本發(fā)明屬于藥物合成技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種N-鹵代芳基取代的胺類化合物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

細(xì)菌等病原微生物廣泛存在于人類生活的自然界。在空氣、土壤與水體中，在人類和動(dòng)植物的體表及其與外界相通的腔道中，在各種物體表面，均無(wú)例外地有細(xì)菌等病原微生物存在。就人類自身而言，一位健康成人體表與外界相通的腔道定植的細(xì)菌總數(shù)，是人體組織細(xì)胞總數(shù)的10倍，其數(shù)量之多與種類之雜，對(duì)人類健康之重要，盡管至今并未為人類真正充分了解，不過(guò)有一點(diǎn)已經(jīng)清楚，即它們所形成的正常微生物群，總體上講對(duì)人體健康是有益而無(wú)害的，隨著抗生素在臨床的廣泛應(yīng)用，當(dāng)不合理應(yīng)用抗菌藥物之后，對(duì)人體正常菌群來(lái)說(shuō)，其中敏感菌群受到抑制或殺滅，而未能被抑殺的不敏感菌群，或具有耐藥性的菌群卻能乘機(jī)大量繁殖細(xì)菌很快對(duì)抗生素產(chǎn)生了耐藥性，而且，隨著抗生素的不斷更新?lián)Q代，細(xì)菌的耐藥性不斷增強(qiáng)，有結(jié)果分析表明(參考文獻(xiàn)廖曉輝.抗菌藥物臨床應(yīng)用中的問(wèn)題與對(duì)策[J].中華醫(yī)院管理雜志.2005，21；122-125.)，在青霉素應(yīng)用于臨床后的2年～3年內(nèi)，75％的金葡菌隨之產(chǎn)生了耐藥性，目前對(duì)青霉素敏感的金葡菌不到10％；而紅霉素僅僅在臨床使用5個(gè)月后，即有70％的金葡菌對(duì)其產(chǎn)生耐藥，耐藥性產(chǎn)生速度之快令人難以想象。近年來(lái)臨床研究表明，細(xì)菌耐藥現(xiàn)象對(duì)人類的身心健康構(gòu)成了極大的威脅。

抗菌藥物是指具有殺菌或抑菌活性的，一類主要用于治療細(xì)菌性與真菌性感染的藥物。抗菌藥物既有天然的，也有人工半合成與合成的。各種抗菌藥物的抗菌譜不一，有的窄，例如異煙肼只對(duì)各型結(jié)核分枝桿菌有高度選擇性抗菌作用；再如萬(wàn)古霉素只對(duì)革蘭陽(yáng)性球菌與桿菌具有抗菌作用；有的稍寬，例如青霉素對(duì)革蘭陽(yáng)性菌、革蘭陰性球菌、嗜血桿菌屬細(xì)菌、致病螺旋體和放線菌等有抗菌作用；有的抗菌譜更廣。例如碳青霉烯類抗生素對(duì)98％的病原菌具有殺菌作用。醫(yī)學(xué)知識(shí)告訴我們，引起人類任何一種細(xì)菌性感染大多為一種細(xì)菌，少數(shù)可為兩種細(xì)菌，三種或多種細(xì)菌同時(shí)引起某種感染的機(jī)會(huì)極少。從理論上講，我們只需針對(duì)一兩種致病菌治療細(xì)菌性感染即夠，沒(méi)有必要去抑殺并未證實(shí)與當(dāng)前感染無(wú)關(guān)的定植菌(它們大多是人體的正常微生物群)?？上В壳翱晒┡R床應(yīng)用的“理想化”的窄譜抗菌藥物偏少，而廣譜抗菌藥物卻較多。假如經(jīng)常使用廣譜抗菌藥物，不可避免地將抑殺許多與當(dāng)前感染無(wú)關(guān)的正常微生物群。所以，希望在抗感染治療過(guò)程中，盡量選用針對(duì)性較強(qiáng)而抗菌譜相對(duì)較窄的抗菌藥物，既能治愈感染性疾病，又能盡量維護(hù)人體正常微生物群。鑒于細(xì)菌的耐藥性不斷增強(qiáng)，且耐藥機(jī)制日趨復(fù)雜，在用藥劑量和療程上遵循“最小有效劑量、最短必須療程”的原則；按照價(jià)廉、有效原則選擇使用抗生素；首選有效、窄譜的抗生素，減少?gòu)V譜抗生素的使用，合理采用聯(lián)合用藥。針對(duì)日益嚴(yán)峻的細(xì)菌耐藥性和耐藥菌感染，醫(yī)學(xué)界已經(jīng)采取多種措施進(jìn)行積極應(yīng)對(duì)，研發(fā)可供臨床應(yīng)用的“理想化”的窄譜抗菌藥物受到廣泛關(guān)注，也是重中之重。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明針對(duì)上述的問(wèn)題，提供了一種N-鹵代芳基取代的胺類化合物及其合成方法和抗菌應(yīng)用。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明公開(kāi)了一種N-鹵代芳基取代的胺類化合物，該化合物的結(jié)構(gòu)如式(I)所示：

其中，X為氟原子或者氯原子；Y為氟原子或者氯原子；R'為氫原子、甲基、乙基；R為對(duì)氟苯基、鄰氟苯基、2,4-二氟苯基、2,6-二氟苯基、3,4-二氟苯基、3,4,5-三氟苯基、苯基、呋喃基、2-甲基呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、四氫吡喃基、3,4-亞甲二氧基苯基、萘基；n為0、1或2；當(dāng)R'為H、且n為0時(shí)，R不為苯基。本發(fā)明還公開(kāi)了一種N-鹵代芳基取代的胺類化合物的制備方法，按照如下反應(yīng)式，將如式(II)所示的多鹵代間苯二甲腈化合物與如式(III)所示的胺類化合物進(jìn)行親核取代反應(yīng)，制得如式(I)所示的N-鹵代芳基取代的胺類化合物；

反應(yīng)式為：

其中，式(II)中，X為氟原子或者氯原子；Y為氟原子或者氯原子；

式(III)中，R'為氫原子、甲基、乙基；R為對(duì)氟苯基、鄰氟苯基、2,4-二氟苯基、2,6-二氟苯基、3,4-二氟苯基、3,4,5-三氟苯基、苯基、呋喃基、2-甲基呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、四氫吡喃基、3,4-亞甲二氧基苯基、萘基；n為0、1或2；當(dāng)R'為H、且n為0時(shí)，R不為苯基。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，包括如下步驟：

步驟(1)，將如式(II)所示的多鹵代間苯二甲腈化合物于非質(zhì)子溶劑中溶解后，將如式(III)所示的胺類化合物加入其中，于0℃～40℃下進(jìn)行反應(yīng)并采用TLC跟蹤反應(yīng)，反應(yīng)完全之后，立即加入冰水淬滅，得到反應(yīng)液；多鹵代間苯二甲腈化合物與胺類化合物的摩爾比為1:1～1:1.2；非質(zhì)子溶劑的體積與多鹵代間苯二甲腈化合物的摩爾比為10～15mL/1mmol。

步驟(2)，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析分離，即得到如式(I)所示的N-鹵代芳基取代的胺類化合物。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述非質(zhì)子溶劑為N,N-二甲基甲酰胺、1,4-二氧六環(huán)、乙腈、四氫呋喃或丙酮。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，反應(yīng)時(shí)間為10～60分鐘。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的柱層析的采用的流動(dòng)相為石油醚和乙酸乙酯，體積比為20:1～10:1，產(chǎn)物R_f值為0.2～0.5。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的冰水用量體積與非質(zhì)子溶劑用量體積相同；所述的乙酸乙酯萃取時(shí)，萃取次數(shù)為3次，但不限于3次，每次萃取乙酸乙酯用量體積與非質(zhì)子溶劑用量體積相同。

本發(fā)明還公開(kāi)了上述N-鹵代芳基取代的胺類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽與溶劑化物作為制備抗細(xì)菌藥物或抗真菌藥物的應(yīng)用。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的細(xì)菌為蠟樣芽孢桿菌或金黃葡萄球菌；真菌為白色念珠菌。

本發(fā)明還公開(kāi)了上述N-鹵代芳基取代的胺類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽與溶劑化物作為制備抗菌劑的應(yīng)用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明可以獲得包括以下技術(shù)效果：

本發(fā)明利用簡(jiǎn)單易得的原料式(II)所示的多鹵代間苯二甲腈化合物與式(III)所示的胺類化合物出發(fā)，通過(guò)一步反應(yīng)得到具有抗菌活性的目標(biāo)化合物(I)。該發(fā)明的合成工藝簡(jiǎn)單，產(chǎn)率高，產(chǎn)物穩(wěn)定。該發(fā)明實(shí)現(xiàn)了簡(jiǎn)潔、高效平行合成N-鹵代芳基取代的胺類化合物庫(kù)，而且真正實(shí)現(xiàn)了分子多樣性。為殺滅、治療和預(yù)防細(xì)菌、真菌感染提供一類共72種新的抗細(xì)菌、真菌的潛在化合物；其中部分化合物對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌蠟樣芽孢桿菌與金黃葡萄球菌的最低抑菌濃度與最小殺菌濃度均優(yōu)于參考對(duì)照諾氟沙星,部分化合物對(duì)真菌白色念珠菌的最低抑菌濃度與最小殺菌濃度優(yōu)于參考對(duì)照氟康唑。

附圖說(shuō)明

圖1為化合物1的高分辨質(zhì)譜；

圖2為化合物2的高分辨質(zhì)譜。

具體實(shí)施方式

以下將配合實(shí)施例來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方式，藉此對(duì)本發(fā)明如何應(yīng)用技術(shù)手段來(lái)解決技術(shù)問(wèn)題并達(dá)成技術(shù)功效的實(shí)現(xiàn)過(guò)程能充分理解并據(jù)以實(shí)施。

本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過(guò)購(gòu)買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

合成本發(fā)明的N-鹵代芳基取代的胺類化合物方法如下：

用式(II)結(jié)構(gòu)的多鹵代間苯二甲腈化合物與式(III)結(jié)構(gòu)的胺類化合物在適當(dāng)溶劑中。TLC檢測(cè)反應(yīng)完全后，反應(yīng)完全之后，立即加入冰水淬滅；用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，萃取液用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，半小時(shí)之后進(jìn)行抽濾，將濾液濃縮蒸干，進(jìn)行柱層析分離得到純凈的式(I)目標(biāo)產(chǎn)物，具體反應(yīng)式如下：

在式(I)中，X為氟原子或者氯原子；Y為氟原子或者氯原子；R'為氫原子、甲基、乙基；R為對(duì)氟苯基、鄰氟苯基、2,4-二氟苯基、2,6-二氟苯基、3,4-二氟苯基、3,4,5-三氟苯基、苯基、呋喃基、2-甲基呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、四氫吡喃基、3,4-亞甲二氧基苯基、萘基；n為0、1或2；當(dāng)R'為H、且n為0時(shí)，R不為苯基。。

在式(II)中，X為氟原子或者氯原子；Y為氟原子或者氯原子；

在式(III)中，R'為氫原子、甲基、乙基；R為對(duì)氟苯基、鄰氟苯基、2,4-二氟苯基、2,6-二氟苯基、3,4-二氟苯基、3,4,5-三氟苯基、苯基、呋喃基、2-甲基呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、四氫吡喃基、3,4-亞甲二氧基苯基、萘基；n為0、1或2；當(dāng)R'為H、且n為0時(shí)，R不為苯基。

反應(yīng)中，溶劑可選用N,N-二甲基甲酰胺、1,4-二氧六環(huán)、乙腈、四氫呋喃、丙酮中的一種，溶劑的體積與多鹵代間苯二甲腈化合物的摩爾比為10～15mL/1mmol，通常優(yōu)選1,4-二氧六環(huán)；反應(yīng)溫度為0℃～40℃,通常優(yōu)選室溫；反應(yīng)時(shí)間不作具體規(guī)定，常為10～60分鐘。反應(yīng)過(guò)程采用TLC檢測(cè)跟蹤，反應(yīng)完全后用等溶劑體積冰水淬滅反應(yīng)得到反應(yīng)液，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，通常用等溶劑體積，萃取三次。柱色譜分離用溶劑不作具體規(guī)定，常采用的流動(dòng)相為石油醚和乙酸乙酯，體積比為20：1～10：1，產(chǎn)物R_f值為0.2～0.5。

反應(yīng)中，式(II)化合物與式(III)化合物的摩爾比為1:1～1:1.2。反應(yīng)的收率一般在70～94％。

式(II)的化合物是公知的，可按照公知的方法制備,也可商購(gòu)。

式(III)的化合物是公知的，或者可按照公知的方法制備，也可商購(gòu)。

本發(fā)明從易得原料多鹵代間苯二甲腈(II)和胺類化合物(III)出發(fā)，通過(guò)一鍋法合成一系列結(jié)構(gòu)新穎的N-鹵代芳基取代的胺類化合物(I)。

MIC值的測(cè)定采用微量稀釋法(參考文獻(xiàn)：Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters,2013,23,5958–5963；Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters,2013,23,2399–2403)：

第一步：將已滅菌的液體培養(yǎng)基加入到無(wú)菌96孔聚苯乙烯板中，在板上的第1列的每個(gè)小孔中加入180μL培養(yǎng)基，剩余所有小孔每孔加入100μL。將準(zhǔn)備好的藥液取20μL分別加入第一列小孔中，每一個(gè)小孔中只能加入一種抗菌藥，一個(gè)板上可以加7個(gè)樣品，剩余一個(gè)加對(duì)照藥諾氟沙星或者氟康唑。與常量稀釋法操作基本相似，用移液槍將第1個(gè)小孔中的液體混合均勻，吸出100μL加入到第二個(gè)小孔中，同樣操作，混合均勻之后吸取100μL至第3個(gè)小孔中，依次進(jìn)行到底11個(gè)小孔中，將液體混合均勻，吸取100μL棄去，第12個(gè)小孔作為生長(zhǎng)對(duì)照。此時(shí)第1-11孔中的藥物濃度分別是1000.000、500.000、250.000、125.000、62.500、31.250、15.625、7.813、3.906、1.953、0.976μg/mL；為滿足更低藥物濃度下的MIC值測(cè)定時(shí),同樣的將已滅菌的液體培養(yǎng)基加入到無(wú)菌96孔聚苯乙烯板中，在板上的第1列的每個(gè)小孔中加入198μL培養(yǎng)基，剩余所有小孔每孔加入100μL。將準(zhǔn)備好的藥液取2μL分別加入第一列小孔中，每一個(gè)小孔中只能加入一種抗菌藥，一個(gè)板上可以加7個(gè)樣品，剩余一個(gè)加對(duì)照藥諾氟沙星或者氟康唑。與常量稀釋法操作基本相似，用移液槍將第1個(gè)小孔中的液體混合均勻，吸出100μL加入到第二個(gè)小孔中，同樣操作，混合均勻之后吸取100μL至第3個(gè)小孔中，依次進(jìn)行到底11個(gè)小孔中，將液體混合均勻，吸取100μL棄去，第12個(gè)小孔作為生長(zhǎng)對(duì)照。此時(shí)第1-11孔中的藥物濃度分別是100.000、50.000、25.000、12.500、6.250、3.125、1.563、0.781、0.391、0.195、0.098μg/mL

第二步：取本發(fā)明化合物的菌懸液15uL用培養(yǎng)基稀釋1000倍，混合均勻，向96孔板中每孔加入100uL液體培養(yǎng)基。此時(shí)第1-11孔中樣品濃度分別為500.000、250.000、125.000、62.5.000、31.250、15.625、7.813、3.906、1.953、0.977、0.488μg/mL。更低藥物濃度下的MIC值測(cè)定時(shí)，第1-11孔中樣品濃度分別為50.000、25.000、12.500、6.250、3.125、1.563、0.781、0.391、0.196、0.098、0.049μg/mL。蓋上蓋子放置恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，細(xì)菌需培養(yǎng)24-48h，真菌培養(yǎng)48-72h，之后觀察結(jié)果并記錄。

第三步：在小孔內(nèi)樣品能夠完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度為該樣品的MIC值。若出現(xiàn)跳孔現(xiàn)象，此時(shí)以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最高樣品濃度為準(zhǔn)，并記錄結(jié)果。每塊96孔板只能接種一種菌，不能接種多種菌。一般需重復(fù)試驗(yàn)三次，在無(wú)較大誤差情況下，取三組實(shí)驗(yàn)的平均值即為MIC值。

MBC值的測(cè)定(參考文獻(xiàn)：郭菲，侯淼.藥敏紙片擴(kuò)散法與儀器法在陰道加德納菌鑒定中的比較[J].

檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2015,12,2600-2602.)：在最小抑菌濃度測(cè)量的基礎(chǔ)上，選取活性較好的化合物進(jìn)行下一步的MBC值測(cè)定。選取化合物進(jìn)行第二步MIC值的操作步驟，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)之后，將無(wú)菌生長(zhǎng)的小孔內(nèi)的混合液用移液槍頭吸出涂布于培養(yǎng)基上，置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間觀察結(jié)果，培養(yǎng)基上無(wú)任何細(xì)菌生長(zhǎng)的對(duì)應(yīng)最低抗菌藥物濃度即為該藥物的MBC值。

所得數(shù)據(jù)證實(shí)，本發(fā)明的化合物對(duì)金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、白色念珠菌有明顯的活性。

本發(fā)明化合物的日給藥劑量為0.001mg-1mg/kg。優(yōu)選的日給藥劑量為約0.02mg至0.2mg/kg體重，對(duì)于體重約70kg的患者來(lái)說(shuō)，采用在24小時(shí)內(nèi)單次劑量給藥約1.4mg至約14mg的活性物質(zhì)。該劑量范圍可進(jìn)行調(diào)整以獲得更好的治療效果。本發(fā)明的活性化合物可通過(guò)外涂、口服、靜脈內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥、皮下給藥等方式給藥。

本發(fā)明的化合物可與其它用于治療細(xì)菌感染的試劑組合給藥，以協(xié)同增加所述化合物的抗菌效果。可用于本發(fā)明的化合物組合使用的化合物的實(shí)例為：阿莫西林、氨芐西林、諾氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、紅霉素、頭孢、磺胺嘧啶、頭孢克肟、氟康唑、酮康唑等。

本發(fā)明的藥物組合物包含治療有效量的至少一種發(fā)明的化合物與可藥用的混合物。

外用包括滴劑、膏劑等含有本發(fā)明的化合物。

口服組合物包含適用于口服給藥的膠囊、片劑、丸劑、懸浮液或糖漿。

為制備用于腸胃外給藥的藥物組合物，可將活性成分摻入溶液或懸浮液中，其還包括以下的組合：無(wú)菌稀釋劑如注射用水、鹽水溶液、油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑如芐基醇；抗氧化劑如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑如乙二胺四乙酸；緩和劑如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽，用于調(diào)節(jié)溶液張力的試劑如氯化鈉或葡萄糖。腸胃外制劑可包含于安瓿、一次性注射器或玻璃或塑料小藥瓶中。

下面結(jié)合部分具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳述。

實(shí)施例1

2,4,5-三氟-6-((1-苯基)氨基)間苯二腈(化合物1)的合成:在室溫下將原料2,4,5,6-四氟間苯二甲腈加入25mL的圓底燒瓶中，加入1,4-二氧六環(huán)溶解攪拌，1,4-二氧六環(huán)體積與2,4,5,6-四氟間苯二甲腈摩爾比為15mL/1mmol，將原料α-甲基苯乙胺緩慢滴加，α-甲基苯乙胺與2,4,5,6-四氟間苯二甲腈的摩爾比為1:1～1.2:1。隨時(shí)進(jìn)行TLC檢測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)完全之后，立即加入與1,4-二氧六環(huán)相同體積的冰水進(jìn)行淬滅，用與1,4-二氧六環(huán)相同體積的乙酸乙酯萃取三次，取有機(jī)層，萃取液用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥之后進(jìn)行抽濾,將濾液濃縮蒸干，采用的流動(dòng)相為石油醚和乙酸乙酯為20:1比例，進(jìn)行柱層析分離，干燥得白色固體產(chǎn)品，2,4,5-三氟-6-((1-苯基)氨基)間苯二腈(化合物1)，產(chǎn)率92％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀F₃N₃[M-H]^-,理論值300.0754實(shí)測(cè)值,300.0758。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝1.66(d,J＝6.6Hz,3H,CH₃),5.38-7.37(m,5H,ArH),7.39(br,1H,NH)。

實(shí)施例2

5-氯-2,4-二氟-6-((1-苯基)氨基)間苯二腈(化合物2)的合成:在20℃下將原料5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈加入25mL的圓底燒瓶中，加入1,4-二氧六環(huán)溶解攪拌(即以1,4-二氧六環(huán)為溶劑)，1,4-二氧六環(huán)體積與5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈摩爾比為10mL/1mmol，將原料α-甲基苯乙胺緩慢滴加，α-甲基苯乙胺與5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈的摩爾比為1:1。隨時(shí)進(jìn)行TLC檢測(cè)反應(yīng)，20min反應(yīng)完全，立即加入等溶劑體積冰水淬滅，用等溶劑體積的乙酸乙酯萃取三次，取有機(jī)層，萃取液用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥之后進(jìn)行抽濾,將濾液濃縮蒸干，采用的流動(dòng)相為石油醚和乙酸乙酯為20:1比例，進(jìn)行柱層析分離，產(chǎn)物R_f值為0.2,干燥得白色固體產(chǎn)品5-氯-2,4-二氟-6-((1-苯基)氨基)間苯二腈(化合物2),產(chǎn)率90％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀ClF₂N₃[M-H]^-,理論值316.0459；實(shí)測(cè)值,316.0461。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝1.69(d,J＝6.6Hz,3H,CH₃),5.70-7.38(m,5H,ArH),7.39(br,1H,NH)。

實(shí)施例3

5-氯-2,4-二氟-6-((1-(4-氟苯基)乙基)氨基)間苯二腈(化合物3)的合成:在0℃下將原料5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈加入25mL的圓底燒瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺溶解攪拌(即以N,N-二甲基甲酰胺為溶劑)，N,N-二甲基甲酰胺體積與5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈摩爾比為12mL/1mmol，將原料1-(4-氟苯基)乙胺緩慢滴加，1-(4-氟苯基)乙胺與5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈的摩爾比為1.2:1。隨時(shí)進(jìn)行TLC檢測(cè)反應(yīng)，60min反應(yīng)完全，立即加入等溶劑體積冰水淬滅，用等溶劑體積乙酸乙酯萃取三次，取有機(jī)層，萃取液用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥之后進(jìn)行抽濾,將濾液濃縮蒸干，采用的流動(dòng)相為石油醚和乙酸乙酯為10:1比例，進(jìn)行柱層析分離，產(chǎn)物R_f值為0.5,干燥得白色固體產(chǎn)品,5-氯-2,4-二氟-6-((1-(4-氟苯基)乙基)氨基)間苯二腈(化合物3),產(chǎn)率88％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₉ClF₃N₃[M-H]-,理論值334.0364；實(shí)測(cè)值,334.0363。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝1.59(d,J＝6.7Hz,3H,CH₃),5.60(m,1H,CH),6.91-7.21(m,4H,ArH),5.91(br,1H,NH)。

實(shí)施例4

4-((2,4-二氟芐基)氨基)-2,5,6-三氟間苯二腈(化合物4)的合成:在40℃下將原料2,4,5,6-四氟間苯二甲腈加入25mL的圓底燒瓶中，加入乙腈溶解攪拌(即以乙腈為溶劑)，乙腈體積與2,4,5,6-四氟間苯二甲腈摩爾比為15mL/1mmol，將原料(2,4-二氟苯基)甲胺緩慢滴加，(2,4-二氟苯基)甲胺與2,4,5,6-四氟間苯二甲腈的摩爾比為1.1:1。隨時(shí)進(jìn)行TLC檢測(cè)反應(yīng)，10min反應(yīng)完全，立即加入等溶劑體積冰水淬滅，用等溶劑體積乙酸乙酯萃取三次，取有機(jī)層，萃取液用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥之后進(jìn)行抽濾,將濾液濃縮蒸干，采用的流動(dòng)相為石油醚和乙酸乙酯為15:1比例，進(jìn)行柱層析分離，產(chǎn)物R_f值為0.3,干燥得白色固體產(chǎn)品,4-((2,4-二氟芐基)氨基)-2,5,6-三氟間苯二腈(化合物4),產(chǎn)率87％。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆F₅N₃[M-H],理論值；322.0409,實(shí)測(cè)值,322.0407。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝4.89(d,J＝6.06Hz,2H,CH₂),5.57(br,1H,NH),6.87-7.31(m,3H,ArH)。

實(shí)施例5

5-氯-2,4-氟-6-((噻吩-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物5)的合成:在30℃下將原料5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈加入25mL的圓底燒瓶中，加入四氫呋喃溶解攪拌(即以四氫呋喃為溶劑),四氫呋喃體積與5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈摩爾比為15mL/1mmol，將原料噻吩-3-甲胺緩慢滴加。(2,4-二氟苯基)甲胺與2,4,5,6-四氟間苯二甲腈的摩爾比為1.2:1。隨時(shí)進(jìn)行TLC檢測(cè)反應(yīng)，30min反應(yīng)完全，立即加入等溶劑體積冰水淬滅，用等溶劑體積乙酸乙酯萃取三次，取有機(jī)層，萃取液用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥之后進(jìn)行抽濾,將濾液濃縮蒸干，采用的流動(dòng)相為石油醚和乙酸乙酯為15:1比例，進(jìn)行柱層析分離，產(chǎn)物R_f值為0.3,干燥得黃色固體產(chǎn)品5-氯-2,4-氟-6-((噻吩-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物5),產(chǎn)率85％。

高分辨質(zhì)譜C₁₃H₁₆ClF₂N₃S[M-H]^-,理論值307.9866；實(shí)測(cè)值,307.9866。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝5.03-5.08(m,2H,CH₂),7.11-7.33(m,3H,CH),5.57(br,1H,NH)。

實(shí)施例6

2,4,5-三氟-6-((呋喃-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物6)的合成:在10℃下將原料5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈加入25mL的圓底燒瓶中，加入丙酮溶解攪拌(即以丙酮為溶劑)，丙酮體積與5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈摩爾比為15mL/1mmol，將原料呋喃-3-甲胺緩慢滴加。呋喃-3-甲胺與5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈的摩爾比為1.2:1。隨時(shí)進(jìn)行TLC檢測(cè)反應(yīng)，40min反應(yīng)完全，立即加入等溶劑體積冰水淬滅，用等溶劑體積乙酸乙酯萃取三次，取有機(jī)層，萃取液用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥之后進(jìn)行抽濾,將濾液濃縮蒸干，采用的流動(dòng)相為石油醚和乙酸乙酯為15:1比例，進(jìn)行柱層析分離，產(chǎn)物R_f值為0.3,得到白色固體2,4,5-三氟-6-((呋喃-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物6),產(chǎn)率89％。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝4.93-4.96(m,CH₂),6.29-7.39(m,2H,CH₂),7.32-7.35(m,1H,CH),5.95(br,1H,NH)。

實(shí)施例7

2,4,5–三氟-6-((1-(4-氟苯基)乙基)氨基)間苯二腈(化合物7)的合成:用1-(4-氟苯基)乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5–三氟-6-((1-(4-氟苯基)乙基)氨基)間苯二腈(化合物7),產(chǎn)率79％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₉F₄N₃[M-H]^-,理論值318.0660；實(shí)測(cè)值,318.0662。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝1.57(d,J＝6.72Hz,3H,CH₃),5.30-5.34(m,1H,CH),6.95-6.97(m,2H,ArH),7.18-7.22(m,2H,ArH),5.43(br,1H,NH)。

實(shí)施例8

(S)-(-2,4,5-三氟-6(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物8)的合成:用(S)-2-苯丙基-1-胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(S)-(-2,4,5-三氟-6(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物8),產(chǎn)率87％。

高分辨質(zhì)譜C₁₇H₁₂F₃N₃[M-H]^-,理論值314.0911；實(shí)測(cè)值,374.0515。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝1.26(d,J＝6.96Hz,3H,CH₃),3.15(m,1H,CH),3.71-3.76(m,2H,CH₂)，7.20-7.32(m,5H,ArH),8.15(br,1H,NH)。

實(shí)施例9

2,4,5-三氯-6-((3–(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物9)的合成:(3–(三氟甲基)苯基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((3–(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物9),產(chǎn)率74％。

實(shí)施例10

5-氯-4-((3,5-二氟芐基)氨基)-2,6-二氟間苯二腈(化合物10)的合成:用(2,4-二氟苯基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-4-((3,5-二氟芐基)氨基)-2,6-二氟間苯二腈(化合物10),產(chǎn)率88％。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆F₃ClF₄N₃[M-H]^-,理論值338.0114；實(shí)測(cè)值,338.0112。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝5.05(d,J＝5.94,3H,CH₂),5.47–5.53(m,1H,CH),5.92(br,1H,NH),6.89-6.96(m,2H,ArH),7.27-7.42(m,1H,ArH)。

實(shí)施例11

5-氯-2,4-二氟-6-((4-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物11)的合成:用4-氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-((4-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物11),產(chǎn)率87％。熔點(diǎn)：85.7-86.0℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₇ClF₃N₃[M-H]^-,理論值320.0207；實(shí)測(cè)值,320.0208。

實(shí)施例12

2,4,5-三氟-6-((2-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物12)的合成：用2-氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((2-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物12),產(chǎn)率92％。熔點(diǎn):97.6-98.0℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₇F₄N₃[M-H]^-,理論值304.0503；實(shí)測(cè)值,304.0505。

實(shí)施例13

5-氯-2,4-二氟-6-((2-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物13)的合成：用2-氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-((2-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物13),產(chǎn)率89％。熔點(diǎn)：90.1-90.8℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₇ClF₃N₃[M-H]^-,理論值320.0207；實(shí)測(cè)值,320.0207。

實(shí)施例14

(S)-2,4,5-三氟-6-((1-苯基乙基)氨基)間苯二腈(化合物14)的合成:用(S)-1-苯基乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(S)-2,4,5-三氟-6-((1-苯基乙基)氨基)間苯二腈(化合物14),產(chǎn)率90％。熔點(diǎn)：107.1-107.9℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀F₃N₃[M-H]^-,理論值300.0754；實(shí)測(cè)值,300.0752。

實(shí)施例15

(S)-5-氯-2,4-二氟-6-((1-苯基乙基)氨基)間苯二腈(化合物15)的合成:用(S)-1-苯基乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(S)-5-氯-2,4-二氟-6-((1-苯基乙基)氨基)間苯二腈(化合物15),產(chǎn)率84％。熔點(diǎn)：94.8-95.4℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀ClF₂N₃[M-H]^-,理論值316.0458；實(shí)測(cè)值,316.0459。

實(shí)施例16

2,4,5-三氟-6-((3–(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物16)的合成:(3–(三氟甲基)苯基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((1-(3,4,5-三氟苯基)乙基)氨基)間苯二腈(化合物16),產(chǎn)率84％。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝4.93(d,J＝5.94Hz,2H,CH₂),7.53-7.64(m,4H,ArH),5.72(br,1H,NH)。

實(shí)施例17

2,4,5-三氟-6-((噻吩-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物17)的合成:用噻吩-3-甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色固體2,4,5-三氟-6-((噻吩-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物17),產(chǎn)率80％。

高分辨質(zhì)譜C₁₃H₆F₃N₃S[M-H]^-,理論值292.0162；實(shí)測(cè)值,292.0165。

實(shí)施例18

4-((3,4-二氟芐基)氨基)-2,5,6-三氟間苯二腈(化合物18)的合成:用(3,4-二氟苯基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體4-((3,4-二氟芐基)氨基)-2,5,6-三氟間苯二腈(化合物18),產(chǎn)率92％。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆F₅N₃[M-H]^-,理論值322.0409；實(shí)測(cè)值,322.0407。

實(shí)施例19

5-氯-4-((3,4-二氟芐基)氨基)-2,6-二氟間苯二腈(化合物19)的合成:用(3,4-二氟苯基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-4-((3,4-二氟芐基)氨基)-2,6-二氟間苯二腈(化合物19),產(chǎn)率89％。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆Cl₃F₄N[M-H]^-,理論338.0114；實(shí)測(cè)值,338.0114。

實(shí)施例20

2,4,5-三氯-6-(3,4-二氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物20)的合成:用(3,4-二氟苯基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-(3,4-二氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物20),產(chǎn)率80％。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆Cl₃F₂N₃[M-H]^-,理論值369.9523；實(shí)測(cè)值,369.9525。

實(shí)施例21

2,4,5-三氯-6-(2,4-二氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物21)的合成:用(2,4-二氟苯基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-(2,4-二氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物21),產(chǎn)率83％。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆Cl₃F₂N₃[M-H]^-,理論值369.9523；實(shí)測(cè)值，369.9525。

實(shí)施例22

5-氯-2,4-二氟-6-((3-(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物22)的合成:用(3–(三氟甲基)苯基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的四氟間苯二腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-((3-(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物22),產(chǎn)率87％。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝5.03(d,J＝6Hz,2H,CH₂),7.26-7.63(m,4H,ArH),5.74(br,1H,NH)。

實(shí)施例23

2,4,5-三氯-6-((噻吩-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物23)的合成:用噻吩-3-甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色固體5-氯-2,4-氟-6-((噻吩-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物5),產(chǎn)率70％。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝5.20(d,J＝5.3Hz,2H,CH₂),7.03(d,J＝7.9Hz,1H,CH),7.13(d,J＝1.4Hz,1H,CH),7.35(d,J＝5.0Hz,1H,CH),5.92(br,1H,NH)。

實(shí)施例24

5-氯-2,4-二氟-(R)-(+)-1-苯丙胺間苯二甲腈(化合物24)的合成:用(R)-(+)-1-苯丙胺間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色固體5-氯-2,4-二氟-(R)-(+)-1-苯丙胺間苯二甲腈(化合物24),產(chǎn)率91％。

高分辨質(zhì)譜C₁₇H₁₂ClF₂N₃,[M-H]^-,理論值330.0615；實(shí)測(cè)值,330.0617。

實(shí)施例25

5-氯-2,4-二氟-6-(呋喃-3-基甲基)氨基間苯二腈(化合物25)的合成:用呋喃-3-甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((呋喃-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物25),產(chǎn)率89％。

核磁共振氫譜(氘代DMSO,Bruker AM 600儀):δ＝4.86(d,J＝5.8Hz,2H,CH₂),6.37(m,2H,2CH₂),5.64(br,1H,NH),7.41(d,J＝0.84Hz,H,CH₂)。

實(shí)施例26

2,4,5-三氯-6-((呋喃-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物26)的合成:用呋喃-3-甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((呋喃-3-甲基)氨基)間苯二腈(化合物26),產(chǎn)率89％。

核磁共振氫譜(氘代DMSO,Bruker AM 600儀):δ＝4.99(d,J＝6.2Hz,2H,CH₂),6.38(m,2H,2CH₂),7.63(br,1H,NH),8.15(d,J＝5.8Hz,H,CH₂)。

實(shí)施例27

(S)-(-5-氯-2,4-二氟-6-(2-丙基)氨基)間苯二腈(化合物27)的合成:用(S)-2-苯丙基-1-胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(S)-(-2,4,5-三氟-6-(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物27),產(chǎn)率83％。

核磁共振氫譜(氘代DMSO,Bruker AM 600儀):δ＝1.25(d,J＝7.0Hz,3H,CH₃),3.89(m,2H,CH₂),3.18(br,1H,NH),7.19-7.44(m,5H,ArH)。

實(shí)施例28

(S)-(-2,4,5-三氯-6(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物28)的合成:用(S)-2-苯丙基-1-胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(S)-(-2,4,5-三氟-6(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物28),產(chǎn)率80％。

高分辨質(zhì)譜C₁₇H₁₂Cl₃N₃[M-H]^-,理論值362.0024；實(shí)測(cè)值,362.0029。

實(shí)施例29

(R)-(-2,4,5-三氟-6-(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物29)的合成:用(R)-2-苯丙基-1-胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(R)-(-2,4,5-三氟-6(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物29),產(chǎn)率86％。

高分辨質(zhì)譜C₁₇H₁₂F₃N₃[M-H]^-,理論值314.0911；實(shí)測(cè)值,314.0909。

實(shí)施例30

(R)-(-5-氯-2,4-二氟-6-(2-丙基)氨基)間苯二腈(化合物30)的合成:用(R)-2-苯丙基-1-胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(R)-(-2,4,5-三氟-6-(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物30),產(chǎn)率83％。

核磁共振氫譜(氘代DMSO,Bruker AM 600儀):δ＝1.45(d,J＝7.0Hz,3H,CH₃),4.19(m,2H,CH₂),5.56(br,1H,NH),7.26-7.40(m,5H,ArH)。

實(shí)施例31

(R)-(-2,4,5-三氯-6-(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物31)的合成:用(R)-2-苯丙基-1-胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(R)-(-2,4,5-三氯-6-(2-苯丙基)氨基)間苯二腈(化合物31),產(chǎn)率80％。

高分辨質(zhì)譜C₁₇H₁₂Cl₃N₃[M-H]^-,理論值362.0024；實(shí)測(cè)值,362.0028。

實(shí)施例32

2,4,5–三氯-6-((1-(4-氟苯基)乙基)氨基)間苯二腈(化合物32)的合成:用1-(4-氟苯基)乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5–三氯-6-((1-(4-氟苯基)乙基)氨基)間苯二腈(化合物32),產(chǎn)率72％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₉Cl₃FN₃[M-H]^-,理論值365.9773；實(shí)測(cè)值,365.9774。

實(shí)施例33

2,4,5–三氟(((四氫呋喃-3-基)甲基)氨基)間苯二腈(化合物33)的合成:用(四氫呋喃-3-基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5–三氟(((四氫呋喃-3-基)甲基)氨基)間苯二腈(化合物33),產(chǎn)率93％。

高分辨質(zhì)譜C₁₃H₁₀F₃N₃O[M-H]^-,理論值280.0703實(shí)測(cè)值,280.0705。

實(shí)施例34

5-氯-2,6-二氟(((四氫呋喃-3-基)甲基)氨基)間苯二腈(化合物34)的合成:用(四氫呋喃-3-基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,6-二氟(((四氫呋喃-3-基)甲基)氨基)間苯二腈(化合物34),產(chǎn)率92％。

高分辨質(zhì)譜C₁₃H₁₀ClF₂N₃O[M-H]^-,理論值296.0408；實(shí)測(cè)值,296.0408。

實(shí)施例35

2,4,5–三氯(((四氫呋喃-3-基)甲基)氨基)間苯二腈(化合物35)的合成:用(四氫呋喃-3-基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色固體2,4,5–三氯(((四氫呋喃-3-基)甲基)氨基)間苯二腈(化合物35),產(chǎn)率83％。

核磁共振氫譜(氘代DMSO,Bruker AM 600儀):δ＝1.57-1.60(m,1H,CH),1.84-1.90(m,2H,CH₂),2.48-2.52(m,1H,CH),3.64-4.11(m,4H,2CH₂),7.78(br,1H,NH)。

實(shí)施例36

2,4,5-三氟-6-(((四氫-2H-吡喃-4-甲基)氨基))間苯二腈(化合物36)的合成:用(四氫-2H-吡喃-4-基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-(((四氫-2H-吡喃-4-甲基)氨基))間苯二腈(化合物36),產(chǎn)率94％。

高分辨質(zhì)譜C₁₄H₁₂F₃N₃O[M-H]^-,理論值294.0860；實(shí)測(cè)值,296.0860。

實(shí)施例37

5-氯-2,4-二氟-6-(((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)間苯二腈(化合物37)的合成:用(四氫-2H-吡喃-4-基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-(((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)間苯二腈(化合物37),產(chǎn)率94％。

高分辨質(zhì)譜C₁₄H₁₂ClF₂N₃O[M-H]^-,理論值310.0564；實(shí)測(cè)值,310.0563。

實(shí)施例38

2,4,5-三氯-6-(((四氫-2H-吡喃-4-甲基)氨基))間苯二腈(化合物38)的合成:用(四氫-2H-吡喃-4-基)甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-(((四氫-2H-吡喃-4-甲基)氨基))間苯二腈(化合物38),產(chǎn)率84％。

實(shí)施例39

2,4,5-三氟-6-((4-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物39)的合成:用4-氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((4-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物39),產(chǎn)率90％。熔點(diǎn)：117-118.0℃。

核磁共振氫譜(氘代二甲亞砜,Bruker AM 400儀):δ＝4.81(d,J＝6.4Hz,2H,CH₂),7.17-7.39(m,4H,ArH),8.70(br,1H,NH)。

核磁共振碳譜(氘代二甲亞砜,Bruker AM 400儀):δ＝46.4,78.8,82.3,109.3,111.8,115.7,115.9,129.1,129.2,134.7,137.3,144.9,152.5,161.6,164.2。高分辨質(zhì)譜C₁₅H₇F₄N₃[M-H]^-,理論值304.0503；實(shí)測(cè)值,304.0502。

實(shí)施例40

2,4,5-三氟-6-((4-甲氧基芐基)氨基)間苯二腈(化合物40)的合成:用4-甲氧基芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((4-甲氧基芐基)氨基)間苯二腈(化合物40),產(chǎn)率94％。熔點(diǎn):92.3-93.1℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀F₃N₃O[M-H]^-,理論值316.0703；實(shí)測(cè)值,316.0703。

實(shí)施例41

5-氯-2,4-二氟-6-((4-甲氧基芐基)氨基)間苯二腈(化合物41)的合成:用4-甲氧基芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺,用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-((4-甲氧基芐基)氨基)間苯二腈(化合物41),產(chǎn)率86％。熔點(diǎn)：117.6-118.2℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀ClF₂N₃O[M-H]^-,理論值332.0407；實(shí)測(cè)值,332.0406。

實(shí)施例42

4-((2,6-二氟芐基)氨基)-2,5,6-三氟間苯二腈(化合物42)的合成:用2，6-二氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體4-((2,6-二氟芐基)氨基)-2,5,6-三氟間苯二腈(化合物42),產(chǎn)率93％。熔點(diǎn)：137.8-138.4℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆F₅N₃[M-H]^-,理論值322.0410；實(shí)測(cè)值,322.0411。

實(shí)施例43

5-氯-4-((2,6-二氟芐基)氨基)-2,6-二氟間苯二腈(化合物43)的合成:用2，6-二氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-4-((2,6-二氟芐基)氨基)-2,6-二氟間苯二腈(化合物43),產(chǎn)率87％。熔點(diǎn)：142.3-142.9℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆ClF₄N₃[M-H]^-,理論值300.0754；實(shí)測(cè)值,300.0752。

實(shí)施例44

2,4,5-三氟-6-((4-甲基芐基)氨基)間苯二腈(化合物44)的合成:用4-甲基芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((4-甲基芐基)氨基)間苯二腈(化合物44),產(chǎn)率92％。熔點(diǎn)：140.2-140.9℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀F₃N₃[M+K]+,理論值340.0085；實(shí)測(cè)值,340.0084。

實(shí)施例45

5-氯-2,4-二氟-6-((4-甲基芐基)胺)間苯二腈(化合物45)的合成:用4-甲基芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺,用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng),可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-((4-甲基芐基)胺)間苯二腈(化合物45),產(chǎn)率87％。熔點(diǎn)：87.6-88.4℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀ClF₂N₃[M-H]^-,理論值316.0458；實(shí)測(cè)值,316.0458。

實(shí)施例46

2,4,5-三氯-6-((4-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物46)的合成:用4-氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺,用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((4-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物46),產(chǎn)率80％。熔點(diǎn)：167.2-168.1℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₇Cl₃FN₃[M-H]^-,理論值351.9616；實(shí)測(cè)值,351.9611。

實(shí)施例47

2,4,5-三氯-6-((2,6-二氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物47)的合成：用2,6-二氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺,用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((2,6-二氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物47),產(chǎn)率82％。熔點(diǎn)：200.8-201.6℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₆Cl₃F₂N₃[M-H]^-,理論值369.9522；實(shí)測(cè)值,369.9520。

實(shí)施例48

2,4,5-三氯-6-((2-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物48)的合成：用4-氟芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺,用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((2-氟芐基)氨基)間苯二腈(化合物48),產(chǎn)率78％。熔點(diǎn)：149.4-150.2℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₅H₇Cl₃FN₃[M-H]^-,理論值351.9616；實(shí)測(cè)值,351.9616。實(shí)施例49

(R)-2,4,5-三氟-6-((1-苯基乙基)氨基)間苯二腈(化合物49)的合成：用(R)-1-苯基乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(R)-2,4,5-三氟-6-((1-苯基乙基)氨基)間苯二腈(化合物49),產(chǎn)率94％。熔點(diǎn)：106.4-107.2℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀F₃N₃[M-H]^-,理論值300.0754；實(shí)測(cè)值,300.0755。

實(shí)施例50

(R)-5-氯-2,4-二氟-6-((1-苯基乙基)氨基)間苯二腈(化合物50)的合成：用(R)-1-苯基乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體(R)-5-氯-2,4-二氟-6-((1-苯基乙基)氨基)間苯二腈(化合物50),產(chǎn)率86％。熔點(diǎn)：98.2-99.0℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀ClF₂N₃[M-H]^-,理論值316.0455；實(shí)測(cè)值,316.0457。

實(shí)施例51

2,4,5-三氟-6-((4-(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物51)的合成:用4-三氟甲基芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((4-(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物51),產(chǎn)率90％。熔點(diǎn)：103.3-104.1℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₇F₆N₃[M-H]^-,理論值354.0458；實(shí)測(cè)值,354.0459。

實(shí)施例52

5-氯-2,4-二氟-6-((4-(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物52)的合成:用4-三氟甲基芐胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-((4-(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物52),產(chǎn)率85％。熔點(diǎn)：111.7-112.6℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₇ClF₅N₃,理論值370.0175；實(shí)測(cè)值,370.0175。

實(shí)施例53

2,4,5-三氯-6-((4-(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物53)的合成:用2,4,5,6-四氯間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((4-(三氟甲基)芐基)氨基)間苯二腈(化合物53),產(chǎn)率81％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₇ClF₅N₃,理論值370.0175；實(shí)測(cè)值,370.0175

實(shí)施例54

2,4,5-三氟-6-((4-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物54)的合成:用4-氟苯乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((4-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物54)，產(chǎn)率89％。

核磁共振氫譜(氘代二甲亞砜,Bruker AM 600儀):δ:2.93(t,2H,CH₂),3.80(s,2H,CH₂),5.36(s,2H,CH₂),7.12–7.30(m,4H,ArH),8.23(br,1H,NH)；核磁共振碳譜(氘代二甲亞砜，Bruker AM 600儀):δ:35.4,45.6,78.1,81.8,109.3,112.2,115.5,115.7,131.1,131.1,134.6,136.0,144.9,152.5,161.0,163.1；高分辨質(zhì)譜C₁₆H₉F₄N₃[M-H]^-,理論值318.0660；實(shí)測(cè)值,318.0660。

實(shí)施例55

5-氯-2,4,二氟-6-((4-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物55)的合成:用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈，用4-氟苯乙胺代替實(shí)施例1中Α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體狀5-氯-2,4,二氟-6-((4-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物2),產(chǎn)率90％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₆ClF₃N₃[M-F],理論值334.064；實(shí)測(cè)值,334.0367。

核磁共振氫譜(氘代二甲亞砜,Bruker AM 600儀):δ:2.98(t,2H,CH₂),3.83(s,2H,CH₂),5.36(s,2H,CH₂),7.13–7.34(m,4H,ArH),8.24(br,1H,NH)；

實(shí)施例56

2,4,5-三氟-6-((4-氟苯乙基)胺間苯二甲腈(化合物56)的合成:用2-氟苯乙胺代替實(shí)施例1中的Α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氟-6-((2-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物56),產(chǎn)率89％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₉lF₄N₃[M-H]^-,理論值318.0660；實(shí)測(cè)值,318.0666。

核磁共振氫譜(氘代二甲亞砜,Bruker AM 600儀):δ＝2.95–2.97(m,2H,CH₂),3.90–3.93(m,2H,CH₂),7.12–7.15(t,J＝18.0Hz,2H,ArH),7.28–7.29(m,2H,ArH)7.94(m,1H,NH)

實(shí)施例57

5-氯-2,4,二氟-6-((2-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物57)的合成:用用2-氟苯乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4,二氟-6-((2-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物57),產(chǎn)率87％。

核磁共振氫譜(氘代二甲亞砜,Bruker AM 600儀):δ＝3.00–3.24(m,2H,CH₂),3.96–3.99(m,2H,CH₂),7.12–7.36(m,4H,ArH),7.94(m,1H,NH)

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₉ClF₃N₃[M-H]^-,理論值,334.0364；實(shí)測(cè)值,334.0369。

實(shí)施例58

2,4,5-三氟-6-(苯乙胺)間苯二甲腈(化合物58)的合成:用苯乙胺代替實(shí)施例2中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色半固體2,4,5-三氟-6-(苯乙胺)間苯二甲腈(化合物58),產(chǎn)率85％。

核磁共振氫譜(氘代二甲亞砜,Bruker AM 600儀):δ＝2.93–2.95(m,2H,CH₂),3.80–3.83(m,2H,CH₂),7.21–7.32(m,2H,ArH),7.28–7.32(m,5H,ArH)8.24(br,1H,NH)

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀F₃N₃[M-H]^-,理論值300.0754；實(shí)測(cè)值,300.0759。

實(shí)施例59

5-氯-2,4-二氟-6-(苯乙胺)間苯二甲腈(化合物59)的合成:用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈，用苯乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-(苯乙胺)間苯二甲腈(化合物59),產(chǎn)率80％。熔點(diǎn)：85.7-85.9℃。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀ClF₂N₃[M-H]^-,理論值316.0459；實(shí)測(cè)值,316.0462。

實(shí)施例60

2,4,5-三氟-6-5-甲基-2-呋喃甲胺間苯二甲腈(化合物60)的合成:用5-甲基-2-呋喃甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色半固體2,4,5,-三氟-6-(5-甲基-2-呋喃)甲胺間苯二甲腈(化合物60),產(chǎn)率93％。

高分辨質(zhì)譜C₁₄H₈F₃N₃O[M-H]^-,理論值290.0547；實(shí)測(cè)值,290.0552。

實(shí)施例61

5-氯-2,4-二氟-6-(5-甲基-2-呋喃)甲胺間苯二甲腈(化合物61)的合成:用5-甲基-2-呋喃甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色固體5-氯-2,4-二氟-6-(5-甲基-2-呋喃)間苯二甲腈(化合物61),產(chǎn)率92％。

核磁共振氫譜(氘代氯仿,Bruker AM 600儀):δ＝4.95(d,J＝5.82Hz,2H,CH₃),4.72-4.90(m,2H,CH₂),6.01-6.24(m,2H,CH),8.57(br,1H,NH)。

實(shí)施例62

2,4,5,-三氟-3,4-亞甲二氧基苯甲胺間苯二甲腈(化合物62)的合成:用3,4-亞甲二氧基苯甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體3,4-亞甲二氧基苯甲胺間苯二甲腈(化合物62),產(chǎn)率88％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₈F₃N₃O₂[M-H]^-,理論值330.0496；實(shí)測(cè)值,330.0500。

實(shí)施例63

5-氯-2,4-二氟-3,4-亞甲二氧基苯甲胺間苯二甲腈(化合物63)的合成:用3,4-亞甲二氧基苯甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用5-氯-2,4,6-三氟間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的2,4,5,6-四氟間苯二甲腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-3,4-亞甲二氧基苯甲胺間苯二甲腈(化合物63),產(chǎn)率90％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₈ClF₂N₃O₂[M-H]^-,理論值346.0200；實(shí)測(cè)值,346.0207。

實(shí)施例64

2,4,5-三氯-6-((4-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物64)的合成:用四氯間苯二腈代替實(shí)施例1中的四氟間苯二腈，用4-氟苯乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((4-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物64),產(chǎn)率90％。

核磁共振氫譜(氘代二甲亞砜,Bruker AM 600儀):δ＝2.95–2.97(m,2H,CH₂),3.90–3.95(m,2H,CH₂),7.09–7.30(m,2H,ArH),7.69–7.29(m,4H,ArH)7.70(br,1H,NH)

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₉Cl₃FN₃[M-H]^-,理論值365.9773；實(shí)測(cè)值,365.9770。

實(shí)施例65

2,4,5-三氯-6-((2-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物65)的合成：用四氯間苯二腈代替實(shí)施例1中的四氟間苯二腈；用2-氟苯乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((2-氟苯乙基)胺)間苯二甲腈(化合物65),產(chǎn)率92％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₉Cl₃FN₃[M-H]^-,理論值365.9773；實(shí)測(cè)值,365.9777。

實(shí)施例66

2,4,5-三氯-6-苯乙胺間苯二甲腈(化合物66)的合成：用三氟間苯二腈代替代替實(shí)施例1中的四氟間苯二腈用苯乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色固體2,4,5-三氯-6-苯乙胺間苯二甲腈(化合物66),產(chǎn)率86％。

高分辨質(zhì)譜C₁₆H₁₀Cl₃N₃[M-H]^-,理論值347.9868；實(shí)測(cè)值,347.9868。

實(shí)施例67

2,4,5–三氯-6-(5-甲基-2-呋喃)甲胺間苯二甲腈(化合物67)的合成：5-甲基-2-呋喃甲胺用代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到紅色半固體2,4,5–三氯-6-(5-甲基-2-呋喃)甲胺間苯二甲腈(化合物67),產(chǎn)率86％，熔點(diǎn)：150.1-150.9℃。

實(shí)施例68

2,4,5,-三氯-3,4-亞甲二氧基苯甲胺間苯二甲腈(化合物68)的合成：用3,4-亞甲二氧基苯甲胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到白色半固體2,4,5,-三氯-3,4-亞甲二氧基苯甲胺間苯二甲腈(化合物68),產(chǎn)率85％，熔點(diǎn)：201.3-201.8℃。

實(shí)施例69

2,4,5-三氟-6-((1-(萘乙基-1)乙基)甲胺間苯二甲腈(化合物69)的合成:用1-萘乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色固體2,4,5-三氟-6-((1-(萘乙基-1)乙基)甲胺間苯二甲腈(化合物69),產(chǎn)率90％。

高分辨質(zhì)譜C₂₀H₁₂F₃N₃[M-H]^-,理論值350.0911；實(shí)測(cè)值,350.0911。

實(shí)施例70

5-氯-2,4-二氟-6-((1-(萘乙基-1)乙基)甲胺間苯二甲腈(化合物70)的合成:用1-萘乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用三氟間苯二腈代替實(shí)施例1中的四氟間苯二腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體5-氯-2,4-二氟-6-((1-(萘乙基-1)乙基)甲胺間苯二甲腈(化合物70),產(chǎn)率90％。

高分辨質(zhì)譜C₂₀H₁₂ClF₂N₃[M-H]^-,理論值366.0615；實(shí)測(cè)值,366.0617。

實(shí)施例71

2,4,5-三氯-6-((1-(萘乙基-1)乙基)甲胺間苯二甲腈(化合物71)的合成:用1-萘乙胺代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺，用四氯間苯二腈代替實(shí)施例1中的四氟間苯二腈進(jìn)行反應(yīng)可得到白色固體2,4,5-三氯-6-((1-(萘乙基-1)乙基)甲胺間苯二甲腈(化合物71),產(chǎn)率78％。

高分辨質(zhì)譜C₂₀H₁₂Cl₃N₃[M-H]^-,理論值398.0024；實(shí)測(cè)值,398.0027。

實(shí)施例72

2,4,5-三氟-(R)-(+)-1-苯丙胺間苯二甲腈(化合物72)的合成:用(R)-(+)-1-苯丙胺間苯二甲腈代替實(shí)施例1中的α-甲基苯乙胺進(jìn)行反應(yīng)可得到黃色固體2,4,5-三氟-(R)-(+)-1-苯丙胺間苯二甲腈(化合物72)，產(chǎn)率93％。

高分辨質(zhì)譜C₁₇H₁₂F₃N₃[M-H]^-,理論值314.0911；實(shí)測(cè)值,314.0915。

實(shí)施例73

MIC值得測(cè)定采用微量稀釋法(參考文獻(xiàn)：Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters,2013,23,5958–5963；Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters,2013,23,2399–2403)：

第一步：將已滅菌的液體培養(yǎng)基加入到無(wú)菌96孔聚苯乙烯板中，在板上的第1列的每個(gè)小孔中加入180μL培養(yǎng)基，剩余所有小孔每孔加入100μL。將準(zhǔn)備好的藥液取20μL分別加入第一列小孔中，每一個(gè)小孔中只能加入一種抗菌藥，一個(gè)板上可以加7個(gè)樣品，剩余一個(gè)加對(duì)照藥諾氟沙星或者氟康唑。與常量稀釋法操作基本相似，用移液槍將第1個(gè)小孔中的液體混合均勻，吸出100μL加入到第二個(gè)小孔中，同樣操作，混合均勻之后吸取100μL至第3個(gè)小孔中，依次進(jìn)行到底11個(gè)小孔中，將液體混合均勻，吸取100μL棄去，第12個(gè)小孔作為生長(zhǎng)對(duì)照。此時(shí)第1-11孔中的藥物濃度分別是1000.000、500.000、250.000、125.000、62.500、31.250、15.625、7.813、3.906、1.953、0.976μg/mL。為滿足更低藥物濃度下的MIC值測(cè)定時(shí),同樣的將已滅菌的液體培養(yǎng)基加入到無(wú)菌96孔聚苯乙烯板中，在板上的第1列的每個(gè)小孔中加入198μL培養(yǎng)基，剩余所有小孔每孔加入100μL。將準(zhǔn)備好的藥液取2μL分別加入第一列小孔中，每一個(gè)小孔中只能加入一種抗菌藥，一個(gè)板上可以加7個(gè)樣品，剩余一個(gè)加對(duì)照藥諾氟沙星或者氟康唑。與常量稀釋法操作基本相似，用移液槍將第1個(gè)小孔中的液體混合均勻，吸出100μL加入到第二個(gè)小孔中，同樣操作，混合均勻之后吸取100μL至第3個(gè)小孔中，依次進(jìn)行到底11個(gè)小孔中，將液體混合均勻，吸取100μL棄去，第12個(gè)小孔作為生長(zhǎng)對(duì)照。此時(shí)第1-11孔中的藥物濃度分別是100.000、50.000、25.000、12.500、6.250、3.125、1.563、0.781、0.391、0.195、0.098μg/mL。

第二步：取本發(fā)明化合物的菌懸液15uL用培養(yǎng)基稀釋1000倍，混合均勻，向96孔板中每孔加入100uL液體培養(yǎng)基。此時(shí)第1-11孔中樣品濃度分別為500.000、250.000、125.000、62.5.000、31.250、15.625、7.813、3.906、1.953、0.977、0.488μg/mL。更低藥物濃度下的MIC值測(cè)定時(shí)，第1-11孔中樣品濃度分別為50.000、25.000、12.500、6.250、3.125、1.563、0.781、0.391、0.196、0.098、0.049μg/mL。蓋上蓋子放置恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，細(xì)菌需培養(yǎng)24-48h，真菌培養(yǎng)48-72h，之后觀察結(jié)果并記錄。

第三步：在小孔內(nèi)樣品能夠完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度為該樣品的MIC值。若出現(xiàn)跳孔現(xiàn)象，此時(shí)以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最高樣品濃度為準(zhǔn)，并記錄結(jié)果。

每塊96孔板只能接種一種菌，不能接種多種菌。一般需重復(fù)試驗(yàn)三次，在無(wú)較大誤差情況下，取三組實(shí)驗(yàn)的平均值即為MIC值。

測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表一。

MBC值的測(cè)定：(參考文獻(xiàn)：郭菲，侯淼.藥敏紙片擴(kuò)散法與儀器法在陰道加德納菌鑒定中的比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2015,12,2600-2602)：在最小抑菌濃度測(cè)量的基礎(chǔ)上，選取活性較好的化合物進(jìn)行下一步的MBC值測(cè)定。選取化合物進(jìn)行第二步MIC值的操作步驟，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)之后，將無(wú)菌生長(zhǎng)的小孔內(nèi)的混合液用移液槍頭吸出涂布于培養(yǎng)基上，置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間觀察結(jié)果，培養(yǎng)基上無(wú)任何細(xì)菌生長(zhǎng)的對(duì)應(yīng)最低抗菌藥物濃度即為該藥物的MBC值。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表二。

所得數(shù)據(jù)證實(shí)，本發(fā)明的化合物對(duì)金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、白色念珠菌有明顯的活性。

表一本發(fā)明的化合物對(duì)細(xì)菌和真菌的抗菌活性測(cè)試MIC值

注：“N”代表無(wú)抗菌活性,“-”代表無(wú)數(shù)據(jù)

表二本發(fā)明的代表性化合物對(duì)細(xì)菌和真菌的抗菌活性測(cè)試MBC值

注：“-”代表無(wú)數(shù)據(jù)。

對(duì)本發(fā)明的化合物對(duì)五種菌株進(jìn)行抗菌活性實(shí)驗(yàn)：蠟樣芽孢桿菌(BC)，金黃葡萄球菌(SA)，大腸桿菌(EC)，銅綠假單胞菌(PA)，白色念珠菌(MA)。對(duì)所合成的72個(gè)N-鹵代芳基取代的胺類化合物進(jìn)行紙片擴(kuò)散法初篩，MIC(最小抑菌濃度)與MBC(最小殺菌濃度)的測(cè)定。經(jīng)過(guò)篩選本發(fā)明部分化合物對(duì)大腸桿菌(EC)，銅綠假單胞菌(PA)具有一定活性，部分化合物對(duì)蠟樣芽孢桿菌(BC)，金黃葡萄球菌(SA)，白色念珠菌(MA)有較好活性與上市藥物諾氟沙星，氟康唑活性相當(dāng)。

所得數(shù)據(jù)證實(shí)，本發(fā)明的化合物對(duì)蠟樣芽孢桿菌、金黃葡萄球菌和白色念珠菌有明顯的活性。

本發(fā)明對(duì)所合成的72個(gè)N-鹵代芳基取代的胺類化合物針對(duì)五種菌種進(jìn)行紙片擴(kuò)散法初篩，在初篩的結(jié)果上進(jìn)一步進(jìn)行MIC(最小抑菌濃度)值測(cè)定從而獲得MIC值，進(jìn)而測(cè)定MBC值。

如實(shí)施例1化合物1(0.082μg/mL)，實(shí)施例2化合物2(0.065μg/mL)對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌活性參照諾氟沙星(0.651μg/mL)較優(yōu)異；實(shí)施例2化合物2(0.065μg/mL)、實(shí)施例4化合物4(0.065μg/mL)、實(shí)施例8化合物8(0.082μg/mL)對(duì)蠟樣芽孢桿菌(BC)的抑菌活性優(yōu)于參照諾氟沙星(0.651μg/mL)；實(shí)施例1化合物1(0.049μg/mL)、實(shí)施例2化合物2(0.049μg/mL)、實(shí)施例3化合物3(0.049μg/mL)、實(shí)施例4化合物4(0.065μg/mL)、實(shí)施例5化合物5(0.065μg/mL)對(duì)白色念珠菌的抑菌活性明顯優(yōu)與參照氟康唑(3.255μg/mL)。

上述說(shuō)明示出并描述了發(fā)明的若干優(yōu)選實(shí)施例，但如前所述，應(yīng)當(dāng)理解發(fā)明并非局限于本文所披露的形式，不應(yīng)看作是對(duì)其他實(shí)施例的排除，而可用于各種其他組合、修改和環(huán)境，并能夠在本文所述發(fā)明構(gòu)想范圍內(nèi)，通過(guò)上述教導(dǎo)或相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)或知識(shí)進(jìn)行改動(dòng)。而本領(lǐng)域人員所進(jìn)行的改動(dòng)和變化不脫離發(fā)明的精神和范圍，則都應(yīng)在發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。