.34(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 424(M+H+)。
實施例18(5R，6S)-2-(鄰甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯48以32為原料，操作同47。得白色晶體，收率81％。
m.p.94-95℃.1H NMR(CDCl3)δ7.85(m，1H，Ph)，7.51(m，1H，Ph)，6.99(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.70-5.63(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.25(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.75(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.22(m，1H，CHOSi)，3.76(d，J＝1.5Hz，1H，H6)，1.35(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).
FAB-MSm/z 420(M+H+)。
實施例19(5R，6S)-2-(間氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯49以33為原料，操作同47。得淡黃色固體，收率85％。
m.p.103-104℃.1H NMR(CDCl3)δ7.84(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.72(d，J＝9.3，1H，Ph)，7.44(m，1H，Ph)，7.30(m，1H，Ph)，5.95(m，1H，CH＝CH2)，5.73-5.66(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.76(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.78(d，J＝6.3Hz，1H，H6)，1.34(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 407(M+)。
實施例20(5R，6S)-2-(間硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯50以34為原料，操作同47。得白色晶體，收率82％。
m.p.160-161℃.1H NMR(CDCl3)δ8.87(s，1H，Ph)，8.47-8.37(m，2H，Ph)，7.69(m，1H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.80-5.67(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.46-5.27(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.80(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.81(m，1H，H6)，1.35(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 434(M+)。
實施例21(5R，6S)-2-(苯丙酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯51以35為原料，操作同47。得白色晶體。收率90％。
m.p.77-78℃.1H NMR(CDCl3)δ7.31(m，5H，Ph)，5.94(m，1H，CH＝CH2)，5.70(s，1H，H5)，5.60-5.28(m，2H，CH2CH＝CH2)，5.28-5.09(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.79(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.73(m，1H，H6)，2.97(m，2H，OCCH2CH2)，2.74(m，2H，OCCH2CH2)，1.34(d，J＝3.6Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 417(M+)。
實施例22(5R，6S)-2-(苯乙酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯52
以36為原料，操作同47。得黃色晶體。收率86％。
m.p.71-73℃.1H NMR(CDCl3)δ7.30(m，5H，Ph)，5.93(m，1H，CH＝CH2)，5.59-5.10(m，5H，H5，CH2CH＝CH2，CH2OCO)，4.73(m，2H，CH2-CH＝CH)，4.22(m，1H，CHOSi)，3.73(d，J＝6.9Hz，1H，H6)，3.67(s，2H，OCCH2)，1.34(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 403(M+)。
實施例23(5R，6S)-2-(對甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯53以37為原料，操作同47。得白色晶體。收率92％。
m.p.89-90℃.1H NMR(CDCl3)δ8.00(m，2H，Ph)，6.92(m，2H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.69-5.63(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.25(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.73(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.86(m，1H，H6)，3.75(m，1H，H6)，1.34(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z420(M++H)。
實施例24(5R，6S)-2-(對氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯54以38為原料，操作同47。得白色晶體。收率86％。
m.p.103-104℃.1H NMR(CDCl3)δ8.07(m，2H，Ph)，7.13(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.78(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.77(dd，J＝2.1，6.9Hz，1H，H6)，1.35(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z407(M+H+)。
實施例25(5R，6S)-2-(五氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯55以39為原料，操作同47。得白色固體。收率89％。
m.p.164-166℃.1H NMR(CDCl3)δ5.95(m，1H，CH＝CH2)，5.76(d，J＝15Hz，1H，CH2CH＝CH)，5.67(d，J＝1.8Hz，1H，H5)，5.45-5.26(m，3H，CH2-CH＝Ch and CH2OCO)，4.77(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.78(m，1H，H6)，1.35(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).EAB-MSm/Z 268(M-C6H5COO+)。
實施例26(5R，6S)-2-(對溴苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯56以40為原料，操作同47。得白色晶體。收率82％。
m.p.138-140℃.1H NMR(CDCl3)δ7.89(d，J＝8.1Hz，2H，Ph)，7.59(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.96(m，1H，CH＝CH2)，5.72-5.64(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.78(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.77(d，J＝6.0Hz，1H，H6)，1.34(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z 467(M+)，469(M++2)。
實施例27(5R，6S)-2-(鄰氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯57以41為原料，操作同47。得無色液體。收率81％。
1H NMR(CDCl3)δ7.95(m，1H，Ph)，7.55(m，1H，Ph)，7.19(m，2H，Ph)，5.94(m，1H，CH＝CH2)，5.74-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.25(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.77(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.77(m，1H，H6)，1.34(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z 407(M+)。
實施例28(5R，6S)-2-(鄰甲基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯58以42為原料，操作同47。得白色晶體。收率87％。
m.p.110-111℃.1H NMR(CDCl3)δ7.93(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.42(m，1H，Ph)，7.25(m，2H，Ph)，5.98(m，1H，CH＝CH2)，5.71-5.64(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.75(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.77(d，J＝6.6Hz，1H，H6)，2.61(s，3H，CH3)，1.34(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 403(M+)。
實施例29(5R，6S)-2-(對硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯59
以43為原料，操作同47。得白色晶體。收率79％。
m.p.165-166℃.1H NMR(CDCl3)δ8.15(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，7.77(d，J＝7.8Hz，2H，Ph)，5.95(m，1H，CH＝CH2)，5.76-5.66(m，2H，H5 andCH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.81(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.78(d，J＝6.0Hz，1H，H6)，1.35(d，J＝6.0Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 415(M+H+)。
實施例30(5R，6S)-2-(對硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯60以44為原料，操作同47。得白色固體。收率83％。
m.p.172-174℃.1H NMR(CDCl3)δ8.26(m，4H，Ph)，5.92(m，1H，CH＝CH2)，5.78-5.67(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.27(m，3H，CH2OCOand CH2-CH＝CH)，4.76(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.26(m，1H，CHOSi)，3.78(d，J＝7.8Hz，1H，H6)，1.35(d，J＝6.0Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 433(M-H+)。
實施例31(5R，6S)-2-(鄰硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯61以45為原料，操作同47。得淡黃色晶體。收率88％。
m.p.130-133℃.1H NMR(CDCl3)δ7.95(m，1H，Ph)，7.79-7.66(m，3H，Ph)，5.96(m，1H，CH＝CH2)，5.75-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.45-5.26(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.75(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.24(m，1H，CHOSi)，3.77(m，1H，H6)，1.34(d，J＝5.7Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z434(M+)。
實施例32(5R，6S)-2-(鄰氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸烯丙酯62以46為原料，操作同47。得白色固體。收率82％。
m.p.145-146℃.1H NMR(CDCl3)δ7.88(d，J＝6.6Hz，1H，Ph)，7.51-7.31(m，3H，Ph)，5.99(m，1H，CH＝CH2)，5.74-5.65(m，2H，H5 and CH2CH＝CH)，5.48-4.84(m，3H，CH2OCO and CH2-CH＝CH)，4.72(m，2H，OCH2CH＝CH2)，4.25(m，1H，CHOSi)，3.76(dd，J＝1.5，6.6Hz，1H，H6)，1.37(d，J＝7.2Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 424(M+H+)。
實施例33(5R，6S)-2-(對氯苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽63將47(1.25mmol)溶于1.5mL二氯甲烷中，室溫下連續(xù)加入四(三苯磷)鈀(0.0125mmol)，三苯磷(0.0625mmol)和2-乙基己酸鈉(1.43mmol)的乙酸己酯溶液1.5mL。攪拌反應1h后TLC檢測，已無原料點。加入2mL水提取，水層用二氯甲烷和乙酸己酯洗，用乙醚洗。冷凍干燥得到黃色固體。用大孔樹反相柱純化，梯度洗脫水；水∶丙酮(95∶5；9∶1；4∶1；1∶1)；丙酮。所得組分冷凍干燥得到白色固體63，收率72％。
1H NMR(CDCl3)δ8.02(d，J＝5.1Hz，2H，Ph)，7.53(d，J＝5.1Hz，2H，Ph)，5.80(d，J＝8.4Hz，1H，H5)，5.61 and 5.40(m，2H，CH2OCO)，4.11(m，1H，CHOSi)，3.66(d，J＝4.2，1H，H6)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-H).IR(KBr)νmaxcm-11770(β-lactam C＝O)，1724(OC＝O)，1595，1489.FAB-MSm/z 428(M++Na)。
實施例34(5R，6S)-2-(鄰甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽64以48為原料，操作同47。得白色固體，收率67％。
1H NMR(CDCl3)δ7.77(d，J＝4.2Hz，1H，Ph)，7.54(m，1H，Ph)，7.11(d，J＝5.1Hz，1H，Ph)，6.98(m，1H，Ph)，5.72(d，J＝9.0Hz，1H，CHOCO)，5.63(s，1H，H5)，5.42(d，J＝9.0Hz，1H，CHOCO)，4.12(m，1H，CHOSi)，3.88(s，3H，OCH3)，3.78(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-H).13CNMR(D2O)δ175.80(COONa)，166.95(C＝O)，160.97(C＝O)，145.51(C＝C)，127.91(C＝C)，135.46，132.81，127.92，121.38，120.11，113.30(6C，Ph)，71.67(2′-C)，68.42(OCH2)，66.16(C6)，63.80(1′-C)，56.38(C5)，21.71(CH3)；IR(KBr)νmaxcm-11759(β-lactam C＝O)，1736(OC＝O)，1601，1491.FAB-MSm/z 402(M+H+)。
實施例35(5R，6S)-2-(間氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽65
以49為原料，操作同47。得淡黃色固體，收率64％。
1H NMR(CDCl3)δ7.50(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.59(m，1H，Ph)，7.47-7.40(m，1H，Ph)，7.33-7.27(m，1H，Ph)，5.70(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.56(d，J＝1.2Hz，1H，H5)，5.36(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.02(m，1H，CHOSi)，1.70(dd，J＝1.2，6.6Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝10.8Hz，3H，CH3-H).
13CNMR(D2O)δ175.72(COONa)，165.82(C＝O)，165.54(C＝O)，162.30(C＝C)，144.96(C＝C)，133.09，132.99，128.11，126.60，121.30，117.2(6C，Ph)，71.73(C6)，66.08(CHOH)，63.84(C5)，62.12(CH2O)，21.67(CH3)；FAB-MSm/z390(M+H+)。
實施例36(5R，6S)-2-(間硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽66以50為原料，操作同47。得白色固體，收率78％。
1H NMR(CDCl3)δ8.71(s，1H，Ph)，8.41(d，J＝6.9Hz，1H，Ph)，8.31(d，J＝7.8Hz，1H，Ph)，7.67(m，1H，Ph)，5.79(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.56(d，J＝1.5Hz，1H，H5)，5.40(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.04(m，1H，CHOSi)，3.67(d，J＝6.9Hz，1H，H6)，1.20(d，J＝6.6Hz，3H，CH3-H).IR(KBr)νmaxcm-11763(β-lactam C＝O)，1732(OC＝O)。
實施例37(5R，6S)-2-(苯丙酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽67以51為原料，操作同47。得淡黃色固體，收率54％。
1H NMR(CDCl3)δ7.29-7.17(m，5H，Ph)，5.56(d，J＝6.0Hz，1H，H5)，5.52and 5.18(d，J＝8.7Hz，CH2OCO)，4.11(m，1H，CHOSi)，3.73(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，2.94(m，2H，OCCH2)，2.65(m，2H，OCCH2CH2)，1.30(d，J＝7.8Hz，3H，CH3-H)。
實施例38(5R，6S)-2-(苯乙酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽68以52為原料，操作同47。得淡黃色固體，收率72％。
1H NMR(CDCl3)δ7.20(m，5H，Ph)，5.48(m，2H，H5 and CHOCO)，5.10(d，J＝14.4Hz，1H，CHOCO)，4.01(m，1H，CHOSi)，3.60(s，3H，H6 andOC-CH2-Ph)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 386(M+H+)。
實施例39(5R，6S)-2-(對甲氧基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽69以53為原料，操作同47。得白色固體，收率65％。
1H NMR(CDCl3)δ7.91(m，2H，Ph)，6.90(m，2H，Ph)，5.62-5.18(3H，H5and CH2OCO)，4.13(m，1H，CHOSi)，3.80(s，3H，OCH3)，3.23(m，1H，H6)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-H).FAB-MS(m/z)402(M+H+)。
實施例40(5R，6S)-2-(對氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽70以54為原料，操作同47。得淡黃色固體，收率79％。
1H NMR(CDCl3)δ8.03-7.95(m，2H，Ph)，7.19-7.07(m，2H，Ph)，5.70(d，J＝14.7，1H，CHOCO)，5.60(s，1H，H5)，5.35(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.11-3.99(m，1H，CHOSi)，3.64(d，J＝1.2Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 390(M+H+)。
實施例41(5R，6S)-2-(五氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽71以55為原料，操作同47。得白色固體，收率81％。
1H NMR(CDCl3)δ5.83(d，J＝14.1Hz，1H，CHOCO)，5.54(d，J＝1.2Hz，1H，H5)，5.37(d，J＝14.1Hz，1H，CHOCO)，4.04(m，1H，CHOSi)，3.62(dd，J＝1.2，7.2Hz，H6)，1.22(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H)；FAB-MSm/z 462(M+H+)。
實施例42(5R，6S)-2-(對溴苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽72以48為原料，操作同47。得白色固體，收率58％。
1H NMR(D2O)δ7.83(d，J＝8.4Hz，2H，Ph)，7.52(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.70(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.55(d，J＝1.2H，1H，H5)，5.35(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.03(m，1H，CHOSi)，3.67(dd，J＝1.2，6.9Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).IR(KBr)νmaxcm-11766(β-lactam C＝O)，1718(OC＝O).
FAB-MSm/z 450(M+H+)。
實施例43(5R，6S)-2-(鄰氟苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽73以57為原料，操作同47。得白色固體，收率77％。
1H NMR(D2O)δ7.90-7.84(m，1H，Ph)，7.60-7.53(m，1H，Ph)，7.24-7.10(m，2H，Ph)，5.65(d，J＝18.6Hz，1H，H5)，5.55 and 5.35(m，2H，CH2OCO)，4.12-3.99(m，1H，CHOSi)，3.66(d，J＝5.7Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.9Hz，3H，CH3-H).IR(KBr)νmaxcm-11754(β-lactam C＝O)，1736(OC＝O).FAB-MSm/z390(M+H+)。
實施例44(5R，6S)-2-(鄰甲基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽74以58為原料，操作同47。得白色固體，收率82％。
1H NMR(D2O)δ7.91(d，J＝4.8Hz，2H，Ph)，7.45(m，1H，Ph)，7.29(m，2H，Ph)，5.78(d，J＝8.7Hz，1H，CHOCO)，5.62(s，1H，H5)，5.39(d，J＝8.7Hz，1H，CHOCO)，4.11(m，1 H，CHOSi)，3.68(d，J＝4.2，1H，H6)，1.30(d，J＝3.6Hz，3H，CH3-H).13CNMR(D2O)δ175.16(COONa)，168.20(C＝O)，166.46(C＝O)，142.32(C＝C)，141.41(C＝C)，133.41，132.73，131.69，130.31，129.98，126.87(6C，Ph)，71.99(C6)，66.40(CHOH)，63.89(C5)，61.38(CH2O)，21.84(CH3CHO)，21.69(PhCH3)；FAB-MSm/z 386(M+H+)，408(M+Na+)。
實施例45(5R，6S)-2-(對氰基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽75以59為原料，操作同47。得淺黃色固體，收率48％。
m.p.130-131℃.1H NMR(D2O)δ7.83(d，J＝8.4Hz，2H，Ph)，7.52(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.70(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.55(d，J＝1.2H，1H，H5)，5.35(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.03(m，1H，CHOSi)，3.67(dd，J＝1.2，6.9Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/Z 397(M+H+)。
實施例46(5R，6S)-2-(對硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽76以60為原料，操作同47。得淡黃色固體，收率74％。
1H NMR(D2O)δ8.08(m，2H，Ph)，7.80(d，J＝8Hz，2H，Ph)，5.72(d，J＝14.5Hz，1H，CHOCO)，5.56(s，1H，H5)，5.38(d，J＝14.5Hz，1H，CHOCO)，4.03(m，1H，CHOSi)，3.70(d，J＝6.5Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.5Hz，3H，CH3-H).
FAB-MSm/z 417(M+H+)，439(M+Na+)。
實施例47(5R，6S)-2-(鄰硝基苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽77以61為原料，操作同47。得白色固體，收率65％。
1H NMR(D2O)δ8.00-7.66(m，4H，Ph)，5.80(d，1H，H5)，5.65 and 5.42(m，2H，CH2OCO)，4.12(m，1H，CHOSi)，3.80(d，J＝3.9Hz，1H，H6)，1.30(d，J＝3.9Hz，3H，CH3-CH).FAB-MSm/z 417(M+H+)。
實施例48(5R，6S)-2-(苯甲酸)甲酯-6-[(1R)-1-羥乙基]-青霉烯-3-羧酸單鈉鹽78以62鄰氯為原料，操作同47。得白色固體，收率55％。
1H NMR(D2O)δ7.83(d，J＝8.4Hz，2H，Ph)，7.52(d，J＝8.7Hz，2H，Ph)，5.70(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，5.55(d，J＝1.2H，1H，H5)，5.35(d，J＝14.7Hz，1H，CHOCO)，4.03(m，1H，CHOSi)，3.67(dd，J＝1.2，6.9Hz，1H，H6)，1.21(d，J＝6.3Hz，3H，CH3-H).FAB-MSm/z 406(M+H+)。
權利要求
1.2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，其特征在于，該化合物結(jié)構(gòu)如通式I所示 其中，n為0、1或2，R代表連接在苯環(huán)上的一個或一個以上取代基，選自H、鹵原子、烷氧基、NO2、CN或烷基，R1為H、堿金屬或在生物體內(nèi)水解的酯殘基。
2.權利要求1所述的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，其中，R為C1-C3的烷氧基或烷基。
3.權利要求1所述的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，其中，R取代基團為間位或?qū)ξ蝗〈?br> 4.權利要求1或3所述的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，其中，R為H、硝基、CN或鹵原子。
5.權利要求1所述的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物，其為2-苯甲酸甲酯青霉烯化合物。
6.權利要求1所述的式I化合物的制備方法，其包括使具有通式II的化合物與選定的苯羧酸化合物發(fā)生酯化反應，以及脫除保護基的過程， 式中T1和T2均為保護基。
7.權利要求6所述的制備方法，其中，使酯化產(chǎn)物順序脫除保護基T1和T2。
8.權利要求1-5任一項所述的2-苯羧酸酯青霉烯類化合物在制備抗生素類藥物中的應用。
9.權利要求8所述的應用，其中所述2-苯羧酸酯青霉烯類化合物用于制備可抗MRSA的抗生素藥物。
10.抗菌藥物組合物，其中含有權利要求1-5的任一化合物的可藥用酸、鹽或酯作為活性成分。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有抗菌作用的2－苯羧酸酯青霉烯類化合物，結(jié)構(gòu)如下所示，包括其鹽和酯，該化合物具有強效抗革蘭氏陽性菌，尤其是抗MRSA的活性，本發(fā)明還涉及該2－苯羧酸酯青霉烯類化合物的制備方法和該化合物在制備抗菌劑中的應用，以及含有該化合物作為有效成分的抗菌藥物。
文檔編號A61K31/429GK1556109SQ20041000038
公開日2004年12月22日 申請日期2004年1月9日 優(yōu)先權日2004年1月9日
發(fā)明者劉浚, 韓紅娜, 陳曉芳, 金潔, 王燕云, 屈傳星, 劉 浚 申請人:中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥生物技術研究所